Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы, составы для них, способы получения подобных составов: .использующие трансферазу – C12Q 1/48

Группа изобретений относится к области биотехнологии и касается способа обнаружения сахарных цепей с GlcNAc, синтезированных GnT-V. Сущность изобретений включает способы определения, очистки и фильтрации сахарных цепей, содержащих GlcNAc, синтезированных GnT-V, где используется, по крайней мере, один вид GlcNAc-специфических лектинов, имеющих аффинитет к сахарным цепям, содержащим GlcNAc, синтезированным GnT-V, которые выбираются из группы, включающей GSL-II и PHA-L, и, по крайней мере, один вид GlcNAc-специфических лектинов, не имеющих аффинитет к сахарным цепям, содержащим GlcNAc, синтезированным GnT-V, которые выбираются из группы, включающей BLL и АВА, и используются в комбинации в качестве среды для определения сахарных цепей, содержащих GlcNAc, синтезированных GnT-V или в сочетании для вступления в контакт с образцом сахарной цепи. Одним из группы изобретений также является набор, включающий два вида GlcNAc-специфических лектинов. Преимущество изобретения заключается в разработке точного метода определения сахарных цепей с GlcNAc, синтезированных GnT-V. 4 н.п. ф-лы, 1 табл., 5 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам in vitro определения стадии или тяжести заболевания раком у больного или контролирования эффекта терапии, назначаемой больному раком, и может быть использовано в медицине. Способ определения прогноза развития заболевания у больного раком предусматривает оценку уровня экспрессии гена холинкиназы альфа в образце раковой ткани, выделенном у больного, и сравнение полученной величины с величиной, соответствующей одному или более образцам нормальной нераковой ткани. По повышенным уровням экспрессии гена холинкиназы альфа дифференцируют больных с худшим прогнозом развития заболевания. Способ in vitro мониторинга эффекта противораковой терапии осуществляют путем оценки уровня экспрессии гена холинкиназы альфа в образце раковой ткани, выделенном у больного, которому вводится противоопухолевый агент, и сравнения полученной величины с величиной, соответствующей одному или более образцам нормальной нераковой ткани. При этом эффективная терапия снижает уровни экспрессии гена холинкиназы альфа или вызывает реверсирование эффектов высокой экспрессии указанного гена. Изобретение позволяет эффективно определять прогноз развития заболевания у больного раком или проводить мониторинг эффекта противораковой терапии у пациента. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 27 ил., 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. В тестируемую пробу вводят щелочную фосфатазу, выделенную из яйцеклеток морского ежа, и предварительно инкубируют в течение 10-15 мин при комнатной температуре. Добавляют n-нитрофенилфосфат натрия и инкубируют в течение 30 мин при температуре 25°С или 37°С. Получают окрашенное соединение в качестве продукта реакции. Оценивают степень ингибирования фермента по величине оптической плотности продукта гидролиза субстрата при длине волны 400 нм с помощью ультрафиолетового ридера, используя 96-луночные планшеты. Способ позволяет визуально определить степень ингибирования фермента, интегрально оценить присутствие в воде тяжелых металлов, пестицидов и других токсикантов и увеличить количество одновременно исследуемых проб. 3 табл.

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано при поиске фармакологически активных соединений, обладающих белок-фосфорилирующей активностью или способностью модифицировать указанную активность. Предложен способ определения способности фермента изменять уровень фосфорилирования полипептида, предусматривающий проведение реакции исследуемого фермента с субстратом, в качестве которого используют биотинилированный фрагмент от 516 до 777 остатка человеческого субстрата рецептора инсулина 1 (hIRS-1-р30), связывание продукта реакции с иммобилизованным на носителе стрептавидином и определение уровня его фосфорилирования с помощью антител, специфичных в отношении фосфорилированных остатков полипептида. Способ по изобретению позволяет идентифицировать тирозиновые и сериновые протеинкиназы и может быть положен в основу тест-системы для поиска новых модуляторов их активности. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной инженерии, и может быть использовано в фармакологии. Предложен способ идентификации и/или проверки ингибиторов рецепторных тирозинкиназ, основанный на использовании новой тест-системы, которая представляет собой дрожжевую клетку-хозяина, содержащую экспрессионный вектор, включающий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую слитый белок, по существу состоящий из полной цитоплазматической части исследуемой рецепторной тирозинкиназы и домена димеризации и, при необходимости, дополнительно включающий последовательность для «заякоривания» слитого белка в мембране, где экспрессия слитого белка приводит к прекращению пролиферации клеток. Способ предусматривает получение указанных клеток-хозяев, контактирование этих клеток с соединением-кандидатом и идентификацию ингибиторов активности тестируемой тирозинкиназы по результатам их культивирования, исходя из того, что ингибирование активности тирозинкиназы соединением-кандидатом ведет к восстановлению процесса пролиферации. Перспективы применения изобретения связаны с разработкой селективных лекарственных, в том числе противораковых, препаратов. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложено применение антитела к sgk1, такого, с помощью которого обнаруживается изменение экспрессии и/или функции sgk1 в эукариотических клетках, для диагностики заболеваний, связанных с нарушенной активностью тканевого фактора. Раскрыты способ диагностики указанных заболеваний и диагностический набор для выявления указанных заболеваний на основе антитела для диагностики заболеваний, связанных с нарушенной активностью тканевого фактора. Использование изобретения позволяет определять по изменению экспрессии sgk1 изменение экпрессии тканевого фактора, что может найти применение в медицине для диагностики заболеваний, связанных с нарушенной активностью тканевого фактора. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и касается варианта сфингозинкиназы, обладающего сниженной способностью к фосфорилированию сфингозина до сфингозин-1-фосфата. Такой вариант содержит одну или несколько модификаций в области, ограниченной аминокислотами 16-153 сфингозинкиназы дикого типа. Изобретение также предусматривает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую последовательность, кодирующую эту сфингозинкиназу. Сфингозинкиназа согласно настоящему изобретению может быть использована для лечения или профилактики заболеваний у млекопитающих, которые характеризуются ненормальной, нежелательной или иной ненадлежащей активностью клеток. Изобретение позволяет получить новую сфингозинкиназу со сниженной каталитической активностью, пригодную для лечебного или профилактического применения. 7 н. и 17 з.п. ф-лы, 15 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Предусматривается применение PIM-3 в качестве агента для идентификации лекарственных средств против сахарного диабета типа 2. Использование изобретения обеспечивает лекарственные средства против диабета типа 2, влияющие на уровень экспрессии PIM-3. 2 з.п. ф-лы, 11 табл.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в фармакологии и фармацеи. Способ включает воздействие исследуемого вещества на цитохром Р-450 и на глутатионтрасферазу, определяют скорость ферментативной реакции до и после воздействия. Результат оценивают по соотношению скоростей ферментативных реакций после и до воздействия исследуемого вещества, при соотношении, большем 1, делают заключение о наличии антитоксических свойств, а при соотношении, равном или меньшем 1, делают заключение об отсутствии антитоксических свойств. Повышается информативность способа, позволяющего проводить in vitro скрининг БАВ, обладающих антитоксическими свойствами. Способ обладает высокой специфичностью, чувствительностью, хорошей воспроизводимостью, меньшей трудоемкостью. 4 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"Xenobiotica, Jan.1988, v.18, suppl. 1, р.35-44. PARK В.К. et. al. Assessment of enzyme induction and enzyme inhibition in humans: toxicological implication, Xenobiotica, 1990 Nov, 20 (11), abstract.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для секвенирования полинуклеотидных последовательностей. Последовательность полинуклеотида определяют по изменению нелинейного оптического сигнала или линейного оптического сигнала, связанного с нелинейным сигналом, регистрируемым при взаимодействии иммобилизованного в фиксированном положении фермента, который может взаимодействовать с нуклеотидной цепью и непрерывно продвигаться по ней, с отдельными основаниями мишеневого полинуклеотида. Применение изобретения позволяет определять последовательность полинуклеотидов большого размера с высокой скоростью посредством автоматизированного процесса. 23 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к генной инженерии, конкретно, к генам точки контроля клеточного цикла и может быть использовано in vitro или in vivo в системах клеточной культуры для изучения роли ATR в качестве гена точки контроля. Полинуклеотид, кодирующий гомолог ATR полипептида rad3, клонируют в экспрессирующий вектор, функциональный в эукариотических клетках. Полипептид гомолога ATR полипептида rad3 получают путем культивирования эукариотической клеточной культуры, трансформированной вектором. Моноклональное антитело к гомологу ATR полипептида rad3 получают с помощью гибридомных технологий. Путем инокуляции полипептида гомолога ATR полипептида rad3 животному-хозяину получают поликлональные антитела. Присутствие полинуклеотида в образце животной ткани обнаруживают путем контактирования данного образца, содержащего ДНК или РНК, с полинуклеотидом, кодирующим гомолог ATR полипептида rad3, в условиях гибридизации. Полипептид в биологическом образце обнаруживают путем контактирования образца с моноклональными или поликлональными антителами. Проводят отбор веществ - кандидатов как антираковых агентов, судя по уменьшению активности полипептида ATR на субстрате или уменьшению комплексообразования гомолога ATR в присутствии веществ-кандидатов. Изобретение позволяет получить гомологи ATR полипептида rad3 человека или S.pombe. 22 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил.