способ стерилизации и набор средств для его осуществления

Формула изобретения

1. Способ стерилизации, включающий стадию обработки изделий 0,05-0,3%-ными растворами (по действующему веществу) биоцидных средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом и последующую стадию обработки раствором, содержащим перекись водорода с концентрацией от 2,5 до 3,5% (по действующему веществу).

2. Способ по п.1, включающий стадии предстерилизационной чистки загрязнений стерилизуемых объектов и/или ополаскивания после второй стадии.

3. Способ по п.1, где на первой стадии используют растворы, полученные из концентрата биоцидного средства, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 20; этиловый спирт - 20; вода - остальное.

4. Способ по п.1, где на первой стадии используют растворы, полученные из биоцидного средства на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом в виде таблетки, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; кислотный компонент, выбранный из борной кислоты, водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита - 5-15.

5. Способ по п.1, где на первой стадии используют растворы, полученные из биоцидного средства на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом в виде гранул, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; кислотный компонент, выбранный из борной кислоты, водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита - 5-15.

6. Способ по п.1, где на второй стадии используют растворы, полученные из перекиси водорода, перекисных, надперекисных соединений, которые при растворении обеспечивают получение концентрации перекиси водорода не менее чем 2,5.

7. Способ по п.2, где на необязательной стадии ополаскивания используется этиловый спирт или его водные растворы.

8. Набор, содержащий (а) концентрат биоцидного средства на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом и (б) перекисное соединение.

9. Набор по п.8, где перекисное соединение представляет собой гидроперит.

10. Набор по п.8, где перекисное соединение представляет собой 30-35%-ный раствор перекиси водорода (пергидроль).

11. Набор по п.8, где концентрат биоцидного средства, используемого на первой стадии, содержит, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 20; этиловый спирт - 20; вода - остальное.

12. Набор по п.8, где концентрат биоцидного средства, используемого на первой стадии, представляет собой таблетки, содержащие, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; кислотный компонент, выбранный из борной кислоты, водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита - 5-15.

13. Набор по п.8, где концентрат биоцидного средства, используемого на первой стадии, представляет собой гранулы, содержащие, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; кислотный компонент, выбранный из борной кислоты, водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита - 5-15.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к способу стерилизации изделий медицинского назначения, включая эндоскопы, стоматологические инструменты, а также белья, посуды и т.п., от патогенных микроорганизмов, вирусов, спор - возбудителей опасных заболеваний, а также к набору средств для его осуществления. Предлагаемый способ может быть использован для стерилизации и дезинфекции в различных областях медицины, ветеринарии, пищевой промышленности и т.п.

Известны химические способы обеззараживания и стерилизации, основанные на применении растворов, содержащих активные химические соединения, обладающие бактерицидной, микоцидной, вирулицидной и спороцидной активностью. К таким соединениям относятся перекись водорода (6% раствор), надуксусная кислота (1% раствор), глутаровый альдегид (2,5% раствор) и т.п. Однако применение однокомпонентных растворов требует использования высоких концентраций (в скобках указаны минимальные допустимые концентрации), длительной обработки и, в ряде случаев, применения повышенной температуры. Кроме того, ввиду высокой активности биоцидных и стерилизующих агентов, проявляющейся в деструктивном воздействии на обрабатываемые объекты, как правило, требуется дополнительная стадия промывки стерилизуемых объектов от остатков химически активных соединений. При этом промывка проводится в условиях, исключающих повторную контаминацию стерилизуемых объектов. Таким образом, двухванные (или двухстадийные) методики обработки являются приемлемыми, при условии обеспечения стерильности на последней стадии - промывки от активного вещества.

В этой связи особый интерес представлял бы способ, в котором последнюю стадию осуществляли бы в растворе, контаминация которого нежелательной микрофлорой из окружающей среды была бы исключена за счет его состава, при этом этот раствор обеспечивал бы стадию отмывки от остатков высокоактивного биоцидного агента, применяемого на первой стадии, который может проявлять деструктирующее действие на стерилизуемый объект после процедуры стерилизации. Тогда заключительная стадия будет предполагать, при необходимости, только ополаскивание перед сушкой или упаковкой стерильного объекта.

Общая тенденция развития способов дезинфекции предполагает использование высокоактивных в плане биоцидной активности средств, которые наносят наименьшее повреждение обрабатываемому объекту. Таким образом, имеет место задача по разрешению противоречия в том, что для достижения биоцидной активности в отношении неопределенного спектра микроорганизмов биоцидный агент должен обладать высокой деструктирующей активностью по отношению к биологическому материалу и в то же время не должен разрушать обрабатываемый объект, к которым относятся различные медицинские инструменты, оборудование биологических и пищевых производств и т.п.

Заявители обнаружили, что применение на последней стадии растворов, содержащих перекись водорода в незначительных концентрациях, обеспечивает удаление с поверхности обрабатываемых объектов остатков высокоактивных биоцидных агентов, исключает контаминацию этого раствора микрофлорой из окружающей среды и, в то же время, не требует дополнительной промывки, например водой или другим растворителем, от остатков перекиси, сохраняющихся на поверхности объекта после обработки в ванне со слабым раствором перекиси водорода.

Такой прием позволяет снизить концентрацию активного вещества (или реализовать более мягкий режим стерилизации) на первой стадии, обеспечивая стерилизацию или дезинфекцию обрабатываемых объектов высокого уровня.

"Двухванный" способ является приемлемым в свете традиционной организации стерилизации в учреждениях медицинского и микробиологического профилей, когда первую стадию обработки осуществляют в "грязной зоне", а вторую - в "чистой", где осуществляют заключительные операции и упаковывают стерильные объекты.

Химические способы стерилизации осуществляют с применением высокоактивных препаратов, все из которых имеют свои определенные недостатки.

Известен способ стерилизации с применением стерилизующего состава в порошкообразной форме, содержащего перекись водорода, N-алканоиламиноипропилдиметилбензиламмоний хлорид, мочевину и аэросил (RU 20832228 C1, 1984). Препарат имеет низкую стабильность, достаточно ограниченную сферу использования, не обладает достаточной активностью при холодной стерилизации изделий медицинского назначения, а также требует применения дополнительных мер защиты органов дыхания, глаз и кожи. Использование такого состава предполагает тщательную промывку обрабатываемых объектов от остатков препарата.

Известны способы стерилизации с использованием средств на основе перекиси водорода. Однако средства на основе перекиси водорода имеют сравнительно малый срок хранения: 18 месяцев твердого препарата, а образцы жидкого препарата теряют свою активность по истечении 12 месяцев. Для достижения стерильности обрабатываемых объектов используют растворы перекиси водорода с концентрацией не ниже 6%, что ведет к разрушению обрабатываемых объектов. Биоцидные средства на основе перекиси водорода предполагают не менее 6 часов для стерилизации, при этом такой способ стерилизации требует итоговой многократной промывки простерилизованных изделий, что не позволяет использовать это средство при проведении широкомасштабных дезинфекционных мероприятий, например в эпидемических очагах.

Объектами стерилизации могут быть медицинские и ветеринарные изделия, инструменты, оборудование, принадлежности, устройства, а также объекты пищевой и микробиологической промышленности, к которым предъявляются требования по стерильности в ходе их эксплуатации или в период хранения.

Применение способа по настоящему изобретению не ограничивается обработкой изделий в ваннах или других емкостях, абсолютно очевидно, что данный способ может быть применен для обработки полостей или емкостей, путем поочередной заливки в них растворов.

Таким образом, настоящее изобретение предлагает эффективный способ стерилизации широкого круга объектов, допускающих контакт с солевыми растворами.

Известны дезинфицирующие средства на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом, в частности клатрата дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной, в качестве действующего вещества, дополнительно содержащие вспомогательные компоненты: в виде концентрата (в качестве вспомогательного компонента содержит этиловый спирт) (патент RU 2095086, 1997), в виде таблеток, содержащие в качестве вспомогательных веществ гидроксикислоту, неорганическую соль и растворимый в воде наполнитель при следующем соотношении компонентов (мас.%): клатрат дидецилдиметиламмония бромида с мочевиной - 1-50; гидроксикислота - 1-35; неорганическая соль - 1-35; наполнитель - остальное (RU 2214837, 2003 г.), которые используются для эффективной дезинфекции в отношении не только грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, включая туберкулез, но и патогенных микроорганизмов I и II группы. Эти дезинфицирующие средства обладают антимикробной активностью в отношении бактерий, в том числе возбудителей туберкулеза, сальмонеллезов, брюшного тифа, дизентерии, дифтерии, скарлатины, венерических болезней, анаэробной инфекции, возбудителей особо опасных инфекций (чума, холера, сап, мелиоидоз, туляремия и сибирская язва), дерматофитов, дрожжеподобных грибов рода Candida, а также инактивируют вирусы (вирусы гепатитов В, С, ВИЧ, гепатита А, герпеса, гриппа, парагриппа); проявляют моющие свойства.

Однако указанные дезинфицирующие средства проявляют свои биоцидные свойства при довольно длительном времени контакта с обрабатываемым объектом и относительно высоких концентрациях рабочих растворов (по биоцидному агенту). Так, гибель спор возбудителя сибирской язвы на изделиях медицинского назначения, посуде с остатками пищи и белье с примесью крови или фекалий наблюдается при времени стерилизации в течение 60-120 мин при 2,0-2,5% концентрациях рабочих растворов по препарату при температуре 55°С.

Технической задачей изобретения является снижение времени стерилизации и рабочих концентраций по действующему веществу используемых биоцидных средств и исключение заключительной стадии промывки в стерильной воде или другой жидкости стерилизуемых объектов от остатков биоцидов.

Поставленная задача решена созданием высокоэффективного 2-стадийного способа стерилизации изделий медицинского, ветеринарного и другого назначения, которые требуют для их эксплуатации абсолютного отсутствия на их поверхности какой-либо микрофлоры, включающего стадию обработки с использованием 0,05-0,3% растворов [по действующему веществу (ДВ)] биоцидных средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом (ЧАС) и последующую стадию обработки с использованием 2,5-3,5% (по ДВ) раствора, содержащего перекись водорода.

Первая стадия обычно осуществляется в течение ˜30 минут, а вторая - ˜60 минут.

Предлагаемый способ может включать необязательные стадии предстерилизационной очистки загрязнений стерилизуемых объектов и/или ополаскивания после второй стадии.

Четвертичные аммониевые соединения (ЧАС), помимо биоцидных свойств, обладают поверхностно активным действием, что дает возможность при обработке изделий в первой ванне, удалить с них (как минимум частично) другие загрязнения, которые не относятся к микроорганизмам, но могут проявлять биоактивное, например пирогенное или какое-либо другое отрицательное, действие при использовании стерилизуемого объекта. Таким образом, при стерилизации загрязненных объектов дополнительная стадия по предварительной предстерилизационной обработке (такой как замачивание в растворе ПАВ, ополаскивание в воде, предварительной стирки и т.п.) может быть исключена.

На первой стадии используют растворы, содержащие 0,05-0,3% ЧАС. Наиболее предпочтительно применение клатрата галогенида дидецилдиметиламмония с мочевиной. Раствор может быть приготовлен в воде, водно-спиртовом, водно-глицериновом растворе или другом растворителе. На первой стадии дезинфекции могут быть использованы растворы, содержащие ЧАС, полученные либо из концентрата дезифицирующего средства, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 20; этиловый спирт - 20; вода - остальное; либо растворы, полученные из таблеток или гранул дезифицирующего средства на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; вспомогательное вещество (кислотный компонент, выбранный из борной кислоты; водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита) - остальное.

Рабочие растворы, содержащие 0,05-0,3% действующего вещества, готовят разведением порошка, концентрата биоцидного средства или растворением таблеток или гранул биоцидного средства.

В качестве примера, на первой стадии могут быть использованы коммерческие препараты, такие как "Септабик", "Велтолен", "Велтосепт" или аналогичные, с заявленной концентрацией действующего вещества.

Раствор, применяемый на второй стадии, должен содержать приблизительно 3% перекиси водорода. Эта концентрация, с одной стороны, достаточна для того, чтобы обеспечить полную стерилизацию по заявляемому способу, а с другой стороны, недостаточна для того, чтобы вызвать интенсивную деструкцию или повреждение обрабатываемого объекта. При использовании растворов чистой перекиси водорода, т.е. полученной из пергидроля, дополнительной промывки стерилизуемых изделий не требуется, так как этот раствор полностью испаряется при сушке. При использовании других растворов, которые содержат эквивалентное количество перекиси, может оказаться целесообразным включить дополнительную стадию ополаскивания перед сушкой или упаковкой стерильных объектов.

В качестве источника перекиси при приготовлении раствора для второй стадии могут быть использованы перекисные и надперекисные соединения, такие как перекиси и надперекиси металлов, комплексные соединения перекиси водорода, например гидроперит (соединение перекиси водорода с мочевиной), пероксикислоты, их соли или их смеси, включая сухие концентраты, допускающие длительное хранение в сухом состоянии. Критериальным условием является получение раствора, в котором эквивалентное содержание перекиси соответствует приблизительно 3%. При этом, очевидно, что концентрация перекиси может варьироваться в допустимых пределах, например быть снижена до 2,5%, как это имеет место на практике для продажного раствора перекиси водорода. Использование более высоких концентраций перекиси будет положительно сказываться на процессе стерилизации, однако при этом возрастает опасность повреждения стерилизуемого объекта.

Таким образом, на второй стадии предлагаемого способа предпочтительно используют растворы, полученные из перекиси водорода, перекисных, надперекисных соединений, которые при растворении обеспечивают получение концентрации перекиси водорода, равной не менее чем 2,5%.

Растворы перекиси, применяемые на второй стадии стерилизации могут быть приготовлены на воде, водно-спиртовых растворах или на любом другом растворителе, допустимом для приготовления растворов перекиси и приемлемом с точки зрения практического использования стерилизуемого объекта.

Ввиду того, что ЧАС в минимальных количествах попадает в ванну со вторым раствором, оно продолжает оказывать свое бактерицидное действие, также как и поверхностно-активное, обеспечивая эффективное действие перекиси.

При нахождении стерилизуемого объекта в ванне со вторым раствором, концентрация ЧАС на объекте уменьшается до пределов, когда промывка стерилизуемого изделия от следов ЧАС уже не нужна. Однако в некоторых случаях может понадобиться ополаскивание изделия в воде или в другом растворителе (например, спирте), для удаления следов биоцидов, особенно если на второй стадии в качестве источника перекиси использовалась не чистая перекись, а ее соединения, например гидроперит. Кроме того, прием ополаскивания в спирте используется для ускорения сушки стерилизованного изделия.

Таким образом, на необязательной стадии ополаскивания предлагаемого способа стерилизации предпочтительно используют этиловый спирт или его водные растворы.

В свете традиционной организации стерилизации в учреждениях медицинского и микробиологического профилей, биоцидные средства, используемые в предлагаемом "двухванном" способе стерилизации, для удобства доставки и использования могут быть представлены в виде набора.

Таким образом, второй целью настоящего изобретения является набор, содержащий (а) концентрат биоцида на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом и (б) перекисное соединение.

Средство (а) в наборе, используемое на первой стадии предлагаемого способа стерилизации, - концентрат биоцидного средства, предпочтительно, представлено в виде состава, содержащего, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 20; этиловый спирт - 20; вода - остальное, или таблеток или гранул, содержащих, мас.%: клатрат дидецилдиметиламмоний бромида с мочевиной - 85-95; кислотный компонент, выбранный из борной кислоты; водорастворимых кислых солей фосфорных кислот, кислых солей серной кислоты, метабисульфита - 5-15.

В качестве средства (а) в наборе могут быть использованы также коммерческие препараты, такие как "Септабик", "Велтолен", "Велтосепт" или аналогичные, с заявленной концентрацией действующего вещества.

Средство (б) в наборе - перекисное соединение, представлено перекисями и надперекисями металлов, комплексными соединениями перекиси водорода, пероксикислотами, их солями или их смесями, включая сухие концентраты, допускающие длительное хранение в сухом состоянии, предпочтительно в виде гидроперита или 30-35% раствора перекиси водорода (пергидроль). Средство (б) используется на второй стадии предлагаемого способа стерилизации.

Средства в наборе, в соответствии с запросами потребителей, могут быть представлены в упаковках различного объема, соответственно, соразмерных для средств (а) и (б).

Средство в виде таблеток может расфасовываться в мелкую упаковку из расчета приблизительно 50 и 500 г (по желанию потребителя) или в упаковку большего объема - барабаны и герметичные полимерные мешки различной емкости.

Твердые формы биоцидного средства (а) могут быть представлены в емкости из любого материала (полимерных, стеклянных): флаконах, банках, коробках, пеналах, контейнерах, полимерных пакетах, а также пакетах из трехслойного композита, емкостью от 1,0 г до 5-10 кг, в соответствии с запросами потребителей, обеспечивающих сохранность биоцидного средства в течение всего срока годности, а также при транспортировке.

Расфасовка биоцидного средства может осуществляться из расчета применения одной упаковки на соответствующую стадию стерилизации предложенного способа (например, одна упаковка на одно ведро воды) или упаковка может комплектоваться мерным приспособлением, позволяющим дозировать биоцидное средство, для получения растворов нужной концентрации. При приготовлении растворов небольших объемов дозирование биоцидного средства осуществляется путем отсчета необходимого количества таблеток или гранул. Набор биоцидных средств можно транспортировать любыми видами транспорта, при низких и высоких температурах, они не являются опасными грузами.

Для перекисных соединений используют упаковки из коррозионностойкого инертного материала, при этом для длительного хранения перекисных соединений она должна обладать определенной пористостью или иметь канал для выхода продуктов разложения перекисных соединений, если это имеет место и допустимо при хранении перекисного соединения.

Например, упаковка для пергидроля должна содержать клапан для выхода газообразных продуктов из-за саморазложения перекиси во время хранения.

В то же время некоторые соединения, которые образуют перекись при растворении, в сухом (твердом виде) являются стабильными (например, персульфаты, пербораты, перекись бария и т.п.) и не требуют дополнительных устройств и приспособлений для вывода продуктов разложения.

При проведении экспериментальной проверки растворы для второй стадии готовились из концентрированной перекиси водорода (33% пергидроль) или использовались коммерчески доступные таблетки гидроперита.

Для контроля стерильности в опытах по оценке эффективности способа использовали стандартные методы контроля стерильности в отношении бактериальной, споровой, грибковой и вирусной микрофлоры. Оценку сохранности стерилизуемых объектов оценивали визуально с использованием оптических приборов (контроль наличия микротрещин на тест-подложках, полимерах и лакокрасочных покрытиях), а образцы ткани и полимерных пленок - по прочности на разрыв после однократной стерилизации.

Поскольку ранее было доказано биоцидное действие клатрата галогенида дидецилдиметиламмония с мочевиной на широкий спектр патогенов, бактериальной, вирусной и грибковой природы, вызывающих заболевания, такие как парентеральные гепатиты В, С, Д, ВИЧ-инфекции, гепатита А, ТОРС, а также заболевания, обусловленные патогенами I и II групп, в том числе особо опасных инфекций, то для доказательства эффективности стерилизации необходимо было продемонстрировать полную инактивацию споровых форм.

В опытах использованы культуры возбудителя сибирской язвы - В. anthracis (штаммы СТИ и 27), полученные в музее живых культур ВолгоградНИПЧИ.

В соответствии с требованиями, споры возбудителя обладали 3-х часовой устойчивостью к 10% раствору фенола и погибали через 30 мин при действии текучего пара. Перед постановкой опытов бактериальную массу исследованных штаммов возбудителя сибирской язвы предварительно подвергали температурному стрессу, и полученную суспензию, содержащую 95% спор данного микроорганизма, в последующем хранили при 4°С.

Для выращивания исследуемых микроорганизмов использовали соответствующие селективные плотные и жидкие питательные среды при оптимальной температуре инкубации для возбудителя сибирской язвы 37°С при окончательном учете результатов роста через 5 суток.

Эффективность обеззараживания различных объектов испытываемыми средствами оценивали в соответствии с принятыми методами испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности.

В качестве тест-объектов применяли изделия медицинского назначения (эндоскопы, ножницы, скальпель, зажим, трубки из натуральной и силиконовой резины, стеклянные и пластиковые стаканчики, стоматологические боры, щипцы, зеркала, незагрязненное и загрязненное выделениями (остатки крови и фекалии) белье, посуду (незагрязненную и с остатками пищи).

Для органического загрязнения белья добавляли 40% инактивированную лошадиную сыворотку (НЛС) или фекалии, для изделий медицинского назначения - 40% НЛС, а для посуды с остатками пищи брали манную кашу.

Заражение батистовых тестов проводили путем погружения в суспензию исследуемых микроорганизмов из расчета 0,5 мл взвеси концентрацией 2x10⁹ м.к./мл на 1 тест-обьект. При обеззараживании загрязненного возбудителями ООИ белья батистовые тесты помещали в различных точках стопки белья (низ, середина, верх).

Изделия медицинского назначения опускали на 2 мин в суспензию микроорганизмов в концентрации 2x10⁹ м.к./мл с 40% НЛС, затем переносили в исследуемый рабочий раствор средства на 60-90 мин, после нейтрализации делали высевы.

Посуду и изделия медицинского назначения обеззараживали методом погружения, белье замачивали в рабочем растворе испытуемого средства.

Перечисленные объекты первоначально обрабатывали 0,05% - 0,3% растворами (по ДВ) исследуемых бицидных средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом в течение 30 мин, а затем проводили их последующее 60 мин обеззараживание 3,0% (по ДВ) раствором перекиси водорода.

Для нейтрализации в опытах по контролю качества стерилизации использовали "универсальный" нейтрализатор, включающий в свой состав твин-80, лецитин, цистеин. В контроле дезинфицирующее средство заменяли стерильной водопроводной водой. Положительным считали результат, обеспечивающий 100% гибель исследуемых микроорганизмов при трех повторностях опытов.

Биологические пробы ставили на белых мышах путем внутрибрюшинного введения им подвергнутого нейтрализации смыва с исследованных объектов в объеме 0,1 мл. Павших животных вскрывали и проводили бактериологический высев, отрицательные результаты которого являлись показателем антимикробного действия препарата.

В Таблице представлены данные по спороцидной активности 0,05% - 0,3% растворов дезинфицирующих средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом, приготовленных из таблеток (1), из гранул (2) и из концентрата (3) при первоначальном 30 мин обеззараживании загрязненных спорами возбудителя сибирской язвы белья, посуды и изделий медицинского назначения с последующей 60 мин обработкой 3,0% (по ДВ) раствором перекиси водорода. В качестве контроля использовали для обработки спор отдельно 0,3% (по ДВ) растворы ЧАС или 3,0% (по ДВ) перекиси водорода при 90 мин экспозиции.

При этом отмечено, что в контроле на исследованных объектах при 90 минутной экспозиции 0,3% концентрации (по ДВ) каждого из средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом или одного 3% (по ДВ) раствора перекиси водорода гибели спор не вызывали.

В ходе экспериментальной проверки было установлено, что эффективность стерилизации сохраняется при снижении концентрации перекиси водорода вплоть до 2,5%.

Контроль проб, которые могли содержать неопределенную микрофлору, подвергали комплексной проверке на наличие спор, вегетативных бактерий и грибков путем высева аликвот на неселективные среды. Наличие вирусов контролировалось путем заражения развивающихся куриных эмбрионов с последующим интрацеребральным заражением мышей. В проверенных пробах жизнеспособных микроорганизмов не выявлено в пределах чувствительности методов контроля.

Контроль пирогенности смывов со стерилизованных образцов осуществляли стандартным способом на кроликах путем контроля ректальной температуры после введения контрольной и исследуемой пробы. Температурный ответ у кроликов при введении смывов со стерилизуемой тканевой подложки, загрязненной фекальными массами, был существенно ниже по сравнению с контролем, прошедшим только замачивание в воде.

Контроль прочности на разрыв резиновых и силиконовых трубок, тест-полосок медицинской клеенки, медицинского пластика, хлопчатобумажной ткани после их стерилизации показал отсутствие достоверного снижения прочности. Визуальное исследование лакокрасочных покрытий тест-пластин, полимеров (полистирол) под оптическим микроскопом поверхностных дефектов не выявило.

Таблица Результаты двухстадийного способа стерилизации объектов, загрязненных спорами возбудителя сибирской язвы, с использованием дезинфицирующих средств на основе клатрата четвертичного аммониевого соединения с карбамидом (ЧАС) (1), (2) и (3) и перекиси водорода
Дезинфи-цирующее средство	1 стадия: 30 мин обеззараживание объектов средствами ЧАС при концентрации (по ДВ)	2 стадия: последующее 60 мин обеззараживание объектов 3,0% раствором перекиси водорода (по ДВ.)	Время гибели спор возбудителя сибирской язвы (мин) на обеззараживаемых объектах
			На посуде без остатков пищи		На посуде с остатками пищи	На незагряз-ненном белье		На белье, загрязненном выделениями (кровью или фекалиями)		На изделиях медицинского назначения (в том числе эндоскопах, стоматологических инструментах) с остатками крови
(1)	0,05%-0,2%	+	0,05% - 60 мин	0,1% - 60 мин		0,1% - 60 мин		0,1% - 90 мин 0,2% - 60 мин		0,1% - 60 мин
	Контроль 1. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 0,2% (по ДВ) раствором ЧАС при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
	Контроль 2. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 3,0% (по ДВ) раствором перекиси водорода при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
(2)	0,05%-0,3%	+	0,05% - 60 мин	0,1% - 60 мин		0,1% - 60 мин	0,2% - 90 мин 0,3% - 60 мин		0,1% - 60 мин
	Контроль 1. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 0,2% (по ДВ) раствором ЧАС при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
	Контроль 2. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 3,0% раствором перекиси водорода (по ДВ) при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
(3)	0,1%-0,3%	+	0,1% - 60 мин	0,2% - 60 мин		0,2% - 60 мин	0,2% - 90 мин 0,3% - 60 мин		0,2% - 60 мин
	Контроль 1. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 0,2% (по ДВ) раствором ЧАС при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
	Контроль 2. Обеззараживание загрязненных спорами объектов 3,0% раствором перекиси водорода (по ДВ)при 90 мин экспозиции		Гибель спор возбудителя сибирской язвы не наступала
Примечание: 1) Посуду и изделия медицинского назначения стерилизовали методом погружения, а белье - методом замачивания.