средство для стимуляции лейкопоэза

Формула изобретения

Применение лития сукцината в качестве средства, стимулирующего лейкопоэз.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно средствам коррекции лейкопенических состояний, вызванных действием ионизирующего облучения, цитостатиков и др. факторов.

Известны препараты лития (лития карбонат, хлорид), применяемые в клинике для лечения лейкопении (В. А. Алмазов и др. 1981), а также в эксперименте при лучевой болезни (Б. Б. Мороз и др. 1986, 1988).

Недостатками этих препаратов является следующее:

сравнительно высокая токсичность (ЛД₅₀ лития карбоната около 200 мг/кг) и возможность иммунодепрессивного влияния;

неудобство их практического применения вследствие нерастворимости лития карбоната в воде и гигроскопичности, неустойчивости лития хлорида;

отсутствие в их составе органического компонента, играющего роль носителя катиона лития и одновременно обладающего синергическими свойствами.

Целью изобретения является усиление лейкопоэза и сокращение сроков восстановления числа лейкоцитов крови при лучевой болезни.

Цель достигается тем, что при депрессии лейкопоэза применяют лития сукцинат.

В литературе имеются ограниченные сведения о физико-химических свойствах лития сукцината, но совершенно отсутствуют данные о его биологической активности и также отсутствует его промышленный выпуск.

В лабораторных условиях лития сукцинат получают следующим образом.

Пример. 45,0 г янтарной кислоты растворяют в 150 мл дистиллированной воды при подогревании в водяной бане (60 70^o). К теплому раствору (pН 1 - 1,5) по частям добавляют точно рассчитанное количество карбоната лития, каждый раз добиваясь полного его растворения и прекращения выделений СО. Операцию повторяют до установления pН раствора в пределах 7,0 7,20 по индикаторной бумаге, на что расходуется 27 27,5 г карбоната лития. Раствор фильтруют, охлаждают до 18 20 и по частям добавляют 2,5 3 объема ацетона для концентрирования и после тщательного перемешивания целевой продукт кристаллизуют в термостате при 35 55^oC в течение 18 20 ч. Водно-ацетоновую фазу сливают, осадок 3 раза промывают ацетоном и досушивают в термостате при той же температуре. Выход 75 80 от расчетного количества.

Лития сукцинат получается в виде белого аморфного порошка, без запаха. Балловая формула С₄Н₄О₄Li₂, молекулярная масса 130.

Данные анализа:

Найдено, мас. C 37,541; О 49,2; Н 3,378; Li 9,88.

Вычислено, мас. С 37,0; О 49,2; Н 3,0; Li 10,6.

Разлагается при нагревании. Начало разложения при 500^oC.

В ИК-спектре соединения имеются полосы поглощения, относящиеся к валентным и деформационным колебаниям СН группы (2940, 2985 см^-1, 1465 см^-1) и асимметричным и валентным колебаниям -СОО и СН-СОО (1560 1600 см^-1, 1400 1445 1470 см^-1). Соединение в твердом виде устойчиво при длительном хранении.

Лития сукцинат хорошо растворим в воде 20 22 при 15 20^oC. Нерастворим в эфире, хлороформе, спирте.

Водные растворы имеют нейтральную реакцию, устойчивы и сохраняют биологическую активность при термической стерилизации.

Исследование биологической активности лития сукцината.

1. В опытах на б/п белых мышах определяют острую токсичность препарата путем однократного в/бр. введения нескольких возрастающих доз и по количеству зарегистрированных смертельных случаев рассчитывают (Беленький М. Л. 1963) ЛД₅₀. Для сукцината лития ЛД₅₀ 820 мг/кг (713,0 943,0).

2. Изучение стимулирующего эффекта сукцината лития на миелопоэз проводят следующим образом. Белых б/п крыс самок (n 90) весом 115 150 г подвергают общему рентгеновскому облучению на установке РУМ-17 в дозе 5,5 Гp (доза 116,70 р/мин, мощность 200 кВ, сила тока 16 мА). Затем крыс делят на 3 группы по 30 в каждой.

Животным I серии (контроль облучения) спустя 16 ч после облучения вводят 0,9 раствор хлорида натрия по 0,2 мл. в /бр. 1 раз в сутки в течение 7 дней.

Животным II серии в том же режиме вводят водный раствор сукцината лития из расчета 50 мг/кг (или 6 от ЛД₅₀).

Животным III серии вводят раствор хлорида лития также из расчета 50 мг/кг (прототип).

В качестве интактной группы используют здоровых крыс (n 7), содержащихся в одинаковых условиях (биологический контроль). Спустя 7, 15 и 25 дней после рентгенооблучения из каждых первых трех серий забивают по 10 крыс путем быстрой декапитации.

Подсчитывают количество эритроцитов, лейкоцитов в периферической крови и число ядросодержащих клеток костного мозга бедренной кости общепринятыми методами. Полученные результаты свидетельствуют (в расчете на литий во II серии 5,35 мг/кг, в III серии 8,10 мг/кг).

а) Рентгенооблучение крыс в дозе 5,5 Гр приводит к развитию кроветворного синдрома средней тяжести, для которого характерно снижение количества эритроцитов, лейкоцитов крови и микрокариоцитов, что отмечается у всех животных контрольной серии в течение 15 дней, причем клеточность костного мозга остается сравнительно низкой и к 25-му дню наблюдения.

б) Введение лития сукцината (II серия) в первые 7 дней предупреждает уменьшение числа миелокариоцитов, но не предотвращает развитие лейкопении. Однако к 15 суткам у животных данной серии количество лейкоцитов и миелокариоцитов нарастает более интенсивно и достигает больших значений (121 и 116 соответственно), чем в интактной и в группе животных I серии.

в) В случае введения хлорида лития в первые 7 дней отмечается лейкопения и снижение числа миелокариоцитов. К 15 суткам количество ядросодержащих клеток костного мозга достигает уровня интактных животных, но заметно меньше, чем таковое во II серии. Явление лейкопении все еще сохраняется, что нивелируется только к 25 суткам.

Таким образом, можно отметить, что лития сукцинат сочетает в себе положительные эффекты обоих действующих начал (катиона лития, аниона янтарной кислоты) и будучи введенным в организм даже в меньших количествах (в расчете на литий на 34), чем хлорид лития, обеспечивает более быстрое восстановление костно-мозгового кроветворения и клеточного состава периферической крови при лучевой болезни животных.