Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ....гранулоцитов ФСК, гранулоцит-макрофага ФСК – C07K 14/535

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к стимуляции выработки гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) клетками костного мозга, и может быть использовано в медицине. Прилипающую фракцию миелокариоцитов культивируют в питательной среде с добавлением стимулятора - ингибитора протеинкиназы p38. Изобретение позволяет повысить выработку Г-КСФ клетками прилипающей фракции миелокариоцитов. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой онколитический аденовирусный вектор, клетку и фармацевтическую композицию, содержащую указанный вектор, а также применение указанных векторов в производстве лекарственного средства для лечения рака у субъекта и к способу лечения рака у субъекта. Предложенное изобретение может быть использовано при лечении рака. Онколитический аденовирусный вектор содержит остов нуклеиновой кислоты аденовируса 5-го серотипа (Ad5), делецию в 24 нуклеотида, соответствующих аминокислотам 122-129 в E1A константной области 2, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую человеческий колониестимулирующий фактор гранулоцитов-макрофагов (GM-CSF) на месте удаленного gp19k/6.7K в участке E3, и при необходимости капсидную модификацию. Предложенное изобретение позволяет повысить опухолеспецифический иммунный ответ у субъекта. 9 н. и 31 з.п. ф-лы, 36 ил., 10 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ получения, выделения и очистки рчГ-КСФ. Осуществляют получение клеток рекомбинантного штамма-продуцента, а затем концентрирование культуральной жидкости. Разрушают бактериальные клетки при выделении тел включения двукратной обработкой высоким давлением. Удаляют примесные белки. Растворяют тела включения и осуществляют восстановление белка. Проводят ренатурацию белка длительностью 70-90 часов с разбавлением раствора белка до 400 л. Полученный раствор наносят на анионообменную ХК диаметром 300 мм с линейной скоростью нанесения 600-1000 мл/мин. Затем проводят концентрирование рчГ-КСФ последовательно на хроматографических колонках с анионообменным и катионообменным сорбентами. Затем осуществляют очистку рчГ-КСФ на катионообменнике в режиме рецикла фракций и стабилизацию диализом. Способ позволяет получать за один цикл стабильный препарат рчГ-КСФ в количестве 15-20 г с гомогенностью более 97% по ВЭЖХ и с гемостимулирующей активностью 1000-1400%. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Изобретение относится к способу улучшения выхода реакции пегилирования r-metHuG-CSF, включающему конъюгацию r-metHuG-CSF с ПЭГ-альдегидом по свободной аминогруппе в N-конце r-metHuG-CSF в присутствии восстановителя в буферном растворе для пегилирования, включающем полиол формулы C_nH_2n+2O _n, где n равен 3-6, или углевод, или его производное, где концентрация указанного полиола или углевода, или его производного находится в интервале 0,1%-10%, мас./мас. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению ПЭГилированного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), и может быть использовано в медицине. Получают конъюгат Г-КСФ с монометоксиполиэтиленгликолем, присоединенным к N-концевому метионину Г-КСФ, общей формулы

Изобретение относится к области биотехнологии и генетической инженерии, а именно к генно-инженерной конструкции pGoatcasGCSF для экспрессии гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека (Г-КСФ). Предложенное изобретение может быть использовано для получения трансгенных животных, продуцентов гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека. Создают генно-инженерную конструкцию pGoatcasGCSF, имеющую размер 6386 п.н., и установленную нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID 1. Генно-инженерная конструкция pGoatcasGCSF включает в себя 5 -регуляторную последовательность гена _S1-казеина козы CSN1S1 размером 3387 п.н., соединенную с полноразмерным геном Г-КСФ человека размером 1485 п.н., и 3 -фланкирующую область гена CSN1S1 коровы размером 1514 п.н. Предложенное изобретение позволяет получить стабильный эффективный уровень экспрессии Г-КСФ человека в молоко трансгенных животных, а также исключить возможность эктопической экспрессии трансгена. 9 ил., 2 табл.

Настоящее изобретение относится к конъюгатам пептида гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, образованного присоединением через интактную гликозильную линкерную группу фрагментов ПЭГ. Указанные конъюгаты получают из гликозилированных и негликозилированных пептидов под действием гликозилтрансферазы. Гликозилтрансфераза присоединяет фрагмент модифицированного сахара к аминокислотному или гликозильному остатку пептида. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные конъюгаты, и способам получения этих конъюгатов. 4 н. и 31 з.п. ф-лы, 11 ил., 3 табл.

Изобретение относится к способу выделения биологически активного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF). Выделение осуществляют аффинной хроматографией с иммобилизованным металлом. Способ может быть осуществлен при нативных условиях. Получают биологически активный G-CSF с чистотой выше 95%. Дополнительно применяют две дополнительные хроматографические стадии, катионообменную хроматографию и гель-фильтрацию, для удаления следовых количеств примесей. Способ приводит к получению G-CSF с большим выходом и чистотой выше 99%. Описанный способ является особенно подходящим для промышленного получения G-CSF. 15 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению новых пептидов, и может быть использовано в лечении и профилактике цитокинзависимых нарушений. Пептиды размером от 5 до 40 аминокислот, происходящие от цитокинов, используют в вакцине для лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний, рассеянного склероза, ревматоидного полиартрита, псориаза, аутоиммунных диабетов, волчанки, аллергии, астмы, рака и СПИДа. Изобретение позволяет эффективно проводить иммунизацию пациентов против указанных заболеваний с минимизацией побочных эффектов. 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 17 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно, к выделению кроветворных стволовых клеток, и может быть использовано для трансплантации. Полученные из костного мозга Lin-отрицательные или слабоположительные клетки культивируют в присутствии макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF) в концентрации приблизительно от 5 до 20 нг/мл, вместе с композицией цитокинов, включающей фактор стволовых клеток (SCF), интерлейкин-11 (IL-11) и лиганд fms-подобную тирозинкиназу (FLT) или тромбоцитопоэтин (ТРО). При этом цитокины используют в следующем весовом соотношении: 1-4 M-CSF:20 SCF:20 IL-11:20 (FLT или ТРО). Изобретение позволяет направленно размножить кроветворные стволовые клетки при культивировании популяции Lin-отрицательных или слабоположительных клеток, полученных из костного мозга. 4 н.п. ф-лы, 1 табл., 3 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению конъюгатов полипептидов с полиэтиленгликолем, и может быть использовано для получения конъюгатов мутантной формы G-CSF с ПЭГ. Мутантный пептид, обладающий активностью G-CSF, получают путем замен не более чем 15 аминокислотных остатков в определенных положениях аминокислотной последовательности G-CSF дикого типа, преимущественно на остаток лизина. Затем полученный мутантный пептид G-CSF конъюгируют с молекулой ПЭГ. Изобретение позволяет увеличить полупериод существования и повысить биологическую активность G-CSF in vivo, по сравнению с неконъюгированным G-CSF дикого типа. 14 з.п. ф-лы, 3 ил.