способ получения соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ, способ получения антагониста соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси

Формула изобретения

1. Способ получения соматотропного гормона (СТГ) со сниженным содержанием агрегата его изоформ, который предусматривает отделение изоформ СТГ посредством анионообменного хроматографирования с применением анионообменной смолы для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 10 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что СТГ содержит одну или несколько изоформ СТГ PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9, агрегат, трисульфидную примесь и дефенилаланиновую примесь, неполиэтиленгликолизированную примесь СТГ и свободные молекулы PEG.

3. Способ по п.2, дополнительно включающий стадии:

разделения упомянутых изоформ СТГ на избранные изоформы; и

объединения упомянутых избранных изоформ с получением обогащенного пула упомянутых избранных изоформ.

4. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию объединения, на которой осуществляется объединение дискретных количеств упомянутых изоформ СТГ с получением объединенного СТГ посредством метода, выбранного из группы, включающей электрофорез в капиллярах, электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия, ионообменную хроматографию, гидрофобную хроматографию, анионообменную хроматографию, катионообменную хроматографию, высокоэффективную жидкостную хроматографию с обращенной фазой, высокоэффективную жидкостную гель-хроматографию, афинную хроматографию и их комбинации.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что упомянутый объединенный СТГ содержит одну или несколько PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что объединенная фракция СТГ PEG-4, PEG-5 и PEG-6 содержит по меньшей мере около 70 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ СТГ PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9 и упомянутого агрегата.

7. Способ получения антагониста СТГ со сниженным содержанием агрегата его изоформ, который предусматривает отделение изоформ антагониста СТГ на анионообменной смоле посредством анионообменного хроматографирования для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 6 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.

8. Способ получения антагониста СТГ со сниженным общим суммарным содержанием трисульфидной примеси, дефенилаланиновой примеси и агрегата его изоформ, предусматривающий отделение изоформ антагониста СТГ на анионообменной смоле посредством анионообменного хроматографирования для снижения общего содержания трисульфидной примеси, дефенилаланиновой примеси и упомянутого агрегата до уровня, меньшего либо равного 15 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую примесь и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.

Описание изобретения к патенту

Текст описания представлен в факсимильном виде.