n-имидазолильные производные замещенного индола, способ их получения и фармацевтическая композиция

Формула изобретения

1. N-имидазолильные производные замещенного индола общей формулы I



где p 1 или 2;

А -прямая C₁-C₄-алкиленовая цепь;

В простая связь или прямая насыщенная C₁-C₄ углеводородная цепь;

Q прямая или разветвленная насыщенная C₁-C₄ углеводородная цепь;

каждый из R₁ и R₂ независимо водород или галоген;

каждый из R₃ и R₅ независимо водород или C₁-C₄-алкил;

R₄ -OR₆ или -N(R₆R₇)-группа, в которой каждый из R₆ и R₇ независимо водород или C₁-C₄- алкил,

и их фармацевтически приемлемые соли.

2. N-имидазолильные производные по п.1, в которых р 1 или 2;

А -CH₂- или -CH₂-CH₂-;

В простая связь или -CH₂-;

Q -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-; -CH₂-C(CH₃)₂-, -CH₂-CH₂-C(H₃)₂-;

каждый из R₁ и R₂ независимые водород или галоген;

R₃ C₁-C₄-алкил;

R₅ водород;

R₄ -OR₆ или NHR₆, где R₆ водород или C₁-C₄-алкил,

и их фармацевтически приемлемые соли.

3. N-имидазолильные производные по п.1, в которых Р 1 или 2;

А -CH₂-;

В простая связь или -CH₂-;

Q -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂- или -CH₂-C(CH₃)₂-;

R₂ и R₅ водород;

R₃ C₁-C₄-алкил;

R₁- галоген;

R₄ -OR₆ или NHR₆, где R₆ водород или C₁-C₄-алкил,

и их фармацевтически приемлемые соли.

4. N-имидазолильные производные по п.1, выбранные из группы, состоящей из следующих соединений: 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2-пропановая кислота; 5,7-дифтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2-пропановая кислота; 5-фтор-1-[[3-(1Н-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2-пропановая кислота; 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2-пропановая кислота; этиловый эфир 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2-пропановая кислота; 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2-пропанамид; 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил]-, , 3,3-триметил-1Н-индол-2- -пропановая кислота; 5,7-дифтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -, , 3,3-триметил-1Н-индол-2-пропановая кислота; 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2-бутановая кислота; этиловый эфир 5-фтор-1-[[4-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2 бутановой кислоты; 5-фтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -, , 3-метил-1Н-индол-2-бутановая кислота; 5,7-дифтор-1-[[4-(1Н-имидазол-1-ил)фенил] метил] -, , 3-триметил-1Н-индол-2-бутановая кислота, и их фармацевтически приемлемые соли.

5. Способ получения N-имидазолильных производных замещенного индола формулы I



где Р 1 и 2;

А прямая C₁-C₄- алкиленовая цепь;

В простая связь или прямая насыщенная C₁-C₄-углеводородная цепь;

Q прямая или разветвленная насыщенная C₁-C₄-углеводородная цепь;

каждый из R₁ и R₂ независимо -водород или галоген;

каждый из R₃ и R₅ независимо водород или C₁-C₄-алкил;

R₄ -OR₆- или -N(R₆R₇)-группа, в которой каждый из R₆ и R₇ независимо водород или C₁-C₄- алкил,

или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что соединение формулы II или его соль



где P, Q, R₁, R₃ и R₄ имеют указанные значения, подвергают реакции с соединением формулы III



где A, B, R₂ и R₅ имеют указанные значения;

Y удаляемая группа, и, если необходимо, превращают соединение формулы I в другое соединение формулы I, и/или, если необходимо, превращают соединение формулы I в его соль, и/или, если необходимо, превращают соль соединения формулы I в свободное соединение, и/или, если необходимо, разделяют смесь изомеров соединения формулы I на отдельные изомеры.

6. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора TxA₂- синтазы и/или антагониста PCH₂/TxA₂- рецептора, включающая подходящий носитель и/или разбавитель и активный агент, отличающаяся тем, что в качестве активного агента композиция содержит эффективное количество N-имидазолильного производного замещенного индола, охарактеризованного в п.1, или его фармацевтически приемлемой соли.

7. N-имидазолильные производные по п.1 или их фармацевтически приемлемые соли, обладающие активностью ингибитора ТxA₂- синтазы и/или антагониста PCH₂/TxA₂- рецептора.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к новым N-имидазолильным производным замещенного индола, к способу их приготовления, к содержащим их фармацевтическим соединениям и к их использованию в качестве терапевтических средств.

Настоящим изобретением являются новые соединения, имеющие общую формулу (1)

(I)

в которой p представляет собой целое число от 1 до 4;

A представляет собой прямую или разветвленную С₁-C₄ алкиленовую цепь;

B представляет собой простую связь, прямую или разветвленную, ненасыщенную или насыщенную С₁-C₄ углеводородную цепь;

Q представляет собой прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную С₁-С₉ углеводородную цепь, либо указанная цепь прерывается атомом кислорода;

каждый из R₁ и R₂, независимо, представляет собой водород, С₁-C₄ алкил, С₁-C₄ алкокси, С₁-C₄ алкилтио, С₁-C₄ алкилсульфонил, галоген, либо тригалометил;

каждый из R₃ и R₅, независимо, представляет собой водород или С₁-C₄ алкил;

R₄-представляет собой -OR₆ или -N(R₆R₇) группу, в которой каждый из R₆ и R₇, независимо, представляет собой водород, С₁-C₄ алкил, фенил или бензил; и их фармацевтически приемлемые соли.

Изобретение включает также в свой объем всевозможные изомеры, стереоизомеры и их смеси, и метаболиты, и предшественники метаболитов или биопредшественники соединений, формулы (I).

Если p больше 1, то заместители R₁ могут быть либо одинаковыми, либо различными.

Алкильная, алкоксил, алкилтио и алкилсульфонильная группы могут быть разветвленноцепными, либо прямоцепными группами.

Группа С₁-C₄ алкил представляет собой, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил или трет-бутил, предпочтительно метил или этил.

С₁-C₄ алкокси группа представляет собой, например, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси или третбутокси, предпочтительно метокси, этокси или пропокси группы.

Группа C₁-C₄ алкилтио представляет собой, например, метилтио, этилтио, пропилтио или бутилтио, предпочтительно метилтио или этилтио.

C₁-C₄ алкилсульфонильная группа представляет собой предпочтительно метилсульфонил.

Атом галогена означает бром, хлор или фтор, предпочтительно бром или фтор.

Прямая либо разветвленная C₁-C₄ алкиленовая цепь представляет собой, например, -CH₂-, -CH₂-CH₂-, или -CH(CH₃)-CH₂-, в частности -CH₂-CH₂-.

Тригалоидометильная группа представляет собой, например, трихлорметил или трифторметил, предпочтительно трифторметил.

Прямая или разветвленная, насыщенная или ненасыщенная C₁-C₄ углеводородная цепь представляет собой, например, одну из цепей -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-, CH(CH₃)-CH₂- или -CH=CH-, в частности -CH₂- или -CH₂-CH₂-.

Прямая или разветвленная, насыщенная или ненасыщенная C₁-C₉ углеводородная цепь представляет собой, например, -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-, -CH₂-CH(CH(CH₃)-CH₂, -CH(CH₃)-CH(CH₃)-, -CH= CH- или -CH=CH-CH₂-.

Если указанная углеводородная цепь прерывается атомом кислорода, то таким образом образованная цепь представляет собой предпочтительно -CH₂-O-CH₂- или -CH₂-CH₂-O-CH₂-.

Фармацевтически приемлемые соли соединений по изобретению включают кислотно-аддитивные соли с неорганическими кислотами, например: с азотной, соляной, бромистоводородной, серной, хлорной и фосфорной кислотами, либо с органическими кислотами, например: с уксусной, пропионовой, гликолевой, молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной и салициловой кислотами, а также соли с неорганическими основаниями, например с щелочными металлами, особенно с натрием или калием, основными или щелочноземельным металлом, особенно с кальцием или магнием, либо с органическими основаниями, например алкиламинами, предпочтительно с триэтиламином, или с основными аминокислотами природного происхождения, предпочтительно с аргинином.

Как указано выше, настоящее изобретение включает также в свой объем фармацевтически приемлемые биопредшественники (известные также как пролекарства) соединений формулы (I), то есть соединения, которые имеют формулу, отличающуюся от вышеприведенной формулы (I), но которые, тем не менее, при введении в человека превращаются непосредственно или опосредованно in vivo в соединение формулы (I)

Предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I), в которой,

p представляет собой 1 или 2;

А представляет собой -CH₂- или -CH₂-CH₂-;

B представляет собой простую связь либо -CH₂-;

Q представляет собой -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-, -CH₂-C(CH₃)₂-, -CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-, -CH₂-O-CH₂-, -CH₂-CH₂-O-CH₂-;

каждый из R₁ и R₂ представляет собой независимо водород, С₁-C₄ алкил, галоген либо трифторметил;

R₃ представляет собой С₁-C₄ алкил;

R₅ представляет собой водород;

R₄ представляет собой -OR₆ или NHR₆, где R₆ означает водород, либо С₁-C₄ алкил, и их фармацевтически приемлемые соли.

Более предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I), в которой:

p представляет собой 1 или 2;

A представляет собой -CH₂-;

B представляет собой простую связь либо -CH₂-;

Q представляет собой -CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH₂-, -CH₂-C(CH₃)₂-, -CH=CH- или -CH₂-O-CH₂-;

R₂ и R₅ представляют собой водород;

R₃ представляет собой C₁-C₄ алкил;

R₁ представляет собой галоген или трифторметил;

R₄ представляет собой -OR₆ или NHR₆, где R₆ означает водород либо С₁-C₄ алкил; и фармацевтически допустимые их соли.

Примеры предпочтительных соединений формулы (I) представлены ниже:

1) 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-ме тил-1H-индол-2-пропановая кислота;

2) 5,7-дифторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н -индол-2-пропановая кислот;

3) 5-фторо-1-[[(3-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1Н -индол-2-пропановая кислотa;

4) 5-фторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-илметил)фенил] метил] -3-метил-1Н -индол-2-пропановая кислота;

5) Этиловый эфир 5-фторо-1-[[(4-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3 -метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты;

6) 5-фторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3 -метил-1Н-индол-2-пропанамид;

7) 5-фторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-, , 3-триметил-1Н-индол-2-пропановая кислота;

8) 5,7-дифторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-, , 3-триметил-1Н-индол-2-пропановая кислота;

9) 5-фторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3 -метил-1Н-индол-2-бутановая кислота;

10) Этиловый эфир 5-фторо-1-[[(4-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н -индол-2-бутановой кислоты;

11) 5-фторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-, , 3-триметил-1Н-индол-2-бутановая кислота;

12) 5,7-дифторо-1-[[(4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -, , 3-триметил-1Н-индол-2-бутановая кислота; и их фармацевтически приемлемые соли.

Структурные формулы вышеперечисленных соединений, согласно их порядковому номеру, представлены в следующей таблице 1.

Соединения по изобретению и их соли можно получить способом, включающим:

a) взаимодействие соединения формулы (II) или его соли

(II)

где p, Q, R₁, R₃ и R₄ определены выше, с соединением формулы (III)

(III)

где А, В, R₂ и R₅ определены выше и Y представляет собой отщепляющую группу; или

б) взаимодействие соединения формулы (IV)

(IV)

в которой p, A, B, R₁, R₂ и R₅ определены выше, с соединением формулы (V)

(V)

в которой Q, R₃ и R₄ определены выше; или

c) взаимодействие соединения формулы (VI) либо его соли

(VI)

в которой p, A, B, Q, R₁, R₂, R₃, R₄ определены выше, и Y представляет собой отщепляющуюся группу, с имидазолом, C₁-C₄ алкилимидазолом либо его солью, и, если нужно, превращение соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I) и/или, если нужно, превращение соединения формулы (I) в его соль и/или, если нужно, превращение соли соединения формулы (I) в свободное соединение и/или, если нужно, разделение смеси изомеров соединения формулы (I) на определенные изомеры.

Отщепляющаяся группа V в соединение формулы (III) или формулы (VI) означает предпочтительно галоген, например бром или хлор, либо мезильную или тозильную группы.

Реакцию соединения формулы (II) или его соли с соединением формулы (III) можно провести, используя сильное основание, такое как гидроксид натрия, трет-бутилат калия, гидрид калия, магний-бромэтил или гексаметил-дисилазид калия в присутствии подходящего органического растворителя, такого как диметилформами, диметилацетамид, тетрагидрофуран, толуол, ацетат, бензол или их смесь, при температуре в диапазоне от примерно -20^oС до примерно 50^oС.

Реакцию соединения формулы (IV) с соединением формулы (V) можно провести, используя стандартные условия индольного синтеза по Фишеру (хорошо известная реакция, описанная, например, в "Heterocyclic Compounds", 25, parts I, II and III, W.J.Houlihan, ed. Interscience, John Wiley of Sons, New Jork, 1979), работая, например, при температуре флегмы в каком нибудь органическом растворителе, например алканоле, в частности метаноле, этаноле, изопропиловом спирте, бензоле или толуоле. Реакцию можно проводить в присутствии кислотного катализатора, например сильной неорганической кислоты, в частности серной кислоты или соляной кислоты.

Реакцию соединения формулы (VI) или его соли с имидазолом или C₁-C₄ алкилимидазолом можно проводить в присутствии основания, такого как триэтиламин, или предпочтительно используя избыток имидазола либо алкилимидазола.

Если соединение формулы (VI) или его соль взаимодействует с солью имидазола или C₁-C₄ алкилимидазолом, то соль последнего из упомянутых соединений представляет собой, например, соль калия или натрия, и для протекания реакции не требуется присутствия какого-либо дополнительного основного реагента.

Реакцию проводят в присутствии подходящего органического растворителя, такого как этанол, метанол, диметилформамид, диметилацетамид, или вообще в отсутствии растворителя, например при синтезе с избытком имидазола или C₁-C₄ алкилимидазола, при температуре в диапазоне от примерно 70^oС до примерно 170^oС. Если в соединении формулы (VI) В означает простую связь, то реакцию можно проводить в условиях радикального механизма, используя в качестве катализатора Cu₂Br₂ или порошок меди.

Соединение формулы (I) можно превратить, если нужно, в другое соединение формулы (I).

Эти необязательные превращения могут проводиться известными методами.

Соединение формулы (I), содержащее эстерифицированную карбоксильную группу, может быть преобразовано в соединение формулы (I), содержащее свободную углеродную группу, путем кислотного или щелочного гидролиза, проводимого при температурах в диапазоне от комнатной температуры до температуры примерно 100^oC.

Cоединение формулы (I), содержащее свободную карбоксильную группу, может быть преобразовано в соединение формулы (I), содержащее эстерифицированную карбоксильную группу, путем эстерификации, например через соответствующий галоидангидрид, например хлорид, проводя реакцию с избытком подходящего C₁-C₄ алкилового спирта, либо через прямую эстерификацию путем кислотного катализатора в присутствии безводного HCl, SOCl₂ или BF₃-этерата.

Соединение формулы (I), содержащее свободную или эстерифицированную карбоксильную группу, может быть преобразовано в соединение формулы (I), содержащее -CONR₆R₇ группу, в которой R₆ и R₇ определены выше. Соответственно преобразование эстерифицированной карбоксильной группы в соответствующий амид может быть выполнено по прямой реакции с аммиаком, либо с соответствующим амином в подходящем апротонном растворителе, например в простом эфире или бензоле, либо используя избыток амина как растворителя, при температуре в диапазоне от комнатной до температуры флегмы.

Превращение свободной карбоксильной группы в соответствующий амид можно выполнить через промежуточные реакционные производные, которые можно либо выделять, либо нет.

Промежуточные реакционные производные могут представлять собой активные сложные эфиры, например NO₂-фенильные сложные эфиры, или N-гидроксисукцимидные сложные эфиры, галоидангидриды, предпочтительно хлорид, смешанные ангидриды, например этоксикарбонил или трет-бутилкарбониловые ангидриды, либо реакционные промежуточные соединения, полученные in situ по реакции кислоты с дициклогексилкарбодиимидом или карбонилдиимидазолом. Реакционные промежуточные соединения, полученные известными способами, обычно применяемыми при синтезе пептидов, контактируют с аммиаком или с соответствующим амином в подходящем растворителе, либо с избытком самого амина при температурах в диапазоне от примерно -10^oС до примерно 50^oС.

Необязательное получение соли соединения формулы (I), а также преобразование соли в свободное соединение и разделение смеси изомеров на отдельные изомеры можно выполнить известными способами.

Например, разделение смеси геометрических изомеров, например цис- и транс- изомеров, можно выполнить путем фракционной кристаллизации из подходящего растворителя, или с помощью хроматографии, либо хроматографии на колонке, либо с помощью жидкофазной хроматографии высокого давления.

Соединение формулы (II) можно получить контактированием соединения формулы (VII)

(VII)

в которой R₁ и p определены выше, с соединением формулы (V), которая определена выше, используя стандартные условия индольного синтеза по Фишеру, как описано выше.

Соединение формулы (III) можно получить контактированием соединения формулы (VIII)

(VIII)

в которой B и Y определены выше, Т представляет собой простую связь, либо прямую или разветвленную C₁-C₃ алкиленовую цепь, и R представляет собой низшую, например C₁-C₄ алкильную группу, с имидазолом, C₁-C₄ алкилимидазолом или его солью.

Реакцию можно провести в присутствии основания, такого как триэтиламин, или предпочтительно используя избыток имидазола или C₁-C₂ алкилимидазола в подходящем органическом растворителе, в таком как этанол, метанол, диметилформамид, диметилацетамид, или вообще при отсутствии растворителя, например при синтезе с избытком имидазола или C₁-C₄ алкилимидазола, при температурах в диапазоне от около 70^oС до примерно 165^oС.

Если нужен катализатор, то в вышеуказанной реакции дополнительно можно использовать, например, CuBr или Cu.

Таким образом, полученный сложный эфир, содержащий имидазольное кольцо, можно превратить обычными и хорошо известными способами в соединение формулы (III), например, восстановлением с LiAlH₄ и галогенированием, таким образом полученных спиртов, с SOCl₂, SOBr₂ или PCl₅.

Альтернативно, соединение формулы (III), в которой В представляет собой простую связь и А представляет собой -CH₂-, можно получить контактированием соединения формулы (IX)

(IX)

в которой R₂ и Y определены выше, и в которой R" и R"" представляют собой C₁-C₆ алкильные группы, либо взятые вместе они образуют 1,3-диоксолановое, либо 1,3-диоксановое кольцо, с имидазолом, C₁-C₄ алкилимидазолом или, предпочтительно, с их солями натрия или калия, в присутствии катализатора, например Сu₂Br₂ или порошка меди, используя подходящий органический растворитель, такой как диметилформамид, диметилацетамид или диметоксиэтан, при температурах в диапазоне от примерно 100^oС до примерно 200^oС. Таким образом, полученный замещенный бензальдегидкеталь может быть преобразован в соединение формулы (III) хорошо известными способами, например гидролизом ацетальной группы в кислотных условиях, восстановлением альдегида с NaBH₄ или c LiAlH₄ и галогенированием с SOCl>₂ или SOBr₂.

Соединение формулы (IV) получают, следуя хорошо известным способам N-алкилирования фенилгидразинов, используя соединения формулы (III) в качестве алкилирующих реагентов.

Соединение формулы (VI) можно получить контактированием соединения формулы (II) с соединением формулы (X)

(X)

в которой Е представляет собой либо Y, как определено выше, либо химический предшественник В-Y группы, в которой В и Y определены выше, получая таким образом, соответственно, соединение формулы (VI), в которой В означает прямую связь, или, после преобразования химического предшественника в В-Y группу хорошо известными в данной области способами, получают соединение формулы (VI), в которой В означает C₁-C₄ углеводородную цепь.

Химический предшественник группы В-Y может быть, например, кетальной или сложноэфирной группой, хорошо известной в данной области.

Соединения формулы (V), (VII), (VIII), (IX) и (X) представляют собой хорошо известные соединения, их можно получить методами, хорошо известными в органической химии.

Если в промежуточных соединениях согласно настоящему изобретению присутствуют группы, которые могут мешать проведению описанных здесь реакций, то эти группы могут быть защищены до проведения реакции, и затем защита может быть снята в конце реакции известными способами, например, способами, применяемыми в химии пептидов.

Фармакология.

Тромбоксан (ТхА₂) является производным метаболизма арахидовой кислоты, который соединяет тромбоциты и усиливает их восприимчивость к другим разнообразным агрегирующим реагентам.

Кроме того, ТxA₂ сужает сосуды, бронхиальные и трахеальные гладкие мышечные клетки и улубочковые мезангиальные клетки.

Поэтому ТхА₂ участвует в разнообразных патологиях, таких как: сердечно-сосудистые заболевания (инфаркт миокарда и ангина), цереброваскулярные заболевания (припадок, преходящее нарушение мозгового кровообращения и мигрень), периферические сосудистые заболевания (микроангиопатия), почечные заболевания (гломерулосклероз, волчаночный нефрит, диабетическая нефропатия), респираторные болезни (бронхостеноз и астма), и, более того, обычно участвует в антеросклерозе.

ТхА₂ оказывает влияние на тромбоциты и гладкие мышечные клетки путем занятия рецептора (или рецепторов), рецептора (или рецепторов) ТхА₂.

Действия ТхА₂ можно нейтрализовать реагентами, имеющими противоположные свойства для рецепторов TxA₂, и/или реагентами, инбигирующими ферменты, участвующие в синтезе ТxA₂, в частности ингибирующими ТхA₂-синтазу, которая катализирует образование ТхА₂ из циклических эндопероксидов простагландина G₂ и из простагландина H₂, без влияния на синтез других простагландинов.

Можно ожидать, что реагенты, которые ингибируют действие ТхA₂ за счет антагонизма по отношению к ТxA₂ и/или из-за замедления синтеза ТxA₂-синтазы, представляют терапевтическую ценность для лечения вышеупомянутых болезней и других патологических состояний, в которых участвует ТхA₂.

Предполагают, что соединения настоящего изобретения, которые обладают этими свойствами, эффективны в лечении болезненных состояний, при которых увеличение синтеза ТхA₂ приводит к проявлению патогенных эффектов, таких, например, как упомянутые выше.

Методы

Было оценено влияние представительной группы соединений этого изобретения, по сравнению с влиянием известных соединений, на ингибирование синтеза ТхА₂ in vitro, в цельной крови нормальных крыс, и на антагонизм к ТхA₂ в пробе по связыванию в промытых тромбоцитах человека.

Ингибирование синтеза ТхB₂

Кровь брали из брюшной аорты нормальных крыс Sprague Dawley (Чарльз Ривер, Италия) при легкой анестезии простым эфиром. Затем, кровь немедленно делили на порции по 0,5 мл и помещали в стеклянные пробирки, каждая из которых содержала некоторую концентрацию испытываемого соединения или эталонного соединения.

Затем образцам давали возможность свертываться в течение 1 часа при температуре 37^oС, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин, сыворотку собирали и хранили при температуре -20^oС до дальнейших анализов. Уровни ТхB₂ определяли радиоиммуноанализом согласно ранее описанным методам (Thromb. Res. 17, 3/4, 317, 1980), используя высокочувствительное антитело.

Замещение меченных тритием [³H]-SQ 29548, связанных с промытыми тромбоцитами человека

Кровь здоровых добровольцев обоих полов, которые не принимали никаких медикаментов в течение последних 10 дней, помещали в одну десятую объема кислой цитрат-декстрозы, содержащей индометацин (28 мкмоль/л). Обогащенную тромбоцитами плазму (PRP), полученную центрифугированием крови при 200g в течение 20 минут, промывали дважды (1000g в течение 10 мин). Затем тромбоциты повторно суспендировали в буфере Тирода-Гепеса (pH 7,4) до получения окончательной концентрации 5-10х10^-8 клеток/мл и инкубировали в течение 0-60 мин при температуре 25^oС с [³H]-SQ 29548 (5 наномоль/л). В экспериментах по замещению добавляли различные концентрации (10^-9-10^-4моль/л) конкурирующих лигандов и инкубировали в течение 30 мин при температуре 25^oС. Неспецифичные связывания определяли в присутствии 50 мкмоль/л U46619 и они составляли, примерно 5% от общего числа связываний помеченных тритием [³H]-SQ 29548. После инкубации в каждую пробирку добавляли 4 мл охлажденного льдом Трис-НСl буфера (10 миллимоль/л, 7,4 pH), и затем реакционную связь сразу же фильтровали путем просасывания через стеклянный дисковый фильтр Ватмана GF/C, который промывали 2 раза охлажденной льдом Трис-HCl и измеряли на радиоактивность -счетчиком Паккарда.

Данные по связыванию анализировали с помощью компьютерной нелинейной кривой совпадения, используя программу Лиганд, и выражали их в единицах концентрации ингибирования IC₅₀.

В таблице 2 для примера сравниваются результаты, полученные в тестах по связыванию (промытых тромбоцитов человека) с показательными соединениями изобретения, имеющих внутренние коды FCE 27005 и FCE 27093, с результатами, полученными с эталонными стандартными соединениями, ВМ 13505 и ВМ 13177 (Naunyn Schmideberg"s Arch. Pharmacol 1986, 332 (Suppl) Abst 144 SR. 36; Cardiovasc. Drug. Rw. 1988, 6:20-34).

Эти результаты показали, что соединения FCE 27005 и FCE 27093 имеют большее сродство к рецептору, чем соединения ВМ 13505 и ВМ 13177.

В таблице 3 для примера сравниваются результаты, полученные с соединениями изобретения, имеющими внутренний код FCE 27093, по их влиянию на синтез TxB₂ в нормальных крысах, с результатами, полученными с эталонными стандартными дазоксибеном и ASA; предельные значения, если они были рассчитаны, указаны в скобках.

В приведенных выше таблицах 2 и 3 внутренний код FCE 27005 означает 5-фтор-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил-3-метил-1Н-индол-2 -пропановую кислоту, внутренний код FCE 27093 означает 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил-3-метил-1Н-индол-2 -бутановую кислоту и ASA означает ацетилсалициловую кислоту.

Поскольку соединения настоящего изобретения являются и ингибиторами синтеза ТxA₂, и антагонистами PGH₂/TxA₂-тромбоцитах, на основе знаний в данной области, как сообщалось, например, в J.Clin.Invest 80, 1435 (1987) и в Adv. Prostaglandins, Thromboxanes, Leukotrienes Res. Vol.17 (1987) p.49, эти соединения являются особенно подходящими для лечения болезненных состояний, в которых увеличение синтеза ТхA₂ проявляет свое патогенное действие, например указанное выше.

В частности, при лечении почечной недостаточности соединения изобретения могут использоваться вместе с ферментным ингибитором, преобразующим ангиотензии (АСЕI), как при раздельном, так и по существу при совместном введении. Соединения изобретения можно также использовать для профилактики или для лечения, вызванного циклоспорином-А нефроза у млекопитающих.

Соединения изобретения могут также использоваться вместе с растворяющими тромб реагентами (например, tPA (терефталевая кислота), стрептокиназа, проурокиназа), для того чтобы уменьшить требуемую дозу последних при тромболитической терапии, и для того чтобы снизить возможность реокклюзии и возможно кровотечения.

Дальнейшее применение соединений изобретения заключается в предотвращении и/или при лечении рестеноза после ирезкожной пластической операции на сосудах.

Токсичность соединений изобретения незначительна, поэтому они могут безопасно использоваться в терапии. Мышей и крыс, которым предварительно не давали пищу в течение девяти часов, обрабатывали перорально отдельными введениями с возрастающими дозами соединений изобретения, и затем помещали в клетку и нормально кормили.

Ориентировочную острую токсичность (ЛД₅₀) определяли на седьмой день после обработки.

В виду их высокой активности соединения изобретения могут безопасно использоваться в медицине. Схему лечения для различных клинических синдромов нужно подстраивать под тип патологии, принимая во внимание, как обычно, также путь введения лекарственного соединения, форму, в которой это соединение вводят, а также возраст, вес и состояние больного. Пероральный путь используют вообще во всех случаях, где нужны такие соединения. Предпочтение отдают внутривенным инъекциям или вливаниям для лечения острых патологических соединений.

Для поддерживающих схем лечения пероральный или парентеральный, например внутримышечный способ, являются предпочтительными.

Величина дозы, приемлемая для перорального введения для взрослого человека соединений изобретения, например 5-фторо[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил-3-метил-1Н-индол-2 -пропановой кислоты, может лежать в диапазоне от около 50 мг до примерно 500 мг на одну дозу, применяемую от 1 до 3 раз в день.

Конечно, эта схема приема лекарственных средств может подстраиваться для обеспечения оптимальной терапевтической ответной реакции.

Природа фармацевтических смесей, содержащих соединения этого изобретения вместе с фармацевтически допустимыми носителями или растворителями будет зависеть от желаемого пути введения. Состав может быть приготовлен известным способом с обычными ингредиентами. Например, соединения изобретения можно вводить в форме водных или масляных растворов, суспензий, таблеток, пилюль, желатиновых капсул, сиропов, капель или суппозиториев.

Таким образом, для перорального введения, фармацевтические смеси, содержащие соединения этого изобретения, представляют собой, предпочтительно, таблетки, пилюли или желатиновые капсулы, которые содержат активное вещество наряду с растворителями, такими как лактоза, декстроза, сахароза, маннит, сорбит, целлюлоза; смазки, например кремнозем, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция, и/или полиэтиленгликоли; либо они также могут содержать связующие вещества, такие как крахмал, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гуммиарабик, трагакант, поливинилпирролидон; дезинтегрирующие реагенты, такие как крахмал, альгиновая кислота, альгинаты, крахмалгликолят натрия, вспенивающиеся смеси; пищевые красители; подслащивающие вещества; смачивающие реагенты, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; нетоксичные и фармацевтически неактивные вещества, используемые в фармацевтических прописях. Указанные фармацевтические препараты могут быть получены известными способами, например процессами смешивания, гранулирования, таблетирования, покрытия сахаром или покрывания пленкой. Жидкими дисперсиями при пероральном введении могут быть, например сиропы, эмульсии или суспензии.

Сиропы могут содержать в качестве носителя, например, сахарозу или сахарозу с глицерином, и/или маннит, и/или сорбит.

Суспензии и эмульсии могут содержать в виде носителя, например, натуральную смолу, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт.

Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать наряду с активным соединением, фармацевтически допустимый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например пропиленгликоль, и, если нужно, подходящее количество лидокаингидрохлорида.

Растворы для внутривенных инъекций или вливаний могут содержать в виде носителей, например, стерильную воду или, предпочтительно, они могут быть в форме стерильных водных изотонических солевых растворов.

Суппозитории могут содержать наряду с активным соединением фармацевтически допустимый носитель, например масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активное вещество на основе полиоксиэтиленсорбитанового сложного эфира жирной кислоты или лецитин.

Следующие примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.

Пример 1

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1H-индол-2- пропановая кислота.

Раствор 198 мг 5-фторо-3-метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты в 20 мл сухого N, N-диметилформамида (ДМF) охлаждают при 0^oС, и обрабатывают 155 мг 55% раствора NaH. Реакционную смесь размешивают в течение 60 мин при температуре 0^oС, затем порциями добавляют 307 мг 1-[4-(хлор-метил)фенил]-1Н-имидазол гидрохлорида под азотом при 0^oС. После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 часов, смесь вливают в воду и промывают метиленхлоридом. Водный раствор нейтрализуют разбавленной соляной кислотой НСl и экстрагируют добавлением метиленхлорида. Органический слой высушивают над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток, размешанный с ацетоном, фильтруют и высушивают, получая при этом 35 мг вышеуказанного соединения (т.пл. 222^oС).

Я. М. Р. (ДМСО-д6) в миллионных долях: 2,20 (3H, c. CH₃), 2,37 (2H, м. -COOH), 2,95 (2H, м. -CH₂-COOH), 5,47 (2H, c. NCH₂), 6,80-7,65 (9H, м. бензол Н и ), 8,16 (1H, c. ).

Аналогично могут быть приготовлены следующие соединения: 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-илметил)фенил] метил]-3-метил-1H-индол-2 -пропановая кислота, т.пл. 192^oС.

Я. М. Р. (ДМСО-д6) в миллионных долях: 2,17 (3Н, с. СН₃), 2,33 (2H, м. -COOH), 2,90 (2H, м. -CH₂-COOH), 5,10 (2H, c. -имидазол), 5,39 (2H, c. ), 6,75-7,30 (9H, м. бензол Н и ), 7,68 (1H, c. ).

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1H-индол-2 -бутановая кислота, т.пл. 192-193^oС.

Я. М. Р. (ДМСО-д6) в миллионных долях: 1,7 (2H, м. -CH₂-COOH), 2,20 (3H, c. CH₃), 2,25 (2H, м. -COOH), 2,25 (2H, м. CH₂COOH), 2,74 (2H, м. -CH₂-COOH), 5,45 (2H, c. NCH₂), 6,70-7,7 (9H, м. бензол Н и ), 8,11 (1H, c. ).

5,7-дифторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1H -индол-2-пропановая кислота;

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазо-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1H -индол-2-пропановая кислота;

5-бромо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1H -индол-2-пропановая кислота;

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил] , ,, 3-триметил-1Н-индол-2-пропановая кислота;

5-бромо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] , , 3-триметил-1H-индол-2-пропановая кислота;

5,7-дифторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] , ,, 3-триметил-1H-индол-2-пропановая кислота;

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] , ,, 3-триметил-1H-индол-2-бутановая кислота;

5-хлоро-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] , ,, 3-триметил-1H-индол-2-бутановая кислота;

5,7-дифторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] , ,, 3-триметил-1H-индол-2-бутановая кислота.

5-фторо-3-метил-1H-индол-2-пропановую кислоту, примененную выше, можно приготовить следующим образом:

Смесь изопропилового эфира 5-фторо-3-метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты (0,42 г), 1Н. раствор гидрооксида натрия (6,3 мл) и метанол (20 мл) размешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь вливают в воду, промывают метиленхлоридом, подкисляют 1Н. раствором соляной кислоты НСl и экстрагируют метиленхлоридом. Органический слой, высушенный и выпаренный, дает 0,36 г 5-фторо-3-метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты.

Изопропиловый эфир 5-фторо-3-метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты, использованный выше, может быть приготовлен следующим образом:

Смесь 1-(-4-фторфинил)гидразин гидрохлорида (1,03 г), этилового эфира 4-оксо-гексановой кислоты (1,0 г), 2-пропанола (25 мл) и H₂SO₄ кипятят с обратным холодильником под азотом в течении 9 часов. После охлаждения, смесь вливают в водный раствор NaHCO₃, экстрагируют добавлением АсОЕt и выпаривают досуха, получая при этом 1,45 г изопропилового эфира 5-фторо-3-метил-1Н-индол-2-пропановой кислоты.

1-[4-(хлорметил)фенил] -1H-имидазол гидрохлорид, использованный выше, может быть приготовлен следующим образом.

К раствору 4-(1-имидазолил)бензальдегида (2,5 г) в метаноле (20 мл), добавляют 1,5 г NaBH₄.

После размешивания при комнатной температуре в течение 3 часов, смесь вливают в воду и экстрагируют добавлением метиленхлорида. Органическую фазу высушивают и выпаривают досуха, получая при этом 2,0 г 4-(имидазолил)-бензилового спирта.

Альтернативно 4-(1-имидазолил)-бензиловый спирт можно получить восстановлением этил 4-(1-имидазолил) бензоата.

Полученный таким образом 4-(1-имидазолил)-бензиловый спирт растворяют в диэтиловом эфире и превращают в соответствующий гидрохлорид барботированием газообразного HCl. Фильтрацией получают 2,4 г соли, которую суспендируют в 30 мл бензола и обрабатывают 0,8 г SOCl₂ и кипятят с обратным холодильником в течение 3 часов. Смесь выпаривают досуха, размешивают с этиловым эфиром и фильтруют, получая 2,6 г 1-[4-(хлорметил)фенил]-1H-имидазол гидрохлорида, т. пл. 176-178^oС.

4-(1-имидазолил)бензалдегид, использованный выше, можно приготовить следующим образом: 7,36 г п-бромобензолдегида обрабатывают кипячением с обратным холодильником с этиленгликолем в бензоле, чтобы получить соответствующий ацеталь. 8,51 г этого ацеталя добавляют в раствор 5,12 г натриевой соли имидазола в 100 мл диметилформамида, затем добавляют 3,63 г порошка меди, и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 6 часов, затем охлаждают и вливают в разбавленную хлористоводородную кислоту и колотый лед. Смесь нагревают при 50^oС в течение 1 часа, охлаждают, промывают метиленхлоридом, нейтрализуют с NaHCO₃, экстрагируют добавлением метиленхлорида, высушивают и выпаривают досуха, получая 2,5 г 4-(1-имидазолил) бензальдегида.

Этил-4-(1-имидазолил)-бензоат получают с хорошим выходом путем реакции этил 4-бромобензоата с имидазолом, протекающей по радикальному механизму, при использовании CuBr как катализатора.

Пример 2

Этиловый эфир 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1H-индол-2 -пропановой кислоты.

К раствору хлористого водорода в абсолютном этаноле (50 мл) добавляют 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1Н-индол-2 -пропановую кислоту (0,5 г). Реакционную смесь нагревают при 60^oС в течение 3 часов и затем выпаривают при пониженном давлении досуха. Остаток, размешанный с этиловым эфиром и отфильтрованный, дает 0,45 г названного соединения.

Аналогично, может быть приготовлено следующее соединение: этиловый эфир 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2- бутановой кислоты.

Пример 3

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1Н-индол-2- пропанамид.

Суспензию 5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2- пропановой кислоты в диметилформамиде (10 мл) обрабатывают с SOCl₂ (0,5 г), и после охлаждения через реакционную смесь в течение 6 часов продувают газообразный аммиак. Соль аммония отфильтровывают, и к раствору добавляют простой эфир. Таким образом приготовленный раствор, отфильтровывают и сушат, получая в результате 0,8 г названного соединения.

Пример 4

5-фторо-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил] -3-метил-1Н-индол-2 -пропановая кислота.

Смесь 1-[(4-1H-имидазол-1-ил)бензил] -1-(4-фторфенил) гидразин гидрохлорида (1,7 г), этилового эфира 4-оксо-гексановой кислоты (0,85 г) и 2-пропанола (100 мл) кипятят с обратным холодильником под азотом в течение 9 часов. После охлаждения реакционную смесь выпаривают досуха. Получившийся остаток очищают с помощью селикагельной колонки, элюированной метиленхлоридом-метанолом (955), получая при этом 0,7 г смеси этилового эфира 5-фтор-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1Н-индол-2 -пропановой кислоты и изопропилового эфира-5-фтор-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил] метил]-3-метил-1Н-индол-2 -пропановой кислоты.

В смесь этилового и изопропилового сложных эфиров добавляют метанол (30 мл), воду (30 мл) и гидроксид калия (0,5 г). Получившуюся смесь кипятят с обратным холодильником в течение 6 часов.

После охлаждения метанол выпаривают при пониженном давлении, и получившийся водный раствор нейтрализуют раствором соляной кислоты и подкисляют уксусной кислотой.

Получившуюся соль фильтруют, промывают водой и высушивают, получая при этом 0,4 г названного соединения, т.пл. 222^oС.

1-[(4-1H-имидазол-1-ил)бензил] -1-(4-фторфенил)гидразин гидрохлорид, использованный выше, приготавливают следующим образом.

Смесь 1-(4-фторфенил)гидразин гидрохлорида (3,3 г), 1-[4-(хлорметил)фенил] -1Н-имидазол гидрохлорида, триэтиламина (6,6 мл) и толуола (200 мл) кипятят с обратным холодильником под азотом в течение 13 часов. После охлаждения смесь фильтруют, и раствор выпаривают досуха. Остаток очищают с помощью силикагельной колонки, элюированной метиленхлоридом-метанолом (100/5), получая при этом 2,0 г 1-[(4-1Н-имидазолом-1-ил)бензол]-1-(4-фторфенил)гидразин гидрохлорида, масс-спектр масса/заряд 282 (М⁺), 158157.

Пример 5

Таблетки, каждая весом 150 мг и содержащая 50 мг активного вещества, можно изготовить следующим образом.

Состав (на 10000 таблеток)

5-фтор-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2 -пропановая кислота 500 г

Лактоза 710 г

Кукурузный крахмал 235,5 г

Порошок талька 37,5 г

Стеарат магния 15 г

Смешивают 5-фтор-1-[[4-(1H-имидазол-1-ил)фенил]метил]-3-метил-1Н-индол-2 -пропановую кислоту, лактозу и половину кукурузного крахмала; затем смесь просеивают через сито с размером отверстий 0,5 мм. Кукурузный крахмал (18 мл) суспендируют в теплой воде (180 мл). Получившуюся смесь используют для получения гранулированного порошка. Гранулы высушивают, превращают в порошок с помощью сита с размером отверстий 1,4 мм, затем добавляют оставшееся количество крахмала, талька и стеарата магния, тщательно смешивают и, используя перфораторы, с диаметром отверстий 8 мм, изготавливают таблетки.