Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ...действующие на бета-1,4-глюкозидные связи, например целлюлаза – C12N 9/42

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлена моющая композиция, содержащая изолированный мутантный вариант исходной ксилоглюканазы, от 2 до 50 мас.% поверхностно-активного вещества и вспомогательный ингредиент, где вариант исходной ксилоглюканазы содержит одну из представленных в описании групп изменений; исходная ксилоглюканаза является ксилоглюканазой, имеющей по меньшей мере 90% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:3, представленной в описании; и вариант обладает ксилоглюканазной активностью. Предложено применение указанной композиции для придания хлопку грязеотталкивающих свойств в процессе последующей стирки. Изобретение позволяет получить моющую композицию со стабильной ксилоглюканазой для придания хлопку грязеотталкивающих свойств в процессе последующей стирки. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 1 ил., 56 табл., 29 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии. Предложена полинуклеиновая кислота, кодирующая слитый белок для обеспечения секреции фермента, расщепляющего клеточную стенку, в микроорганизме класса Clostridia, а также соответствующий рекомбинантный микроорганизм и способ продуцирования и секреции указанного белка. Изобретение может быть использовано для целлюлолитических процедур в промышленности. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области биохимии и биотехнологии. Проводят дробление, просеивание лигноцеллюлозного материала и отбор гранул с размером частиц от 0,08-0,1 мм. В качестве лигноцеллюлозного материала используют солому, траву, щепу, кукурузные початки, жом и жмых. Смешивают полученные гранулы при массовом соотношении между гранулами и водой 1:(1-5) при температуре 70-90^о С. Диспергируют их через коллоидную мельницу в течение 1-2 часа для получения суспензии с размером частиц 40-80 мкм. Проводят гомогенизацию полученной суспензии при давлении 50-100 атм и температуре 60-85^оС в течение 1-2 часов. Получают взвесь с частицами размером 10-40 мкм. Осуществляют буферизацию полученной взвеси буферным раствором ацетата натрия и уксусной кислоты со значением рН=4,8-5,8. Добавляют смесь ферментов: целлюлазы в количестве 10-60 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала, -глюкозидазы в количестве 40-100 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала и ксиланазы в количестве 60-120 международных единиц на грамм лигноцеллюлозного материала. Смесь ферментов вводят в реактор после охлаждения взвеси до температуры проведения энзимолизиса 40-55^оС. Энзимолизис проводят в реакторе в течение 36-72 часов при скорости вращения реактора 80-160 оборотов в минуту. Определяют содержание сахара в гидролизате методом жидкостной хроматографии. Изобретение позволяет провести обработку лигноцеллюлозного материала при невысокой температуре 40-55^оС. 6 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ повышения активности полипептида GH61, обладающего усиливающей целлюлолитическую активность деятельностью, предусматривающий добавление растворимого активирующего катиона двухвалентного металла, выбранного из Mn⁺⁺, Co⁺⁺, Mg ⁺⁺, Ca⁺⁺ и их сочетания, к композиции, содержащей полипептид GH61 и целлюлолитический фермент, где наличие указанного растворимого активирующего катиона двухвалентного металла повышает уровень разложения или преобразования содержащего целлюлозу сырья. Также рассмотрены способ разложения или преобразования содержащего целлюлозу сырья, способ получения продукта ферментации и композиции для разложения содержащего целлюлозу сырья. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 18 ил., 4 табл., 24 пр.

Изобретение относится к способу получения спирта из предварительно обработанной лигноцеллюлозной биомассы. Способ включает этап ферментативного гидролиза ферментами, разлагающими целлюлозу и/или гемицеллюлозу, полученными при использовании по меньшей мере одного типа отходов с другого процесса получения этанола, использующего в качестве сырья сахароносные растения. Получение ферментов, разлагающих целлюлозу и/или гемицеллюлозу, осуществляют штаммами микроорганизмов, разлагающих целлюлозу, использующих в качестве источника углерода для роста сахарозу, природную или модифицированную. В качестве микроорганизмов используют микроорганизмы рода Trichoderma, Aspergillus, Penicillium или Schizophyllum. Изобретение обеспечивает эффективный ферментативный гидролиз в предложенном процессе получения спирта. 9 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к клетке-хозяину Trichoderma reesei для получения целлюлолитической белковой композиции, целлюлолитической белковой композиции, способам получения и применения композиции. Клетка-хозяин Trichoderma reesei содержит полинуклеотиды, кодирующие гетерологичный полипептид GH61, слитый белок бета-глюкозидазы, целлюлолитические ферменты. Способ получения композиции включает культивирование клетки-хозяина Trichoderma reesei и выделение композиции. Композиция содержит полипептид GH61, слитый белок бета-глюкозидазы и один или более целлюлолитических ферментов. Способ разложения материала, содержащего целлюлозу, характеризуется обработкой материала целлюлолитической белковой композицией. Способ получения продукта ферментации включает осахаривание материала, ферментацию осахаренного материала сбраживающими микроорганизмами и выделение продуктов ферментации. Представленные изобретения могут быть использованы для разложения или преобразования материала, содержащего целлюлозу. 5 н. и 7 з.п. ф-лы, 14 ил., 23 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Представлены выделенные варианты целлюлазы, где указанные варианты являются вариантами исходной целлюлазы, аминокислотная последовательность которой идентична, по меньшей мере, на 75% аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3, при этом один вариант включает замену в положении, выбранном из положения 63, 77, 129, 147, 153, 157, 161, 194, 197, 203, 237, 239, 247, 254, 281, 285, 288, 289, 294, 327, 339, 344, 356, 378 или 382, а второй вариант целлюлазы содержит дополнительно к одной из вышеуказанных замен замену в положении 146, 151, 189, 208, 211, 244, 277 или 405, где положения пронумерованы в соответствии с аминокислотной последовательностью эталонной целлобиогидролазы II (СВН2), представленной в SEQ ID NO: 3, и где замена в одном или более положении является причиной того, что вариант целлюлазы имеет более отрицательный результирующий заряд, чем эталонная СВН2, при этом вариант целлюлазы обладает повышенной целлюлолитической активностью по сравнению с целлюлазами дикого типа. Раскрыты способы преобразования биомассы и продуцирования топлива с использованием указанного варианта целлюлазы. Изобретение позволяет получать целлюлазы с повышенной целлюлолитической активностью по сравнению с целлюлазами дикого типа. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 табл., 9 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и касается новых целлюлотических полипептидов и их применения. Представленный полипептид целлобиогидролазы выбирают из группы, состоящей из:

a) полипептида, включающего аминокислотную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 95%-ную идентичность SEQ ID NO:6 и обладающую целлобиогидролазной активностью и

b) фрагмента а), имеющего целлобиогидролазную активность. Такие полипептиды могут быть получены с помощью рекомбинантной технологии при использовании подходящих полинуклеотидов, экспрессирующих векторов и клеток-хозяев. Представленное изобретение может быть использовано при получении ферментируемых сахаров и биоэтанола из лигноцеллюлозного материала посредством ферментативной конверсии. 11 н. и 21 з.п. ф-лы, 15 ил., 31 табл., 32 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается целлюлазных слитых белков. Представленные слитые белки содержат аминокислотную последовательность эндоглюканазного ядра, имеющую, по крайней мере, 95%-ную идентичность с SEQ ID NO:2, слитую с аминокислотной последовательностью, содержащей линкер и целлюлозосвязывающий домен (CBD), имеющую, по крайней мере 95%-ную идентичность с SEQ ID NO:15. Такие слитые белки могут быть получены с помощью рекомбинантной технологии при использовании подходящих полинуклеотидов, экспрессирующих векторов и клеток-хозяев. Представленное изобретение обеспечивает целлюлазу, обладающую низкой активностью в отношении восстановления окраски, и может быть использовано для обработки целлюлозного материала, например, текстильного материала и для биологической абразивной обработки денима. Кроме того, представленные слитые белки и ферментные препараты на их основе могут использоваться для приготовления детергентных композиций или для улучшения качества кормов для животных. 12 н. и 14 з.п. ф-лы, 8 ил., 10 табл., 10 пр.

Штамм создан на основе промышленного продуцента, мутантного штамма, Aspergillus awamori M-2002 (ВКМ F-3771D) с использованием методов индуцированного мутагенеза и ДНК-технологий. Штамм A.awamori Xyl Т-15 депонирован в BKM ИБФМ им. Г.К.Скрябина РАН под № 4278D, хранится в лиофильно высушенном состоянии на скошенном сусло-агаре в отделе биотехнологии ферментных препаратов в пищевой промышленности ГНУ ВНИИ пищевой биотехнологии Россельхозакадемии г.Москвы. Изобретение обеспечивает получение высокоактивных комплексных ферментных препаратов глюкоамилазы и ксиланазы с уровнем активности ксиланазы 150-200% относительно исходного штамма для применения в различных отраслях АПК. 3 табл., 3 пр.

НОВАЯ ЭНДО-(1-4)- -D-КСИЛАНАЗА ИЗ PENICILLIUM CANESCENS (ВАРИАНТЫ), ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ СЕКРЕТИРУЕМУЮ ЭНДО-(1-4)- -D-КСИЛАНАЗУ ИЗ PENICILLIUM CANESCENS (ВАРИАНТЫ), И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новые эндо-(1-4)- -D-ксиланазы мицелиального гриба Penicillium canescens. Изобретение относится также к способу получения эндо-(1-4)- -D-ксиланаз с использованием эукариотических клеток, трансформированных фрагментом ДНК, кодирующим указанные ксиланазы из Penicillium canescens. Изобретение позволяет расширить арсенал известных эндоксиланаз. 10 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для повышения эффективности ферментативного расщепления целлюлозосодержащих субстратов в технологиях переработки целлюлозосодержащих отходов, в спиртовой, пищевой, целлюлозно-бумажной отраслях промышленности, в кормопроизводстве, в технологиях обработки тканей из природных растительных волокон и др. Предлагаемое средство для повышения целлюлазной активности представляет собой -(3',5'-дитрет-бутил-4'-гидроксифенил)пропионовую кислоту (фенозан-кислота) или ее калиевую соль (фенозан-К). Средство проявляет активирующее действие в широком диапазоне концентраций, включая сверхнизкие. Применение заявляемого средства позволяет ускорить процесс ферментативного расщепления целлюлозосодержащего субстрата, увеличить выход целевого продукта и снизить расход ферментного препарата в 1,3-1,5 раза. 1 табл., 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно микробиологической промышленности. Получен новый штамм гриба-продуцента пектолитических ферментов Aspergillus foetidus 379-K (ВКПМ F-962). Использование данного штамма Aspergillus foetidus 379-K позволяет получить комплекс пектолитических ферментов с высоким уровнем активности эндополигалактуроназы, -глюканаз, ксиланаз, целлюлаз, маннаназ и хитиназ. Штамм получен многоступенчатой селекцией из штамма Aspergillus foetidus 37 (ЦМПМ-Р-270) с использованием мутагенеза. Штамм хранится в лиофильно высушенном состоянии и на скошенном сусло-агаре. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в медицинской, пищевой и сельскохозяйственной отраслях промышленности. Пищевую карбоксиметилцеллюлозу растворяют в буферном растворе или подщелоченной дистиллированной воде с рН 9,5-10 и добавляют к фильтрату полученного раствора целлюлазу, продуцируемую культурой Trichoderma reesei или культурой Trichoderma viride с активностью не ниже 50 ед/г в виде порошка в присутствии 1-1,5%-ного раствора поверхностно-активного вещества при интенсивном перемешивании со скоростью 4500-5000 об/мин. Образовавшуюся эмульсию охлаждают до 5-10°С, уменьшают рН реакционной смеси до 3,0-3,5 и оставляют на сутки в холодильнике. Выпавшие частицы отделяют из раствора и неоднократно добавляют к оставшимся частицам ацетатный буфер с рН 4-4,5 при перемешивании, затем выпавшие частицы, содержащие целлюлазу, отделяют и высушивают. Это позволяет уменьшить размер частиц иммобилизованной целлюлазы, что способствует увеличению скорости ферментативного процесса.

Ферментный препарат комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы для гидролиза целлюлозы и гемицеллюлозы получают культивированием штамма Penicillium verruculosum BKM F-3972D на водной среде, содержащей в г/л: целлюлозу - 50-60, глюкозу - 10-30, минеральные соли - KН₂РО₄ 8-12, (NH₂)₂SO₄ 3-7, MgSO₄ ·7H₂O 0,2-0,4, CaCl₂·2H₂ O 0,2-0,4, при непрерывной подпитке глюкозой. Процесс культивирования ведут при температуре 26-30°С и поддержании рН в диапазоне 4,5-5,0. Культуральную жидкость, содержащую ферментный препарат, отделяют через 120-144 ч после начала культивирования, подвергают ультрафильтрации и высушивают. Это обеспечивает высокую специфическую активность комплекса целлюлаз, ксиланазы и ксилоглюканазы и способствует повышению эффективности использования ферментного препарата в различных областях биотехнологии. 2 н.п. ф-лы., 1 табл.

Штамм Myceliophthora fergusii UV-64 BKM F-3932D обладает способностью продуцировать комплекс высокоактивных карбогидраз, включающий нейтральные целлюлазу, ксиланазу и бета-глюканазу. Это позволяет получить целый ряд ферментов для гидролиза некрахмальных полисахаридов растительного сырья, проявляющих высокую активность при слабокислых и нейтральных значениях рН, и тем самым расширить ассортимент ферментных препаратов. 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм бактерий Bacillus macerans BKM В-2419 D - продуцент пектатлиазы, пектинлиазы и полигалактуроназы и комплекса щелочных карбогидраз, содержащего ксиланазу, -глюканазу, галактоманнаназу, арабиназу, ксилоглюканазу и амилазу, может быть использован в микробиологической, пищевой, текстильной, целлюлозно-бумажной отраслях промышленности, а также в производстве кормовых добавок. Изобретение позволяет увеличить выход щелочных пектиназ и щелочных карбогидраз.

ШТАММ МИЦЕЛИАЛЬНОГО ГРИБА PENICILLIUM FUNICULOSUM - ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА КАРБОГИДРАЗ, СОДЕРЖАЩЕГО ЦЕЛЛЮЛАЗЫ, -ГЛЮКАНАЗЫ, -ГЛЮКОЗИДАЗЫ, КСИЛАНАЗЫ И КСИЛОГЛЮКАНАЗЫ, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА КОМПЛЕКСА КАРБОГИДРАЗ ДЛЯ ОСАХАРИВАНИЯ ЛИГНОЦЕЛЛЮЛОЗНЫХ МАТЕРИАЛОВ

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения сбраживаемых сахаров, предназначенных для переработки в этанол, а также в качестве кормовых добавок. Штамм мицелиального гриба получен с помощью многоступенчатого мутагенеза и селекции из исходной культуры Penicillium funiculosum BKM F 3661. Полученный штамм культивируют на жидкой питательной среде при непрерывной подпитке глюкозой. Через 120 ч после начала культивирования культуральную жидкость отделяют и концентрируют ультрафильтрацией с получением жидкого ферментного препарата или высушивают. 2 н.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой бета-глюканазу, получаемую из гриба Talaromyces emersonii, или композицию, обладающую активностью бета-глюканазы. Данный фермент или композиция используются при обработке растительного материала для разрушения или модификации целлюлозы, а также входят в состав пищевых продуктов и кормов для животных. Заявленное изобретение позволяет расширить ассортимент ферментов, обладающих бета-глюканазной активностью. 9 н. и 8 з.п. ф-лы, 15 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности области биотехнологической переработки лигноцеллюлозных материалов. Способ включает обработку сырья ферментным препаратом. В качестве ферментного препарата используют препарат, полученный культивированием штамма Penicillium funiculosum S-2006 на среде, содержащей в г/л: целлюлозу - 50-60, глюкозу - 10-30, КН₂ РО₄ - 8÷12, (NH₄ )₂SO₄ - 3÷7, MgSO₄×7H₂O - 0,2÷0,4, CaCl₂×2H ₂O - 0,2÷0,4 при 26-30°С при поддержании рН в диапазоне 4,5-5,5. Обработку проводят при интенсивном перемешивании и при температуре 45-55°С в слабокислой среде, а количество ферментного препарата подбирают таким образом, чтобы активность по фильтровальной бумаге была 9-11 ед. на 1 г сухого субстрата. Способ обеспечивает высокий выход сбраживаемых сахаров. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для осахаривания и переработки отходов промышленности и сельского хозяйства, для биодеградации клеточных стенок растений и микроорганизмов, в микробиологической промышленности, в целлюлозно-бумажной промышленности в различных отраслях спиртовой и пищевой промышленности, в кормопроизводстве, в сельском хозяйстве при проведении ферментативного гидролиза (осахаривания) целлюлозы и целлюлозосодержащего сырья. Штамм Tr.longibrachiatum TW-420 депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К.Скрябина РАН под № ВКМ F-3880D. Штамм получен с помощью многоступенчатого мутагенеза и селекции из мутанта Tr.longibrachiatum TW-307 (F-3865D). По своим морфологическим признакам при росте на глюкозокартофельном агаре, на агаре для споруляции (СМ-агаре) отличается от исходного штамма сниженной интенсивностью спороношения, цветом пигмента и более медленным ростом на твердых средах, повышенной способностью при глубинном культивировании на жидких средах к биосинтезу целлюлаз бета-глюканаз и ксиланаз. Активности FPA, (целлюлазная), КМЦ-азная, бета-глюканазная и ксиланазная в культуральной жидкости оставляют 9, 48, 45 и 50 ед/мл соответственно.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в различных отраслях спиртовой и пищевой промышленности, в кормопроизводстве, в сельском хозяйстве. Штамм Aspergillus aculeatus ВКМ F-3766D обладает способностью продуцировать комплекс карбогидраз, включающий целлюлазы, бета-глюканазы, ксиланазы, маннаназы и пектиназы, содержащий ферменты высокого уровня активности. Изобретение обеспечивает возможность получения полного комплекса ферментов для гидролиза полисахаридов растительного сырья, а также, при необходимости, отдельных индивидуальных ферментов (компонентов) комплекса. Для достижения высокой продуктивности штамма не требуется применения сложных и дорогих питательных сред.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в различных отраслях спиртовой и пищевой промышленности, в кормопроизводстве, в сельском хозяйстве. Штамм Trichoderma longibrachiatum BKM F-3865D (Всероссийская коллекция микроорганизмов при ИБФМ им. Г.К.Скрябина РАН) обладает способностью продуцировать комплекс карбогидраз, включающий целлюлазы, бета-глюканазы, ксиланазы, маннаназы и пектиназы, содержащий ферменты высокого уровня активности. Изобретение обеспечивает возможность получения полного комплекса ферментов для гидролиза полисахаридов растительного сырья, а также при необходимости - отдельных индивидуальных ферментов (компонентов) комплекса. Для достижения высокой продуктивности штамма не требуется применения сложных и дорогих питательных сред.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологической и пищевой промышленности и сельском хозяйстве. Штамм мицелиального гриба Penicillium funiculosum BKM F-3668D получают с помощью многоступенчатого классического мутагенеза и селекции из исходной культуры Penicillium funiculosum P1 (BKM F-3661D) с применением ультрафиолетового облучения. Штамм обладает способностью продуцировать комплекс высокоактивных карбогидраз, включающий целлюлазы, -глюканазы, ксиланазы, пектиназы, и маннаназы, что создает возможность получения намного более активного и полного комплекса ферментов, а также, при необходимости - отдельных индивидуальных ферментов (компонентов) комплекса. Для получения высокой продуктивности штамма не требуется применения сложных и дорогих питательных сред, могут использоваться питательные среды, традиционно применяемые в промышленных технологиях получения такого рода ферментных препаратов. Изобретение позволяет существенно увеличить эффективность и расширить спектр использования ферментных препаратов в различных областях биотехнологии и, особенно, в качестве кормовых добавок.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Способ получения олигосахаридов из галактоманнанов включает гидролиз водного раствора или суспензии с использованием ферментативно действующего агента из бактерий штамма Bacillus subtilis DSM 13182. Получают водный раствор смеси из галактоманнаноолигосахаридов со степенью полимеризации <15. Кроме того, предложен галактоманнаноолигосахарид, фермент, неочищенный экстракт, штамм Bacillus subtilis DSM 13182, лекарственное средство, пищевой продукт и вкусовой продукт. Предложенная группа изобретений позволяет получить продукт, используемый в пищевых продуктах и лекарственных средствах для увеличения поступления кальция в организм. 8 н. и 10 з.п. ф-лы, 10 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и кормопроизводству. Способ получения водной жидкости, содержащей фитазу, включающий культивирование в водной среде, содержащей источник углерода и азота, микроорганизма рода Aspergillus, трансформированного вектором экспрессии, содержащим ген фитазы указанного микроорганизма, соединенный с промоторной и/или сигнальной последовательностью гена амилоглюкозидазы, в условиях, позволяющих экспрессироваться рекомбинантной фитазе. Культуральную жидкость фильтруют, проводят катионообменную хроматографию, анионообменную хроматографию и ультрафильтрацию с получением водной жидкости, содержащей фитазу с активностью, по меньшей мере, 14000 ед/г. Эта водная жидкость с фитазной активностью применена для получения гранулированного материала, корма для животных, премикса или полуфабриката корма. Гранулированным материал или кормом стимулируют рост животного. 8 н. и 16 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ культивирования бактерий Serratia marcescens включает культивирование этих бактерий на питательной среде, содержащей дрожжи Saccharomyces cerevisiae 50-150 г/л, буферные соли 1,5 г/л и воду 1 л. Культивирование проводят при температуре 28-30°C и рН среды 8,0-8,4 с аэрацией в течение 3-5 суток. Изобретение позволяет упростить состав питательной среды, сократить продолжительность культивирования бактерий, повысить выход хитиназы, снизить стоимость среды для культивирования бактерий. 1 табл., 3 ил.