Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: .оксидоредуктазы (1.), например люцифераза – C12N 9/02

МПКРаздел CC12C12NC12N 9/00C12N 9/02
Раздел C ХИМИЯ; МЕТАЛЛУРГИЯ
C12 Биохимия; пиво; алкогольные напитки; вино; уксус; микробиология; энзимология; получение мутаций; генная инженерия
C12N Микроорганизмы или ферменты; их композиции; размножение, консервирование или сохранение микроорганизмов; мутации или генная инженерия; питательные среды
C12N 9/00 Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их; способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов
C12N 9/02 .оксидоредуктазы (1.), например люцифераза

Патенты в данной категории

ИНГИБИТОР АНДИЙСКОГО ВИРУСА КРАПЧАТОСТИ КАРТОФЕЛЯ

Изобретение относится к области биохимии и касается применения концентрата культуральной жидкости штамма Trichoderma harzianum Rifai, депонированного во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под № ВКПМ F-180, в качестве ингибитора Андийского вируса крапчатости картофеля. Изобретение позволяет снизить потери картофеля от заражения растений Андийским вирусом крапчатости. 2 пр.

2527899
патент выдан:
опубликован: 10.09.2014
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗ И СУБСТРАТНАЯ СМЕСЬ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗ

Группа изобретений относится к биотехнологии и может быть использовано при создании аналитических наборов с использованием пероксидаз. Способ предусматривает приготовление субстратной смеси, введение в субстратную смесь пероксидаз с последующей регистрацией интенсивности образующегося свечения. Субстратная смесь включает в себя следующие компоненты, указанные в конечных концентрациях: буферный раствор 10-125 мМ, люминол 0.05-8 мМ, пероксид водорода 0.05-8 мМ, 4-аминопиридины 0.1-10 мМ, N-карбоксифенотиазин, или N-(карбоксиметил)фенотиазин, или N-(2-карбоксиэтил)фенотиазин 0.1-10 мМ. При этом рН буферного раствора составляет 7,9-9.0. Изобретение обеспечивает получение высокой интенсивности хемилюминесценции и, соответственно, высокой чувствительности определения активности пероксидаз. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 8 пр.

2525137
патент выдан:
опубликован: 10.08.2014
ГЕНЫ ДЕЛЬТА-8-ДЕСАТУРАЗЫ, ФЕРМЕНТЫ, КОДИРУЕМЫЕ ИМИ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

Изобретение относится к биохимии и представляет собой выделенные полинуклеотиды, кодирующие 8-десатуразу. Изобретение также относится к самим 8-десатуразам, кодируемым выделенными полинуклеотидами, векторам экспрессии, содержащим выделенные полинуклеотиды, клеткам-хозяевам, содержащим векторы экспрессии, и к способам получения 8-десатураз и полиненасыщенных жирных кислот, выбранных из группы, состоящей из дигомо-гамма-линоленовой кислоты (DGLA), 3-эйкозатетраеновой кислоты ( 3-ЕТА) и любых их сочетаний. Изобретение позволяет расширить ассортимент 8-десатураз, используемых для получения полиненасыщенных жирных кислот. 10 н. и 2 з.п. ф-лы, 12 ил., 14 табл., 6 пр.

2517615
патент выдан:
опубликован: 27.05.2014
ТРАНСГЕННЫЕ РАСТЕНИЯ

Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетической конструкции для экспрессии нечувствительной к треонину аспартаткиназы в растении, где конструкция содержит специфический для фазы старения промотор, функционально связанный с кодирующей последовательностью, которая кодирует полипептид, обладающий активностью нечувствительной к треонину аспартаткиназы, и в которой специфический к старению промотор выбран из группы, состоящей из SAG12, SAG13, SAG101, SAG21 и SAG18, или их функциональных вариантов, или фрагментов. Раскрыты вектор, растительная клетка, трансгенное растение, материал для размножения растения, собранный лист, курительный табак, содержащие вышеуказанную генетическую конструкцию. Также раскрыт способ получения трансгенного растения, которое обладает способностью накапливать треонин в увядающих листьях в большем количестве, чем в листьях соответствующего растения дикого типа, и способ повышения уровня треонина в листьях стареющего растения до уровней треонина, превышающих содержание треонина в листьях растения дикого типа без ухудшения приспособленности растения с использованием вышеуказанной генетической конструкции. Изобретение позволяет получать трансгенное растение, которое обладает способностью накапливать треонин в увядающих листьях в большем количестве, чем в листьях растения дикого типа. 9 н. и 13 з.п. ф-лы, 16 ил., 2 табл., 4 пр.

2515927
патент выдан:
опубликован: 20.05.2014
УКОРОЧЕННАЯ МУТАНТНАЯ ЛЮЦИФЕРАЗА ИЗ Metridia longa ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО РЕПОРТЕРА В ЖИВЫХ КЛЕТКАХ

Изобретение относится к биохимии и представляет собой укороченную мутантную люциферазу MLM4 из Metridia longa размером ~16 кДа с улучшенными свойствами для использования в качестве генетически-кодируемого биолюминесцентного репортера для визуализации молекулярных процессов в живых клетках. Аминокислотные замены I69L, H74E, K125V, W139F введены в последовательность укороченной люциферазы MLM4 из Metridia longa размером ~16 кДа. Изобретение позволяет получить люциферазу с повышенной термостабильностью и со сдвигом спектра в длинноволновую область, что обуславливает общее увеличение чувствительности биолюминесцентного репортера при использовании в живых клетках и организмах. 4 ил., 1 табл, 3 пр.

2495929
патент выдан:
опубликован: 20.10.2013
ПОЛИПЕПТИДЫ ДЛЯ ЭНАНТИОСЕЛЕКТИВНОГО ФЕРМЕНТАТИВНОГО ВОССТАНОВЛЕНИЯ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для энантиоселективного ферментативного восстановления

кетосоединения общей формулы (I):

2486239
патент выдан:
опубликован: 27.06.2013
МУТАНТЫ FAD-2 И ВЫСОКООЛЕИНОВЫЕ РАСТЕНИЯ

Изобретение относятся к области биохимии. Представлены варианты белков дельта-12-олеатдесатуразы (FAD2), где один вариант имеет аминокислотную замену в положении, соответствующем положению 108 на аспарагиновую кислоту, а другой - замены в положениях, соответствующих положениям 108 на аспарагиновую кислоту и 118 на фенилаланин, в белке FAD2 дикого типа с последовательностью SEQ ID NO:4 или SEQ ID NO:8, приведенными в описании. Описаны: нуклеиновые кислоты, кодирующие указанные белки; векторы экспрессии, содержащие указанные нуклеиновые кислоты; клетки-хозяева, содержащие указанные векторы. Предложены фрагменты, состоящие из по крайней мере 20 нуклеотидов выделенной молекулы нуклеиновой кислоты, содержащие указанные замены, для использования в качестве праймера, зонда и/или маркера. Представлено растение, создающее высокий профиль олеиновых кислот в масле семян, трансформированное нуклеиновой кислотой с последовательностью SEQ ID NO:1, или SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:5. Изобретение позволяет увеличить содержание олеиновой кислоты в семенах масличных растений. 17 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 ил., 3 пр.

2484137
патент выдан:
опубликован: 10.06.2013
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕГИДРОГЕНАЗНОЙ АКТИВНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для оценки дегидрогеназной активности активного ила. Способ предусматривает смешивание суспензии микроорганизма с субстратом (10%-ным раствором глюкозы) и акцептором водорода, в качестве которого используют краситель метиленовый синий с последующим измерением концентрации метиленового синего в ходе ферментативной реакции. По скорости изменения концентрации метиленового синего в линейной фазе ферментативной реакции определяют активность дегидрогеназ. Изобретение позволяет сократить сроки определения дегидрогеназной активности микроорганизмов и повысить качество ее определения. 1 ил.

2476598
патент выдан:
опубликован: 27.02.2013
ИНГИБИТОР ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА

Изобретение относится к области вирусологии и биотехнологии и может быть использовано в медицине. Для ингибирования вируса клещевого энцефалита применяют L-лизин- -оксидазу, продуцируемую штаммом Trichoderma harzianum Rifai ВКПМ F-180. Изобретение позволяет подавить вирусную активность клещевого энцефалита в клетках in vitro. 2 табл.

2473689
патент выдан:
опубликован: 27.01.2013
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУБСТАНЦИИ L-ЛИЗИН-АЛЬФА-ОКСИДАЗЫ

Изобретениео тносится к биотехнологии и медицине, а именно к онкологи. Предложен способ получения субстанции L-лизин-альфа-оксидазы (ЛО) с использованием штамма-продуцента Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D. Проводят ферментацию на содержащей источники азота, фосфата и пшеничные отруби среде. Затем осуществляют выделение и очистку фермента при следующей последовательности операций: диализ культуральной жидкости, обработка адсорбентами, осаждение примесей сульфатом аммония 20% степени насыщения, гидрофобная и ионообменная хроматография. Получают L-лизин-альфа-оксидазу, имеющую молекулярную массу 115-116 кДа, изоэлектрическую точку 4,25, оптимум рН - 7,4. Предлагаемый способ обеспечивает увеличение выхода ЛО до 67%. 5 табл., 5 пр.

2471866
патент выдан:
опубликован: 10.01.2013
ДЕЛЬТА-5-ДЕСАТУРАЗА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен выделенный полинуклеотид для экспрессии дельта-5-десатуразы, включающий нуклеотидную последовательность: 1) кодирующую полипептид дельта-5-десатуразы, причем полипептид обладает по меньшей мере 80% идентичности SEQ ID NO:2; 2) кодирующую полипептид дельта-5-десатуразы, причем нуклеотидная последовательность обладает по меньшей мере 90% идентичности SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:3; 3) кодирующую полипептид дельта-5-десатуразы, причем нуклеотидная последовательность гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:3; 4) комплемент нуклеотидной последовательности 1)-3). Описаны рекомбинанатная ДНК-конструкция, клетка-хозяин, трансгенное растение с масличными семенами, трансгенное семя, содержащие указанный полинуклеотид. Предложены способы: трансформации клетки-хозяина, экспрессии полиненасыщенных жирных кислот с длинными цепями в клетке растения, получения по меньшей мере одной полиненасыщенной жирной кислоты в растении, с использованием указанного полинуклеотида. Описана возможность применения указанных трансгенных семян для получения пищевых продуктов для питания людей, кормов для животных, получения масла и лецитина. Изобретение позволяет получить измененный профиль полиненасыщенных жирных кислот по сравнению с профилем полиненасыщенных жирных кислот нетрансформированного растения. 15 н. и 9 з.п. ф-лы, 12 табл., 15 ил., 20 пр.

2469092
патент выдан:
опубликован: 10.12.2012
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОКСИЛИРОВАННОГО L-ЛЕЙЦИНА И БАКТЕРИЯ, ТРАНСФОРМИРОВАННАЯ ДНК, КОДИРУЮЩЕЙ ДИОКСИГЕНАЗУ

Изобретение относится к области биохимии. Представлен способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли методом ферментативной конверсии L-лейцина или его соли в присутствии бактериальной диоксигеназы, выбранной из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Раскрыт способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли в содержащей L-лейцин или его соль среде в присутствии первой бактерии, трансформированной молекулой ДНК, кодирующей диоксигеназу, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Представлена бактерия-продуцент 4-гидрокси-L-лейцина или его соли, трансформированная молекулой ДНК, кодирующей бактериальную диоксигеназу, выбранную из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов, в среде, содержащей L-лейцин или его соль. Изобретение позволяет получить 4-гидрокси-L-лейцин или его соль с высокой степенью эффективности. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 24 ил., 5 табл., 11 пр.

2468085
патент выдан:
опубликован: 27.11.2012
FAD-2-МУТАНТЫ И РАСТЕНИЯ С ВЫСОКИМ СОДЕРЖАНИЕМ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Настоящее изобретение включает растение вида Brassica napus, которое имеет мутантные последовательности, придающие маслу из семян высокий профиль олеиновой кислоты. В частности, настоящее изобретение относится к мутантным последовательностям дельта-12-десатуразы жирных кислот, которые увеличивают содержание олеиновой кислоты в растении. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 2 табл., 3 пр.

2461624
патент выдан:
опубликован: 20.09.2012
СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ПОЛИМОРФИЗМА rs1128446 ГЕНА ТИОРЕДОКСИНРЕДУКТАЗЫ-1 У ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области молекулярной биологии и может быть использовано в медицине при определении наследственной предрасположенности к развитию заболеваний, ассоциированных с носительством полиморфных вариантов гена тиоредоксинредуктазы-1. Предложен способ генотипирования полиморфизма rs 1128446 гена TXNRD1, предусматривающий проведение 1ЩР с использованием специально подобранной пары праймеров (F: 5'-GGCTTCTCGTAGCCATTAGG-3' и R: 5'-TATCTTCCCTTCCCCGAGAC-3') и последующий анализ ПЦР-продукта методом ПДРФ, который включает обработку эндонуклеазой Taq1 и фракционирование полученных фрагментов в 2% агарозном геле. При этом ДНК-фрагменты размером 179 и 83 п.н. верифицируют как гомозиготный генотип дикого типа СС, фрагмент размером 262 п.н. - как гомозиготный мутантный генотип GG, а фрагменты 262, 179 и 83 п.н. - как гетерозиготный генотип CG. Способ отличается простотой и точностью диагностики. 1 ил., 1 пр.

2458146
патент выдан:
опубликован: 10.08.2012
СПОСОБ ГЕНОТИПИРОВАНИЯ ПОЛИМОРФИЗМА rs17522918 ГЕНА ПЕРОКСИРЕДОКСИНА-1 У ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области молекулярной биологии и может быть использовано в медицине при определении наследственной предрасположенности к развитию заболеваний, ассоциированных с носительством полиморфных вариантов гена пероксиредоксина-1. Предложен способ генотипировании полиморфизма rs 17522918 гена PRDX1, предусматривающий проведение ПЦР с использованием специально подобранной пары праймеров (F: 5'-ACACTCACCAGTCCCAACACAAG-3' и R: 5'-ССАСАТСССССТССТСТСТСТС-3') и последующий анализ ПЦР-продукта методом ПДРФ, который включает обработку эндонуклеазой BstH2I и фракционирование полученных фрагментов в 2% агарозном геле. При этом ДНК-фрагменты размером 81 и 84 п.н. верифицируют как гомозиготный генотип дикого типа СС, фрагмент размером 165 п.н. - как гомозиготный мутантный генотип АА, а фрагменты 165, 81 и 84 п.н. - как гетерозиготный генотип СА. Способ по изобретению отличается простотой и точностью диагностики. 1 ил., 1 пр.

2458145
патент выдан:
опубликован: 10.08.2012
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ КИСЛОТ ЖИРНОГО РЯДА В ТРАНСГЕННЫХ ОРГАНИЗМАХ

Изобретение относится к биотехнологии, к способу получения жирных полиненасыщенных кислот в трансгенных растениях. Способ включает введение в растительный организм нуклеиновых кислот, последовательности которых кодируют ферменты с активностью десатураз и элонгаз. Способ позволяет увеличить содержание жирных полиненасыщенных кислот в трангенном растении. 9 з.п. ф-лы, 33 ил., 21 табл., 60 пр.

2447147
патент выдан:
опубликован: 10.04.2012
СТАБИЛИЗАТОР ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ

Изобретение относится к области биохимии. Предложен стабилизатор ферментативной активности пероксидазы. Стабилизатор представляет собой наноразмерные частицы кобальтовой феррошпинели, компоненты которой изменяются в интервале Co0,7±0,05 Fe2,3±0,05O4÷Co1±0,05 Fe2±0,05O4, суспендированные в натрий-фосфатном буферном растворе в концентрации 0.01-10 мг/мл. Изобретение способствует сохранению 40-42% ферментативной активности пероксидазы в течение 105-255 суток при заданной намагниченности частиц кобальтовой феррошпинели. 2 табл.

2445271
патент выдан:
опубликован: 20.03.2012
ВАРИАНТНАЯ ФОРМА УРАТ-ОКСИДАЗЫ И ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

Изобретение относится к области биохимии. Представлены варианты уриказы, содержащие последовательности, приведенные в описании. Также представлена выделенная нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеотидов, которая кодирует указанную уриказу, и указанная нуклеиновая кислота оперативно связанная с гетерологичным промотором. Описан экспрессирующий вектор, содержащий указанную нуклеиновую кислоту и клетка-хозяин, содержащая этот вектор и являющаяся продуцентом уриказы. Описаны способ получения уриказы, включающий стадии культивирования указанных клеток-хозяев при условиях, когда последовательность нуклеиновой кислоты экспрессируется клетками-хозяевами, и выделение уриказы. Изобретение позволяет ослабить гиперурикемию и гиперурикозурию. 12 н. и 1 з.п. ф-лы, 8 ил., 7 табл.

2435847
патент выдан:
опубликован: 10.12.2011
ОЧИСТКА БЕЛКОВ С ПОМОЩЬЮ КАТИОННОГО ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способы очистки целевого белка предусматривают получение раствора, содержащего смесь растворенного целевого белка и один или несколько растворенных белков-примесей, контактирование указанного раствора с одним или более катионными поверхностно-активными веществами с увеличением содержания целевого белка относительно оставшихся в растворе белков и выделение растворенного целевого белка. В качестве катионного поверхностно-активного вещества может быть использовано амфипатическое соединение аммония в количестве, эффективном для предпочтительного осаждения одного или более белков-примесей. Изобретение позволяет повысить эффективность выделения и чистоту целевых белков, увеличить содержание целевого белка относительно оставшихся в растворе белков. 3 н. и 38 з.п. ф-лы, 12 ил., 5 табл.

2426738
патент выдан:
опубликован: 20.08.2011
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДРОЖЖЕЙ, ПРИНАДЛЕЖАЩИХ К РОДУ Yarrowia

Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии и касается способа получения янтарной кислоты с использованием штамма дрожжей, Yarrowia lipolytica ВКПМ Y-3314. Данные дрожжи модифицированы таким образом, что у них снижена активность сукцинатдегидрогеназы. Способ включает стадию выращивания штамма дрожжей в питательной среде, содержащей глицерин, и выделения янтарной кислоты из культуральной жидкости. Использование штамма Yarrowia lipolytica ВКПМ Y-3314 привело к существенному увеличению продукции янтарной кислоты этим способом. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 5 табл.

2422526
патент выдан:
опубликован: 27.06.2011
РЕАГЕНТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДЕНОЗИН-5'-ТРИФОСФАТА

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к реагенту для определения аденозин-5'-трифосфата. Данный реагент содержит мутантную люциферазу светляков Luciola mingrelica (SEQ ID No:2), выделенную из рекомбинантных клеток E.coli, трансформированных плазмидой pETL7, люциферин, сульфат магния, трис-(оксиметил)-аминометан, уксусную кислоту, этиленаминотетраацетат натрия, дитиотреитол, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и воду. Предложенное изобретение позволяет повысить чувствительность определения АТФ, а также снизить расход фермента. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

2420594
патент выдан:
опубликован: 10.06.2011
БАКТЕРИЯ ESCHERICHIA COLI ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ 1,2-ПРОПАНДИОЛА, СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1,2-ПРОПАНДИОЛА

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения бактерии Escherichia coli для продуцирования 1,2-пропандиола из исходной модифицированной бактерии, имеющей делецию в генах tpiA, gloA, aldA и aldB, включает культивирование указанной исходной модифицированной бактерии в соответствующей культуральной среде, содержащей источник углерода, с применением повышающихся степеней разведения таким образом, что в культуральной среде сохраняются только микроорганизмы, степень роста которых равна или больше используемой степени разведения, для эволюционирования в указанной исходной модифицированной бактерии одного или нескольких генов, участвующих в пути биосинтеза DHAP в метилглиоксаль, затем в 1,2-пропандиол, до получения эволюционирующих генов, кодирующих ферменты, обладающие более высокой активностью «1,2-пропандиолсинтазы», селекцию и выделение одной или нескольких бактерий Escherichia coli, обладающих более высокой активностью «1,2-пропандиолсинтазы». Изобретение также касается исходных микроорганизмов и таким образом полученных эволюционирующих микроорганизмов и способа получения 1,2-пропандиола и ацетона путем культивирования эволюционирующих микроорганизмов. Изобретение позволяет повысить эффективность продуцирования 1,2 пропандиола. 6 н. и 13 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл.

2407793
патент выдан:
опубликован: 27.12.2010
РЕКОМБИНАНТНАЯ ЛАККАЗА ЛИГНИНОЛИТИЧЕСКОГО ГРИБА Trametes sp. И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой клетку мицелиального гриба, принадлежащего к роду Penicillium, трансформированную плазмидой. Плазмида содержит фрагмент ДНК, кодирующий лакказу С1 лигнинолитического гриба Trametes hirsuta или фрагмент ДНК, который гибридизуется с SEQ ID NO:1 в жестких условиях, под контролем промотора, функционирующего в указанной клетке. Полученная клетка является продуцентом лакказы С1. Изобретение относится также к способу получения лакказы с использованием указанной клетки. Изобретение позволяет эффективно получать лакказу с высокой каталитической активностью. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 ил.

2394912
патент выдан:
опубликован: 20.07.2010
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРОВ ДИПЕПТИДИЛПЕПТИДАЗЫ IV И ИХ ПРОИЗВОДНЫХ

Способ получения циклопропилконденсированных ингибиторов дипептидилпептидазы IV предусматривает использование ВОС-защищенного амина структурной формулы (3), полученного путем восстановительного аминирования кислоты формулы (1) обработкой указанной кислоты формиатом аммония, никотинамидадениндинуклеотидом, дитиотреитолом и частично очищенным концентратом ферментов фенилаланиндегидрогеназы и формиатдегидрогеназы (PDH/FDH) и без вьделения - обработкой полученного амина формулы (2) дитретбутил-дикарбонатом с получением ВОС-защищенного амина. 6 н.и 7 з.п. ф-лы.

2373194
патент выдан:
опубликован: 20.11.2009
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТА ПЕРОКСИДАЗЫ ИЗ КОРНЕЙ ХРЕНА

Способ предусматривает размельчение и гомогенизацию пророщенных корней хрена, экстракцию гомогенизата корней хрена 0,15±0,01 М раствором хлорида натрия. Отделяют балластные белки и осаждают пероксидазу солями сульфата аммония 45-48% насыщения и 85-90% насыщения соответственно. Гельфильтрацию раствора пероксидазы осуществляют на сефадексе G-100 с элюированием 0,15-0,2 М раствором хлорида натрия. Хроматографическую очистку проводят на карбоксиметилцеллюлозе. Осуществляют лиофильную сушку целевой пероксидазы. Проводят диализ против натрий-ацетатного буфера с рН 4,4-5,0 и диализ против калий-фосфатного буфера с рН 8,0±0,1. Осуществляют концентрирование с дополнительной очисткой на ДЭАЭ-целлюлозе с элюцией тем же буфером с последующим диализом против деионизованной воды. Способ позволяет получить пероксидазу с высокой удельной активностью и высоким выходом. Выход пероксидазы составляет 2,52-3,50 г/кг корней хрена, удельная активность - 640-700 Е.А./мг белка. 5 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

2353652
патент выдан:
опубликован: 27.04.2009
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА ЛАККАЗЫ

Способ получения ферментного препарата лакказы предусматривает поддержание параметров культивирования в зависимости от концентрации в среде растворенного кислорода. С начала культивирования до снижения концентрации растворенного кислорода до 50% от насыщения поддерживают температуру 25-27°С и рН в пределах 3,0-7,0. При дальнейшем снижении концентрации растворенного кислорода до 5% повышают температуру до 27-29°С и сужают некорректируемый диапазон рН до 4,0-5,0. При снижении концентрации растворенного кислорода до минимального уровня и ее дальнейшем повышении температуру поддерживают 30-33°С и рН 4,0-6,0. Изобретение обеспечивает повышение активности культуральной жидкости, содержащей лакказу. 1 табл.

2349644
патент выдан:
опубликован: 20.03.2009
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕХНИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ЛАККАЗЫ

Способ включает глубинное культивирование штамма гриба Trametes hirsuta (Wulfen) Pilát, ООО ПКФ «БИГОР» CF-28, на питательной среде, отделение биомассы гриба, мембранное концентрирование фильтрата. В составе питательной среды используют ростовые факторы в концентрации 0,1-1,02 мас.% и в качестве источника углерода пшеничную муку в концентрации 2,0-4,0 мас.%. Культивирование ведут при температуре 28-34°С, рН 4,0-4,5, концентрации растворенного кислорода не менее 1,5-2,0 мг·дм -3. Мембранное концентрирование осуществляют при размерах пор мембранного элемента 0,1-0,5 мкм, перепаде давления 1,0-4,0 МПа и температуре 20-40°С. Активность лакказы составляет 140-200 ME. Способ позволяет получить технический ферментный препарат лакказы, обладающий высокой активностью.

2345134
патент выдан:
опубликован: 27.01.2009
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИОЛ:ПРОТЕИН-ДИСУЛЬФИД ОКСИДОРЕДУКТАЗЫ ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Изобретение относится к энзимологии и может быть использовано при оценке качества зерна и продуктов на его основе. Способ предусматривает получение гомогената из муки грубого помола пшеницы Triticum aestiivum L., путем экстрагирования белковых структур водным раствором, содержащим химические реагенты - ЭДТА и ДТТ. Экстракцию ведут при непрерывном перемешивании муки и водного раствора, в соотношении 1:3. Полученный экстракт отделяют от твердой фазы центрифугированием при 3000-5000 об/мин в течение 15-30 мин. Полученный супернатант дважды фракционируют. Первое фракционирование осуществляют при 20%-ном насыщении раствора сульфатом аммония; второе - при 70%-ном насыщении с отделением осадка центрифугированием после первого и второго фракционирования. Осадок, полученный после фракционирования, ресуспендируют в 0,1 М трис - HCl буфере, содержащем ЭДТА, и отделяют центрифугированием при 10000 - 14000 об/мин. Выделенный целевой неочищенный продукт высаливают на колонке с сефадексом. Экстракт очищают ионообменной хроматографией на колонке с сефадексом ДЕАЕ А50 в 0,1 М трис - HCl буфере, содержащем ЭДТА с последующей рехроматографией целевого продукта на колонке с сефадексом ДЕАЕ А50 в 0,1 М трис - HCl буфере, содержащем ЭДТА. Очищенный экстракт лиофильно высушивают. Изобретение позволяет получить и выделить фермент с различными степенями очистки. 10 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

2310684
патент выдан:
опубликован: 20.11.2007
РЕКОМБИНАНТНЫЙ БЕЛОК УРИКАЗЫ МЛЕКОПИТАЮЩЕГО ДЛЯ КОНЪЮГИРОВАНИЯ С ПЭГ, МОЛЕКУЛА НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩАЯ ЕГО, ВЕКТОР ДЛЯ ЕГО ЭКСПРЕССИИ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности генетической инженерии, и может быть использовано в медицине. В результате увеличения числа доступных сайтов связывания ПЭГ в молекуле уриказы млекопитающего, достигаеиого путем замены, по меньшей мере, одного фрагмента аминокислотной последовательности природного фермента млекопитающего, не содержащего остатка лизина, гомологичным фрагментом уриказы млекопитающего другого вида, содержащим остаток лизина, и скрининга вариантов уриказы по показателям активности и иммуногенности после конъюгирования с ПЭГ получены новые химерные ферментные белки, в частности формы, состоящие из фрагментов уриказы свиньи и уриказы павиана (РВС и PKS). Предлагаемые варианты уриказы отличаются тем, что после ПЭГ - илирования сохраняют по существу такую же уриколитическую активность, что и немодифицированный фермент, и являются по существу неиммуногенными. Описаны способы получения новых химерных белков уриказы с помощью технологии рекомбинантных ДНК и необходимые для их осуществления векторные конструкции и системы экспрессии. Применение изобретения обеспечивает получение промежуточных продуктов для производства медицинских препаратов с низкой иммуногенностью и повышенной биодоступностью. 5 с. и 11 з.п. ф-лы, 4 табл., 14 ил.

2290439
патент выдан:
опубликован: 27.12.2006
НОВЫЕ ЦИТОХРОМ Р450-МОНООКСИГЕНАЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ОКИСЛЕНИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ микробиологического окисления N-, О- или S-гетероциклических одно- или многоядерных ароматических соединений, включающий культивирование рекомбинантного микроорганизма, который экспримирует цитохром Р450-монооксигеназу ВМ-3 из Bacillus megaferium с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:2, которая имеет по меньшей мере одну функциональную мутацию в области 86-88 и, при необходимости, по меньшей мере, одну функциональную мутацию в одной из областей 73-82, 172-224, 39-43, 48-52, 67-170, 300-335 и 352-356. Полученный продукт окисления выделяют из среды. Заявленное изобретение позволяет проводить окисление органических соединений с высокой степенью эффективности. 4 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 табл.

2285044
патент выдан:
опубликован: 10.10.2006
Наверх