Общие способы получения пептидов: ...афинная хроматография или аналогичная техника, основанная на селективных абсорбционных процессах – C07K 1/22

Предложен способ очистки соединения формулы 1, включающий следующие этапы: (1) загрузку неочищенного соединения 1 в макропористую адсорбционную смолу, (2) промывку макропористой адсорбционной смолы при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды, (3) элюирование при помощи водного раствора, органического растворителя или смешанного раствора органического растворителя и воды. 8 з.п. ф-лы, 7 ил., 12 пр.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложен способ очистки фактора, способствующего заживлению ран, представляющего собой фактор роста гепатоцитов (HGF). Все стадии способа очистки осуществляют в присутствии антитромбина III (AT-III). Согласно предложенному способу осуществляют размораживание замороженного источника, содержащего HGF, и удаление осадка из размороженного источника. Далее полученный раствор, содержащий супернатант и AT-III, приводят в контакт с носителем для аффинной хроматографии на основе иммобилизованного гепарина. Затем отделяют раствор от носителя для аффинной хроматографии. Приводят носитель в контакт с десорбционным буфером с ионной силой, достаточной для десорбции HGF. Собирают десорбционный буфер, содержащий HGF, AT-III и богатый гистидином гликопротеин (HRGP). Также предложены композиции для заживления ран, содержащие очищенный указанным способом HGF, AT-III и/или HRGP. Изобретения позволяют повысить постадийный выход фактора роста гепатоцитов, при этом в присутствии АТ-III фактор роста гепатоцитов сконцентрирован в элюате. 6 н. и 20 з.п. ф-лы, 2 табл., 6 пр.

Изобретения относятся к области биотехнологии. Предложены способы получения выделенного биотоплива и очищенного белкового продукта из сырья, которое получено из растительного материала или материала животного происхождения. При этом биотопливо является маслом или спиртом. Способ получения масла и очищенного белкового продукта включает воздействие на сырье с целью получения белкового остатка и выделение масла. Затем полученный белковый остаток суспендируют с получением водной суспензии и обрабатывают в колонне путем адсорбции на взвешенном слое. Белковый остаток элюируют с колонны с получением очищенного белкового продукта. Способ получения спирта и очищенного белкового продукта включает воздействия на указанное сырье с целью высвобождения способных к ферментации сахаров и получение белкового остатка. Затем ферментируют полученные сахара с получением спирта и выделяют спирт. Далее суспендируют белковый остаток с получением водной суспензии. Обрабатывают полученную суспензию в колонне путем адсорбции на взвешенном слое. Затем белковый остаток элюируют с колонны с получением очищенного белкового продукта. При этом выход полученного белка в каждом из способов представляет собой эквивалент по меньшей мере 10 грамм 100%-но чистого белкового продукта на кг масла или спирта соответственно. Способы имеют высокую степень производительности на единицу затраты, требуют минимального числа стадий манипулирования и совместимы с автоматизированными и полуавтоматизированными системами по выделению биотоплива и очистке белкового продукта. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для выделения плазминогена или плазмина. Смесь, содержащую фибриноген и плазминоген или плазмин, наносят на хроматографическую колонку, содержащую нерастворимую матрицу для аффинной хроматографии, ковалентно сшитую с транексамовой кислотой. Затем проводят элюирование плазминогена или плазмина с матрицы для аффинной хроматографии водным раствором, содержащим достаточное количество лиганда, конкурирующего с плазмином или плазминогеном за связывающие участки указанной матрицы, связанной с транексамовой кислотой. При этом транексамовая кислота ковалентно связана с указанной матрицей через линкер, который находится между матрицей и транексамовой кислотой и длина которого составляет более трех атомов углерода. Изобретение позволяет повысить эффективность выделения плазминогена или плазмина в присутствии фибриногена из смеси. 9 з.п. ф-лы, 13 табл., 1 ил., 6 пр.

Описан материал твердого носителя для выделения антител и их производных. На твердом носителе ковалентно иммобилизован аффинный лиганд, который содержит одну или несколько гидрофобных функциональных групп и одну или несколько катионных функциональных групп. По меньшей мере, одна гидрофобная функциональная группа отделена, по меньшей мере, от одной катионной функциональной группы расстоянием между связями от 5 Å до 20 Å. При этом лиганд имеет молекулярную массу не более 1000 Да, состоит из менее чем 5 остатков, обязательно содержащих структуру Х1-Х2-Х3. Указанная структура связана с твердым носителем линкером. Каждый из X1, Х2, Х3 выбирают из соответствующей группы соединений. Описаны также варианты твердого носителя со сходной структурой, но без линкера. Предложен также способ выделения антител или их производных на основе твердого носителя. Аффинная смола имеет емкость связывания более 5 мг моноклонального антитела на мл аффинной смолы и может найти применение в очистке антител и их производных. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного фактора свертываемости крови VIIa человека. Способ очистки фактора VIIa человека предусматривает создание афинного сорбента, включающего иммобилизацию антител к фактору VIIa на нерастворимой матрице, сорбцию фактора VIIa на аффинном сорбенте, последующую элюцию фактора VIIa и контроль корректности его посттрансляционной модификации и конформации. Получение аффинного сорбента достигается оптимальным сочетанием NHS-activated Sepharose 4FF как твердой основы и комбинации моноклональных антител, продуцируемых клонами 4F4 и 6В8 культивируемой гибридомы, отобранными по наиболее высокой степени выхода моноклональных антител к эпитопам кальцийсвязывающего домена в составе фактора VIIa. Контроль корректности посттрансляционной модификации и конформации фактора VIIa осуществляют иммуноферментным анализом с использованием планшет, покрытых моноклональными антителами, продуцируемыми клоном 5D9. 95%-связывание аффинного сорбента с фактором VIIa достигается через 5 минут контакта при одном цикле взаимодействия с сорбентом. Изобретение обеспечивает сокращение времени очистки фактора VIIa и затрат на этот процесс, содержит 4 примера. 4 ил., 7 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу очистки белка рекомбинантной стафилокиназы. Предложенное изобретение может быть использовано в фармацевтической промышленности. Способ включает суспендирование клеток штамма Е.coli MZ08 - продуцента рекомбинантной стафилокиназы, характеризующейся аминокислотной SEQ ID NO:1, в фосфатном буферном растворе. Проводят гомогенизацию и центрифугирование полученного супернатанта, затем хроматографию в два этапа, на первом этапе осуществляют ионообменную хроматографию на колонке, заполненной DE-целлюлозой с получением фракции, обогащенной стафилокиназой. Затем полученную фракцию разбавляют раствором хлорида натрия и осуществляют второй этап с помощью металлхелатирующей аффинной хроматографии. Предложенное изобретение позволяет осуществлять очистку белка рекомбинантной стафилокиназы с высокой чистотой.

Изобретение относится к медицине. Исходный раствор альбумина при значении рН от 5 до 9 вводят в контакт с твердым адсорбентом, сродство которого к, по меньшей мере, части используемых молекул стабилизаторов выше, чем сродство альбумина к соответствующим молекулам стабилизаторов, и отделяют от адсорбента. Осуществляют применение водного раствора альбумина для приготовления средства, предназначенного для лечения гипоальбуминемии, в качестве кровезаменителя, соответственно плазмозаменителя, для экстракорпорального очищения крови путем афереза или альбуминового диализа, для улучшения функции системы кровообращения, почек и/или головного мозга пациента. Изобретение позволяет получить раствор альбумина с уменьшенным содержанием стабилизатора и с повышенной связывающей способностью. 7 н. и 17 з.п. ф-лы, 2 табл., 8 ил.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ очистки белка, имеющего область Fc от исходной жидкости путем адсорбции такого белка на веществе, связывающем Fc, таком как Белок А или Белок G, с последующей промывкой буферным раствором, содержащим соль бивалентного катиона, с целью удаления примесей и последующим выделением белка из вещества, связывающего область Fc. Способ позволяет эффективно очищать белок, имеющий область Fc от исходной жидкости, содержащей указанный белок и одну или более примесей, выбранной из группы, состоящей из: разновидностей прочтения интронов (IRT), разновидностей с пониженным содержанием дисульфидных связей (UDB) и разновидностей с низкой молекулярной массой (LMW). 40 з.п. ф-лы, 12 табл.

Настоящее изобретение относится к хроматографическому лиганду, представляющему собой N-бензил-N-метилэтаноламин, а также к способу получения сепарационной матрицы, содержащей указанный лиганд, и хроматографической колонки для очистки антител. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 4 табл., 6 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения пэгилированного соматотропного гормона. Способ получения соматотропного гормона (СТГ) со сниженным содержанием агрегата его изоформ предусматривает отделение изоформ СТГ посредством анионообменного хроматографирования с применением анионообменной смолы для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 10% (мас.), исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата. При этом осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу. Загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющую не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой. Изобретение позволяет получить соматотропный гормон со сниженным содержанием агрегата его изоформ, а также его антагонист со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 5 ил., 8 табл.

Изобретение относится к способу выделения биологически активного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF). Выделение осуществляют аффинной хроматографией с иммобилизованным металлом. Способ может быть осуществлен при нативных условиях. Получают биологически активный G-CSF с чистотой выше 95%. Дополнительно применяют две дополнительные хроматографические стадии, катионообменную хроматографию и гель-фильтрацию, для удаления следовых количеств примесей. Способ приводит к получению G-CSF с большим выходом и чистотой выше 99%. Описанный способ является особенно подходящим для промышленного получения G-CSF. 15 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано в фармацевтической промышленности для очистки смесей природного происхождения, содержащих плазминоген и фибриноген, от плазминогена. Плазминоген удаляют из смеси, содержащей плазминоген и фибриноген, с помощью нерастворимой матрицы для хроматографии, ковалентно сшитой с транексамовой кислотой через аминогруппу с помощью линкера, длина которого составляет более трех атомов углерода. Для этого указанную смесь наносят на хроматографическую колонку, содержащую указанную нерастворимую матрицу. Затем колонку промывают нейтральным раствором, содержащим соли, и собирают несвязавшийся материал. Применение изобретения позволяет расширить технические возможности очистки смесей природного происхождения, содержащих плазминоген и фибриноген, от плазминогена с сохранением при этом исходного количества фибриногена в смеси. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 ил., 13 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ включает двухэтапное приготовление комплекса, состоящего из выделяемого и очищаемого белка с иммобилизованным на сорбенте пропептидом этого белка, выделение белка элюцией из полученного комплекса. На первом этапе приготовления комплекса получают иммобилизованный на сорбенте пропептид выделяемого и очищаемого белка. На втором этапе приготовления комплекса осуществляют контакт выделяемого и очищаемого белка с иммобилизованным на сорбенте его пропептидом путем пропускания раствора этого белка через заполненную колонку. Способ позволяет расширить ассортимент средств, применяемых для выделения и очистки белков, упростить процесс, повысить его эффективность за счет повышения выхода целевого продукта. 6 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения высокоочищенного белка альфа-фетопротеина. Для получения высокоочищенного белка альфа-фетопротеина из сыворотки крови человека на последней стадии окончательной доочистки используют аффинный сорбент, представляющий собой рекомбинантный белок G стрептококка, ковалентно конъюгированный с сефарозой. Способ позволяет увеличить чистоту выделяемого альфа-фетопротеина без введения дополнительных стадий в технологию очистки.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"http://www.biosan-nsk.ru/applications/catalogue/applications/catalogue_reagent_.php?cat=6.