водорастворимое производное салицилморфолида, обладающее ноотропной активностью в сочетании с антидепрессивным действием
Классы МПК: | C07D295/192 из ароматических карбоновых кислот A61K31/5375 1,4-оксазины, например морфолин |
Автор(ы): | Брель Анатолий Кузьмич (RU), Лисина Светлана Викторовна (RU), Саломатина Юлия Николаевна (RU), Ковалев Дмитрий Геннадьевич (RU), Мягкова Ирина Алексеевна (RU), Бугаева Любовь Ивановна (RU) |
Патентообладатель(и): | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Волгоградский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2012-06-26 публикация патента:
10.10.2013 |
Изобретение относится к водорастворимому производному салицилморфолида формулы
Это производное обладает ноотропной активностью в сочетании с антидепрессивным действием. 6 табл., 6 пр.
Формула изобретения
Водорастворимое производное салицилморфолида формулы
обладающего ноотропной активностью в сочетании с антидепрессивным действием.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новым водорастворимым производным салицилморфолида (а именно, солям) и его применению как ноотропного препарата с антидепрессивным действием.
В современном обществе наблюдается прогрессирующий рост частоты органических поражений головного мозга разного генеза с когнитивными расстройствами. Вместе с тем, в связи с многократно возросшим ритмом жизни достаточно широко распространена проблема психоэмоционального напряжения, повышенной утомляемости, вследствие чего наблюдается резкое снижение умственной деятельности [Кудашов В.И. Когнитивные технологии усиления интеллекта и их биоэтическая оценка. Сибирское медицинское обозрение. 2009. Т.59. № 5. С.98-102]. В связи с этим актуальна проблема поиска новых психофармакологических средств, свободных от нежелательных эффектов, безопасных, эффективных, надежных, экономичных.
Салицилморфолид (N-салицилоилморфолин, CAS 3202-84-4) обладает противовоспалительным действием (US 3265575), однако в медицинской практике не применяется. В медицинской практике среди используемых салициламидов известны отдаленные аналоги заявляемого соединения, такие как салициламид (CAS 65-45-2), который назначают внутрь в качестве болеутоляющего и жаропонижающего средства, оксафенамид (CAS 526-18-1) усиливает образование и выделение желчи, оказывает спазмолитическое действие и снимает или уменьшает спазмы желчевыводящих путей, тиаприд и султоприд оказывают антидофаминергическое действие, которые применяются наружно в качестве обезболивающих и противовоспалительных средств, натриевая соль салициловой кислоты (энтерсалил, диуретин, натрия салицилат, CAS 54-21-7) оказывает аналгезирующее, жаропонижающее и противовоспалительное действие [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.1. -М.: Новая волна. - 2002. - С.74, 167, 318, 504]. К побочным действиям салицилатов относят тошноту, гастралгию, аллергические реакции, нарушения функции печени, синдром Рейе и др. [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.1. -М.: Новая волна. - 2002. - С.165].
Наряду с перечисленными терапевтическими эффектами, которые проявляются практически во всех физиологических системах организма, салициловая кислота и ее производные оказывают также нейротропное воздействие. Так, в исследованиях было выявлены особенности нейротропного действия салицилата кобальта и салицилата цинка на нейронах виноградной улитки [Коренюк И.И. Влияние салициловой кислоты и ее солей на электрическую активность нейронов виноградной улитки / И.И.Коренюк, Д.Р.Хусаинов, В.Ф.Шульгин // Нейрофизиология. - 2005. - Т.37, № 2.-С.142-150].
Однако в медицинской практике отсутствуют препараты СК, которые обладали бы ноотропным действием.
Лития карбонат (седалит) применяют в маниакальной фазе и для профилактики обострений биполярного аффективного расстройства, шизоаффективные расстройства, маниакальные состояния различного генеза, аффективные расстройства при хроническом алкоголизме, лекарственная зависимость, сексуальные отклонения, синдром Меньера, мигрень [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.1. -М.: Новая волна. - 2002. - С.108].
Эталонным ноотропом, который используется для восстановления нарушений интеллектуальных функций у больных при нарушении мозгового кровообращения, является пирацетам (2-оксо-1-пирролидинацетамид, С AS 932-17-2). Недостатком пирацетама как эталонного препарата является его низкая активность: уровень эффективных доз действия составляет 200-500 мг/кг, эффект пирацетама часто плохо воспроизводим [RU 2050851]. Другой лекарственный препарат "Мексидол" (этилметилгидроксипиридина сукцинат) проявляет ноотропную, нейропротекторную, анксиолитическую, противогипоксическую, антистрессорную, антиалкогольную, противопаркинсоническую и противосудорожную активность и др. [Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. -М.: 2004. - 248 с.].
Цель изобретения заключается в получении высокоэффективного производного СК, сочетающего основные эффекты, присущие ноотропным средствам в сочетании с антидепрессивным эффектом и характеризующегося низкой токсичностью и действующего в малых дозах.
Сущность изобретения заключается в синтезе литиевой соли салицилморфолида формулы
и использования ее в качестве ноотропного и антидепрессивного средства.
В исследованиях психотропного эффекта соединения использовались дозы 10 и 50 мг/кг разведенных в изотоническом растворе 0,9% NaCl при комнатной температуре. Все вещество вводилось однократно за 60 минут до начала эксперимента. Результаты проведенных исследований подвергнуты статистической обработке, достоверность различий оценивали с помощью критерия Уитни-Манна (табл.1, табл.2).
Пример 1. Литиевая соль N-салицилоилморфолина. Для синтеза литиевой соли 10,0 г (100 ммоль) фенолята лития, 35 г толуола или бензола и 20,7 г (100 ммоль) N-салицилоилморфолина смешивают и при перемешивании нагревают при температуре 100°С в течение 60 мин. После охлаждения продукт отделяют фильтрованием, промывают небольшим количеством растворителя и сушат. Получают белое кристаллическое вещество (20,61 г, 96,7%) с температурой плавления выше 270°С. В спектре ЯМР 1Н (ДМСО-d6) отсутствует сигнал фенольного гидроксила (1Н, Ph-OH).
Пример 2. Тест «принудительного» плавания Порсольта. Метод изучения антидепрессивной активности соединений был предложен почти 30 лет назад [Porsolt R.D., Le Pichon М., Jalfre М. Depression: a new animal model sensitive to antidepressant treatments // Nature. - 1977. - Vol.266, № 21. - P. 730-732], тем не менее не потерял актуальности. Крыс на 15 мин помещали в стеклянный бассейн диаметром 32 см и высотой 50 см, на 20 см заполненный водой (температурой 1-19°С). Через 24 часа процедуру повторяли, регистрируя в течение 300 секунд общее время нахождения крысы в состоянии иммобилизации (животное пассивно плавает в воде со слегка поднятой головой) и количество прыжков из воды (попытка избежать аверсивного воздействия среды). Уменьшение общей продолжительности периода иммобилизации и увеличение количества прыжков расценивали как проявление антидепрессивной активности соединений.
Пример 3. Метод выработки условной реакции пассивного избегания (УРПИ).
В работе при изучении ноотропной активности соединений использовалась модификация этого метода, специально разработанная для крыс [Bures J., Buresova О. Cortical spreading depression as a memory diedurbing factor // J.Physiol and Psychol, - 1963. - Vol.56. - P.268-72]. Выработку условной реакции избегания затемненного отсека производили в экспериментальной камере, которая состояла из двух смежных отсеков - большого освещенного (60×40 см) и малого затемненного (15×15 см), снабженного электродным полом. Отсеки соединялись между собой с помощью четырехугольного отверстия (8×8 см). Крысу помещали в светлый отсек, хвостом к темному отсеку, и в течение 3 минут регистрировали латентный период первого захода животного в темный (опасный) отсек. Крысы, предпочитавшие светлый отсек, из дальнейшего эксперимента исключались. По прошествии трех минут в темном отсеке животное получало через электродный пол однократное электроболевое раздражение (40 В), состоящее из трех импульсов длительностью 1 секунда, следующих с интервалом 0.5 секунд. Крыса считалась обученной, если в течение 30 секунд после сеанса обучения она не заходила в темный отсек экспериментальной камеры. Тест на воспроизведение памятного следа осуществлялся через 24 ч после обучения. Животное помещали в светлый отсек камеры и в течение 3 мин регистрировали те же показатели, что и при обучении. Ноотропный эффект исследуемых соединений проявлялся при воспроизведении УРПИ и выражался в увеличении латентного периода первого захода животного в темный отсек, уменьшении количества заходов в этот отсек и времени пребывания в нем по сравнению с животными контрольной группы.
Пример 4. Амнезия, вызванная скополамином. Амнезию УРПИ вызывают внутрибрюшинным введением скополамина в дозе 1 мг/кг непосредственно после сеанса обучения. Воспроизведение УРПИ производят через 24 ч после обучения. Исследуемые вещества вводятся за 1 ч до воспроизведения УРПИ. Регистрируют латентный период захода в темный отсек и время пребывания в нем. Ноотропный эффект выражается в устранении скополаминовой амнезии, что характеризуется увеличением латентного периода захода и уменьшением времени пребывания в нем при воспроизведении УРПИ.
Пример 5. Изучение влияния на физическую работоспособность. Изучение адаптогенных свойств изучаемых соединений проводили на модели плавания с грузом, сопровождающейся циркуляторной гипоксией вследствие нарастания лактата в крови по мере утомления (Воронина Т.А., Неробкова Л.Н. Методические указания по изучению противосудорожной активности фармакологичесих веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -М.: 2000. - С.138-147). Дополнительная нагрузка составляла 15% от собственного веса подопытной крысы. Плавание осуществляли в емкости с предварительно отстоянной (для уменьшения содержания растворенного газа) водой при температуре 24-26°С. Груз фиксировали на туловище. Учитывалась длительность плавания до утопления животных. Увеличение времени плавания до утопления расценивали как увеличение физической работоспособности. Исследуемое вещество вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг в течение 7 дней до эксперимента (таблица 5).
Пример 6. Определение острой токсичности. Острую суточную токсичность при однократном введении изучали на мышах обоего пола массой 25-30 г. Соединение в изотоническом растворе хлорида натрия вводили животным внутрибрюшинно в различных возрастающих дозах однократно. Наблюдение за животными проводили в течение суток, отмечая количество погибших животных. Расчет ЛД50 проводили по методу Литчфилда и Уилкоксона. Исследования острой токсичности заявляемого производного показали, что по классификации опасности (вредности) веществ литиевой соли N-салицилоилморфолина при внутрибрюшинном введении мышам (ЛД50=1473,62 мг/кг) относятся к классу умеренно токсичных соединений [Саноцкий И.В., Уланова И.П. Критерий вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. -М.: Медицина, 1975-328 с.] (таблица 6).
Патентуемое соединений в обеих дозах вызывало достоверные однонаправленные изменения в тесте УРПИ - увеличивался латентный период первого захода в темный отсек (на 586,4% в дозе 10 мг/кг и на 840,9% в дозе 50 мг/кг) и уменьшалось общее время пребывания в нем (на 67,7% в дозе, 10 мг/кг и на 100% в дозе 50 мг/кг). В связи с этим можно говорить о проявлении антиамнестических свойств. Это же соединение в обеих дозах проявило однонаправленный эффект в тесте форсированного плавания Порсольта, заключающийся в уменьшении времени иммобилизации, что, несмотря на недостоверность большинства данных, свидетельствует о его незначительном антидепрессивном эффекте. В дозе 50 мг/кг в тесте «открытое поле» достоверно увеличивалась горизонтальная активность в 2 раза по сравнению с контролем, что указывает на возможное психостимулирующее действие этого соединения (таблица 3).
Введение литиевой соли салицилморфолида в дозе 50 мг/кг устранило скополаминовую амнезию, вызывая статистически достоверное увеличение латентного периода захода в темный отсек и уменьшение времени пребывания в нем, как и введение пирацетама. Однако по сравнению с пирацетамом, заявляемое соединение действует в дозе, которая меньше дозы пирацетама в 4 раза (таблица 4).
В этой же дозе (50 мг/кг) заявляемое соединение статистически достоверно увеличивало физическую работоспособность (время плавания до утопления увеличивалось по сравнению с показателем контрольной группы на 112%). В группе животных, получавших пирацетам (200 мг/кг), работоспособность увеличилась на 110% (таблица 5).
Из сравнения доз, в которых литиевая соль N-салицилоилморфолина проявляет ноотропные свойства в сочетании с антидепрессивным действием (10 мг/кг) с ЛД50 (1473,62 мг/кг), можно заключить, что препарат обладает широким диапазоном терапевтического действия и низкой токсичностью. Так терапевтический индекс заявляемого соединения почти в 9 раз превышает индекс мексидола и в 7,4 раза - пирацетама (таблица 6).
Таблица 1 | |||
Тест принудительного плавания по Porsolt литиевой соли салицилморфолида | |||
Соединение | Доза, мг/кг | Время иммобилизации | Количество прыжков |
Контроль | 0 | 79,50±17,10 | 0,00±0,00 |
литиевая соль салицилморфолида | 10 | 52,63±15,40 | 0,75±0,34 |
50 | 17,00±5,44* | 1,13±0,41 | |
* - данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна |
Таблица 2 | |||
Тест УРПИ литиевой соли салицилморфолида | |||
Соединение | Доза, мг/кг | Латентный период захода в темный отсек, с | Время пребывания в темном отсеке, с |
Контроль | 0 | 19,13±3,20 | 160,88±3,20 |
литиевая соль салицилморфолида | 10 | 131,29±23,40* | 48,71±23,40* |
50 | 180,00±0,00* | 0,00±0,00* | |
* - данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна |
Таблица 3 | |||||||
Влияние нового производного литиевой соли салицилморфолида на поведение крыс в «открытом поле», (М±т) | |||||||
Соедине-ние | Доза, мг/кг | Вертикальная двигательная активность (число вставаний на задние лапы) | Горизонтальная двигательная активность (число пересеченных квадратов) | Количество заглядываний в отверстия | Число актов груминга | Количество выхо-дов в центральную зону | Коли-чест-во болю-сов |
Контроль | 0 | 3,75±0,91 | 15,63±7,57 | 1,75±0,46 | 3,25±0,86 | 1,38±0,68 | 2,88±1,15 |
литиевая соль салицилморфолида | 10 | 5,00±1,71 | 23,38±5,33 | 2,25±0,66 | 2,63±0,73 | 0,380±0,25 | 1,88±0,67 |
50 | 9,50±2,34 | 33,13±4,43* | 3,25±0,93 | 5,50±1,10 | 0,25±0,15 | 1,25±0,49 | |
* - данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна |
Таблица 4 | ||
Изучение влияния литиевой соли салицилморфолида на скополаминовую амнезию | ||
Латентный период захода в темный отсек, М±т, с | Время пребывания в темном отсеке, М±т | |
Контроль, скополамин 1.0 мг/кг | 21.38±3.88 | 158.63±3.88 |
Скополамин 1.0 мг/кг+ Литиевая соль салицилморфолида, 50 мг/кг | 109.88±26.11* | 70.1326.11* |
Скополамин 1.0 мг/кг+ Пирацетам, 200 мг/кг | 107.25±25.75* | 72.75±25.75* |
* - данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна |
Таблица 5 | ||
Влияние на физическую работоспособность, (М±m) | ||
Вещество | Доза, мг/кг | Время плавания, с |
Физ. раствор | 0 | 790,3±65,9 |
Пирацетам | 200 | 1092,8±110,9 |
литиевая соль салицилморфолида | 50 | 1151,5±94,4* |
*-р<0,05, критерий Крускалла-Уоллиса, Критерий Даннета |
Таблица 6 | |||
Сравнительная характеристика эффективности литиевой соли салицилморфолида с пирацетамом и мексидолом | |||
ЛД50, мг/кг | Терапевтический индекс | ||
литиевая соль салицилморфолида | 1473,62* (1265,69÷1715,70) | 147,36 | |
Пирацетам | 8000,0** | 20,0 | |
Отношение | 1:5,4 | 7,4 | |
Мексидол (внутрибрюшинно) | 475***(365+617) | 16,4 | |
Отношение | 3,1 | 8,99 | |
*данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна | |||
**RU 2050851 | |||
***Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. -М.: 2004. - 248 с. |
Класс C07D295/192 из ароматических карбоновых кислот
Класс A61K31/5375 1,4-оксазины, например морфолин