Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ...трипсин, химотрипсин – C12N 9/76

Изобретение относится к способу стабилизации наночастиц биогенных элементов ферментами. Способ включает в себя проведение синтеза наночастиц посредством окислительно-восстановительной реакции с введением стабилизатора-фермента, образующихся наночастиц непосредственно в реакцию. При этом к раствору фермента - химотрипсина, концентрацию которого выбирают от 0,02%, добавляют раствор прекурсора - селенистой кислоты 0,013 М концентрации или азотнокислого серебра - 1%, 0,01%, 0,001%; растворы перемешивают и выдерживают при комнатной 20°C или пониженной 0°C температуре в течение 30-60 минут. Затем в реакционную колбу вводят восстановитель: аскорбиновую кислоту или боргидрид натрия, растворы перемешивают и оставляют для завершения реакции. Изобретение позволяет получить стабилизированные наночастицы биогенных элементов в виде молекулярных устойчивых во времени к осаждению растворов при различных pH среды, различного регулируемого диаметра с выходом 75-97%. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Подготовленную поджелудочную железу убойных животных измельчают до размеров 7-11 мм и подвергают экстрагированию в подкисленной дистиллированной воде при температуре 7-15°С и периодическом перемешивании. Разделяют суспензию на осадительно-фильтрующей центрифуге с автоматической выгрузкой осадка с применением фильтрующего элемента с размером пор 1-5 мм. Разделение на фракции после высаливания балластных веществ и трипсина проводят с использованием фильтрующего элемента с размером пор 16-20 мкм с последующим высушиванием целевого продукта методом распыления или сублимации. При этом обессоливание проводят диафильтрацией на ультрафильтрационных аппаратах с использованием полых волокон. Изобретение обеспечивает повышение выхода очищенного препарата, его активности и срока хранения. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения стабильных клеточных культур. Промывают эмбриональную ткань ферментным раствором при температуре 25-37°С. Проводят трипсинизацию клеточного материала не менее трех, но не более пяти раз путем обработки кусочков ткани раствором трипсина с протеолитической активностью в пределах 65-80 Ед. Для нейтрализации фермента применяют среду на основе среды Игла с гидролизатом лактальбумина или с содержанием сыворотки крупного рогатого скота. За счет снижения протеолитической активности трипсина и повышения температуры обработки при получении стабильных клеточных культур увеличивается выход жизнеспособных диплоидных клеток в 1,5-2 раза по сравнению с ближайшим аналогом изобретения. 6 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может найти применение в производстве медицинских препаратов - рибонуклеазы панкреатической, дезоксирибонуклеазы панкреатической, трипсина, а также холестеролэстеразы. Способ предусматривает измельчение поджелудочной железы крупного рогатого скота, ее гомогенизацию. Полученный гомогенат экстрагируют охлажденным этиловым спиртом при постоянном перемешивании. Центрифугируют. Проводят повторную экстракцию серной кислотой, содержащей сульфат магния, при постоянном перемешивании. Экстракт, содержащий целевые ферменты, отделяют от осадка центрифугированием. Балластные белки осаждают сульфатом аммония при 30-35%-ном насыщении и удаляют центрифугированием из супернатанта. Холестеролэстеразу осаждают сульфатом аммония при 45-50% насыщении экстракта, трипсин осаждают при 60-65% насыщении, дезоксирибонуклеазу (ДНК-аза) осаждают при 80-85% насыщении. Полученный при осаждении ДНК-азы супернатант, содержащий рибонуклеазу, подвергают ультрафильтрации и осаждению сернокислым аммонием при 95-98% насыщении с последующим диализом и хроматографической очисткой на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой. Изобретение позволяет получать четыре фермента из поджелудочной железы в рамках единой технологической схемы, увеличить выход рибонуклеазы панкреатической, увеличить ее удельную активность. 4 з.п. ф-лы, 8 табл., 6 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению протеолитических ферментов? и может быть использовано в медицине, ветеринарии и других отраслях. Способ предусматривает измельчение (гомогенизацию) поджелудочной железы в водопроводной воде без применения буферных растворов, экстракцию продукта, отделение балластных белков и липидов. Отделение балластных белков и липидов осуществляют путем добавления к гомогенату 1%-ного кислотного раствора хитозана, перемешивания, отстаивания. Фильтруют полученную смесь через бельтинг-ткань. Концентрируют трипсиносодержащий фильтрат методом ультрафильтрации через полые волокна и подвергают сушке. Изобретение позволяет увеличить выход трипсина, повысить специфическую его активность, упростить технологический процесс получения трипсина и сократить его продолжительность, повысить безопасность и экологическую чистоту производства. 2 табл.