Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии, ткани, культивирование или сохранение их, питательные среды для них: .клетки или ткани растений – C12N 5/04

Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения клеточной суспензионной культуры трансгенного табака N. tabacum L., содержащей ген uidA, включающий получение эксплантов, индукцию каллусогенеза и последующее субкультивирование. Изобретение позволяет отобрать перспективные линии, характеризующиеся максимальной скоростью роста и максимальным уровнем экспрессии гена uidA. 1 ил., 5 табл., 6 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе клонального микроразмножения яблони и груши на этапе собственно микроразмножения. Питательная среда содержит кальций азотнокислый, тиамин, пиридоксин, никотиновую кислоту, аскорбиновую кислоту, мезоинозит, сахарозу, агар-агар, 6-бензиламинопурин, удобрение Мастер марки 3.11.38+4 и дистиллированную воду в заданном соотношении компонентов. Изобретение позволяет улучшить качество и количество побегов, оптимальной для укоренения длины и упростить технологию приготовления питательной среды. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Способ выделения гомогенной камбиальной клеточной линии предусматривает: получение ткани запасающего корня, обработку ткани осмотическим стрессом, снятие осмотического стресса, индукцию пролиферации камбиальной клеточной линии путем культивирования полученной камбий-содержащей ткани корня в среде индукции, включающей специфический гормон деления клеток камбия и сбор индуцированной камбиальной клеточной линии. Представлена гомогенная камбиальная клеточная линия, полученная описанным способом из камбия травянистого растения с запасающим корнем и/или камбия корня женьшеня. Раскрыта композиция, содержащая полученную гомогенную камбиальную клеточную линию для ингибирования экспрессии УФ-индуцированной матриксной металлопротеиназы в клетках человека. Представлен способ получения антиоксиданта, включающий: культивирование полученной гомогенной камбиальной клеточной линии, отделение клеток от среды, а также получение экстракта клеток или извлечение среды, в которой растили клетки. Изобретение позволяет получить гомогенную камбиальную клеточную линию, с помощью которой можно получать большие количества полезных растений, которые сложно культивировать на открытом воздухе. 5 н. и 22 з.п. ф-лы, 11 ил., 14 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, клеточной технологии, медицине и трансплантологии. Предложен способ получения клеточных масс кардиомиоцитов, получаемых из плюрипотентных стволовых клеток. Способ предусматривает дифференцировку и индукцию плюрипотетных стволовых клеток с получением клеточных масс кардиомиоцитов. Далее проводят диспергирование клеточных масс до отдельных клеток и их культивирование в культуральной среде в условиях отсутствия сыворотки для их повторной агрегации. Способ позволяет получать кардиомиоциты высокой степени очистки, свободных от клеток, не являющихся кардиомиоцитами, и от любых компонентов, полученных из другого вида, которые обладают повышенной пост-трансплантационной приживляемостью. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 34 ил., 15 пр.

Настоящее изобретение относится к биохимии. Культивируют содержащие покоящийся центр ткани корня растения в среде, содержащей 2,4-D. Отбирают белую недифференцированную ткань из культивируемой ткани, где ткань представляет собой клеточную линию. Указанная клеточная линия характеризуется следующим: в суспензионной культуре находится в одноклеточном состоянии, морфологически ее ядра больше, чем в клеточных линиях корня того же растения, окружена слизистыми веществами, растет стабильно и дольше по сравнению с клеточными линиями корня того же растения, демонстрирует высокую жизнеспособность при криоконсервации. Изобретение позволяет получать генетически стабильные клеточные линии для получения полезных веществ с помощью культур растительных клеток. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 11 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к культивированию клеточных культур лекарственных растений. Область применения - медицинская промышленность, получение нового вида сырья биологически активных веществ растительного происхождения. Способ культивирования каллусной ткани Centaurea Scabiosa l., включает получение каллусной культуры из эксплантов интактных растений путем приготовления питательной среды Мурасиге-Скуга с дальнейшим разливом среды и выращиванием каллусной культуры. Каллусную культуру получают на среде Мурасиге-Скуга с добавлением 0,5-1 мг/л НУК ( -нафтилуксусной кислоты) и 0,2-0,5 мг/л БАП (6-бензиламинопурин), разливом среды Мурасиге-Скуга в пластиковые чашки Петри, пересадкой каллусной культуры в эти чашки и дальнейшим выращиванием каллусной культуры в пластиковой чашке Петри на синем свету (380-560 нм). Изобретение позволяет повысить ростовой индекс каллусной культуры. 1 ил., 1 табл., 2 пр.

Готовят базовую среду АИ, включающую микро- и макроэлементы, витамины, источники железа, органические вещества в заданном количественном содержании компонентов в соответствующей модификации состава среды по MSG. В полученную среду вводят экспланты зародышей семян, отобранных на стадии созревания семядолей с деревьев лиственницы сибирской, устойчивых к лиственничной почковой галлице. Способ на этапах соматического эмбриогенеза предусматривает дополнительное включение в базовую среду АИ следующих компонентов. На этапе инициации - мезоинозит - 1 г/л, 2,4Д - 2 мг/л, 6-БАП - 1 мг/мл, сахарозу - 30 г/л, агар - 7 г/л; на этапе пролиферации - мезоинозит - 1 г/л, 2,4Д - 2 мг/л, 6-БАП - 0,5 мг/мл, сахарозу - 20 г/л, Gellan gum - 4 г/л, а содержание гидролизата казеина уменьшают до 500 мг/л; на этапе предвызревания - мезоинозит - 1 г/л, сахарозу - 30 г/л; на этапе созревания - мезоинозит - 1 г/л, АБК - 32 мг/л, ИМК - 0,2 мг/л, сахарозу - 40 г/л, Gellan gum - 4 г/л; на этапе прорастания - Gellan gum - 4 г/л, а концентрацию макро-, и микроэлементов снижают в 2 раза и исключают источники органического азота и витаминов. Способом выращены соматические растения регенеранты лиственницы сибирской, устойчивые к лиственничной почковой галлице, из которых создают здоровые лиственничные леса, отличающиеся быстрым ростом и высокой урожайностью.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к штамму продуценту стефарина. Штамм культивируемых в условиях in vitro клеток растения стефания гладкая (Stephania glabra (Roxb.) Miers) ИФР Sg 26127 депонирован во Всероссийской коллекции клеточных культур высших растений (ВККК-ВР) под номером № 69. Изобретение обеспечивает стабильный синтез стефарина с достаточным содержанием его в биомассе без примесей других алкалоидов и более высокой продуктивностью.

Изобретение относится к области биотехнологии растений и может быть использовано для мультипликации культур, трудно размножаемых вегетативным способом. Питательная среда включает регуляторы роста 6-БАП, ИМК, витамины по Murashige-Skoog (1962), агар. Минеральная основа содержит макро- и микроэлементы по Quoirin-Lepoivre в модификации A.Standardi - F.Catalano (1984), гидролизат казеина, глюкозу и воду в заданном соотношении компонентов среды. Изобретение обеспечивает повышение коэффициента размножения и увеличение длины формирующихся побегов лимонника китайского в культуре in vitro. 6 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Культивируют листовые экспланты на жидкой питательной среде, представляющей собой модифицированную питательную среду Мурасиге и Скугу. Модификация представляет собой изменение концентрации NH₄NO ₃ до 3300 мг/л, FeSO₄·7H₂O до 27,8 мг/л, тиамина-HCl до 0,1 мг/л, замену метаборной к-ты на ортоборную в концентрации 6,2 мг/л, добавление Nа₂ ЭДТА·2 H₂O в концентрации 37,3 мг/л, мезоинозита - 100 мг/л, сахарозы - 3000 мг/л, 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты - 10 мг/л, индолилуксусной кислоты - 0,8 мг/л, кинетина - 0,5 мг/л, цефотаксима - 100-300 мг/л. При этом плотность посева составляет 104-105 протопластов в 1 мл среды, а сахарозу исключают после регенерации клеточной стенки. Изобретение обеспечивает получение фитомассы лотоса орехоносного in vitro в необходимых для промышленного использования объемах. 1 табл.

Изобретение может быть использовано в фармакологической промышленности для получения тритерпеновых сапонинов и флавоноидов. Клетки растения Atragene speciosa Weinm. (княжик сибирский) культивируют на среде МС при освещении белым светом интенсивностью (2-4)×10 ³ лк с фотопериодом 12-14 час при концентрации 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты 0,6-1,2 мг/л, 6-бензиламинопурина 0,2-0,6 мг/л, мезоинозита 100-125 мг/л. Введение дополнительно в питательную среду фитогормона 24-эпибрассинолида увеличивает процентное содержание целевого продукта в клетках. Способ позволяет получать требуемый объем биомассы каллусной культуры с повышенным содержанием тритерпеновых сапонинов и флавоноидов, близким к содержанию таковых в листьях интактного растения. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к культивированию клеточных культур лекарственных растений. Питательная среда содержит KNO₃, NH₄NO ₃, СаСl₂6Н₂О, MgSO₄7H ₂O, KH₂PO₄, FeSO₄7H ₂O, Nа₂ЭДТА2Н₂О, Н₃ВО ₃, MnSO₄4H₂O, ZnSO₄7H ₂O, KI, Na₂MoO₄2H₂O, CuSO ₄5H₂O, CoCl₂6H₂O, никотиновую кислоту, тиамин, пиридоксин, 2,4-Д, БАП, сахарозу, агар-агар и воду при заданных соотношениях компонентов. Изобретение позволяет культивировать клеточную культуру SAUSSUREA ORGAADAYI V. KHAN. ET KRASNOB.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к культивированию клеточных культур лекарственных растений. Питательная среда для культивирования клеточной культуры Atragene speciosa Weinm. содержит питательную среду с макро- и микросолями по Мурасиге и Скугу, гормоны, витамины и сахарозу, с дополнительным добавлением мезоинозита при следующем соотношении компонентов, мг/л: MnSO₄5H₂O - 24,1; ZnSO₄ 7H₂O - 8,6; Na₂MoO₄ - 0,25; KI - 0,83; CuSO₄5H₂O - 0,025; CoCl ₂6H₂O - 0,025; пиридоксин-HCl - 0,5-1,0; тиамин-HCl - 0,5-1,0; никотиновая кислота - 0,5-1,0; НУК - 0,5-1,0; 2,4-Д - 0,5-1,0; БАП - 0,2-0,8; мезоинозит - 50-100; сахароза - 20000-30000; агар - 0,1-6700; вода - до 1 л. Изобретение позволяет увеличить биомассу клеток лекарственного растения Atragene speciosa Weinm. 1 ил.

Корни шлемника байкальского разрезают на сегменты размером 2-3-мм. Полученные сегменты капсулируют в альгинатную оболочку, содержащую безгормональную питательную среду Гамборга с добавлением антибиотика клафоран. Концентрация клафорана составляет 300-550 мг/л. Способ позволяет получить оздоровленную культуру, не проявляющую признаков бактериальной инфекции в течение полутора лет и имеющую более высокие показатели ростовой активности и содержания основных флавонов, по сравнению с исходной культурой корня. Полученные «искусственные семена» сохраняют жизнеспособность корневых фрагментов при их длительном хранении в условиях низких положительных температур. 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности культивированию клеток растения женьшеня настоящего, и может быть использовано для получения ценных биологически активных соединений - гинзенозидов, которые широко используются в фармацевтической промышленности и косметологии. Штамм культивируемых в условиях in vitro клеток растения женьшеня настоящего Pg-1 (Panax ginseng С.А Меу) депонирован в Российской коллекции культивируемых клеток высших растений при учреждении Российской Академии наук, институте физиологии растений им. К.А.Тимирязева РАН под № 68 - продуцент гинзенозидов: соединений групп Rg и Rb. В течение длительного культивирования (6-7 циклов) стабильно присутствовали все семь гинзенозидов, характерных для растений. В штамме Pg-1 активизировался синтез соединений Rb-группы и особенно Re гинзенозида. Отношение соединений Rg/Rb групп было достаточно высоким и оставалось стабильным в течение нескольких последовательных циклов культивирования. Полученный штамм женьшеня настоящего Pg-1 синтезирует полный состав соединений Rg и Rb групп гинзенозидов и их значительное количество - до 4% от сухой биомассы клеток. Качественный состав всех соединений гинзенозидов Rb- и Rg-групп и их количество было равно значениям, имеющимся в дикорастущем растении женьшеня настоящего. 3 табл.

Клетки растения стефания гладкая культивируют на жидкой питательной среде при перемешивании и аэрации воздухом в темноте. Добавление в питательную среду в конце экспоненциальной фазы роста культуры метилового эфира жасмоновой кислоты и олеиновой кислоты повышает выход стефарина сульфата, который является субстанцией для получения медицинского препарата стефаглабрина сульфата. 3 з.п. ф-лы, 1 табл.

Клетки растения стефания гладкая культивируют в биореакторе при перемешивании и аэрации культуральной суспензии путем подачи воздуха через барботер. Контроль изменения концентрации клеток в суспензии и подача воздуха в соответствии с этой концентрацией позволяют минимизировать влияние механического и гидродинамического стресса на клетки, что приводит к увеличению выхода из культуры стефарина сульфата. 3 з.п. ф-лы.

Ткань растения, содержащую камбий, культивируют, индуцируя слой камбия и каллус из других тканей. Из полученной смеси выделяют и пролиферируют клон одной клетки камбия. Создание гомогенной клеточной линии из камбия позволяет минимизировать варьирование скорости роста клеток и образования вторичных метаболитов. Тем самым обеспечивается стабильность производства биологически активных веществ растительного происхождения в ходе долгосрочного культивирования. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для накопления фармакологически ценных алкалоидов аймалина и йохимбина. Способ предусматривает выращивание культуры ткани Rauwolfia serpentina Benth (раувольфии змеиной) штамм К-27 на питательной среде заданного состава в присутствии мелафена (меламиновой соли бис(оксиметил)фосфиновой кислоты) 10-17 пассажей при концентрации мелафена 1·10^-3 г/л. После чего полученную культуру ткани Rauwolfia serpentina Benth пересаживают на питательную среду того же состава, но содержащую сверхмалые концентрации мелафена 1·10^-10-1·10^-15 г/л, преимущественно при 1·10^-13 г/л и выращивают на этой среде в течение 1 пассажа не более 50 суток. Изобретение позволяет увеличить накопление алкалоидов. 2 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к культивированию клеточных культур лекарственных растений. Питательная среда для культивирования каллусной культуры Artemisia annua L. содержит, мг/л: KNO₃ - 1900, NH₄ NO₃ - 1650, CaCl₂·6H₂O - 332, MgSO₄·7H₂O - 370, KH₂ PO₄ - 170, FeSO₄·7H₂O - 27,85, Na₂ЭДТА - 37,25, Н₃ВО₃ - 6,2, MnSO₄·5H₂O - 24,1, ZnSO ₄·7H₂O - 8,6, Na₂MoO₄ - 0,25, KI - 0,83, CuSO₄·5H₂O - 0,025, CoCl₂·6H₂O - 0,025, пиридоксин - 1,0, тиамин хлорид - 1,0, никотинамид - 1,0, 6-БАП - 0,2, НУК - 0,5-1,0, сахароза - 30000, агар - 9000 и воду - до 1 л. Это обеспечивает ускорение роста каллусной ткани, увеличение выхода биомассы и расширение арсенала питательных сред для культивирования каллусной культуры Artemisia annua L. 1 табл.

Штамм культивируемых клеток растения стефании гладкой Stephania glabra (Roxb) Miers ИФР Sg 113 получен методом клеточной селекции из коллекционного штамма Stephania glabra Sg 86 mf и депонирован в ВККК ВР под № 67. Штамм обладает стабильным уровнем биосинтеза стефарина 0,1-0,5% от сухой массы ткани при условии отсутствия других алкалоидов, что является более технологичным для дальнейших операций по выделению стефарина из биомассы и получения медицинского препарата. Культивируют штамм в биореакторе барботажного типа при перемешивании в темноте, при температуре 25-27°С, влажности 70%. Причем перемешивание проводят путем барботажа при возрастающем расходе воздуха с 0,1 л/л-мин до 1,5 л/л-мин. Это обеспечивает при максимальном содержании стефарина 0,5% от сухой массы ткани получение до 210 г сухой биомассы, то есть до 1005 мг стефарина при отсутствии других алкалоидов. 2 н.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения восстановителей фертильности. Изобретение представляет собой способ создания восстановителей фертильности ярового рапса in vitro. Отбирают донорский материал и проводят предобработку центральных кистей растений ярового рапса со стерильной цитоплазмой и генами восстановления фертильности температурой +4-6°С в течение суток. Вводят в культуру неоплодотворенные семязачатки с бутонов длиной 2-4 мм и культивируют их на питательной среде MS с добавлением 1 мг/л кинетина, 0,2 мг/л НУК и 0,1 мг/л 2,4-Д, осуществляют стабилизацию и микроразмножение гаплоидных линий, диплоидизацию путем добавления 0,005% раствора колхицина в питательную среду. Укорененные растения пересаживают в грунт, где они формируют семена, которые высевают в поле для получения растений-восстановителей фертильности. Изобретение позволяет получить новый исходный материал для гетерозисной селекции на основе ЦМС. 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области физиологии растений, биотехнологии и генной инженерии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Культура корня Hed.th. (Hedysarum theinum Krasnob.) обладает всеми признаками pRi Т-ДНК трансформированных корней, а именно интенсивным ростом на питательных средах простого состава, не содержащих фитогормоны, плагиотропным ветвлением корней, а также генетической и биохимической стабильностью, способностью к синтезу видоспецифичных изофлавонов. Химический анализ вторичных метаболитов подтверждает, что он сохраняет способность к синтезу изофлавонов - ононина, гликозида тексазина, малонилононина, формононетина, характерных для корней целого растения. 7 ил., 1 табл.

Изобретение может быть использовано в фармакологии для выращивания биомассы клеточной культуры трансгенного табака Nicotiana tabacum L., содержащего ген интерлейкина-18 человека, а также в исследовательских целях. Семена трансгенных растений Nicotiana tabacum L. стерилизуют, переносят на безгормональную питательную среду и проращивают in vitro на свету в течение 28 суток. Полученные проростки рассекают на сегменты размером 0,2-0,3 см², переносят на модифицированную питательную среду, включающую 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту, индолилуксусную кислоту и кинетин. Для стерилизации семян используют раствор, состоящий из 96%-ного этанола, 37%-ной перекиси водорода и воды в объемном соотношении 7,5:1:1. Образовавшийся каллус, содержащий ген интерлейкина-18 человека, культивируют в темноте в течение 21-28 суток и размножают пассированием до требуемого количества. 3 з.п. ф-лы, 3 табл.

Для выявления трансформантов кукурузы MON863 трансформанты диагностируют на наличие ДНК-последовательности, встроенной в геном кукурузы посредством трансформации рекомбинантной конструкцией, содержащей ген Cry3Bb и геномные последовательности, фланкирующие сайт инсерции. Растения кукурузы, регенерированные из трансформантов MON863, обладают устойчивостью к поражению насекомыми отряда Жесткокрылых. 10 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 ил.

Растительную клетку трансформируют ДНК, кодирующей растительные белки 3Rmyb или РНК, супрессирующую экспрессию белков 3Rmyb. Белок 3Rmyb растений является фактором, активирующим специфичную для фазы G2/M транскрипцию, т.е. фактором, необходимым для роста растительных клеток. Растение, регенерированное из такой клетки, обладает гипертрофией специфичного органа, мужской стерильностью или устойчивостью к стрессу. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 33 ил.

Штамм культуры клеток Polyscias filicifolia (MOORE EX ROUNIER) BAILEY БФТ 01-95 получен из каллуса листа оранжерейного растения Ботанического института РАН г.Санкт-Петербург, депонирован во Всероссийской коллекции клеточных культур (специализированная коллекция клеток высших растений, ВНИИФР им. К.А.Тимирязева) под №ВРКК-ВР №58. Изобретение может быть использовано для получения лекарственных препаратов, биологически активных добавок, продуктов функционального питания, косметических средств. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Клеточную культуру винограда амурского Vitis amurensis Rupr. трансформируют агробактериальным вектором, содержащим ген rolB, с последующим выделением целевого продукта. Способ обеспечивает существенное повышение выхода резвератрола. 3 ил., 1 табл.

Способ включает заготовку эксплантов, их стерилизацию, помещение эксплантов для каллусообразования и роста биомассы в стерильные пробирки с модифицированной питательной средой Мурасиге-Скуга с добавлением ростовых стимуляторов, термостатирование при 26±1°С. Стерилизацию эксплантов осуществляют в дистиллированной воде воздействием ультразвуковых колебаний с интенсивностью 1...2 Вт/кв.см на рабочей частоте 22...44 кГц в течение 3...6 мин. На этапах каллусообразования и роста биомассы пробирки с эксплантами погружают в водную среду и осуществляют через нее воздействие ультразвуковыми колебаниями с интенсивностью не менее 10...15 Вт/кв.см на частоте 22...44 кГц. Воздействие проводят со стороны дна пробирок с периодичностью не реже 1 раза в сутки в течение не менее 6 мин на каждом этапе. Прирост биомассы составляет 87,40-176,53%. Способ позволяет получить оздоровленный посадочный материал, увеличить эффективность стерилизации, увеличить способность неинфицированных эксплантов образовывать каллус. 5 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к применению регулятора роста растений Мелафена для увеличения накопления алкалоида берберина в суспензионной клеточной культуре Василистника малого. Внесение Мелафена в качестве единственного регулятора роста в питательную среду для выращивания суспензионной культуры клеток Василистника малого способствует увеличению накопления берберина в суспензионной клеточной культуре Василистника малого до 275% и сокращению цикла развития клеточной культуры до 25%. 2 табл.