фрагмент днк, плазмидный вектор, способ получения полипептида и полипептид, обладающий il-1 протеазной активностью
Классы МПК: | C12N15/57 действующие на пептидные связи (34) C12N9/64 получаемые из животной ткани, например реннин C12P21/02 с известной последовательностью из двух или более аминокислотных остатков, например глутатиона |
Автор(ы): | БЛЭК Рой А. (US), СМИТ Паул Р. (US), КРОНХЕЙМ Ширлей Р. (US) |
Патентообладатель(и): | ВЕРТЕКС ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ ИНКОРПОРЕЙТЕД (US) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1991-09-12 публикация патента:
20.06.2003 |
Изобретение относится к получению биологически активной IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазы с помощью технологии рекомбинантных ДНК и может быть использовано в медицине. Изолирована последовательность ДНК, кодирующая полную аминокислотную последовательность (предшественник) IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазы, в которой идентифицирована область, кодирующая "зрелую" форму фермента. В результате экспрессии названных последовательностей ДНК в культуре клеток млекопитающего синтезируется биологически активная IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеаза, обладающая способностью расщеплять неактивный предшественник IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> в положении между 116 и 117 аминокислотными остатками с образованием активного цитокина. 4 с.п.ф-лы, 2 табл., 7 ил.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74
Формула изобретения
1. Фрагмент ДНК, кодирующий полипептид, обладающий IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазной активностью и имеющий полинуклеотидную последовательность от нуклеотида 1 до нуклеотида 1232, или от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую вырожденностью генетического кода. 2. Плазмидный вектор для экспрессии IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазной активности в клетках млекопитающего, содержащий в сайте клонирования фрагмент ДНК по п.1. 3. Способ получения полипептида, обладающего IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазной активностью, включающий стадии: a) культивирования клеток млекопитающего, продуцирующих указанный полипептид, в условиях, подходящих для его биосинтеза; и б) выделения и очистки продукта, в котором клетки, продуцирующие указанный полипептид, трансформированы рекомбинантным экспрессирующим вектором, включающим фрагмент ДНК от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую вырожденностью генетического кода. 4. Полипептид, обладающий IL-1 протеазной активностью, патент № 2206611" SRC="/images/patents/264/2206019/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> протеазной активностью, получаемый способом по п.3.Описание изобретения к патенту
Текст описания в факсимильном виде. ТмКласс C12N15/57 действующие на пептидные связи (34)
Класс C12N9/64 получаемые из животной ткани, например реннин
Класс C12P21/02 с известной последовательностью из двух или более аминокислотных остатков, например глутатиона