способ прогнозирования активности гликофорина мембран эритроцитов в периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции и содержания перекисей жирных кислот в периферической крови

Формула изобретения

Способ прогнозирования активности гликофорина мембран эритроцитов в периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции и повышении перекисей жирных кислот в крови путем определения содержания гликофорина мембран эритроцитов методом гель-элетрофореза и малонового диальдегида спектрофотометрически, характеризующийся тем, что решают дискриминантное уравнение D=-2,719 · гликофорин +{+25,331 · малоновый альдегид}, и при D, равной или большей граничного значения +9,52, прогнозируют повышение активности гликофорина в мембранах эритроцитов у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции.

Описание изобретения к патенту

Цель изобретения заключается в прогнозировании степени активности гликофорина мембран эритроцитов в периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции.

Гликофорин является основным интегральным белком мембраны эритроцита, несущим на своей поверхности отрицательный заряд, что способствует отталкиванию эритроцитов друг от друга. Помимо этого гликофорин является рецептором для целого ряда антигенов и в зависисмости от контакта с одним из них проявляются те или иные морфофункциональные свойства эритроцитов (Dranton et al, 2001; Gallgher P.G., Forget B.G, 2001; Bemnet V., 1985; Воробьев А.И., 2007). В известной литературе не освещаются вопросы активности гликофорина при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией. Сослаться на какой-либо прототип, в формулируемом нами аспекте, не представляется возможным.

Отсутствие данных позволяет сформулировать прогноз активности интегрального белка мембран эритроцитов гликофорина при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности.

Цель достигается тем, что оценка активности гликофорина в мембранах эритроцитов периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции определяют в зависимости от накопления конечных продуктов перекисей жирных кислот - малонового диальдегида.

Заявленный способ имеет следующие приемы:

а) с помощью диск-электрофореза в ступенчатом градиенте плотности полиакриламидного геля (10%) с додецилсульфатом натрия определяют белковые фракции мембран эритроцитов, в том числе гликофорина

б) определение малонового диальдегида (МДА) проводят с помощью тиобарбитуровой кислоты на спектрофотометре «Stat-Fax-1900» (USA) [2].

в) титр антител к вирусу простого герпеса определяют методом иммуноферментного анализа на микропланшетном анализаторе «Stat-Fax-2100» (USA) с использованием наборов «Вектор-Бест» (Новосибирск).

г) оценку взаимосвязи между исследуемыми параметрами у здоровых беременных и беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, решают с помощью дискриминантного уравнения D=-2,719 · гликофорин + {+25,331-малоновый диальдегид} (табл. 2). Малоновый диальдегид выбран как наиболее значимый параметр при множественной линейной регрессии (табл. 1).

На основании дискриминантного анализа

D=-2,719·8,9+{+25,331·1,65}

D=-21,99+{+41,79}=+19,80

D(+19,80)>граничного значения (+9,52)

и при увеличении содержания малонового диальдегида в периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции (титр антител - 1:12800) прогнозируют повышение активности гликофорина мембран эритроцитов.

д) для иллюстрации заявленного способа приводим примеры (1-3).

Литература

1. Воробьев А.И. Руководство по гематологии. - М.: Ньюдиамед, 2007. - с.1275.

2. Стельная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты: Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - 390 с.

3. Bemnet V. The membrane skeleton of human erythrocyte implications for more complex cell / Annu. Rev. Biochem. - 1985. - Vol.54. - P.273-304.

4. Branton D., Coher С.М., Tyler J. Interaction of cytoskeletal on the human erythrocyte membrane / Cell. - 1981. - Vol.24. - P.22-32.

5. Gallgher P.G., Forget B.G. The ret cell membrane. Williams Hematology. / Edit. E. Beutler, M. Lichtman, B.S. Coller et al. - Charter 45, 6th edition. Mc. Grow Hill, International Edition, 2001. - C.333-343.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Беременная А., 20 лет. Перенесла в третьем триместре обострение герпес-вирусной инфекции с титром антител 1:12800. В периферической крови определяют спектрометрическим методом (Stat-Fax-1900; USA) 30,51 мкмоль/л малонового диальдегида. С помощью диск-электрофореза в ступенчатом градиенте плотности полиакриламидного геля (10%) с додецилсульфатом натрия определяли белковые фракции мембран эритроцитов, в том числе и гликофорина. Процент гликофорина был 12,0%.

Дискриминантное уравнение в данном случае показывает: D=-2,719·12+{+30,51·1,65}=16,86, то есть оно больше граничного значения (+9,52). У данной беременной прогнозируют увеличение гликофорина до 12,0% по сравнению с контролем (6,65±0,08%) при содержании в периферической крови малонового диальдегида 30,51 мкмоль/л при обострении герпес-вирусной инфекции.

Пример 2. Беременная Г., 23 года. Перенесла в третьем триместре обострение герпес-вирусной инфекции с титром антител - 1:12800. В периферической крови определяют спектрометрическим методом (Stat-Fax-1900; USA) 36,51 мкмоль/л малонового диальдегида. С помощью диск-электрофореза в ступенчатом градиенте плотности полиакриламидного геля (10%) с додецилсульфатом натрия определяли белковые фракции мембран эритроцитов, в том числе и гликофорина. Процент гликофорина составлял 13,0±1,2%. D=-2,719·13+{+36,51-1,65}=24,90. Граничное значение (+9,52).

У данной беременной при 36,51 мкмоль/л малонового диальдегида в периферической крови при обострении герпес-вирусной инфекции прогнозируют увеличение процентного содержания в мембранах эритроцитов гликофорина до 13,0±1,2%) по сравнению с контролем (6,15±0,08%).

Пример 3. Беременная С, 24 года. В третьем триместре не перенесла никаких заболеваний. Количество малонового диальдегида и периферической крови определялось спектрофотометрическим методом (Stat-Fax-1900; USA) 11,33 мкмоль/л. С помощью диск-электрофореза в ступенчатом градиенте плотности полиакриламидного геля (10%) с додецилсульфатом натрия определяли белковые фракции мембран эритроцитов, в том числе и гликофорина. Процент гликофорина был 7,5%.

Дискриминантное уравнение в данном случае показывает: D=-2,719·7,5+{+11,33-1,65}=2,67. То есть оно меньше граничного значения (+9,52).

У данной беременной не прогнозируют увеличение гликофорина выше граничного значения (6,65±0,08%)) при содержании малонового диальдегида в пределах 11,33 мкмоль/л и отсутствии обострения герпес-вирусной инфекции в третьем триместре.

Таблица 2
Автоматизированная система диспансеризации.	сегодня 07.12.2008 22:53
Статистическая обработка результатов	дискриминантный анализ
Имя выборки	Объем выборки	Количество параметров	Расстояние Махалана	Критерий Фишера. Различия выборок	Вероятность различия выборок %	Граничное значение дискриминантной функции	Вероятность ошибочности классов %
493	14	2	4,65	63,80	100,000	9,52	1,809
OOR-контроль	11	2					1,365
D=-2,719·8 гликофорин + 25,331 малоновый диальдегид (МДА)
Примечание: 493 - выборка с герпес-вирусной инфекцией; OOR - контроль.

D=-2,719·8,9+{+25,331·1,65}

D=-21,99+{+41,79}=+19,80

D(+19,80)>граничного значения (+9,52)