способ получения препарата для проведения аппликационного кожного теста

Формула изобретения

Способ получения препарата для проведения аппликационного кожного теста, включающий смешивание тестируемого вещества с носителем и растворителем, отличающийся тем, что в качестве носителя используют агар-агар, а в качестве растворителя - боратный буфер рН 6,8-7,2, агар-агар в боратном буфере нагревают при перемешивании до полного растворения агар-агара, охлаждают смесь до 40-45°С и вводят тестируемое вещество в количестве 10-50% от общего объема готового препарата, при этом в качестве тестируемых веществ используют их водные растворы с концентрациями, способными вызывать контактные реакции гиперчувствительности.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению препаратов для исследований в области аллергологии и дерматологии для определения причинных факторов реакций гиперчувствительности к различным соединениям и многокомпонентным смесям, существующим в виде водных растворов с низкими концентрациями.

Известен способ получения препарата для проведения аппликационного кожного теста, основанный на смешивании тестируемого вещества с носителем и растворителем, где в качестве носителя используется расплавленный белый вазелин, а в качестве растворителя используется смесь дистиллированной воды, этилового спирта и ацетона

(RU 2235557 C1, A61K 39/35, 2004 г.)

Однако известный способ не позволяет выявлять наличие гиперчувствительности в тестируемых веществах при проведении аппликационного кожного теста.

Задачей, на решение которой направлено данное изобретение, является разработка способа, который предусматривает выявление реакций гиперчувствительности к тестируемым веществам в виде водных растворов с низкой концентрацией, способных вызывать контактные реакции гиперчувствительности.

Техническим результатом изобретения является получение препарата для проведения аппликационного кожного теста, способного выявлять гиперчувствительность к тестируемым веществам.

Для достижения указанного технического результата в способе получения препарата для проведения аппликационного кожного теста, включающем смешивание тестируемого вещества с носителем и растворителем, согласно изобретению в качестве носителя используют агар-агар, а в качестве растворителя - боратный буфер pH 6,8-7,2, агар-агар в боратном буфере нагревают при перемешивании до полного растворения агар-агара, охлаждают смесь до 40-45°C и вводят тестируемое вещество в количестве 10-50% от общего объема готового препарата.

В качестве тестируемых веществ используют их водные растворы с низкими концентрациями, способные вызывать контактные реакции гиперчувствительности.

Приготовление препарата для проведения кожного аппликационного теста.

Раствор A: 6,25 г H₃BO₃ растворяют в 1 л дистиллированной воды.

Раствор B: 40 г Na₂B₄O₇ растворяют в 1 л дистиллированной воды.

Раствор C: смешивают растворы A и B в соотношении 40:1, устанавливают pH 6,8-7,2.

К 100 мл раствора C прибавляют 1 г агар-агара, нагревают и перемешивают до полного растворения агар-агара при кипении. Раствор агара охлаждают до 40-45°C, прибавляют 10-50% от общего объема водного раствора тестируемого препарата, перемешивают до получения однородной массы.

Изобретение иллюстрируется на следующих примерах.

Пример 1. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к ионам никеля.

Берут следующие ингредиенты:

- H ₃BO₃;

- Na₂B₄ O₇;

- агар-агар;

- воду дистиллированную;

- никель сернокислый кристаллогидрат в качестве тестируемого вещества.

7 г никеля сернокислого кристаллогидрата растворяют в 100 мл дистиллированной воды.

0,625 г H₃BO₃ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г Na₂B₄ O₇ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 6,8. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 40°C. К 1 мл охлажденного раствора прибавляют 1 мл приготовленного раствора никеля сернокислого.

Пример 2. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к аллергенному экстракту полыни.

Берут следующие ингредиенты:

- H₃BO₃;

- Na₂B₄O₇;

- агар-агар;

- воду дистиллированную;

- аллергенный экстракт полыни (10000 pnu/мл).

0,625 г H₃BO₃ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г Na₂B₄O₇ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 7,2. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 45°C. К 1 мл охлажденного раствора прибавляют 0,5 мл аллергенного экстракта полыни.

Пример 3. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к аллергенному экстракту Dermatophagoides pteronyssinus. Берут следующие ингредиенты:

- H₃BO₃;

- Na ₂B₄O₇;

- агар-агар;

- воду дистиллированную;

- аллергенный экстракт Dermatophagoides pteronyssinus (10000 pnu/мл).

0,625 г H₃BO₃ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г Na₂B₄O₇ растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 7,2. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 45°C. К 1 мл полученного агара прибавляют 0,25 мл аллергенного экстракта Dermatophagoides pteronyssinus.

Кожу пациента обрабатывают раствором 70% раствором этилового спирта. В аппликационную ячейку помещают 0,02 мл готового препарата с тестируемым веществом. Ячейку прикрепляют на кожу пластырем для обеспечения полного контакта препарата по всей площади ячейки с кожей. В случае отсутствия активной реакции в ближайшее время, через 48 часов снимают ячейку с препаратом. Первичный осмотр места контакта проводят через 24 часа после снятия ячейки. В случае обнаружения в месте контакта гиперемии, зуда, папулезных высыпаний, образования инфильтрата, делают вывод о наличии гиперчувствительности к тестируемому веществу. Если при первичном осмотре место контакта остается без изменений, то наблюдение продолжают еще в течение 2-4 недель, и если изменений нет, то делают вывод о том, что гиперчувствительность к тестируемому веществу отсутствует.