стабильные композиции пищеварительных ферментов

Формула изобретения

1. Композиция для лечения или предупреждения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительного фермента, содержащая множество покрытых частиц, каждая указанная частица включает ядро, покрытое кишечно-растворимым покрытием, где ядро включает панкрелипазу и где кишечно-растворимое покрытие включает: 10-20 мас.%, по меньшей мере, одного кишечно-растворимого полимера и 4-10 мас.% талька, где указанные мас.% рассчитаны от общей массы покрытых частиц и где покрытые частицы проявляют потерю ферментативной активности панкрелипазы не более чем приблизительно 25% после 6 месяцев ускоренного тестирования стабильности.

2. Композиция по п.1, где влагосодержание составляет приблизительно 3% или менее.

3. Композиция по п.1, где композиция имеет активность воды приблизительно 0,6 или менее.

4. Композиция по п.2, где влагосодержание составляет приблизительно 2% или менее.

5. Композиция по п.1, где покрытые частицы проявляют потерю ферментативной активности панкрелипазы не более чем приблизительно 15% после 6 месяцев ускоренного тестирования стабильности.

6. Композиция по п.1, где покрытие дополнительно содержит, по меньшей мере, один пластификатор.

7. Композиция по п.6, где покрытие дополнительно включает 1-2 мас.%, по меньшей мере, одного пластификатора в расчете на общую массу покрытых частиц.

8. Композиция по п.7, где пластификатор выбран из группы, состоящей из триацетина, трибутилцитрата, триэтилцитрата, ацетил-три-н-бутилцитрата, диэтилфталата, дибутилсебацината, полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля, касторового масла, ацетилированного моноглицерида, ацетилированного диглицерида и их смесей.

9. Композиция по п.8, где пластификатором является триэтилцитрат.

10. Композиция по п.1, где ядро дополнительно содержит, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый наполнитель, выбранный из группы, состоящей из связующего, разрыхлителя, смазывающего вещества, глиданта, разбавителя и их смесей.

11. Композиция по п.10, где связующее выбрано из группы, состоящей из крахмалов, сахаров, лактозы, сахарных спиртов, ксилита, сорбита, мальтита, целлюлозы, микрокристаллической целлюлозы, модифицированной целлюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, натрийкарбоксиметилцеллюлозы, альгиновой кислоты и поливинилпирролидона; разрыхлитель выбран из группы, состоящей из двухосновного фосфата кальция, дигидрата двухосновного фосфата кальция, трехосновного фосфата кальция, кукурузного крахмала, альгиновой кислоты, гидроксипропилцеллюлозы, кальцийкарбоксиметилцеллюлозы, натрийкарбоксиметилцеллюлозы, сшитой натрийкарбоксиметилцеллюлозы, набухающих ионообменных смол, альгинатов, формальдегидказеина, целлюлозы, натрийкроскармеллозы, кросповидона, микрокристаллической целлюлозы, натрийкарбоксиметилкрахмала, гликолята крахмала натрия, крахмалов и рисового крахмала;

смазывающее вещество выбрано из группы, состоящей из кальция стеарата, магния стеарата, натрия стеарилфумарата, стеариновой кислоты, цинка стеарата, талька и восков;

глидант выбран из группы, состоящей из коллоидного диоксида кремния и талька; и

разбавитель выбран из группы, состоящей из маннита, сахарозы, безводного двухосновного фосфата кальция, безводного дигидрата двухосновного фосфата кальция, трехосновного фосфата кальция, целлюлозы, лактозы, карбоната магния и микрокристаллической целлюлозы.

12. Композиция по п.10, где ядро дополнительно включает

1-4 мас.%, по меньшей мере, одного разрыхлителя;

0,2-0,6 мас.%, по меньшей мере, одного глиданта;

2-6 мас.%, по меньшей мере, одного связующего и

0,2-0,6 мас.%, по меньшей мере, одного смазывающего вещества в расчете от общей массы покрытых частиц.

13. Композиция по п.12, где, по меньшей мере, одним разрыхлителем является сшитая натрийкроскармеллоза, по меньшей мере, одним глидантом является коллоидный диоксид кремния, по меньшей мере, одним связующим является микрокристаллическая целлюлоза и, по меньшей мере, одним смазывающим веществом является стеарат магния.

14. Композиция по п.12, где ядро дополнительно включает 0,5-1,0 мас.%, по меньшей мере, одного пластификатора в расчете от общей массы покрытых частиц.

15. Композиция по п.14, где, по меньшей мере, одним пластификатором является гидрированное касторовое масло.

16. Композиция по п.1, где ядро включает 68-90 мас.% панкрелипазы.

17. Композиция по п.1, где панкрелипаза получена от свиньи.

18. Композиция по п.1, где кишечно-растворимый полимер выбран из группы, состоящей из целлюлозы ацетата-фталата, гидроксипропилметилцеллюлозы фталата, гидроксипропилметилцеллюлозы ацетата-сукцината, поливинилацетата фталата, сополимеров метакриловой кислоты и метилметакрилата и шеллака.

19. Композиция по п.18, где кишечно-растворимым полимером является гидроксипропилметилцеллюлозы фталат.

20. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет соотношение активности протеазы к активности липазы от приблизительно 1,8 до приблизительно 6,2.

21. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет соотношение активности протеазы к активности липазы от приблизительно 2,0 до приблизительно 6,1.

22. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет соотношение активности амилазы к активности липазы от приблизительно 1,8 до приблизительно 8,2.

23. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет соотношение активности амилазы к активности липазы от приблизительно 2,0 до приблизительно 8,2.

24. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет соотношение активности липаза : протеаза : амилаза от приблизительно 1:10:10 до приблизительно 10:1:1.

25. Композиция по любому из пп.1-19, где панкрелипаза имеет комбинированную активность липазы, протеазы и амилазы приблизительно 4500-5500 ME активности липазы, приблизительно 8000-34000 ME активности протеазы и приблизительно 8000-45000 ME активности амилазы;

приблизительно 9000-11000 ME активности липазы, приблизительно 17000-67000 ME активности протеазы и приблизительно 17000-90000 ME активности амилазы;

приблизительно 13500-16500 ME активности липазы, приблизительно 26000-100000 ME активности протеазы и приблизительно 26000-135000 ME активности амилазы или

приблизительно 18000-22000 ME активности липазы, приблизительно 35000-134000 ME активности протеазы и приблизительно 35000-180000 ME активности амилазы.

26. Композиция по любому из пп.1-19, где ядро покрытых частиц имеет номинальный диаметр частицы в пределах приблизительно 2-5 мм и массу покрытия покрытых частиц приблизительно 15% в расчете от общей массы покрытых частиц.

27. Композиция по любому из пп.1-19, где ядро покрытых частиц имеет номинальный диаметр частицы в пределах приблизительно 1-2 мм и массу покрытия покрытых частиц приблизительно 22% в расчете от общей массы покрытых частиц.

28. Лекарственная форма для лечения или предупреждения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительного фермента, включающая композицию по любому из пп.1-19.

29. Лекарственная форма по п.28, где указанная лекарственная форма является капсулой, заполненной композицией.

30. Лекарственная форма по п.29, где капсула состоит из материала, выбранного из группы, состоящей из целлюлозного полимера, гидроксипропилметилцеллюлозы, крахмала, полисахарида, пуллулана и желатина.

31. Лекарственная форма по п.30, где капсула состоит из гидроксипропилметилцеллюлозы, имеющей влагосодержание приблизительно 6% или менее.

32. Лекарственная форма по п.31, где капсула состоит из гидроксипропилметилцеллюлозы, имеющей влагосодержание приблизительно 2% или менее.

33. Лекарственная форма по п.28, где указанная лекарственная форма имеет, по существу, нулевое переполнение.

34. Упаковка, содержащая герметичный контейнер из влагонепроницаемого материала, осушитель и, по меньшей мере, одну лекарственную форму по п.28, где композиция имеет влагосодержание примерно 3% или менее, и где осушитель и, по меньшей мере, одна лекарственная форма находятся внутри герметичного контейнера.

35. Упаковка по п.34, где влагонепроницаемый материал выбран из группы, состоящей из металла, стекла, пластмассы и пластмассы с металлическим покрытием.

36. Упаковка по п.34, где осушитель выбран из группы, состоящей из молекулярного сита, глины, силикагеля, активированного угля и их комбинаций.

37. Упаковка по п.36, где осушитель является молекулярным ситом.

38. Упаковка по п.34, где указанная лекарственная форма является капсулой, состоящей из гидроксипропилметилцеллюлозы.

39. Применение композиции по п.1 для изготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительных ферментов у млекопитающих, нуждающихся в этом.

40. Применение по п.39, дополнительно включающее использование лекарственного средства, которое повышает рН ЖКТ, и где композиция панкрелипазы и лекарственное средство, которое увеличивает рН ЖКТ, находятся в одной композиции или в разных композициях.

41. Применение по п.40, где лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из ингибиторов протонного насоса и антацидов.

42. Применение по п.39, где расстройством является муковисцидоз.

43. Применение по п.39, где расстройством является нарушение всасывания жиров у млекопитающего.

44. Применение по п.39, где лекарственное средство повышает коэффициент всасывания жиров у пациента.

45. Способ получения композиции панкрелипазы по п.1, включающий: нанесение на частицы панкрелипазы в атмосфере с влагосодержанием приблизительно 3,6 г воды на кубический метр или менее покрытия, содержащего кишечно-растворимый полимер и тальк с образованием множества частиц с отсроченным высвобождением.

46. Способ по п.45, где на частицы наносят покрытие из смеси кишечно-растворимого полимера, растворенного в ацетоне, и талька.

47. Способ по п.45, где множество частиц с отсроченным высвобождением имеет влагосодержание приблизительно 3% или менее или активность воды приблизительно 0,6 или менее, и где потеря активности пищеварительного фермента после 6 месяцев ускоренного тестирования стабильности составляет не более 15%.

Описание изобретения к патенту

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ

В настоящей заявке испрашивается приоритет согласно предварительной заявке на патент США № 60/902091, поданной 20 февраля 2007 г., предварительной заявке на патент США № 60/902093, поданной 20 февраля 2007г. и предварительной заявке на патент США № 60/902092, поданной 20 февраля 2007г., раскрытие каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки во всей их полноте для всех целей.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В случаях панкреатической недостаточности могут вводиться панкрелипаза и другие продукты панкреатических ферментов, чтобы по меньшей мера частично скорректировать недостаточность ферментов, вызванную различными заболеваниями, влияющими на поджелудочную железу, например, панкреатитом, панкреатэктомией, муковисцидозом и так далее. Применение панкреатических ферментов в терапии недостаточности поджелудочной железы - главная часть лечения больных муковисцидозом. Без этих добавок у пациентов возникает тяжелое нарушение питания. В отсутствие лечения это нарушение питания может угрожать жизни, особенно в случае грудных детей.

Лекарственная субстанция панкрелипаза представляет собой, главным образом, комбинацию трех классов ферментов: липазы, протеазы и амилазы, вместе с их различными кофакторами и коферментами. Эти ферменты естественным образом вырабатываются в поджелудочной железе и важны для переваривания жиров, белков и углеводов. Панкрелипазу обычно получают из свиных поджелудочных желез, хотя могут использоваться и другие источники, например, описанные в патентах США 6051220, 2004/0057944, 2001/0046493 и WO 2006044529, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки. Ферменты катализируют гидролиз жиров до глицерина и жирных кислот, крахмала - до декстрина и сахаров и белка - до аминокислот и их производных.

Панкреатические ферменты проявляют оптимальную активность в близкой к нейтральной или слегка щелочной среде. В среде желудка панкреатические ферменты могут инактивироваться, в результате чего наступает потеря биологической активности. Поэтому вводимые извне ферменты обычно защищают против инактивации в желудке, и они остаются интактными во время перемещения через желудок в двенадцатиперстную кишку. Хотя желательно наносить на панкреатические ферменты покрытие, на рынке также присутствуют препараты без покрытия. Панкреатические липазы наиболее чувствительны к инактивации в желудке, а также являются самыми важными ферментами в лечении нарушения всасывания. Чтобы определить стабильность ферментной композиции, содержащей липазу, обычно мониторируют активность липазы.

После перемещения через желудок ферменты должны высвобождаться в двенадцатиперстной кишке в пределах 5-30 минут, поскольку переваривание панкреатическими ферментами и всасывание метаболитов главным образом происходят в верхнем отделе кишечника, хотя переваривание и всасывание могут иметь место в любом месте ЖКТ. На панкреатические ферменты обычно наносят покрытие из кишечнорастворимого полимера, который защищает ферментную композицию от кислой среды желудка, а затем обеспечивает высвобождение фермента в кишке.

Обычные препараты панкреатических ферментов нестабильны и не обладают сроком годности, типичным для одобренных фармацевтических продуктов для перорального введения. Активность препаратов панкреатических ферментных обычно определяют по активности липазы, которая является одним из ферментов, наиболее чувствительных к потере ферментативной активности во время хранения. У имеющихся в продаже композиций пищеварительных ферментов потеря активности липазы со временем достигает приблизительно 35% или более. Чтобы компенсировать потерю ферментативной активности во время хранения и гарантировать, что продукт имеет заявленную на этикетке активность в конце срока годности, изготовители обычно вводят в лекарственные формы избыток ферментов (от 5 до 60%), и современные требования фармакопеи США для капсул с отсроченным высвобождением панкрелипазы допускают активность панкрелипазы не менее 90% и не более 165% от указанной на этикетке активности липазы.

Практически это означает, что пациенты и врачи, выписывающие лекарства, не могут с точностью оценить дозировку, что на практике ведет к эмпирическому подбору нужной дозировки для каждого нового прописанного препарата. Пациенты с недостаточностью экзокринной функции поджелудочной железы полагаются на эти препараты, которые содержат ферменты, необходимые, чтобы переварить пищу должным образом. Если этикетка содержит неточное заявление об активности конкретного продукта, то пациент подвергается риску получить слишком большую или слишком малую дозу препарата.

Соответственно, было бы желательно получить стабильную композицию пищеварительных ферментов, способную сохранять необходимую активность в течение ожидаемого срока годности ферментного препарата без введения в лекарственную форму избытка действующего вещества.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к стабильным композициям пищеварительных ферментов, а также к лекарственным формам и способам получения стабильных ферментных композиций и лекарственных форм. Конкретнее, настоящее изобретение относится к ферментным композициям с кишечнорастворимым покрытием и лекарственным формам с минимальной потерей активности при типичных условиях хранения.

Один вариант осуществления настоящего изобретения относится к композиции, содержащей по меньшей мере один пищеварительный фермент, где влагосодержание композиции составляет приблизительно 3% или менее.

В другом варианте осуществления композиция по настоящему изобретению содержит по меньшей мере один пищеварительный фермент, где активность воды композиции составляет приблизительно 0,6 или менее.

В другом варианте осуществления композиция по настоящему изобретению содержит по меньшей мере один стабилизированный пищеварительный фермент, где после 6 месяцев ускоренного тестирования стабильности по меньшей мере у одного стабилизированного пищеварительного фермента потеря активности не превышает приблизительно 15%.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к лекарственной форме, такой как таблетка или капсула, заполненной композицией по настоящему изобретению.

Еще в одном варианте осуществления композиция по настоящему изобретению дополнительно содержит по меньшей мере один пищеварительный фермент с нанесенным покрытием, где покрытие содержит кишечнорастворимый полимер и необязательно по меньшей мере одно неорганическое вещество.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к упаковке, содержащий герметичный контейнер, выполненный из водонепроницаемого материала, осушитель и по меньшей мере одну лекарственную форму по настоящему изобретению, где осушитель и по меньшей мере одна лекарственная форма находятся в герметичном контейнере.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения или предупреждения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительного фермента, где способ включает введение композиции по настоящему изобретению млекопитающему, нуждающемуся в этом.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу получения композиции по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления способ включает нанесение покрытия на частицы по меньшей мере одного пищеварительного фермента в атмосфере, имеющей влагосодержание приблизительно 3,6 г воды на кубический метр или менее, где покрытие содержит кишечнорастворимый полимер и по меньшей мере одно неорганическое вещество; в результате образуется множество частиц с отсроченным высвобождением.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Один аспект настоящего изобретения относится к стабилизированной композиции пищеварительных ферментов. Термин «стабилизированный пищеварительный фермент» означает пищеварительный фермент, который сохраняет существенную ферментативную активность после длительного хранения. Термин «пищеварительный фермент» обозначает фермент в пищеварительном тракте, который расщепляет компоненты пищи так, чтобы организм мог их всасывать или абсорбировать.

Неограничивающие классы пищеварительных ферментов, подходящих для применения по настоящему изобретению, включают липазы, амилазы и протеазы. Неограничивающие примеры пищеварительных ферментов включают панкрелипазу (также называемую панкреатином), липазу, колипазу, трипсин, химотрипсин, химотрипсин B, панкреатопептидазу, карбоксипептидазу A, карбоксипептидазу B, гидролазу сложных эфиров глицерина, фосфолипазу, гидролазу сложных эфиров стерола, эластазу, кининогеназу, рибонуклеазу, дезоксирибонуклеазу, -амилазу, папаин, химопапаин, глутеназу, бромелайн, фицин, -амилазу, целлюлазу, -галактозидазу, лактазу, сукразу, изомальтазу и их смеси.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения стабилизированный пищеварительный фермент представляет собой панкреатический фермент. Термин «панкреатический фермент», который используется в данном документе, относится к любому из типов ферментов, присутствующих в панкреатическом секрете, например, амилазе, липазе, протеазе, или их смесям, или к любому экстракту панкреатического происхождения, имеющему ферментативную активность, такому как панкреатин. Панкреатический фермент может быть получен путем извлечения из поджелудочной железы, создан искусственно или получен из источников, отличных от поджелудочной железы, таких как микроорганизмы, растения или иные ткани животных.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения стабилизированный пищеварительный фермент является панкрелипазой. Термины «панкрелипаза» или «панкреатин» обозначают смесь нескольких типов ферментов, включая амилазу, липазу и протеазу. Панкрелипаза поступает в продажу, например, от Nordmark Arzneimittel GmbH или Scientific Protein Laboratories LLC.

В одном варианте осуществления композиций по настоящему изобретению стабилизированный пищеварительный фермент содержит липазу. Термин «липаза» относится к ферменту, который катализирует гидролиз липидов до глицерина и простых жирных кислот.

Примеры липаз, пригодных для настоящего изобретения, включают, без ограничения перечисленными, липазу животных (например, свиную липазу), бактериальную липазу (например, липазу Pseudomonas и/или липазу Burkholderia), грибковую липазу, растительную липазу, рекомбинантную липазу (например, полученную посредством технологии рекомбинантной ДНК в подходящей клетке-хозяине, выбранной из любых бактериальных, дрожжевых, грибковых, растительных клеток-хозяев или клеток-хозяев насекомого или млекопитающего, находящихся в культуре; или рекомбинантные липазы, которые содержат аминокислотную последовательность, гомологичную или по существу идентичную встречающейся в природе последовательности; липазы, кодируемые нуклеиновой кислотой, которая гомологична или по существу идентична встречающейся в природе нуклеиновой кислоте, кодирующей липазу, и так далее), химически модифицированную липазу или их смеси.

В другом варианте осуществления композиций по настоящему изобретению стабилизированный пищеварительный фермент содержит амилазу. Термин «амилаза» относится к гидролизирующим гликозиды ферментам, которые расщепляют крахмал, например, -амилазам, -амилазам, -амилазам, кислым -гликозидазам, амилазам слюны, таким как птиалин, и так далее.

Амилазы, пригодные для применения в композициях по настоящему изобретению, включают, без ограничения перечисленными, животные амилазы, бактериальные амилазы, грибковые амилазы (например, амилаза аспергилл и предпочтительно амилаза Aspergillus oryzae), растительные амилазы, рекомбинантные амилазы (например, полученные посредством технологии рекомбинантной ДНК в подходящей клетке-хозяине, выбранной из любых бактериальных, дрожжевых, грибковых, растительных клеток-хозяев или клеток-хозяев насекомого или млекопитающего, находящихся в культуре; или рекомбинантные амилазы, которые содержат аминокислотную последовательность, гомологичную или по существу идентичную встречающейся в природе последовательности; амилазы, кодируемые нуклеиновой кислотой, которая гомологична или по существу идентична встречающейся в природе нуклеиновой кислоте, кодирующей амилазу, и так далее), химически модифицированные амилазы или их смеси.

В другом варианте осуществления композиций по настоящему изобретению стабилизированный пищеварительный фермент содержит протеазу. Термин «протеаза», в целом, относится к ферментам (например, протеиназы, пептидазы или протеолитические ферменты), которые разрушают пептидные связи между аминокислотами белков. Протеазы, как правило, идентифицируют по их каталитическому типу, например, пептидазы аспарагиновой кислоты, цистеиновые (тиоловые) пептидазы, металлопептидазы, сериновые пептидазы, треониновые пептидазы, щелочные или полущелочные протеазы, нейтральные и пептидазы с неизвестным каталитическим механизмом.

Неограничивающие примеры протеаз, пригодных для применения в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению, включают сериновые протеазы, треониновые протеазы, цистеиновые протеазы, протеазы аспарагиновой кислоты (например, плазмепсин), металлопротеазы, глутаминовые протеазы и так далее; кроме того, протеазы, пригодные для применения в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению, включают, без ограничения перечисленными, животные протеазы, бактериальные протеазы, грибковые протеазы (например, протеаза Aspergillus melleus), растительные протеазы, рекомбинантные протеазы (например, полученные посредством технология рекомбинантной ДНК в подходящей клетке-хозяине, выбранной из любых бактериальных, дрожжевых, грибковых, растительных клеток-хозяев или клеток-хозяев насекомого или млекопитающего, находящихся в культуре; или рекомбинантные протеазы, которые содержат аминокислотную последовательность, гомологичную или по существу идентичную встречающейся в природе последовательности протеаз, кодируемой нуклеиновой кислотой, которая гомологична или по существу идентична встречающейся в природе нуклеиновой кислоте, кодирующей протеазу, и так далее), химически модифицированные протеазы или их смеси.

Композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению могут содержать одну липазу или более (то есть одну липазу или две липазы или более), одну амилазу или более (то есть одну амилазу или две амилазы или более), одну протеазу или более (то есть одну протеазу или две протеазы или более), смеси одной липазы или более с одной амилазой или более, смеси одной липазы или более с одной протеазой или более, смеси одной амилазы или более с одной протеазой или более или смеси одной липазы или более с одной амилазой или более и одной протеазой или более.

В одном варианте осуществления пищеварительный фермент представляет собой экстракт свиной поджелудочной железы, содержащий различные липазы (например, липаза, колипаза, фосфолипаза A2, холестеринэстераза), протеазы (например, трипсин, химотрипсин, карбоксипептидазы A и B, эластаза, кининогеназа, ингибитор трипсина), амилазы и необязательно нуклеазы (рибонуклеаза, дезоксирибонуклеаза). В другом варианте осуществления пищеварительный фермент по существу подобен соку поджелудочной железы человека. Еще в одном варианте осуществления пищеварительный фермент является панкрелипазой, соответствующей фармакопее США. В еще одном варианте осуществления пищеварительный фермент - это панкрелипаза ESP с активностью липазы 69-120 ЕД USP/мг, активностью амилазы 216 ЕД USP/мг или более, активностью протеазы 264 ЕД USP/мг и общей протеазной активностью 264 ЕД USP/мг или более.

Активность липаз в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может быть равна приблизительно 4500-25000 МЕ, например, приблизительно 4500-5500 МЕ, приблизительно 9000-11000 МЕ, приблизительно 13500-16500 МЕ и приблизительно 18000-22000 МЕ. Активность амилаз в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может равняться приблизительно 8100-180000 МЕ, например, приблизительно 8000-45000 МЕ, приблизительно 17000-90000 МЕ, приблизительно 26000-135000 МЕ, приблизительно 35000-180000 МЕ. Активность протеаз в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может составлять приблизительно 8000-134000 МЕ, например, приблизительно 8000-34000 МЕ, 17000-67000 МЕ, 26000-100000 МЕ, 35000-134000 МЕ. В одном варианте осуществления активность липазы находится в диапазоне приблизительно 4500-5500 МЕ, активность амилазы - приблизительно 8000-45000 МЕ и активность протеазы - приблизительно 8000-34000 МЕ. В другом варианте осуществления активность липазы находится в диапазоне приблизительно 9000-11000 МЕ, активность амилазы - приблизительно 17000-90000 МЕ и активность протеазы - приблизительно 17000-67000 МЕ. Еще в одном варианте осуществления активность липазы находится в пределах приблизительно 13500-16500 МЕ, активность амилазы - приблизительно 26000-135000 МЕ и активность протеазы - приблизительно 26000-100000 МЕ. В еще одном варианте осуществления активность липазы находится в границах приблизительно 18000-22000 МЕ, активность амилазы - приблизительно 35000-180000 МЕ и активность протеазы - приблизительно 35000-134000 МЕ.

Соотношение липаза:протеаза:амилаза в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может находиться в пределах от около 1:10:10 до около 10:1:1 или около 1,0:1,0:0,15 (по активности ферментов). Соотношение амилаза/липаза в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может составлять приблизительно 1,8-8,2, например, приблизительно 1,9-8,2 или приблизительно 2,0-8,2. Отношение протеаза/липаза в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может находиться в диапазоне приблизительно 1,8-6,2, например, приблизительно 1,9-6,1 или приблизительно 2,0-6,1.

В другом варианте осуществления активность липазы, протеазы и амилазы может соответствовать приведенной в таблице A, ниже):

Таблица A
Состав	1		2		3		4
Активность, МЕ	мин	макс	мин	макс	мин	макс	мин	макс
Липаза	4500	5500	9000	11000	13500	16500	18000	22000
Амилаза	8100	45000	17100	90000	26100	135000	35100	180000
Протеаза	8100	34000	17100	67000	26100	100000	35100	134000
Соотношение	мин	макс	мин	макс	мин	макс	мин	макс
Амилаза/липаза	1,8	8,2	1,9	8,2	1,9	8,2	2,0	8,2
Протеаза/липаза	1,8	6,2	1,9	6,1	1,9	6,1	2,0	6,1

Общее количество пищеварительных ферментов (по массе) в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению может составлять приблизительно 20-100%, 20-90%, 20-80%, 20-70%, 20-60%, 20-50%, 20-40%, 20-30% или приблизительно 20%, приблизительно 30%, приблизительно 40%, приблизительно 50%, приблизительно 60%, приблизительно 70%, приблизительно 80%, приблизительно 90% или приблизительно 100%. В одном варианте осуществления общее количество пищеварительных ферментов составляет 60-90%. В другом варианте осуществления общее количество пищеварительных ферментов (например, панкрелипазы) составляет приблизительно 68-72%.

В одном варианте осуществления в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению, содержащих по меньшей мере один пищеварительный фермент, влагосодержание составляет приблизительно 3% или менее, приблизительно 2,5% или менее, приблизительно 2% или менее, приблизительно 1,5% или менее или приблизительно 1% или менее, включая все диапазоны и поддиапазоны, подпадающие под данные рамки (то есть любые из приблизительно 2,5-3%, 2-3%, 1,5-3%, 1-3%, 2-2,5%, 1,5-2,5%, 1-2,5%, 1,5-2%, 1-2%, 1-1,5% и так далее). Обнаружено, что при сохранении низкого влагосодержания композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению по существу стабильнее обычных композиций с более высоким влагосодержанием, составляющим, например, более приблизительно 3% или выше.

Термин «влагосодержание», также называемый «содержание воды», означает количество воды, которую содержит композиция. Для композиций, которые не изменяют объем при изменении влагосодержания, влагосодержание можно выразить волюметрически (то есть по объему) как отношение массы влаги к объему сухого вещества. Для композиций, которые изменяют объем при изменении влагосодержания, влагосодержание можно выразить гравиметрически (то есть по массе) как массу воды, удаленной после сушки, на единицу сухой массы образца. Определение влагосодержания можно произвести любым обычным способом, известным в данной области техники. Например, влагосодержание может быть определено химическим титрованием, таким как титрование по Карлу Фишеру, при котором проба растворяется в электрохимической ячейке для титрования. Вода из образца потребляется в ходе электрохимической реакции, момент окончания которой определяется потенциометрически, таким образом, количество воды в образце измеряется непосредственно. Альтернативно, могут использоваться относительно простые термогравиметрические методы, такие как «потеря при сушке» (LoD), в котором масса пробы измеряется до и после контролируемой сушки. Потеря массы после сушки считается потерей влажности. Имеющиеся в продаже анализаторы влажности (например, доступные от Mettler Toledo, Sartorius AG и так далее) также могут использоваться для определения влагосодержания. Влагосодержание композиций или пероральных лекарственных форм по настоящему изобретению может быть измерено любым подходящим способом, известным в данной области техники, например, "потеря при сушке".

В другом варианте осуществления в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению, содержащих по меньшей мере один пищеварительный фермент, активность воды составляет приблизительно 0,6 или менее, приблизительно 0,5 или менее, приблизительно 0,4 или менее, приблизительно 0,3 или менее, приблизительно 0,2 или менее или приблизительно 0,1 или менее, включая все диапазоны и поддиапазоны, подпадающие под данные рамки (то есть любые из приблизительно 0,5-0,6, 0,4-0,6, 0,3-0,6, 0,2-0,6, 0,1-0,6, 0,4-0,5, 0,3-0,5, 0,2-0,5, 0,1-0,5, 0,3-0,4, 0,2-0,4, 0,1-0,4, 0,2-0,3, 0,1-0,3, 0,1-0,2 и так далее). Обнаружено, что при сохранении низкой активности воды композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению по существу стабильнее обычных композиций пищеварительных ферментов с более высокой активностью воды.

Активность воды ("aw") представляет собой относительную доступность воды в веществе. Используемый в данном документе термин «активность воды» определяется как давление пара воды из пробы, разделенное на давление пара чистой воды при той же самой температуре. У чистой дистиллированной воды активность воды точно равна единице. Активность воды зависит от температуры. Таким образом, активность воды изменяется по мере изменения температуры. В настоящем изобретении активность воды измеряется при температуре от приблизительно 0°C до приблизительно 50°C, предпочтительно от приблизительно 10°C до приблизительно 40°C.

Активность воды продукта может быть определена путем измерения относительной влажности воздуха, окружающего пробу в равновесном состоянии. Соответственно, измерение активности воды в пробе обычно выполняется в замкнутом (обычно изолированном) пространстве, где такое равновесие может иметь место. В равновесии активность воды образца и относительная влажность воздуха равны, и поэтому измерение равновесной относительной влажности воздуха в камере служит мерой активности воды пробы. В продаже имеется по меньшей мере два различных типа измерителей активности воды. В одном типе измерителей активности воды используется технология точки росы охлаждаемого зеркала (например, измерители активности воды AquaLab , поставляемые Decagon Devices, Inc), в то время как в других относительная влажность измеряется с помощью датчиков, в которых меняется электрическое сопротивление или емкость (например, измерители активности воды от Rotronic). Активность воды композиций или пероральных лекарственных форм по настоящему изобретению может быть измерена любым подходящим способом, известным в данной области техники.

В другом варианте осуществления после 6 месяцев ускоренного тестирования стабильности у композиций или пероральных лекарственных форм по настоящему изобретению, содержащих по меньшей мере один стабилизированный пищеварительный фермент, потеря ферментной активности составляет не более приблизительно 25%, не более приблизительно 20%, не более приблизительно 15%, не более приблизительно 12%, не более приблизительно 10%, не более приблизительно 8% или не более приблизительно 5%.

Термин «ускоренное тестирование стабильности» или «ускоренное тестирование хранения» относится к методам испытания, используемым, чтобы моделировать влияние относительно длительных условий хранения на активность ферментов; эти методы могут быть выполнены в относительно короткое время. Как известно в данной области техники, ускоренные методы тестирования стабильности являются надежной альтернативой тестированию стабильности в реальном времени и могут точно предсказать срок годности биологических продуктов. Такие условия «ускоренного тестирования стабильности» известны в технике и находятся в соответствии с International Conference for Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use: Stability Testing of New Drug Substances and Products Q1A - эти материалы полностью включены в данный документ посредством ссылки.

Один метод ускоренного тестирования стабильности предусматривает хранение проб композиции пищеварительных ферментов в герметичном пакете из Nialene (нейлон, алюминий, слоистый полиэтилен; GOGLIO SpA, Милан) при 40°C/75% относительной влажности в течение 6 месяцев.

После хранения (или периодически во время хранения) ферментную активность проб можно проверять, используя обычные способы анализа активности пищеварительных ферментов (например, United States Pharmacopoeia, Pancrelipase: Assay for lipase activity; включено в данный документ полностью посредством ссылки).

Композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению также могут дополнительно содержать один стабилизатор и более, которые увеличивают или улучшают стабильность композиций или пероральных лекарственных форм по настоящему изобретению. Неограничивающие примеры подходящих стабилизаторов включают пролин, трегалозу, декстран, мальтозу, сахарозу, маннит, полиолы, силикагель, аминогуанидин, пиридоксамин, безводные соли металлов, такие как гидрокарбонат натрия, оксид магния, оксид кальция, оксид алюминия и их смеси. Влагосодержание у одного стабилизатора или более может составлять приблизительно 3% или менее и/или активность воды - 0,6 или менее.

Неограничивающие примеры подходящих форм трегалозы, которые могут использоваться в композициях или пероральных лекарственных формах по настоящему изобретению, включают трегалозы дигидрат (ТД), аморфную трегалозу (AT), безводную трегалозу (например, безводная аморфная трегалоза [БАТ], безводная кристаллическая трегалоза [БКТ]). Измельченная в порошок безводная трегалоза может содержать БАТ и/или БКТ. Как используется в данном документе, термин «трегалоза» относится к любой физической форме трегалозы, включая безводную, частично гидратированную, полностью гидратированную, а также их смеси и растворы. Термин «безводная трегалоза» относится к любой физической форме трегалозы, содержащей менее 2% воды. Безводные формы трегалозы могут содержать 0-2% воды. Аморфная трегалоза содержит приблизительно 2-9% воды, а дигидрат трегалозы содержит приблизительно 9-10% воды. Безводную трегалозу можно получить, как описано в PCT/GB97/00367, который включен в данный документ полностью посредством ссылки. В одном варианте осуществления композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению содержат один стабилизированный пищеварительный фермент или более и безводную трегалозу.

Количество безводной трегалозы (БАТ или БКТ) в композиции по настоящему изобретению может находиться в пределах приблизительно 5-50%, 5-40%, 5-30%, 5-20%, 5-15%, 5-10%, 7-15% или составлять приблизительно 5%, приблизительно 7%, приблизительно 10%, приблизительно 15% или приблизительно 20%.

Безводная трегалоза может быть включена в композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению в виде порошка. Размер частиц безводного порошка трегалозы может находиться в диапазоне приблизительно 2-2000 мкм.

Композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению содержат один стабилизированный пищеварительный фермент или более и безводную трегалозу, придающие ферментам улучшенную стабильность. Считается, что безводная трегалоза стабилизирует композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению за счет поглощения или связывания влаги из окружающей среды или остаточной влажности, оставшейся после производства или находящейся в самом составе.

В зависимости от предполагаемого назначения и требования к композициям, соотношение по массе стабилизированного пищеварительного фермента к стабилизатору находится в диапазоне от приблизительно 99:1 до 80:20. Стабилизатор может быть включен в композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению путем влажного или сухого смешивания по меньшей мере одного стабилизированного пищеварительного фермента по меньшей мере с одним стабилизатором. В одном варианте осуществления один стабилизированный пищеварительный фермент или более в сухом виде смешивается с одним стабилизатором или более. В другом варианте осуществления один стабилизированный пищеварительный фермент или более во влажном виде смешивается с одним стабилизатором или более.

Помимо стабилизированного пищеварительного фермента и/или стабилизатора(ов) композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению могут дополнительно содержать один фармацевтически приемлемый наполнитель или более. Термин «наполнители» включает другие фармацевтически приемлемые ингредиенты, добавленные к активному компоненту(ам) композиции (например, стабилизированным пищеварительным ферментам), чтобы улучшить обработку, стабильность, вкусовую привлекательность и так далее. Неограничивающие примеры подходящих наполнителей включают фармацевтически приемлемые связующие, стабилизаторы, разрыхлители, смазывающие вещества, глиданты, разбавители и их смеси и так далее. Специалистам в области техники фармацевтических составов будет ясно, что конкретный наполнитель может выполнять в композиции многочисленные функции. Так, например, связующее также может функционировать как разбавитель и так далее. Влагосодержание наполнителей может составлять приблизительно 3% или менее, и/или их активность воды - приблизительно 0,6 или менее.

Неограничивающие примеры подходящих связующих включают крахмалы, сахара (например, лактоза), сахарные спирты (например, ксилит, сорбит, мальтит), целлюлозу (например, микрокристаллическая целлюлоза), модифицированную целлюлозу (например, гидроксипропилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза), альгиновую кислоту, поливинилпирролидон (повидон) и их смеси. Неограничивающие примеры подходящих разрыхлителей включают двухосновный фосфат кальция, дигидрат двухосновного фосфата кальция, трехосновный фосфат кальция, альгиновую кислоту, гидроксипропилцеллюлозу, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, поперечно-сшитую натрийкарбоксиметилцеллюлозу, набухающие ионообменные смолы, альгинаты, формальдегид-казеин, целлюлозу, натрийкроскармеллозу, кросповидон (например, поперечно-сшитый поливинилпирролидон), микрокристаллическую целлюлозу, натрийкарбоксиметилкрахмал, гликолят крахмала натрия, крахмалы (кукурузный крахмал, рисовый крахмал) и их смеси. Неограничивающие примеры подходящих смазывающих веществ включают стеарат кальция, стеарат магния, натрийстеарилфумарат, стеариновую кислоту, стеарат цинка, тальк, воски, Sterotex ^®, Stearowet^® и их смеси. Неограничивающие примеры подходящих глидантов включают коллоидный диоксид кремния, тальк и их смеси. Неограничивающие примеры подходящих разбавителей включают маннит, сахарозу, безводный двухосновный фосфат кальция, безводный дигидрат двухосновного фосфата кальция, трехосновный фосфат кальция, целлюлозу, лактозу, карбонат магния, микрокристаллическую целлюлозу и их смеси. Неограничивающие примеры подходящих стабилизаторов включают трегалозу, пролин, декстран, мальтозу, сахарозу, маннит, полиолы, силикагель, аминогуанидин, пиридоксамин и их смеси.

В одном варианте осуществления разрыхлитель представляет собой кросповидон (например, POLYPLASDONE XL, POLYPLASDONE XL-10). В другом варианте осуществления разрыхлитель представляет собой натрийкроскармеллозу (например, AC-DI-SOL). В другом варианте осуществления разрыхлитель - это гликолят крахмала натрия (например, EXPLOTAB, EXPLOTAB CV). В другом варианте осуществления композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению могут содержать комбинацию разрыхлителей, например, микрокристаллическую целлюлозу и гликолят крахмала натрия или натрийкроскармеллозу и кросповидон.

Количество разрыхлителя может находиться в любом диапазоне, составляющем приблизительно 0,1-30%, 1-30%, 1-25%, 1-20%, 1-15%, 1-10%, 1-5%, 5-10%, 5-15%, 5-20%, 5-25% или 5-30%. В одном варианте осуществления количество разрыхлителя составляет приблизительно 2-4% или приблизительно 2-3%, или приблизительно 2,5%.

Неограничивающие примеры подходящих разбавителей включают микрокристаллическую целлюлозу, крахмал, фосфат кальция, лактозу, сахарозу, маннит, сорбит и их комбинации. В одном варианте осуществления разбавитель является микрокристаллической целлюлозой (например, Avicel). В другом варианте осуществления разбавитель представляет собой крахмал. В другом варианте осуществления разбавитель является лактозой (например, Pharmatol). В другом варианте осуществления композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению могут содержать комбинацию разбавителей, таких как микрокристаллическая целлюлоза, крахмал и лактоза.

Количество разбавителя может находиться в любом диапазоне, составляющем приблизительно 0,1-99%, 1-30%, 1-25%, 1-20%, 1-15%, 1-10%, 1-5%, 5-10%, 5-15%, 5-20%, 5-25% или 5-30%. В одном варианте осуществления количество разбавителя составляет приблизительно 2-5%, 3-5% или приблизительно 4%.

Один или более наполнителей композиций или пероральных лекарственных форм по настоящему изобретению могут функционировать как поглотитель влаги, чтобы дополнительно стабилизировать композицию. Подходящие наполнители, пригодные в качестве осушителей, включают любой фармацевтически приемлемый наполнитель, который прочно связывает воду или снижает активность воды композиции. Например, композиция по настоящему изобретению может содержать приблизительно 1-4% силикагеля или приблизительно 2,5% силикагеля.

Композиции по настоящему изобретению могут быть получены в виде любой подходящей пероральной лекарственной формы. Неограничивающие примеры подходящих лекарственных форм включают таблетки, капсулы и саше. Поскольку определенные пищеварительные ферменты, такие как панкреатические липазы, до высвобождения в двенадцатиперстной кишке должны быть защищены против инактивации в желудке, может быть желательно, чтобы стабилизированные композиции пищеварительных ферментов или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению были сформированы в виде составов с контролируемым или отсроченным высвобождением. Такие составы с контролируемым или отсроченным высвобождением могут включать таблетки или частицы, покрытые кишечнорастворимым покрытием, которое служит для защиты чувствительных к pH пищеварительных ферментов от инактивации в желудке до высвобождения пищеварительных ферментов в двенадцатиперстной кишке. Альтернативно, составы с контролируемым высвобождением могут включать капсулы, заполненные стабилизированными композициями пищеварительных ферментов или пероральными лекарственными формами по настоящему изобретению, где капсула защищает содержимое от инактивации в желудке, при этом высвобождает пищеварительные ферменты в двенадцатиперстную кишку. Однако стабилизированные композиции пищеварительных ферментов или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению неограничены пищеварительными ферментами, восприимчивыми к инактивации в желудке, и, например, могут включать определенные пищеварительные ферменты, которые по природе стабильны в желудочной среде, такие как желудочные липазы, ряд протеаз, включая таковые панкреатического происхождения, и амилазы. Определенные пищеварительные ферменты, полученные или экстрагированные из микроорганизмов, обладают стабильностью или химически модифицированы сшиванием.

Если из композиций по настоящему изобретению формируются таблетки, стабилизированный пищеварительный фермент(ы) может(гут) быть «таблетирован(ы)» (то есть преобразован(ы) в таблетки) с использованием методов, известных в данной области техники, и затем покрыты кишечнорастворимым покрытием, опять с использованием методов, известных в данной области техники.

Если из композиций по настоящему изобретению формируются капсулы, содержимое капсулы может быть получено с использованием методов, известных в данной области техники. Например, стабилизированная композиция пищеварительных ферментов может быть получена в форме частиц или таблеток, подходящих для инкорпорации в капсулу.

Термин «частицы», как используется в данном документе, включает вещества в виде от тонких порошков (с диаметром частиц в пределах приблизительно 1 мкм) до пеллет, имеющих диаметр приблизительно 5 мм.

Из стабилизированной композиции пищеварительных ферментов также могут быть получены частицы с покрытием, где покрытие содержит кишечнорастворимый полимер. Термин «кишечнорастворимый полимер» означает полимер, который защищает пищеварительные ферменты от содержимого желудка, например, полимер, который стабилен при кислом pH, но может быстро разрушаться при более высоком pH, или полимер, чья скорость гидратации или эрозии достаточно медленная, чтобы гарантировать, что контакт содержимого желудка с пищеварительными ферментами будет относительно незначителен в то время, когда они будут находиться в желудке, в противоположность остальным отделам ЖКТ. Неограничивающие примеры кишечнорастворимых полимеров включают известные в данной области техники, такие как модифицированные или немодифицированные природные полимеры, например ацетатфталат целлюлозы, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетатсукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы и шеллак; или синтетические полимеры, например акриловые полимеры или сополимеры, или полимеры и сополимеры метакриловой кислоты, сополимеры метилметакрилата и сополимеры метакриловой кислоты/метилметакрилата.

Кишечнорастворимое полимерное покрытие может быть синтетическим полимером, необязательно включающим неорганическое вещество, такое как подщелачивающее средство. Полученные в результате частицы с покрытием представляют собой шарики, содержащие ядро, включающее стабилизированный пищеварительный фермент(ы), и кишечнорастворимое покрытие, инкапсулирующее ядро. Из частиц стабилизированного пищеварительного фермента с нанесенным на них покрытием могут быть получены таблетки или капсулы.

Кишечнорастворимый полимер и по меньшей мере одно неорганическое вещество придают покрытию по настоящему изобретению кишечнорастворимые свойства. Таким образом, при использовании в качестве лекарственного препарата покрытие будет действовать как барьер, защищая препарат от кислой среды желудка, и по существу предотвращать высвобождение препарата прежде, чем он достигнет тонкой кишки (то есть высвобождение фермента в желудке составит менее приблизительно 10-20% общего количества фермента в композиции).

Неорганическое вещество может включать, например, подщелачивающее средство. Неограничивающие примеры подщелачивающих средств включают диоксид кремния, соли натрия, соли кальция, соли магния, соли алюминия, гидроксиды алюминия, гидроксиды кальция, гидроксиды магния, тальк и их комбинации. В одном варианте осуществления подщелачивающее средство является тальком.

В зависимости от предполагаемого назначения композиции соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества может находиться в диапазоне от приблизительно 10:1 до приблизительно 1:60 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 8:1 до приблизительно 1:50 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 6:1 до приблизительно 1:40 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 5:1 до приблизительно 1:30 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 4:1 до приблизительно 1:25 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 4:1 до приблизительно 1:9 по массе. В другом варианте осуществления соотношение кишечнорастворимого полимера и по меньшей мере одного неорганического вещества колеблется от приблизительно 10:4 до приблизительно 10:7 по массе.

В одном варианте осуществления композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению содержат частицы стабилизированного пищеварительного фермента, покрытые кишечнорастворимым покрытием, которое содержит кишечнорастворимый полимер и неорганическое вещество, например тальк. В конкретном варианте осуществления неорганическое вещество кишечнорастворимого покрытия составляет приблизительно 1-10 мас.% от общей массы частиц. В другом варианте осуществления неорганическое вещество содержит приблизительно 3, приблизительно 5, приблизительно 7 или приблизительно 10 мас.% частиц. В других вариантах осуществления неорганическое вещество является подщелачивающим средством и составляет приблизительно 20-60% сухой массы покрытия. В других вариантах осуществления подщелачивающее средство составляет приблизительно 25%, приблизительно 30%, приблизительно 35%, приблизительно 40%, приблизительно 45%, приблизительно 50% или приблизительно 55% сухой массы покрытия (включая все диапазоны, поддиапазоны и значения, подпадающие под данные рамки). В конкретном варианте осуществления подщелачивающее средство представляет собой тальк. В другом конкретном варианте осуществления сухое покрытие частиц содержит приблизительно 35% талька.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения покрытие дополнительно содержит пластификатор. Примеры подходящих пластификаторов включают, без ограничения перечисленными, триацетин, трибутилцитрат, триэтилцитрат, ацетил-три-н-бутилцитрат, диэтилфталат, дибутилсебацинат, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, касторовое масло, ацетилированный моноглицерид, ацетилированный диглицерид и их смеси.

Лекарственные формы по настоящему изобретению могут быть капсулами, содержащими композицию по настоящему изобретению (например, частицы с контролируемым высвобождением композиции стабилизированных пищеварительных ферментов, покрытые кишечнорастворимым полимером и подщелачивающим средством). Сами капсулы могут состоять из любого обычного поддающегося биологическому разложению вещества, известного в данной области техники, например желатина, полисахаридов, таких как пуллулан, или модифицированных целлюлозных материалов, например гидроксипропилметилцеллюлозы. Чтобы улучшить стабильность стабилизированных пищеварительных ферментов, капсула может быть высушена до заполнения или может быть выбрана капсула, состоящая из материала с низким влагосодержанием. В одном варианте осуществления лекарственной формы по настоящему изобретению капсула состоит из гидроксипропилметилцеллюлозы. В другом варианте осуществления лекарственной формы по настоящему изобретению капсула состоит из гидроксипропилметилцеллюлозы, имеющей содержание воды приблизительно 6% или менее, например, любое содержание воды, составляющее около 4% или менее, 2% или менее или 2-6%, или 4-6%. В другом варианте осуществления капсула состоит из гидроксипропилметилцеллюлозы, имеющей содержание воды менее приблизительно 2%.

Лекарственные формы по настоящему изобретению могут содержать один пищеварительный фермент или смеси пищеварительных ферментов. Если стабилизированная композиция пищеварительных ферментов сформирована в виде частиц с кишечнорастворимым покрытием, каждая частица с покрытием может содержать ядро, содержащее один пищеварительный фермент или смеси пищеварительных ферментов. Лекарственная форма также может содержать частицы, имеющие покрытие, каждая из которых имеет номинально один и тот же состав, или лекарственная форма может содержать смеси различных видов частиц с покрытием. Например, лекарственная форма может быть капсулой, заполненной покрытыми частицами, где у каждой из частиц с покрытием есть ядро, содержащее панкрелипазу. Альтернативно, лекарственная форма может быть капсулой, заполненной частицами с покрытием, где у некоторых из частиц с покрытием есть ядро, содержащее панкрелипазу, в то время как у других частиц с покрытием есть ядра, содержащие другую липазу или протеазы, или амилазы. Чтобы обеспечить желаемое терапевтическое влияние, может использоваться любая подходящая комбинация частиц с покрытием, состоящих из различных композиций.

Кроме того, если лекарственные формы по настоящему изобретению состоят из покрытых частиц стабилизированных пищеварительных ферментов, каждая отдельная частица может иметь одну и ту же композицию покрытия или может содержать смеси частиц, у некоторых из которых композиция покрытия отличается. Любая подходящая комбинация покрытия композиций может использоваться, чтобы обеспечить желаемый тип контролируемого высвобождения или терапевтический эффект.

Ядра частиц с покрытием могут иметь любой подходящий размер или форму частиц. Например, покрытые частицы могут быть в форме порошка с диапазоном размера частиц приблизительно 50-5000 мкм или могут быть в форме «мини-таблеток» с номинальным диаметром частицы в пределах приблизительно 2-5 мм. Для других применений ядра частиц с покрытием могут быть «микротаблетками», у которых номинальный диаметр частиц составляет менее приблизительно 2 мм, например, приблизительно 1-2 мм.

В одном варианте осуществления композиции или пероральные лекарственные формы по настоящему изобретению могут содержать множество покрытых частиц пищеварительного фермента (например, панкрелипазы). Частицы пищеварительных ферментов могут содержать пищеварительный фермент, по меньшей мере один разрыхлитель, по меньшей мере одно полимерное связующее или разбавитель и необязательно по меньшей мере один пластификатор, необязательно по меньшей мере один глидант и необязательно по меньшей мере одно смазывающее вещество. В одном варианте осуществления частицы пищеварительных ферментов могут содержать приблизительно 60-90% пищеварительного фермента, приблизительно 1-4% по меньшей мере одного разрыхлителя, приблизительно 2-6% по меньшей мере одного полимерного связующего или разбавителя и необязательно приблизительно 0,5-1,0% по меньшей мере одного пластификатора, необязательно приблизительно 0,2-0,6% по меньшей мере одного глиданта, и необязательно приблизительно 0,2-0,6% по меньшей мере одного смазывающего вещества. Например, частицы пищеварительных ферментов могут содержать приблизительно 60-90% панкрелипазы, приблизительно 1-4% натрия кроскармеллозы, приблизительно 0,5-1,0% гидрогенизированного касторового масла, приблизительно 0,2-0,6% коллоидного диоксида кремния, приблизительно 2-6% микрокристаллической целлюлозы и приблизительно 0,2-0,6% стеарата магния. Покрытие может содержать по меньшей мере один кишечнорастворимый полимер, приблизительно 4-10% по меньшей мере одного подщелачивающего средства (в расчете на общую массу частиц) и необязательно по меньшей мере один пластификатор. В одном варианте осуществления покрытие может содержать приблизительно 10-20% по меньшей мере одного кишечнорастворимого полимера, приблизительно 4-10% по меньшей мере одного подщелачивающего средства и приблизительно 1-2% по меньшей мере одного пластификатора (в расчете на общую массу частиц). Например, покрытие может содержать приблизительно 10-20% фталата гидроксипропилметилцеллюлозы, приблизительно 4-10% талька и приблизительно 1-2% триэтилцитрата (в расчете на общую массу частиц). Затем из множества покрытых частиц пищеварительных ферментов может быть сформирована таблетка, или этими частицами заполнена капсула. В одном варианте осуществления капсула содержит гидроксипропилметилцеллюлозу.

Композиции по настоящему изобретению и лекарственные формы, содержащие композиции по настоящему изобретению, имеют улучшенную стабильность по сравнению с обычными композициями и лекарственными формами пищеварительных ферментов (например, панкрелипазы). Следовательно, лекарственные формы по настоящему изобретению не требуют «переполнения» (т.е. являются формами «с нулевым переполнением») - введения избытка действующего вещества, как обычные лекарственные формы пищеварительных ферментов, чтобы доставить клинически применимое количество пищеварительного фермента пациенту, нуждающемуся в этом. Обычные композиции пищеварительных ферментов и лекарственные формы требуют избытка действующего вещества, достигающего 65% (то есть содержат 165% необходимой дозы пищеварительного фермента), чтобы компенсировать низкую стабильность ферментов. В результате создается неуверенность относительно дозы, доставленной обычными композициями пищеварительных ферментов. Таким образом, обычные «переполненные» лекарственные формы вскоре после своего изготовления могут доставлять более высокие, чем предполагалось, дозы пищеварительных ферментов, но с течением времени ферментная активность может упасть ниже ожидаемой дозы.

В одном варианте осуществления лекарственные формы, содержащие композиции по настоящему изобретению, по существу являются формами «с нулевым переполнением». Термин "по существу с нулевым переполнением" означает композиции по настоящему изобретению, в которых уровень дополнительной пищеварительной ферментной активности (то есть количество дополнительной ферментной активности, превышающее предполагаемую дозу) меньше или равно приблизительно 10%, то есть составляет приблизительно 10%, менее приблизительно 10%, меньше или равно приблизительно 9%, меньше или равно приблизительно 8%, меньше или равно приблизительно 7%, меньше или равно приблизительно 6%, меньше или равно приблизительно 5%, меньше или равно приблизительно 4%, меньше или равно приблизительно 3%, меньше или равно приблизительно 2%, меньше или равно приблизительно 1% или приблизительно 0%. Так, например, если предполагаемая доза равна приблизительно 4500 МЕ липазы, по существу «непереполненные» композиции по настоящему изобретению могут содержать менее или равно приблизительно 4950 МЕ липазы (то есть менее или равно 110% 4500 МЕ липазы). В другом варианте осуществления «непереполненная» лекарственная форма содержит 4500 МЕ липазы.

Композиции или лекарственные формы (например, таблетки или капсулы) по настоящему изобретению могут храниться в любой подходящей упаковке. Например, упаковка может быть стеклянным или пластмассовым сосудом с нарезной или плотной пробкой. Альтернативно, композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению могут быть упакованы в виде дозированной лекарственной формы в «блистерных упаковках». Заявители обнаружили, что повышенная стабильность композиций или лекарственных форм пищеварительных ферментов может быть обеспечена с помощью влагонепроницаемого изолирующего слоя и/или влагонепроницаемой упаковки. Неограничивающие примеры подходящих влагонепроницаемых упаковок включают стеклянные флаконы, пластмассовые флаконы, содержащие гидроизолирующие смолы или покрытия, алюминированную пластиковую упаковку (например, Майлар) и так далее. Термин «влагонепроницаемый» относится к упаковке, у которой проницаемость для воды составляет менее 0,5 мг воды на кубический сантиметр объема контейнера в год.

Контейнеры (например, бутылки) могут быть закрыты любой подходящей крышкой, особенно крышками, которые минимизируют попадание влаги во время хранения. Например, композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению могут быть закрыты такими крышками, как Saf-Cap III-A (Van Blarcom Closures, Inc.), которая содержит HS 035 Heat Seal/20F (SANCAP Liner Technology, Inc.) в виде герметизирующей прокладки.

Чтобы гарантировать целостность упаковки и минимизировать проникновение влаги во время хранения, герметичные упаковки, содержащие композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению, могут быть испытаны на герметичность после расфасовки композиции или лекарственной формы по настоящему изобретению и герметизации упаковки. Например, герметичные упаковки могут быть проверены путем наложения контролируемого вакуума на крышку и обнаружения снижения вакуума со временем. Подходящее оборудование для проверки на герметичность включает производимое Bonfiglioli (например, модель LF-01-PKV или модель PKV 516).

Упаковки, содержащие композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению, также могут содержать осушитель (то есть вещество, которое абсорбирует или адсорбирует воду либо реагирует с ней), способный снижать влажность внутри упаковки, например, капсулу осушителя, способного удалять влажность из атмосферы, запечатанной внутри упаковки. Неограничивающие примеры подходящих поглотителей влаги, которые могут быть помещены в таких упаковках, включают цеолиты (например, молекулярные сита, например, молекулярные сита 4Å), глину (например, монтмориллонит), силикагель, активированный уголь или их комбинации. В одном варианте осуществления осушитель содержит молекулярные сита.

Кроме того, обычной практикой является такая, когда при упаковке пероральных фармацевтических доз к ним добавляют «пробку» из целлюлозного полимера, такого как вата, в верхнюю часть контейнера, чтобы заполнить пустое пространство наверху контейнера, тем самым минимизируя движение содержимого. Целлюлозные полимеры несколько гигроскопичны и могут действовать как «резервуар» влажности в упаковке. Соответственно, в одном варианте осуществления упаковок по настоящему изобретению «пробка» из целлюлозного полимера или ваты в упаковке отсутствует. В другом варианте осуществления упаковок по настоящему изобретению упаковки лишены «пробки» из целлюлозного полимера или ваты и содержат осушитель.

Композиции по настоящему изобретению можно приготовить, используя обычные методы, но модифицированные, как указано в данном документе, чтобы обеспечить влагосодержание приблизительно 3% или менее, активность воды приблизительно 0,6 или менее или получить стабилизированные композиции пищеварительных ферментов, которые теряют активность не больше, чем приблизительно на 15% после 3 месяцев ускоренного тестирования стабильности. Например, на частицы пищеварительных ферментов (например, панкрелипазы) может быть нанесено покрытие в аппарате с кипящим слоем, где аппарат оборудован осушителем. В одном варианте осуществления аппарат для нанесения покрытия действует в атмосфере с содержанием воды приблизительно 4 г/м ³ или менее, приблизительно 3,5 г/м³ или менее, приблизительно 3 г/м³ или менее, приблизительно 2,5 г/м³ или менее, приблизительно 2,0 г/м³ или менее, приблизительно 1,5 г/м³ или менее, приблизительно 1,0 г/м³ или менее или приблизительно 0,5 г/м ³ или менее, включая все диапазоны и поддиапазоны, подпадающие под данные рамки. Атмосфера, в которой наносится покрытие, может содержать обезвоженный воздух, обезвоженный азот или другой обезвоженный инертный газ.

Покрытие может быть нанесено в виде раствора кишечнорастворимого полимера (и необязательно взвешенного неорганического вещества) в органическом растворителе, таком как спирт (например, этанол), кетон (например, ацетон), метиленхлорид или их смеси (например, смеси этанола и ацетона).

Композиции по настоящему изобретению обеспечивают улучшенное всасывание жиров, белков и углеводов у пациентов, страдающих от состояний или расстройств, связанных с недостаточностью пищеварительных ферментов. В одном варианте осуществления композиции по изобретению, а именно композиции панкрелипазы или панкреатина, могут использоваться для лечения экзокринной панкреатической недостаточности (ЭПН), связанной с различными заболеваниями. Такие заболевания включают, без ограничения перечисленным, муковисцидоз. В некоторых вариантах осуществления такие композиции могут по существу облегчить мальабсорбцию (например, жиров), связанную с ЭПН, у больных муковисцидозом и других пациентов, включая педиатрических пациентов. В некоторых вариантах осуществления такие композиции могут увеличить у больных муковисцидозом коэффициент всасывания жиров по меньшей мере до приблизительно 85% или более. Такие результаты можно получить при одновременном введении с другими средствами или композициями, или можно получить без совместного введения с другими средствами. В одном варианте осуществления такие коэффициенты всасывания жиров достигаются без совместного введения ингибиторов протонного насоса, таких как Prilosec^®, Nexium^® и т.п.

У пациентов, у которых диагностирован низкий уровень pH ЖКТ (например, pH ЖКТ менее приблизительно 4), улучшенные результаты могут быть получены путем введения композиций или лекарственных форм по настоящему изобретению вместе с ингибиторами протонного насоса, антацидами и другими лекарственными средствами, которые увеличивают pH ЖКТ. Например, композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению можно вводить в отдельности от ингибиторов протонного насоса, антацида или других лекарственных средств (до, одновременно или после введения ингибитора протонного насоса, антацида и так далее). Альтернативно, ингибитор протонного насоса, антацид или другое лекарственное средство может быть объединено с композицией панкреатина по настоящему изобретению в виде единой лекарственной формы.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительных ферментов, включающему введение композиции по настоящему изобретению млекопитающему, нуждающемуся в этом. В одном варианте осуществления млекопитающее является человеком.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительных ферментов, включающему введение композиции или лекарственной формы по настоящему изобретению млекопитающему, нуждающемуся в этом, где композиция или лекарственная форма по настоящему изобретению содержит, помимо по меньшей мере одного пищеварительного фермента, ингибитор протонного насоса, антацид или другое лекарственное средство, которое повышает pH ЖКТ. Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения расстройства, связанного с недостаточностью пищеварительных ферментов, включающему введение композиции или лекарственной формы по настоящему изобретению в комбинации с лекарственной формой, содержащей ингибитор протонного насоса, антацид или другой лекарственный препарат, который увеличивает pH ЖКТ.

Расстройства, которые можно лечить композицией или лекарственной формой по настоящему изобретению, включают состояния, при которых пищеварительные ферменты у пациента отсутствуют или имеются в очень малом количестве или при которых пациенты нуждаются в дополнительном введении пищеварительных ферментов. Например, такие состояния могут включать муковисцидоз, хронический панкреатит, другие заболевания поджелудочной железы (например, наследственный, посттравматический панкреатит и панкреатит аллотрансплантата, гемохроматоз, синдром Швахмана, липоматоз или гиперпаратиреоз), побочные эффекты рака или его лечения, побочные эффекты хирургии (например, шунтирования ЖКТ, процедуры Уиппля, тотальной панкреатэктомии и так далее) или другие состояния, при которых панкреатические ферменты не могут достичь кишки, плохое смешивание (например, гастрэктомия по Бильроту II, другие типы шунтирования ЖКТ, гастринома и так далее), побочные эффекты фармакотерапии, такой как лечение метформином или лекарственными средствами для лечения симптомов ВИЧ и аутоиммунных заболеваний, таких как диабет, при котором функция поджелудочной железы может оказаться под угрозой, обструкцию (например, литиаз желчного протока и протока поджелудочной железы, опухоли поджелудочной железы и двенадцатиперстной кишки, стеноз протока), нарушение всасывания, связанное с целиакией, аллергией на пищу и старением.

Количество композиции или лекарственной формы по настоящему изобретению, вводимой млекопитающим (например, людям) в сутки, зависит от ожидаемого результата. Квалифицированный врач будет способен назначить необходимую дозу на основании диагноза состояния, которое будет подвергаться лечению.

Например, для лечения недостаточности пищеварительных ферментов у людей (например, с муковисцидозом), стартовая доза должна составлять 500-1000 единиц липазы/кг/прием пищи, а суммарная доза не должна превышать 2500 единиц липазы/кг/прием пищи или 4000 единиц липазы/грамм жира/прием пищи по рекомендации FDA США. Как правило, пациент должен получить по меньшей мере 4 лекарственные формы в сутки, предпочтительно вместе с пищей.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

МТ (мини-таблетки) панкрелипазы являются смесью сырья панкрелипазы (например, полученной от Nordmark) и наполнителей, таблетированной с использованием круглых скошенных пуансонов диаметром 2 мм. Физические особенности МТ панкрелипазы перед нанесением покрытия приведены ниже в таблице 1.

Таблица 1
Диаметр	2,0 мм
Масса (10 МТ)	0,074-0,086 г
Толщина (среднее значение для 10 МТ)	2,2±0,2 мм
Твердость	0,5-2,0 Kp
Хрупкость* (20 г МТ, 30 минут при 25 об/мин)	0,0-2,5%
*Метод фармакопеи США

На МТ панкрелипазы был нанесен состав покрытия (таблица 2) с применением аппарата Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованного осушителем Munters ML 1350 для участвующего в процессе воздушного потока. Процесс нанесения покрытия был выполнен при трех разных значениях влагосодержании потока воздуха, участвовавшего в процессе (таблица 3). Для каждой партии масса покрытия составляла приблизительно 15% от общей массы частиц с покрытием. Композиция частиц с покрытием для каждого набора условий процесса была приблизительно одинаковой (таблица 4), и покрытие выглядело однородным, гладким и гомогенным после микроскопического исследования.

Таблица 2
Вещество	% (мас./мас.)
Гипромеллозы фталат (HP55)	10,19
Триэтилцитрат	1,02
Тальк	1,02
Этанол 96%	79,78
Ацетон	7,99
	100,00

Таблица 3
Партия	Влагосодержание участвовавшего в процессе воздуха, г/м3
P9A165	8,8
P9A167	0,4
P9A170	3,6

Таблица 4
Вещество	Композиция покрытия, % (мас./мас.)
МТ панкрелипазы	85,00
Гипромеллозы фталат (HP55)	12,50
Триэтилцитрат	1,25
Тальк	1,25
	100,00

В трех наборах проб (то есть P9A165, P9A167 и P9A170) остаточное влагосодержание соответствовало влагосодержанию потока воздуха, участвовавшего в процессе (таблица 4).

Таблица 5
Партия	Потеря при сушке, %
P9A165	2,8
P9A167	1,1
P9A170	1,7

Влияние остаточной влажности на потерю активности со временем было оценено в условиях ускоренного тестирования стабильности следующим образом.

Твердые желатиновые капсулы (доза липазы 20000 МЕ) заполнили тремя партиями МТ панкрелипазы с покрытием, описанных выше, и хранили при 40°C и 75% относительной влажности в герметичных пакетах из Nialene.

Активность липазы оценили через 15 дней и через 4 месяца хранения. Результаты приведены в таблице 6.

Таблица 6
		Начало отсчета	15 дней	4 месяца
Партия	Потеря при сушке	Липаза, МЕ/мг
P9A165	(2,8%)	62,5	46 (активность -26%)	33,6 (активность -46%)
P9A167	(1,1%)	64,5	53 (активность -18%)	46,2 (активность -28%)
P9A170	(1,7%)	63,8	53 (активность -17%)	44,8 (активность -30%)

Из результатов таблицы 6 следует, что улучшенная стабильность свойственна композициям, имеющим влагосодержание менее приблизительно 2%. Альтернативно, улучшенная стабильность обеспечивается при нанесении покрытия в атмосфере с влагосодержанием менее 3,6-0,4 г/м³.

Пример 2

На МТ панкрелипазы нанесли две композиции покрытия, содержащие различное количество талька (таблица 7).

Таблица 7
	Состав, % (масс./масс.)
Вещество	Низкое содержание талька	Высокое содержание талька
Гипромеллозы фталат (HP55)	10,190	5,825
Триэтилцитрат (ТЭЦ)	1,020	0,580
Тальк	1,020	5,825
Этанол 96%	79,780	79,780
Ацетон	7,990	7,990
	100,000	100,000
Отношение HP:ТЭЦ:тальк	10:1:1	10:1:10
Общее содержание твердых веществ	12,23%	12,23%

Испытания покрытий выполнили, используя аппарат Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованный осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить проведение процесса при низкой влажности воздуха (то есть ниже 1 г/м³). Масса покрытия составляла приблизительно 15%. Теоретический состав этих двух партий указан в таблице 8. Микроскопическое исследование показало, что покрытие на всех пробах было гладким и гомогенным. Остаточное влагосодержание измерили по потере при сушке (таблица 9).

Таблица 8
Партия	P9A230	P9A240
Вещество	Низкое содержание талька	Высокое содержание талька
	Состав, % (мас./мас.)
МТ панкрелипазы	85,000	85,000
Гипромеллозы фталат (HP55)	12,500	7,143
Триэтилцитрат	1,250	0,714
Тальк	1,250	7,143
	100,000	100,000

Таблица 9
Партия	Потеря при сушке, %
P9A230	0,9
P9A240	0,9

Влияние различных композиций покрытия на потерю активности со временем оценили при условиях ускоренного тестирования стабильности следующим образом.

Твердые желатиновые капсулы (доза липазы 20000 МЕ) заполнили двумя партиями МТ панкрелипазы с покрытием, описанных выше, и хранили при 40°C и 75% относительной влажности в герметичных пакетах из Nialene.

Активность липазы проверяли после 1, 2 и 3 месяцев хранения, как показано в таблице 10.

Таблица 10
	Начало отсчета времени	1 месяц	2 месяца	3 месяца
Партия	Липаза (МЕ/мг)
P9A230 Низкое содержание талька	64,5	57,6 (активность -11%)	49,6 (активность -23%)	52,3 (активность -19%)
P9A240 Высокое содержание талька	65,3	58,2 (активность -11%)	60,62 (активность -7%)	59,6 (активность -9%)

Результаты показали, что потеря активности после трех месяцев хранения при условиях ускоренного тестирования стабильности значительно ниже для проб, покрытие которых имеет высокое содержание талька (партия P9A240). Соответственно, увеличение концентрации талька приблизительно с 1% до приблизительно 7% приводит к статистически значимым улучшениям стабильности ферментов.

Пример 3

Влияние растворителя покрытия композиции оценивали с помощью получения композиций покрытия с «высоким содержанием талька» и «низким содержанием талька», подобных описанным в таблице 7, за исключением того, что растворитель этанол (96% этанол, 4% вода)/ацетон был заменен 100% ацетоном (таблица 11).

Таблица 11
	Состав, % (масс./масс.)
Вещество	Низкое содержание талька	Высокое содержание талька
Гипромеллозы фталат (HP55)	10,190	5,825
Триэтилцитрат (ТЭЦ)	1,020	0,580
Тальк	1,020	5,825
Ацетон	87,770	87,770
	100,000	100,000
Отношение HP:ТЭЦ:тальк	10:1:1	10:1:10
Общее содержание твердых веществ	12,23%	12,23%

Испытания покрытий выполнили, используя аппарат Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованный осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить проведение процесса при низкой влажности воздуха (то есть ниже 1 г/м³). Масса покрытия составляла приблизительно 15%. Теоретический состав этих двух партий приведен в таблице 12.

Таблица 12
Партия	P9A318 Низкое содержание талька	P9A352 Высокое содержание талька
Вещество	Состав, % (масс./масс.)
МТ панкрелипазы	85,000	85,000
Гипромеллозы фталат (HP55)	12,500	7,143
Триэтилцитрат	1,250	0,714
Тальк	1,250	7,143
	100,000	100,000

Партия P9A318 соответствовала спецификациям для коммерческих продуктов, а партия P9A352 не прошла тест на устойчивость в ЖКТ. Микроскопия показала, что пленочное покрытие партии P9A352 не было столь гладким и гомогенным как у других проб с покрытием, вероятно, из-за более высокой скорости испарения ацетона по сравнению со смесью этанол/ацетон, использованной в предыдущих пробах, и высокой концентрации талька в покрытии.

Партию P9A318 затем оценили при условиях ускоренного тестирования стабильности следующим образом.

Твердые желатиновые капсулы (доза липазы 20000 МЕ) были приготовлены и хранились при 40°C и 75% относительной влажности в герметичных пакетах из Nialene. Активность липазы измерили через 1, 2 и 3 месяца хранения, как показано в таблице 13.

Таблица 13
	Начало отсчета времени	1 месяц	2 месяца	3 месяца
Партия	Липаза (МЕ/мг)
P9A318 Низкое содержание талька	63,6	59,5 (активность -6%)	60,4 (активность -5%)	55,4 (активность -13%)

Стабильность партии P9A318 значительно улучшилась по сравнению со стабильностью партии P9A230, которая была приготовлена с подобным покрытием при подобных состояниях покрытия (таблица 14). Поэтому представляется, что замена в составе покрытия 96% этанола ацетоном обеспечивает значительно более низкую потерю ферментной активности со временем.

Таблица 14
Ускоренное тестирование стабильности при 40°C+75% относительной влажности	1 месяц	2 месяца	3 месяца
Партия	HP:ТЭЦ:тальк	Содержание талька	Растворитель	Липаза (потеря активности)
P9A230	10:1:1	Низкое	Этанол/ацетон	-11%	-23%	-19%
P9A240	10:1:10	Высокое	Этанол/ацетон	-11%	-7%	-9%
P9A318	10:1:1	Низкое	Ацетон	-6%	-5%	-13%

Пример 4

Капсулы из желатина и ГПМЦ (гидроксипропилметилцеллюлоза) заполнили идентичными композициями липазы с покрытием. Содержание воды в желатиновых капсулах составило приблизительно 14%, в капсулах ГПМЦ - приблизительно 4%. Кроме того, один набор капсул ГПМЦ высушили до влажности менее 2%. Все пробы подвергли ускоренному тестированию стабильности (40°C и 75% относительная влажность); пробы были запаяны в пакеты из Nialene, и активность липазы проверяли через 15, 30 и 90 дней. Результаты приведены ниже в таблицах 15-17.

1) Капсулы из ГПМЦ против желатиновых

Таблица 15
	Партия P200450287
	Потеря активности липазы, %
Время	Желатиновые капсулы	ГПМЦ-капсулы (невысушенные)
15 дней	-12%	-3%
30 дней	-21%	-13%

	Таблица 16
	Партия P200450614
	Потеря активности липазы, %
Время	Желатиновые капсулы	ГПМЦ-капсулы (высушенные)
30 дней	-11	-1

	Таблица 17
	Партия P200450653
	Потеря активности липазы, %
Время	Желатиновые капсулы	ГПМЦ-капсулы (невысушенные)
30 дней	-14	-8
90 дней	-32	-18

Как показано в таблицах 15-17, композиции липазы в ГПМЦ-капсулах сохраняли значительно более высокую активность липазы после хранения в течение 15, 30 и 90 дней при ускоренном тестировании стабильности, и высушенные ГПМЦ-капсулы обеспечивают лучшую стабильность, чем капсулы с равновесным уровнем влажности.

Пример 5

Капсулы из желатина и гидроксипропилметилцеллюлозы заполнили мини-таблетками из композиций липазы с покрытием. Покрытие для композиций желатиновых капсул (P200050) содержало приблизительно 10% талька, в то время как покрытие для композиций капсул из гидроксипропилметилцеллюлозы (P200550) содержало приблизительно 33% талька. В остальных отношениях композиции покрытия были идентичны. В следующей таблице 18 сравниваются уровни разложения, наблюдаемые после хранения при условиях ускоренного тестирования стабильности при разном влагосодержании композиций. Как показано в таблице 18, более высокая активность липазы коррелирует с более низкой влажностью композиции. Кроме того, композиции, которыми заполнили ГПМЦ-капсулы, более стабильны чем композиции, которыми заполнили желатиновые капсулы.

Таблица 18
ГПМЦ		% активности	Потеря при сушке, %
		Месяц 40°C/75% относит. влажности	Месяц 40°C/75% относит. влажности
Партия		0	1	3	6	0	1	3	6
P200550	503	100	100	105	101	1,6	1,7	1,6	1,5
P200550	865	100	96	101	102	1,7	2,1	1,6	1,8
P200550	500	100	102	101	98	0,8	1,9	1,7	2
P200550	861	100	97	103	99	1,5	1,7	2,0	1,4
P200550	502	100	100	99	98	0,4	1,4	2,3	2,0
P200550	859	100	103	103	97	1,1	0,7	1,9	1,3
Среднее		100	100	102	99	1,2	1,6	1,9	1,7
Желатин		% активности	Потеря при сушке, %
		Месяц 40°C/75% относит. влажности	Месяц 40°C/75% относит. влажности
Партия		0	1	3	6	0	1	3	6
P200050	981	100	90	92	81	2,9	3,0	3,0	2,8
P200050	975	100	89	79	66	2,7	3,2	3,1	2,8
P200050	977	100	96	93	87	3,2	3,4	3,2	2,9
Среднее		100	92,5	86	77	3,0	3,3	3,2	2,9

Пример 6

Влияние хранения капсул, содержащих композиции липазы, в пакетах, содержащих осушитель, оценили путем измерения активности липазы в пробах через 30 и 90 дней хранения при условиях ускоренного тестирования стабильности (40°C и 75% относительная влажность; пробы были запаяны в пакеты из Nialene). Как показано в таблицах 19 и 20, активность липазы значительно выше в пакетах, содержащих осушитель, и в капсулах, высушенных ниже равновесного содержания влаги.

2) Осушители

Осушитель 1: силикагель в пакетах Tyvek^®

Осушитель 2: молекулярные сита в пакетах Tyvek^®

Таблица 19
	Потеря липазы, %
Время	P200450614 в ГПМЦ-капсулах (высушенных) без осушителя	P200450614 в ГПМЦ-капсулах (высушенных), осушитель 1	P200450614 в ГПМЦ-капсулах (высушенных), осушитель 2
30 дней	-1	+ 4	+ 1
90 дней	-10	+ 2	0

Таблица 20
	Потеря липазы, %
Время	P200450653 в ГПМЦ-капсулах без осушителя	P200450653 в ГПМЦ-капсулах, осушитель 1	P200450653 в ГПМЦ-капсулах, осушитель 2
30 дней	-8	-8	-5
90 дней	-18	-14	-10

Пример 7

На частицы МТ панкрелипазы нанесли две композиции покрытия, в которых содержание талька находилось между «низким» и «высоким», использованные выше (HP55:ТЭЦ:тальк = 10:1:5), применяя в качестве растворителя покрытия или ацетон или смесь этанол/ацетон. Теоретический состав двух суспензий покрытия показан в таблице 21 ниже.

Таблица 21
	Состав, % (мас./мас.)
Вещество	Промежуточное содержание талька
Гипромеллозы фталат (HP55)	7,644	7,644
Триэтилцитрат (ТЭЦ)	0,764	0,764
Тальк	3,822	3,822
Этанол	79,780
Ацетон	7,990	87,770
	100,000	100,000
Отношение HP:ТЭЦ:тальк	10:1:5	10:1:5
Общее содержание твердых веществ	12,23%	12,23%

Испытания покрытий выполнили, используя аппарат Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованный осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить проведение процесса при низкой влажности воздуха (то есть ниже 1 г/м³).

Партии получали, нанося покрытие на МТ панкрелипазы при массе покрытия приблизительно 15%. Три партии приготовили с растворителем для покрытия этанол/ацетон и три партии приготовили с растворителем для покрытия ацетоном. Теоретический состав, который был одинаковым для всех шести партий, приведен ниже в таблице 22.

Таблица 22
Партия	P9A483 - P9A485 - P9A486, растворитель - этанол/ацетон	P9A405 - P9A476-P9A477, растворитель -ацетон
Вещество	Состав, % (мас./мас.)
МТ панкрелипазы	85,00	85,00
Гипромеллозы фталат (HP55)	9,37	9,37
Триэтилцитрат	0,94	0,94
Тальк	4,69	4,69
	100,00	100,00

Микроскопия показала, что покрытие у всех шести проб было гладким и гомогенным. Покрытыми частицами МТ панкрелипазы затем заполнили ГПМЦ-капсулы, которые упаковали в стеклянные бутылки, содержащие осушители (молекулярные сита). Бутылки герметизировали и хранили в условиях ускоренного тестирования стабильности; активность липазы определяли через различные периоды времени, как указано ниже в таблице 23.

Условия упаковки для каждой пробы были следующими: 12 ГПМЦ-капсул (доза липазы 20000 МЕ) и 1 г молекулярных сит (сорбент Minipax - Multisorb) в качестве осушителя помещали в стеклянную бутылку объемом 30 мл. Бутылки закрыли Saf-Cap III-A, содержащим HS 035 Heat Seal/20F в качестве герметизирующей прокладки и хранили при 40°C/75% относительной влажности.

Таблица 23
Ускоренное тестирование стабильности в 40°C+75% отн. влажн.		0 дней	20 дней	30 дней	40 дней	60 дней	90 дней	120 дней	180 дней
Партия	Растворитель
P9A483	Этанол/ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	69,0	67,0	72,4	62,6	64,7	НД	НД	НД
		% ПМ	1,0	0,5	0,2	0,2	0,6	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		-3%	5%	-9%	-6%	НД	НД	НД
P9A485	Этанол/ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	70,0	73,2	65,7	69,8	66,9	НД	НД	НД
		% ПМ	1,1	0,6	0,3	0,6	0,6	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		5%	-6%	0%	-4%	НД	НД	НД
P9A486	Этанол/ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	63,0	61,4	59,7	62	61,5	НД	НД	НД
		% ПМ	1,6	0,2%	0,6%	0,5%	0,4%	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		-3%	-5%	-2%	-2%	НД	НД	НД
P9A405	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	64,0	63,2	62,9	65,1	65,5	64,7	66,7	63,1
		% ПМ	1,3	0,3	0,3	0,3	0,4	0,04	0,6	0,2
		Липаза (потеря активности)		-1%	-2%	2%	2%	1%	4%	-1%
P9A476	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	64,9	65,3	62,1	62,4	62,6	58,7	67,0	61,4
		% ПМ	1,2	0,4	1,0	1,3	0,5	1,0	1,0	0,6
		Липаза (потеря активности)		1%	-4%	-4%	-4%	-10 %	3%	-5%
P9A477	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	68,7	71,7	68,0	67,2	69,7	64,4	73,4	66,2
		% ПМ	1,1	0,2	0,3	1,0	0,0	0,6	0,7	0,4
		Липаза (потеря активности)		4%	-1%	-2%	1%	-6%	7%	-4%
НД - нет данных; ПМ - потеря массы

Как показано в таблице 23, эти три пробы, при получении которых в качестве растворителя покрытия использовалась смесь этанол/ацетон, продемонстрировали сходную потерю активности липазы. После 2 месяцев хранения две из проб, полученных с растворителем покрытия ацетоном, не проявляли потери активности, а третья - продемонстрировала снижение активности на 4%. Это предполагает, что пробы, полученные с растворителем покрытия ацетоном, более стабильны, чем пробы, приготовленные со смесью этанол/ацетон в качестве растворителя покрытия.

Пример 8. Микротаблетки

Чтобы создать дополнительный вариант выбора, были приготовлены лекарственные формы со значительно уменьшенным размером таблеток. Смесь панкрелипазы таблетировали круглым пуансоном диаметром 1,5 мм с радиусом изгиба 1,2 мм.

Параметры прессования были установлены так, чтобы получить микротаблетки («МТ») с хрупкостью ниже 2,5% (способ фармакопеи США). Характеристики партии 9A402 приведены в таблице 24.

Таблица 24
Партия P9A402	Значение
Диаметр	1,5 мм
Масса (20 МТ)	0,071 г (0,070-0,073)
Толщина (как среднее значение для 20 МТ)	1,73 мм (1,70-1,77)
Твердость (как среднее значение для 20 МТ)	4 Н (3-5)
Хрупкость (20 г МТ 30 мин при 25 об/мин)	1,80%

Покрытие на партию P9A402 было нанесено в аппарате Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованном осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить низкое влагосодержание потока воздуха (ниже 1 г/м³ ). Состав суспензии показан в таблице 2. Масса покрытия составила 22%. Микроскопия пленочных покрытий показала, что все пробы гладкие и гомогенные.

Теоретический состав партии P9A422 показан в таблице 25.

Таблица 25
Партия P9A422	Состав стандартной оболочки, % (мас./мас.)
МТ панкрелипазы	78,00
Гипромеллозы фталат (HP55)	18,34
Триэтилцитрат	1,83
Тальк	1,83
	100,000

Две другие партии микротаблеток были получены, как описано выше, и их свойства показаны ниже в таблице 26.

Таблица 26
Параметр	Партия P9A457	Партия P9A459
Диаметр	1,5 мм	1,5 мм
Масса (20 МТ)	0,072 г (0,070-0,073)	0,071 г (0,070-0,074)
Толщина (среднее значение для 20 МТ)	1,73 мм (1,67-1,83)	1,74 мм (1,69-1,82)
Твердость (среднее значение для 20 МТ)	5 ньютонов (3-6)	5 ньютонов (4-6)
Хрупкость (20 г МТ, 30 мин при 25 об/мин)	1,99%	2,02%

Микротаблетки панкрелипазы были покрыты одной из двух суспензий с содержанием талька, промежуточным между «высоким» и «низким», описанных выше (HP55:ТЭЦ:тальк=10:1:5), с использованием в качестве растворителя покрытия или ацетона, или смеси этанола в ацетоне (таблица 27).

Эти шесть испытаний были выполнены с использованием аппарата Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованным осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить низкое влагосодержание потока воздуха (ниже 1 г/м³). Масса покрытия составила примерно 22% и микроскопия показала, что все покрытия гладкие и гомогенные.

Таблица 27
Покрытые МТ	Растворитель	Непокрытые МТ
Партия P9A460	Ацетон	Партия P9A402
Партия P9A458	Ацетон	Партия P9A457
Партия P9A463	Ацетон	Партия P9A459
Партия P9A473	Этанол/ацетон	Партия P9A402
Партия P9A466	Этанол/ацетон	Партия P9A457
Партия P9A468	Этанол/ацетон	Партия P9A459

Теоретический состав партий суммирован в таблице 28.

Таблица 28
Партия	P9A466 - P9A468 - P9A473, растворитель - этанол/ацетон	P9A458 - P9A460-P9A463, растворитель - ацетон
Вещество	Состав, % (мас./мас.)
МТ панкрелипазы	78,00	78,00
Гипромеллозы фталат (HP55)	13,75	13,75
Триэтилцитрат	1,37	1,37
Тальк	6,88	6,88
	100,00	100,00

ГПМЦ-капсулы заполнили покрытыми микротаблетками, описанными выше, и упаковали в стеклянные бутылки, содержащие осушители (молекулярные сита). Затем бутылки были закрыты Saf-Cap III-A, содержащим HS 035 Heat Seal/20F в виде герметизирующей прокладки, и хранились при условиях ускоренного тестирования стабильности (40°C и 75% относительная влажность). Двенадцать капсул MPMC (доза липазы 5000 МЕ) и 1 г молекулярных сит (Minipax сорбент Multisorb) в качестве осушителя были помещены в стеклянную бутылку объемом 30 мл. Активность липазы измеряли через 20, 30, 40 и 60 дней хранения, как показано в таблицах 29 и 30.

Таблица 29
Ускоренное тестирование стабильности при 40°C+75% относит. влажность		0 дней	20 дней	30 дней	40 дней	60 дней	90 дней	120 дней	180 дней
Партия	Растворитель
P9A466	Этанол/ ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	64,7	67,0	64,6	63,6	62,3	НД	НД	НД
		% ПМ	1,7	2,2	0,4	0,0	0,0	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		4%	0%	-2%	-4%	НД	НД	НД
P9A468	Этанол/ ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	61,2	59,6	57,7	58,6	58,9	НД	НД	НД
		% ПМ	1,7	0,5	0,4	0,0	0,0	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		4%	0%	-2%	-4%	НД	НД	НД
P9A473	Этанол/ ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	59,8	58,9	57,7	59,4	58,4	НД	НД	НД
		% ПМ	1,8	0,7	0,9	0,0	0,0	НД	НД	НД
		Липаза (потеря активности)		-2%	-4%	-1%	-2%	НД	НД	НД
P9A458	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	62,4	65,4	64,3	62,9	65,0	62,3	65,5	62,6
		% ПМ	3,0	0,1	0,5	0,0	0,0	0,6	1,3	0,3
		Липаза (потеря активности)		5%	3%	1%	4%	0%	5%	0%
P9A460	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	56,9	58,2	59,2	58,3	60,0	57,6	62,2	56,8
		% ПМ	1,7	0,07	0,3	0,0	0,0	0,0	0,6	0,2
		Липаза (потеря активности)		2%	4%	2%	5%	1%	9%	0%
P9A463	Ацетон	Липаза, ЕД USP/мг	62,7	63,8	62,2	61,5	59,8	54,5	62,6	58,6
		% ПМ	1,6	2,3	0,5	0,0	0,0	0,4	0,6	0,5
		Липаза (потеря активности)		2%	-1%	-2%	-5%	-13 %	0%	-7%
НД - нет данных; ПМ - потеря массы

Таблица 30
Ускоренное тестирование стабильности при 40°C+75% относит. влажность	20 дней	30 дней	40 дней	60 дней
Партия	Растворитель	Липаза (потеря активности)
P9A466	Этанол/ацетон	+4%	0%	-2%	-4%
P9A468	Этанол/ацетон	-3	-4%	-4	-4%
P9A473	Этанол/ацетон	-2%	-4%	-1%	-2%
P9A458	Ацетон	+5%	+3%	+1%	+4%
P9A460	Ацетон	+2	+4%	+2%	+5%
P9A463	Ацетон	+2%	-1%	-2%	-5%

Все три пробы, полученные с использованием в качестве растворителя покрытия смеси этанол/ацетон, продемонстрировали сходное поведение, и через 2 месяца хранения потеря активности липазы составила 2-4%. После двух месяцев хранения две пробы, приготовленные с использованием в качестве растворителя покрытия ацетона, не проявили признаков снижения активности липазы, в то время как в третьей пробе активность липазы снизилась на 5%. Таким образом, композиции, приготовленные с использованием в качестве растворителя покрытия ацетона, были более стабильными, чем пробы, полученные с использованием в качестве растворителя покрытия смеси этанол/ацетон, что, возможно, связано с содержанием воды в используемом этаноле.

Микротаблетки, приготовленные как описано выше, были немного продолговатыми (см. таблицы 24 и 26); отношение между толщиной микротаблетки и диаметром колебалось между 1,22:1 и 1,15:1.

Чтобы дополнительно уменьшить величину микротаблеток, новые пробы были приготовлены с отношением толщины к диаметру ближе к 1:1 (партия Q9A006), что показано ниже в таблице 31.

Таблица 31
Параметр	Партия Q9A006
Диаметр	1,5 мм
Масса (20 МТ)	0,060 г (0,058-0,062)
Толщина (среднее значение для 20 МТ)	1,50 мм (1,45-1,58)
Твердость (среднее значение для 20 МТ)	5 Н (4-6)
Хрупкость (20 г МТ, 30 мин при 25 об/мин)	1,63%

Партия Q9A006 была покрыта композициями, показанными в таблице 32, масса покрытия составила 22%. Испытания покрытий были выполнены с использованием аппарата Glatt-GPCG1 с кипящим слоем, оборудованного осушителем Munters ML 1350, чтобы обеспечить низкое влагосодержание потока воздуха (ниже 1 г/м³).

Теоретический состав партии микротаблеток с покрытием Q9A019 был таким же, как показанный в таблице 28. Микроскопия показала, что покрытия были гладкими и гомогенными.

Таблица 32
	Состав, % (мас./мас.)
Вещество	Промежуточное содержание талька
Гипромеллозы фталат (HP55)	7,644
Триэтилцитрат (ТЭЦ)	0,764
Тальк	3,822
Ацетон	87,770
	100,000
Отношение HP:ТЭЦ:тальк	10:1:5
Общее содержание твердых веществ	12,23%

Вышеприведенные примеры показывают, что композиции пищеварительных ферментов с улучшенной стабильностью можно получить при поддержании низкого влагосодержания и активности воды в компонентах композиции, например, при замене растворителя покрытия - водного этанола/ацетона - ацетоном, нанося покрытие на мини-таблетки и микротаблетки в потоке обезвоженного воздуха (например, с влагосодержанием 0,4-3,6 г/м³). Кроме того, повышенный уровень неорганических веществ в покрытии (например, отношение HP55:ТЭЦ:тальк в диапазоне от 10:1:1 до 10:1:5), выбор менее гигроскопичных веществ для капсул (например, ГПМЦ или высушенной ГПМЦ) и улучшенные методы упаковки (например, хранение в хорошо загерметизированных стеклянных бутылках, содержащих поглотители влаги) дают композиции пищеварительных ферментов и лекарственные формы с улучшенной стабильностью.

Пример 9

В следующей таблице 33 отображено ускоренное тестирование стабильности (в бутылках; 40°C и 75% относительная влажность) мини-таблеток панкрелипазы, покрытых Eudragit.

Таблица 33
Партия	1	2	3	4	5
Время, месяцы	0	1	0	1	0	1	0	1	0	1
Липаза, МЕ	23030	15510	24180	15810	23550	16014	23000	16100	23613	17594
% (vs времени 0)	100	67	100	65	100	68	100	70	100	74
Потеря влаги, Е (макс. 5,0)	4,0	4,9	3,9	4,6	4,2	4,2	3,9	4,3	3,3	3,7

Результаты показывают, что обычные кишечнорастворимые покрытия, например, Eudragit, не позволяют получить стабилизированные композиции панкрелипазы.

Пример 10

Примеры лекарственных форм, содержащих покрытые ER шарики, с различной дозой на капсулу, покрытие на которые нанесено, как описано в предыдущих примерах, приведены в таблице 34, ниже.

Таблица 34
	Содержание (мг/капсула) для каждой дозы
Компонент	Композиция 1	Композиция 2	Композиция 3	Композиция 4
Панкрелипаза	55,7 (5000 ЕД USP)	108,9 (10000 ЕД USP)	163,4 (15000 ЕД USP)	217,8 (20000 ЕД USP)
Натрийкроскармеллоза	1,9	3,6	5,5	7,3
Гидрогенизированное касторовое масло	0,6	1,2	1,8	2,4
Коллоидный диоксид кремния	0,3	0,6	0,9	1,2
Микрокристаллическая целлюлоза	3,1	6,1	9,1	12,1
Стеарат магния	0,3	0,6	0,9	1,2
Гипромеллозы фталат	12,2	18,9	28,4	37,8
Тальк	6,1	9,5	14,2	18,9
Триэтилцитрат	1,2	1,92	2,8	3,8
Ацетон b	Следы	Следы	Следы	Следы
Каррагенан	0,1	0,2	0,3	0,3
Хлорид калия	0,2	0,3	0,4	0,4
Диоксид титана	2,3	3,5	5,1	5,2
Гипромеллоза	33,5	52,9	79,4	79,2
Воск карнаубы	Следы	Следы	Следы	Следы
Вода	0,38	0,60	0,9	0,90
Желтая окись железа	-	0,1	-	0,2
Красная окись железа	-	-	0,3	-
FDC синий 2	-	-	-	0,1

Пример 11

В следующей таблице 35 приведено содержание воды в контейнерах различного размера, в которых находятся капсулы, содержащие композиции по настоящему изобретению. Содержание воды включает общее количество воды из капсул и воду, проникшую в контейнер за время хранения свыше дух лет. «Эквивалентная масса молекулярных сит» - это минимальное количество молекулярных сит, необходимое для поглощения присутствующей в контейнерах воды.

Таблица 35
Размеры бутылки, см3	Число капсул	Масса капсул, мг	Влажность капсул, %	Всего воды из капсул, мг/ бутылка	Проникшая вода, мг/ 2 года/ бутылка	Эквивалентная масса молекулярных сит, г
30	12	95	3%	34	111	0,96
200	100	95	3%	285	401	4,58
750	500	95	3%	1425	474	12,66
30	20	95	3%	57	111	1,12

Пример 12

Было выполнено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое перекрестное исследование III фазы, чтобы сравнить эффекты лечения композициями панкрелипазы из таблицы 34 с эффектами плацебо у 34 пациентов в возрасте семи лет и старше с муковисцидозом и ЭПН. Исследование проводилось в 14 центрах по лечению муковисцидоза в США. Первичной конечной точкой исследования было сравнение коэффициента всасывания жиров после перорального введения композиции панкрелипазы в суточных дозах 10000 единиц липазы или менее на килограмм массы тела в комбинациях 5000, 10000, 15000 или 20000 единиц липазы на капсулу по сравнению с плацебо. Вторичными конечными точками исследования были изменения коэффициента всасывания азота как показателя всасывания белков, холестерина, жирорастворимых витаминов, массы тела, индекса массы тела и симптомов ЭПН.

У пациентов, получающих эти композиции, наблюдалось статистически значимое увеличение коэффициента всасывания жиров и коэффициента всасывания азота по сравнению с теми, которые получали плацебо; у первой группы пациентов также было меньше симптомов, связанных с нарушенным всасыванием, таких как вздутие живота, метеоризм, боль и наличие жира в стуле. У пациентов, получающих эти композиции панкрелипазы, также наблюдалось повышение среднего уровня холестерина и витаминов по сравнению с пациентами, получавшими плацебо. Статистически значимое уменьшение отмечено в частоте дефекаций в сутки. Эти композиции хорошо переносились пациентами, и во время исследования не наблюдались серьезные нежелательные явления.

Средний коэффициент всасывания жиров в процентах у пациентов, получающих эти композиции, составил 88,28% против 62,76% у принимавших плацебо. Средний коэффициент всасывания азота составил 87,2% против 65,7% у пациентов, принимавших плацебо, и среднее количество дефекаций в сутки уменьшилось в соответствующих группах пациентов с 2,66 до 1,77.

Пример 13

Выполнено педиатрическое клиническое исследование III фазы, чтобы оценить эффект лечения композициями из таблицы 34 в открытом исследовании с участием 19 больных муковисцидозом младше 7 лет в 11 центрах по лечению муковисцидоза в США - первое испытание панкреатической заместительной терапии такого размера, проведенное с участием детей младшего возраста с экзокринной панкреатической недостаточностью. Дизайн исследования предусматривал семидневный период стабилизации дозы, за которым следовал семидневный период лечения; пациенты получали 5000 единиц липазы на капсулу ежедневно; препаратом посыпали пищу. Первичной конечной точкой исследования был процент «ответивших на лечение», или пациентов без избытка жира в кале и без проявлений мальабсорбции после одной и двух недель лечения. Вторичные конечные точки включали изменение массы тела, питательный статус, частоту и консистенцию стула и частоту вздутия живота, боли и метеоризма, а также ослабление клинических симптомов, по мнению врача и родителя или опекуна. Также оценивали безопасность продукта.

Средний процент ответивших на лечение, как определено в протоколе исследования, при скрининге (начало периода стабилизации, когда пациенты получали предыдущую заместительную терапию панкреатическими ферментами и до лечения) составил 52,6%. В конце периода стабилизации и в конце периода лечения средний процент ответивших на лечение составил 66,4 и 57,9% соответственно. Симптомы мальабсорбции были значительно менее выражены в конце периода лечения, чем при скрининге, что согласовалось с наблюдением относительно контроля симптомов нарушения всасывания, отмеченных в исследовании III фазы, описанном выше в примере 12. Композиции панкрелипазы по настоящему изобретению также хорошо переносились пациентами, и серьезные нежелательные явления во время исследования не наблюдались.

Эти результаты демонстрируют, что композиции по настоящему изобретению эффективно контролируют симптомы нарушения всасывания, и согласуются с результатами, полученными в пилотном исследовании III фазы, описанном в примере 12. Статистически значимое количество врачей и пациентов отметило, что контроль симптомов композициями по настоящему изобретению был лучше, чем на фоне предшествовавшей терапии.

Пример 14

Выполнено открытое рандомизированное одноцентровое несравнительное перекрестное исследование III фазы для сравнения эффектов лечения композициями панкрелипазы из таблицы 34, чтобы определить гастроинтестинальную биодоступность этих композиций у 10 больных хроническим панкреатитом с экзокринной панкреатической недостаточностью. Ингибиторы протонного насоса, антациды и препараты, способные повлиять на перистальтику ЖКТ, отменяли за 7 дней до начала исследования. Пациентов рандомизировали для получения либо только Ensure Plus (пищевая добавка с витаминами, поставляемая Abbott), либо Ensure Plus в комбинации с 75000 ЕД USP липазы (3 капсулы, содержащие по 20000 ЕД каждая плюс 3 капсулы, содержащие 5000 ЕД каждая) на процедуру. Капсулы открывали, и их содержимое смешивали с 480 мл Ensure Plus непосредственно перед введением. После однодневного периода «отмывки» пациенты, ранее получавшие только Ensure Plus , получали Ensure Plus в комбинации с 75000 ЕД USP липазы, а пациенты, которые ранее получали комбинацию Ensure Plus и липазы, получали только Ensure Plus . На следующий день пациентам выполняли физикальное исследование, и у них брали пробы крови и мочи. Биодоступность композиций по настоящему изобретению оценивали по количеству соответствующих ферментов (то есть липазы, амилазы и химотрипсина), высвобожденных и выделенных в двенадцатиперстную кишку после введения композиции в присутствии Ensure Plus . Кроме того, измеряли уровень холецистокинина в крови, а также рН желудочного и дуоденального содержимого. Активность липазы измеряли по методу Carriere, F.; Barrowman, J.A.; Verger, R.; Laugier, R. Secretion and contribution to lipolysis of gastric and pancreatic lipases during a test meal in humans. Gastroenterology 1993, 105, 876-88. Амилазу и химотрипсин измеряли по методу, описанному в Carriere, F.; Grandval, P.; Renou, C.; Palomba, A.; Prieri, F.; Giallo, J; Henniges, F.; Sander-Struckmeier, S.; Laugier, R. Quantitative study of digestive enzyme secretion and gastrointestinal lipolysis in chronic pancreatitis Clin. Gastroenterol. Hepatol. 2005, 3, 28-38.

Обнаружено, что лечение композициями панкрелипазы по настоящему изобретению приводит к высвобождению статистически значимо большего количества амилазы, липазы и химотрипсина в двенадцатиперстную кишку пациентов, которые получили комбинацию Ensure Plus и панкрелипазы, по сравнению с пациентами, которые получали только Ensure Plus (после коррекции по рН в качестве вмешивающегося фактора).

Средняя биодоступность липазы, амилазы и химотрипсина для восьми пациентов, которые закончили исследование по протоколу, составила 27,5%, 21,6% и 40,1% соответственно. Обнаружено, что пациенты входят в две различные субпопуляции по рН ЖКТ («нормальный pH» и «низкий pH»). У пациентов с «нормальным pH» (то есть пациентов, у которых дуоденальный pH в среднем превышал 4) средняя биодоступность липазы, амилазы и химотрипсина была более высокой, чем для всей исследованной группы: 45,6%, 26,9% и 47,7% соответственно. Различий в уровне холецистокинина между этими двумя субпопуляциями не наблюдалось.

Поскольку биодоступность липазы, амилазы и химотрипсина у пациентов с «нормальным pH» и «низким pH» отличается (в особенности липазы), эффективность композиций панкрелипазы или лекарственных форм по настоящему изобретению может быть увеличена, например, у пациентов с «низким pH», за счет одновременного введения препаратов, которые повышают рН ЖКТ, например, ингибиторов протонного насоса и антацидов. Однако композиции или лекарственные формы по настоящему изобретению могут вводиться без одновременного назначения, например, ингибиторов протонного насоса.

Предшествующее описание изобретения приведено с целью иллюстрации и описания. Это описание не должно рассматриваться как исчерпывающее или ограничивающее изобретение точной раскрытой формой. В свете вышеупомянутых идей возможны модификации и изменения. Описания вариантов осуществления выбраны, чтобы объяснить и описать принципы настоящего изобретения и его практическое применение, и не предназначены, чтобы ограничить объем формулы изобретения.

Все публикации и патенты или заявки на патент, процитированные в данном документе, включены посредством ссылки во всей их полноте в том же объеме, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент были конкретно и отдельно включены посредством ссылки.