спироимидазолидиновые производные, способ их получения и фармацевтическая композиция на их основе

Формула изобретения

1. Спироимидазолидиновые производные формулы I

где R¹ представляет водород или метил;

R² представляет фенил или (C₁-C₄ )-алкил;

Х представляет -СН₂-СН₂- или -СН₂-СН₂-СН₂-;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -CO-R³;

R³ представляет гидрокси, (C₁-C₄)-алкокси или амино;

фенил представляет незамещенный фенильный остаток или фенильный остаток, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями из группы, состоящей из (C₁ -C₄)-алкокси, метилендиокси и этилендиокси, во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях,

и его физиологически допустимые соли.

2. Соединение формулы I по п.1, где W представляет изопропил и V представляет водород, во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях и его физиологически допустимые соли.

3. Соединение формулы I по п.1 и/или 2, где R² представляет незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя (C₁ -C₄)-алкоксигруппами, или (C₁-C₄ )-алкил, во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях и его физиологически допустимые соли.

4. Соединение формулы I по любому из пп.1-3, где Е представляет -CO-R³ и R³ представляет гидрокси или амино, во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях и его физиологически допустимые соли.

5. Соединение формулы I по любому из пп.1-4, где R¹ представляет водород или метил; R² представляет незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя метоксигруппами, или (C ₁-C₄)-алкил; Х представляет -СН₂-СН ₂- или -СН₂-СН₂-СН₂ -; W представляет изопропил или циклопропил; V представляет водород или метокси; Е представляет -СО-ОН, -СО-O-(C₁-C ₄)-алкил или -CO-NH_2, во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях и его физиологически допустимые соли.

6. Соединение формулы I по любому из пп.1-5, представляющее собой

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионамид,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту или

3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

во всех его стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и его физиологически допустимые соли.

7. Соединение формулы I по любому из пп.1-6, представляющее собой

(S)-3-((S)-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовую кислоту,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-фенилпропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-метилпропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионамид,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

(R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропил-метилацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту

или

(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)-уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропил-метилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовую кислоту,

и его физиологически допустимые соли.

8. Соединение формулы I по любому из пп.1-7, представляющее собой трометаминовую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты,

трометаминовую соль (R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовой кислоты,

трометаминовую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионо-вой кислоты,

натриевую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты,

трометаминовую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты,

натриевую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты,

трометаминовую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазоли-дин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты или

натриевую соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-цикло-пропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты.

9. Способ получения соединения формулы I по любому из пп.1-8, включающий осуществление конденсации соединения формулы II с соединением формулы III

где в указанных формулах II и III группы Е, V, W, X, R ¹ и R² имеют значения, указанные в пп.1-8, или функциональные группы присутствуют в защищенной форме или в форме предшественника;

G представляет гидроксикарбонил, (С₁-С₆)-алкоксикарбонил или активированное производное карбоновой кислоты.

10. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения в качестве фармацевтического препарата.

11. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующими свойствами в отношении адгезии лейкоцитов, содержащая одно или несколько соединений формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли и фармацевтически допустимый носитель.

12. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения в качестве противовоспалительного средства.

13. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения при лечении или профилактике артрита, ревматоидного артрита, полиартрита, воспалительного заболевания кишечника, системной красной волчанки, рассеянного склероза или воспалительных расстройств центральной нервной системы.

14. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения при лечении или профилактике астмы или аллергических заболеваний.

15. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения при лечении или профилактике сердечно-сосудистых расстройств, артериосклероза, рестеноза, диабета, повреждения трансплантатов органов, иммунных расстройств, аутоиммунных расстройств, роста опухолей или метастаза опухолей или малярии.

16. Соединение формулы I по любому из пп.1-8 и/или его физиологически допустимые соли для применения в качестве ингибитора адгезии и/или миграции лейкоцитов или для ингибирования рецептора VLA-4.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к спироимидазолидиновым производным формулы I

где Е, V, W, X, R¹ и R² имеют значения, указанные ниже.

Соединения формулы I являются ценными фармацевтическими активными соединениями, подходящими, например для лечения и профилактики воспалительных расстройств, например, ревматоидного артрита, или аллергических расстройств. Соединения формулы I являются ингибиторами адгезии и миграции лейкоцитов и/или антагонистами адгезионных рецепторов VLA-4, принадлежащих к группе интегринов. Как правило, они подходят для лечения и профилактики болезней, вызываемых нежелательной степенью адгезии лейкоцитов и/или миграции лейкоцитов или ассоциируемых с этими явлениями, или в которых играют роль взаимодействия клетки с клеткой или клетки с матриксом, которые основаны на взаимодействиях рецепторов VLA-4 со своими лигандами. Изобретение также относится к способам получения соединений формулы I, их применению и фармацевтическим композициям, содержащим соединения формулы I.

Интегрины представляют собой группу адгезионных рецепторов, играющих важную роль в процессах связывания клетки с клеткой и клетки с внеклеточным матриксом. Они имеют -гетеродимерную структуру и обнаруживают широкое распространение в клетках и высокую степень сохранения в ходе развития. Интегрины включают, например, фибриногенный рецептор на тромбоцитах, взаимодействующий, в особенности, с последовательностью RGD фибриногена, или витронектиновый рецептор на остеокластах, взаимодействующий, в особенности, с последовательностью RGD витронектина или остеопонтина. Интегрины разделяют на три основных группы: подсемейство 2 с характерными представителями LFA-1, Мас-1 и р150/95, ответственными, в частности, за взаимодействия клетки с клеткой иммунной системы, и подсемейства 1 и 3, характерные представители которых, главным образом, опосредуют адгезию клеток к компонентам внеклеточного матрикса (Ruoslahti, Annu. Rev. Biochem., 1988, 57, 375). Интегрины подсемейства 1, называемые также VLA-белками (очень поздний (активационный) антиген), включают по меньшей мере шесть рецепторов, специфически взаимодействующих с фибронектином, коллагеном и/или ламинином в качестве лигандов. В пределах семейства VLA интегрин VLA-4 (41) является атипичным, постольку поскольку ограничивается, главным образом, лимфоидными и миелоидными клетками и ответственен в них за взаимодействия клетки с клеткой с большим числом других клеток. Например, VLA-4 опосредует взаимодействие Т- и В-лимфоцитов с фрагментом связывания гепарина II фибронектина (FN) плазмы человека. Связывание VLA-4 с фрагментом связывания гепарина II фибронектина плазмы основано, в особенности, на взаимодействии с последовательностью LDVP. В противоположность фибриногенному или витронектиновому рецептору, VLA-4 не является типичным RGD-связывающим интегрином (Kilger and Holzmann, J. Mol. Meth., 1995, 73, 347).

Лейкоциты, циркулирующие в крови, обычно обнаруживают только слабую аффинность в отношении эндотелиальных клеток сосудов, выстилающих кровеносные сосуды. Цитокины, высвобождаемые из воспаленной ткани, вызывают активацию эндотелиальных клеток и, таким образом, экспрессию большого числа антигенов на клеточной поверхности. К ним относятся, например, факторы адгезии ELAM-1 (фактор адгезии 1 эндотелиальных клеток, обозначаемый также как Е-селектин), связывающий, в частности, нейтрофилы, ICAM-1 (фактор межклеточной адгезии 1), взаимодействующий с LFA-1 (ассоциированный с функцией лейкоцитов антиген 1) на лейкоцитах, и VCAM-1 (фактор адгезии 1 сосудистых клеток), связывающий различные лейкоциты, в частности лимфоциты (Osborn et al., Cell, 1989, 59, 1203). VCAM-1, подобно ICAM-1, является членом суперсемейства иммуноглобулиновых генов. VCAM-1 (сначала известный как INCAM-110) идентифицирован как фактор адгезии, индуцируемый на эндотелиальных клетках цитокинами зоны воспаления, такими как TNF и IL-1, и липополисахаридами (LPS). Elices et al. (Cell, 1990, 60, 577) показали, что VLA-4 и VCAM-1 образуют пару рецептор-лиганд, опосредующую адгезию лимфоцитов к активированному эндотелию. Связывания VCAM-1 с VLA-4 в таком случае не происходит из-за взаимодействия VLA-4 с последовательностью RGD; данная последовательность не содержится во VCAM-1 (Bergelson et al., Current Biology, 1995, 5, 615). Однако VLA-4 также имеется на других лейкоцитах, и адгезия лейкоцитов, иных чем лимфоциты, также опосредуется через механизм адгезии VCAM-1/VLA-4. Таким образом, VLA-4 представляет отдельный пример 1-интегринового рецептора, который, с помощью лигандов VCAM-1 и фибронектина, играет важную роль как во взаимодействии клетки с клеткой, так и во взаимодействии клетки с внеклеточным матриксом.

Цитокининдуцированные факторы адгезии играют важную роль в рекрутменте лейкоцитов во внесосудистые участки тканей. Лейкоциты рекрутируются в воспаленные участки ткани факторами клеточной адгезии, экспрессируемыми на поверхности эндотелиальных клеток, и служат в качестве лигандов для белков поверхности лейкоцитов или белковых комплексов (рецепторы) (термины "лиганд" и "рецептор" можно также использовать наоборот). Лейкоциты из крови, прежде чем мигрировать в синовию, должны сначала прилипнуть к эндотелиальным клеткам. Так как VCAM-1 связывается с клетками, имеющими интегрин VLA-4 (41), такими как эозинофилы, Т- и В-лимфоциты, моноциты или нейтрофилы, VCAM-1 и механизм VCAM-1/VLA-4 имеют функцию рекрутинга клеток данного типа из кровотока в области заражения и центры воспаления (Elices et al., Cell, 1990, 60, 577; Osborn, Cell, 1990, 62, 3; Issekutz et al., J. Exp. Med., 1996, 183, 2175).

Механизм адгезии VCAM-1/VLA-4 связывают с рядом физиологических и патологических процессов. Кроме цитокининдуцированного эндотелия, VCAM-1 дополнительно экспрессируется, в частности, следующими клетками: миобластами, лимфоидными дендритными клетками и тканевыми макрофагами, ревматоидной синовией, цитокинстимулированными нервными клетками, париетальными эпителиальными клетками боуменовой капсулы, эпителием почечных канальцев, воспаленной тканью во время отторжения сердечного или почечного трансплатата и интестинальной тканью при болезни "трансплантат против хозяина". Также обнаружено, что VCAM-1 экспрессируется в участках тканей артериального эндотелия, соответствующих ранним артериосклеротическим бляшкам кроличьей модели. Кроме того, VCAM-1 экспрессируется на фолликулярных дендритных клетках лимфоузлов человека и обнаруживается в клетках стромы костного мозга, например, у мыши. Последние данные указывают на функцию VCAM-1 в развитии В-клеток. Кроме клеток гематопоэтического происхождения, VLA-4 также находят, например, в клеточных линиях меланомы, и механизм адгезии VCAM-1/VLA-4 связывают с метастазом таких опухолей (Rice et al., Science, 1989, 246, 1303).

Основная форма, в которой VCAM-1 встречается in vivo в эндотелиальных клетках и которая является преобладающей формой in vivo, обозначается как VCAM-7D и содержит семь иммуноглобулиновых доменов. Домены 4, 5 и 6 подобны по своим аминокислотным последовательностям доменам 1, 2 и 3. В другой форме, состоящей из шести доменов, названной здесь VCAM-6D, четвертый домен удаляют альтернативным сплайсингом. VCAM-6D также может связывать клетки, экспрессирующие VLA-4.

Другие подробности, касающиеся VLA-4, VCAM-1, интегринов и адгезионных белков можно найти, например, в статьях Kilger and Holzmann, J. Mol. Meth., 1995, 73, 347; Elices, Cell Adhesion in Human Disease, Wiley, Chichester 1995, p.79; Kuijpers, Springer Semin. Immunopathol., 1995, 16, 379.

Вследствие роли механизма VCAM-1/VLA-4 в процессах адгезии клеток, которые важны, например, при инфекциях, воспалениях или атеросклерозе, предпринята попытка посредством вмешательства в указанные адгезионные процессы регулировать болезни, в частности, например, воспаления (Osborn et al., Cell, 1989, 59, 1203). Способом осуществления этого является применение моноклональных антител, направленных против VLA-4. Моноклональные антитела (mAB) такого типа, которые, как антагонисты VLA-4, блокируют взаимодействие между VCAM-1 и VLA-4, известны. Так, например, анти-VLA-4 mAB HP2/1 и НР1/3 ингибируют адгезию клеток Ramos, экспрессирующих VLA-4 (клетки, подобные В-клеткам), к эндотелиальным клеткам пуповины человека и к СОS-клеткам, трансфецированным VCAM-1. Подобным образом, mAB 4В9 против VCAM-1 ингибируют адгезию клеток Ramos, клеток Юрката (клетки, подобные Т-клеткам) и клеток HL60 (гранулоцитоподобные клетки) к СОS-клеткам, трансфецированным генными конструкциями, вызывающими экспрессию VCAM-6D и VCAM-7D. Результаты исследований in vitro с антителами, направленными против субъединицы 4 VLA-4, показывают, что блокируется адгезия лимфоцитов к синовиальным эндотелиальным клеткам, которая имеет значение при ревматоидном артрите (van Dinther-Janssen et al., J. Immunol., 1991, 147, 4207).

Эксперименты in vivo показывают, что экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит можно ингибировать mAB против 4. Подобным образом, моноклональными антителами против цепи 4 VLA-4 блокируется миграция лейкоцитов в центр воспаления. Влияние антител на зависимый от VLA-4 механизм адгезии также исследовалось на модели астмы с целью исследования роли VLA-4 в рекрутменте лейкоцитов в воспаленную ткань легких (WO-A-93/13798). Введение антител против VLA-4 подавляло реакцию замедленного типа и гиперреакцию дыхательных путей у овцы с повышенной чувствительностью.

Зависимый от VLA-4 механизм адгезии клеток также исследовался на приматной модели воспалительного заболевания кишечника (IBD). На такой модели, соответствующей неспецифическому язвенному колиту у человека, введение антител против VLA-4 приводило к существенному снижению острого воспаления.

Кроме того, можно показать, что зависимая от VLA-4 адгезия клеток играет роль в перечисленных далее клинических состояниях, включая хронические воспалительные процессы: ревматоидный артрит (Cronstein and Weismann, Arthritis Rheum., 1993, 36, 147; Elices et al., J. Clin. Invest., 1994, 93, 405), сахарный диабет (Yang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 10494), системная красная волчанка (Takeuchi et al., J. Clin. Invest., 1993, 92, 3008), аллергические реакции замедленного типа (аллергические реакции IV типа) (Elices et al., Clin. Exp. Rheumatod., 1993, 11, S77), рассеянный склероз (Yednock et al., Nature, 1992, 356, 63), малярия (Ockenhouse et al., J. Exp. Med., 1992, 176, 1183), артериосклероз (O'Brien et al., J. Clin. Invest., 1993, 92, 945), трансплантация (Isobe et al., Transplantation Proceedings, 1994, 26, 867), различные злокачественные образования, например меланома (Renkonen et al., Am. J. Pathol., 1992, 140, 763), лимфома (Freedman et al., Blood, 1992, 79, 206) и другие (Albelda et al., J. Cell Biol., 1991, 114, 1059).

Блокирование VLA-4 подходящими антагонистами, соответственно, предоставляет эффективные терапевтические возможности, в частности, например, лечения различных воспалительных состояний, включая астму и IBD. Особая значимость антагонистов VLA-4 для лечения ревматоидного артрита в данном случае проистекает, как уже отмечалось, из того факта, что лейкоциты из крови должны сначала прилипать к эндотелиальным клеткам, прежде чем они смогут мигрировать в синовию, и что рецептор VLA-4 играет роль при таком прилипании. Факт, что VCAM-1 индуцируется факторами воспаления в эндотелиальных клетках (Osborn, Cell, 1990, 62, 3; Stoolman, Cell, 1989, 56, 907), и рекрутмент различных лейкоцитов в участки заражения и центр воспаления уже обсуждались выше. В то же время Т-клетки прилипают к активированному эндотелию, главным образом, через механизмы адгеэии LFA-1/ICAM-1 и VLA-4/VCAM-1 (Springer, Cell, 1994, 76, 301). При ревматоидном артрите для большинства синовиальных T-клеток связывающая способность VLA-4 в отношении VCAM-1 повышается (Postigo et al., J. Clin invest., 1992, 89, 1445). Кроме того, наблюдают повышенную адгезию синовиальных Т-клеток к фибронектину (Laffon et al., J. Clin. Invest., 1991, 88, 546; Morales-Ducret et al., J. Immunol., 1992, 149, 1424). VLA-4 гиперрегулируется как в ходе своей экспрессии, так и в отношении своей функции на Т-лимфоцитах ревматоидной синовиальной мембраны. Блокирование связывания VLA-4 со своими физиологическими лигандами VCAM-1 и фибронектином делает возможным эффективное предупреждение или смягчение воспалительных процессов в суставах. Такое обстоятельство также подтверждается экспериментами с антителами НР2/1 на крысах Lewis с адъювантным артритом, когда наблюдают эффективное предупреждение болезни (Barbadillo et al., Springer Semin. Immunopathol., 1995, 16, 427). Таким образом, VLA-4 является важной лечебной молекулой-мишенью.

Вышеуказанные антитела к VLA-4 и применение антител в качестве антагонистов VLA-4 описываются в заявках на патент WO-А-93/13798, WO-A-93/15764, WO-A-94/16094, WO-A-94/17828 и WO-А-95/19790. В заявках на патент WO-A-94/15958, WO-A-95/15973, WO-A-96/00581, WO-A-96/06108 и WO-A-96/20216 в качестве антагонистов VLA-4 описываются пептиды. Однако применение антител и пептидов в качестве фармацевтических средств имеет ряд недостатков, например утрату пригодности перорального применения, легкость разрушения или иммуногенное действие при длительном применении, и, таким образом, существует потребность в антагонистах VLA-4 с благоприятным профилем свойств для применения при лечении и профилактике.

В WO-A-95/14008, WO-A-93/18057, US-A-5658935, US-A-5686421, US-A-5389614, US-A-5397796, US-A-5424293 и US-A-5554594 описываются замещенные 5-членные кольцевые гетероциклические соединения, имеющие функциональную амино-, амидино- или гуанидиногруппу в N-конце молекулы и обнаруживающие ингибирующее действие на агрегацию тромбоцитов. В ЕР-А-796855 также описываются гетероциклические соединения, являющиеся ингибиторами резорбции кости. В ЕР-А-842943, ЕР-А-842945 и ЕР-А-842944 сообщается, что соединения такого ряда и также другие соединения также неожиданно ингибируют адгезию лейкоцитов и являются антагонистами VLA-4.

В ЕР-А-903353, ЕР-А-905139, ЕР-А-918059 и WO-A-99/60015 (заявка на патент Германии 19821483.9) также описываются соединения, ингибирующие адгезию лейкоцитов и являющиеся антагонистами VLA-4. Однако свойства таких соединений все еще неудовлетворительны в различных отношениях, и существует потребность в соединениях с улучшенным профилем свойств. В ЕР-А-918059 описываются, в частности, имидазолидиновые производные, содержащие спиросистему в имидазолидиновом кольце. Однако конкретно не описываются спироимидазолидиновые производные настоящего изобретения, отличающиеся своим выгодным профилем свойств.

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I

где R¹ представляет водород или метил;

R² представляет фенил или (C₁-C₄ )-алкил;

Х представляет -СН₂-СН₂- или -СН₂-СН₂-СН₂-, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может быть заменена карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -CO-R³, -CO-H, -CH₂-O-R ⁴, -CH₂-O-CO-R⁴, -CH₂ -O-CO-O-R⁵ или 5-тетразолил;

R³ представляет гидрокси, (C₁-С₁₀)-алкокси, фенил-(С ₁-С₈)-алкокси; фенилокси-, (C₁-C ₈)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, фенилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, фенил-(C ₁-C₆)-алкилкарбонилокси-(C₁-C ₆)-алкокси-, (C₁-C₈)-алкоксикарбонилокси-(C ₁-С₆)-алкокси-, фенилоксикарбонилокси-(C ₁-C₆)-алкокси-, фенил-(C₁-C ₆)-алкоксикарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, амино, моно-((С₁-C₁₀)-алкил) амино-, ди-((C ₁-С₁₀)-алкил)амино- или R⁴R ⁴N-CO-(C₁-C₆)-алкокси-, где остатки R⁴ не зависят один от другого и могут быть одинаковыми или различными;

R⁴ представляет водород, (C ₁-С₁₀)-алкил, фенил или фенил-(C₁ -C₈)-алкил-;

R⁵ имеет одно из значений R⁴ за исключением водорода;

фенил представляет незамещенный фенильный остаток или фенильный остаток, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями из группы, состоящей из (C₁-C₄)-алкила, (C₁-C₄)-алкокси, метилендиокси, этилендиокси, галогена, трифторметила и трифторметокси;

во всех их стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и к их физиологически допустимым (толерантным) солям.

Если в соединении формулы I остаток встречается более одного раза, например, если R ² представляет фенил, и фенильный остаток также содержится в группе Е, такие остатки во всех случаях не зависят один от другого и могут быть одинаковыми или различными.

Алкильные остатки могут быть прямыми или разветвленными. Такое определение также применимо, если они содержат заместители или встречаются как заместители в других остатках, например в алкоксиостатках, алкоксикарбонильных остатках или аралкильных остатках. Примерами подходящих алкильных остатков являются метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил, изопропил, изобутил, изопентил, изогексил, 3-метилпентил, неопентил, неогексил, 2,3,5-триметилгексил, втор-бутил, трет-бутил, трет-пентил. Предпочтительными алкильными остатками являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, иэобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, н-гексил и изогексил. Замещенные алкильные остатки могут быть замещены в любых требуемых положениях.

Если двухвалентный остаток Х в формуле I представляет собой двухвалентный 1,2-этиленовый остаток -СН₂-СН₂ -, т.е., если Х вместе с двумя группами CH₂, к которым Х присоединяется, образует тетраметиленовый остаток, соединения формулы I содержат спироциклопентановое кольцо, и, таким образом, имеются соединения формулы Iа, которые можно назвать производными 4,4-тетраметиленимидазолидина.

Если в соединениях формулы Iа одну из групп СН₂ в циклопентановом кольце заменяют группой С=O, т.е., если Х в формуле I представляет собой группу -СН₂-СО- или -CO-CH₂-, имеются соединения формулы Ib.

В соединениях формулы Ib X вместе с двумя группами CH ₂ в формуле I, с которыми соединяется X, образует 2-оксотетраметиленовый остаток -СН₂-СО-СН₂-СН₂-. Соединения формулы Ib можно назвать производными 4,4-(2-оксотетраметилен)имидазолидина.

Если двухвалентный остаток Х в формуле I представляет собой двухвалентный 1,3-пропиленовый остаток -СН₂-СН ₂-СН₂-, т.е., если Х вместе с двумя группами СН₂, к которым Х присоединяется, образует пентаметиленовый остаток, соединения формулы I содержат спироциклогексановое кольцо, и, таким образом, имеются соединения формулы Iс, которые можно назвать производными 4,4-пентаметиленимидазолидина.

Если в соединениях формулы Iс одну из групп СН₂ в циклогексановом кольце заменяют группой С=O, т.е., если Х представляет собой одну из групп -СО-СН₂-СН₂ -, -СН₂-СО-СН₂- или -СН₂-СН ₂-СО-, имеются соединения формулы Id или Iе.

В соединениях формул Id и Ie X вместе с двумя группами CH₂ в формуле I, с которыми Х соединяется, образует 2-оксопентаметиленовый остаток -CH₂-CO-CH₂ -CH₂-CH₂- или 3-оксопентаметиленовый остаток -CH₂-CH₂-CO-CH₂-CH₂ -. Соединения формул Id и Ie можно назвать производными 4,4-(2-оксопентаметилен)имидазолидина и производными 4,4-(3-оксопентаметилен)имидазолидина. Если в остатке -CH₂-CH₂-CH₂-, представляющем X, группу СН₂ заменяют карбонильной группой, предпочтительно заменять среднюю группу СН₂, т.е. в данном случае, предпочтительно, имеются соединения формулы Ie.

Фенильные остатки могут быть незамещенными или являются монозамещенными или полизамещенными, например монозамещенными, дизамещенными, тризамещенными, тетразамещенными или пятизамещенными, одинаковыми или различными остатками. Если фенильный остаток является замещенным, предпочтительно, он содержит один или два одинаковых или различных заместителя. То же самое применимо, например, к замещенным фенильным остаткам в таких группах, как фенилалкил, фенилкарбонил и т.п. Фенилалкильными остатками являются, например, бензил, 1-фенилэтил или 2-фенилэтил, в частности бензил, которые все также могут быть замещенными.

В монозамещенных фенильных остатках заместитель может располагаться в положении 2, положении 3 или положении 4. В дизамещенных фенильных остатках заместители могут располагаться в 2,3-положении, 2,4-положении, 2,5-положении, 2,6-положении, 3,4-положении или 3,5-положении. В трехзамещенных остатках заместители могут располагаться в 2,3,4-положении, 2,3,5-положении, 2,4,5-положении, 2,4,6-положении, 2,3,6-положении или 3,4,5-положении. Если фенильный остаток содержит заместитель из группы, состоящей из метилендиокси (-О-СН₂-О-) и этилендиокси (-О-СН₂-СН ₂-О-), он, предпочтительно, содержит только один заместитель из указанной группы (необязательно, в дополнение к другим заместителям).

Примерами замещенных фенильных остатков, которые, например, могут представлять собой R², являются 2-метилфенил, 3-метилфенил, 4-метилфенил, 2,3-диметилфенил, 2,4-диметилфенил, 2,5-диметилфенил, 2,6-диметилфенил, 3,4-диметилфенил, 3,5-диметилфенил, 2,4,5-триметилфенил, 2,4,6-триметилфенил, 3,4,5-триметилфенил, 2-(н-бутил)фенил, 3-(н-бутил)фенил, 4-(н-бутил)фенил, 2-изобутилфенил, 3-изобутилфенил, 4-изобутилфенил, 3-трет-бутилфенил, 4-трет-бутилфенил, 2-метоксифенил, 3-метоксифенил, 4-метоксифенил, 2,3-диметоксифенил, 2,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 2,6-диметоксифенил, 3,4-диметоксифенил, 3,5-диметоксифенил, 2,4,5-триметоксифенил, 2,4,6-триметоксифенил, 3,4,5-триметоксифенил, 2-(н-бутокси)фенил, 3-(н-бутокси)фенил, 4-(н-бутокси)фенил, 2-изобутоксифенил, 3-изобутоксифенил, 4-изобутоксифенил, 2-трет-бутоксифенил, 3-трет-бутоксифенил, 4-трет-бутоксифенил, 2,3-метилендиоксифенил, 3,4-метилендиоксифенил, 2,3-этилендиоксифенил, 3,4-этилендиоксифенил, 2-фторфенил, 3-фторфенил, 4-фторфенил, 2,3-дифторфенил, 2,4-дифторфенил, 2,5-дифторфенил, 2,6-дифторфенил, 3,4-дифторфенил, 3,5-дифторфенил, 2,4,5-трифторфенил, 2,4,6-трифторфенил, 3,4,5-трифторфенил, 2,3,5,6-тетрафторфенил, 2,3,4,5,6-пентафторфенил, 2-хлорфенил, 3-хлорфенил, 4-хлорфенил, 2,3-дихлорфенил, 2,4-дихлорфенил, 2,5-дихлорфенил, 2,6-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 3,5-дихлорфенил, 2-бромфенил, 3-бромфенил, 4-бромфенил, 3-иодфенил, 4-иодфенил, 2-трифторметилфенил, 3-трифторметилфенил, 4-трифторметилфенил, 3,4-бис(трифторметил)фенил, 3,5-бис(трифторметил)фенил, 2-трифторметоксифенил, 3-трифторметоксифенил, 4-трифторметоксифенил и т.п. Однако в замещенных фенильных остатках также могут содержаться различные заместители в любом желаемом сочетании, таком как, например, в остатках 3-метокси-4-метилфенил, 4-фтор-3-метоксифенил, 3-фтор-4-метоксифенил, 3,5-дифтор-4-метоксифенил, 3-фтор-4,5-метилендиоксифенил, 3-фтор-4,5-этилендиоксифенил, 2-хлор-3-метилфенил, 3-хлор-4-метилфенил, 3-хлор-4-фторфенил и т.п.

Галоген представляет собой фтор, хлор, бром или иод, в частности, фтор или хлор.

Физиологически допустимые соли соединений формулы I представляют собой, в частности, нетоксичные или фармацевтически используемые соли. Соли такого типа соединений формулы I, содержащих кислотные группы, например, карбоксильную группу, представляющую группу Е, представляют собой, например, соли щелочных металлов или соли щелочноземельных металлов, такие как, например, натриевые соли, калиевые соли, магниевые соли и кальциевые соли, или соли аммония, такие как, например, соли с физиологически допустимыми ионами четвертичного аммония, и аддитивные соли кислот с аммиаком и физиологически допустимыми органическими аминами, такими как, например, метиламин, этиламин, триэтиламин, 2-гидроксиэтиламин, трис(2-гидроксиэтил)амин, ,,-трис(гидроксиметил)метиламин (трометамин), или аминокислотами, в частности основными аминокислотами. Соли кислотных соединений формулы I и органического амина могут содержать два компонента в соотношении 1:1 (или примерно 1:1) или в другом соотношении, например в соотношении от примерно 1:0,5 до 1:4 (1 молекула соединения формулы I на 0,5-4 молекулы амина), в частности, в соотношении от примерно 1:0,5 до 1:2 (1 молекула соединения формулы I на 0,5-2 молекулы амина).

Соединения формулы I, содержащие основные группы, например аминогруппу, в спиртовом компоненте группы эфира карбоновой кислоты, образуют соли с неорганическими кислотами, такими как, например, хлористоводородная кислота, серная кислота или фосфорная кислота, и с органическими карбоновыми кислотами или сульфоновыми кислотами, такими как, например, уксусная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, метансульфоновая кислота или п-толуолсульфоновая кислота. Соединения, содержащие как кислотные группы, так и основные группы, также могут находиться в форме внутренних солей или бетаинов или цвиттер-ионов, которые также входят в настоящее изобретение.

Получить соли из соединений формулы I можно в соответствии с обычными способами, известными специалистам в этой области, например путем сочетания с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или разбавителе, или также из других солей путем анионного обмена или катионного обмена.

Соединения формулы I могут находиться в стереоизомерных формах. При всех асимметричных центрах в соединениях формулы I, независимо друг от друга, могут существовать S-конфигурация или R-конфигурация, или может существовать смесь R/S. Так, асимметричный атом углерода, к которому присоединяется остаток R² , может иметь R-конфигурацию или S-конфигурацию, или соединение формулы I может быть представлено, относительно указанного атома углерода, в виде смеси R/S. Подобным образом, асимметричный атом углерода, к которому присоединяются группа -CH₂-W, представляющая собой изобутильную группу (= 2-метилпропильную группу) или циклопропилметильную группу, и имидазолидиновое кольцо, может иметь R-конфигурацию или S-конфигурацию, или соединение формулы I может быть представлено, относительно указанного атома углерода, в виде смеси R/S. Все другие асимметричные атомы углерода также могут иметь R-конфигурацию или S-конфигурацию, или соединение формулы I может быть представлено, относительно каждого из таких атомов углерода, в виде смеси R/S.

Изобретение включает в себя все возможные стереоизомеры соединений формулы I, например, чистые или в значительной степени чистые энантиомеры и чистые или в значительной степени чистые диастереомеры, и смеси двух или большего числа стереоизомерных форм, например, смеси энантиомеров и/или диастереомеров во всех соотношениях. Таким образом, энантиомеры являются предметом изобретения в энантиомерно чистой форме, как в виде левовращающих, так и в виде правовращающих антиподов, в форме рацематов и в форме смесей двух энантиомеров во всех соотношениях. Подобным образом, диастереомеры в диастереомерно чистой форме и в форме смесей во всех соотношениях являются предметом изобретения. Примерами отдельных стереоизомеров, представляющих собой предмет изобретения, являются соединения формул If, Ig, Ih и Ii.

При необходимости отдельные стереоизомеры можно получить, используя исходные вещества при синтезе в стереохимически определенной форме, путем стереоселективного синтеза или путем разделения смеси согласно обычным способам, например, хроматографией или кристаллизацией, например, в случае энантиомеров, хроматографией на хиральных фазах. Перед разделением стереоизомеров можно осуществить, необязательно, превращение в другие производные. Разделение смеси стереоизомеров может происходить на стадии соединений формулы I или в ходе синтеза на стадии исходного вещества или промежуточного вещества.

Соединения формулы I по настоящему изобретению могут содержать подвижные атомы водорода, т.е. находиться в различных таутомерных формах. Все таутомеры соединений формулы I также являются предметом настоящего изобретения. Настоящее изобретение также включает сольваты и аддитивные соединения или аддукты соединений формулы I, например аддукты с водой, т.е. гидраты, или аддукты со спиртами или аминами. Изобретение также включает производные соединений формулы I, например эфиры, амиды, пролекарства и другие физиологически допустимые производные, а также активные метаболиты соединений формулы I. Изобретение, в частности, также относится к пролекарствам соединений формулы I, которые могут превращаться в соединения формулы I в физиологических условиях. Подходящие пролекарства соединений формулы I, т.е. химически модифицированные производные соединений формулы I, обладающие желательно улучшенными свойствами, известны специалистам в данной области. Подробности, касающиеся пролекарств, можно найти, например, в Fleisher et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 19 (1996), 115; Design of Prodrugs, H.Bundgaard, Ed., Elsevier, 1985; H.Bundgaard, Drugs of the Future, 16 (1991), 443. Возможными пролекарствами соединений формулы I являются, в особенности, пролекарства-эфиры, пролекарства-амиды, пролекарства-альдегиды и пролекарства-спирты, образованные по карбоксильным группам. Примерами пролекарств-эфиров и пролекарств-амидов, которые можно назвать, являются (C₁-C₄)-алкилэфиры, такие как метиловые эфиры, этиловые эфиры, изопропиловые эфиры, изобутиловые эфиры, замещенные алкилэфиры, такие как гидроксиалкилэфиры, ацилоксиалкилэфиры, аминоалкилэфиры, ациламиноалкилэфиры, диалкиламиноалкилэфиры, незамещенные амиды или N-(C₁-C₄)-алкиламиды, такие как метиламиды или этиламиды.

Что касается структурных элементов V и W, то настоящее изобретение включает четыре варианта, каждый из которых определенно является предметом настоящего изобретения. В одном из указанных вариантов группа W в формуле I представляет изопропил, т.е. остаток -СН(СН₃)₂, и V в то же самое время представляет водород. Таким образом, указанный вариант включает соединения формулы Ik

где R¹ представляет водород или метил;

R² представляет фенил или (C₁-C₄ )-алкил;

Х представляет -СН₂-СН₂- или -CH₂-CH₂-CH₂-, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может быть заменена карбонильной группой С=O;

Е представляет -CO-R ³, -СО-Н, -CH₂-O-R⁴, -CH ₂-O-CO-R⁴, -CH₂-O-CO-O-R⁵ или 5-тетразолил;

R³ представляет гидрокси, (C₁-C₁₀)-алкокси, фенил-(C₁-C ₈)-алкокси; фенилокси-, (C₁-C₆ )-алкилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, фенилкарбонилокси-(C ₁-C₆)-алкокси-, фенил-(C₁-C ₆)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, (C₁-C₈)-алкоксикарбонилокси-(C₁ -C₆)-алкокси-, фенилоксикарбонилокси-(C₁ -C₆)-алкокси-, фенил-(C₁-C₆)-алкоксикарбонилокси-(C ₁-C₆)-алкокси-, амино, моно-((C₁ -С₁₀)-алкил)амино-, ди-((C₁-С₁₀ )-алкил)амино- или R⁴R⁴N-CO-(C₁ -С₆)-алкокси-, где остатки R⁴ не зависят друг от друга и могут быть одинаковыми или различными;

R⁴ представляет водород, (C₁-С₁₀ )-алкил, фенил или фенил-(C₁-C₈) -алкил-;

R⁵ имеет одно из значений R⁴ за исключением водорода;

фенил представляет незамещенный фенильный остаток или фенильный остаток, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями из группы, состоящей из (C₁-C₄)-алкила, (C₁-C ₄)-алкокси, метилендиокси, этилендиокси, галогена, трифторметила и трифторметокси;

и все их стереоизомерные формы и их смеси во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

Второй из указанных четырех вариантов относится к соединениям формулы I, в которых W представляет собой циклопропил, т.е. остаток

и V в то же самое время представляет водород.

Третий вариант относится к соединениям формулы I, в которых W представляет собой изопропил, и V в то же самое время представляет метокси, т.е. остаток -ОСН₃. Четвертый вариант относится к соединениям формулы I, в которых W представляет циклопропил и V в то же самое время представляет метокси. Подгруппа соединений по настоящему изобретению включает соединения второго, третьего и четвертого вариантов, описанных выше, т.е. соединения формулы I, в которых V представляет водород или метокси и W представляет изопропил или циклопропил, но в которых одновременно V не представляет водород и W не представляет собой изопропил. Соединения второго, третьего и четвертого вариантов воплощения изобретения также являются предметом изобретения во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях и в форме их физиологически допустимых солей.

Отдельные структурные элементы в формуле I, предпочтительно, имеют указанные далее значения, которые они могут иметь одно независимо от другого.

Е, предпочтительно, представляет -CO-R³, -CO-H, -CH₂-O-R ⁴, -СН₂-O-CO-R⁴ или -CH₂ -O-CO-O-R⁵, в частности, предпочтительно, -CO-R ³, -CO-H, -CH₂-O-R⁴ или -СН₂ -O-CO-R⁴, еще предпочтительнее, -CO-R³ , -CH₂-O-R⁴ или -CH₂-O-CO-R ⁴, еще предпочтительнее, -CO-R³ или -СН ₂-O-R⁴ и, особенно предпочтительно, -CO-R ³. Остаток -CH₂-O-R⁴, представляющий группу Е, предпочтительно, представляет собой гидроксиметильный остаток -CH₂-OH. Особенно предпочтительными значениями Е являются -СО-O-(C₁-C₄)-алкил, -СО-ОН, -CO-NH₂ и -СН₂-ОН, в частности, -СО-ОН, -CO-NH₂ и -СН₂-ОН, в особенности, -СО-ОН.

X, предпочтительно, представляет -CH₂-CH ₂- или -СН₂-СН₂-СН₂-, в частности, -СН₂-СН₂-СН₂-, где ни одна из групп CH₂ не заменяется карбонильной группой.

R² представляет, предпочтительно, незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя (C₁ -C₄)-алкоксигруппами, в частности, метоксигруппами, или (C₁-C₄)-алкил, где (C₁-C ₄)-алкильная группа, предпочтительно, представляет собой метил, этил или изобутил, предпочтительнее метил или этил, особенно предпочтительно метил. В частности, предпочтительно, когда R² представляет собой незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя метоксигруппами, или метил. В частности, весьма предпочтительно, когда R² представляет собой незамещенный фенил, 3,4-метилендиоксифенил, 3,4-этилендиоксифенил, 2-метоксифенил, 3-метоксифенил, 4-метоксифенил, 2,3-диметоксифенил, 2,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 2,6-диметоксифенил, 3,4-диметоксифенил, 3,5-диметоксифенил или метил.

R³ представляет, предпочтительно, гидрокси, (C₁-C₆)-алкокси или амино (-NH₂), особенно предпочтительно гидрокси, (C₁-C₄)-алкокси или амино, и, в частности, весьма предпочтительно гидрокси или амино, особенно предпочтительно гидрокси.

R⁴ представляет, предпочтительно, водород или (C₁-C₆)-алкил, в частности, предпочтительно водород или (C₁-C₄)-алкил. R⁵ представляет собой, предпочтительно, (C₁ -С₆)-алкил, в частности, предпочтительно (C₁ -C₄)-алкил.

Предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, имеющие однотипную конфигурацию у одного или нескольких хиральных центров, например, у атома углерода, к которому присоединен остаток R², и/или у атома углерода, к которому присоединена группа -CH₂-W. Т.е. предпочтительны соединения, находящиеся в однотипной или по существу однотипной, конфигурации у одного или нескольких хиральных центров - или в R-конфигурации или в S-конфигурации, но не в виде смеси R/S. Как пояснялось, отдельные хиральные центры в таких соединениях формулы I, однако, могут, независимо один от другого, иметь или R-конфигурацию или S-конфигурацию и могут иметь идентичную или разную конфигурацию. В частности, предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, в которых атом углерода, к которому присоединена группа -CH₂-W, находится в S-конфигурации, т.е. в конфигурации относительно указанного стереоцентра, показанной в формулах If и Ig. Особенно предпочтительными соединениями формулы I являются также соединения, в которых атом углерода, к которому присоединена группа R², находится в конфигурации, показанной в формулах If и Ih. Если R² представляет собой фенил или замещенный фенил, в таких особенно предпочтительных соединениях атом углерода, к которому присоединена группа R ², находится в S-конфигурации, если R² представляет собой, например, метил, этил или изобутил, он имеет R-конфигурацию. В частности, весьма предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, в которых два вышеуказанных стереоцентра находятся в конфигурации, показанной в формуле If.

Предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, в которых один или несколько остатков имеют предпочтительные значения или имеют конкретные значения из числа значений, перечисленных выше, причем все сочетания предпочтительных значений остатков являются предметом настоящего изобретения.

Особенно предпочтительными соединениями являются соединения формулы I, в которых

R¹ представляет водород или метил;

R² представляет незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя (C₁-C₄)-алкоксигруппами, или (C₁ -C₄)-алкил;

Х представляет -CH₂-CH ₂- или -CH₂-CH₂-CH₂ -, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может заменяться карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -CO-R³, -СО-Н, -CH₂ -O-R⁴, -CH₂-O-CO-R⁴ или -CH ₂-O-CO-O-R⁵;

R³ представляет гидрокси, (C₁-С₁₀)-алкокси, фенил-(C ₁-C₈)-алкокси-, фенилокси-, (C₁-C ₈)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, фенилкарбонилокси-(C₁-С₆)-алкокси-, фенил-(C ₁-C₆)-алкилкарбонилокси-(C₁-C ₆)-алкокси-, (C₁-C₈)-алкоксикарбонилокси-(C ₁-С₆)-алкокси-, фенилоксикарбонилокси-(C ₁-C₆)-алкокси-, фенил-(C₁-C ₆)-алкоксикарбонилокси-(C₁-C₆)-алкокси-, амино, моно-((С₁-С₁₀)-алкил) амино-, ди-((C ₁-С₁₀)-алкил)амино- или R⁴R ⁴N-CO-(C₁-С₆)-алкокси-, где остатки R⁴ не зависят один от другого и могут быть одинаковыми или различными;

R⁴ представляет водород, (C ₁-С₁₀)-алкил, фенил или фенил-(C₁ -C₈) -алкил-;

R⁵ имеет одно из значений R⁴ за исключением водорода;

фенил, содержащийся в группе Е, представляет незамещенный фенильный остаток или фенильный остаток, замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями из группы, состоящей из (C₁-C₄ )-алкила, (C₁-C₄)-алкокси, метилендиокси, этилендиокси, галогена, трифторметила и трифторметокси,

во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

В частности, весьма предпочтительными соединениями являются соединения формулы I, в которых

R¹ представляет водород или метил;

R² представляет незамещенный фенил, фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, фенил, замещенный одной или двумя метоксигруппами, или (C ₁-C₄)-алкил;

X представляет -СН₂ -СН₂- или -СН₂-СН₂-СН₂ -, где одна из групп CH₂ в указанных двух остатках может заменяться карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -СО-ОН, -СО-O-(C₁-C₄ )-алкил, -CO-NH₂ или -СН₂-ОН,

во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

Подгруппу таких соединений образуют соединения формулы I, в которых

R¹ представляет водород или метил;

R² представляет фенил, замещенный остатком метилендиокси или остатком этилендиокси, или фенил, замещенный одной или двумя метоксигруппами;

Х представляет -СН₂-СН₂- или -CH₂ -CH₂-CH₂-, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может заменяться карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -СО-ОН, -СО-O-(C₁-C₄)-алкил, -CO-NH₂ или -СН₂-ОН,

во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

Другую подгруппу таких соединений образуют соединения формулы I, в которых

R¹ представляет водород или метил;

R² представляет незамещенный фенил;

Х представляет -CH₂-CH₂- или -СН₂-СН₂-СН₂-, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может заменяться карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -СО-ОН, -СО-O-(C₁-C₄)-алкил, -CO-NH₂ или -СН₂-ОН,

во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

Другую подгруппу таких соединений образуют соединения формулы I, в которых

R¹ представляет водород или метил;

R² представляет (C₁ -C₄)-алкил, предпочтительно метил;

Х представляет -СН₂-СН₂- или -СН₂-СН₂ -СН₂-, где одна из групп СН₂ в указанных двух остатках может заменяться карбонильной группой С=O;

W представляет изопропил или циклопропил;

V представляет водород или метокси;

Е представляет -СО-ОН, -СО-O-(C ₁-C₄)-алкил, -CO-NH₂ или -СН ₂-ОН,

во всех своих стереоизомерных формах и их смесях во всех соотношениях, и их физиологически допустимые соли.

В случае указанного выше варианта воплощения изобретения, где группа V в соединениях формулы I представляет водород и группа W представляет изопропил, т.е. в случае соединений формулы Ik, примерами конкретных соединений являются соединения, перечисленные ниже, каждое из которых определенно является предметом настоящего изобретения. В названиях соединений используются аббревиатуры, указанные далее.

IBU=2-метилпропил=изобутил=-СН-СН ₂-СН (СН₃)₂

4PM-3-PUB-DI=4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4PM-3-MPUB-DI=4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4TM-3-PUB-DI=4,4-тетраметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4TM-3-MPUB-DI=4,4-тетраметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4OPM-3-PUB-DI=4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4OPM-3-MPUB-DI=4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4OTM-3-PUB-DI=4,4-(2-оксотетраметилен)-3-(4-(3-фенилуреидо) бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил

4OTM-3-MPUB-DI=4,4-(2-оксотетраметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил.

Таким образом, такое название, как, например, 3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид следует понимать как обозначающее соединение 3-(2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид формулы Im.

Настоящее изобретение относится, например, к перечисленным ниже соединениям, таким как

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4OТМ-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4OТМ-3-МРUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DD-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-метилпропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4ТМ-3-МPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IВU)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(IBU)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-фенилпропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметокcифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,3-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OТМ-3-МРUВ-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(2,6-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-З-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OРМ-3-МPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,5-диметоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-метилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионамид;

3-(2-(4PM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4PM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4TM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OPM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-PUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол;

3-(2-(4OTM-3-MPUB-DI)-2-(IBU)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропанол.

Все вышеуказанные соединения являются предметом настоящего изобретения во всех своих стереоизомерных формах и в форме их смесей во всех соотношениях. Таким образом, указанное выше в качестве примера соединение 3-(2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамид является предметом изобретения, в частности, в форме (RS)-3-((RS)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (S)-3-((S)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (S)-3-((R)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (R)-3-((S)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (R)-3-((R)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (S)-3-((RS)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (R)-3-((RS)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, в форме (RS)-3-((R)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида и в форме (RS)-3-((S)-2-(4,4-(3-оксопентаметилен)-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионамида, и это определенно применяется ко всем указанным соединениям. В другом аспекте рассмотрения данной ситуации, касающемся отдельных стереоизомеров, все указанные соединения являются предметом изобретения в стереохимическом расположении, показанном формулой If, так же, как и в расположении, показанном формулой Ig, так же, как и в расположении, показанном формулой Ih, так же, как и в расположении, показанном формулой Ii, в частности, в расположении, показанном формулой If. Также все перечисленные выше соединения являются предметом изобретения в форме их физиологически допустимых солей и в форме их пролекарств и других физиологически допустимых производных, например, их эфиров.

Настоящее изобретение также определенно относится ко всем соединениям, аналогичным перечисленным отдельным соединениям, содержащим вместо изобутилзамещенной ацетиламиногруппы циклопропилметилзамещенную ацетиламиногруппу, и ко всем соединениям, аналогичным перечисленным отдельным соединениям, содержащим вместо 4-(3-арилуреидо)бензильной группы 4-(3-арилуреидо)-3-метоксибензильную группу, и ко всем соединениям, аналогичным перечисленным отдельным соединениям, одновременно содержащим вместо изобутилзамещенной ацетиламиногруппы циклопропилметилзамещенную ацетиламиногруппу и вместо 4-(3-арилуреидо)бензильной группы 4-(3-арилуреидо)-3-метоксибензильную группу, где также все указанные соединения являются предметом настоящего изобретения во всех своих стереоизомерных формах и в форме их смесей во всех соотношениях, и в форме их физиологически допустимых солей, и в форме их пролекарств.

Соединения формулы I можно получить, например, путем конденсации соединения формулы II

с соединением формулы III

где в формулах II и III группы X, W, V, Е, R¹ и R² имеют указанные выше значения или также функциональные группы в указанных группах могут находиться в защищенной форме или в форме предшественников и где G представляет собой гидроксикарбонил, (C₁-С₆)-алкоксикарбонил или активированное производное карбоновой кислоты, такое как хлорангидрид или активный эфир.

При конденсации соединений формул II и III, как правило, необходимо, чтобы карбоксильная группа, которая присутствует, но не участвует в реакции конденсации, была защищена удаляемой защитной группой, например такой как подходящая (C₁ -C₆)-алкилсложноэфирная, например трет-бутилэфирная или бензилэфирная. Если необходимо получить соединения формулы I, в которых группа Е представляет собой, например, гидроксикарбонил или группу, которую необходимо получить из гидроксикарбонильной группы в соединениях формулы III, например, группа Е сначала может представлять собой гидроксикарбонильную группу, присутствующую в защищенной форме, а затем, после конденсации соединений формул II и III в одну или несколько стадий, гидроксикарбонильную группу можно вернуть в свободное состояние или можно синтезировать нужную группу Е.

Предшественниками функциональных групп являются группы, которые можно превратить в нужные функциональные группы обычными способами синтеза, известными специалистам в этой области. Например, цианогруппу, которую можно превратить в амидную группу или карбоксильную группу путем гидролиза или можно превратить в тетразол путем взаимодействия с азидом, можно назвать предшественником указанных групп. Спиртовую группу, которую можно окислить до альдегидной группы, можно назвать предшественником такой группы. Примеры защитных групп, которые вводят в молекулу перед реакцией или последовательностью реакций и позднее снова удаляют, уже указывались.

Для конденсации соединений формул II и III выгодно использовать методы сочетания из химии пептидов, хорошо известные специалистам в этой области (см., например, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Volume 15/1 and 15/2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974). Подходящими агентами конденсации или реагентами сочетания являются, например, карбонилдиимидазол, карбодиимиды, такие как дициклогексилкарбодиимид (DCC) или диизопропилкарбодиимид, тетрафтороборат O-((циано(этоксикарбонил)метилен)амино)-N,N,N',N'-тетраметилурония (TOTU) или пропилфосфоновый ангидрид (РРА). Конденсацию можно осуществить в стандартных условиях, хорошо известных специалистам в этой области. Вообще, такие взаимодействия осуществляют в инертном растворителе или разбавителе, например в апротонном растворителе, таком как N,N-диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО), N-метил-2-пирролидон (NMP), тетрагидрофуран (ТГФ) или диметоксиэтан (DME). В зависимости от конденсации, осуществляемой в конкретном случае, может быть выгодным добавление основания, такого как третичный амин, или вспомогательных реагентов, например N-гидроксисоединения, такого как 1-гидроксибензотриазол (НОВТ). Обработку реакционной смеси и очистку продукта реакции можно осуществить обычными стандартными способами. После конденсации подходящим способом удаляют имеющиеся защитные группы. Например, бензильные группы в бензиловых эфирах можно удалить гидрированием или защитные группы типа трет-бутильных можно удалить в кислой среде. Соединения формулы I также можно получить, например, путем постадийного синтеза соединений на твердой фазе согласно обычным способам, причем возможно вводить отдельные структурные элементы молекулы в различной последовательности.

Аминосоединения формулы III являются коммерчески доступными или могут быть синтезированы в соответствии с хорошо известными стандартными способами из исходных веществ, являющихся коммерчески доступными, или их, в свою очередь, можно получить аналогично методам, описанным в литературе. Например, оптически активные 3-замещенные 3-аминопропионовые кислоты формулы III или их эфиры, в частности эфиры 3-фенил-3-аминопропионовой кислоты, можно получить из соответствующих 3-замещенных акриловых кислот, которые, в свою очередь, можно получить из соответствующих альдегидов. 3-Замещенные акриловые кислоты превращают в хлорангидриды с использованием оксалилхлорида и хлорангидриды превращают в сложные эфиры с использованием спирта, например в трет-бутиловые эфиры, с использованием трет-бутанола. Для введения аминогруппы сложный эфир затем вводят во взаимодействие с литиевой солью оптически активного амина, например литиевой солью (R)-(+)-N-бензил-N-(1-фенилэтил)амина, и затем из полученного 3-замещенного трет-бутил-3-(N-бензил-N-(1-фенилэтил)амино)пропионата каталитическим гидрированием удаляют бензильную группу и фенилэтильную группу. Для получения соединений формулы III, в которых Е представляет собой гидроксиметильную группу СН₂OН или этерифицированную (с образованием простого или сложного эфира) гидроксиметильную группу, в реакции конденсации можно использовать 3-замещенные 3-аминопропанолы или их сложные или простые эфиры, которые можно получить из 3-замещенных 3-аминопропионовых кислот или их эфиров путем восстановления кислотной группы (или сложноэфирной группы), например из этилового эфира или трет-бутилового эфира, с использованием алюмогидрида лития или смеси алюмогидрида лития и трихлорида алюминия.

Соединения формулы II можно получить, например, вводя сначала соединения формулы IV

в реакцию Бухерера, например, с карбонатом аммония и цианидом калия, с образованием соединений формулы V

где, в указанных формулах IV и V, группа Х имеет значения, указанные выше, или функциональная группа может присутствовать в защищенной форме или в форме предшественника. Затем можно получить соединения формулы VI

где W, Х и G имеют значения, указанные выше, или функциональные группы могут присутствовать в защищенной форме или в форме предшественников, вводя соединения формулы V во взаимодействие, например, с первым алкилирующим реагентом формулы LG-CH(G)-CH₂-W, который вводит в молекулу остаток -СН(G)-CH₂-W. Затем взаимодействие соединений формулы VI со вторым алкилирующим реагентом формулы VII

где V и R¹ имеют значения, указанные выше,

приводит к соответствующим соединениям формулы II. Группа LG является нуклеофильно замещенной удаляемой группой, например галогеном, таким как хлор или бром, или сульфонилокси, таким как тозилокси, метилсульфонилокси или трифторметилсульфонилокси.

Соединения формулы II также можно получить, например, путем взаимодействия соединения формулы VI сначала с реагентом формулы 4-(PG-NH) -C₆VH₃-CH₂ -LG, где LG, в свою очередь, является нуклеофильно замещаемой удаляемой группой, и группа V в положении 3 представляет собой водород или метокси, с образованием соединения формулы VIII

где значения, указанные выше, применяют к G, V, W и X и PG представляет собой защитную группу для аминогруппы, например трет-бутоксикарбонил или бензилоксикарбонил.

После удаления защитной группы PG соединения формулы II получают путем взаимодействия полученной аминогруппы H₂N с фенилизоцианатом или с 2-метилфенилизоцианатом. Подобно соединениям формулы VIII можно также получить и использовать соединения, в которых группа PG-NH- в формуле VIII заменена группой, являющейся предшественником аминогруппы, и которую затем превращают в аминогруппу на следующей стадии взаимодействия. Например, соединение формулы VI можно сначала ввести во взаимодействие с нитросоединением формулы 4-O ₂N-С₆VН₃-СН₂-LС с образованием соединения, соответствующего соединению формулы VIII, затем нитрогруппу можно превратить в аминогруппу, например, каталитическим гидрированием, и затем аминогруппу можно превратить в нужную группу соединения формулы II с использованием фенилизоцианата или 2-метилфенилизоцианата.

В случае, когда необходимо получить соединение формулы I, где одна из групп CH₂ в группе Х в спирокольце заменена группой С=O, выгодно сначала защитить указанную карбонильную группу, например, в виде кеталя и осуществить реакцию Бухерера с соединением формулы IV, содержащим защитную группу, например, монокеталем циклоалкандиона. Затем осуществляют алкилирование соединения формулы V, содержащего защитную группу, с образованием соединений формул VI и VIII, как пояснялось выше, и затем, или иначе - на последней стадии синтеза, карбонильную группу в группе Х снова приводят в свободное состояние. В случае кеталя как защитной группы удаление защитной группы из карбонильной группы можно осуществить путем обработки кислотой аналогично методам, описанным в литературе.

Вообще, отдельные стадии получения соединений формулы I можно осуществить согласно, или аналогично, известным способам, с которыми хорошо знакомы специалисты в этой области. Как уже указывалось и как известно специалистам в этой области, в зависимости от конкретного случая на всех стадиях синтеза соединений формулы I может подойти временное блокирование функциональных групп, которые могли бы вызвать побочные реакции или нежелательные реакции, с помощью стратегии защитных групп, разработанной для решения проблем синтеза.

Соединения формулы I также можно получить следующим образом. Путем взаимодействия N-замещенных аминокислот, которые можно получить обычными способами, или, предпочтительно, их сложных эфиров, например, метиловых эфиров, этиловых эфиров, трет-бутиловых эфиров или бензиловых эфиров, например, соединений формулы IX

где R¹, V и X имеют значения, указанные выше,

с изоцианатом формулы Х

для которого применимы указанные выше определения и который можно получить согласно стандартным процедурам из соответствующего соединения, содержащего вместо изоцианатной группы группу H ₂N, получают производные мочевины, например, формулы XI

для которых применимы указанные выше определения.

Затем соединения формулы XI можно циклизовать до соединений формулы I путем нагревания с кислотой. Циклизацию соединений формулы XI до соединений формулы I можно также осуществить путем обработки основаниями в инертном растворителе, например путем обработки гидридом натрия в апротонном растворителе, таком как диметилформамид. Во время реакции функциональные группы могут находиться в защищенной форме.

Соединения формулы I также можно получить путем взаимодействия соединения формулы IX с изоцианатом формулы XII

где Q, например, представляет собой алкоксигруппу, например (C₁-C₄)-алкоксигруппу, такую как метокси, этокси или трет-бутокси, или (С₆-С₁₄)-арил-(C ₁-C₄)-алкоксигруппу, например бензилокси, и W имеет значения, указанные выше.

В таком случае получают соединение формулы XIII

где X, W, V, Q и R¹ имеют значения, указанные выше,

которое затем циклизуют под действием кислоты или основания, как описано выше в случае циклизации соединений формулы XI, до соединения формулы XIV

где Q, W, V, Х и R имеют значения, указанные выше.

Затем возможно превратить группу CO-Q в соединениях формулы XIV, например, путем гидролиза в карбоксильную группу СООН. Если циклизацию соединения формулы XIII в соединение формулы XIV осуществляют с использованием кислоты, конверсию группы CO-Q в группу СООН можно осуществить одновременно с циклизацией. Затем путем последующего сочетания с соединением формулы III, как описано выше в случае сочетания соединений формул II и III, получают соединение формулы I. При таком способе синтеза функциональные группы также могут находиться в защищенной форме или в форме предшественников.

Другим способом получения соединений формулы I является, например, взаимодействие соединений формулы XV

для которой применимы указанные выше определения,

с фосгеном или соответствующими эквивалентами (аналогично S. Goldschmidt and M.Wick, Liebigs Ann. Chem., 575 (1952), 217, и С. Тrорр, Chem. Веr., 61 (1928), 1431).

Соединения формулы I также можно получить, осуществляя сначала сочетание соединения формулы XVI

где Х имеет значения, указанные выше, и PG представляет собой защитную группу для аминогруппы, такую как, например, бензилоксикарбонильную группу,

с соединением формулы XVII

где Q' представляет собой защищенную гидроксигруппу карбоксильной группы, например алкоксигруппу, такую как трет-бутокси, и W имеет значения, указанные выше, с образованием соединения формулы XVIII

где X, W, PG и Q' имеют значения, указанные выше.

Затем возможно селективно удалить защитную группу PG из аминогруппы соединения формулы XVIII, например, гидрированием в случае бензилоксикарбонильной группы и путем введения группы СО можно осуществить замыкание кольца и получить соединение формулы XIX

где X, W и Q' имеют значения, указанные выше.

Для введения карбонильной группы можно использовать, например, фосген или эквивалент фосгена (аналогично взаимодействию соединений формулы XV, описанному выше). Промежуточное соединение, которое может появиться или может быть специфически получено при конверсии соединения формулы XVIII в соединение формулы XIX, представляет собой, например, изоцианат. Конверсию соединения формулы XVIII в соединение формулы XIX можно осуществить в одну или несколько стадий. Например, сначала можно ввести в молекулу карбонильную группу и затем на отдельной стадии осуществить циклизацию в присутствии основания, такого как гидрид натрия, подобно процессу циклизации, описанному выше. Соединения формулы XVIII, в которых PG представляет собой бензилоксикарбонильную группу, можно также непосредственно превратить в соединения формулы XIX без дополнительного компонента синтеза, такого как фосген, используемого для введения карбонильной группы. Если соединения формулы XVIII, в которых PG представляет собой бензилоксикарбонильную группу, обработать основанием, таким как гидрид натрия, можно непосредственно получить соединения формулы XIX.

Затем соединения формулы XIX можно алкилировать по группе NH с использованием реагента формулы VII, например, так, как поясняется выше в случае соединений формулы VI, и после конверсии защищенной карбоксильной группы CO-Q' в карбоксильную группу СООН можно синтезировать нужные соединения формулы I, как описано выше в случае соединений формулы VI и II. При таком способе синтеза функциональные группы также могут находиться в защищенной форме или в форме предшественников.

Соединения формулы I также можно получить, вводя сначала соединение формулы XX

где X и Q' имеют значения, указанные выше,

во взаимодействие с изоцианатом формулы XII с образованием соединения формулы XXI

где X, W, Q и Q' имеют значения, указанные выше.

Затем соединение формулы XXI циклизуют путем обработки сильной кислотой, например полуконцентрированной соляной кислотой, и получают соединения формулы XXII

Соединения формулы XXII также можно получить, получая сначала соединение формулы XVIII, в котором X, W и Q' имеют указанные значения, и PG представляет алкоксикарбонильную группу, такую как (C₁-C₄)-алкоксикарбонил, арилалкоксикарбонильную группу, такую как фенил-(C₁-C₄)-алкоксикарбонил, или арилоксикарбонильную группу, такую как фенилоксикарбонил, превращая его путем освобождения защищенной карбоксильной группы CO-Q' в соединение формулы XVIII, где группа CO-Q' представляет собой свободную карбоксильную группу СО-ОН, PG представляет собой алкоксикарбонил, арилалкоксикарбонил или арилоксикарбонил и Х и W имеют указанные значения, и циклизуя полученное соединение с помощью основания, такого как, например, карбонат натрия, до соединения формулы XXII.

Затем можно получить соединения формулы IIа

где R¹, V, W и Х имеют значения, указанные выше, посредством взаимодействия соединений формулы XXII с алкилирующим реагентом формулы VII в присутствии избытка основания, например в присутствии избытка н-бутиллития, и последующей обработки кислотой. 4-(3-Арилуреидо)бензильную группу также можно ввести в соединения формулы XXII постадийно, аналогично получению соединений формулы VIII и соединений формулы II, получаемых из них. Если в соединениях формулы XXII группа СН₂ в группе Х заменена карбонильной группой, выгодно защитить указанную карбонильную группу в случае реакций алкилирования, получить соединения формулы IIа, и после алкилирования снова вернуть ее в свободное состояние, как поясняется выше.

Соединения формулы I, где Е, например, представляет гидроксикарбонил или гидроксиметил, можно превратить стандартными способами в соединения формулы I, где Е имеет другие значения, или в другие пролекарства или производные соединений формулы I. Так, для получения эфиров соединения формулы I, где Е представляет собой гидроксикарбонил, можно этерифицировать соответствующими спиртами, например, в присутствии агента конденсации, такого как DCC, или соединения формулы I, где Е представляет собой гидроксикарбонил, можно алкилировать с использованием алкилгалогенидов, таких как алкилхлориды или алкилбромиды, например, с использованием хлоралканамидов, и получить соединения формулы I, где Е представляет собой R ⁴R⁴N-CO-алкокси-СО-, или ацилоксиалкилгалогенидов, и получить соединения формулы I, где Е представляет собой ацилоксиалкокси-СО-. Соединения формулы I, где Е представляет собой гидроксикарбонил, можно превратить в амиды с использованием аммиака или органических аминов в присутствии агента конденсации. Соединения формулы I, где Е представляет собой CO-NH₂, также можно получить на твердой фазе, путем сочетания соединения, где Е представляет собой СООН, с амидной смолой Rink в присутствии агента конденсации, такого как TOTU, и затем снова удалить его со смолы с использованием трифторуксусной кислоты. Соединения формулы I, где Е представляет собой гидроксиметильную группу CH₂OH, можно этерифицировать по гидроксиметильной группе стандартными способами с образованием простых или сложных эфиров. В соответствии со стандартными способами селективного окисления спиртов до альдегидов, например, с использованием гипохлорита натрия в присутствии 4-ацетамидо-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила (4-ацетамидо-ТЕМРО), соединения формулы I, где Е представляет собой СН₂ОН, можно превратить в соединения формулы I, где Е представляет собой альдегидную группу СО-Н.

Соединения формулы I являются ценными фармацевтически активными соединениями, подходящими, например, для лечения или профилактики воспалительных заболеваний, аллергических болезней или астмы. Соединения формулы I и их физиологически допустимые соли и производные можно вводить, согласно изобретению, животным, предпочтительно млекопитающим, в частности людям, в виде фармацевтических композиций для лечения или профилактики. Их можно вводить или как таковые, в смесях друг с другом или в форме фармацевтических препаратов, допускающих энтеральное или парентеральное применение, и которые, в качестве активной составляющей, содержат эффективную дозу по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически допустимых солей и производных вместе с фармацевтически безвредными носителями и/или добавками.

Следовательно, настоящее изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их физиологически допустимым солям и производным для применения в качестве фармацевтических композиций, к применению соединений формулы I и/или их физиологически допустимых солей и производных для получения фармацевтических композиций для лечения и профилактики заболеваний, указанных выше и далее, например для лечения и профилактики воспалительных заболеваний, и к применению соединений формулы I и/или их физиологически допустимых солей и производных при лечении и профилактике указанных заболеваний. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим препаратам (или фармацевтическим композициям), содержащим эффективную дозу по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически допустимых солей и производных и фармацевтически допустимый носитель, т.е. один или несколько фармацевтически безвредных носителей и/или добавок.

Фармацевтические препараты можно вводить системно или местно. Их можно вводить, например, перорально в форме пилюль, таблеток, таблеток с пленочным покрытием, таблеток с сахарным покрытием, гранул, твердых и мягких желатиновых капсул, порошков, растворов, сиропов, эмульсий, суспензий и в других фармацевтических формах. Введение также можно осуществить вагинально или ректально, например, в форме суппозиториев, или парентерально или путем имплантации, например, в форме растворов для инъекций или инфузионных растворов, микрокапсул или палочек, или местно, или чрезкожно, например, в форме кремов, мазей, порошков, растворов, эмульсий или настоек, или другими способами, например, в форме назальных спреев или аэрозольных смесей. Можно осуществить парентеральное введение растворов, например, внутривенно, внутримышечно, подкожно, интраартикулярно, интрасиновиально или другими способами.

Фармацевтические композиции по изобретению получают известными способами, причем соединение или соединения формулы I и/или их физиологически допустимые соли и производные смешивают с фармацевтически инертными неорганическими и/или органическими носителями и/или добавками. Для получения пилюль, таблеток, таблеток с покрытием и твердых желатиновых капсул можно использовать, например, лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновую кислоту или ее соли, полиэтиленгликоли и т.п. Для мягких желатиновых капсул и суппозиториев можно использовать, например, жиры, воски, полутвердые и жидкие полиолы, полиэтиленгликоли, природные или отвержденные масла и т.п. Подходящими носителями для получения растворов, например растворов для инъекций, или эмульсий, или сиропов являются, например, вода, спирты, глицерин, диолы, полиолы, сахароза, инвертный сироп, глюкоза, растительные масла и т.п. Подходящими носителями для микрокапсул, имплантатов или палочек являются, например, сополимеры гликолевой кислоты и молочной кислоты. Фармацевтические препараты обычно содержат от примерно 0,5 до примерно 90 мас.% соединений формулы I и/или их фармацевтически допустимых солей и производных. Количество активного соединения формулы I и/или его фармацевтически допустимых солей и производных в фармацевтических препаратах обычно составляет от примерно 0,2 до примерно 1000 мг, предпочтительно от примерно 1 до примерно 500 мг, но, в зависимости от характера фармацевтического препарата, количество активного соединения также может быть более высоким.

Кроме активных соединений и носителей фармацевтические композиции могут дополнительно содержать эксципиенты или добавки, например наполнители, дезинтегранты, связующие вещества, смазывающие вещества, смачиватели, стабилизаторы, эмульгаторы, консерванты, подслащиватели, красители, вкусовые добавки, ароматизаторы, загустители, разбавители, буферные вещества, растворители, солюбилизаторы, средства для достижения эффекта депо, соли для изменения осмотического давления, вещества, образующие покрытия, или антиоксиданты. Они также могут содержать два или большее число соединений формулы I и/или их физиологически допустимых солей и производных. Кроме того, помимо по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его физиологически допустимых солей и производных, они могут содержать одно или несколько других фармацевтически активных соединений, например веществ, обладающих противовоспалительным действием.

Если соединения формулы I или содержащие их фармацевтические композиции вводят в виде аэрозолей, например в виде назальных аэрозолей, или путем ингаляции, такое введение можно осуществить, например, с использованием пульверизатора, распылителя, насосного распылителя, ингалятора, мерного ингалятора или ингалятора с сухим порошком. Фармацевтические формы для введения соединений формулы I в виде аэрозоля можно получить способами, хорошо известными специалистам в этой области. Для их получения можно использовать, например, растворы или дисперсии соединений формулы I в воде, водно-спиртовых смесях или подходящих солевых растворах, с применением обычных добавок, например, бензилового спирта или других подходящих консервантов, усилителей абсорбции для повышения биодоступности, солюбилизаторов, диспергаторов и других, и, если это подходит, обычных пропеллентов, например хлорфторзамещенных углеводородов и/или фторзамещенных углеводородов.

Другими подходящими фармацевтически активными соединениями, которые, кроме соединений формулы I, могут содержаться в фармацевтических композициях по изобретению, но с которыми соединения формулы I также можно объединять другими способами в контексте комбинированной терапии или комбинированной профилактики, являются, в частности, такие активные соединения, которые подходят для лечения или профилактики заболеваний, указанных выше, или в дополнение к которым подходит лечение или профилактика соединениями формулы I. Примерами классов активного соединения такого типа, которые можно указать, являются стероиды, нестероидные противовоспалительные вещества, нестероидные противовоспалительные производные уксусной кислоты, нестероидные противовоспалительные производные пропионовой кислоты, нестероидные антиастматические средства, производные салициловой кислоты, пиразолоны, оксикамы, антагонисты лейкотриенов, ингибиторы биосинтеза лейкотриенов, ингибиторы циклооксигеназы, ингибиторы циклооксигеназы-2 (ингибиторы СОХ-2), антигистамины, антагонисты H1-гистамина, неседативные антигистамины, соединения золота, 2-агонисты, антихолинергические средства, антагонисты мускарина, антигиперлипидемические средства, антигиперхолестеринемические средства, ингибиторы HMG-СоА-редуктазы, статины, производные никотиновой кислоты, иммунодепрессанты, циклоспорины, -интерфероны, противоопухолевые лечебные средства, цитостатические средства, ингибиторы метастаза, антиметаболиты, производные 5-аминосалициловой кислоты, антидиабетические средства, инсулины, сульфонилмочевины, бигуаниды, глитазоны, ингибиторы -глюкозидазы и другие средства. Примерами подходящих активных соединений, которые можно указать, являются ацетилсалициловая кислота, бенорилат, сульфазалазин, фенилбутазон, оксифенилбутазон, метамизол, мофебутазон, фепразон, целекоксиб, рофекоксиб, диклофенак, фентиазак, сулиндак, зомепирак, толметин, индометацин, ацеметацин, ибупрофен, напроксен, карпрофен, фенбуфен, индопрофен, кетопрофен, пирпрофен, тиапрофеновая кислота, дифлунизал, флуфенамовая кислота, меклофенамовая кислота, мефенамовая кислота, нифлумовая кислота, толфенамовая кислота, пироксикам, изоксикам, теноксикам, никотиновая кислота, преднизолон, дексаметазон, гидрокортизон, метилпреднизолон, бетаметазон, беклометазон, будезонид, монтекуласт, пранкуласт, зафиркуласт, зилейтон, циклоспорин, рапамицин, такролимус, метотрексат, 6-меркаптопурин, азатиоприн, интраферон-бета-1a, интерферон-бета-1b, 5-аминосалициловая кислота, лефлунамид, D-пеницилламин, хлорохин, глибенкламид, глимепирид, троглитазон, метформин, акарбоза, аторвастатин, флувастатин, ловастатин, симвастатин, правастатин, колестипол, колестирамин, пробукол, клофибрат, фенофибрат, безафибрат, гемфиброзил, ипатропийбромид, кленбутерол, фенотерол, метапротеренол, пирбутерол, тулобутерол, сальбутамол, сальметерол, тербуталин, изоэтарин, кетотифен, эфедрин, окситропийбромид, атропин, кромоглицевая кислота, теофилин, фексофенадин, терфенадин, цетиризин, диметинден, дифенгидрамин, дифенилпиралин, фенирамин, бромофенирамин, хлорофенирамин, дексхлорофенирамин, алимемаэин, антазолин, астемизол, азатадин, клемастин, ципрогептадин, гидроксизин, лоратидин, мепирамин, прометазин, трипеленамин, трипролидин и другие.

Если соединения формулы I и/или их физиологически допустимые соли или пролекарства должны использоваться в комбинированной терапии или комбинированной профилактике вместе с одним или несколькими другими активными соединениями, это можно осуществить, как указывалось, путем введения всех активных соединений вместе в одном фармацевтическом препарате, например в таблетке или капсуле. Фармацевтические препараты такого типа, для которых, соответственно, применимы все приведенные выше пояснения, определенно являются предметом настоящего изобретения. Количество активных соединений в таких фармацевтических препаратах, как правило, таково, чтобы имелось эффективное количество каждого активного соединения. Однако комбинированную терапию или комбинированную профилактику также можно осуществить с помощью активных соединений, находящихся в двух или большем числе отдельных фармацевтических препаратов, которые могут находиться в единой упаковке или в двух или большем числе отдельных упаковок. Введение соединений формулы I и/или их физиологически допустимых солей или продуктов и других активных соединений можно осуществить совместно или раздельно и можно осуществить одновременно или последовательно в любом порядке. Введение также можно осуществить различными способами, например одно активное соединение можно ввести перорально, а другое применить с помощью инъекции, ингаляции или местно.

Соединения формулы I обладают, например, способностью ингибировать процессы взаимодействия клетки с клеткой и процессы взаимодействия клетки с матриксом, при которых играют роль взаимодействия между VLA-4 и его лигандами. Активность соединений формулы I можно продемонстрировать, например, при анализе, при котором определяют связывание клеток, содержащих рецептор VLA-4, например лейкоцитов, с лигандами такого рецептора, например с VCAM-1, который для указанной цели также можно выгодно получить методами генной инженерии. Подробности такого анализа описываются ниже. В частности, соединения формулы I способны ингибировать адгезию и миграцию лейкоцитов, например адгезию лейкоцитов к эндотелиальным клеткам, которая, как пояснялось выше, регулируется механизмом адгезии VCAM-1/VLA-4. Кроме как в качестве противовоспалительных веществ, соединения формулы I и их физиологически допустимые соли и производные подходят, следовательно, для лечения и профилактики заболеваний, основанных на взаимодействии между рецептором VLA-4 и его лигандами, или на указанные заболевания можно повлиять путем ингибирования такого взаимодействия, и они, в частности, подходят для лечения и профилактики заболеваний, которые по меньшей мере частично вызываются нежелательной степенью адгезии лейкоцитов и/или миграции лейкоцитов или связаны с ними, и в случае которых для предупреждения, облегчения или лечения следует уменьшать адгезию и/или миграцию лейкоцитов.

Следовательно, настоящее изобретение также относится к соединениям формулы I и их физиологически допустимым солям и производным для ингибирования адгезии и/или миграции лейкоцитов или для ингибирования рецептора VLA-4, и к применению соединений формулы I для получения фармацевтических препаратов для указанных целей, т.е. фармацевтических препаратов для лечения или профилактики заболеваний, при которых обнаруживается адгезия и/или миграция лейкоцитов в нежелательной степени, или для лечения или профилактики заболеваний, при которых играют роль процессы VLA-4-зависимой адгезии, и к применению соединений формулы I и/или их физиологически допустимых солей для лечения или профилактики заболеваний такого типа.

Соединения формулы I могут применяться в качестве противовоспалительных средств в случае воспалительных симптомов самых различных причин для того, чтобы предотвратить, снизить или подавить нежелательные и вредные последствия воспаления. Они используются, например, для лечения или профилактики артрита, ревматоидного артрита, полиартрита, воспалительного заболевания кишечника (язвенный колит), системной красной волчанки, для лечения и профилактики воспалительных расстройств центральной нервной системы, таких как, например, рассеянный склероз, или для лечения или профилактики астмы или аллергии, например аллергии замедленного типа (аллергия IV типа). Кроме того, они полезны для лечения или профилактики сердечно-сосудистых расстройств, артериосклероза, рестеноза, диабетов, повреждения трансплантатов органов, иммунных расстройств, роста опухоли или метастазов опухоли при различных злокачественных заболеваниях, малярии, а также других заболеваний, при которых блокировка интегрина VLA-4 и/или изменение активности лейкоцитов, очевидно, подходит для профилактики, облегчения или лечения.

Доза при применении соединений формулы I может изменяться в широких пределах и, что обычно известно специалистам в этой области, должна быть приспособлена к конкретным условиям в каждом отдельном случае. Доза зависит, например, от характера и тяжести заболевания, которое лечат, от состояния пациента, от используемого соединения или от того, лечится ли острое или хроническое заболевание или проводится профилактика, или от того, вводят ли другие активные соединения в дополнение к соединениям формулы I. Вообще, в случае перорального введения для взрослого человека массой примерно 75 кг суточная доза от примерно 0,01 до примерно 100 мг/кг, предпочтительно от примерно 0,1 до примерно 10 мг/кг (в каждом случае мг соединения на кг массы тела) является подходящей для достижения эффективных результатов. В случае внутривенного введения суточная доза составляет от примерно 0,01 до 50 мг на кг массы тела, предпочтительно от примерно 0,01 до 10 мг/кг. Суточная доза может быть разделена, в частности, когда вводят относительно большие количества, на несколько, например 2, 3 или 4 введения по частям. В соответствующем случае, в зависимости от конкретного состояния, может оказаться необходимым отойти от указанной суточной дозы в меньшую или большую сторону.

Помимо фармацевтически активных соединений в медицине и ветеринарии соединения формулы I и их соли и производные, подходящие для указанного применения, также могут использоваться для целей диагностики, например при диагнозе in vitro образцов клеток или образцов тканей, и в качестве вспомогательных веществ или исследовательского инструмента при биохимических исследованиях, при которых требуется блокирование VLA-4 или воздействие на взаимодействия клетки с клеткой и клетки с матриксом. Кроме того, соединения формулы I и их соли можно использовать в качестве промежуточных продуктов для получения других соединений, в частности других фармацевтически активных соединений, которые можно получить из соединений формулы I, например, путем модификации или введения остатков или функциональных групп, например, методами этерификации, восстановления, окисления, или другими превращениями функциональных групп.

Примеры

Пример 1

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

a) 4-(3-Фенилуреидо)бензиловый спирт

Гидрируют 30,6 г (200 ммоль) 4-нитробензилового спирта над 1,0 г палладия-на-углероде (концентрация 10%, 50% воды) в 500 мл метил-трет-бутилового простого эфира. После завершения поглощения водорода катализатор отфильтровывают. К фильтрату при 15°С и перемешивании в течение 30 минут добавляют 24 г (200 ммоль) фенилизоцианата. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают с отсосом и промывают метил-трет-бутиловым эфиром. Выход 43 г (89%).

b) 4-(3-Фенилуреидо)бензилхлорид

К суспензии 42,8 г (177 ммоль) 4-(3-фенилуреидо)бензилового спирта в 500 мл дихлорметана при 30°С добавляют по каплям 42 г (354 ммоль) тионилхлорида. Затем смесь перемешивают при 40°С в течение 1 часа. После завершения выделения газа смесь охлаждают до комнатной температуры. Выпавший в осадок продукт реакции отфильтровывают с отсосом и промывают дихлорметаном. Выход 44,26 г (96%).

c) Метил-1-аминоциклогексан-1-карбоксилат

К 50 г (350 ммоль) 1-аминоциклогексан-1-карбоновой кислоты в 1,25 л метанола при -5°С добавляют по частям 51 мл тионилхлорида. Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов и оставляют на ночь при комнатной температуре. Метанол удаляют в вакууме, остаток смешивают с водой, рН водного раствора доводят до 9 с использованием насыщенного раствора карбоната натрия и раствор дважды экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и после фильтрования удаляют растворитель в вакууме. Выход 36,35 г (66%).

d) Метил-1-(3-((S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-метилбутил)уреидо)циклогексанкарбоксилат

Раствор 28 г (179 ммоль) метил-1-аминоциклогексан-1-карбоксилата добавляют к раствору 38 г (179 ммоль) изоцианата трет-бутилового эфира L-лейцина (полученного согласно J.S. Nowick et al., J. Org. Chem., 1996, 61, 3229) в 300 мл абсолютного ДМФА. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь оставляют на ночь. Растворитель удаляют в вакууме, остаток обрабатывают гептаном и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают с отсосом и промывают гептаном. Выход 45,94 г (69%).

е) (S)-2-(4,4-Пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусная кислота

Греют 11,4 г (30,8 ммоль) метил-1-(3-((S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-метилбутил)уреидо)циклогексанкарбоксилата при 60°С в течение 8 часов с 200 мл 6 N хлористоводородной кислоты, смесь оставляют при комнатной температуре на ночь и затем экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные экстракты концентрируют в вакууме и остаток растворяют в небольшом количестве ацетонитрила, обрабатывают водой и сушат вымораживанием. Выход 8,28 г (95%).

f) (S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусная кислота

К раствору 7,4 г (26,24 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 150 мл абсолютного ТГФ при -76°С в атмосфере аргона добавляют 21 мл 2,5 М раствора н-бутиллития в гексане. После перемешивания при -76°С в течение 30 минут реакционную смесь нагревают до 0°С и добавляют по частям 6,82 г (26,24 ммоль) 4-(3-фенилуреидо)бензилхлорида. После перемешивания при 0°С в течение 30 минут рН реакционной смеси доводят до 1, добавляя 1 N хлористоводородную кислоту, смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. После разделения фаз органическую фазу сушат над сульфатом натрия и после фильтрования удаляют растворитель в вакууме. Полученный таким образом остаток очищают методом препаративной ВЭЖХ. Выход 2,18 г (16%).

д) Этил-(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионат

К раствору 720 мг (1,42 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 274 мг (1,42 ммоль) этил-(S)-3-амино-3-фенилпропионата (полученного из гидрохлорида) в 20 мл абсолютного ДМФА при охлаждении льдом добавляют последовательно 525 мг (1,42 ммоль) TOTU и 230 мкл (1,35 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина. После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре удаляют растворитель в вакууме, остаток растворяют в этилацетате и этилацетатный раствор последовательно промывают, в каждом случае дважды, водным раствором КНSO₄/К₂SO₄, насыщенным раствором NаНСО₃ и насыщенным раствором хлорида натрия. После сушки органической фазы над сульфатом натрия и фильтрования удаляют растворитель в вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гептана (1/1). После концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, получают 826 мг (85%) названного в заголовке соединения.

h) (S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

К 820 мг (1,2 ммоль) этил-(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионата в 30 мл метанола добавляют 3,61 мл 1 М раствора гидроксида лития и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После добавления еще 10 мл метанола и 1,2 мл 1 М раствора гидроксида лития и перемешивания в течение ночи добавляют 30 мл воды и значительную часть метанола удаляют в вакууме. Доводят рН оставшейся водной фазы до 1, добавляя 1 N хлористоводородную кислоту, и смесь дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный сырой продукт реакции (760 мг) растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Получают 639 мг названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 654,4 (М+Н)⁺.

Способ получения исходного соединения гидрохлорида (S)-3-амино-3-фенилпропионата

i) (R)-2-Амино-2-фенилэтанол

Растворяют 20 г (920 ммоль) борогидрида лития в 420 мл абсолютного ТГФ. При перемешивании добавляют по каплям 233,5 мл (1,84 моль) триметилхлорсилана, а затем добавляют по частям в течение 4 часов 69,5 г (0,46 моль) (R)-фенилглицина. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем добавляют 690 мл метанола, смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрируют в вакууме. Остаток при перемешивании растворяют в 690 мл 20% водного раствора гидроксида калия. Водную фазу три раза экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Выход 41,2 г (65,3%).

FAB-MC: 138 (М+Н)⁺.

j) (R)-2-Бензилоксикарбониламино-2-фенилэтанол

Растворяют 40,5 г (295 ммоль) (R)-2-амино-2-фенилэтанола в 385 мл абсолютного ДМФА. При 0°С и перемешивании добавляют 73,5 г N-(бензилоксикарбонилокси)сукцинимида (295 ммоль) и смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. Ледяную баню удаляют и загрузку оставляют при комнатной температуре на 48 часов. Реакционный раствор концентрируют в вакууме и затем растворяют остаток в 500 мл этилацетата. Органическую фазу дважды промывают 10% водным раствором лимонной кислоты и один раз водой. Ее сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют. Полученный кристаллический сырой продукт реакции (82,3 г) снова растворяют в этилацетате. Органическую фазу дважды промывают 10% водным раствором лимонной кислоты и один раз водой и концентрируют. Затем остаток перекристаллизовывают из этилацетата/петролейного эфира. Выход 74,6 г (93,3%).

FAB-MC: 272 (M+H)⁺.

k) (R)-2-Бензилоксикарбониламино-2-фенилэтил-4-метилфенилсульфонат

Растворяют 53,9 г (R)-2-бензилоксикарбониламино-2-фенилэтанола (198,7 ммоль) в смеси 500 мл метиленхлорида и 80,3 мл (993,5 ммоль) пиридина. При 0°С и перемешивании добавляют 45,5 г (238,4 ммоль) тозилхлорида в 240 мл метиленхлорида и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 7 часов. Добавляют еще 11,36 г тозилхлорида (59,61 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 5 часов. Затем загрузку оставляют на ночь при комнатной температуре и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате. Органическую фазу три раза промывают 10% водным раствором лимонной кислоты и два раза водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Остаток растирают в порошок с диэтиловым эфиром, отфильтровывают с отсосом, промывают диэтиловым эфиром и сушат над пентоксидом фосфора. Выход 60,9 г (72%). Маточную жидкость концентрируют, остаток растворяют в смеси н-гептана и этилацетата (6/4) и хроматографируют на силикагеле, получают еще 3,5 г (4,2%).

Общий выход 64,4 г (76,2%).

FAB-MC: 426 (М+Н)⁺.

l) (S)-3-Бензилоксикарбониламино-3-фенилпропионитрил

Растворяют 60,5 г (R)-2-бензилоксикарбониламино-2-фенилэтил-4-метилфенилсульфоната (142,2 ммоль) в 675 мл ДМФА. Добавляют 13,9 г цианида калия (213,3 ммоль), 5,64 г 18-краун-6 (21,33 ммоль) и 520 мг иодида калия (3,13 ммоль) и смесь перемешивают при 50°С в течение 20 часов. Реакционный раствор выливают в 500 мл смеси воды со льдом и затем перемешивают при 0°С в течение 5 часов. Выпавший осадок отфильтровывают с отсосом и растворяют в этилацетате. Органическую фазу три раза промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Остаток растирают в порошок с диэтиловым эфиром, отфильтровывают с отсосом и сушат над пентоксидом фосфора. Выход 25,3 г (63,5%).

FAB-MC: 281 (М+Н)⁺ .

m) Этил-(S)-3-бензилоксикарбониламино-3-фенилпропионат

Суспендируют 15 г (S)-3-бензилоксикарбониламино-3-фенилпропионитрила (53,51 ммоль) в смеси 110 мл абсолютного этанола и 30 мл диоксана. При 10-15°С при перемешивании и охлаждении пропускают газообразный НСl. Вскоре образуется прозрачный раствор. Пропускают еще газообразный НСl при перемешивании и охлаждении до тех пор, пока исходное вещество не будет более обнаруживаться на тонкослойной хроматограмме. Затем через реакционный раствор пропускают азот в течение 15 минут и затем раствор концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают водой до образования устойчивой мутности. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут и затем водную фазу три раза экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в смеси этилацетата и петролейного эфира (1/1) и раствор хроматографируют на силикагеле. Выход 10,55 г (60%).

FAB-MC: 328 (М+Н)⁺.

n) Гидрохлорид этил-(S)-3-амино-3-фенилпропионата

Растворяют 10,29 г этил-(S)-3-бензилоксикарбониламино-3-фенилпропионата (31,44 ммоль) в 125 мл этанола и осуществляют каталитическое гидрирование над палладием-на-углероде при рН 4 в автоматической бюретке с добавлением 2 N раствора НСl в этаноле. Катализатор отфильтровывают с отсосом через кизельгур и фильтрат концентрируют. Остаток растирают в порошок с диэтиловым эфиром, отфильтровывают с отсосом, промывают диэтиловым эфиром и сушат над пентоксидом фосфора. Выход 5,05 г (70%).

FAB-MC: 194 (M+H)⁺ .

Пример 2

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты

Суспендируют 100 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты в 15 мл воды, обрабатывают 20,4 г , , -трис(гидроксиметил)метиламина и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Нерастворимые компоненты отфильтровывают и фильтрат сушат вымораживанием. Получают 105 мг трометаминовой соли (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты, содержащей, согласно ¹H-ЯМР-спектру, 1,3 моль трометамина на моль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты.

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил) метиламин + Н)⁺;

654,4 (3-(2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота + Н)⁺; 775,4.

Пример 3

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

К раствору 500 мг (0,988 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 15 мл абсолютного ДМФА при охлаждении льдом добавляют 132 мг (0,988 ммоль) НОВТ и 245 мг (1,18 ммоль) DCC. После перемешивания при охлаждении льдом в течение 1 часа добавляют 157 мг (0,988 ммоль) трет-бутил-(R)-3-аминобутаноата. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 часов и выстаивания в течение ночи реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и раствор промывают, в каждом случае дважды, водным раствором KHSO₄/K₂ SO₄ и водой. После сушки органической фазы над сульфатом натрия и фильтрования растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Полученный таким образом остаток хроматографируют на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гептана (1/3 и 1/1). Остаток после концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Для расщепления трет-бутилового сложного эфира добавляют 10 мл 95% трифторуксусной кислоты и смесь оставляют при комнатной температуре на 15 минут. Остаток после удаления летучих компонентов в вакууме растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Выход 463 мг (79%).

ES(+)-MC: 592,4 (М+Н)⁺.

Пример 4

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)-бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовая кислота

К раствору 500 мг (0,988 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 15 мл абсолютного ДМФА при охлаждении льдом добавляют 132 мг (0,988 ммоль) НОВТ и 245 мг (1,18 ммоль) DCC. После перемешивания при охлаждении льдом в течение 1 часа добавляют 199 мг (0,988 ммоль) трет-бутил-(R)-3-амино-5-метилгексаноата. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 часов и выстаивания в течение ночи реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и в каждом случае промывают дважды водным раствором KHSO₄/K₂SO ₄ и водой. После сушки органической фазы над сульфатом натрия и фильтрования растворитель удаляют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гептана (1/3 и 1/1). Остаток после концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Для расщепления трет-бутилового сложного эфира добавляют 10 мл 95% трифторуксусной кислоты и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Остаток после удаления летучих компонентов в вакууме растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Выход 447 мг (71%).

ES(+)-MC: 634,4 (М+Н)⁺.

Исходя из 1-аминоциклопентан-1-карбоновой кислоты, аналогично примерам 1, 3 и 4 можно получить соединения примеров 5, 6 и 7.

Пример 5

(S)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

Пример 6

(R)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

Пример 7

(R)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовая кислота

Пример 8

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

a) 4-(3-(2-Метилфенил)уреидо)бензиловый спирт

При охлаждении льдом гидрируют 30,6 г (200 ммоль) 4-нитробензилового спирта над 1,0 г палладия-на-углероде (концентрация 10%, 50% воды) в 500 мл метил-трет-бутилового эфира. После завершения поглощения водорода катализатор отфильтровывают и к фильтрату при 15°С и перемешивании в течение 30 минут добавляют 24,8 мл (200 ммоль) 2-метилфенилизоцианата. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают с отсосом и промывают метил-трет-бутиловым эфиром. Выход 46,9 г (92%).

b) 4-(3-(2-Метилфенил)уреидо)бензилхлорид

К суспензии 10 г (39,06 ммоль) 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензилового спирта в 150 мл дихлорметана при охлаждении льдом добавляют по каплям 5,66 мл (78,12 ммоль) тионилхлорида. Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов и выливают в 200 мл н-гептана. Гептан декантируют с осевшего масла, и масло перемешивают с диизопропиловым эфиром. Полученное твердое вещество отфильтровывают и промывают диизопропиловым эфиром. Выход 8,32 г (78%).

c) (S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусная кислота

К раствору 9,5 г (33,6 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 190 мл абсолютного ТГФ при -76°С в атмосфере аргона добавляют 26,6 мл 2,5 М раствора н-бутиллития в гексане. После перемешивания при -76°С в течение 30 минут реакционную смесь нагревают до 0°С и добавляют раствор 9 г (33,6 ммоль) 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензилхлорида в 95 мл NMP. После перемешивания при комнатной температуре в течение 60 минут добавляют 38 мл 2 N хлористоводородной кислоты и ТГФ удаляют в вакууме. После добавления дихлорметана рН смеси доводят до 1 с использованием 1 N хлористоводородной кислоты. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и после фильтрования концентрируют в вакууме. Остаток выливают в смесь воды со льдом и выпавший осадок отфильтровывают с отсосом. После хроматографии на силикагеле с использованием смеси дихлорметана, метанола, уксусной кислоты и воды (95/5/0,5/0,5), концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, и последующей сушки вымораживанием получают 5,05 г (29%) названного в заголовке соединения.

d) Этил-(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионат

К раствору 2,22 г (4,26 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 30 мл абсолютного ДМФА при охлаждении льдом добавляют 566 мг (4,26 ммоль) НОВТ и 1,05 г (5,11 ммоль) DCC. После перемешивания при 0°С в течение 1 часа добавляют 823 мг (4,26 ммоль) этил-3-амино-3-фенилпропионата (полученного из гидрохлорида). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 часов реакционную смесь оставляют на ночь. Мочевину отфильтровывают с отсосом и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и этилацетатный раствор последовательно промывают, в каждом случае дважды, водным раствором KHSO₄/K₂SO₄, насыщенным раствором NaHCO₃ и водой. После сушки органической фазы над сульфатом натрия и фильтрования удаляют растворитель в вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гептана (1/3 и 1/1). После концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, получают 1,98 г (67%) названного в заголовке соединения.

е) (S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

К 1,97 г (2,83 ммоль) этил-(S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионата в 120 мл метанола добавляют 8,5 мл 1 М раствора гидроксида лития и смесь оставляют при комнатной температуре на 3 суток. Метанол удаляют в вакууме, доводят рН оставшейся водной фазы до 1, добавляя 1 N хлористоводородную кислоту, и смесь дважды экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой и сушат над сульфатом натрия. После фильтрования растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в смеси ацетонитрила и воды и сушат вымораживанием. Выход 1,69 г (89%).

ES(+)-MC: 668,4 (M+H)⁺.

Пример 9

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота

Соединение можно получить посредством сочетания (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты с трет-бутил-(R)-аминобутаноатом аналогично примеру 3.

Пример 10

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовая кислота

Соединение можно получить посредством сочетания (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты с трет-бутил-(R)-3-амино-5-метилгексаноатом аналогично примеру 4.

Исходя из 1-аминоциклопентан-1-карбоновой кислоты, аналогично примерам 8, 9 и 10, можно получить соединения примеров 11, 12 и 13.

Пример 11

(S)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота

Пример 12

(R)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота

Пример 13

(R)-3-((S)-2-(4,4-Тетраметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2-метилпропил)пропионовая кислота

Пример 14

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид

Соединение получают из 1,012 г (2 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 204 мг (2 ммоль) (R)-3-аминобутанамида так, как описано в примере 1. После хроматографической очистки продукта сочетания получают 392 мг (33%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 591,4 (М+Н)⁺.

Пример 15

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионамид

При охлаждении льдом к раствору 800 мг (1,22 ммоль) (S)-3((S) -2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты (см. пример 1) в 10 мл ДМФА добавляют 271 мг (2,04 ммоль) НОВТ и 290 мг (1,4 ммоль) DCC. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа добавляют 101 мкл 25% водного раствора аммиака и смесь оставляют на ночь при комнатной температуре. После фильтрования фильтрат концентрируют в вакууме, остаток растворяют в дихлорметане и органическую фазу промывают дважды с использованием водного раствора КНSO₄/К₂ SO₄, дважды с использованием насыщенного раствора NаНСО₃ и дважды водой. После сушки органической фазы над сульфатом магния, фильтрования, удаления растворителя в вакууме и хроматографической очистки остатка на силикагеле (элюент смесь этилацетата и гептана 9/1) получают 543 мг (68%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 653,4 (М+Н)⁺ .

Пример 16

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 2,02 г (3,98 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 1 г (3,98 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(4-метоксифенил)пропионата (для получения указанного сложного эфира -аминокислоты и других эфиров -аминокислот, используемых при получении соединений примеров, см. S.G. Davies et al., Tetrahedron: Asymmetry, 2, 183 (1991), и J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1, 1129 (1994)). После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и последующей хроматографической очистки получают 1,116 г (41%) названного в заголовке соединения.

ЕS(+)-МС: 684,4 (М+Н)⁺.

Пример 17

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 550 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовой кислоты получают 632 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,5).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил)метиламин + Н)⁺; 684,5 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 805,5 (М+Н)⁺.

Пример 18

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 1,08 г (2,14 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 600 мг (2,14 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(2,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и последующей хроматографической очистки получают 341 мг (22%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 714,4 (М+Н)⁺.

Пример 19

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 160 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты получают 188 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2, 5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/2,1).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил) метиламин + Н)⁺; 714,4 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 835,5 (М+Н)⁺.

Пример 20

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 1,5 г (2,96 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 833 мг (2,96 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и обработки водой и затем пентаном получают 1,17 г (55%) названного в заголовке соединения.

ЕЗ(+)-МС: 714,4 (М+Н)⁺.

Пример 21

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 200 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты получают 235 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,4).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил)метиламин + Н)⁺; 714,4 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3, 4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 835,4 (М+Н)⁺.

Пример 22

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 1,5 г (2,96 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-фенилуреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 1,48 г (2,96 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3-метоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и обработки водой и затем пентаном получают 1,01 г (50%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 684,4 (M+H)⁺.

Пример 23

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 216 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты (см. пример 8) получают 235 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,5).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис (гидроксиметил) метиламин + Н)⁺; 668,4 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)-ацетиламино)-3-фенилпропионовая кислота + Н)⁺; 789,5 (М+Н)⁺.

Пример 24

Трометаминовая соль (R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 250 мг (R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовой кислоты (см. пример 9) получают 315 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,3).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил)метиламин + Н)⁺; 606,4 ((R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовая кислота + Н)⁺; 727,5 (М+Н)⁺.

Пример 25

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3-метоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 1 г (1,92 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты (см. пример 8) и 963 мг (3,84 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3-метоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и обработки водой и затем пентаном получают 555 мг (40%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 698,4 (М+Н)⁺.

Пример 26

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 900 мг (1,73 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты (см. пример 8) и 434 мг (1,73 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(4-метоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и обработки водой и пентаном получают 348 мг (29%) названного в заголовке соединения.

ЕS(+)-МС: 698,4 (М+Н)⁺.

Пример 27

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 170 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 26) получают 173 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,6).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис (гидроксиметил) метиламин + Н)⁺; 698,4 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(4-метоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺;

819,5 (М+Н)⁺.

Пример 28

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 900 мг (1,73 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты (см. пример 8) и 486 мг (1,73 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(2,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и обработки водой и пентаном получают 330 мг (26%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 728,4 (М+Н)⁺.

Пример 29

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 160 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-1,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 28) получают 82 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/4,2).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил)метиламин + Н)⁺; 728,5 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 849,5 (М+Н)⁺.

Пример 30

Натриевая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

К раствору 292 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 28) в ТГФ добавляют 1 молярный эквивалент 1 N раствора гидроксида натрия. После перемешивания в течение 30 минут ТГФ удаляют в вакууме, раствор разбавляют водой и сушат вымораживанием. После очистки на сефадексе с использованием воды получают 216 мг названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 728,3 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺, 750,3 (М+Н)⁺.

Пример 31

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 1 г (1,92 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты (см. пример 8) и 540 мг (1,92 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира, хроматографической очистки методом препаративной ВЭЖХ, концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, сушки вымораживанием и обработки продукта водой и пентаном получают 480 мг (34%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 728,4 (М+Н)⁺ .

Пример 32

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 150 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 31) получают 175 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,3).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил) метиламин + Н)⁺; 728,5 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 849,6 (M+H)⁺.

Пример 33

Натриевая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

К раствору 300 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 31) в ТГФ добавляют 1 молярный эквивалент 1 N раствора гидроксида натрия. После перемешивания в течение 30 минут ТГФ удаляют в вакууме, раствор разбавляют водой и сушат вымораживанием. После очистки на сефадексе с использованием воды получают 154 мг названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 728,3 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺, 750,3 (М+Н)⁺.

Пример 34

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 590 мг (1,1 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты (см. пример 8) и 475 мг (1,7 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания и расщепления трет-бутилового сложного эфира получают 650 мг (81%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 726,2 (М+Н)⁺.

Пример 35

Натриевая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовой кислоты

К суспензии 600 мг (0,83 ммоль) (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 34) в воде добавляют 0,95 молярного эквивалента 1 N раствора гидроксида натрия. После перемешивания в течение 30 минут смесь фильтруют и фильтрат сушат вымораживанием. Получают 610 мг (98%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 726,2 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-этилендиоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺, 748,2 (М+Н)⁺.

Пример 36

(R)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидаэолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионамид

Соединение получают аналогично примеру 15. Исходя из 150 мг (0,247 ммоль) (R)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-метилпропионовой кислоты (см. пример 9) после хроматографической очистки сырого продукта реакции на силикагеле с использованием в качестве элюента этилацетата, концентрирования фракций, содержащих продукт, обработки остатка водой и затем пентаном и сушки вымораживанием получают 74 мг (50%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 605,4 (М+Н)⁺.

Пример 37

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

a) 4-(3-(2-Метилфенил)уреидо)-3-метоксибензиловый спирт

При охлаждении льдом гидрируют 15 г (81,8 ммоль) 3-метокси-4-нитробензилового спирта над 1,3 г палладия-на-углероде (концентрация 10%, 50% воды) в 500 мл метил-трет-бутилового простого эфира. После завершения поглощения водорода катализатор отфильтровывают и к фильтрату при перемешивании в течение 30 минут добавляют 10,14 мл (81,8 ммоль) 2-метилфенилизоцианата. Реакционную смесь оставляют на ночь, выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают с отсосом и промывают метил-трет-бутиловым простым эфиром. Получают 20,5 г (88%) 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензилового спирта.

b) 4-(3-(2-Метилфенил)уреидо)-3-метоксибензилхлорид

К суспензии 15 г (52,4 ммоль) 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензилового спирта в 300 мл дихлорметана при охлаждении льдом добавляют по каплям 7,65 мл (104,8 ммоль) тионилхлорида. Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов, оставляют на ночь и затем выливают в 1000 мл н-гептана. Гептан декантируют с осевшего масла, остаток снова суспендируют в н-гептане и гептан декантируют. Этот процесс повторяют еще два раза. Затем остаток растворяют в дихлорметане и выливают в 800 мл диизопропилового эфира, охлажденного льдом. Затем смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 2 часов, продукт отфильтровывают с отсосом и промывают диизопропиловым эфиром. После сушки над пентоксидом фосфора получают 12 г (75%) названного в заголовке соединения.

с) (S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусная кислота

К раствору 1,98 г (8,21 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты в 40 мл абсолютного ТГФ при -40°С в атмосфере аргона добавляют 6,6 мл 2,5 М раствора н-бутиллития в гексане. После перемешивания при -40°С в течение 30 минут реакционную смесь нагревают до 0°С и добавляют раствор 2,5 г (8,21 ммоль) 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензилхлорида в 10 мл NMP. Реакционную смесь нагревают до 0°С и затем перемешивают при 0°С в течение 2 часов. Добавляют 15 мл 1 N хлористоводородной кислоты и ТГФ удаляют в вакууме. Остаток выливают в 300 мл метил-трет-бутилового простого эфира. Фазы разделяют, органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и после фильтрования концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ. После концентрирования фракций, содержащих продукт реакции, и последующей сушки вымораживанием получают 716 мг (17%) названного в заголовке соединения.

d) (S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 300 мг (0,55 ммоль) (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)уксусной кислоты и 154 мг (0,55 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира, хроматографической очистки методом препаративной ВЭЖХ, концентрирования фракций, содержащих продукт, и сушки вымораживанием получают 205 мг (49%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 758,3 (М+Н) ⁺.

Пример 38

Трометаминовая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

Соединение получают аналогично примеру 2. Исходя из 100 мг (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты (см. пример 37) получают 123 мг соответствующей соли трометамина (стехиометрия: соотношение (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота/трометамин составляет примерно 1/1,3).

ES(+)-MC: 122,0 (, , -трис(гидроксиметил)метиламин + Н)⁺; 758,3 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-З-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)-3-метоксибензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-(2-метилпропил)ацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺; 879,4 (М+Н)⁺.

Пример 39

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(3,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 257 мг (0,496 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилуксусной кислоты и 140 мг (0,496 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(3,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира и сушки вымораживанием получают 296 мг (82%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 726,3 (М+Н)⁺.

(S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилуксусную кислоту получают аналогично примеру 37 из (S)-2-(4,4-пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилуксусной кислоты и 4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)хлорида (см. пример 8).

(S)-2-(4,4-Пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилуксусную кислоту получают из (S)-2-амино-3-циклопропилпропионовой кислоты следующим способом.

К суспензии 10 г (77,5 ммоль) (S)-2-амино-3-циклопропилпропионовой кислоты в 160 мл диоксана при 0°С добавляют 1 N раствор гидроксида натрия до тех пор, пока рН не достигнет 8-9. Затем добавляют 16,9 г (77,5 ммоль) ди-трет-бутилдикарбоната, ледяную баню убирают и поддерживают рН на уровне 8-9, добавляя еще 1 N раствор гидроксида натрия. После выстаивания в течение ночи диоксан удаляют в вакууме, к водной фазе добавляют этилацетат и фазы разделяют. Доводят рН водной фазы до 4,5, используя 1 N хлористоводородную кислоту, и экстрагируют этилацетатом. Полученную таким образом этилацетатную фазу сушат над сульфатом натрия, осушающий агент отфильтровывают и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 1000 мл дихлорметана и обрабатывают 53,4 мл бензилового спирта, 8,37 г 4-диметиламинопиридина и 18,8 г DCC. После перемешивания в течение 6 часов и выстаивания в течение ночи смесь фильтруют, фильтрат концентрируют в вакууме и остаток обрабатывают 300 мл 90% трифторуксусной кислоты. После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут трифторуксусную кислоту удаляют в вакууме и остаток дважды хроматографируют на силикагеле (элюент дихлорметан/метанол, 95/5). Получают 11,48 г (68%) бензил-(S)-2-амино-3-циклопропилпропионата.

Суспензию 39,9 г (279 ммоль) 1-аминоциклогексан-1-карбоновой кислоты в смеси 75 мл ТГФ и 75 мл воды обрабатывают, добавляя по каплям раствор 23,8 мл метилхлорформиата в 40 мл ТГФ, таким образом, чтобы температура суспензии не превышала 50°С. В ходе этой операции рН раствора поддерживают на уровне 8,5-9,5 посредством добавления 25% раствора гидроксида натрия. После перемешивания при рН 8 в течение 30 минут смесь разбавляют водой, ТГФ удаляют в вакууме и водную фазу дважды промывают метил-трет-бутиловым простым эфиром. Доводят рН водной фазы до 2, используя 6 N хлористоводородную кислоту, и последовательно экстрагируют метил-трет-бутиловым эфиром и дихлорметаном. Объединенные органические фазы концентрируют в вакууме. Остаток растирают в порошок с диэтиловым эфиром и продукт реакции отфильтровывают. Получают 47,85 г (85%) 1-метоксикарбониламиноциклогексан-1-карбоновой кислоты.

К раствору 3,2 г (16 ммоль) 1-метоксикарбониламиноциклогексан-1-карбоновой кислоты и 3,5 г (16 ммоль) бензил-(S)-2-амино-3-циклопропилпропионата в 40 мл ТГФ добавляют 216 г НОВТ и 3,2 г (16 ммоль) DCC и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. После выстаивания в течение ночи и фильтрования ТГФ удаляют в вакууме, остаток растворяют в метил-трет-бутиловом простом эфире, раствор промывают, в каждом случае дважды, насыщенным раствором NаНСО ₃ и раствором KHSO₄/K₂SO ₄. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и после фильтрования удаляют растворитель в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и гидрируют в присутствии палладия-на-углероде (10%, 50% воды). Катализатор отфильтровывают, и органическую фазу обрабатывают 500 мл воды и 4,5 г NаНСО₃. После экстрагирования путем встряхивания и разделения фаз водную фазу перемешивают при 100°С в течение 2 часов. Добавляют 3,39 г Nа₂СО₃ и раствор перемешивают при 100°С в течение 8 часов. После выстаивания в течение ночи добавляют 500 мл 6 N хлористоводородной кислоты, водную фазу экстрагируют метил-трет-бутиловым простым эфиром. Фазы разделяют, органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и после фильтрования концентрируют в вакууме. Остаток растирают в порошок с гептаном и продукт реакции отфильтровывают. Получают 3,7 г (83%) (S)-2-(4,4-пентаметилен-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилуксусной кислоты.

Пример 40

(S)-3-((S)-2-(4,4-Пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота

Соединение получают аналогично примеру 1 из 522 мг (1 ммоль) (S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилуксусной кислоты (получение см. пример 39) и 284 мг (1 ммоль) трет-бутил-(S)-3-амино-3-(2,4-диметоксифенил)пропионата. После сочетания, хроматографической очистки продукта сочетания, расщепления трет-бутилового сложного эфира с использованием 90% трифторуксусной кислоты, удаления трифторуксусной кислоты в вакууме, растворения остатка в дихлорметане, промывания дихлорметановой фазы водой три раза, удаления дихлорметана в вакууме и последующей сушки вымораживанием получают 590 мг (81%) названного в заголовке соединения.

ЕS(+)-МС: 726,3 (М+Н)⁺.

Пример 41

Натриевая соль (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты

К суспензии 540 мг (0,74 ммоль) (S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовой кислоты в 20 мл воды добавляют порциями при перемешивании 7,07 мл 1 N раствора гидроксида натрия и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. После фильтрования и сушки фильтрата вымораживанием получают 524 мг (95%) названного в заголовке соединения.

ES(+)-MC: 726,2 ((S)-3-((S)-2-(4,4-пентаметилен-3-(4-(3-(2-метилфенил)уреидо)бензил)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)-2-циклопропилметилацетиламино)-3-(2,4-диметоксифенил)пропионовая кислота + Н)⁺, 748,3 (М+Н)⁺.

Исследование биологической активности

А) Испытание на адгезию клеток U937 к VCAM-1

Используемый метод испытания соединений формулы I на активность в отношении взаимодействия между VCAM-1 и VLA-4 представляет собой анализ, описанный ниже, специфичный для указанного взаимодействия. Компоненты клеточного связывания, т.е. интегрин VLA-4, получают в его природной форме как поверхностные молекулы на клетках U937 человека (АТСС CRL 1593), принадлежащих к группе лейкоцитов. Специфические компоненты связывания представляют собой растворимые слитые белки, созданные методами генной инженерии, состоящие из экстрацитоплазматического домена VCAM-1 человека и константной области иммуноглобулина человека подкласса IgG1.

Анализ для измерения адгезии клеток U937 (АТСС CRL 1593) к hVCAM-1(1-3)-IgG

1. Получение VCAM-1(1-3)-IgG человека и CD4-IgG человека

Используют генную конструкцию для экспрессии внеклеточного домена VCAM-1 человека, объединенную с генетической последовательностью тяжелой цепи иммуноглобулина человека IgG1 (шарнир, области СН2 и СН3) (от Brian Seed, Massachusetts General Hospital, Бостон, США; сравни Damle and Aruffo, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 6403). Растворимый слитый белок hVCAM-1(1-3)-IgG содержит три аминоконцевых внеклеточных иммуноглобулиноподобных домена VCAM-1 человека (Damle and Aruffo, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 6403). CD4-IgG (Zettlmeissi et al., DNA and Cell Biology, 1990, 9, 347) служит в качестве слитого белка для отрицательного контроля. Рекомбинантные белки экспрессируют в виде растворимых белков после трансфекции ДНК, опосредуемой DEAE/декстраном, в COS-клетках (АТСС CRL1651) в соответствии со стандартными процедурами (Ausubel et al., Current protocols in molecular biology, John Wiley & Sons, Inc., 1994).

2. Анализ для измерения адгезии клеток U937 к hVCAM-1(1-3)-IgG

2.1 Титрационные 96-луночные микропланшеты (Nunc Махisorb) инкубируют при комнатной температуре в течение 1 часа со 100 мкл/лунку раствора козьих антител против IgG человека (10 мкг/мл в 50 мМ трис, рН 9,5). После удаления раствора антител осуществляют один раз промывание PBS.

2.2 Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 0,5 часов со 150 мкл/лунку буфера для блокирования (1% BSA в PBS). После удаления буфера для блокирования осуществляют один раз промывание PBS.

2.3 Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 1,5 часов со 100 мкл/лунку клеточного культурального супернатанта трансфецированных COS-клеток. COS-клетки трансфецируют плазмидой, кодирующей три N-концевых иммуноглобулиноподобных домена VCAM-1, соединенных с Fc-частью IgG₁ человека (hVCAM-1(l-3)-IgG). Содержание hVCAM-1(1-3)-IgG составляет примерно 0,5-1 мкг/мл. После удаления культурального супернатанта осуществляют один раз промывание PBS.

2.4 Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 20 минут со 100 мкл/лунку буфера для блокирования Fc-рецептора (1 мг/мл -глобулина, 100 мМ NaCl, 100 мкМ MgCl₂, 100 мкМ MnCl₂ , 100 мкМ CaCl₂, 1 мг/мл BSA в 50 мМ HEPES, рН 7,5). После удаления буфера для блокирования Fc-рецептора осуществляют один раз промывание PBS.

2.5 Сначала вводят 20 мкл буфера для связывания (100 мМ NaCl, 100 мкМ MgCl₂, 100 мкМ MnCl₂, 100 мкМ CaCl₂, 1 мг/мл BSA в 50 мМ HEPES, pH 7,5), добавляют испытываемые вещества в 10 мкл буфера для связывания и инкубируют в течение 20 минут. Используемым контролем являются антитела против VCAM-1 (ВВТ, No. BBA6) и против VLA-4 (Immunotech, No. 0764).

2.6 Клетки U937 инкубируют в буфере для блокирования Fc-рецептора в течение 20 минут и затем вносят пипеткой в лунки при концентрации 1×10⁶ /мл и в количестве 100 мкл на лунку (конечный объем 125 мкл/лунку).

2.7 Планшеты медленно погружают под углом 45° в буфер для остановки реакции (100 мМ NaCl, 100 мкМ MgCl₂, 100 мкМ MnCl₂, 100 мкМ CaCl₂ в 25 мМ трис, рН 7,5) и встряхивают. Процесс повторяют.

2.8 Затем планшеты инкубируют в течение 15 минут с 50 мкл/лунку красителя (16,7 мкг/мл красителя Hoechst Dye 33258, 4% формальдегида, 0,5% тритона Х-100 в PBS).

2.9 Планшеты встряхивают и медленно погружают под углом 45° в буфер для остановки реакции (100 мМ NaCl, 100 мкМ MgCl₂, 100 мкМ MnCl₂, 100 мкМ CaCl ₂ в 25 мМ трис, рН 7,5). Процесс повторяют. Затем на планшетах с присутствующей жидкостью (буфер для остановки реакции) проводят измерения цитофлуориметром (Millipore) (чувствительность 5, фильтр; длина волны возбуждения 360 нм; длина волны испускания 460 нм).

Интенсивность излучения, испускаемого окрашенными клетками U937, является мерой числа клеток U937, прилипших к hVCAM-1(1-3)-IgG и остающихся на планшете, и, таким образом, мерой способности добавленных испытываемых веществ ингибировать такую адгезию. Из результатов по ингибированию адгезии при разных концентрациях испытываемого вещества вычисляют концентрацию IC ₅₀, приводящую к ингибированию адгезии на 50%.

3. Результаты

При испытании на адгезию клеток U937 к hVCAM-l получают результаты, приведенные в таблице (величины IC₅₀ приводятся в нМ (наномоль/литр).

Соединение примера №	IC50 (нМ)
1	3,2
2	4,5
3	17
4	85,4
8	3,2
9	2,2
16	4
17	1,9
18	2,4
19	3
20	1,6
21	3
22	6,7
23	5,5
24	1,7
25	1,1
26	2,6
27	3,4
28	2,1
29	1,9
30	3,6
31	0,8
32	0,6
33	1,3
34	1,8
35	3,4
37	1.3
38	1,6
39	0,8
40	2,1
41	2,3

Фармакологические свойства соединений формулы I также можно исследовать на моделях, описанных далее.

В) Адгезия лейкоцитов у крыс

На данной модели адгезии лейкоцитов исследуют влияние соединений формулы I на адгезию лейкоцитов в венулах крыс. Адгезия лейкоцитов к эндотелию посткапиллярных венул рассматривают как важную стадию в воспалительных реакциях (J.M.Harlan, Blood, 1985, 65, 513). При рекрутменте лейкоцитов из крови в области воспаления происходит хорошо скоординированная динамическая последовательность событий, в которой активную роль играют хемотактические цитокины и факторы клеточной адгезии. Обнаружено, что взаимодействия VCAM-1/VIA-4 играют ключевую роль в адгезии и эмиграции лейкоцитов и возросшей проницаемости сосудов для макромолекул, индуцированных различными веществами-медиаторами и цитокинами (D.Seiffge, Int. J.Microcirc., 1995, 15, 301). В данной модели генерализованное воспаление или ревматоидный артрит, приводящий к адгезии лейкоцитов и их эмиграции в больные участки органа, вызывается местной или общей инъекцией эндотоксинов, например зимосана, бактериальных токсинов, таких как полисахариды (LPS) адъюванта Фрейнда. Определяют повышенную адгезию к эндотелию венул при введении эндотоксина.

Для определения адгезии лейкоцитов используют инвертированный микроскоп с фотокамерой (Zeiss), снабженный видеосистемой. Самцам крыс Sprague-Dawley (масса тела примерно 250 г) инъецируют зимосан или бактериальный эндотоксин под легкой премедикацией галотаном. Контрольные животные получают идентичный объем 0,9% физиологического раствора. Затем животным вводят подкожно или перорально испытываемое вещество в виде одной дозы или нескольких доз. Для осуществления измерений крысам дают наркоз путем внутримышечной инъекции уретана 1,25 г/кг. Им предоставляют дышать самопроизвольно через трахеальную трубку. Температуру тела поддерживают на уровне 37°С с помощью подушки с регулируемым обогревом. Осторожно выставляют брыжейку посредством подчревного разреза на термостатированное (37°С) окно предметного столика микроскопа и заливают жидким парафином при 37°С. Илеоцекальную зону брыжейки удерживают с помощью трех затупленных игл и глины для лепки. После 30-минутного периода для достижения равновесия, во время которого ткань стабилизируется, определяют адгезию лейкоцитов в посткапиллярных венулах диаметром 20-30 мкм и длиной примерно 100 мкм, проводя подсчет в 2-3 сегментах венул в течение 1 часа с интервалами в 10 минут. Лейкоцит считают прилипшим к эндотелию, если он неподвижен в течение более 30 секунд. По завершении эксперимента определяют общее число лейкоцитов и содержание фибриногена в крови. Ингибирование адгезии лейкоцитов испытываемым соединением выражают как снижение (в %) числа прилипших лейкоцитов у обработанных животных по сравнению с числом прилипших лейкоцитов у контрольных животных.

С) Гиперчувствительность замедленного типа у мышей

На модели гиперчувствительности замедленного типа (модель DTH) исследуют антиаллергическое или противовоспалительное действие соединений формулы I. DTH является воспалительной реакцией кожи, которая индуцируется сенсибилизацией антигенными веществами. Для того, чтобы определить соответствующую воспалительную реакцию и рекрутмент лейкоцитов в зоны воспаления in vivo, вещества испытывают на описанной далее модели DTH у мышей (см. также Т.В. Issekutz, J. Immunol., 1991, 147, 4178).

Группы самок мышей BALB/с (масса тела примерно 20 г) сенсибилизируют на выбритой коже 150 мкл 3% раствора оксазолона, который, как известно, индуцирует сильную воспалительную реакцию DTH. Спустя 6 дней стимулируют реакцию посредством введения 20 мкл 1% раствора оксазолона в правое ухо животного. Испытываемые вещества вводят подкожно или перорально в каждом случае за 44 часа до стимуляции реакции, за 20 часов до стимуляции и через 4 часа после стимуляции. Непосредственно перед стимуляцией и через 24 часа после стимуляции на правом ухе измеряют изменения в толщине уха из-за отека вследствие воспаления с использованием микрометра Mitutoyo Engeneering. Определяют различие в этих двух измерениях для каждого животного в группе. Сравнивают средние величины различий в группе животных, обработанных испытываемым веществом, с одной стороны, и в контрольной группе, не подвергавшейся обработке, с другой стороны. Процент ингибирования отека уха указывается как мера действия вещества.

D) Антиастматическое действие на морских свинках

Действие на функцию легких и антиастматическое действие соединений формулы I можно определить на модели морских свинок согласно методу, описанному G. Moacevic, Arch. Toxicol., 1975, 34, 1. Для этого проводят техническую подготовку к исследованию в соответствии с деталями, описанными Moacevic. Используют самцов морских свинок-альбиносов с массой тела 300-500 г. Животных помещают в плетизмограф (FMI) и регистрируют три исходных величины параметров частоты дыхания и амплитуды дыхания. На данной модели астматическое дыхание характеризуется снижением амплитуды дыхания (= снижению объема дыхания с учетом сужения бронхов) и повышением частоты дыхания (= рефлекторной реакции). Такое состояние у больных астмой известно как одышка.

За 22 дня до начала исследования морских свинок-альбиносов сенсибилизируют 0,1% раствором овальбумина (1 мл на животное) в течение двух дней подряд. Экспериментальный астматический приступ вызывают путем ингаляции 0,3% раствора овальбумина в течение 1 минуты. После 40-60-минутной фазы восстановления животные вдыхают испытываемое вещество в виде водного раствора. Сразу же после этого дают в течение 1 минуты 0,3% раствор овальбумина. На последующей 30-минутной фазе восстановления животные дышат обычным воздухом. Данный процесс повторяют дважды. Если астматический приступ становится угрожающим для жизни, животным дают кислород.