Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ..факторы коагуляции или фибринолиза крови – C07K 14/745

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному фактору Виллебранда (VWF), и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают модифицированный VWF, слитый в С-концевой части своего первичного продукта трансляции с N-концевой частью альбумина посредством линкера SSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGS. Полученный модифицированный VWF используют в составе фармацевтической композиции для лечения или профилактики нарушения свертываемости крови. Изобретение позволяет получить модифицированный VWF, который сохраняет способность к N-концевой димеризации и С-концевой мультимеризации, имея при этом удлиненный полупериод функционального существования в плазме крови по сравнению с полупериодом функционального существования VWF. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 11 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой микровезикулу, несущую тканевый фактор. Полученная из дрожжей микровезикула, несущая тканевый фактор (ТФ), снижающая время коагуляции, содержит (i) мембрану дрожжей и (ii) белок тканевого фактора (ТФ) человека или его вариант, обладающий прокоагулянтной активностью, где часть указанного белка ТФ человека, обладающего прокоагулянтной активностью, встроена в указанную мембрану, и где N-концевой домен указанного белка ТФ человека или его варианта, обладающего прокоагулянтной активностью, расположен на внешней стороне указанной мембраны, и где указанный его вариант, обладающий прокоагулянтной активностью, соответствует белку тканевого фактора человека, имеющему по меньшей мере одну модификацию, выбранную из группы, состоящей из включения гетерологичной последовательности, которая пригодна для облегчения выделения или очистки варианта, причем указанная гетерологичная последовательность связана с C-концевым или N-концевым доменом; удаления сигнального пептида, приводящего к зрелому белку ТФ человека; модификации сайта N-гликозилирования, соответствующего остаткам в положениях 11-13 зрелого белка ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; модификации сайта N-гликозилирования, соответствующего остаткам в положениях 124-126 в зрелом белке ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; модификации сайта N-гликозилирования, соответствующего остаткам в положениях 137-139 в зрелом белке ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; модификации сайтов N-гликозилирования, соответствующих остаткам 124-126 и 11-13 в зрелом белке ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; модификации сайтов N-гликозилирования, соответствующих остаткам 124-126 и 137-139 в зрелом белке ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; модификации сайтов N-гликозилирования, соответствующих остаткам 124-126, и 11-13, и 137-139 в зрелом белке ТФ человека, причем указанная модификация делает указанный сайт нефункциональным; удаления всего домена или его части, ответственных за связывание с FVIIa; и введения мутации в домен, ответственный за связывание с FVIIa, которая приводит к существенно сниженной аффинности к FVIIa. Изобретение позволяет получить микровезикулу, снижающую время коагуляции. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 34 ил., 16 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Предложены варианты способа очистки жидкой композиции, содержащей рекомбинантный фактор VII, от вирусов. Композиция, подлежащая очистке, содержит, по меньшей мере, 5% рекомбинантного полипептида фактора VII в активированной форме. Очистку проводят с помощью нанофильтра с размером пор максимум 80 нм. Способы позволяют получать очищенный рекомбинантный полипептид фактора VII без разрушения его активной формы. 3 н. и 31 з.п. ф-лы, 1 ил., 6 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению высокоочищенных композиций рекомбинантных витамин К-зависимых белков, и может быть использовано для снижения примесей белка S в этих композициях. Способ предусматривает проведение стадии контактирования исходной композиции, содержащей рекомбинантный витамин К-зависимый белок, продуцируемый в условиях культивирования клеток, с твердофазным веществом, которое способно связывать этот витамин К-зависимый белок, и сбора получающейся вторичной композиции, содержащей этот витамин К-зависимый белок. После этого проводят контактирование вторичной композиции, полученной на предыдущей стадии, с твердофазным веществом, несущим аффинные лиганды, которое способно связывать белок S, в то время как рекомбинантный витамин К-зависимый белок не связывается с указанной твердой фазой и проскакивает хроматографическую колонку; и сбор получающейся композиции, содержащей рекомбинантный витамин К-зависимый белок. Изобретение позволяет уменьшить уровень белка S по меньшей мере в 2 раза. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 24 пр.

Изобретение относится к области медицины. Предложен пептидный конъюгат, содержащий гликозилированный пептид, который ковалентно связан с фрагментом полиэтиленгликоля (ПЭГ) через интактную гликозильную связывающую группу. Изобретение обеспечивает получение нового химического соединения, содержащего разветвленную молекулу ПЭГ, сиалильную связывающую группу и пептид с пониженной антигенностью. 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 10 пр.

Изобретение относится к способам получения терапевтически эффективного средства для лечения и/или улучшения состояния при диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови (ДВС), и касается способов лечения и/или улучшения состояния при ДВС у пациентов, активность антитромбина в плазме которых составляет 40% или менее. Сущность изобретения заключается в том, что используется тромбомодулин, полученный трансфекцией клеток-хозяев с помощью ДНК, кодирующей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:9 или 11. 9 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению вариантов домена Gla фактора VII человека и фактора VIIa человека, и может быть использовано в медицине. Получают аминокислотную последовательность варианта FVII или FVIIa, которая отличается по 1-15 аминокислотным остаткам по отношению к аминокислотной последовательности фактора VII человека (hFVII) или фактору VIIa человека (hFVIIa), в которой отрицательно заряженный аминокислотный остаток введен путем замены в положение 36. Полученные варианты FVII или FVIIa используют в составе композиции для лечения млекопитающих, имеющих заболевание или нарушение, где желательным является образование сгустка крови. Изобретение позволяет получить варианты FVII или FVIIa с повышенной свертывающей активностью и/или повышенной активацией фактора X по сравнению с природной формой hFVIIa. 3 н. и 39 з.п. ф-лы, 3 ил., 5 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению гамма-карбоксилированного белка, и может быть использовано в медицине. Витамин К-зависимый белок получают путем выделения после культивирования эукариотической клетки, содержащей экспрессирующий вектор, который содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую витамин К-зависимый белок и ассоциированные последовательности, контролирующие экспрессию. Ассоциированные последовательности содержат первый промотор и молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гамма-глутамилкарбоксилазу, и второй промотор. В качестве первого промотора используют предранний промотор цитомегаловируса человека (hCMV), а в качестве второго промотора - предранний промотор SV40. При этом соотношение экспрессии витамин К-зависимого белка и гамма-глутамилкарбоксилазы составляет от 10:1 до 250:1. Изобретение позволяет получить гамма-карбоксилированный витамин К-зависимый белок в промышленных масштабах. 4 н. и 25 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к выделению сериновых протеаз, содержащих GLA-остаток, и может быть использовано в медицине. Очищенную сериновую протеазу, содержащую GLA-остаток, получают путем культивирования клетки-хозяина млекопитающего, экспрессирующей указанную сериновую протеазу в культуральной среде, сбора культуральной среды, содержащей указанную сериновую протеазу, и очистки указанной сериновой протеазы от культуральной среды при рН от 4,5 до 6,9 или от 8,6 до 10 и концентрации свободных ионов кальция либо выше 20 мМ, либо ниже 1 мМ. Изобретение позволяет получить стабильный очищенный полипептид фактора VII, IX или X. 3 н. и 39 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению полипептидов фактора VII, и может быть использовано в медицине. Получают конъюгат полипептида фактора VII, включающий полипептид фактора VII с аспарагинсвязанными и/или серинсвязанными олигосахаридными цепями, которые включают фрагменты сиаловой кислоты или фрагменты галактозы. При этом по меньшей мере одна из олигосахаридных цепей ковалентно связана с по меньшей мере одной полимерной группой, представляющей собой полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу в диапазоне приблизительно 300-100000 Да. Полученный конъюгат фактора VII используют в составе фармацевтической композиции для лечения фактор VII-реактивного синдрома. Изобретение позволяет получить конъюгат фактора VII с ПЭГ с заданным характером гликозилирования для получения гомогенно модифицированного препарата. 4 н. и 18 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения фактора VII свертывания крови человека. Получают производные полипептида фактора VII с аминокислотными заменами Q250C, R396C и Р406С или с цистеином присоединенным к С-концу нативной последовательности фактора VII. Производные получают с использованием трансгенных технологий в эукариотических клетках-хозяевах млекопитающих. Изобретение позволяет получать производные фактора VII с сохраненной активностью коагуляционного фактора VII человека и с повышенной способностью конъюгировать с ПЭГ, по сравнению с природной формой полипептида. 7 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области белковой и генной инженерии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Предложены новые варианты фактора VII свертывания крови с повышенной протеолитической активностью, которая является результатом замены аминокислотного остатка, занимающего в природной последовательности положение, соответствующее Met 298 фактора VII человека, остатком глутамина. Варианты фактора VII по изобретению могут включать дополнительные замены в некоторых других положениях протеазного домена и представлять многосайтовые мутантные формы, в частности [V158T/M298Q]-FVIIa, [V158D/M298Q]-FVIIa, [V158D/E296V/M298Q]-FVIIa и [V158D/E296V/M298Q/K337A]-FVIIa. Новые варианты фактора VII получены с помощью метода рекомбинантных ДНК, для реализации которого предложены кодирующие нуклеотидные последовательности, векторные конструкции и трансформированные клетки. Изобретение раскрывает возможность использования новых мутантных форм фактора VII для получения лекарственных препаратов с коагулянтной активностью. 7 н. и 13 з.п.ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Настоящее изобретение относится к области белковой и генетической инженерии и может быть использовано в медицине. Предложены варианты полипептида фактора коагуляции VII человека, которые характеризуются повышенной, по сравнению с природной формой фактора VIIa, коагулянтной активностью и при этом не нуждаются в индукции тканевым фактором для ее проявления. В структурном отношении новые варианты фактора VII представляют собой аминокислотную последовательность природного белка, содержащую замену L305 Val/Tyr/Ile, и одну или несколько замен из группы, включающей К337 Ala/Gly/Val/Ser//Thr/Asn/Gln/Asp/Glu; V158 Ser/Thr/Asn/Gln/Asp/Glu; E296 Arg/Lys/Val и М298 Lys/Arg/Gln/Asn. Описаны генетические конструкции и системы экспрессии для получения предложенных вариантов фактора VII с помощью технологии рекомбинантных ДНК, а также применение новых полипептидов в составе фармацевтических композиций, которые могут быть использованы в частности для лечения кровотечений и поддержания системы свертывания крови в норме. 9 н. и 22 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к новым соединениям общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемым солям, где G представляет собой глицин, D представляет собой аспарагиновую кислоту, R _i представляет собой -(СН₂) _n- или -(СН₂)_n -С₆Н₄-, где n представляет собой положительное целое число от 1 до 10, h представляет собой положительное целое число 1 или 2, X₁ представляет собой аминокислотный остаток, причем указанная аминокислота имеет функциональную боковую цепь, такую как амин, Х ₂ и Х₄ независимо представляют собой аминокислотный остаток, способный к образованию дисульфидной связи, Х₃ представляет собой аргинин или N-метиларгинин, Х₅ представляет собой гидрофобную аминокислоту, представляющую собой фенилаланин, Х ₆ представляет собой и Х₇ отсутствует или представляет собой биомодифицирующую группировку, состоящую из монодисперсной ПЭГ-подобной структуры,

Настоящее изобретение относится к улучшенным хелатным конъюгатам формулы

где каждый R¹, R ² и R³ независимо представляет собой группу R; Y представляет собой -(A)_n-X-Z, где Х представляет собой -NH-, -CO₂-, -N(C=O)-; Z представляет собой биологическую группировку для направленной доставки, которая выбрана из 3-20-членного пептида, субстрата фермента, ингибитора фермента или синтетического связывающегося с рецептором соединения; -(А)_n- представляет собой линкер, где каждый А независимо представляет собой -CR ₂-, -NRCO-, -CONR-, -CR₂OCR ₂- или группировку полиалкиленгликоля; n представляет собой целое число, имеющее значение от 2 до 10; каждая группа R независимо представляет собой Н или С_1-10алкил, или 2 группы R вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют C_3-6карбоциклическое насыщенное кольцо. Комплексы с радиоактивными металлами пригодны в качестве радиоактивных фармацевтических препаратов, в особенности с ^99mTc. 7 н. и 21 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 ил.