Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: .....белки из ДНК вирусов – C12N 15/34

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и касается тест-системы и способа для обнаружения РНК вируса болезни Шмалленберг. Предложенная тест-система включает праймер Schm U, имеющий нуклеотидную последовательность 5'-САА ССА GAA GAA GGC САА GA-3', праймер Schm L, имеющий нуклеотидную последовательность 5'-TCT GGC АСА GGA TTT GAG AC-3' и зонд Schm Z, имеющий последовательность 5'-[Hex] CCC CAC САА AAG TAA GAT CGA CAC [BHQ₂]-3'. Предложенный способ предусматривает выделение РНК из биологического материала, постановку полимеразной цепной реакции с использованием указанных праймеров и зонда и амплификацию РНК вируса с детекцией продуктов амплификации в реальном времени. Интерпретацию результатов проводят на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией (Threshold). Представленные изобретения могут быть использованы в ветеринарной вирусологии для выявления генома вируса болезни Шмалленберг. 2 н.п. ф-лы, 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана молекула химерной нуклеиновой кислоты цирковируса свиней (PCV2Gen-1Rep), которая включает молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую цирковирус свиней 2 типа (PCV2), которая содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок Rep цирковируса свиней 1 типа (PCV1). Химерную молекулу нуклеиновой кислоты конструируют посредством замещения гена Rep ORF1 PCV2 геном Rep ORF1 PCV1. Изобретение также включает биологически функциональную плазмиду или вирусный вектор, содержащие уникальные молекулы химерных нуклеиновых кислот, подходящие клетки-хозяева, трансфицированные плазмидой или вектором, инфекционные химерные цирковирусы свиней, которые продуцируют подходящие клетки-хозяева, способ получения иммуногенного полипептидного продукта с использованием новой химеры, вирусных вакцин, которые защищают свинью от вирусной инфекции или синдрома мультисистемного послеотъемного истощения (PMWS), вызванного PCV2, способы защиты свиньи от вирусной инфекции или синдрома мультисистемного послеотъемного истощения (PMWS), вызванного PCV2, способы получения уникальной химеры PCV2Gen-1Rep и подобных. Изобретение дополнительно включает новый способ увеличения уровня репликации и титра PCV2 в клеточной культуре. Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 9 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описаны нуклеиновые кислоты, кодирующие геномы двух новых штаммов свиного цирковируса типа 2В. Эти два новых штамма свиного цирковируса можно использовать для получения вакцины или иммуногенной композиции для иммунизации свиней против синдрома послеотъемного мультисистемного истощения (PMWS). Изобретение может быть использовано в животноводстве для защиты свиней от цирковируса свиней типа 2В. 5 н. и 14 з.п. ф-лы, 6 ил., 11 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Предоставлен улучшенный способ выделения белка, экспрессированного с открытой рамки считывания 2 из цирковируса свиней типа 2. Способ в включает в себя стадии введения рекомбинантного бакуловируса, содержащего кодирующие последовательности открытой рамки считывания 2, в клетки насекомого, содержащиеся в культуральной среде. Далее происходит экспрессия бакуловирусом открытой рамки считывания 2 и выделение экспрессированного белка из супернатанта. Выделение производят приблизительно с 5 суток после инфекции клеток, чтобы позволить значительным количествам рекомбинантного белка экспрессироваться и секретироваться из клеток в культуральную среду. Такие способы обходят дорогостоящие и трудоемкие процедуры выделения, требующие разделения и выделения рекомбинантного белка из внутреннего пространства клеток. 7 н. и 25 з.п. ф-лы, 3 ил., 24 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии ветеринарных препаратов. Вакцина против вируса бешенства представляет собой аллантоисную жидкость куриных эмбрионов. Жидкость содержит гликопротеин вируса бешенства, а также смесь рекомбинантных аденовирусов птиц, несущих ген поверхностного гликопротеина вируса бешенства, один из которых содержит секретируемую форму поверхностного гликопротеина вируса бешенства, а второй - мембраннсвязанную. Взаимодействие гликопротеинов с организмом животных достигается путем перорального введения препарата. Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Разработаны инфекционные клоны, имеющие нуклеотидную последовательность, идентичную вирусам PRRS, таким как VR-2332, Lelystad или другие, и дополнительно необязательно включающие делецию в области ORF1, которая кодирует полипептид nsp2. Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 4 н. и 30 з.п. ф-лы, 12 ил., 6 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Раскрыты синтетические олигонуклеотиды для выявления ДНК вируса Torque teno virus всех известных генотипов. Праймеры объединены в набор для выявления ДНК в крови и других биоматериалах возбудителя латентной вирусной инфекции - вируса Torque teno virus семейства Circoviridae методом полимеразной цепной реакции. Изобретение позволяет достоверно проводить обнаружение указанного вируса в биологическом материале.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к синтетическим олигонуклеотидным праймерам, комплементарным высоко консервативной области гена VP60 генома вируса вирусной геморрагической болезни кроликов, способу выявления вируса вирусной геморрагической болезни кроликов и к тест-системе для выявления РНК вируса вирусной геморрагической болезни кроликов. Предложенное изобретение может быть использовано в ветеринарной вирусологии. Способ выявления вируса вирусной геморрагической болезни кроликов включает пробоподготовку, выделение РЫК из биологического материала. После чего осуществляют постановку полимеразной цепной реакции с использованием праймеров 5'-саа cgt get cca gtt ttg gta cg-3', 5'-att ctg tct ggt tgg ggc gtg t-3'. Далее проводят амплификацию РНК вируса. Затем осуществляют оценку проведения реакции гель-электрофорезом в агарозе, при этом результат реакции считается положительным, если продукт ПЦР соответствует размеру 398 пар оснований. Предложенное изобретение позволяет повысить чувствительность метода, а также сократить время проведения диагностической работы с пробами органов и крови от инфицированных животных. 3 н.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к синтетическим олигонуклеотидным праймерам для выявления субгенотипов 1а и 1b вируса вирусной диареи болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (ВД-БС КРС) и к способу применения синтетических олигонуклеотидных праймеров для выявления субгенотипов 1а и 1b вируса вирусной диареи болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота. Способ может быть использован в ветеринарной вирусологии для дифференциации штаммов и изолятов вируса 1-го генотипа на субгенотипы. Предложенный способ включает проведение ПЦР с парами праймеров SEQ ID NO:1 5'-tcgacgccttaacatgaaggt-3' и SEQ ID NO:3 5'-ccatgtgccatgtacag-3' на субгенотип 1a, SEQ ID NO:2 5'-tcgacgctttggaggacaagc-3' и SEQ ID NO:3 5'-ccatgtgccatgtacag-3' на субгенотип 1b. После чего осуществляют выявления фрагмента ДНК размером 186 н.п. в каждой реакции. Далее делают заключение о наличии в исследуемом материале вируса вирусной диареи болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота субгенотипов 1а и 1b. Предложенное изобретение позволяет быстро проводить дифференциацию штаммов вируса ВД-БС КРС первого генотипа на субгенотипы. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к молекулярной биологии, генетической инженерии и может быть использовано в медицине. Количественную экспресс-идентификацию генома ВИЧ-1 в пробе детектируют с помощью олигонуклеотидных праймеров, комплементарных консервативному участку 5'-LTR-области генома ВИЧ-1, флуоресцентно меченных зондов и РНК-модифицированного фрагмента консервативного участка 5'-LTR-области генома ВИЧ-1 в качестве внутреннего количественного стандарта. Анализ проводят в реальном времени в формате «закрытая пробирка» с помощью калибровочных кривых, полученных с помощью плазмид pVar15-HIV-LTR и pBluSK-HIV-LTR mod, содержащих нативный и модифицированный кДНК-фрагмент вирусного генома из консервативной 5'-LTR-последовательности соответственно. Плазмида pVarl5-HIV-LTR получена на основе плазмиды pVar15. Плазмида pBluSK-HIV-LTR mod получена на основе плазмиды pBluKSM. Применение изобретения позволяет определить наличие ВИЧ-1 в пробе независимо от типа вируса, сочетания типов и присутствия родственных видов. 4 н.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к области медицинской диагностики. Предложен способ для обнаружения ДНК возбудителя Лаймского боррелиоза человека в периферической крови, культуре клеток и клещах. Способ предусматривает выделение ДНК из биологического материала, синтез праймеров, постановку полимеразной цепной реакции с использованием синтезированных праймеров и оценку полученных результатов. При этом используют праймеры BBsl4.F/BBsl4.R 5'-AAGAATACATTAAGTGCGATATT-3', 5'-CAATCCACTTAATTTTTGTGTTAT-3', к участку гена, кодирующего 16S рРНК. Способ является высокоспецифичным, чувствительным, но более простым. Кроме того, предложен набор для осуществления этого способа. Предложенная группа изобретений может быть использована в медицине и молекулярной биологии. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 5 табл.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. Предложены 5 штаммов цирковируса свиней типа II (РСЧ II). Штаммы являются возбудителями послеотъемного мультисистемного синдрома истощения (PMWS) у свиней. Кроме того, предложены различные иммуногенные композиции и вакцины, основанные на этих штаммах, предназначенные для борьбы с PMWS. Также предложены векторы, вирусные препараты, клеточные экстракты, супернатанты клеточных культур, содержащие вирус PCV II или его нуклеотидные или белковые компоненты. Предложен также способ диагностики заражения РСЧ II, а также диагностическая композиция и диагностический набор для его осуществления. Изобретение может быть использовано в ветеринарии для борьбы с PMWS свиней. 37 н. и 141 з.п. ф-лы, 7 ил., 5 табл.

Изобретение относится к области вирусологии и биотехнологии. Предложены олигонуклеотиды, праймеры и зонды на их основе, предназначенные для способа детекции и/или количественного определения нуклеиновых кислот аденовирусов в биологическом образце. Способ предусматривает амплификацию путем ПЦР в реальном времени с помощью предложенных праймеров НЕХ1 и НЕХ2, при этом продукт реакции детектируют с помощью зонда HEX. Предложены также набор реагентов для осуществления такого способа и способы диагностики и селекции, основанные на нем. Предложенная группа изобретений позволяет детектировать за одну реакцию различные серотипы аденовирусов и количественно определять очень незначительные количества. 10 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 ил., 7 табл.

Изобретение относится к комплексам типа катионный липид/протеин/нуклеиновая кислота. Предложен невирусный вектор, содержащий конденсированный комплекс полипептид/нуклеиновая кислота и катионный липид. Комплекс представляет собой необходимую нуклеотидную последовательность и один или несколько вирусных упаковывающих нуклеиновую кислоту полипептидов или их производных. Предложен также сам комплекс полипептид/нуклеиновая кислота, способ получения невирусного вектора и способ встраивания представляющей интерес нуклеиновой кислоты в эукариотическую клетку. Изобретение позволяет повысить эффективность введения нуклеиновых кислот в клетки. Изобретение может быть использовано в генетической инженерии. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 25 ил., 1 табл.