Микроорганизмы: ..Streptomyces – C12R 1/465

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к новому, высокоэффективному способу получения такролимуса (FK-506) методом микробиологического синтеза. Способ предусматривает приготовление инокулята клеток Streptomyces sp. MT246 (ВКМ Ас-2618Д), приготовление питательной среды, содержащей один или более источников углерода, азота, ионов металлов в виде растворимых солей с дробной подачей источника углерода в течение продуктивной стадии. При этом в качестве дополнительного источника углерода питательная среда содержит рамнозу, а необходимого компонента питательной среды - MnSO₄ и сорбент из группы амберлитов XAD. Внесение инокулята клеток Streptomyces sp. MT246 (ВКМ Ас-2618Д) в питательную среду совместно с рамнозой и MnSO₄ в заданном соотношении и инкубирование при рН среды 7,0-7,5, температуре 25-35°C в течение 7-10 суток. Отделение осадка проводят центрифугированием. К полученному осадку добавляют этанол в заданном соотношении с последующей экстракцией такролимуса при 30° в течение 2 часов и центрифугированием с получением экстракта, содержащего такролимус. Изобретение позволяет повысить выход такролимуса до 980 мг/л. 8 з.п. ф-лы, 6 пр.

Проводят ферментацию питательной среды на основе гидролизатов кукурузного крахмала актиномицетом. Проводят ультрафильтрацию полученного фильтрата культуральной жидкости с активностью 4250±250 ИЕ/см³ через мембраны с отсечением 5 кДа. Концентрируют под вакуумом 0,082 МПА при температуре 25-30°C полученный фильтрат. Осветляют его при температуре 30-40°C. Снова проводят его ультрафильтрацию через мембрану с отсечением 1 кДа. Полученный ингибитор гликозидаз сушат и измельчают. Изобретение позволяет получить ингибитор гликозидаз с повышенной активностью 3500000±50000. 1 табл., 4 пр.

Для получения белка проводят культивирование бактериальной клетки-хозяина, содержащей рекомбинантную нуклеиновую кислоту, в среде, содержащей неочищенный глицерин в качестве источника углерода, и выделение белка, экспрессируемого клеткой. Неочищенный глицерин представляет собой побочный продукт производства биотоплива или мыла, который присутствует в среде в концентрации от 0,1% до 75% (об/об). Культивирование ведут в условиях замкнутого объема, подпитывания или непрерывной ферментации. Бактериальную клетку выбирают из Streptomyces lividans, Bacillus subtilis и Streptomyces rubiginosis. Изобретение обеспечивает повышение накопления биомассы клеток и продукцию белка в культуре. 10 з.п. ф-лы, 14 ил., 8 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Представлен способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли методом ферментативной конверсии L-лейцина или его соли в присутствии бактериальной диоксигеназы, выбранной из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Раскрыт способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли в содержащей L-лейцин или его соль среде в присутствии первой бактерии, трансформированной молекулой ДНК, кодирующей диоксигеназу, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Представлена бактерия-продуцент 4-гидрокси-L-лейцина или его соли, трансформированная молекулой ДНК, кодирующей бактериальную диоксигеназу, выбранную из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов, в среде, содержащей L-лейцин или его соль. Изобретение позволяет получить 4-гидрокси-L-лейцин или его соль с высокой степенью эффективности. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 24 ил., 5 табл., 11 пр.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Штамм Streptomyces cellulosae WH9 депонирован в CGMCC под номером NO.2167 и используют для получения микробного удобрения. Штамм Aspergillus versicolor WH13 депонирован в CGMCC под номером NO.2171 и используют для получения микробного удобрения. Микробное фосфатное удобрение содержит продукт ферментации микробной композиции, состоящей из следующих четырех микроорганизмов: штамма Bacillus subtilis WH2 (CGMCC NO.0395.2), штамма Bacillus licheniformis WH4 (CGMCC NO.0395.4), штамма Streptomyces cellulosae WH9 и штамма Aspergillus versicolor WH13. Также предоставлен способ изготовления указанного микробного фосфатного удобрения, где производство указанного микробного фосфатного удобрения может включать использование измельченной фосфатной породы, содержащей 8%-12% Р₂ О₅. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 16 табл.

Штамм Streptomyces caespitosus 3810/OE - продуцент митомицина С получен из исходного штамма, выделенного из почвы, путем обработки химическими мутагенами с последующей ступенчатой селекцией и депонирован в Коллекции культур микроорганизмов ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф.Гаузе РАМН под номером ИНА 01082. Для продуцирования митомицина С штамм выращивают на посевной среде следующего состава (%): глюкоза - 0,6-1,4, крахмал - 0,6-1,4, соевая мука - 2-5, кукурузный экстракт - 0,6-1,0, KH₂PO₄ - 0,01-0,03, мел - 0,05-0,12, (NH ₄)₂SO₄ - 0,06-0,14, вода водопроводная, рН до стерилизации 6,8-7,2 и затем передают на ферментационную среду следующего состава (%): крахмал - 0,6-1,4, сахароза - 1-3, соевая мука - 2-4, кукурузный экстракт - 0,6-1,0, CoCl₂ ·6Н₂О - 0,007-0,012, KH₂PO₄ - 0,02, мел - 0,05-0,12, (NH₄)₂SO ₄ - 0,06-0,14, FeSO₄·7H₂O - 0,01-0,02, MgSO₄·7H₂O - 0,01-0,03, NaCl - 0,2-0,6, вода водопроводная, рН до стерилизации 6,8-7,2. Штамм выращивают в условиях аэрирования в течение 100-120 ч, затем мицелий удаляют центрифугированием или фильтрацией, а надосадочную жидкость, содержащую целевой продукт, экстрагируют смесью ацетонитрила и метилового или этилового спирта. Уровень продуктивности митомицина С штаммом составляет от 85 до 100 мкг/мл. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.

В соответствующей питательной среде культивируют штамм К04-0144, относящийся к роду Streptomyces, обладающий способностью продуцировать группу соединений К04-0144, причем выделенные из него соединения К04-0144А, К04-0144В и К04-0144С обладают сильной антибактериальной активностью против грам-положительных бактерий, включая метициллин-устойчивых Staphylococcus aureus (MRSA), а соединение K04-0144D обладает усиливающей анти-MRSA активностью в комбинации с -лактамовыми антибиотиками. Для выделенных соединений установлены химические структуры (I-IV), представленные в формуле изобретения. Описан выделенный из почвы штамм Streptomyces sp. K04-0144 NITE BP-107 - продуцент указанной группы соединений. Соединение K04-0144D, обладающее способностью усиливать действие -лактамовых антибиотиков в комбинации с ними, применимо в качестве терапевтического средства для лечения инфекционных заболеваний, вызванных метициллин-устойчивыми Staphylococcus aureus (MRSA) и бактериями, обладающими мультилекарственной устойчивостью, в т.ч. устойчивых к -лактамовым антибиотикам. Изобретение позволяет получить новые терапевтические препараты против MRSA- инфекций и инфекционных заболеваний, вызванных бактериями с мультилекарственной устойчивостью. 3 н.п. ф-лы, 16 ил., 3 табл.

Изобретение относится к новому штамму-продуценту антибиотика блеомицетина и его использованию в биосинтезе противоопухолевого антибиотика блеомицетина гидрохлорида, используемого при лечении плоскоклеточного рака. Штамм-продуцент Streptomyces griseocarneus subsp. bleomycini ВКПМ-S1086 получен в результате индуцированного мутагенеза с последующим отбором вариантов на селективных средах, содержащих стрептомицин и ванкомицин. Полученный штамм 10007 депонирован в ВКПМ под номером S1086 и продуцирует блеомицетин в 1,8 раз больше, чем исходный штамм. Антибиотик блеомицетин получают из культуральной жидкости продуцента с использованием карбоксильного катионита КБ-2 и очисткой на нейтральном гидрофобном сорбенте "Стиросорб MN-200». Фильтрация раствора антибиотика на колонке с сорбентом "Стиросорб MN-200» позволяет сорбировать примеси и не сорбировать антибиотик, повышает до 70% выход антибиотика с содержанием активного вещества до 97%. Использование на этой стадии воды позволяет получать высокоочищенные бессолевые препараты блеомицетина гидрохлорида. Использование изобретения позволяет повысить выход антибиотика до 70% с содержанием активного вещества до 97%. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к новому штамму - продуценту антибиотика блеомицина и его использованию в биосинтезе противоопухолевого антибиотика блеомицина А₂, эффективного при лечении плоскоклеточного рака и ряда других типов опухолей. Штамм-продуцент Streptomyces griseocarneus subsp. bleomycini ВКПМ-S887 получен в результате многоступенчатого мутагенного воздействия метилнитрозогуанидина, УФ-излучения и гамма-лучей ⁶⁰Со на исходный штамм № 1129 с последующим отбором мутантов на средах, содержащих аминоэтилцистеин, карбамоилцистеин, канаванин, метилтреонин в качестве селективных агентов. Полученный штамм № 7-99 депонирован в ВКПМ под номером S887. Штамм по сравнению с исходным штаммом обладает более чем в 10 раз повышенной продуктивностью. Продуцируемый штаммом продукт представляет собой однокомпонентный антибиотик - содержание антибиотического комплекса в культуральной жидкости штамма по изобретению составляет 140 мкг монокомпонентного блеомицина А₂ в 1 мл. Чистота целевого продукта достигается хроматографией элюата с КБ-2 на сорбенте "Стиросорб MN-200», на котором сорбируются только примеси. Высокая активность нового штамма ВКПМ-S887 определяет перспективность его использования для промышленного производства блеомицина A₂. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.

Штамм актиномицета Streptomyces lucensis ВКПМ Ac-1743 выделен из штамма Streptomyces lucensis Arcamone et al. 1957 BKM Ac-1737 путем проведения ступенчатого отбора. Штамм характеризуется высокими ингибиторными активностями в отношении гликозидаз различного происхождения. Общая ингибиторная активность в отношении панкреатической свиной -амилазы составляет 2000-3700 ИЕ/см³, -амилазы Bacillus subtilis - 220-400 ИЕ/см³, -амилазы солода - 40-70 ИЕ/см³, комплекса ферментов - -амилаза, глюкоамилаза, мальтаза, декстриназа Aspergillus niger - 1000-1300 ИЕ/см³, глюкоамилазы Aspergillus awamori - 1000-1500 ИЕ/см³.

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм актиномицета Streptomyces violaceus ВКПМ Ас-1734 - продуцент ингибитора гликозидаз может быть использован в качестве продуцента ингибитора гликозидаз в микробиологическом производстве ингибитора гликозидаз для пищевой, химико-фармацевтической промышленности, биотехнологии и биохимии. Изобретение позволяет повысить выход ингибитора гликозидаз.

Изобретение относится к очистке сточных вод предприятий пищевой промышленности от ионов тяжелых металлов. Способ предусматривает подготовку питательной среды, культивирование штамма Streptomyces chromogenes s.g. 0832, внесение биомассы вместе с культуральной жидкостью в сточную воду в соотношении к сточной воде 1:5,0, перемешивание, седиментацию. Питательная среда содержит крахмал, соевую муку, измельченное перо, сульфат цинка, сульфат железа (II), карбонат кальция, гидроортофосфат калия, воду. Начальное значение рН среды поддерживают 11,0±0,2. Питательную среду засевают водно-споровой суспензией штамма Streptomyces chromogenes s.g. 0832 в количестве 1% к объему среды, культивируют при аэрации в течение 72 ч при 28±1°С. Способ позволяет наиболее полно удалить из сточных вод предприятий пищевой промышленности ионы тяжелых металлов, обеспечив высокую степень извлечения за короткий промежуток времени. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано при производстве антибиотиков авермектинов. Изобретение относится к полинуклеотиду, содержащему нуклеотидные последовательности, кодирующие продукт гена aveC, молекулы которого можно использовать для изменения соотношения количества авермектинов класса 2:1, продуцируемых в ферментационных культурах S. avermitilis. Нуклеотидная последовательность полинуклеотида по существу аналогична последовательности аллеля aveC S. avermitilis, последовательности плазмиды pSE186 (ATCC 209604), кодирующей продукт гена AveC S. avermitilis, нуклеотидной последовательности (НП) открытой рамки считывания (ORF) aveC, но при этом НП содержит мутации, кодирующие комбинацию замен аминокислот, благодаря чему штамм S. avermitilis ATCC 53692, в клетках которого инактивирован аллель aveC дикого типа, способен продуцировать авермектины класса 2:1 в соотношении 0,35:1 или меньше (когда авермектины являются циклогексилом В2 и циклогексилом В1 соответственно). Изобретение относится также к векторам, клеткам-хозяевам и мутантным штаммам S. avermitilis, в которых ген aveC инактивирован или мутирован с возможностью изменения соотношения количества авермектинов класса 2:1. Изобретение касается способа получения мутированного штамма (комбинации замен аминокислот приводятся в формуле) и способа получения авермектинов класса 2:1 в уменьшенном соотношении, а также композиции, полученной указанным способом. Использование изобретения позволяет получить композицию авермектинов класса 2:1 со сниженным количеством в смеси авермектина В2. 7 н. и 10 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл.