композиции для лечения боли и/или воспаления

Формула изобретения

1. Применение пептида общей формулы (I)



его стереоизомеров, их смесей и его косметически и фармацевтически приемлемых солей, где

АА представляет собой последовательность из 6-40 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26;

R₁ представляет собой Н, ацетил, трет-бутаноил, гексаноил, 2-метилгексаноил, циклогексанкарбоксил, октаноил, деканоил, лауроил, миристоил, пальмитоил, стеароил, олеоил, линолеоил и полимер полиэтиленгликоля; и

R₂ представляет собой -NR₃R ₄, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, гексила, додецила и гексадецила,

для лечения боли и/или воспаления.

2. Применение по п.1, где полимер полиэтиленгликоля представляет собой



где n может быть равен 1-100.

3. Применение по п.1, где пептид общей формулы (I), его стереоизомеры, их смеси или его косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в систему доставки или систему с длительным высвобождением, выбранную из группы, состоящей из липосом, милликапсул, микрокапсул, нанокапсул, губок, везикул, мицелл, миллисфер, микросфер, наносфер, липосфер, микроэмульсий, наноэмульсий, милличастиц, микрочастиц и наночастиц.

4. Применение по п.1, где пептид адсорбирован на органическом полимере или твердом минеральном носителе, выбранном из группы, состоящей из талька, бентонита, диоксида кремния, крахмала или мальтодекстрина.

5. Применение по п.1, где пептид включен в композицию, выбранную из группы, состоящей из кремов, гетерогенных эмульсий, безводных композиций, водных дисперсий, масел, молочка, бальзамов, пенок, лосьонов, гелей, водно-спиртовых растворов, жидких мазей, сывороток, мыл, шампуней, мазей, муссов, притираний, порошков, мелков, карандашей, спреев и аэрозолей.

6. Применение по п.1, где пептид включен в ткань, нетканый материал или медицинское устройство.

7. Применение по п.1, где пептид включен в композицию, содержащую эффективное количество по меньшей мере одного активного ингредиента, выбранного из группы, состоящей из антиоксиданта, ингибитора NO-синтазы, агента, расслабляющего кожу, противовоспалительного агента, обезболивающего агента, антимикробного агента, противогрибкового агента или их смесей.

8. Применение по любому из пп.1-7, где пептид вводят местным, энтеральным или парентеральным способом.

9. Применение по п.1, где боль и/или воспаление выбраны из группы, состоящей из невропатической боли, воспалительной боли, висцеральной боли, боли в животе, боли в пищеварительной системе, боли в дыхательной системе, боли в мочеполовой системе, боли в эндокринной системе, боли в сердце, боли в поджелудочной железе, боли в кишечнике, боли в желудке, боли в селезенке, боли в кровеносных сосудах, синдрома раздраженной толстой кишки, головной боли напряжения, головной боли, связанной с синуситом, мигрени, боли в глазах, сухого кератита, послеоперационной боли, послеоперационной боли, обусловленной хирургическими разрезами, послеоперационной боли, обусловленной введением имплантатов в кость, послеоперационной боли, обусловленной замещением кости, послеоперационной боли, обусловленной инфекциями, боли, обусловленной раком, боли, обусловленной раком кости, боли, связанной с доброкачественными опухолями кости, боли, связанной с остеоид-остеомами, боли, связанной с остеобластомами, боли, обусловленной лечением рака, скелетно-мышечной боли, фибромиалгии, невралгии, шейной боли, связанной с шейной дистонией, боли в спине, люмбаго, ишиаса, нейрогенного воспаления, раздражения кожи, чувствительной кожи, атопического дерматита, контактного дерматита, пеленочного дерматита, экземы, артрита, ревматоидного артрита, остеоартрита, постгерпетической невралгии, периферических невропатий, фантомной боли, аллодинии, боли, обусловленной синдромом запястного канала, жгучей боли, парестезии, лицевой боли, невралгии тройничного нерва, невропатической боли, обусловленной диабетом, боли, связанной с нанесением или удалением татуировок, боли, обусловленной бурситами большого пальца стопы, боли в яичке, миофасциальной боли, боли в мочевом пузыре, боли в мочевых путях, боли в женских наружных половых органах, вагинальной боли, боли в мошонке, боли в промежности, тазовой боли, боли или раздражения кожи после хирургического вмешательства, после лечения с применением терапии импульсным светом (интенсивным импульсным светом (IPL)), после лечения с применением терапии импульсным монохроматическим светом (лазером), после лечения химическими отшелушивающими агентами или после чрезмерного воздействия агрессивных внешних агентов.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к композиции для лечения боли и/или воспаления, предпочтительно для лечения острой боли, хронической боли, воспалительной боли, боли, вызванной раком или лечением рака, висцеральной боли, невропатической боли, постгерпетической невралгии, диабетической невропатии, невралгии тройничного нерва, мигрени и фибромиалгии. Данная композиция содержит эффективное количество по меньшей мере одного пептида, имеющего последовательность, имеющую происхождение из аминокислотной последовательности белка SNAP-25, или его косметически или фармацевтически приемлемых солей.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Боль является серьезной социальной и экономической проблемой. Согласно подсчетам, более двух миллионов людей ежедневно становятся нетрудоспособными, страдая от транзиторных или хронических болевых ощущений [Williams, M., Kowaluk, E.A. and Americ S.P (1999) "Emerging Molecular approaches to pain therapy" J. Med. Chem. 42, 1481-1500]. Наглядными примерами является повышенная чувствительность к боли, которую испытывают пациенты, страдающие от рака, мигрени, артрита, ожогов, травм, и в связи с хирургическими вмешательствами. Боль без эффективного лечения может быть изнуряющей для людей, ограничивая их возможности, уменьшая их подвижность, вызывая расстройства сна и значительно ухудшая качество их жизни. Несмотря на серьезность проблемы, фармацевтический арсенал для борьбы, предотвращения и/или минимизации ее симптомов и его развитие неожиданно ограничены, частично ввиду отсутствия конкретных терапевтических мишеней для воздействия и незнания метаболических путей, опосредующих трансдукцию боли.

Целостность нашего организма обеспечена правильным связанным действием двух высоко специализированных систем: иммунной системы и нервной системы. В случае повреждения тканей, вызванного вредными стимулами физической или химической природы, обе системы функционируют во взаимодействии, приводя к сенсибилизации пораженной области с целью остановки распространения повреждения и обеспечения быстрого восстановления поврежденной области [Belmonte, С. and Cervero, F. Eds. (1996) "Neurobiology of Nociceptors" Oxford University Press]. Этот процесс называют воспалением, и оно может быть одного из двух типов, либо гуморальным, если оно опосредовано главным образом иммунной системой, или нейрогенным, если оно вызвано нервной системой. В любом случае одним важным аспектом является то, что оба типа воспаления усиливают друг друга, усиливая тем самым восприятие боли, сопровождающей воспалительный процесс.

Болевое ощущение появляется при активации периферических окончаний группы чувствительных нейронов, известных как ноцицепторные нейроны, или ноцицепторы, химическими, механическими или температурными вредными стимулами. Ноцицепторные нейроны передают информацию о повреждении тканей в центры обработки болевых ощущений в спинном мозге и головном мозге [Belmonte, С. and Cerver6, F. Eds. (1996) "Neurobiology of Nociceptors" Oxford University Press; Baranauskas, G. and Nistri, A. (1998) "Sensltization of pain pathways in the spinal cord: cellular mechanisms" Prog. Neurobiol. 54, 349-365; Richardson, D.J. and Vasko, M.R. (2002) "Cellular mechanisms of neurogenic inflammation" J. Pharmacol. Exp. Ther. 302, 839-845J. Важным свойством ноцицепторов является то, что хотя они и являются главным образом первичными афферентными нейронами, при активации они способны выполнять эфферентную функцию, высвобождая про-болевые и провоспалительные молекулы, такие как субстанция Р (SP), пептид, родственный кальцитонину (CGRP), гистамин, аденозинтрифосфат (АТР), глутамат и брадикинин (ВК). Эти молекулы стимулируют аутокринную и паракринную активацию соседних нейронов, а также клеток других типов, таких как тучные клетки, нейтрофилы и тромбоциты. При активации окружающие клетки, не являющиеся нейронами, высвобождают нейротрофины (фактор роста нервов (NGF)), цитокины (фактор некроза опухоли ( -TNF), интерлейкин-1 (IL1- ), интерлейкин-6 (IL-6)), простагландины, лейкотриены и протоны, придающие воспалительному экссудату кислотные свойства. Все эти факторы в свою очередь действуют на ноцицепторы, усиливая местное воспаление или нейрогенное воспаление, изменяя чувствительность ноцицепторов или периферическую сенсибилизацию и приводя к изменениям восприятия стимулов, воздействующих на поврежденную область, как например гипералгезии, которую определяют как ненормально увеличенный ответ на незначительно вредный стимул, такой как невысокие температуры 35-40°С, или аллодинии, которую определяют как феномен болезненного восприятия безвредных стимулов, таких как легкий ветер [Belmonte, С. and Cerver6, F. Eds. (1996) "Neurobiology of Nociceptors" Oxford University Press; Baranauskas, G. and Nistri, A. (1998) "Sensitization of pain pathways in the spinal cord: cellular mechanisms" Prog. Neurobiol. 54, 349-365; Richardson, D.J. and Vasko, M.R. (2002) "Cellular mechanisms of neurogenic inflammation" J. Pharmacol. Exp. Ther. 302, 839-845; Brune, К. and Handworker, H.O. Eds. (2004) "Hyperalgesia: molecular mechanisms and clinical implications" Progress in Pain Research and Management, vol 30. IASP Press. Seattle]. Постоянная возбудимость периферических ноцицепторов приводит к изменениям в синапсах на уровне спинного мозга, что приводит к процессу центральной сенсибилизации, который в свою очередь способствует усилению восприятия боли в воспаленной области [Richardson, D.J. and Vasko, M.R. (2002) "Cellular mechanisms of neurogenic inflammation" J. Pharmacol. Exp. Ther. 302, 839-845; Brune, К. and Handworker, H.O. Eds. (2004) "Hyperalgesia: molecular mechanisms and clinical implications" Progress in Pain Research and Management, vol 30. IASP Press. Seattle].

Молекулярные и клеточные основы нейрогенного воспаления и их регуляция медиаторами воспаления в значительной степени неизвестны, главным образом, ввиду недостаточной информации о молекулярной идентичности многих вовлеченных рецепторов и неясности сигнальных путей, вовлеченных в функционирование ноцицепторов. Тем не менее, известно, что механизмы, посредством которых компоненты воспалительного экссудата изменяют возбудимость нейронов, могут действовать непосредственно через взаимодействие с ионными каналами на поверхности ноцицепторов или косвенно через внутриклеточные каскады [Richardson, D.J. and Vasko, M.R. (2002) "Cellular mechanisms of neurogenic inflammation" J. Pharmacol. Exp. Ther. 302, 839-845; Brune, К. and Handworker, H.O. Eds. (2004) "Hyperalgesia: molecular mechanisms and clinical implications" Progress in Pain Research and Management, vol 30. IASP Press. Seattle]. Таким образом, BK, NGF и интерлейкины оказывают свои действия, активируя метаболические пути, активирующие киназные белки протеинкиназу С (РКС) и протеинкиназу А (РКА), которые могут изменять мембранные рецепторы, осуществляющие трансдукцию внешних стимулов, и/или модулирование экспрессии генов нейронов (особенно при хронических воспалительных процессах). Рецепторы-мишени внутриклеточных сигнальных путей включают потенциал-зависимые ионные Na⁺-каналы и ванилоидный рецептор TRPV1, сенсорный интегратор химических и температурных вредных стимулов, а также механочувствительные каналы. Активация этих рецепторов запускает потенциалы действия, стимулирующие афферентную и эфферентную функцию ноцицепторов, приводя к усилению периферической и центральной сенсибилизации. Таким образом, все эти наблюдения демонстрируют ключевую роль нейрогенного или неврологического воспаления при острых и хронических воспалительных процессах. Следовательно, соединения, уменьшающие интенсивность нейрогенного воспаления, будут обладать противовоспалительной и обезболивающей активностью. Так, например, антагонисты вовлеченных нейронных рецепторов, таких как TRPV1, Nа⁺-каналы, рецепторы брадикинина или пуринергические (purinegenic) рецепторы, будут действовать как мощные противовоспалительные и/или обезболивающие агенты. Доказательствами этого являются антагонисты рецептора TRPV1 [Garcia-Martinez, С., Planells-Cases, R., Fernandez, A.M. Royo, M., Albericio, F., Messeguer, A., Perez-Paya, E., СаггеПо, С. and Ferrer-Montiel, A. (2003) "Small molecules targeting the TRPV1 complex as new drugs for pain management" Drugs of the Future 28, 15-23].

Несмотря на эти знания, современные противовоспалительные и/или обезболивающие соединения ограничены нестероидными противовоспалительными лекарственными средствами (NSAID), такими как аспирин или ибупрофен, и наркотическими лекарственными средствами, такими как морфин. NSAID имеют побочные эффекты, ограничивающие их применение; с одной стороны, они имеют предел активности, после которого увеличение дозы не приводит к уменьшению боли, с другой стороны, они также могут вызывать раздражение в кишечном тракте, и по этой причине их длительное применение может приводить к развитию язвы желудка. Это несомненно важно для пожилых пациентов, часто принимающих NSAID на ежедневной основе для лечения хронических артритических патологических состояний. К сожалению, опиоиды также имеют нежелательные побочные эффекты, такие как запор, угнетение дыхательной системы и психоактивные эффекты, такие как эйфория, седативный эффект и привыкание. Эти побочные эффекты возникают при использовании доз, сходных с дозами, используемыми при лечении, так что дозы, которые можно вводить пациентам, сильно ограничены, и это означает, что их применение часто относят к лечению пациентов с неизлечимыми заболеваниями.

Таким образом, существует значительная потребность в увеличении существующего фармакологического арсенала для лечения боли.

Однако, в дополнение к действию на уровне нейронных рецепторов, молекулярные основы нейрогенного воспаления также включают дополнительную терапевтическую мишень, как например блокада или ингибирование высвобождения провоспалительных (или про-болевых) нейрогенных веществ, таких как CGRP, субстанция Р, L-глутамат, АТР, гистамин и тому подобные, обеспечивающих стимуляцию иммунной и нервной систем. Высвобождение про-болевых нейрогенных веществ происходит посредством механизма экзоцитоза, зависимого от катиона Ca²⁺ и опосредованного белками SNARE [Bennett, M.K. and Scheller, R.H. (1993) "The molecular machinery for secretion is conserved from yeast to neurons" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 2559-2563; Sudhof, T.C. (1995) "The synaptic vesicle cycle: a cascade of protein-protein interactions" Nature 375, 645-653; Yang, Y., Xia, Z., and Liu, У. (2000) "SNAP25 functional domains in SNARE core complex assembly and glutamate release of cerebellar granule cells" J. Biol. Chem. 275, 29482-29487; Brunger, A.T. (2001) "Structure of proteins involved in synaptic vesicle fusion in neurons" Annu. Rev. Biophys. Biolmof. Struct. 30, 157-171; Chen, Y.A. and Scheller, R.H. (2001) "SNARE-mediated membrane fusion" Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2, 98-106].

В современном уровне техники известно, что подкожная инъекция ботулотоксина А, мощного ингибитора нейронного экзоцитоза, разрушающего белок SNAP-25 [Bennett, M.K. and Scheller, R.H. (1993) "The molecular machinery for secretion is conserved from yeast to neurons" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 2559-2563; Sudhof, T.C. (1995) "The synaptic vesicle cycle: a cascade of protein-protein interactions" Nature 375, 645-653], уменьшает боль, вызванную внутриподошвенным введением химического раздражителя формалина [Cui, М., Khanijou, S., Rubino, J. and Aoki, K.R. (2004) "Subcutaneous administration of botulinum toxin A reduces formalin-induced pain" Pain 107, 125-133]. Разработка различных серотипов ботулотоксина для лечения различных типов боли известна в современном уровне техники, как например, без ограничения, терапевтические применения, описанные, среди прочего, в патентах US 7381700, US 7374769, US 7361358, US 7294339, US 7255866, US 7211262, US 7172763, US 7091176, US 7067137, US 6887476, US 6869610, US 6838434, US 6776992, US 6641820, US 6623742, US 6565870, US 6500436, US 6464986, US 6458365, US 6423319, US 6372226, US 6333037, US 6235289, US 6113915 и US 5714468.

Тем не менее, токсичность, присущая ботулотоксину, приводит к тому, что его введение в широком диапазоне доз включает нежелательные побочные эффекты, такие как иммуногенные ответы, головные боли, тошнота, паралич или слабость мышц, дыхательная недостаточность и, в самых крайних случаях, смерть субъекта, проходящего лечение [PDA News, February 8, 2008, "PDA Notifies Public of Adverse Reactions Linked to Botox Use"; Cote, T.R., Mohan, A.K., Polder, J.A., Walton, M.K. and Braun, M.M. (2005) "Botulinum toxin type A injections: Adverse events reported to the US Food and Drug Administration in therapeutic and cosmetic cases" J. Amer. Acad. Derm. 53 (3), 407-415]. Эти тяжелые побочные эффекты, вместе с высокой стоимостью лечения, сильно ограничивают применение ботулотоксина для лечения боли и/или воспаления, относя его к применениям при хронических состояниях и/или патологических состояниях, от которых не существует подходящего лечения. По этой причине существует потребность в обнаружении более безопасного альтернативного лечения соединениями, имитирующими действие ботулотоксина, но не вызывающими иммунных реакций, имеющими меньше побочных эффектов и менее дорогими в получении.

Автор настоящего изобретения обнаружил, что существуют соединения, которые могут демонстрировать противовоспалительную и/или обезболивающую активность, препятствуя образованию SNARE-комплекса, необходимого для нейронного экзоцитоза, и решить проблемы, обусловленные лечением ботулотоксином. В современном уровне техники известно, что определенные пептиды, имеющие происхождение из последовательностей белков, образующих SNARE-комплекс, могут ингибировать нейронный экзоцитоз, такие как, например, пептиды, имеющие происхождение из N-концевых и С-концевых доменов белка SNAP-25 [Apland, J.P., Biser, J.A., Adier, M., Ferrer-Montiel, A.V., Mental, M., Canaves, J.M., and Filbert, M.G. (1999) "Peptides that mimic the carboxy-terminal domain of SNAP-25 block acetylcholine release at an aplysia synapse" J. Appl. Toxicol. 19, Suppl. 1: S23-S26; Mehta, P.P., Battemger, E., and Wilson, M. (1996) "SNAP-25 and synaptotagmin involvement in the final Ca²⁺-dependent triggering of neurotransmitter exocytosis" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 10471-10476; Ferrer-Montiel, A.V., Gutierrez, L.M., Apland, J.P., Canaves, J.M., Gil, A., Viniegra, S., Biser, J.A., Adier, M., and Montal, M. (1998) "The 26-mer peptide released from cleavage by botulinum neurotoxin E inhibits vesicle docking" FEBS Lett. 435, 84-88; Gutierrez, L.M., Canaves, J.M., Ferrer-Montiel, A.V., Reig, J.A., Montal, M. and Viniegra, S. (1995) "A peptide that mimics the carboxy-terminal domain of SNAP-25 blocks Ca²⁺-dependent exocytosis in chromaffin cells" FEBS Lett. 372, 39-43; Gutierrez, L.M., Viniegra, S., Rueda, J., Ferrer-Montiel, A.V., Canaves, J.M., and Montal, M. (1997) "A peptide that mimics the C-tenninal sequence of SNAP-25 inhibits secretory vesicle docking in chromaffin cells" J. Biol. Слет.272, 2634-2639; Blanes-Mira, С, Valera, E., Femandez-Ballester, G., Merino, J.M., Viniegra, S., Gutierrez, L.M., Perez-Paya, E., and Ferrer-Montiel, A. (2004) "Small peptides patterned after the N-terminus domain of SNAP-25 inhibit SNARE complex assembly and regulated exocytosis" J. Neurochem. 88, 124-135], пептиды, имеющие происхождение из аминокислотной последовательности синтаксина [Martin, F., Salinas, E., Vazquez, J., Soria, В., and Reig, J.A. (1996) "Inhibition of insulin release by synthetic peptides show that the H3 region at the C-terminal domain of syntaxin-1 is crucial for Ca²⁺-but not for guanosine 5'-[gamma-thio]thriphosphate-induced secretion" Biochem. J. 320, 201-205], синаптобревина [Comille, F., Deloye, F., Foumie-Zaluski, M.C., Roques, B.P. and Poulain, B. (1995) "Inhibition of neurotransmitter release by synthetic proline-rich peptides shows that the N-terminal domain of vesicle-associated membrane protein/synaptobrevin is critical for neuro-exocytosis" J. Biol. Chem. 270, 16826-16830], синаптотагмина [Mehta, P.P., Battemger, E., and Wilson, M. (1996) "SNAP-25 and synaptotagmin involvement in the final Ca²⁺-dependent triggering of neurotransmitter exocytosis" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 10471-104], и белка снапина (Snapin) [llardi, J.M., Mochida, S., and Sheng, Z.H. (1999) "Snapin: A SNARE associated protein implicated in synaptic transmission" Nat. Neurosci. 2, 119-124]. Сходным образом, рациональным конструированием или сканированием синтетических химических библиотек были также получены синтетические пептиды, которые могут препятствовать образованию SNARE-комплекса, ингибируя нейронный экзоцитоз [Blanes-Mira, С., Pastor, M.Т., Valera, E., Femandez-Ballester, G., Merino, J.M., Gutierrez, L.M., Perez-Paya, £., and Ferrer-Montiel, A. (2003) "Identification of SNARE complex modulators that inhibit exocytosis form an a-helix-constrained combinatorial library" Biochem J. 375, 159-166].

Промышленное применение соединений данного типа ограничено. В косметической промышленности предприняты значительные усилия для разработки соединений, имитирующих действие ботулотоксинов, для исключительного применения в лечении и предотвращении образования мимических морщин [Blanes-Mira, С., Clemente, J., Joe/as, G., Gil, A., Femandez-Ballester, G., Ponsati, В., Gutierrez, L.M., Perez-Paya, E. and Ferrer-Montiel, A. (2002) "A synthetic hexapeptide (Argireline®) with anti-wrinkle activity" Int. J. Cosmet. Sci. 24, 303-310]. Конкретно, в патентных заявках ЕР1180524 А1 и WO 2008/049945 от Lipotec, S.A., описаны пептиды, имеющие происхождение из N-концевого фрагмента белка SNAP-25, свободные или модифицированные в их N- и/или С-концевых областях, обладающие эффектом против морщин, и в международной заявке WO 97/34620 также описаны пептиды, имеющие происхождение из аминокислотной последовательности белка SNAP-25, в частности, его С-конца, или синаптобревина, или синтаксина, способные ингибировать нейронный экзоцитоз.

Ни один из описанных выше патентов не относится ни к применению пептидов, имеющих происхождение из белка SNAP-25, в качестве обезболивающего и/или противовоспалительного агента, ни, в частности, к применению пептидов, имеющих происхождение из белка SNAP-25, для лечения боли и/или воспаления.

Согласно данному изобретению предложено решение существующих потребностей, включающее демонстрацию того, что пептиды, имеющие происхождение из белка SNAP-25, блокирующие нейронный экзоцитоз, являются противовоспалительными и/или обезболивающими.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно данному изобретению предложено простое, эффективное и надежное решение для лечения боли и/или воспаления, включающее применение композиции, содержащей по меньшей мере один пептид, имеющий последовательность из 3-40 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность белка SNAP-25, определенную SEQ ID NO:1.

Следовательно, первый аспект данного изобретения относится к композиции для лечения боли и/или воспаления, содержащей эффективное количество по меньшей мере одного пептида общей формулы (I);

его стереоизомеров и их рацемических или нерацемических смесей, и его косметически или фармацевтически приемлемых солей, где

АА представляет собой последовательность из 3-40 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1;

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного гетероциклила, замещенного или незамещенного гетероарилалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного аралкила и R₅-С(О)-; и

R₂ выбран из группы, состоящей из -NR₃R ₄, -OR₃ и -SR₃, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного гетероциклила, замещенного или незамещенного гетероарилалкила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного аралкила;

где R₅ выбран из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного аралкила, замещенной или незамещенной гетероциклической группы и замещенного или незамещенного гетероарилалкила.

В одном определенном воплощении композиция для лечения боли и/или воспаления представляет собой косметическую или фармацевтическую композицию.

В другом определенном воплощении АА представляет собой последовательность из 3-30 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры пептидов, представленных общей формулой (I), представляют собой структуры, где

R₁ представляет собой Н, замещенную или незамещенную нециклическую алифатическую группу, имеющую 2-24 атомов углерода, замещенную или незамещенную алициклильную группу, имеющую 2-24 атомов углерода, или R₅-C(O)-, где R₅ представляет собой замещенную или незамещенную нециклическую алифатическую группу, имеющую 1-24 атомов углерода, или замещенную или незамещенную алициклильную группу, имеющую 1-24 атомов углерода; и

R₂ представляет собой -NR₃R₄ или -ОR₃, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, имеющей 1-24 атомов углерода, и замещенной или незамещенной алициклильной группы, имеющей 1-24 атомов углерода.

В другом определенном воплощении наиболее предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₁ представляет собой полимер полиэтиленгликоля. Еще более предпочтительные структуры представляют собой структуры, где полимер полиэтиленгликоля представляет собой

,

где n может варьировать от 1 до 100 и наиболее предпочтительно может варьировать от 1 до 5.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₁ представляет собой Н, ацетил, трет-бутаноил, гексаноил, 2-метилгексаноил, циклогексанкарбоксил, октаноил, деканоил, лауроил, миристоил, пальмитоил, стеароил, олеоил и линолеоил.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, гексила, додецила и гексадецила.

Пептиды, включенные в композицию по данному изобретению, могут существовать в форме стереоизомеров или смесей стереоизомеров; например, составляющие их аминокислоты могут иметь L-, D-конфигурацию или быть рацемическими независимо друг от друга. Таким образом, возможно получение смесей изомеров, а также рацематов или смесей диастереомеров либо чистых диастереомеров или энантиомеров, в зависимости от числа асимметрических атомов углерода и того, какие изомеры или смеси изомеров присутствуют. Предпочтительные структуры пептидов, включенных в композицию по изобретению, представляют собой чистые изомеры, то есть, энантиомеры или диастереомеры.

В контексте данного изобретения термин «нециклическая алифатическая группа» использован в данном изобретении для включения, например, без ограничения, алкильных, алкенильных и алкинильных групп, линейных или разветвленных.

Термин «алкильная группа» относится в данном изобретении к линейной или разветвленной насыщенной группе, имеющей 1-24, предпочтительно 1-16, еще более предпочтительно 1-14, еще более предпочтительно 1-12, еще более предпочтительно 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, и связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, метил, этил, изопропил, изобутил, трет-бутил, гептил, октил, децил, додецил, лаурил, гексадецил, октадецил, амил, 2-этилгексил, 2-метилбутил, 5-метилгексил и тому подобное.

Термин «алкенильная группа» относится в данном изобретении к группе, имеющей 2-24, предпочтительно 2-16, еще более предпочтительно 2-14, еще более предпочтительно 2-12, еще более предпочтительно 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, с одной или более чем одной двойной углерод-углеродной связью, предпочтительно с 1, 2 или 3 двойными углерод-углеродными связями, сопряженными или несопряженными, связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, группу винил, олеил, линолеил и тому подобное.

Термин «алкинильная группа» относится в данном изобретении к группе, имеющей 2-24, предпочтительно 2-16, еще более предпочтительно 2-14, еще более предпочтительно 2-12, еще более предпочтительно 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, с одной или более чем одной тройной углерод-углеродной связью, предпочтительно с 1, 2 или 3 тройными углерод-углеродными связями, сопряженными или несопряженными, связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, группу этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 3-бутинил, пентинил, например, 1-пентинил, и тому подобное.

Термин «алициклильная группа» использован в данном изобретении для включения, например, без ограничения, циклоалкильных, или циклоалкенильных, или циклоалкинильных групп.

Термин «циклоалкил» относится в данном изобретении к моно- или полициклической насыщенной алифатической группе, имеющей 3-24, предпочтительно 3-16, еще более предпочтительно 3-14, еще более предпочтительно 3-12 и еще более предпочтительно 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, и связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, метилциклогексил, диметилциклогексил, октагидроинден, декагидронафталин, додекагидрофенален и тому подобное.

Термин «циклоалкенил» относится в данном изобретении к моно- или полициклической неароматической алифатической группе, имеющей 5-24, предпочтительно 5-16, еще более предпочтительно 5-14, еще более предпочтительно 5-12 и еще более предпочтительно 5 или 6 атомов углерода, с одной или более чем одной двойной углерод-углеродной связью, предпочтительно с 1, 2 или 3 двойными углерод-углеродными связями, сопряженными или несопряженными, и связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, группу циклопент-1-ен-1-ил и тому подобное.

Термин «циклоалкинил» относится в данном изобретении к моно- или полициклической неароматической алифатической группе, имеющей 5-24, предпочтительно 5-16, еще более предпочтительно 5-14, еще более предпочтительно 5-12 и еще более предпочтительно 5 или 6 атомов углерода, с одной или более чем одной двойной углерод-углеродной связью, предпочтительно с 1, 2 или 3 тройными углерод-углеродными связями, сопряженными или несопряженными, и связанной с остальной частью молекулы простой связью, включая, например, без ограничения, группу циклогекс-1-ин-1-ил и тому подобное.

Термин «арильная группа» относится в данном изобретении к ароматической группе, имеющей 6-30, предпочтительно 6-18, еще более предпочтительно 6-10 и еще более предпочтительно 6 или 10 атомов углерода, состоящей из 1, 2, 3 или 4 ароматических колец, связанных углерод-углеродной связью или конденсированных, включая, например, без ограничения, среди прочего, фенил, нафтил, дифенил, инденил, фенантрил или антранил, или аралкильной группе.

Термин «аралкильная группа» относится в данном изобретении к алкильной группе, замещенной ароматической группой, имеющей 7-24 атомов углерода, и включая, например, без ограничения, -(СН₂)_1-6 -фенил, -(CH₂)_1-6-(1-нафтил), -(СН ₂)_1-6-(2-нафтил), -(СН₂)_1-6 -СН(фенил)₂ и тому подобное.

Термин «гетероциклильная группа» относится в данном изобретении к 3-10-членному углеводородному кольцу, в котором один или более чем один атом кольца, предпочтительно 1, 2 или 3 атома кольца, представляет собой элемент, отличный от углерода, такой как, например, азот, кислород или сера, и которое может быть насыщенным или ненасыщенным. Для целей данного изобретения гетероцикл может представлять собой циклическую, моноциклическую, бициклическую или трициклическую систему, которая может включать конденсированные кольцевые системы, и атомы азота, углерода или серы в гетероциклильном радикале возможно могут быть окисленными; атом азота возможно может быть четвертичным, и гетероциклический радикал может быть частично или полностью насыщенным или быть ароматическим. Более предпочтительно, термин "гетероциклический" относится к 5- или 6-членному кольцу.

Термин «гетероарилалкильная группа» относится в данном изобретении к алкильной группе, замещенной замещенной или незамещенной ароматической гетероциклильной группой, где алкильная группа имеет 1-3 атома углерода, и ароматическая гетероциклильная группа имеет 2-24 атомов углерода и 1-3 атома, отличных от углерода, включая, например, без ограничения, -(СН ₂)_1-6-имидазолил, -(СН₂)_1-6 -триазолил, -(СН₂)_1-6-тиенил, -(CH ₂)_1-6-фурил, -(СН₂)_1-6 -пирролидинил и тому подобное.

Как понятно в данной области техники, радикалы, определенные выше, могут быть в определенной степени замещенными. Таким образом, любые группы по данному изобретению могут быть замещенными. В данной заявке ссылки на замещенные группы в группах по данному изобретению означают, что указанный радикал может быть замещенным по одному или более чем одному доступному положению одним или более чем одним заместителем, предпочтительно по 1, 2 или 3 положениям, более предпочтительно по 1 или 2 положениям и еще более предпочтительно по 1 положению. Такие заместители включают, например, без ограничения, С ₁-C₄алкил; гидроксил; С₁-С₄ алкоксил; амино; С₁-С₄аминокалкил; С ₁-С₄карбонилоксил; С₁-С₄ оксикарбонил; галоген, такой как фтор, хлор, бром и йод; циано; нитро; азидо, С₁-С₄алкилсульфонил; тиол; С₁-С₄алкилтио; арилоксил, такой как феноксил, -NR_b(C=NR_b)NR_bR_c, где R_b и R_c независимо выбраны из группы, состоящей из Н, С₁-С₄алкила, C₂ -С₄алкенила, С₂-С₄алкинила, С₃-С₁₀циклоалкила, С₆-С ₁₈арила, С₇-С₁₇аралкила, 3-10-членной гетероциклической группы или амино-защитной группы.

В контексте данного изобретения «аминокислотная последовательность, имеющая происхождение из аминокислотной последовательности из белка SNAP-25» обозначает любую аминокислотную последовательность или фрагменты аминокислотной последовательности белка SNAP-25, определенной SEQ ID NO:1, или любую аминокислотную последовательность, отличающуюся от последовательности SEQ ID NO:1 мутацией, вставкой, делецией или заменой по меньшей мере одной аминокислоты, или вырожденностью генетического кода, при условии, что она соответствует пептиду, обладающему активностью белка SNAP-25. Мутации, вставки или замены могут быть осуществлены аминокислотами, кодируемыми генетическим кодом, или некодируемыми аминокислотами, естественными или искусственными, например, без ограничения, среди прочего, цитруллином, орнитином, саркозином, десмозином, норвалином, 4-аминомасляной кислотой, 2-аминомасляной кислотой, 2-аминоизомасляной кислотой, 6-аминогексановой кислотой, 1-нафтилаланином, 2-нафтилаланином, 2-аминобензойной кислотой, 4-аминобензойной кислотой, 4-хлорфенилаланином, 2,3-диаминопропионовой кислотой, 2,4-диаминомасляной кислотой, циклосерином, карнитином, цистином, пеницилламином, пироглутаминовой кислотой, тиенилаланином, гидроксипролином, аллоизолейцином, аллотреонином, изонипекотиновой кислотой (isonipecotic acid), изосерином, фенилглицином, статином, бета-аланином, норлейцином, N-метиламинокислотами, бета- или гамма-аминокислотами и их производными. Перечень искусственных аминокислот можно найти в статье "Unusual amino acids in peptide synthesis" Roberts D.C. and Vellaccio F., in "The Peptides", Vol 5 (1983), Chapter VI, Gross, E. and Meienhofer, J., Eds., Academic Press, New York, USA, или в коммерческих каталогах компаний, специализирующихся на данном секторе, таких как, среди прочих, NeoMPS, Bachem, Novabiochem, Sigma-Aldrich, Peptides International, Advanced ChemTech, Chem-lmpex, Maybridge Chemical, Chirotech Technology, Peninsula Laboratories или RSP Amino Acid Analogues.

Среди пептидов, имеющих происхождение из аминокислотной последовательности SNAP-25, определенной SEQ ID NO:1, включенных в композиции по изобретению, предпочтительными последовательностями являются последовательности, имеющие последовательность соседних аминокислот, входящую в последовательность аминоконцевой области белка SNAP-25, определенной SEQ ID NO:2, или карбоксиконцевой области белка SNAP-25, определенной SEQ ID NO:3, более предпочтительно в область с 10 по 22 остаток, определенную SEQ ID NO:4, или входящую в область с 25 по 40 остаток, определенную SEQ ID NO:5, или входящую в область с 65 по 81 остаток, определенную SEQ ID NO:6, или входящую в область со 181 по 206 остаток, определенную SEQ ID NO:7, точнее, входящую в область с 12 по 19 остаток, определенную SEQ ID NO:8, или входящую в область с 26 по 38 остаток, определенную SEQ ID NO:9, или входящую в область с 68 по 79 остаток, определенную SEQ ID NO:10, и, особенно, входящую в область с 12 по 17 остаток, определенную SEQ ID NO:11.

В частности, предпочтительные аминокислотные последовательности предпочтительно представляют собой последовательности, имеющие последовательность соседних аминокислот, входящую в любую из последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31 и SEQ ID NO:32.

Кроме того, изобретение также включает композиции, содержащие пептиды, по существу гомологичные пептидам, имеющим происхождение из аминокислотной последовательности белка SNAP-25, прошедшим необратимую химическую модификацию. «По существу гомологичными пептидами» в данном изобретении обозначены аминокислотные последовательности, по меньшей мере на 60%, предпочтительно на 80% и более предпочтительно на 95%, идентичные любой из предшествующих последовательностей. «Процент идентичности» относится к проценту аминокислот, идентичных у двух сравниваемых аминокислотных последовательностей после оптимального выравнивания этих последовательностей, где этот процент является исключительно статистическим, и различия двух аминокислотных последовательностей случайно распределены по последовательности. Термин «оптимальное выравнивание» означает выравнивание аминокислотных последовательностей, приводящее к большему проценту идентичности. Процент идентичности вычисляют определением числа идентичных положений, где аминокислота идентична у двух сравниваемых последовательностей, делением числа идентичных положений на число сравниваемых положений и умножением результата на 100 для получения процента идентичности двух последовательностей. Сравнение последовательности двух аминокислотных последовательностей может быть проведено вручную или с использованием программного обеспечения, такого как алгоритм BLAST (Basic Local Alignment Search Tool), доступный в режиме онлайн на сайте http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/.

В объем данного изобретения также включены косметически или фармацевтически приемлемые соли пептидов, включенных в композиции по изобретению. Термин «косметически или фармацевтически приемлемые соли» в данном изобретении обозначает соль, общепризнанную для применения у животных и, конкретнее, у людей, включая соли, используемые для получения солей присоединения оснований, либо неорганических, таких как, например, без ограничения, среди прочего, соли лития, натрия, калия, кальция, магния или алюминия, либо органических, таких как, например, без ограничения, среди прочего, соли этиламина, диэтиламина, этилендиамина, этаноламина, диэтаноламина, аргинина, лизина, гистидина или пиперазина, или солей присоединения кислот, либо органических, таких как, например, без ограничения, среди прочего, ацетат, цитрат, лактат, малонат, малеат, тартрат, фумарат, бензоат, аспартат, глутамат, сукцинат, олеат, трифторацетат, оксалат, памоат или глюконат, либо неорганических, таких как, например, без ограничения, среди прочего, хлорид, сульфат, борат или карбонат. Природа соли не является критичной при условии, что она является косметически или фармацевтически приемлемой. Косметически или фармацевтически приемлемые соли пептидов, включенных в композиции по изобретению, могут быть получены обычными способами, хорошо известными в данной области техники [Berge, S.M., Bighley, L.D., and Monkhouse, D.C. (1977) "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci66:1-19].

В дополнение, возможны обратимые химические модификации пептидов по изобретению для улучшения их биодоступности и облегчения их прохождения через гематоэнцефалический барьер или эпителиальную ткань.

Пептиды, включенные в композиции по изобретению, можно вводить любым способом, приводящим к контакту пептидов с местом их действия в организме млекопитающего, предпочтительно людей. Эти композиции могут быть изготовлены обычными способами, известными специалистам в данной области техники ["Harry's Cosmeticology", Eight [sic] edition (2000) Rieger M.M., ed., New York Chemical Pub., NY, US; "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", Twentieth edition (2003) Genaro A.R., ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, US].

Пептиды, включенные в композиции по данному изобретению, имеют различную растворимость в воде, в зависимости от природы их последовательностей или возможных модификаций их амино- и/или карбокси-конца, которые они имеют. Следовательно, пептиды по данному изобретению могут быть включены в композиции с использованием водного раствора, и пептиды, нерастворимые в воде, могут быть солюбилизированы в косметически или фармацевтически приемлемых обычных растворителях, таких как, например, без ограничения, этанол, пропанол, изопропанол, пропиленгликоль, глицерин, бутиленгликоль или полиэтиленгликоль либо любая их комбинация.

Эффективное количество пептидов, включенных в композиции по изобретению, их стереоизомеров, их смесей или их косметически или фармацевтически приемлемых солей, которое должно быть введено для лечения боли и/или воспаления, а также их доза, будут зависеть от нескольких факторов, включая возраст, состояние пациента, причину боли и/или воспаления, тяжесть боли и/или воспаления, способ и частоту введения и конкретную природу используемых пептидов.

«Эффективное количество» означает нетоксичное, но достаточное количество по меньшей мере одного пептида для обеспечения желаемого эффекта. Пептиды используют в композиции по данному изобретению в концентрациях, эффективных для достижения желаемого эффекта; предпочтительно, относительно общей массы композиции, от 0,00000001% (по массе) до 20% (по массе), предпочтительно от 0,000001% (по массе) до 20% (по массе), более предпочтительно от 0,0001% (по массе) до 10% (по массе) и конкретнее от 0,0001% (по массе) до 5% (по массе).

В другом определенном воплощении пептиды, включенные в композиции по изобретению, могут также быть включены в системы доставки и/или системы с длительным высвобождением.

Термин «системы доставки» относится к разбавителю, адъюванту, эксципиенту или носителю, с которым вводят пептидное производное по изобретению. Эти носители могут представлять собой жидкости, такие как вода, масла и поверхностно-активные вещества, включая такие, которые имеют происхождение из нефти, животных, растений, или синтетические, такие как, например, без ограничения, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло, касторовые масла, полисорбаты, эфиры сорбитана, эфирсульфаты, сульфаты, бетаины, глюкозиды, мальтозиды, жирные спирты, ноноксинол, полоксамер, полиоксиэтилены, полиэтиленгликоли, декстроза, глицерин и тому подобное. Разбавители, адъюванты или эксципиенты в качестве подходящих носителей описаны в "Remington's Pharmaceutical Sciences", E.W. Martin.

Термин «длительное высвобождение» использован в обычном смысле в отношении системы доставки соединения, обеспечивающей постепенное высвобождение указанного соединения в течение периода времени и предпочтительно, хотя необязательно, с постоянными уровнями высвобождения соединения в течение периода времени.

Примерами систем доставки или систем с длительным высвобождением являются липосомы, милличастицы, микрочастицы, наночастицы, губки, везикулы, мицеллы, миллисферы, микросферы и наносферы, липосферы, милликапсулы, микрокапсулы, нанокапсулы, микроэмульсии и наноэмульсии, которые могут быть добавлены для достижения большего проникновения активного ингредиента и/или для улучшения его фармакокинетических и фармакодинамических свойств.

В другом определенном воплощении композиции с длительным высвобождением могут быть изготовлены способами, известными в данной области техники, и содержащие их композиции могут быть введены, например, местным введением, включая липкие пластыри и нелипкие пластыри, или системным введением, таким как, например, без ограничения, энтеральный или парентеральный способ введения, и они предпочтительно должны высвобождать относительно постоянное количество пептидов, включенных в композиции по изобретению. Количество пептида, включенного в композицию с длительным высвобождением, будет зависеть, например, от места введения, кинетики и продолжительности высвобождения пептида, включенного в композиции по изобретению, а также причины и тяжести боли и/или воспаления, способа введения, частоты введения и конкретной природы используемых пептидов.

В контексте данного изобретения термины «энтеральный или парентеральный» включают пероральный, назальный, ингаляционный, ректальный способы введения, липкие или нелипкие пластыри, подкожные, внутрикожные, внутрисосудистые инъекции, такие как внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные инъекции, инъекции в стекловидное тело, спинальные, интракраниальные, внутрисуставные, интратекальные и внутрибрюшинные инъекции, а также любые сходные методики инъекции или инфузии.

В другом определенном воплощении композиция по изобретению дополнительно включает приемлемые носители и/или вспомогательные агенты, необходимые для введения композиции желаемым способом. Носители и/или вспомогательные агенты включают эксципиенты, загустители, разбавители, растворители, диспергирующие агенты, агенты для улучшения лиофильной сушки или адъюванты, подходящие для каждого пути введения и известные специалисту в данной области техники. Загустители включают, без ограничения, растворимые в воде полимеры, такие как полимеры, выбранные из группы, состоящей из модифицированных целлюлоз, метилцеллюлозы, этилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксиэтилметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы и карбоксиметилцеллюлозы, декстранов, желатинов, коллагена, гиалуроновой кислоты, полиэтиленгликоля или поливинилпирролидона. Разбавители и растворители включают, без ограничения, разбавители и растворители, выбранные из группы, состоящей из этанола, полиэтиленгликоля, гликофурола, N-метил-2-пирролидона, глицерина, пропандиола, полипропиленгликоля, бензилового спирта или диметилсульфоксида. Диспергирующие агенты включают, без ограничения, поверхностно-активные вещества, выбранные из группы, состоящей из моноэфиров жирных кислот и полиоксиэтиленсорбитана (Tween ^®, Emalex, Nikkol^®, Hodag, Dacol или Liposorb^®), моноэфиров жирных кислот и сорбитана (Span^®), 15-гидроксистеарата полиэтиленгликоля (Solutol^® HS15), эфиров жирных кислот и полиэтиленгликоля (Crodet, Cithrol, Kessco^®, Nikkol^® , Mapeg^®, Myrj, Tagat^®, Aldo ^®, Capmul^®, Glycerox, Lactomul ^® или Emerest^®), сложных эфиров полиоксиэтиленгликоля (Emulphor^®), полиэтоксилированных касторовых масел (Cremophor^®, Emalex, Eumulgin^® , Nikkol^® или Simusol^®), эфиров жирных кислот и полиглицерина (Nikkol Decaglyn, Polymuls, Caprol ^®), простых эфиров полиэтиленгликоля (Volpo или Brij ^®), полоксамеров (Lutrol_® или Pluronic ^®), фениловых эфиров полиоксиэтилена (Triton_® или Igepal^®) или их смесей. Агенты для улучшения лиофильной сушки включают, без ограничения, сахара, такие как сахара, выбранные из группы, состоящей из маннита, сахарозы, глюкозы, фруктозы, лактозы, трегалозы, сахарозы, декстрозы, сорбита, и глицин, желатины, поливинилпирролидон или их смеси. Предпочтительно, композиция для лечения боли и/или воспаления также включает один или более чем один приемлемый эксципиент, такой как увлажнители, рН-буферные агенты, консерванты, бактерицидные и фунгицидные агенты, агенты, замедляющие всасывание, агенты, ускоряющие всасывание, или любой другой эксципиент, известный специалисту в данной области техники.

В другом определенном воплощении пептиды, включенные в композиции по данному изобретению, могут также быть адсорбированы на твердых органических полимерах или твердых минеральных носителях, таких как, без ограничения, среди прочего, тальк, бентонит, диоксид кремния, крахмал или мальтодекстрин.

В другом определенном воплощении композиции по изобретению могут также быть включены в ткани, нетканые материалы и медицинские устройства, непосредственно контактирующие с кожей, слизистыми оболочками и/или кожей волосистой части головы, таким образом, что они высвобождают пептиды либо посредством биодеградации фиксирующей системы ткани, нетканого материала или медицинского устройства, либо в силу трения ткани, нетканого материала или медицинского устройства о тело, потоотделения, рН кожи или в силу температуры тела. Сходным образом, ткани и нетканые материалы могут быть использованы для изготовления одежды, непосредственно контактирующей с телом.

Примеры тканей, нетканых материалов, одежды, медицинских устройств и средств фиксации пептидов на них, включая системы доставки и/или системы с длительным высвобождением, описанные выше, описаны и могут быть найдены в литературе, и известны в данной области техники [Schaab C.K. (1986) "Impregnating Fabrics With Microcapsules", HAPPI May 1986; Nelson G. (2002) "Application of microencapsulation in textiles" Int. J. Pharm. 242:55-62; "Bio functional Textiles and the Skin" (2006) Curr. Probl. Dermatol. v.33, Hipfer U.C. and ElsnerP., eds. S. KargerAG, Basel, Switzerland; Malcom R.K., McCullagh S.D., Wool f son A.D., German S.P., Jones D.S. and Cuddy J. (2004) "Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial" J. Cont. Release 97:313-320]. Предпочтительными тканями, неткаными материалами, одеждой и медицинскими устройствами являются бинты, марли, футболки, носки, чулки, нижнее белье, пояса, перчатки, пеленки, компрессы, повязки, постельные покрывала, салфетки, гидрогели, липкие пластыри, нелипкие пластыри, микроэлектрические пластыри (micro-electric patches) и/или маски для лица.

В другом определенном воплощении композиции, содержащие пептиды по данному изобретению, их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли, могут быть использованы в различных типах композиций для местного или чрескожного применения, которые будут возможно содержать приемлемые эксципиенты, необходимые для изготовления желаемой лекарственной формы [Fault I Trillo С. (1993) in "Tratado de Farmacia Galenica" [Treatise on Galenic Pharmacy], Luzan 5, S.A. Ediciones, Madrid].

Композиции для местного или чрескожного применения могут быть представлены в любой твердой, жидкой или полутвердой лекарственной форме, такой как, например, без ограничения, кремы, гетерогенные эмульсии, такие как, например, без ограничения, эмульсии масла и/или кремния в воде, эмульсии воды в масле и/или кремнии, эмульсии типа «вода/масло/вода» или «вода/кремний/вода» и эмульсии типа «масло/вода/масло» или «кремний/вода/кремний», безводные композиции, водные дисперсии, масла, молочко, бальзамы, пенки, лосьоны, гели, водно-спиртовые растворы, жидкие мази, сыворотки, мыла, шампуни, мази, муссы, помады, порошки, мелки, карандаши и спрей или аэрозоль («спреи»), включая композиции, оставляемые после нанесения («leavе-on»-композиции), и композиции, смываемые после нанесения («rinse-off-композиции). Эти композиции для местного или чрескожного применения могут быть включены, посредством методик, известных специалисту в данной области техники, в различные типы твердых принадлежностей, такие как, например, без ограничения, салфетки, гидрогели, липкие пластыри, нелипкие пластыри или маски для лица, или могут быть включены в различные косметические продукты.

В другом определенном воплощении композиции по изобретению могут дополнительно включать агенты, усиливающие чрескожное всасывание пептидов общей формулы (I), их стереоизомеров, их смесей или их косметически или фармацевтически приемлемых солей, такие как, например, без ограничения, среди прочего, диметилсульфоксид, диметилацетамид, диметилформамид, поверхностно-активные вещества, азон (1-додецилазациклогептан-2-он), спирт, ацетон, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Сходным образом, композиции по данному изобретению могут быть нанесены на ограниченные области для введения местным или чрескожным способом введения посредством внутрикожной инъекции, ионтофореза, сонофореза, электропорации, механического давления, градиента осмотического давления, окклюзионного лечения, микроинъекций или инъекций под давлением без использования игл, таких как инъекции под давлением кислорода, микроэлектрических пластырей, или любой их комбинации, для достижения большего проникновения пептида по изобретению. Область нанесения будет определена природой боли и/или воспаления, подлежащих лечению.

Композиции по изобретению могут также быть введены, в дополнение к местному или чрескожному способу введения, любым другим подходящим способом, например, энтеральным или парентеральным способом введения, с включением приемлемых эксципиентов, необходимых для изготовления желаемой лекарственной формы. Обзор различных лекарственных форм активных ингредиентов и эксципиентов, необходимых для их получения, может быть найден, например, в "Tratado de Farmacia Galenica", C. Fauli i Trillo, 1993, Luzan 5, S.A. Ediciones, Madrid.

В другом определенном воплощении композиция по изобретению дополнительно включает эффективное количество по меньшей мере одного активного ингредиента, выбранного из группы, состоящей из антиоксиданта, ингибитора NО-синтазы, агента, расслабляющего кожу, противовоспалительного агента, обезболивающего агента, антимикробного агента, противогрибкового агента или их смесей.

В другом определенном воплощении данное изобретение относится к композиции, содержащей эффективное количество по меньшей мере одного пептида общей формулы (I), его стереоизомеров, их смесей или его косметически или фармацевтически приемлемых солей и эффективное количество по меньшей мере одного обезболивающего соединения и/или противовоспалительного соединения с целью усиления обезболивающего и/или противовоспалительного эффекта композиций по изобретению. Эти соединения включают синтетические соединения, такие как гидрокортизон, клобетазол, дексаметазон, преднизон, парацетамол, ацетилсалициловая кислота, амоксиприн, бенорилат, салицилат холина, дифлунизал, фаисламин, метилсалицилат, салицилат магния, салсалат, диклофенак, ацеклофенак, ацеметацин, бромфенак, этодолак, индометацин, сулиндак, толметин, ибупрофен, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флурбипрофен, кетопрофен, кеторолак, локсопрофен, напроксен, оксапрозин, тиапрофеновая кислота, супрофен, мефенамовая кислота, меклофенамат, меклофенамовая кислота, набуметон, фенилбутазон, азапропазон, метамизол, оксифенбутазон, сульфинпиразон, пироксикам, лорноксикам, мелоксикам, теноксикам, целекоксиб, эторикоксиб, люмиракоксиб, парекоксиб, рофекоксиб, вальдекоксиб, нимесулид, ликофелон, омега-3-жирные кислоты и их биометаболиты, морфин, кодеин, оксикодон, гидрокодон, диаморфин, петидин, трамадол, брупенорфин, бензокаин, лидокаин, хлорпрокаин, тетракаин, прокаин, три циклические антидепрессанты, амитриптилин, карбамазепин, габапентин, прегабалин, бисаболол, пантенол, биотин, динатрий-лауриминодипропионат-токоферилфосфат, циклопироксоламин, нордигидрогваяретовая кислота, коэнзим Q10 или алкилглицериновые эфиры либо натуральные экстракты или эфирные масла с собственной обезболивающей и/или противовоспалительной активностью, такие как, например, без ограничения, среди прочего, мадекассосид, эхинацин, масло семян амаранта, сандаловое масло, экстракт плаценты, экстракт листьев персика, Aloe vera, Arnica montana, Artemis/a vulgaris, Asarum maximum, Calendula officinalis, Capsicum, Centipede cunninghamii, Chamomilla recutita, Crinum asiaticum, Hamamelis virginiana, Harpagophytum procumbens, Hypericum perforatum, Lilium candidum, Malva sylvestris, Melaleuca altemifolia, Origanum majorana, Salix alba, Silybum marianum, Tanacetum parthenium или Uncana guianensis.

Биологическую активность композиций по данному изобретению определяли в моделях боли и воспаления на животных. Композиции по изобретению могут уменьшать воспаление, вызванное внутриподошвенной инъекцией каррагинана, а также ингибировать температурную гипералгезию, вызванную внутриподошвенной инъекцией полного адъюванта Фрейнда (CFA).

В другом определенном воплощении композиции по данному изобретению являются подходящими для лечения боли и/или воспаления, возникающих в ответ на различные вредные стимулы (механические, химические и температурные), вызывающие острую и хроническую воспалительную боль, а также обусловленных поражениями нервной системы, вызывающими невропатическую боль, и боли и/или воспаления при патологических состояниях, включающих висцеральную боль. Боль и воспаление включают, например, без ограничения, невропатическую боль, воспалительную боль, висцеральную боль, включая боль в животе, боль в пищеварительной системе, боль в дыхательной системе, боль в мочеполовой системе, боль в эндокринной системе, боль в сердце, боль в поджелудочной железе, боль в кишечнике, боль в желудке, боль в селезенке, боль в кровеносных сосудах, синдром раздраженной толстой кишки, головную боль напряжения, головную боль, связанную с синуситом, мигрень, боль в глазах, сухой кератит, послеоперационную боль, включая послеоперационную боль, обусловленную хирургическими разрезами, послеоперационную боль, обусловленную введением имплантатов в кость, послеоперационную боль, обусловленную замещением или инфекцией кости, боль, обусловленную раком, включая боль, обусловленную раком кости, боль, связанную с доброкачественными опухолями кости, включая боль, связанную с остеоид-остеомами, остеобластомами, боль, обусловленную лечением рака, скелетно-мышечную боль, фибромиалгию, невралгию, шейную боль, связанную с шейной дистонией, боль в спине, включая люмбаго и/или ишиас, нейрогенное воспаление, раздражение кожи, чувствительную кожу, атопический дерматит, контактный дерматит, пеленочный дерматит, экзему, артрит, ревматоидный артрит, остеоартрит, постгерпетическую невралгию, периферические невропатии, фантомную боль, аллодинию, боль, обусловленную синдромом запястного канала, жгучую боль, парестезии, лицевую боль, невралгию тройничного нерва, невропатическую боль, обусловленную диабетом, боль, связанную с нанесением или удалением татуировок, боль, обусловленную бурситами большого пальца стопы, боль в яичке, миофасциальную боль, спастическую мышечную боль, боль в мочевом пузыре, боль в мочевых путях, боль в женских наружных половых органах, вагинальную боль, боль в мошонке, боль в промежности, тазовую боль, боль или раздражение кожи после хирургического вмешательства, после лечения с применением терапии импульсным светом (интенсивным импульсным светом (IPL)), после лечения с применением терапии импульсным монохроматическим светом (лазером), после лечения химическими отшелушивающими агентами или после чрезмерного воздействия агрессивных внешних агентов, такого как чрезмерное воздействие солнечного света или чрезмерного холода или тепла.

В частности, лечение послеоперационной боли осуществляют посредством введения композиции по изобретению до, в течение или непосредственно после хирургического вмешательства. Предпочтительно, хирургическое вмешательство выбрано из группы, состоящей из удаления опухолей, костных имплантаций, удаления костей, косметических хирургических вмешательств, диагностических хирургических вмешательств и кожных разрезов.

Второй аспект данного изобретения относится к пептиду общей формулы (I)

его стереоизомерам и их рацемическим или нерацемическим смесям и его косметически или фармацевтически приемлемым солям, где

АА представляет собой последовательность из 3-40 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1;

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного гетероциклила, замещенного или незамещенного гетероарилалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного аралкила и R₅-C(O)-; и

R₂ выбран из группы, состоящей из -NR₃R ₄, -ОR₃ и -SR₃, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного гетероциклила, замещенного или незамещенного гетероарилалкила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного аралкила; и

R₅ выбран из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, замещенного или незамещенного алициклила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного аралкила, замещенного или незамещенного гетероциклила и замещенного или незамещенного гетероарилалкила,

для лечения боли и/или воспаления.

В другом определенном воплощении АА представляет собой последовательность из 3-30 соседних аминокислот, входящую в аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры пептидов, представленных общей формулой (I), представляют собой структуры, где

R₁ представляет собой Н, замещенную или незамещенную нециклическую алифатическую группу, имеющую 2-24 атомов углерода, замещенную или незамещенную алициклильную группу, имеющую 2-24 атомов углерода, или R ₅-С(О)-, где R₅ представляет собой замещенную или незамещенную нециклическую алифатическую группу, имеющую 1-24 атомов углерода, или замещенную или незамещенную алициклильную группу, имеющую 1-24 атомов углерода; и

R ₂ представляет собой -NR₃R₄ или -ОR ₃, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, замещенной или незамещенной нециклической алифатической группы, имеющей 1-24 атомов углерода, и замещенной или незамещенной алициклильной группы, имеющей 1-24 атомов углерода.

В другом определенном воплощении наиболее предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₁ представляет собой полимер полиэтиленгликоля. Еще более предпочтительные структуры представляют собой структуры, где полимер полиэтиленгликоля представляет собой

где n может варьировать от 1 до 100 и наиболее предпочтительно может варьировать от 1 до 5.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₁ представляет собой Н, ацетил, трет-бутаноил, гексаноил, 2-метилгексаноил, циклогексанкарбоксил, октаноил, деканоил, лауроил, миристоил, пальмитоил, стеароил, олеоил и линолеоил.

В другом определенном воплощении предпочтительные структуры представляют собой структуры, где R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, гексила, додецила и гексадецила.

Пептиды, используемые для лечения боли и/или воспаления, могут существовать в форме стереоизомеров или смесей стереоизомеров; например, составляющие их аминокислоты могут иметь L- или D-конфигурацию либо быть рацемическими независимо друг от друга. Таким образом, возможно получение смесей изомеров, а также рацематов или смесей диастереомеров либо чистых диастереомеров или энантиомеров, в зависимости от числа асимметрических атомов углерода и того, какие изомеры или смеси изомеров присутствуют. Предпочтительные структуры пептидов представляют собой чистые изомеры, то есть, энантиомеры или диастереомеры.

Среди пептидов, имеющих происхождение из аминокислотной последовательности SNAP-25, определенной SEQ ID NO:1, используемых для лечения боли и/или воспаления, предпочтительными последовательностями являются последовательности, имеющие последовательность соседних аминокислот, входящую в последовательность аминоконцевой области белка SNAP-25, определенной SEQ ID NO:2, или карбоксиконцевой области белка SNAP-25, определенной SEQ ID NO:3, более предпочтительно входящую в область с 10 по 22 остаток, определенную SEQ ID NO:4, или входящую в область с 25 по 40 остаток, определенную SEQ ID NO:5, или входящую в область с 65 по 81 остаток, определенную SEQ ID NO:6, или входящую в область со 181 по 206 остаток, определенную SEQ ID NO:7, точнее, входящую в область с 12 по 19 остаток, определенную SEQ ID NO:8, или входящую в область с 26 по 38 остаток, определенную SEQ ID NO:9, или входящую в область с 68 по 79 остаток, определенную SEQ ID NO:10, и, особенно, входящую в область с 12 по 17 остаток, определенную SEQ ID NO:11.

В частности, предпочтительные аминокислотные последовательности представляют собой последовательности, имеющие последовательность соседних аминокислот, входящую в любую из последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31 и SEQ ID NO:32.

Кроме того, изобретение также включает пептиды, по существу гомологичные пептидам, имеющим происхождение из аминокислотной последовательности белка SNAP-25, прошедшим необратимую химическую модификацию, для лечения боли и/или воспаления.

В объем данного изобретения также включены косметически или фармацевтически приемлемые соли пептидов общей формулы (I). Природа соли не является критичной при условии, что она является косметически или фармацевтически приемлемой. Косметически или фармацевтически приемлемые соли пептидов могут быть получены обычными способами, хорошо известными в данной области техники [Berge, S.M., Bighley, L.D., and Monkhouse, D.C. (1977) "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci 66:1-19].

В дополнение, возможны обратимые химические модификации пептидов для улучшения их биодоступности и облегчения их прохождения через гематоэнцефалический барьер или эпителиальную ткань.

Пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли для лечения боли и/или воспаления могут быть включены в композиции и могут быть введены любым способом, приводящим к контакту пептидов с местом их действия в организме млекопитающего, предпочтительно людей. Эти композиции могут быть изготовлены обычными способами, известными специалистам в данной области техники ["Harry's Cosmeticology", Eight [sic] edition (2000) Rieger M.M., ed., New York Chemical Pub., NY, US; "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", Twentieth edition (2003) Genaro A.R., ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, US].

Пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли для лечения боли и/или воспаления имеют различную растворимость в воде, в зависимости от природы их последовательностей или возможных модификаций их амино- и/или корбокси-конца, которые они имеют. Следовательно, эти пептиды могут быть включены в композиции с использованием водного раствора, и пептиды, нерастворимые в воде, могут быть солюбилизированы в косметически или фармацевтически приемлемых обычных растворителях, таких как, например, без ограничения, этанол, пропанол, изопропанол, пропиленгликоль, глицерин, бутиленгликоль или полиэтиленгликоль либо любая их комбинация.

Эффективное количество пептидов общей формулы (I), их стереоизомеров, их смесей или их косметически или фармацевтически приемлемых солей, которое должно быть введено для лечения боли и/или воспаления, а также их доза, будут зависеть от нескольких факторов, включая возраст, состояние пациента, причину боли и/или воспаления, тяжесть боли и/или воспаления, способ и частоту введения и конкретную природу используемых пептидов.

Пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в композицию в концентрациях, эффективных для достижения желаемого эффекта для лечения боли и/или воспаления; предпочтительно, относительно общей массы композиции, от 0,00000001% (по массе) до 20% (по массе), более предпочтительно от 0,000001% (по массе) до 20% (по массе), более предпочтительно от 0,0001% (по массе) до 10% (по массе) и конкретнее от 0,0001% (по массе) до 5% (по массе).

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли для лечения боли и/или воспаления включены в системы доставки и/или системы с длительным высвобождением.

Эти носители могут представлять собой жидкости, такие как вода, масла или поверхностно-активные вещества, включая такие, которые имеют происхождение из нефти, животных, растений, или синтетические, такие как, например, без ограничения, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло, касторовые масла, полисорбаты, эфиры сорбитана, эфирсульфаты, сульфаты, бетаины, глюкозиды, мальтозиды, жирные спирты, ноноксинол, полоксамеры, полиоксиэтилены, полиэтиленгликоли, декстроза, глицерин и тому подобное. Разбавители, адъюванты или эксципиенты в качестве подходящих носителей описаны в "Remington's Pharmaceutical Sciences", E.W.Martin.

Примерами систем доставки или систем с длительным высвобождением являются липосомы, милличастицы, микрочастицы, наночастицы, губки, везикулы, мицеллы, миллисферы, микросферы и наносферы, липосферы, милликапсулы, микрокапсулы, нанокапсулы, микроэмульсии и наноэмульсии, которые могут быть добавлены для достижения большего проникновения активного ингредиента и/или для улучшения его фармакокинетических и фармакодинамических свойств.

В другом определенном воплощении композиции с длительным высвобождением могут быть изготовлены способами, известными в данной области техники, и содержащие их композиции могут быть введены, например, местным введением, включая липкие пластыри и нелипкие пластыри, или системным введением, таким как, например, без ограничения, энтеральный или парентеральный способ введения, и они предпочтительно должны высвобождать относительно постоянное количество пептидов, включенных в композиции по изобретению. Количество пептида, включенного в композицию с длительным высвобождением, будет зависеть, например, от места введения, кинетики и продолжительности высвобождения пептида, включенного в композиции по изобретению, а также причины и тяжести боли и/или воспаления, способа введения, частоты введения и конкретной природы используемых пептидов.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли для лечения боли и/или воспаления включены в композицию, дополнительно включающую приемлемые носители и/или вспомогательные агенты, необходимые для введения композиции желаемым способом. Носители и/или вспомогательные агенты включают эксципиенты, загустители, разбавители, растворители, диспергирующие агенты, агенты для улучшения лиофильной сушки или адъюванты, подходящие для каждого пути введения и известные специалисту в данной области техники. Загустители включают, без ограничения, растворимые в воде полимеры, такие как полимеры, выбранные из группы, состоящей из модифицированных целлюлоз, метилцеллюлозы, этилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксиэтилметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы и карбоксиметилцеллюлозы, декстранов, желатинов, коллагена, гиалуроновой кислоты, полиэтиленгликоля или поливинилпирролидона. Разбавители и растворители включают, без ограничения, разбавители и растворители, выбранные из группы, состоящей из этанола, полиэтиленгликоля, гликофурола, N-метил-2-пирролидона, глицерина, пропандиола, полипропиленгликоля, бензилового спирта или диметилсульфоксида. Диспергирующие агенты включают, без ограничения, поверхностно-активные вещества, выбранные из группы, состоящей из моноэфиров жирных кислот и полиоксиэтиленсорбитана (Tween ^®, Emalex, Nikkol^®, Hodag, Dacol или Liposorb^®), моноэфиров жирных кислот и сорбитана (Span^®), 15-гидроксистеарата полиэтиленгликоля (Solutol^® HS15), эфиров жирных кислот и полиэтиленгликоля (Crodet, Cithrol, Kessco^®, Nikkol^® , Mapeg^®, Myrj, Tagat^®, Aldo ^®, Capmul^®, Glycerox, Lactomul ^® или Emerest^®), сложных эфиров полиоксиэтиленгликоля (Emulphor^®), полиэтоксилированных касторовых масел (Cremophor^®, Emalex, Eumulgin^® , Nikkol^® или Simusol^®), эфиров жирных кислот и полиглицерина (Nikkol Decaglyn, Polymuls, Caprol ^®), простых эфиров полиэтиленгликоля (Volpo или Brij ^®), полоксамеров (Lutrol^® или Pluronic ^®), фениловых эфиров полиоксиэтилена (Triton^® или Igepal^®) или их смесей. Агенты для улучшения лиофильной сушки включают, без ограничения, сахара, такие как сахара, выбранные из группы, состоящей из маннита, сахарозы, глюкозы, фруктозы, лактозы, трегалозы, сахарозы, декстрозы, сорбита, и глицин, желатины, поливинилпирролидон или их смеси. Предпочтительно, композиция, которая содержит пептид, также включает один или более чем один приемлемый эксципиент, такой как увлажнители, рН-буферные агенты, консерванты, бактерицидные и фунгицидные агенты, агенты, замедляющие всасывание, агенты, ускоряющие всасывание, или любой другой эксципиент, известный специалисту в данной области техники.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли для лечения боли и/или воспаления могут также быть адсорбированы на твердых органических полимерах или твердых минеральных носителях, таких как, без ограничения, среди прочего, тальк, бентонит, диоксид кремния, крахмал или мальтодекстрин.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в композиции, которые могут быть включены в ткани, нетканые материалы и медицинские устройства, непосредственно контактирующие с кожей, слизистыми оболочками и/или кожей волосистой части головы, таким образом, что они высвобождают пептиды либо посредством биодеградации фиксирующей системы ткани, нетканого материала или медицинского устройства, либо в силу трения ткани, нетканого материала или медицинского устройства о тело, потоотделения, рН кожи или в силу температуры тела. Сходным образом, ткани и нетканые материалы могут быть использованы для изготовления одежды, непосредственно контактирующей с телом.

Примеры тканей, нетканых материалов, одежды, медицинских устройств и средств фиксации пептидов на них, включая системы доставки и/или системы с длительным высвобождением, описанные выше, описаны и могут быть найдены в литературе, и известны в данной области техники [Schaab С.К. (1986) "Impregnating Fabrics With Microcapsules", HAPPI May 1986; Nelson G. (2002) "Application of microencapsulation in textiles" Int. J. Pharm. 242:55-62; "Bio functional Textiles and the Skin" (2006) Curr. Probl. Dermatol. v.33, Hipler U.C. and ElsnerP., eds. S. KargerAG, Basel, Switzerland; Malcom R.K., McCullagh S.D., Woolfson A.D., German S.P., Jones D.S. and Cuddy J. (2004) "Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial" J. Cont. Release 97:313-320]. Предпочтительными тканями, неткаными материалами, одеждой и медицинскими устройствами являются бинты, марли, футболки, носки, чулки, нижнее белье, пояса, перчатки, пеленки, компрессы, повязки, постельные покрывала, салфетки, гидрогели, липкие пластыри, нелипкие пластыри, микроэлектрические пластыри (micro-electric patches) и/или маски для лица.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли содержатся в композициях, которые могут быть использованы в различных типах композиций для местного или чрескожного применения, которые будут возможно содержать приемлемые эксципиенты, необходимые для изготовления желаемой лекарственной формы [Fault i Trillo С. (1993) in "Tratado de Farmacia Galenica", Luzan 5, S.A. Ediciones, Madrid].

Композиции для местного или чрескожного применения могут быть представлены в любой твердой, жидкой или полутвердой лекарственной форме, такой как, например, без ограничения, кремы, гетерогенные эмульсии, такие как, например, без ограничения, эмульсии масла и/или кремния в воде, эмульсии воды в масле и/или кремнии, эмульсии типа «вода/масло/вода» или «вода/кремний/вода» и эмульсии типа «масло/вода/масло» или «кремний/вода/кремний», безводные композиции, водные дисперсии, масла, молочко, бальзамы, пенки, лосьоны, гели, водно-спиртовые растворы, жидкие мази, сыворотки, мыла, шампуни, мази, муссы, помады, порошки, мелки, карандаши и спреи или аэрозоли («спреи»), включая композиции, оставляемые после нанесения («lеаvе-on»-композиции), и композиции, смываемые после нанесения («rinse-off»-композиции). Эти композиции для местного или чрескожного применения могут быть включены, посредством методик, известных специалисту в данной области техники, в различные типы твердых принадлежностей, такие как, например, без ограничения, салфетки, гидрогели, липкие пластыри, нелипкие пластыри или маски для лица, или могут быть включены в различные косметические продукты.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в композиции, которые могут включать дополнительные агенты, усиливающие чрескожное всасывание пептидов общей формулы (I), их стереоизомеров, их смесей или их косметически или фармацевтически приемлемых солей, такие как, например, без ограничения, среди прочего, диметилсульфоксид, диметилацетамид, диметилформамид, поверхностно-активные вещества, азон (1-додецилазациклогептан-2-он), спирт, ацетон, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Кроме того, эти композиции могут быть нанесены на ограниченные области для введения местным или чрескожным способом введения посредством внутрикожной инъекции, ионтофореза, сонофореза, электропорации, механического давления, градиента осмотического давления, окклюзионного лечения, микроинъекций или инъекций под давлением без использования игл, таких как инъекции под давлением кислорода, микроэлектрических пластырей, или любой их комбинации, для достижения большего проникновения пептида по изобретению. Область нанесения будет определена природой боли и/или воспаления, подлежащих лечению.

Пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или косметически или фармацевтически приемлемые соли, включенные в композиции, могут быть введены, в дополнение к местному или чрескожному способу введения, любым другим подходящим способом, например, энтеральным или парентеральным способом введения, с включением приемлемых эксципиентов, необходимых для изготовления желаемой лекарственной формы. Обзор различных лекарственных форм активных ингредиентов и эксципиентов, необходимых для их получения, может быть найден, например, в "Tratado de Farmacia Galenica", C. Fauli i Trillo, 1993, Luzan 5, S.A.Ediciones, Madrid.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в композиции, дополнительно включающие эффективное количество по меньшей мере одного активного ингредиента, выбранного из группы, состоящей из антиоксиданта, ингибитора NО-синтазы, агента, расслабляющего кожу, противовоспалительного агента, обезболивающего агента, антимикробного агента, противогрибкового агента или их смесей.

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли включены в композиции, также включающие эффективное количество по меньшей мере одного обезболивающего соединения и/или противовоспалительного соединения с целью усиления обезболивающего и/или противовоспалительного эффекта композиции. Среди этих соединений можно выделить синтетические соединения, такие как гидрокортизон, клобетазол, дексаметазон, преднизон, парацетамол, ацетилсалициловая кислота, амоксиприн, бенорилат, салицилат холина, дифлунизал, фаисламин, метилсалицилат, салицилат магния, салсалат, диклофенак, ацеклофенак, ацеметацин, бромфенак, этодолак, индометацин, сулиндак, толметин, ибупрофен, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флурбипрофен, кетопрофен, кеторолак, локсопрофен, напроксен, оксапрозин, тиапрофеновая кислота, супрофен, мефенамовая кислота, меклофенамат, меклофенамовая кислота, набуметон, фенилбутазон, азапропазон, метамизол, оксифенбутазон, сульфинпиразон, пироксикам, лорноксикам, мелоксикам, теноксикам, целекоксиб, эторикоксиб, люмиракоксиб, парекоксиб, рофекоксиб, вальдекоксиб, нимесулид, ликофелон, омега-3-жирные кислоты и их биометаболиты, морфин, кодеин, оксикодон, гидрокодон, диаморфин, петидин, трамадол, брупенорфин, бензокаин, лидокаин, хлорпрокаин, тетракаин, прокаин, трициклические антидепрессанты, амитриптилин, карбамазепин, габапентин, прегабалин, бисаболол, пантенол, биотин, динатрий-лауриминодипропионат-токоферилфосфат, циклопироксоламин, нордигидрогваяретовая кислота, коэнзим Q10 или алкилглицериновые эфиры либо натуральные экстракты или эфирные масла с собственной обезболивающей и/или противовоспалительной активностью, такие как, например, без ограничения, среди прочего, мадекассосид, эхинацин, масло семян амаранта, сандаловое масло, экстракт плаценты, экстракт листьев персика, Aloe vera, Arnica montana, Artemisia vulgaris, Asarum maximum, Calendula officinalis, Capsicum, Centipede cunninghamii, Chamomilla recutita, Crinum asiaticum, Hamamelis virginiana, Harpagophytum procumbens, Hypencum perforatum, Lilium candidum, Malva sylvestris, Melaleuca altemifolia, Origanum majorana, Salix alba, Silybum marianum, Tanacetum parthenium или Uncana guianensis.

Биологическую активность пептидов общей формулы (I), их стереоизомеров, их смесей или их косметически или фармацевтически приемлемых солей определяли в моделях боли и воспаления на животных. Эти пептиды могут уменьшать воспаление, вызванное внутриподошвенной инъекцией каррагинана, а также ингибировать температурную гипералгезию, вызванную внутриподошвенной инъекцией полного адъюванта Фрейнда (CFA).

В другом определенном воплощении пептиды общей формулы (I), их стереоизомеры, их смеси или их косметически или фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для лечения боли и/или воспаления, возникающих в ответ на различные вредные стимулы (механические, химические и температурные), вызывающие острую и хроническую воспалительную боль, а также обусловленных поражениями нервной системы, вызывающими невропатическую боль, и боли и/или воспаления при патологических состояниях, включающих висцеральную боль. Боль и воспаление включают, например, без ограничения, невропатическую боль, воспалительную боль, висцеральную боль, включая боль в животе, боль в пищеварительной системе, боль в дыхательной системе, боль в мочеполовой системе, боль в эндокринной системе, боль в сердце, боль в поджелудочной железе, боль в кишечнике, боль в желудке, боль в селезенке, боль в кровеносных сосудах, синдром раздраженной толстой кишки, головную боль напряжения, головную боль, связанную с синуситом, мигрень, боль в глазах, сухой кератит, послеоперационную боль, включая послеоперационную боль, обусловленную хирургическими разрезами, послеоперационную боль, обусловленную введением имплантатов в кость, послеоперационную боль, обусловленную замещением или инфекцией кости, боль, обусловленную раком, включая боль, обусловленную раком кости, боль, связанную с доброкачественными опухолями кости, включая боль, связанную с остеоид-остеомами, остеобластомами, боль, обусловленную лечением рака, скелетно-мышечную боль, фибромиалгию, невралгию, шейную боль, связанную с шейной дистонией, боль в спине, включая люмбаго и/или ишиас, нейрогенное воспаление, раздражение кожи, чувствительную кожу, атопический дерматит, контактный дерматит, пеленочный дерматит, экзему, артрит, ревматоидный артрит, остеоартрит, постгерпетическую невралгию, периферические невропатии, фантомную боль, аллодинию, боль, обусловленную синдромом запястного канала, жгучую боль, парестезии, лицевую боль, невралгию тройничного нерва, невропатическую боль, обусловленную диабетом, боль, связанную с нанесением или удалением татуировок, боль, обусловленную бурситами большого пальца стопы, боль в яичке, миофасциальную боль, спастическую мышечную боль, боль в мочевом пузыре, боль в мочевых путях, боль в женских наружных половых органах, вагинальную боль, боль в мошонке, боль в промежности, тазовую боль, боль или раздражение кожи после хирургического вмешательства, после лечения с применением терапии импульсным светом (интенсивным импульсным светом (IPL)), после лечения с применением терапии импульсным монохроматическим светом (лазером), после лечения химическими отшелушивающими агентами или после чрезмерного воздействия агрессивных внешних агентов, такого как чрезмерное воздействие солнечного света или чрезмерного холода или тепла.

В частности, лечение послеоперационной боли осуществляют посредством введения эффективного количества пептида, содержащегося в композиции по изобретению, до, в течение или непосредственно после хирургического вмешательства. Предпочтительно, хирургическое вмешательство выбрано из группы, состоящей из удаления опухолей, костных имплантаций, удаления костей, косметических хирургических вмешательств, диагностических хирургических вмешательств и кожных разрезов.

В другом аспекте данное изобретение относится к лечению боли и/или воспаления, способу, включающему введение эффективного количества по меньшей мере одного пептида общей формулы (I), его стереоизомеров, их смеси или его косметически или фармацевтически приемлемых солей, предпочтительно в форме содержащей их косметической или фармацевтической композиции. Согласно данному изобретению также предложен способ лечения боли и/или воспаления, включающий нанесение на кожу, слизистые оболочки и/или кожу волосистой части головы, или энтеральное или парентеральное введение композиции, содержащей по меньшей мере один пептид общей формулы (I), его стереоизомеры, их смеси или его косметически или фармацевтически приемлемые соли.

Согласно данному изобретению также предложен способ лечения и/или предотвращения послеоперационной боли у пациента, прошедшего хирургическое вмешательство, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного пептида формулы (I), его стереоизомеров, их смеси или косметически или фармацевтически приемлемых солей, предпочтительно в форме содержащей его фармацевтической композиции до, в течение или непосредственно после хирургического вмешательства. Предпочтительно, хирургическое вмешательство выбрано из группы, состоящей из удаления опухолей, костных имплантаций, удаления костей, косметических хирургических вмешательств, диагностических хирургических вмешательств и кожных разрезов.

ПРИМЕРЫ

Следующие конкретные примеры, приведенные здесь, предназначены для иллюстрации сущности данного изобретения. Эти примеры приведены лишь в иллюстративных целях, и их не следует толковать как ограничения заявленного здесь изобретения.

Общая методология

Аббревиатуры

Аббревиатуры, используемые для аминокислот, соответствуют правилам Комиссии по биохимической номенклатуре (Commission on Biochemical Nomenclature) Международного союза теоретической и прикладной химии и Международного биохимического союза (IUPAC-IUB), указанным в Eur. J. Biochem. (1984) 138, 9-37 и J. Biol Chem (1989) 264, 633-673.

NSAID, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства; АТР, аденозинтрифосфат; ВК, брадикинин; BoNT А, ботулотоксин серотипа А; CFA, полный адъювант Фрейнда; CGRP, пептид, родственный кальцитонину; IL, интерлейкин; NGF, фактор роста нервов; Palm, пальмитоил; PEG, полиэтиленгликоль; PEG_n, -[NН-СН₂-(СН₂СН₂ O)₃-(СН₂)₃-NН-СО-СН₂ СН₂-СО-]_n; РКА, протеинкиназа А; РКС, протеинкиназа С; SNAP-25, белок, ассоциированный с синаптосомами (25 кДа); SP, субстанция Р; TNF, фактор некроза опухоли; TRPV1, транзиторный рецепторный потенциал ванилоида 1.

ПРИМЕР 1. Пептиды уменьшают воспаление, вызванное внутриподошвенной инъекцией каррагинана.

Для демонстрации того, что пептиды, имеющие происхождение из белка SNAP-25, имеют противовоспалительную активность in vivo, использовали тест с каррагинаном. Каррагинан представляет собой раздражающее вещество, введение которого вызывает сильное воспаление через четыре часа после введения. Воспалительный процесс может быть легко распознан как увеличение объема лапы, в которую вводили каррагинан, измеренное плетизмометром. В Таблице 1 показаны значения противовоспалительной активности пептидов, вводимых в дозе 5 мг/кг (внутримышечно), с использованием диклофенака (10 мг/кг) в качестве положительного контроля и нормализацией относительно значений уменьшения воспаления, полученных для положительного контроля. Таким образом, пептиды по данному изобретению имеют противовоспалительную активность in vivo.

Таблица 1
КОМПОЗИЦИЯ	ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ
Диклофенак	100%
Ac-LESTRRMLQLVEE-NH2	98%
Palm-EEMQRR-NH 2	81%
Palm-LESTRRMLQLVEE-NH2	77%
AC-ELEEMQRRADQLA-NH2	65%
Palm-ELEEMQRRADQLA-NH 2	58%
Ac-PEG5-EEMQRR-NH2	53%
Ac-EEMQRR-NH2	49%
AC-PEG 3-EEMQRR-NH2	42%
AC-PEG2-EEMQRR-NH2	29%
Ac-PEG 4-EEMQRR-NH2	23%
Ac-PEG1-EEMQRR-NH2	21%
AC-EEMQRRA-NH 2	14%

ПРИМЕР 2. Пептиды угнетают температурную гипералгезию, вызванную внутриподошвенной инъекцией полного адъюванта Фрейнда (CFA).

Для оценки обезболивающей активности пептидов в модели хронической боли авторы изобретения использовали внутриподошвенное введение CFA (1%), приводящее к воспалительному процессу с температурной гипералгезией через 24 часа после введения раздражающего вещества. Температурную гипералгезию легко оценивают с использованием исследовательского оборудования для подошвы, фокусирующего источник излучения на лапу животного, с оценкой времени задержки от облучения до отдергивания лапы. В этой модели авторы изобретения сравнивали обезболивающую эффективность пептидов (1 мг/кг, внутримышечно) с ибупрофеном (1 мг/кг, внутримышечно) через 24 часа после инъекции CFA. Авторы изобретения также проводили мониторинг температурной чувствительности противоположной лапы (в которую вводили наполнитель CFA) через 1 час, 2 часа, 4 часа и 6 часов после инъекции CFA. На Фиг.1 показано, что пептиды уменьшали температурную гипералгезию через 2 часа после введения. Таким образом, пептиды по изобретению обладают обезболивающей/противовоспалительной активностью в модели хронической боли (Фиг.1).