Соединения, содержащие два или более мононуклеотидных остатка, имеющих отдельные фосфатные или полифосфатные группы, связанные сахаридными радикалами нуклеозидных групп, например нуклеиновые кислоты: .с рибозилом в качестве сахаридного радикала – C07H 21/02

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения свободного от белка биологически активного препарата высокополимерной РНК из сухих пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Способ включает суспендирование дрожжей в течение 3 мин в водном растворе олеиновой кислоты, с концентрацией олеиновой кислоты 15 г/л, оттитрованном 2,5 М NaOH, при температуре суспензии не ниже 98°C. Кипятят суспензию в течение 40 мин при 98-100°C при периодическом перемешивании. Через 10, 20 и 30 мин после суспендирования последней порции дрожжей в кипящую суспензию добавляют 2,5 М NaOH. Добавляют по окончании экстракции в суспензию кипяченую воду, перемешивают, отстаивают суспензию при комнатной температуре в течение 22 ч. Разливают слитый с помощью сифона супернатант в виалы с последующим замораживанием и лиофилизацией. Предложенное изобретение позволяет упростить получение препарата высокополимерной РНК из сухих пекарских дрожжей. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу и диагностическому набору для диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя коклюша. Способ предусматривает осуществление полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и регистрацию продуктов амплификации с помощью гибридизации с флюоресцентными специфическими ДНК-зондами. Осуществляют полимеразную цепную реакцию с использованием ПЦР реакционной смеси, которая включает две пары праймеров, подходящих для амплификации фрагментов последовательностей IS481 и IS 1002, пару праймеров для амплификации последовательности, сформированной в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS В.pertussis, два флуоресцентных зонда, специфичных к последовательностям IS481, IS 1002 и последовательностям, сформированным в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS B.pertussis. Определяют количество бактериальных геномов в образце по наличию последовательностей IS481 и IS 1002 в хромосоме бактерий B.pertussis и определяют количество авирулентных мутантов возбудителя по наличию инсерции IS481 или IS 1002 в cctagg сайте оперона bvgAS B.pertussis. Диагностический набор содержит ПЦР-реакционную смесь, включающую две пары праймеров, подходящих для амплификации фрагментов последовательностей IS481 и IS 1002, пару праймеров для амплификации последовательности, сформированной в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS, два флуоресцентных зонда, специфичных к последовательностям IS481, IS 1002 и последовательностям, сформированным в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvg. Предложенное изобретение позволяет диагностировать коклюш и определять авирулентные мутанты возбудителя коклюша. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к биохимии и представляет собой способ ослабления экспрессии мРНК TNFR1 у субъекта. Способ осуществляется путем введения композиции, содержащей эффективное количество интерферирующей РНК длиной 19-27 нуклеотидов, и фармацевтически приемлемый носитель, где интерферирующая РНК содержит смысловую нуклеотидную цепь, антисмысловую нуклеотидную цепь, в которой участок комплементарности составляет, по меньшей мере, 19 непрерывных нуклеотидов. Также предложены способы лечения связанного с TNF- состояния у нуждающегося в этом субъекта и композиция для лечения связанного с TNF- глазного состояния. Изобретение может эффективно применяться при лечении пациентов, имеющих связанное с TNF- состояние или имеющих риск развития подобного состояния. 4 н. и 19 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 1 пр.

Группа изобретений относится к композиции полинуклеотидного адъюванта (PICKCa) и способам его применения для проявления иммунного ответа. Полинуклеотидный адъювант включает в себя полирибоинозиновую-полирибоцитидиловую кислоту (PIC), где молекулы PIC гетерогенны по молекулярному весу и имеют молекулярный вес от 66000 до 1200000 дальтон, по меньшей мере, один антибиотик и один положительный ион. Изобретение также относится к иммуногенной композиции, включающей полинуклеотидный адъювант вместе с другими иммуногенными композициями, такими как антиген, выбранный из вирусных, бактериальных, грибковых, паразитарных и/или раковых антигенов; также к способам применения таких адъювантных композиций для генерирования иммунного ответа, иммунного ответа слизистой на антигенное соединение. Группа изобретений обеспечивает выработку в организме хозяина специфического для заболевания иммунного ответа. 12 н. и 10 з.п. ф-лы, 38 ил., 28 табл., 7 пр.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. iPHK-агенты содержат смысловую цепь, где указанная смысловая цепь содержит во внутренней области 15-30 последовательных нуклеотидов, которые отличаются от нуклеотидов последовательности SEQ ID NO:427 не более чем на один нуклеотид, и антисмысловую цепь, где указанная антисмысловая цепь содержит во внутренней области 15-30 последовательных нуклеотидов, которые отличаются от нуклеотидов последовательности SEQ ID NO:428 не более чем на один нуклеотид. iPHK-агенты могут содержать модификации, которые повышают их стабильность в биологическом образце, молекулу холестерина, неприродное нуклеотидное основание. iPHK-агенты применяют для ингибирования экспрессии гена РВ2 вируса гриппа А. 11 н. и 62 з.п. ф-лы, 9 ил., 6 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ получения высокополимерной дрожжевой РНК из отработанных пивных дрожжей. Сконцентрированные центрифугированием отработанные пивные дрожжи суспендируют в водном растворе олеиновой кислоты, оттитрованной щелочью до рН 7-8. Суспензию выдерживают при 98-102°С в течение 40-60 мин. Отстаивают горячий лизат в течение 20-24 ч при комнатной температуре. Надосадочную жидкость сливают с помощью сифона. Затем к слитой жидкости добавляют NaCl до концентрации 2-3 М. Суспензию выдерживают 20-96 ч при комнатной температуре. Затем ее центрифугируют без охлаждения на низкоскоростной центрифуге. Полученный шрот промывают последовательно 2-3 М раствором NaCl и 92-96%-ным этанолом путем его ресуспендирования при комнатной температуре и низкоскоростного центрифугирования. Изобретение способствует расширению сырьевой базы и упрощению технологии производства высокополимерной РНК.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен препарат высокополимерной РНК из пекарских дрожжей. Высокополимерную РНК выделяют с помощью ДДС-Na. Высаливают РНК хлористым натрием. Затем осуществляют промывки при низкоскоростном центрифугировании при 1000-3000 g в течение 10 мин без охлаждения. Полученный препарат освобожден от примесных ассоциатов РНК с белками и полисахаридами и узконаправленно стимулирует гемопоэз. 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделению физиологически активных соединений. Предложенный способ получения высокополимерной РНК из дрожжей включает суспендирование дрожжей в водном 1-2%-ном растворе олеиновой кислоты, оттитрованной щелочью до pH 7-8, с последующим продолжительным кипячением суспензии. Далее отстаивают горячий лизат в течение 22 ч при комнатной температуре. После чего осаждают высокополимерную РНК из супернатанта хлористым натрием и промывают полученный шрот, содержащий высокополимерную РНК, последовательно 2 порциями 3 М раствора хлористого натрия и 5 порциями 94% этанола путем его ресуспендирования при комнатной температуре и низкоскоростного центрифугирования. Предложенное изобретение позволяет получить целевой продукт - высокополимерную РНК.

Изобретение относится к способу получения солей 5'-трифосфатов природных и модифицированных дезокси- и рибоолигонуклеотидов, заключающемуся в том, что исходный реагент - защищенный природный или модифицированный олигонуклеотид, дезокси- или риборяда, в виде 0,1-0,05 М раствора, монофосфорилируют в пиридине 2-3-кратным избытком хлорокиси фосфора в течение 10-15 минут, далее полученное активированное производное олигонуклеотида обрабатывают 10-15-кратным избытком раствора бис-трибутиламмонийной соли пирофосфата в ацетонитриле и 20-кратным избытком третичного амина и выдерживают реакционную смесь в течение 15-30 минут с последующим разложением промежуточного триметафосфатного производного олигонуклеотида триэтиламмонийбикарбонатным буфером, очисткой целевого продукта с помощью обращенно-фазовой хроматографии (ОФХ), удалением защитных групп с функциональных групп олигонуклеотида и повторной очисткой целевого продукта с помощью ОФХ. Выходы целевых продуктов после очистки составляют 45-92%. Чистота полученных соединений более 95% по данным ВЭЖХ и ЯМР-спектроскопии. Данные соединения могут быть использованы в молекулярно-биологических и генно-инженерных исследованиях. 1 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к способу получения солей 5'-трифосфатов дезоксирибо- и рибоолигонуклеотидов общей формулы, указанной в описании. Исходный реагент тетраалкиламмониевую или триалкиламмониевую соль 5'-монофосфата дезокси- или рибоолигонуклеотида в виде 0,1-0,5 М раствора активируют в среде растворителя, представляющего смесь диметилсульфоксида и диметилформамида в соотношении 2:1, пяти-пятнадцатикратным избытком окислительно-восстановительной смеси трифенилфосфина и дипиридилдисульфида, взятых в соотношении 1:1, в присутствии 50-80 кратного избытка 1-метилимидазола или N,N-диметиламинопиридина в течение 5-10 минут, а далее добавляют 10-20 кратный избыток раствора бис-трибутиламмонийной соли пирофосфата в ацетонитриле и выдерживают реакционную смесь в течение 15-30 минут с последующим выделением и очисткой целевого продукта. Способ обеспечивает повышение выхода целевых продуктов, сокращение избытка используемых реагентов и объемов растворителей. 1 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению моноклональных антител, и может быть использовано в медицинских и диагностических целях. С помощью гибридомной технологии получено моноклональное антитело, которое селективно связывается с TRAIL-рецептором DR5 и не связывается с TRAIL-рецептором DR4, DcR1 или DcR2. Антитело выявили при тестировании в системах in vitro - по способности индуцировать в растворимой форме при концентрациях менее 1 мкг/мл, гибель клеток-мишеней, экспрессирующих DR5, и in vivo - по способности проявлять туморицидную активность в отношении опухолевых клеток, экспрессирующих DR5. Моноклональное антитело воспроизводят путем трансгенных технологий, включающих культивирование рекомбинантных штаммов-продуцентов Е.coli. Антитело в терапевтических количествах используют в терапии воспалительных, аутоиммунных и связанных с апоптозом заболеваний, а также в комплексном лечении онкологических больных. Полученное моноклональное антитело в концентрациях менее 1 мкг/мл позволяет селективно индуцировать гибель или ингибировать пролиферацию клеток-мишеней, экспрессирующих DR5, 43 н. и 72 з.п. ф-лы, 18 ил., 4 табл.

V-D-J ОЛИГОНУКЛЕОТИД Т-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА, ПАРА ПРАЙМЕРОВ, ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЙ ЗОНД, СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ КЛОНА MBP83-99V13.1 Т-КЛЕТОК, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ МОТИВ LGRAGLTY Т-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА, НАБОР, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ И СПОСОБ ЕГО МОНИТОРИНГА

Изобретение относится к генной инженерии, конкретно к последовательности Т-клеточного рецептора, обнаруженного у страдающих расширенным склерозом пациентов, и может быть использовано в диагностических и лечебных целях. Получают олигонуклеотид, включающий последовательность, которая представляет собой или выведена из 5'-CTAGGGCGGGCGGGACTCACCTAC-3' или нуклеотидной последовательности, полностью комплементарной ей. Олигонуклеотид совместно с нуклеиновой кислотой, включающей примерно 15-30 нуклеотидов, которая не содержит последовательность олигонуклеотида и присутствует в области от V до J гена V13.1 в V13.1-подгруппе Т-клеток, причем последовательности олигонуклеотида и нуклеиновой кислоты не присутствуют на одной и той же цепи пары последовательностей гена V13.1 применяют для амплификации части гена V13.1. В способе обнаружения мотива LGRAGLTY, присутствующего в Т-клеточных рецепторах V13.1-подгруппы Т-клеток, используют олигонуклеотид в сочетании с частицей для мечения. При обнаружении мотива LGRAGLTY осуществляют наблюдение за развитием и проводят лечение путем введения пептида, включающего мотив LGRAGLTY. Изобретение позволяет упрощенным методом обнаружить мотив LGRAGLTY в Т-клеточных рецепторах у пациента, страдающего рассеянным склерозом, и облегчить лечение пациента. 7 с. и 14 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для выделения белков с нужными свойствами из крупных пулов и нуклеиновых кислот (НК). Изобретение предусматривает получение гибридов "РНК-белок", которое включает стадию посттрансляционного инкубирования с высокой концентрацией одновалентного катиона. В качестве одновалентного катиона используют Na⁺, K⁺ или NH⁺₄ в концентрации от 125 мМ до 1,5 М. Способ предусматривает также использование и/или двухвалентного или более высоковалентного катиона, например Mg⁺², в концентрации от 25 мМ до 200 мМ. Способ позволяет получить библиотеку белков. Анлогичный способ используют для получения библиотеки ДНК, который дополнительно включает стадию генерирования ДНК-молекулы из каждой РНК-части гибридов. Изобретение также раскрывает способ отбора нужного белка и НК из полученных библиотек белков и НК, включающий получение и отбор нужного гибрида "РНК-белок" с последующим отбором нужного белка и НК, кодирующего нужный белок. Использование изобретения позволяет облегчить выделение белков с нужными свойствами, а также решить проблему выделения и амплификации последовательности белка. 3 н. и 51 з.п. ф-лы, 38 ил., 5 табл.

В настоящем изобретении предлагается полинуклеотид со средней длиной цепи от 0,1 до 1 тыс. оснований, в котором доля 2’-5’ фосфодиэфирных связей составляет от 0,1 до 3% от общего числа фосфодиэфирных связей, или его соль. Полинуклеотид представляет собой полиинозиновую кислоту (поли(I)), полицитидиловую кислоту (поли(С)), полиадениловую кислоту (поли(А)) или полиуридиловую кислоту (поли(U)). Способ получения полинуклеотида включает гидролиз в растворе при pH от 7 до 10 и температуре от 20 до 110С или обработку фосфодиэстеразой при pH от 4 до 9 и температуре от 20 до 60С. Также изобретение относится к фармацевтической композиции, представляющей собой интерферон-индуцирующий агент, иммуноактивирующий агент и др., включающей указанный полинуклеотид. 5 с. и 3 з.п. ф-лы, 8 табл.