Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ...стабильное введение чужеродной ДНК в хромосому – C12N 15/90
Патенты в данной категории
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ТРАНСКРИПЦИОННЫХ ФАКТОРОВ
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ определения активности транскрипционных факторов. Изобретение может использоваться в фармакологии для первичного скрининга кандидатных соединений. Способ включает получение стабильно трансфицированных клеток линии HeLa путем введения в их хромосому плазмидного вектора pBI/neo/X (X - любой транскрипционный фактор эукариот), содержащего минимальный промотор цитомегаловируса человека, ген зеленого флуоресцирующего белка, последовательность нуклеотидов, кодирующих сайт связывания транскрипционного фактора, ген устойчивости к неомицину. Определяют активность транскрипционного фактора путем измерения интенсивности витальной флуоресценции полученной культуры клеток в присутствии тестируемого вещества в сравнении с интактной культурой клеток. Предложенное изобретение позволяет быстро и с высокой чувствительностью определять активность транскрипционных факторов эукариот. 2 ил., 1 пр. |
2520083 патент выдан: опубликован: 20.06.2014 |
|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСЕРЦИОННЫХ МУТАЦИЙ
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения инсерционных мутаций в случайных или псевдослучайных положениях в хромосомной или внехромосомной нуклеиновой кислоты клетки-мишени. Проводят стадию объединения в клетке-мишени клеточной нуклеиновой кислоты с синаптическим комплексом, который включает (а) протеин Tn5-транспозазы и (б) полинуклеотид. Последний включает пару нуклеотидных последовательностей, адаптированных к функциональному взаимодействию с Tn5-транспозазой, и мобильную нуклеотидную последовательность между ними в условиях, которые опосредуют транспозиции в клеточной ДНК. Согласно способу синаптический комплекс получают in vitro в условиях, которые являются неблагоприятными или препятствуют тому, чтобы синаптические комплексы подвергались продуктивной транспозиции. Способ позволяет повысить частоту продуктивной транспозиции. 13 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.
|
2237715 патент выдан: опубликован: 10.10.2004 |
|
| СПОСОБ ВСТРАИВАНИЯ НУЖНОЙ ДНК В ГЕНОМ КЛЕТКИ МЛЕКОПИТАЮЩЕГО И ВЕКТОРНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано в биотехнологической промышленности. Предложен способ интеграции интересующей ДНК в сайт генома клетки млекопитающего, характеризующийся высокой транскрипционной активностью. Указанный сайт предварительно маркируют путем введения в клетку специально сконструированной плазмиды (“маркерной”), включающей а) фрагмент гетерологичной по отношению к геному клетки ДНК, которая после интеграции в геном дает уникальный сайт для гомологичной рекомбинации; б) фрагмент ДНК, кодирующий часть первого селективного маркера и в) по крайней мере одну маркерную последовательность ДНК, обеспечивающую возможность отбора клеток, в которых успешно прошла интеграция “маркерной” плазмиды. Отобранные на первой стадии клетки затем трансформируют второй (“целевой”) плазмидой, включающей (а) фрагмент ДНК, обладающий достаточной для осуществления рекомбинации гомологией с уникальным сайтом а) “маркерной” плазмиды; б) фрагмент ДНК, кодирующий вторую часть первого селективного маркера, совместная экспрессия которого с элементом (б) “маркерной” плазмиды обеспечивает синтез полного маркерного белка и в) ДНК, которую предполагается встроить в геном. Путем скрининга на экспрессию первого селективного маркера отбирают клетки, в которых ДНК “целевой” плазмиды и соответственно “нужная” ДНК, включилась в состав геномной ДНК. Предложен набор для осуществления способа, содержащий по крайней мере “маркерную” и “целевую” плазмиды. Применение изобретения обеспечивает высокий уровень экспрессии при получении любых рекомбинантных белков. 2 с. и 39 з.п. ф-лы, 10 ил., 5 табл. | 2233334 патент выдан: опубликован: 27.07.2004 |
|