Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: .гидролазы (3.) – C12N 9/14

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм бактерий Serratia species является продуцентом внеклеточных рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, обладающих противовирусной активностью в отношении вирусов птичьего гриппа A/chickenKurgan/05/2005 (H5N1) и вируса гриппа человека A/Aichi/2/68 (H3N2). Предложенный штамм депонирован в коллекции бактерий, бактериофагов и грибов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» под регистрационным номером В-1287. При использовании культуральной жидкости или экстракта клеток штамма для производства противовирусных препаратов нейтрализация вирусов гриппа A/chickenKurgan/05/2005 и A/Aichi/2/68 составляет 100%. 1 ил., 2 табл., 6 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает обработку чувствительного слоя биосенсора раствором общей фракции протеаз гепатопанкреаса камчатского краба в буфере состава трис-НСl 50 мМ, СаСl₂ 3 мМ, NaCl 100 мМ, рН 8,0 при температуре раствора в диапазоне 35-40°С. Процесс ведут в несколько последовательных стадий раствором общей фракции протеаз гепатопанкреаса камчатского краба в указанном растворителе при температуре в диапазоне 35-40°С с последующей экспозицией. Затем чувствительный слой биосенсора последовательно промывают додецилсульфатом, растворенным в том же буфере в концентрации 0,1%, а затем водой на каждой стадии. При этом процесс обработки проводят трижды. Изобретение позволяет сократить продолжительность процесса. 1 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения разжиженной биомассы, предусматривающий получение материала биомассы из сахарной свеклы и/или сахарного тростника, разжижение упомянутой биомассы ферментной смесью. Указанную ферментную смесь используют в количестве по меньшей мере 0,025% от биомассы. Ферментная смесь включает целлобиогидролазу, бета-глюкозидазу и полигалактуроназу и дополнительно один или несколько ферментнов с гемицеллюлазной активностью, выбранных из арабиназы, ксиланазы, пектинметилэстеразы, рамногалактуроназы и 1,3-/1,6-бета-D-глюканазы. Полученный в результате продукт содержит остаточного нерастворимого сухого вещества менее 2 масс.%. Разжиженная биомасса является стабильной при хранении и может быть использована для получения продуктов в результате сбраживания, таких как этанол, бутанол, ацетон, 1,3-пропандиол, пропанол, уксусная кислота, молочная кислота и пропионовая кислота. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 пр.

Изобретение относится к способу идентификации улучшенных вариантов белка. Способ включает тестирование множества вариантов белка с единичными заменами в первом тесте первого свойства и во втором тесте второго свойства. Свойству родительского белка присваивается значение 1,0 в каждом тесте. Благоприятное первое или второе свойство обладает значением, превышающим 1,0, и чрезмерно неблагоприятное первое или второе свойство обладает значением менее чем приблизительно 0,80. Указанный родительский белок представляет собой протеазу. Первым свойством является стабильность, вторым свойством является эффективность стирки. Осуществляют идентификацию замены, введение замены в белок для получения варианта белка с множественными заменами. При этом замена не взаимодействует в трехмерной структуре указанного родительского белка, и одна из замен содержит изменение суммарного заряда, равное 0, -1 или -2 по отношению к родительскому ферменту, и, по меньшей мере, одна из замен содержит изменение суммарного заряда, равное +1 или +2 по отношению к родительскому ферменту. Тестируют вариант белка с множественными заменами в первом и втором тесте и идентифицируют указанный вариант белка. Изобретение позволяет получить вариант белка с улучшенной стабильностью и эффективностью стирки. 13 з.п. ф-лы, 6 ил., 6 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биохимии и биотехнологии. Проводят дробление, просеивание лигноцеллюлозного материала и отбор гранул с размером частиц от 0,08-0,1 мм. В качестве лигноцеллюлозного материала используют солому, траву, щепу, кукурузные початки, жом и жмых. Смешивают полученные гранулы при массовом соотношении между гранулами и водой 1:(1-5) при температуре 70-90^о С. Диспергируют их через коллоидную мельницу в течение 1-2 часа для получения суспензии с размером частиц 40-80 мкм. Проводят гомогенизацию полученной суспензии при давлении 50-100 атм и температуре 60-85^оС в течение 1-2 часов. Получают взвесь с частицами размером 10-40 мкм. Осуществляют буферизацию полученной взвеси буферным раствором ацетата натрия и уксусной кислоты со значением рН=4,8-5,8. Добавляют смесь ферментов: целлюлазы в количестве 10-60 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала, -глюкозидазы в количестве 40-100 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала и ксиланазы в количестве 60-120 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала. Смесь ферментов вводят в реактор после охлаждения взвеси до температуры проведения энзимолизиса 40-55^оС. Энзимолизис проводят в реакторе в течение 36-72 часов при скорости вращения реактора 80-160 оборотов в минуту. Определяют содержание сахара в гидролизате методом жидкостной хроматографии. Изобретение позволяет провести обработку лигноцеллюлозного материала при невысокой температуре 40-55^оС. 6 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии и представляет собой способ выделения эндонуклеазы из яда кобры. Сначала проводят гель-фильтрацию раствора яда среднеазиатской кобры (Naja naja oxiana) на сверхмелком сефадексе G-75, затем хроматографию эндонуклеазы на SP-сефадексе C-25, диализ выделенного фермента с добавлением балластного белка, стерилизацию и лиофилизацию. При этом перед диализом добавляют БСА до конечной концентрации 1,0-2,0 мг/мл, а отдиализованную эндонуклеазу без концентрирования стерилизуют и лиофилизуют. Способ позволяет увеличить выход эндонуклеазы при выделении, а также устранить препятствие на пути ее использования для лечения бешенства коров. 2 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения глоботриозы заключается в ферментативном переносе галактозного мономера от донора галактозила на лактозу, выполняющую роль акцептора. В качестве донора галактозного мономера используют -галактозилазид. В качестве фермента используют -1,4-галактозилсинтазу, полученную путем введения двух замен D327G и P402D в соответствующих положениях аминокислотной последовательности гена альфа-галактозидазы дикого типа, выделенной из Thermotoga maritima. При этом реакцию проводят при 37°С, рН 5,0 до полного расщепления -галактозилазида. Изобретение обеспечивает повышение выхода и чистоты глоботриозы. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии. Способ предусматривает использование рибонуклеазы бактериальной 7P для увеличения эффективности подавления размножения РНК- и ДНК-содержащих вирусов для лечения острых вирусных заболеваний млекопитающих и теплокровных животных. Преимущества заявляемой РНКазы заключаются в том, что подавление размножения вирусов РНКазой Bacillus intermedius достигается при использовании существенно более низких доз вводимых в инфицированный организм ферментов с повышенной эффективностью подавления размножения вирусов и лечебного процесса. 1 з.п. ф-лы, 8 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается штамма дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ Y-3852 - продуцента фитазы. Рекомбинантный штамм получен путем трансформации штамма Yarrowia lipolytica Polf ATCC MYA-2613 и содержит ген фитазы PhyA Obesumbacterium proteus. Штамм может быть использован в животноводстве для получения кормовых добавок.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения гидролазы эфиров альфа-аминокислот путем биосинтеза рекомбинантными бактериями. Для осуществления способа сконструирован рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11271 - продуцент гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, полученный путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей ген aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, не модифицированный на 5 -конце последовательностью, кодирующей полигистидиновый «хвост», и находящийся под контролем промотора Т7, а также ген устойчивости к канамицину Kan. Изобретение позволяет получать гидролазу эфиров альфа-аминокислот с высокой степенью эффективности. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 7 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам переработки шкур рыб для получения гиалуроновой кислоты и коллагена. Способ предусматривает следующее. Шкуры прудовых рыб промывают холодной проточной водой в течение 10-15 мин. Измельчают их до размера 2-3 мм. Проводят водную экстракцию при температуре 40-45°C в течение 40-50 мин при соотношении измельченные шкуры : вода равном 1:1 при периодическом перемешивании. Фильтруют, после чего жидкую фракцию сушат в распылительной сушилке при температуре продукта на выходе из сушилки 60-65°C в течение 15-25 мин с получением гиалуроновой кислоты. Твердую фракцию подвергают отбеливанию в течение 12 ч перекисно-солевым раствором, который готовят путем смешивания 1 л 3%-ной перекиси водорода и 20 г хлорида натрия. Обработку отбеленной твердой фракции 1,0-1,2%-ным раствором гидроксида натрия в течение 24 ч при температуре 20-25°C с последующей нейтрализацией полученной смеси 3%-ным раствором борной кислоты. Обработку набухшей твердой фракции раствором ферментного препарата «Панкреатин», взятым в количестве 0,5-0,6% к массе твердой фракции, в течение 1,5-2,0 ч при температуре 37-40°C. Промывку твердой фракции холодной проточной водой для удаления остатков «Панкреатина» с получением коллагена. Полученный коллаген, в зависимости от назначения, направляют на сушку в сушильные камеры с принудительной циркуляцией воздуха при температуре 18-20°C в течение 12 ч и хранение в сухие вентилируемые помещения при температуре не выше 20°C в течение 24 месяцев или замораживают до температуры минус 18 - минус 20°C и хранят при температуре минус 18 - минус 20°C в течение 24 месяцев. Высушенную в распылительной сушилке жидкую фракцию хранят при температуре 0-4°C в течение 12 месяцев или растворяют в физиологическом буферном растворе. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма Escherichia coli ВКПМ В-11246 - продуцента гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915 и способа микробиологического синтеза такой гидролазы. Представленный штамм сконструирован путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, содержащей кодирующую область гена aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915 под контролем промотора Т7 и ген устойчивости к канамицину Kan гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915. Представленный способ синтеза гидролазы эфиров альфа-аминокислот осуществляют путем культивирования штамма-продуцента Escherichia coli ВКПМ В-11246 с добавлением в состав среды канамицина и изопропил- -D-тиогалактозида в качестве индуктора экспрессии получаемого продукта. Изобретения обеспечивают высокий уровень биосинтеза целевого продукта, что может быть использовано для разработки методов получения биокатализаторов процессов синтеза аминопенициллинов и аминоцефалоспоринов. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 5 пр.

Проводят ферментацию питательной среды на основе гидролизатов кукурузного крахмала актиномицетом. Проводят ультрафильтрацию полученного фильтрата культуральной жидкости с активностью 4250±250 ИЕ/см³ через мембраны с отсечением 5 кДа. Концентрируют под вакуумом 0,082 МПА при температуре 25-30°C полученный фильтрат. Осветляют его при температуре 30-40°C. Снова проводят его ультрафильтрацию через мембрану с отсечением 1 кДа. Полученный ингибитор гликозидаз сушат и измельчают. Изобретение позволяет получить ингибитор гликозидаз с повышенной активностью 3500000±50000. 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описаны выделенная рекомбинантная аденозиндеаминаза, включающая полипептид SEQ ID NO: 1 или вариантный полипептид SEQ ID NO: 1 выделенной рекомбинантной аденозиндеаминазы, где вариантный полипептид SEQ ID NO: 1 включает одну или более аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из: Gln вместо Lys198; Ala вместо Thr245; и Arg вместо Gly351, и кодирующая ее ДНК. Представлен конъюгат полиалкиленоксида с указанной аденозиндеаминазой для лечения аденозиндеаминаза-опосредованных заболеваний, где аденозиндеаминаза включает от 11 до 17 цепей полиалкиленоксида с молекулярной массой 5 кДа на белок АДА. Предложены способы очистки рекомбинантной аденозиндеаминазы, включающие очистку белка с помощью ионообменной хроматографии или очистку белка с помощью хроматографии гидрофобного взаимодействия. Кроме того, представлены препараты рекомбинантной аденозиндеаминазы, полученные указанными способами. Изобретение позволяет получить рекомбинантную аденозиндеаминазу, обладающую повышенной стабильностью. 8 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и касается штамма бактерий Planomicrobium koreense 78k. Предложенный штамм бактерий Planomicrobium koreense 78k выделен из почвы и обеспечивает получение сайт-специфической эндонуклеазы PkrI, узнающей и расщепляющей обе цепи нуклеотидной последовательности ДНК, которая содержит три или четыре С5-метилцитозиновых оснований в сайте узнавания 5 -GCNAGC-3 с образованием однонуклеотидного 3 -выступающего конца. Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика под номером В-10627. Представленный штамм может быть использован для выделения новой сайт-специфической эндонуклеазы PkrI, которая может применяться при выявлении и расщеплении метилированных участков ДНК. 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой штамм бактерии Microbacterium testaceum 17В, депонированный под № ВКПМ В-10628 во Всероссийской Коллекции Промышленных микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика, являющийся продуцентом сайт-специфической эндонуклеазы MteI. Изобретение позволяет получить сайт-специфическую эндонуклеазу, которая узнает и расщепляет обе цепи нуклеотидной последовательности ДНК 5 -G(m5C)G(m5C) NG(m5C)G(m5C)-3 /3 -(m5C)G(m5C)GN (m5C)G(m5C)G-5 , где m5С - 5-метилцитозин, с образованием однонуклеотидного 5 -выступающего конца и не расщепляет метилированную последовательность ДНК 5 -G(m5C)NG(m5C)-3 /3 -(m5C)GN(m5C)G-5 . 2 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и фармакологии, в частности к способу получения препарата Фортелизин, обладающего фибринолитическими свойствами, и его применению для лечения инфаркта миокарда. Размораживают супернатант, содержащий рекомбинантный белок с аминокислотной последовательностью стафилокиназы (РБСФ). Выделяют и хроматографически очищают РБСФ на СМ-сефарозе. Производят хроматографическую очистку РБСФ на DEAE-сефарозе. Затем переводят РБСФ в раствор 0,3% NaCl. Осуществляют стерилизацию, фасовку, лиофильную сушку и маркировку субстанции. В реактор с мешалкой, рабочим объемом 160 л, вносят 20 литров воды для инъекций, затем 150 г субстанции и воду для инъекций в количестве 10 л, включают мешалку реактора (скорость мешалки 80 об/мин), перемешивание продолжают в течение 15 мин, после чего мешалку реактора выключают, отбирают пробу, фиксируют рН полученного раствора, рН от 5,5 до 7,5. Осуществляют стерилизующую фильтрацию раствора, наполнение и предварительную укупорку флаконов. Затем осуществляют лиофильную сушку препарата и окончательную укупорку. Предлагается применение препарата Фортелизин для лечения инфаркта миокарда путем введения внутривенно в дозе 15 мг (2235000 ME), при этом содержимое флакона 5 мг (745000 ME) перед введением препарата разводят в 5 мл раствора натрия хлорида 0,9%, введение осуществляют двумя болюсами 10 мг (1490000 ME) одномоментно и через 30 минут 5 мг (745000 ME) или сначала 10 мг (1490000 ME) болюсно, а оставшиеся 5 мг (745000 ME) внутривенно инфузионно в 50 мл раствора натрия хлорида 0,9% в течение 30 мин. Изобретение расширяет арсенал лекарственных средств с фибринолитическими свойствами. 3 н.п. ф-лы.

Изобретение относится к области биохимии. Представлена плазмида, определяющая синтез щелочной фосфатазы СmАР, включающая NcoI/SacI-фрагмент плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК, размером 1530 пар оснований, содержащий химерный ген, состоящий из структурной части гена СmАР, адаптированной по N-концу для экспрессии в клетках E.coli, и нуклеотид, кодирующий специфическую последовательность для протеазы TEV. Описан штамм E.coli Rosetta(DE3), трансформированный указанной плазмидой, - продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность рекомбинантной щелочной фосфатазы СmАР. Предложен способ получения рекомбинантной щелочной фосфатазы СmАР, включающий стадии: инкубирования указанного штамма-продуцента в жидкой питательной среде LB в течение 12 ч при 20°С, осаждения бактериальных клеток центрифугированием, дезинтеграции суспензии клеток в буфере, центрифугирования экстракта, хроматографии надосадочной жидкости на колонке с металлоафинной смолой, элюции белка, концентрирования активных фракций ультрафильтрацией, инкубирования с протеазой TEV, концентрирования раствора белка и выделения целевого продукта гель-фильтрацией. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.

Изобретение относится к ветеринарии, сельскому хозяйству, медицине, биотехнологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для защиты от инфекций, вызываемых ДНК- и РНК-содержащими вирусами. Антивирусный комбинированный препарат контактного действия на основе средства «Бетадин» представляет собой смесь препарата «Бетадин» с раствором бактериальной эндонуклеазы - продукта гена nuc А (синоним nuc), в любом соотношении, при этом содержание повидон-йода в разбавленном средстве «Бетадин» составляет 0,005-0,000005%, а рН раствора бактериальной эндонуклеазы в буферном или солевом растворе, содержащем катионы магния, составляет 7-9. Охарактеризованный препарат обладает одновременно пониженным раздражающим эффектом и высокой вирулицидной активностью. 2 табл.

ШТАММ ГРИБА Trichoderma aureoviride Rifai - ПРОДУЦЕНТ 1,3- -D-ГЛЮКАНАЗ

Штамм гриба Trichoderma aureoviride Rifai выделен из морского грунта, собранного на глубине 25 м в Южно-Китайском море. Депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ им. Г.К.Скрябина РАН под регистрационным номером ВКМ F-4115D. Для выращивания штамма используют питательную среду, не содержащую сахаров. Штамм характеризуется высокой продуктивностью 1,3- -D-глюканаз. Суммарный выход 1,3- -D-глюканаз составляет 13,5-16 ед./мг белка. 1 табл.

Данное изобретение относится к области биохимии и физики. Предложен способ определения ДНК-гидролизующей активности молекул и устройство для его осуществления. Способ предусматривает адсорбирование реакционной смеси, содержащей ДНК и тестируемые вещества, на рабочем электроде, модифицированном углеродными наноматериалами. Затем регистрируют и сравнивают величины сигналов окисления ДНК в составе реакционной смеси до выдерживания реакционной смеси (контроль) и после выдерживания реакционной смеси (опыт). Увеличение сигнала окисления ДНК свидетельствует о наличии ДНК-гидролизующей активности у тестируемой молекулы. Изобретение позволяет упростить и сократить продолжительность определения ДНК-гидролизующей активности молекул, повысить избирательность и чувствительность анализа при уменьшении его стоимости. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии и касается штамма бактерий, продуцирующего новую сайт-специфическую эндонуклеазу KroI. Предложен штамм бактерий Kocuria rosea 307, выделенный из почвы и обеспечивающий получение сайт-специфической эндонуклеазы KroI. Эндонуклеаза KroI узнает и расщепляет обе цепи нуклеотидной последовательности ДНК 5'-GCCGGC-3'/3'-CGGCCG-5', в которых два центральных цитозина метилированы в положении С5 с образованием четырехнуклеотидных 5'-выступающих концов. Для культивирования штамма применяют среду следующего состава (гл): пептон 10, дрожжевой экстракт 5, NaCl 5, вода дистиллированная остальное. Культивирование проводят при 28°С с аэрацией до достижения стационарной стадии роста. Выход фермента составляет 200 ед./г сырой биомассы, концентрация 1000 ед./мл. 2 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой полипептид, обладающий -L-арабинофуранозидазной активностью, выбранный из следующих полипептидов: полипептид с SEQ ID No.2, полипептид, аминокислотная последовательность которого находится между положениями 28 и 400 SEQ ID No.2, фрагмент полипептида с SEQ ID No.2, обладающий активностью -L-арабинофуранозидазы, полипептид, обладающий активностью -L-арабинофуранозидазы В и проявляющий, по меньшей мере, 80% идентичность с полипептидом SEQ ID No.2. Изобретение также относится к полинуклеотиду, кодирующему данный полипептид, экспрессионной кассете и вектору, содержащим полинуклеотид, и организму-хозяину, содержащему данный полипептид. Изобретение позволяет расширить арсенал средств для гидролиза -L-арабинофуранозильных связей в арабинофуранозилолигосахаридных соединениях. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 ил, 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Иммобилизованный биокатализатор содержит клетки мицелиального гриба, продуцирующие пектиназы и включенные в матрицу содержащего поливиниловый спирт гелевого носителя. Гелевый носитель представляет собой криогель поливинилового спирта с макропорами сечением 0,5-5,0 мкм. Иммобилизованный биокатализатор получен на основе следующих компонентов, взятых в соотношении, мас.%: клетки мицелиального гриба (по сухой массе) 0,001-0,1; поливиниловый спирт 8,4÷12,5; водная фаза - до 100. Изобретение обеспечивает длительное сохранение иммобилизованным биокатализатором высокой механической прочности, жизнеспособности клеток мицелиальных грибов, обладающих пектолитической активностью. Время использования биокатализатора составляет 572-744 ч, средняя продуктивность процесса по пектолитической активности составляет 1,05-1,45 Ед.мл^-1ч^-1, а максимальная пектолитическая активность составляет 104160-830000 Ед.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения гетерогенного биокатализатора для ферментативного синтеза аминобета-лактамного антибиотика на основе внутриклеточной гидролазы эфиров альфа-аминокислот из бактерий рода Xanthomonas, включающий разрушение биомассы клеток Xanthomonas rubrilineans, экстракцию из нее фермента в водную фазу и последующую его иммобилизацию. Причем разрушение клеток осуществляют поэтапно, сначала нарушая их целостность криогенным воздействием, а затем обрабатывая водную суспензию размороженных клеток бутилацетатом. Экстракцию фермента в водную фазу проводят при нагревании обработанной клеточной суспензии сначала в условиях спонтанно устанавливающегося градиента рН, а затем при постоянном значении рН. Получаемый бесклеточный экстракт используют для процедуры иммобилизации фермента путем его осаждения полиэтиленгликолем в виде ферментных агрегатов и их последующей поперечной сшивки в присутствии глутарового альдегида. Полученный таким образом гетерогенный биокатализатор содержит до 0,95 г белка/г сухого биокатализатора и обладает синтетазной активностью до 2200 МЕ/г сухого биокатализатора. Изобретение позволяет повысить эффективность процедуры получения биокатализатора, повысить активность и стабильность получаемого биокатализатора. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для сайт-специфического гидролиза ДНК, содержащей С5-метилцитозиновые основания. Из почвы выделен штамм Paracoccus carotinifaciens 3К, обеспечивающий получение сайт-специфической эндонуклеазы, которая узнает и расщепляет обе цепи нуклеотидной последовательности ДНК, содержащей четыре С5-метилцитозиновых оснований в сайте узнавания 5'-WCGNNNNNNNCGW-3', с образованием однонуклеотидных 3'-выступающих концов. Изобретение позволяет получить новую сайт-специфическую эндонуклеазу PcsI, которая может быть использована для выявления и анализа метилированной ДНК. 2 ил.

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в биотехнологии при получении генно-инженерных продуктов. Для выделения карбоксипептидазы В из поджелудочной железы свиньи экстракцию, осаждение сульфатом аммония и очистку проводят в буферных растворах, содержащих 0,001-0,005 М хлорида цинка. При этом очистку проводят двукратной хроматографией на Q-сефарозе, а в процессе хроматографии используют элюцию 0,07-0,08 М NaCl в 0,005 М трис HCl буфере, рН 7,6. Изобретение обеспечивает упрощение способа получения карбоксипептидазы В при сохранении высокой удельной активности конечного препарата и стабильности карбоксипептидазы В.

Изобретение относится к биотехнологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для защиты от инфекций, вызываемых микроорганизмами. Антимикробный препарат включает бактериальную нуклеазу в комбинации с электроактивированным водно-солевым раствором, содержащим 0,1% йодита калия и 0,3% хлорида натрия, и стабилизатором - глицерином, или сахарозой, или поливинилпирролидоном, или глюкозой, или альбумином. Изобретение позволило расширить спектр действия бактериальной эндонуклеазы, т.е. создать препарат, обладающий вирулицидным, фунгицидным, бактерицидным и хламидиоцидным действием без выраженной видо- и типоспецифичности. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и может быть использовано для анализа ДНК. Из почвы выделен штамм Glacial ice bacterium, обеспечивающий получение сайт-специфической эндонуклеазы, узнающей и расщепляющей обе цепи метилированной нуклеотидной последовательности ДНК 5 -G(m5C) NG(m5C)-3 . Применение изобретения обеспечивает получение новой специфической эндонуклеазы, специфичной к метилированной последовательности ДНК. 3 ил., 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"157(1-2): 25-9. LEE S.Y., MERMELSTEIN L.D., BENNETT G.N., PAPOUTSAKIS E.T. Vector construction, transformation, and gene amplification in Clostridium acetobutylicum ATCC 824. Ann NY Acad Sci. 1992 Oct 13; 665: 39-51.

Изобретение относится к генной инженерии. Введение в растение полинуклеотидов, кодирующих мутантные полипептиды АДФ-глюкозопирофосфорилазы эндоспермы кукурузы и растворимой синтазы крахмала обеспечивает высокую урожайность за счет их повышенной термостабильности в условиях теплового стресса. 8 н. и 78 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл.