Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы, составы для них, способы получения подобных составов: ....с использованием многослойных сред – C12Q 1/08

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается способа быстрого выращивания, детекции и идентификации или подсчета микроколоний микроорганизмов ранней стадии. Описанный способ включает стадии: получение контейнера со средой с пористым элементом, расположенным сверху или под верхней поверхностью среды, причем среда имеет питательные вещества для быстрого роста микроколоний микроорганизмов, и причем пористый элемент имеет поры от 1000 до 10⁷ Да; вливание жидкого образца, не подвергнутого серийным разведениям, в контейнер в область выше пористого элемента; улавливание микроорганизмов в пористом элементе или на среде выше пористого элемента; инкубация контейнера на время, достаточное для быстрого роста микроколонии ранней стадии; перенос пористого элемента и любой среды выше него из контейнера во вторичную среду для оценки, детекции и идентификации микроорганизмов; и исследование микроколоний в отношении роста, детекции, идентификации или подсчета микроорганизмов, причем указанный способ выращивания, детекции и идентификации или подсчета микроорганизмов занимает не более чем приблизительно шесть часов. Представленное изобретение позволяет более быстро, эффективно и менее дорого идентифицировать общее количество жизнеспособных микроколоний микроорганизмов, их идентифицировать и дифференцировать, а также может быть использовано для идентификации антибиотикоустойчивых микроорганизмов. 6 з.п. ф-лы, 10 ил.

Изобретение относится к лабораторной диагностике заболевания иерсиниозом, вызываемым Yersinia enterocolitica. Для идентификации возбудителя иерсиниоза применяют кишечноиерсиниозный фаг ФК-100, который наносят в виде дорожки на двухслойный газон, нижний слой которого представляет собой агаровую среду (рН 7,1) с добавлением ампициллина в концентрации 50 мкг/мл, а верхний получают из исследуемого штамма, который выращивают на 1,5% агаре Хоттингера при 28°С в течение суток и засевают в 4 мл бульона Хоттингера, инкубируют при температуре 28°С до конечной концентрации n·10⁸ м.к./мл, после чего 0,3 мл полученной культуры смешивают с 4,5 мл расплавленного и охлажденного до 45°С 0,7% агара Хоттингера с 50 мкг/мл ампициллина и выливают вторым слоем на пластинки агара. Посев инкубируют при 28°С в течение 20-24 часов. Yersinia enterocolitica в исследуемой пробе идентифицируют от других видов иерсиний по наличию зоны фаголизиса на выросшей культуре. Способ обеспечивает 100%-ную эффективность идентификации. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для культивирования микроорганизмов в искусственных питательных двухфазных средах. Питательная среда содержит жидкую фазу, состав жидкой фазы определяется биологическими особенностями конкретного микроорганизма, и твердую фазу. Твердая фаза содержит коагулированную сыворотку и агарозу в заданном соотношении компонентов. Изобретение позволяет повысить достоверность оценки результатов роста и развития культуры микроорганизмов.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к медицинской микробиологии, и может быть использовано для выделения бруцеллезного микроба. Питательная среда содержит плотную и жидкую фазы. Плотная фаза содержит патоку рафинадную, натрия хлорид, натрий фосфорнокислый двузамещенный, дрожжевой экстракт, микробиологический агар и водопроводную воду в заданном соотношении. Жидкая фаза содержит питательный бульон для культивирования микроорганизмов сухой, лимоннокислый натрий, глюкозу и дистиллированную воду в заданном соотношении. Изобретение позволяет сократить сроки выделения бруцеллезного микроба.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для выявления антагонистических свойств по отношению к патогенным микобактериям. Способ предусматривает засев бактерий кишечной группы на нижний слой питательной среды, содержащей двузамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний, L-аспарагин, глицерин, лимонную кислоту, лимоннокислое аммиачное железо, гумивит, агар и дистиллированную воду, прогрев на водяной бане при температуре 100°С в течение 5-10 минут, скашивание при комнатной температуре, наслаивание на нижний слой питательной среды приведенного выше состава, засев верхнего слоя питательной среды культурой индикаторного штамма микобактерий с последующим культивированием, определение антагонистической активности по отношению количества колоний индикаторного штамма, выросших на плотном питательном агаре, к количеству колоний индикаторного штамма, выросших на двухслойной среде. Изобретение позволяет повысить эффективность способа. 3 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"2001,1(67):1-5. RIED G., COOK R.I., BRUCE A.W., Examination of strains of Lactobacillus for properties that may influence bacterial interference in the urinary tract. J. Uriol. 1978, 138(2), p.330-335. АЛЬТШУЛЛЕР М.Л. и др. Обнаружение штаммов - антагонистов у представителей рода Bacillus и Hafnia. - Микробиология, 1993, 6, с.22-23. ГАНИНА В.И., АНАНЬЕВА Н.В. и др. Результаты оценки анагонистической активности штаммов бифидобактерий, обитающих в кишечнике современных здоровых детей. Сборник материалов международной коференции. - М., 2004, с.22-23. ЕРМОЛЕНКО Е.И., СУВОРОВ А.И. Определение антагонистической активности лактобактерий. Сборник материалов международной коференции. - М., 2004, с.25-26. ЕРМОЛЕНКО Е.И., ИСАКОВ В.А. и др. Количественная оценка антагонистической активности лактобацилл. - Журнал микробиологии и эпидемиологии, 2004, 5, с.94-98.

Способ включает выращивание индикаторного штамма на плотной питательной среде и последующую оценку антагонистической активности. Исследуемый штамм выращивают совместно с микобактериальным штаммом на среде Сотона с последующим получением стерильного фильтрата культуральной жидкости. Фильтрат наслаивают на поверхность плотной питательной среды перед посевом индикаторного штамма. Антагонистическую активность оценивают по отношению количества колоний индикаторного штамма на плотной питательной среде к количеству колоний индикаторного штамма на плотной питательной среде с наслоенным стерильным фильтратом культуральной жидкости после совместного выращивания исследуемого и микобактериального штаммов. Способ позволяет выявить антагонистические свойства по отношению к патогенным бактериям у молочнокислых бактерий и бактерий группы кишечной палочки. 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для оценки антагонистической активности молочнокислых бактерий и бактерий кишечной группы к патогенным микобактериям. Способ предусматривает засев молочнокислых бактерий или бактерий кишечной группы на нижний слой питательной среды, представляющий собой мясопептонный агар, нанесение верхнего слоя питательной среды, содержащей калий фосфорнокислый двузамещенный, сернокислый магний, L-аспарагин, глицерин, лимонную кислоту, лимоннокислое аммиачное железо, гумивит, агар, водный раствор желтка куриного яйца и дистиллированную воду на нижний слой, засев верхнего слоя питательной среды культурой индикаторного штамма микобактерий и определение антагонистической активности, которую оценивают по количеству колониеобразующих единиц (КОЕ), ингибирующих рост 1-5×10 ³ КОЕ индикаторного штамма микобактерий в 1 мл суспензии. Изобретение позволяет определять антагонистическую активность молочнокислых бактерий и бактерий кишечной группы к патогенным микобактериям. 2 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"A.W., Examination of strains of Lactobacillus for properties that may influence bacterial interference in the urinary tract. J. Uriol. 1978, 138 (2), p.330-335. АЛЬТШУЛЛЕР М.Л. и др. Обнаружение штаммов-антагонистов у представителей рода Bacillus и Hafnia, Микробиология, 1993, 6, с.22-23. ГАНИНА В.И., АНАНЬЕВА Н.В. и др. Результаты оценки антагонистической активности штаммов бифидобактерий, обитающих в кишечнике современных здоровых детей. Сборник материалов международной конференции. - М.: 2004, с.22-23. ЕРМОЛЕНКО Е.И., СУВОРОВ А.И. Определение антагонистической активности лактобактерий. Сборник материалов международной конференции. - М.: 2004., с.25-26.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для микробиологического анализа крови при сепсисе и бактериемии. Питательная среда состоит из двух сред твердой и полужидкой. Твердая среда содержит агар, питательный бульон, панкреатический гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, глюкозу, трис (оксиметил) аминометан. Полужидкая - питательный бульон, панкреатический гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, глюкозу, натрия цитрат или натрия гепаринат, парааминобензойную кислоту, трис (оксиметил) аминометан, агар. Изобретение позволяет повысить чувствительность питательной среды и сократить сроки выявления возбудителя сепсиса и бактериемии. 1 табл.