Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ...Salmonella (G) – C07K 14/255

Изобретение относится к области биохимии. Готовят биомассу грамотрицательных бактерий Salmonella typhi семейства Enterobacteriacea. Выделяют пептидогликан клеточной стенки (ПКС) бактерий с помощью экстракции биомассы 45% водным фенолом при температуре 70-90°С или водными растворами ионных или неионных детергентов при температуре 37-100°С. Проводят препаративный ферментативный гидролиз для расщепления нерастворимого ПКС с применением лизоцима при рН 4,5-8,9 и температуре 10-37°С. Одновременно удаляют фармакологически приемлемую смесь веществ из реакционной смеси диализом с применением полупроницаемых мембран для ультрафильтрации с размером отсечки до 5 кДа. Проводят выделение смеси веществ также с помощью колоночной гель-проникающей хроматографии, в частности препаративной гель-хроматографии на колонках с Сефадексом или TSK-гелем. Способ позволяет получить фармакологически-приемлемую смесь веществ, включающую следующие компоненты: -N-ацетил-D-глюкозаминил-(1 4)-N-ацетил-D-мурамоил-(L-аланил-D-изоглютаминил-мезо-диаминопимелиновая кислота) (ГМтри);

-N-ацетил-D-глюкозаминил-(1 4)-N-ацетил-D-мурамоил-(L-аланил-D-изоглютаминил-мезо-диаминопимелоил-D-аланин) (ГМтетра); и

димер ГМтетра (диГМтетра), в котором связь между мономерными остатками ГМтетра осуществляется за счет карбоксильной группы терминального D-аланина одного остатка ГМтетра и -аминогруппы мезо-диаминопимелиновой кислоты другого остатка ГМтетра, причем связанные между собой тетрапептидные остатки расположены в разных полисахаридных цепях. Выход целевого продукта составляет 320 мг. 3 з.п. ф-лы, 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к генетической инженерии, в частности к идентификации генов, участвующих в адаптации организма в среде его обитания, и может быть использовано для создания рекомбинантной бактерии с пониженной адаптацией к конкретной окружающей среде. Инактивация определенной последовательности VGC2 ДНК Salmonella typhimurium, которая расположена между генами ydhE и pykF, или ее части, состоящей, по меньшей мере, из 50 нуклеотидов, или варианта указанной ДНК с, по крайней мере, 85% идентичностью, представляющего собой VGC2 ДНК любого из микроорганизмов Salmonella aberdeen, Salmonella gallinarum, Salmonella cubana и Salmonella typhi, позволяет получить микроорганизм с пониженной способностью к адаптации к конкретным условиям окружающей среды. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 12 ил.

Изобретение относится к генетической инженерии, а в частности способу идентификации генов, участвующих в адаптации организма в среде его обитания. Предложен способ идентификации микроорганизма с пониженной адаптацией к конкретной окружающей среде. Способ предусматривает получение множества микроорганизмов, каждый из которых независимо мутирован инсерционной инактивацией гена нуклеиновой кислотой, содержащей уникальную маркерную последовательность, так, что каждый мутант содержит различные маркерные последовательности, или клонов указанного микроорганизма, стадия (1). Индивидуально хранение образца каждого мутанта, полученного на стадии (1), и индивидуально накопленной нуклеиновой кислоты, содержащей уникальную маркерную последовательность из каждого индивидуального мутанта, стадия (2). Введение множества мутантов, полученных на стадии (1), в указанную конкретную окружающую среду и обеспечение тем микроорганизмам, которые способны к этому, возможности расти в указанной окружающей среде, стадия (3). Извлечение микроорганизмов из указанной окружающей среды или ее выбранной части и выделение нуклеиновой кислоты из этих микроорганизмов, стадия (4). Сравнение любых маркерных последовательностей в нуклеиновой кислоте, выделенной на стадии (4), с уникальной маркерной последовательностью каждого индивидуального мутанта, накопленного на стадии (2), стадия (5). Отбор индивидуального мутанта, который не содержит какой-либо из маркерных последовательностей, выделенных на стадии (4), стадия (6). Предложены также ДНК (варианты), ответственные за снижение адаптации микроорганизма к окружающей среде, выделенные из генома Salmonella, ген вирулентности, содержащий эту ДНК, и полипептид, кодируемый этим геном. Кроме того, предложен способ определения соединения, снижающего адаптацию микроорганизма к окружающей среде. Предложенный способ предусматривает отбор такого соединения, которое препятствует функционированию гена, содержащего ДНК, ответственную за снижение адаптации микроорганизма к окружающей среде. Также предложена антисмысловая нуклеиновая кислота, полученная вышеуказанным способом. Предложенная антисмысловая нуклеиновая кислота используется в способе лечения хозяина, инфицированного или чувствительного к инфицированию микроорганизмом, и входит в фармацевтическую композицию, подавляющую патогенный микроорганизм. 10 н. и 50 з.п.ф-лы, 14 ил., 2 табл.