способ получения гемоглобина

Формула изобретения

Способ получения гемоглобина из крови сельскохозяйственных животных путем разделения крови на плазму и эритроциты, получение гемолизата, очистку от балластных веществ фильтрованием, концентрирование с помощью ультрафильтрации с последующей фильтрацией, стерилизацией и лиофилизацией целевого продукта, отличающийся тем, что эритроциты разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1 2 1 4 и замораживают при -20^oС, затем после размораживания концентрируют ультрафильтрацией при 10 15^oС при рН 6,8 - 7,2 и целевой продукт после стерилизующей фильтрации лиофилизируют.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к выделению биологически активных веществ из животного сырья, а именно к выделению гемоглобина из крови сельскохозяйственных животных. Препарат гемоглобина применяют в диагностических исследованиях, научно-исследовательских работах, а также в качестве красителя в производстве продуктов питания.

Существующие способы [1-3] выделения гемоглобина из крови животных основаны на использовании в качестве осаждающих агентов сульфата аммония или ацетона. Даже незначительные примеси этих веществ в препарате гемоглобина, в случае использования его в качестве пищевой добавки, недопустимы и требуют тщательной и длительной очистки от них диализом или другими методами. Это приводит к значительным потерям гемоглобина и отрицательно сказывается на его физико-химических свойствах (снижается растворимость, разрушается тетрамерная структура, снижается общее содержание железа и увеличивается доля трехвалентного железа).

Известен способ получения гемоглобина [4] включающий гемолиз эритроцитов в растворе хлористого натрия при соотношении эритроцитов и хлористого натрия 1: 10 с последующим добавлением аскорбиновой кислоты, центрифугированием и очисткой с помощью микро- и ультрафильтрации. Однако данный способ многоэтапен и требует значительных временных и трудовых затрат.

Целью предлагаемого способа является упрощение и удешевление процесса получения и одновременное увеличение выхода неденатурированного кристаллического гемоглобина, применяемого в качестве пищевой добавки, предназначенной для лечения и профилактики железодефицитных состояний человека и животных.

Поставленная цель достигается получением гемолиза эритроцитов путем разбавления эритроцитарной массы дистиллированной водой и замораживания с последующим концентрированием гемолизата ультрафильтрацией, стерилизующей фильтрацией и лиофилизацией.

Пример. 10 л стабилизированной крови крупного рогатого скота или свиней сепарируют в течение 30 мин при 6000 об/мин при 4^oС. Осадок, содержащий эритроциты, разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:2-1:4 и замораживают при -20^oС После размораживания гемолизат сепарируют или центрифугируют при тех же условиях и супернатант после фильтрации подвергают концентрированию до объема 5 л на ультрафильтрационной половолоконной установке при 10-15^oС и рН 6,8-7,2 с последующей стерилизующей микрофильтрацией и лиофилизацией.

Выход кристаллического гемоглобина с чистотой более 80% составляет свыше 95% Физико-химические показатели гемоглобина представлены в таблице.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать в промышленных масштабах гемоглобин, очищенный от высоко- и низкомолекулярных примесных соединений и патогенных микроорганизмов, с чистотой свыше 80% и выходом 95%

Литература

1. Авторское свидетельство СССР N 174326, 1965.

2. Украинский биохимический журнал N 1, с. 100, 1966.

3. Ферменты в экспериментальной и клинической онкологии и радиологии, вып. ХХ, ч.1, с. 26, Ленинград, 1967.

4. Авторское свидетельство СССР N 1205910, 1986.