средства, обладающие анксиолитическими свойствами

Формула изобретения

1. Аминокислотные производные 3,4-диметоксифенилэтиламина 1-4 общей формулы



где R:









HX: (COOH)₂ (1, 2, 3, 4);

Y=1 (1, 2); Y=3 (3); Y=0 (4).

2. Аминокислотные производные по п.1, характеризующиеся тем, что обладают анксиолитической активностью.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологическим препаратам, предназначенным для лечения различных невротических и пограничных состояний, сопровождающихся повышенным уровнем тревожности. Оно представляет собой аминокислотные производные 3,4-диметоксидофамина, обладающие анксиолитической активностью. Препараты синтетического происхождения, ранее для этих целей не используемые, могут найти применение в лечении и/или профилактике тревожных состояний.

В настоящее время на рынке нейротропных препаратов существует огромное число наименований лекарственных веществ, используемых для лечения аффективных расстройств, сопровождающихся страхом и беспокойством. Большинство этих препаратов являются производными бензодиазепина и имеют ряд побочных эффектов и противопоказаний. Синтезированные по изобретению препараты не являются такими производными и проявляют более выраженный анксиолитический эффект. Они могут существенно расширить ассортимент анксиолитических препаратов.

Для синтеза была использована метилированная форма дофамина - 3,4-диметоксифенилэтиламин.

Известно, что дофамин в чистом виде не проникает через гематоэнцефалический барьер. На сегодняшний день дофамин используют при сердечно-сосудистой недостаточности (при кардиогенном шоке), нефросклерозе, острой почечной недостаточности, отравлении барбитуратами (Громова Э.Г. Справочник по лекарственным средствам с рецептурой, СПб, 2002, с.190-191).

Общеизвестно, что для лечения различных неврозов, невротических состояний, сопровождающихся тревогой и беспокойством, применяют хлозепид (элениум) - производное бензадиазепина. Однако его длительное использование может вызвать лекарственную зависимость, аллергические реакции, а также нарушение функций печени и почек. Кроме того, элениум нельзя назначать лицам, которым в процессе работы требуется точная координация движений, быстрая реакция (Машковский М.Д. Лекарственные средства, том 1, М., 2002, с.74-87).

Также в настоящее время в медицинской практике используют мепротан (производное карбаминового эфира замещенного пропандиола), активность которого несколько ниже, чем у бензодиазепинов. И он имеет те же противопоказания и побочные эффекты, что и элениум (Машковский М.Д. Лекарственные средства, том 1, М., 2002, с.74-87).

Среди атипичных бензодиазепинов определенный интерес представляет тофизопам (грандаксин). Данный препарат не вызывает сонливости и не оказывает миорелаксирующего и противосу дорожного действия. Отсутствие седативного эффекта позволяет использовать препарат днем. Однако есть данные о возможном развитии привыкания, аллергических реакций и диспептических расстройств. Водителям и лицам, работа которых требует быстрой умственной и физической реакции, грандаксин назначается с осторожностью (Машковский М.Д. Лекарственные средства, том 1, М., 2002, с.74-87). Этот фармакологический препарат авторами выбран за прототип.

Задачей данного изобретения являлось создание препарата, обладающего выраженными анксиолитическими свойствами и не вызывающего привыкания и сонливости, а также с отсутствием у него нежелательных побочных реакций организма.

Цель была достигнута с помощью синтетических препаратов на основе 3,4-диметоксифенилэтиламина (3,4-диметоксидофамина) и ряда аминокислот.

Синтезировано и исследовано пять препаратов, из них наиболее активными являются оксалаты N-L-аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (1) и N-L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (2).

Были синтезированы следующие новые аминокислотные производные дофамина: N-L-аланил-3,4-диметоксифенилэтиламин (1), N-L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламин (2), N-L-триптофанил-3,4-диметоксифенилэтиламин (3), N- -аланил-3,4-диметоксифенилэтиламин (4) и N-глицил-3,4-диметоксифенилэтиламин (5). Они были выделены: 1 и 2 в виде оксалатов моногидратов, 3 в виде оксалата тригидрата, 4 в виде оксалата и 5 в виде хлоргидрата. Структура полученных соединений представлена ниже.

Общая формула веществ:

где R:

HX: (COOH)₂ (1, 2, 3,4),

Y=1 (1,2);

Y=3 (3);

Y=0 (4, 5).

Эти вещества получали взаимодействием активированных эфиров (n-нитрофенилового или TV-гидроксисукцинимидного) N-замещенной аминокислоты с хлоргидратом 3,4-диметоксифенилэтиламина в присутствии основания (триэтиламина) при температуре 17-21°С в течение 5-24 часов. Выделение и очистку продукта реакции, снятие защитных групп и перевод в соль (оксалат или хлоргидрат) проводили по известным стандартным методикам: путем промывания этилацетатных растворов водными растворами хлористого натрия, бикарбоната натрия, серной кислоты удаляли непрореагировавшие компоненты; проводили перекристаллизацию из подходящего растворителя. Защитные группы удаляли гидрированием на катализаторе палладий на активированном угле (Гершкович А.А., Кибирев В.К. Синтез пептидов. Реагенты и методы, Киев, 1987, 264 с.). Индивидуальность продуктов реакции подтверждали тонкослойной хроматографией в системе хлороформ-метанол (9:1). Характеристики полученных соединений приведены в таблице 1.

Для синтезированных соединений были определены LD₅₀ при остром введении. Расчет проводили с помощью метода Першина: LD₅₀= (a+b)·(m-n)/200.

Таким образом, при средней терапевтической дозе 1,0 мг/кг терапевтический индекс равен 153,0 (1, 2, 3, 4) и 760,0 (5), что свидетельствует о низкой токсичности соединений.

В дальнейшем проводили оценку анксиолитического и противосудорожного действия синтезированных соединений.

В результате оценки анксиолитического действия веществ обнаружено, что при внутрибрюшинном (в/б) введении в разных дозах препараты проявляют биологическую активность. Так, соединение 1 (1,0 мг/кг, в/б, однократно), 2 (0,1 мг/кг, в/б, хронически), 3 (1,0 мг/кг, в/б, хронически), 4 (1,0 мг/кг, в/б, хронически), 5 (10,0 мг/кг, в/б, однократно) увеличивают время пребывания животных в открытых рукавах лабиринта по сравнению и с контрольными животными, получавшими физиологический раствор, и с препаратом сравнения грандаксином (0,04 мг/кг), что подтверждает наличие у веществ 1, 2, 3, 4, 5 анксиолитического эффекта, превышающего эффект грандаксина (таблица 3, таблица 4).

Оценка уровня тревожности животных на фоне введения исследуемых соединений и грандаксина (препарат сравнения) проводилась по выраженности горизонтальной, вертикальной и исследовательской активности, а также эмоциональной реакции у крыс в тесте «открытое поле», когда животных после введения препарата помещают в центр освещенной площадки на 3 минуты и автоматически с помощью программно-аппаратного комплекса фиксируют параметры, характеризующие поведение крысы. Установлено, что вещество 1 (1,0 мг/кг, в/б, однократно), 2 (0,1 мг/кг, в/б, хронически), 3 (1,0 мг/кг, в/б, хронически), 4 (1,0 мг/кг, в/б, хронически), 5 (10,0 мг/кг, в/б, однократно) достоверно уменьшают горизонтальную, вертикальную активность и выраженность эмоциональной составляющей по сравнению с грандаксином (0,04 мг/кг), что свидетельствует о более выраженном снижении уровня тревожности у крыс по сравнению с протопипом (таблица 5, таблица 6).

Примеры выполнения изобретения.

Пример I. Синтез оксалата N,L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламина (2).

a) Смесь 3,07 г (7,04 мМ) n-нитрофенилового эфира N-бензилоксикарбонил-О-бензил-L-тирозина, 1,53 г (7,01 мМ) хлоргидрата 3,4-диметокисфенилэтиламина и 0,99 мл триэтиламина в 10 мл диметилформамида перемешивали в течение 5 часов при температуре 18-20°С и оставляли на ночь при той же температуре. Массу разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (20 мл), слои разделяли и органический слой промывали последовательно насыщенным раствором хлористого натрия (2×20 мл), 1М раствором кислоты серной (3×20 мл), насыщенным раствором хлористого натрия (2×20 мл), насыщенным раствором натрия бикарбоната (3×20 мл), насыщенным раствором хлористого натрия (3×20 мл), высушивали натрия сульфатом и упаривали. Остаток обрабатывали этанолом, кристаллы отфильтровывали, промывали этанолом и высушивали. После перекристаллизации из этанола получали 2,6 г (77,4% от теоретического) N-(N-бензилоксикарбонил-O-бензил-L-тирозил)-3,4-диметоксифенилэтиламина, Т.пл. 160-162°С. Продукт индивидуален в системе хлороформ-метанол (9:1).

b) К суспензии 1,7 г (3,56 мМ) N-(N-бензилоксикарбонил-О-бензил-L-тирозил)-3,4-диметоксифенилэтиламина в 25 мл этанола добавляли 0,2 г катализатора (палладий на активированном угле) и при перемешивании пропускали ток водорода в течение 7 часов. Катализатор отфильтровывали, к раствору добавляли 0,46 г дигидрата щавелевой кислоты и растворитель отгоняли в вакууме. Остаток дважды перекристаллизовывали из ацетонитрила. Выход 0,72 г (57,7% от теоретического). Продукт индивидуален в системе хлороформ-метанол (9:1). Т.пл. и элементный анализ представлены в таблице 2.

Аналогично примеру I получены соединения 1, 3, 4, 5.

Пример II. Доклинические исследования проводили в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (под ред. Фисенко В.П. М., 2000, 398 с.). Все животные была разделены на группы, по 10 особей в каждой. Исследуемые вещества вводили внутрибрюшинно в дозах 0,1 мг/кг, 1,0 мг/кг и 10,0 мг/кг. Контрольная группа животных получала физиологический раствор в эквивалентном объеме. Препарат сравнения грандаксин вводили внутрибрюшинно в дозе 0,04 мг/кг. Все препараты вводили однократно и хронически в течение 10 дней. Тестирование проводили в первой половине дня (10-13 ч.).

Определение острой токсичности

Для определения острой токсичности фармакологические соединения испытывали в следующих дозах: 50,0, 100,0, 200,0, 500,0, 700,0, 1000,0 мг/кг. Препараты вводились внутрибрюшинно в объеме 0,1-0,5 мл со скоростью 0,1 мл/сек. Оценка физиологического состояния животных проводилась в течение 48 часов. По окончании времени тестирования определяли процент погибших животных.

Обработку полученных результатов проводили при помощи расчетного метода Першина по формуле: ЛД₅₀= (а+b)·(m-n)/200, где a, b - величины смежных доз; m, n - соответствующие этим дозам частоты летального эффекта (Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. М., 2000, 352 с.).

Тест приподнятый «крестообразный» лабиринт

Уровень тревожности у животных определяли с использованием общепринятого теста приподнятого «крестообразного» лабиринта (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, под ред. Фисенко В.П. М., 2000, с.126-130). Лабиринт состоял из двух открытых и двух закрытых рукавов, расположенных крестообразно и приподнятых над полом на 50 см. Ширина рукавов составляла 10 см при длине 45 см, высота стенок в закрытых рукавах составляла 45 см. Сверху все рукава были открыты. В месте перпендикулярного пересечения рукавов находилась площадка размером 10×10 см, на которую сажали тестируемую крысу. Поведение животных регистрировали в течение 5 мин и оценивали следующие параметры: время нахождения в открытых и закрытых рукавах, число заходов в открытые и закрытые рукава.

Тест «Открытое поле»

Помещение животного в новую обстановку (ярко освещенная площадка, которая значительно больше, чем клетка, в которой живет крыса) приводит к возникновению изменений в характере поведения (Буреш Я. и соавт. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. М., 1991, 339 с.).

Поведение животных в тесте "открытое поле" изучали по модифицированной методике Е.С.Петрова и соавторов (1982). "Открытое поле" представляло собой квадратную площадку размером 80 см × 80 см и боковыми стенками высотой 36 см. Пол площадки был разделен на 16 равных квадратов размером 19,5 см × 19,5 см. Площадка равномерно освещалась источником света. Животное помещали в центр "открытого поля" на 3 мин. Контроль изменений в поведении животного осуществлялся автоматически с помощью программно-аппаратного комплекса "Биологическая установка "открытое поле" (Государственный Электротехнический Университет им. Д.И.Ульянова, Санкт-Петербург). Регистрировали следующие параметры: двигательную горизонтальную активность ("перемещение") и двигательную вертикальную активность ("вставание"); исследовательскую активность (исследование крысой круглых сквозных отверстий, расположенных на полу); груминговые реакции (вычесывание, вылизывание, умывание и др.); эмоциональные реакции (дефекация и уринация).

Результаты испытаний синтезированных аминокислотных производных дофамина представлены в таблицах 1, 2, 3, 4, 5, 6.

Таблица 1. Полученные экспериментальные данные позволяют сделать вывод о низкой токсичности соединений 1, 2, 3, 4, 5.

Таблица 3. Из испытаний соединений 1, 2, 3, 4, 5 и препарата сравнения видно, что при однократном введении наиболее выраженный анксиолитический эффект оказывают вещества 1 и 5.

Таблица 4. Результаты испытаний веществ 1, 2, 3, 4, 5 и прототипа свидетельствуют о том, что в хроническом эксперименте более выраженным противотревожным действием обладают соединения 2, 3, 4.

Таблица 5. Из испытаний соединений 1, 2, 3, 4, 5 и препарата сравнения видно, что преимуществом при однократном введении обладают вещества 1, 3, 4, 5.

Таблица 6. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что при хроническом введении преимуществом обладают вещества 2, 3, 4, 5.

Таблица 2.
Характеристики оксалатов N-L-аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина (1), N-L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламина (2), N-L-три ксифенилэтиламина (3), N- -аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина (4) и хлоргидрата N-глицил-3,4-диметоксифенилэти.
Соединение	Т.пл. (из ацетонитрила), °С	Вычислено %	Брутто-формула	Найдено, %
C	H	N	C	H	N
1	97-100	49,99	7,77	6,71	C15 H22N2O7·Н2O	49,96 50,38	7,76 8,02	6,56 6,65
2	100-102	55,75	6,24	6,19	C21 H26N2O8·H2O	55,88 56,00	5,98 6,08	6,43 6,45
3	136-139	54,00	6,50	8,20	C23 H27N3O7·3H2O	54,21 54,69	5,85 6,03	8,02 8,10
4	142-144	52,62	6,48	8,18	C15 H22N2O7	51,82 51,81	6,90 6,75	7,63 7,61
5	146-148	52,46	6,97	10,20	C10 H18N2O3·HCl	52,61 52,61	7,07 7,07	9,66 9,69

Таблица 3.
Влияние однократного введения оксалатов N-L-аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (1), N-L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (2), - N-L-триптофанил-3,4-диметоксифенилэтиламина тригидрата (3), N- -аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина (4) и хлоргидрата N-глицил-3,4-диметоксифенилэтиламина (5) на уровень тревожности крыс-самцов в тесте приподнятый «крестообразный» лабиринт
Группы животных (n=10)	Время в открытом рукаве, сек	Время в закрытом рукаве, сек	Количество заходов в открытый рукав, раз	Количество заходов в закрытый рукав, раз
интактные	70,0±2,4	230,0±2,4	1,2±0,4	2,8±0,2
грандаксин	90,0±3,6*	210,0±3,6*	4,2±0,8*	3,2±0,8
0,1 мг/кг
1	90,0±4,4*	210,0±2,4*	3,0±0,4*	1,5±0,2*#
2	60,0±2,4#	240,0±2,4*#	1,2±0,2#	3,7±0,2*
3	31,0±2,4*#	269,0±2,4*#	1,2±0,2#	2,0±0,2
4	65,0±2,4#	235,0±2,4#	1,2±0,2#	2,2±0,2
5	120,0±4,5*#	180,0±4,5*#	1,8±0,2#	2,6±0,2
1,0 мг/кг
1	157,0±4,6*#	143,0±4,2*#	4,5±0,4*	2,0±0,4
2	45,0±2,6*#	255,0±4,2*#	1,3±0,2#	2,0±0,4
3	57,0±2,6#	243,0±4,2*#	1,9±0,2#	3,5±0,3
4	71,0±2,6#	229,0±4,2#	1,6±0,2#	3,0±0,3
5	46,0±2,9*#	254,0±2,9*#	2,4±0,2*#	2,4±0,2
10,0 мг/кг
1	120,0±6,4*#	180,0±2,2*#	2,5±0,4*#	2,5±0,2
2	40,0±2,4*#	260,0±2,2*#	1,5±0,4#	3,5±0,2*
3	94,0±2,4*	206,0±2,2*	4,5±0,4*	1,5±0,2*#
4	78,0±2,6#	222,0±4,2	1,4±0,2#	3,0±0,3
5	131,0±8,9*#	169,0±8,9*#	1,6±0,4#	1,2±0,2*#
* - различия являются достоверными относительно интактных животных при р 0,05
# - различия являются достоверными относительно грандаксина (0,04 мг/кг) при р 0,05

Таблица 4.
Влияние хронического введения оксалатов N-L-аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (1), N-L-тирозил-3,4-диметоксифенилэтиламина моногидрата (2), N-L-триптофанил-3,4-диметоксифенилэтиламина тригидрата (3),N- -аланил-3,4-диметоксифенилэтиламина (4) и хлоргидрата N-глицил-3,4-диметоксифенилэтиламина (5) на уровень тревожности крыс-самцов в тесте приподнятый «крестообразный» лабиринт.
Группы животных(п=10)	Время в открытом рукаве, сек	Время в закрытом рукаве, сек	Количество заходов в открытый рукав, раз	Количество заходов в закрытый рукав, раз
интактные	70,0±2,4	230,0±2,4	1,2±0,4	2,8±0,2
грандаксин	96,0±3,0*	204,0±3,0*	3,5±0,8*	3,8±0,8
0,1 мг/кг
1	37,0±4,1*#	263,0±4,1*#	1,8±0,4#	4,6±0,7*
2	134,0±4,3*#	166,0±4,3*	3,6±0,4*	3,2±0,2
3	134,0±11,9*#	166,0±6,8*	3,4±0,2*	3,2±0,4
4	76,0±5,0#	224,0±5,1	4,2±0,4*	4,0±0,4*
5	63,0±5,4#	237,0±5,4#	4,4±0,2*	4,6±0,2*
1,0 мг/кг
1	67,4±13,8#	232,6±13,8#	4,2±0,4*	5,8±0,4*#
2	90,6±5,6*	209,4±5,6*	3,0±0,1*	3,2±0,2
3	156,0±7,6*#	144,0±7,6*#	3,0±0,1*	2,6±0,2#
4	97,5±6,3*	202,5±5,1*	3,4±0,2*	3,0±0,5
5	68,0±2,5#	232,0±2,5#	2,0±0,3	3,0±0,4
10,0 мг/кг
1	32,0±2,5*#	268,0±2,5*#	2,2±0,4*	3,2±0,7
2	60,0±8,8#	240,0±8,8#	2,2±0,4*	3,2±0,5
3	90,0±7,4*	210,0±8,4*	3,2±0,4*	2,6±0,2
4	70,0±9,5#	230,0±9,5#	2,6±0,2*	3,4±0,2
5	65,0±5,0#	235,0±5,0#	1,8±0,4#	4,4±0,2*
* - различия являются достоверными относительно интактных животных при р 0,05
# - различия являются достоверными относительно грандаксина (0,04 мг/кг) при р 0,05

Таблица 5.
Влияние однократного введения соединений 1, 2, 3, 4, 5 на поведение крыс-самцов в тесте «открытое поле» в течение 180 сек
Группы животных (n=10)	Параметры
Двигательная активность	Исследовательская активность	Эмоциональность
Перемещение	Вставание	Груминг	Дефекация
интактные	62,7±6,9	13,2±3,2	3,0±0,5	3,2±0,4	2,4±0,2
грандаксин	27,8±1,6*	8,5±0,9	26,7±2,4*	1,6±0,3*	1,0±0,3*
0,1 мг/кг
1	66,3±4,9#	20,2±2,6#	40,3±3,5*#	12,1±1,4*#	1,0±0,2*
2	50,3±4,9#	2,3±0,6*#	35,3±3,5*	6,5±0,4*#	1,2±0,2*
3	18,4±2,7*#	3,8±0,5*#	2,0±0,4#	2,8±0,2	1,2±0,2*
4	13,8±1,2*#	6,4±0,9*	2,2±0,8#	5,6±0,7*#	1,6±0,2*
5	18,3±0,8*#	5,3±0,7*#	3,5±0,8#	0	1,0±0,3*
1,0 мг/кг
1	25,7±2,8*	4,7±0,8*#	23,0±2,8*	10,7±0,8*#	1,3±0,2*
2	44,7±7,8#	5,7±0,8*	29,0±2,8*	5,7±0,8#	0,8±0,2*
3	25,4±3,4*	15,8±1,4#	2,2±0,8#	3,6±0,6#	1,0±0,1*
4	29,8±2,2*	18,0±2,5#	1,6±0,4*#	8,8±0,4*#	1,6±0,4
5	19,5±1,2*#	6,7±0,9*	4,7±0,5*#	1,2±0.3*	1,4±0,4*
10,0 мг/кг
1	55,8±3,5#	6,7±0,8*	35,0±4,6*	4,8±0,4#	2,7±0,2#
2	56,8±3,5#	7,3±0,8*	37,0±4,6*	3,8±0,4	1,2±0,2*
3	16,2±1,4*#	12,2±0,9#	2,0±0,3#	2,2±0,7	1,6±0,2*
4	30,6±4,7*	16,2±0,9#	2,0±0,3#	5,8±0,5*	2,0±0,3
5	20,7±2,1*#	6,0±0,7*#	5,5±0,8*#	1,4±0,4*	1,4±0,4*
* - различия являются достоверными относительно интактных животных при р 0,05
# - различия являются достоверными относительно грандаксина (0,04 мг/кг) при р 0,05

Таблица 6.
Влияние хронического введения соединений 1, 2, 3, 4, 5 на поведение крыс-самцов в тесте «открытое поле» в течение 180 сек
Группы животных (n=10)	Параметры
Двигательная активность	Исследовательская активность	Эмоциональность
Перемещение	Вставание	Груминг	Дефекация
интактные	62,7±6,9	13,2±3,2	3,0±0,5	3,2±0,4	2,4±0,2
грандаксин	21,0±1,5*	0	14,0±3,0*	0	0
0,1 мг/кг
1	45,5±1,6#	11,8±3,1#	2,4±0,5#	3,0±0,5#	2,7±0,3#
2	18,2±1,0*	8,0±1,0*#	2,4±0,5#	2,0±0,3*#	2,0±0,4#
3	24,6±1,4*	8,8±0,7#	2,4±0,5#	1,4±0,4*#	0,8±0,2*
4	27,8±2,2*#	5,6±0,8*#	3,0±0,7#	1,2±0,2*#	2,4±0,7#
5	17,0±0,6*#	6,4±0,5*#	1,0±0,2*#	0	1,8±0,2
1,0 мг/кг
1	58,5±2,б#	9,8±2,3#	2,4±0,5#	1,4±0,3*#	2,4±0,2#
2	19,0±2,1*	12,4±0,8#	1,2±0,4*#	2,4±0,5#	1,8±0,4#
3	17,0±2,4*	5,4±0,9*#	1,0±0,6*#	1,4±0,5*#	1,6±0,5#
4	14,0±1,4*#	3,0±0,8*#	0	0	0,8±0,2*#
5	16,2±2,1*	6,8±0,5*#	1,2±0,7#	0	1,6±0,2*#
10,0 мг/кг
1	71,0±3,8*#	19,7±1,2*#	1,2±0,2*#	4,9±0,3*#	4,0±0,2*#
2	27,0±2,3*	11,2±1,6#	2,0±0,8#	1,0±0,3*#	2,6±0,4#
3	27,0±2,8*	9,2±0,8#	1,0±0,4*#	0,6±0,2*#	1,6±0,4#
4	18,8±1,3*	3,2±0,4*#	1,0±0,4*#	1,0±0,5*#	1,2±0,4*#
5	27,2±2,1*#	5,6±0,5*#	0	1,4±0,4*#	1,6±0,2*#
* - различия являются достоверными относительно интактных животных при р 0,05
# - различия являются достоверными относительно грандаксина (0,04 мг/кг) при р 0,05