производные андростена, фармацевтическая композиция

Формула изобретения

1. Производное андростена, имеющее формулу



где R₁ представляет С₁-С₄алкил, который является незамещенным или который несет один заместитель, выбранный из группы, включающей хлор, фтор, С₁-С₄ алкокси, С₁-С₄алкилтио, С₁-С₄алкилсульфинил или С₁-С₄алкилсульфонил; R₃ представляет водород, -гидрокси, -гидрокси, -метил, -метил, =СН₂, или

R₄ представляет водород, фтор или хлор;

R₅ представляет водород, фтор, хлор или метил;

Х представляет -О- или -S-;

Z представляет карбонил, -гидроксиметилен или -хлорметилен;

пунктирная линия в кольце А указывает, что 1,2-связь является насыщенной или ненасыщенной.

2. Соединение по п.1, где (а) R₃ представляет собой водород, -метил, -метил, -гидрокси, -гидрокси, -OCOCHCl₂ или -OCOCHCl₂;

(b) R₄ представляет собой водород или фтор;

(c) R₅ представляет собой водород или фтор;

(d) R₁ представляет собой незамещенный С₁-С₄алкил или хлорметил;

(e) Х представляет собой -О-;

(f) Z представляет собой -гидроксиметилен;

(g) 1,2-связь является ненасыщенной.

3. Соединение по п.1, имеющее формулу



где R₁, R₃, R₄, R₅ и пунктирная линия указаны в п.1.

4. Соединение по п. 3, где R₃ представляет собой водород, -метил, -метил, -гидрокси, -гидрокси, -OCOCHCl₂ или -OCOCHCl₂, R₄ представляет собой водород или фтор и R₅ представляет собой водород, фтор или метил.

5. Соединение по п.3, где 1,2-связь является ненасыщенной.

6. Соединение по п.4, где 1,2-связь является ненасыщенной.

7. Соединение по п.1, имеющее формулу



где R₁₁ представляет собой незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил.

8. Соединение по п.7, которое представляет собой:

метил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

изопропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или

хлорметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен- 3-он-17-карбоксилат.

9. Соединение по п.1, имеющее формулу



где R₁₁ представляет собой незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил; R₃₁ представляет собой -метил или -метил; R₄₁ представляет собой водород или фтор; R₅₁ представляет собой водород или фтор.

10. Соединение по п.9, которое представляет собой

метил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

этил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат; или

хлорметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

11. Соединение формулы I по п.1 в качестве активного ингредиента при приготовлении лекарственного препарата, предназначенного для лечения наружного или другого местного воспаления.

12. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления глаза.

13. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения кожного воспаления.

14. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения отита.

15. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения бронхиальной астмы.

16. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления полости рта, десен или горла.

17. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления слизистой носа.

18. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления верхнего или нижнего отдела кишечника.

19. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления, ассоциированного с артритом.

20. Соединение формулы I по п.11, где препарат предназначен для лечения воспаления аноректальной области.

21. Соединение, имеющее формулу



где R₃ представляет собой водород, -гидрокси, -гидрокси, -метил, -метил, =CH₂, -OCOCHCl₂ или -ОСОСНС1₂;

R₄ представляет собой водород, фтор или хлор;

R₅ представляет собой водород, фтор, хлор или метил;

Z представляет собой карбонил, -гидроксиметилен или -хлорметилен;

пунктирная линия в кольце А показывает, что 1,2-связь является насыщенной или ненасыщенной.

22. Соединение по п.21, где Z представляет cобой -гидроксиметилен и/или где R₄ представляет собой водород или фтор и R₅ представляет собой водород, фтор или метил.

23. Соединение по п.21, имеющее формулу



где Z указан в п.10.

24. Соединение по п.21, имеющее формулу



где Z указан в п.10; R₃₁ представляет собой -метил или -метил;

R₄₁ представляет собой водород или фтор;

R₅₁ представляет собой водород или фтор.

25. Соединение по п.23, которое представляет собой 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту.

26. Соединение по п.24, где Z представляет собой -гидроксиметилен.

27. Соединение по п.26, которое представляет собой 17-дихлорацeтокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту. 28. Фармацевтическая композиция, содержащая противовоспалительно эффективное количество соединения формулы



где R₁ представляет собой С₁-С₄ алкил, который является незамещенным или который содержит один заместитель, выбранный из группы, включающей хлор, фтор, С₁-С₄ алкокси, С₁-С₄ алкилтио, С₁-С₄ алкилсульфинил или С₁-С₄ алкилсульфонил;

R₃ представляет собой водород, -гидрокси, -гидрокси, -метил, -метил, =CH₂, -OCOCHCl₂ или -ОСОСНС1₂;

R₄ представляет собой водород, фтор или хлор;

R₅ представляет собой водород, фтор, хлор или метил,

Х представляет собой -О- или -S-;

Z представляет собой карбонил, -гидроксиметилен или -хлорметилен;

пунктирная линия в кольце А указывает, что 1,2-связь является насыщенной или ненасыщенной,

и нетоксичный фармацевтически приемлемый носитель, пригодный для наружного или другого местного применения.

29. Фармацевтическая композиция по п.28, которая является офтальмологической композицией.

30. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде мази, лосьона или крема.

31. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде порошка.

32. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде спрея.

33. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде суппозитория, или удерживающей клизмы, или пены.

34. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде жевательной или сосательной таблетки или гранулы.

35. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде аэрозоля.

36. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде распыляемого или порошкообразного препарата для пероральной ингаляции.

37. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде раствора или суспензии.

38. Фармацевтическая композиция по п.28 в виде препарата для введения парентерально или иным инъекционным путем.

Описание изобретения к патенту

Техническая область изобретения

Изобретение относится к новым производным андростена, обладающим противовоспалительной активностью, к фармацевтическим композициям, содержащим названные производные, к новым химическим промежуточным продуктам реакции, используемым при получении этих производных, а также к способам применения данных производных при лечении воспалительных процессов у млекопитающих.

Предпосылки создания изобретения

Наружное и любое другое местное применение сильнодействующих глюкокортикоидов может снизить тяжелые токсические эффекты, такие как кушингоидные признаки, гипофизарно-адренальная супрессия, атрофия кожи, иммуносупрессия и ингибирование процесса заживления ран. Другие виды токсических реакций, включая аллергии и катаракты, появляются в результате длительного курса применения лекарственных препаратов этого типа.

Применение глюкокортикостероидов в офтальмологии представляет дополнительные проблемы. Существующий в глазу защитный механизм позволяет только небольшой части из применяемой дозы попасть в глаз и достигнуть расположенной внутри глаза целевой области; в целом, более 90 процентов общего количества дозы попадает в систему циркуляции. Это, в свою очередь, приводит к серьезным системным побочным эффектам описанного выше типа. Более того, при применении этих лекарственных средств в глазу возникает более серьезный и специфический побочный эффект, который состоит в повышении внутриглазного давления (IOР). Действительно, с начала 1960-х годов появились сообщения о вызванной кортикостероидами хронической и острой глаукоме. Обычно кортикостероиды необходимы для подавления воспаления только наружно. Однако абсорбированный стероид способен вызывать серьезные побочные эффекты, отмеченные выше. Полагают, что влияние кортикостероидов на пути оттока жидкости и связанные тканевые глюкозаминогликаны (ГАГ) важны в развитии вызванного глюкортикостероидами повышения внутриглазного давления.

Таким образом, существует серьезная потребность в сильных местных противовоспалительных стероидах, которые бы не проявляли системной активности и, соответственно, не вызывали бы серьезных системных побочных эффектов, связанных с лекарственными препаратами этого класса.

Природные глюкокортикостероиды и многие другие имеющиеся в продаже производные представляют ⁴ и ^1,4 прегнины, имеющие 21-гидроксизаместитель. Существует, однако, множество противовоспалительных ⁴ и ^1,4 андростенов, описанных в литературе. Так, Anner et al. Патент США 3636010, запатентованный 18 января 1972 года, описывает сложные эфиры ⁴ и ^1,4-16-метил-6, 9-дифтор-11, 17-дигидрокси-3-оксо-андростадиен-17-карбоновой кислоты, обладающие "хорошей противовоспалительной и тимолитической активностью". Тимолитическая активность, однако, является указанием на системную активность.

В 1970-х и начале 1980-х годов вышли патенты, описывающие производные андростена, цель которых состояла в получении более желательного соотношения противовоспалительной активности и нежелательных побочных эффектов. Они включают описание патента Британии 1384372; Phillipps et al., Патент США 3828080; Phillipps et al., Патент США 3856828; Phillipps et al. Патент США 4093721; Патентная заявка Великобритании 2014579; Edwards, Патент США 4188385; Alvarez, Патент США 4198403; и Edwards, Патент США 4263289. Производные ⁴ и ^1,4 3-оксоандростена, представленные в этих патентах, могут нести различные заместители в положениях 6, 9, 11 и 16 и обычно имеют 17-гидрокси или 17-алканоилокси заместитель. 17-группы представляют различные алкиловые эфиры карбоновой кислоты, галогеналкиловые эфиры карбоновой кислоты или алкиловые эфиры тиокарбоновой кислоты. В описании Патента Великобритании 1578243 и параллельной заявке США, Kalvoda et al. Патент США 4285937, также описывают андростадиен-17-карбоновые кислоты и их сложные эфиры. Соединения, полученные Kalvoda et al., представлены в патенте 4285937 как новые сложные эфиры андростадиен-17-карбоновой кислоты формулы



где R" представляет свободную гидроксильную группу или гидроксильную группу, которая этерифицирована карбоновой кислотой, имеющей не более 7 атомов углерода;

R" представляет метильную группу в положении - или - или метиленовую группу,

R представляет Н или Сl,

каждый из Х и Y представляет атом водорода, хлора или фтора, при условии, что, по крайней мере, один из заместителей является одним из этих галогенов, когда R представляет Сl, и что Y обозначает только Сl или F, и Х обозначает только Сl, когда R представляет Н, и что группа эфира андростадиен-17-карбоновой кислоты не содержит более чем 11 атомов углерода.

Говорят, что эти соединения обладают резко выраженной противовоспалительной активностью с одновременно заметно низкими системными побочными эффектами, и что они особенно пригодны для дерматологического использования. Эфиры стероидной 17-карбоновой кислоты являются производными спиртов, содержащих от 1 до 10 атомов углерода, алифатического, аралифатического и гетероциклического типа, которые являются незамещенными или замещены хлором, фтором, бромом, гидроксилом, низшим алкокси или низшим алканоилокси; считается, что эти спирты включают низшие спирты (метанол, этанол, изопропанол и т. д. ). 17-Сложноэфирная группа также может быть хлорметокси-карбонилом, фторметоксикарбонилом или 2-хлор- или 2-фтор-этоксикарбонилом. Считается, что этерифицированная гидроксигруппа R" является производной насыщенной или ненасыщенной С₁-С₇ карбоновой кислоты, которая является незамещенной или замещена атомами галогена, гидрокcильными или низшими алкоксигруппами; в качестве примеров R" указываются формилокси, ацетокси, пропионилокси, бутирилокси, валерилокси, диэтилацетокси, капроилокси, хлорацетокси, хлорпропионилокси, оксипропионилокси или ацетоксипропионилокси. Однако единственное конкретное соединение, в котором положение 2 является незамещенным, описанное Kalvoda et al. , является метил 9-хлор-6-фтор-11-гидрокси-16-метил-3-оксо-17-пропионилоксиандроста-1,4-диен-17-карбоксилатом. Действительно, все конкретные соединения, описаные Kalvoda et al., являются 17-пропионилокси соединениями. С точки зрения того, что соединения, описанные Kalvoda et al., должны гидролизоваться in vivo для высвобождения кислоты, производным которой является 17-сложный эфир, то неудивительно, что кислота, предпочитаемая Kalvoda et al. для получения производного 17-гидроксила, является пропионовой кислотой, о которой известно, что ее LD₅₀ на крысах только 4,29 г/кг перорально. Уксусная кислота, которая также, в основном, нетоксична, имеет LD₅₀ на крысах при приеме 3,53 г/кг перорально. Для сравнения, LD₅₀ на крысах при приеме хлоруксусной кислоты составляет 76 мг/кг, что относительно довольно токсично.

Более недавно были исследованы мягкие стероиды с целью получения соединений, обладающих сильной противовоспалительной активностью при минимальной системной активности. Эти соединения включают ⁴ и ^1,4 17-алкокси-11-гидрокси-3-оксоандростены, необязательно содержащие различные заместители в положениях 6, 9 и 16, и родственные 11-замещенные соединения, которые являются сложными эфирами или тиоэфирами 17-карбоновой кислоты. Эти 17-сложные эфиры описаны Bodor в патенте США 4710495. Полагают, что предпочтительные соединения представляют собой галогеналкильный сложный эфир 17-алкокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17 карбоновой кислоты.

Другой группой мягких стероидов, которые описаны как обладающие сильной противовоспалительной активностью при минимальной системной активности, являются 17-карбонаты, описанные Bodor в патенте США 4996335. Эти соединения включают в качестве предпочтительных галогеналкил 17-алк-оксикарбонилокси-11-андрост-4-ен-3-он-17-карбоксилаты и соответствующие ^1,4 производные, необязательно содержащие 6- и/или 9-фтор и 16- или 16-метил заместители. Одно из этих соединений представляет собой хлорметил 17-этоксикарбонилокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат,

также известный как лотепреднол этабонат, для которого завершена клиническая разработка и который ожидает окончательного одобрения FDA.

Тем не менее, в данной области остается серьезная необходимость в новых противовоспалительных стероидах, обладающих сильной местной противовоспалительной активностью, при этом обладающих минимальной или совсем не проявляющих системной активности.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к новым производным андростена, обладающим противовоспалительной активностью, имеющим структурную формулу



где R₁ представляет С₁-С₄ алкил, который является незамещенным или который содержит один заместитель, выбранный из группы, включающей хлор, фтор, С₁-С₄ алкокси, С₁-С₄ алкилтио, С₁-С₄ алкилсульфинил и С₁-С₄ алкилсульфонил; R₃ представляет водород, -гидрокси, -гидрокси, -метил, -метил, =СH₂ или - или

R₄ представляет водород, фтор или хлор;

R₅ представляет водород, хлор или метил;

Х представляет -О- или -S-;

Z представляет карбонил, -гидроксиметилен или -хлор-метилен;

и пунктирная линия в кольце А указывает, что 1,2-связь является насыщенной или ненасыщенной.

В этой группе соединений предпочтительными являются следующие подгруппы:

(1) соединения, в которых R₃ представляет Н, R₄ представляет Н или F, и R₅ представляет Н, F или СН₃;

(2) соединения, в которых R₃ представляет -СН₃ или -СН₃, R₄ представляет Н или F, и R₅ представляет Н, F или СН₃; и

(3) соединения, в которых R₃ представляет -OH, -OH, -OCOCHCl₂ или -ОСОСНСl₂, R₄ представляет Н или F, и R₅ представляет Н, F или СН₃;

Особенно предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I), обладающие одной или большим количеством следующих структурных характеристик:

(1) R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлор-метил, особенно когда R₁ представляет незамещенный алкил, и наиболее предпочтительно, когда R₁ представляет метил или этил;

(2) Х представляет -О-;

(3) Z представляет -гидроксиметилен;

(4) 1,2-связь является ненасыщенной;

особенно когда R₃, R₄ и R₅ являются предпочтительными, как описано в предшествующем абзаце.

Одна группа особенно предпочтительных производных по изобретению представлена структурной формулой



где R₁₁ представляет метил, этил, изопропил или хлорметил, особенно когда R₁₁ представляет метил, этил или изопропил. Производные андростена формулы (I) обладают сильной противовоспалительной местной активностью, но не имеют системной активности. Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы при местной (например, наружной обработке воспалительных состояний, без серьезных системных побочных эффектов, которые присутствуют при использовании многих известных глюкокортикостероидов. Более того, с точки зрения их прекрасного рецепторного связывания и сосудосуживающих свойств, настоящие соединения представляют новый класс безопасных и эффективных стероидных противовоспалительных средств, имеющих выдающийся профиль безопасности.

Подробное описание изобретения

Что касается различных групп, объединяемых общими терминами, используемыми здесь и в описании, используются следующие определения и объяснения:

Алкильные группы могут быть с прямой или разветвленной цепью, содержащей приведенное выше количество атомов углерода. Также и каждая алкильная часть группы алкокси, алкилтио, алкилсульфинил и алкилсульфонил может быть прямой или разветвленной цепью.

Конкретные примеры алкильных радикалов, охватываемые формулой (I), как в виде конкретного значения R₁, так и в виде части группы R₁, включают метил, этил, н-пропил, изопропил и н-бутил.

Группы алкокси, алкилтио, алкилсульфинил и алкилсульфонил имеют вид -O-алкил

-S-алкил

-SO-алкил и -SO₂-алкил,

соответственно, где алкил такой, как определено выше и показано на примерах.

Хотя все соединения, охватываемые приведенной выше формулой (I), по существу, соответствуют объектам настоящего изобретения, тем не менее некоторые группы соединений остаются предпочтительными, а именно такие, которые имеют преимущественные заместители, представленные выше в разделе "Сущность изобретения". Особенно предпочтительные группы соединений формулы (I) представлены здесь в разделе "Сущность изобретения", как имеющие формулу (Ia).

Еще одной особенно предпочтительной группой соединений являются соединения формулы (I), имеющие 16-метил или 16-метил заместитель, особенно те, где Z, Х и R₁ такие, как определены в формуле (I), и остальные структурные переменные идентичны тем, которые находятся в соответствующих положениях дексаметазона, бетаметазона, флуметазона или параметазона, особенно когда R₁ является незамещенным С₁-С₄ алкилом или хлорметилом, более предпочтительно, когда R₁ является незамещенным С₁-С₄ алкилом. В этой группе предпочтительных соединений особый интерес представляют соединения, имеющие формулу



где R₁₁ такой, как определено в формуле (Iа),

R₃₁ представляет -СН₃ или -СН₃,

R₄₁ представляет Н или F, и

R₅₁ представляет Н или F, в частности, когда R₁₁ представляет метил или этил.

Другая предпочтительная группа соединений состоит из соединений формулы (I), где Z, Х и R₁ такие, какие определены выше для формулы (I), и остальные структурные переменные идентичны тем, которые находятся в соответствующих положениях гидрокортизона (т.е. R₃, R₄ и R₅, каждый, представляет атом водорода и 1,2-связь является насыщенной), или преднизолон (т.е. R₃, R₄ и R₅, каждый, представляет атом водорода и 1,2-связь является ненасыщенной), особенно когда R₁ является незамещенным С₁-С₄ алкилом или хлорметилом, более предпочтительно, когда R₁ является незамещенным С₁-С₄ алкилом.

Другая предпочтительная группа соединений состоит из 6- и/или 9-фтор производного соединений, указанных в предыдущем абзаце. В этой группе особенно предпочтительны соединения, где Z, Х и R₁ такие, как определено в формуле (I), и остальные структурные переменные идентичны таковым в соответствующих положениях фторкортизона, триамцинолона, флупреднизолона, изофлупреднона или дифлупредната, особенно когда R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил, в особенности, когда R₁ является незамещенным С₁-С₄ алкилом. Другими представляющими интерес соединениями являются такие, где Z, Х и R₁ такие же, как определено в формуле (I), R₃ представляет - или и остальные структурные переменные идентичны тем, которые находятся в соответствующих положениях триамцинолона, особенно когда R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил, особенно когда R₁ представляет С₁-С₄ незамещенный алкил.

Еще одними представляющими особый интерес производными андростена являются соединения формулы (I), имеющие заместитель 6-метил, особенно такой, в котором Z, Х и R₁ такие, как определено для формулы (I), и остальные структурные переменные идентичны тем, которые находятся в соответствующем положении фторметолона или метилпреднизолона, особенно когда R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил, особенно когда R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил.

В каждой группе соединений, приведенных в трех предыдущих абзацах, особенно предпочтительны соединения, где Х

представляет кислород. Наиболее предпочтительны соединения, входящие в вышеуказанные группы, где Z представляет -гидроксиметилен, где Х представляет кислород, и где R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил, особенно незамещенный С₁-С₄ алкил (особенно, метил, этил и изопропил).

Хотя соединения формулы (I), в которых Z представляет -гидроксиметилен, обычно предпочтительны, конкретно производные, в которых Z представляет -хлорметилен или в которых Z представляет карбонил, также представляют значительный интерес. Они включают соединения, в которых 1,2-связь, R₃ R₄, R₅ и Z идентичны соответствующим частям дихлоризона (в которых Z представляет -хлорметилен) или в которых 1,2-связь, R₃, R₄, R₅ и Z идентичны соответствующим частям преднизона, хлорпреднизона или кортизона (во всех, в которых Z представляет карбонил). Как указано выше, производными, представляющими наибольший интерес, являются те, в которых ₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил.

Соединения формулы (I) обычно могут быть получены известными способами, выбор способа зависит от определения различных заместителей в конечном желаемом продукте.

По одному общему применяемому способу получения соединений формулы (I), где Z представляет -гидроксиметилен и Х представляет кислород, в качестве исходного продукта используются стероидные соединения формулы



где R₄, R₅ и пунктирная линия в кольце А определены для формулы (I), и

R"₃ представляет водород, -метил, -метил, -ОН, -ОН или =СН₂;

(и которые могут быть легко получены обработкой соответствующих 21-гидроксипрегненолонов формулы



где R₄, R₅ и R"₃ и пунктирная линия в кольце А указаны выше,

с NaIO₄ в подходящем органическом растворителе при комнатной или повышенной температуре). В соответствии с этим способом по изобретению, исходный продукт формулы (II) подвергают взаимодействию с дихлорацетилхлоридом (Cl₂CHCOCl) в безводных условиях в подходящем инертном органическом растворителе, таком как метиленхлорид, хлороформ или тетрагидрофуран, предпочтительно в присутствии подходящего акцептора кислоты (например, триэтиламин, пиридин, карбонат кальция, бикарбонат натрия или другое подходящее основание). Время и температура не являются определяющими факторами; однако реакцию удобно проводить при температуре между 0^oС и комнатной температурой в течение от 1 до 6 часов. Полученный новый 17-дихлорацетат 17-карбоновой кислоты имеет формулу



где R₄, R₅ и пунктирная линия в А кольце указаны выше, и

R"₃ представляет Н, -СН₃, -СН₃, -OCOCHCl₂, -OCOCHCl₂ или =СН₂.

Когда R"₃ в исходном продукте формулы (II) представляет -OH или -ОН, подходящий дихлорацетилхлорид обычно применяется для образования дихлорацетатной группы как в положении 16, так и в положении 17 [т.е. когда R"₃ в формуле (II) представляет ОН, R"₃ в полученном промежуточном продукте формулы (III) представляет - или -OCOCHCl₂] . При желании группа 16- или 16-OCOCHCl₂ может быть последовательно удалена путем избирательного гидролиза с регенерацией 16-гидроксигруппы, например путем гидролиза водным раствором бикарбоната натрия или обработкой раствором хлороводородной кислоты в метаноле. Альтернативно, когда 16- или 16-гидроксигруппа имеется в исходном продукте, она может быть защищена путем образования триметилсилилового простого эфира или сложного эфира трифторуксусной кислоты, и промежуточный продукт, защищенный в положении 16, затем может быть подвергнут вышеописанному ацилированию, и полученный 16-защищенный 17-дихлорацетат 17-карбоновой кислоты может затем быть обработан хорошо известным образом для удаления защитных групп и получения соответствующего 17-дихлорацетата 16-гидрокси-17-карбоновой кислоты.

Обнаружено, что когда 17-заместитель вводится так, как описано в предыдущем абзаце, очистка промежуточных продуктов может потребовать много времени, так как значения R_f для примесей и для желаемых промежуточных продуктов формулы (III) могут быть очень близки. Однако, когда исходный продукт формулы (II) подвергают взаимодействию с дихлорацетилхлоридом в гексаметилфосфорамиде (ГМФА) в присутствии цианида серебра при нагревании, желаемые промежуточные продукты могут быть получены с высоким выходом (в некоторых случаях, почти количественно) и с таким небольшим количеством примесей, что они могут быть легко очищены или могут быть использованы на следующей стадии без дополнительной очистки. Реакция может быть удобно проведена при около 80^oС за короткий период времени, например от 10 до 15 минут.

После вышеописанного введения 17-заместителя, полученное новое промежуточное соединение формулы (III) легко преобразуется в соответствующее соединение формулы (I) путем обработки алкилгалогенидом R₁-Hal [например, СН₃I, С₂Н₅I, (СН₃)₂СНI] , или, когда R₁ представляет галогеналкил, с галогеналкилгалогенидом [например, ClCH₂I] или галогеналкилхлорсульфатом Hal-SO₂R₁ [например, ClSO₃CH₂Cl] . Когда R₁ представляет алкоксизамещенный алкил или алкилтиоалкил в конечном продукте, алкоксиалкилгалогенид или алкилтиоалкилгалогенид могут быть подвергнуты взаимодействию с промежуточными продуктами формулы (III). Эту стадию в реакционной последовательности можно удобно проводить при комнатной температуре в течение от около 1 до 24 часов в соответствующем растворителе, таком как метиленхлорид.

Реакцию, описанную в предыдущем абзаце, осуществляют с использованием алкилгалогенида в бикарбонате натрия в присутствии гидросульфата тетрабутиламмония (ТБА) в качестве катализатора межфазового переноса, но получая конечный продукт с низким общим выходом. Более того, разделение примесей и желаемых продуктов длительно по времени. Однако, когда промежуточный продукт формулы (III) получают способом с применением цианида серебра в ГМФА и промежуточный продукт подвергают взаимодействию с алкилиодидом в присутствии карбоната калия в ГМФА при комнатной температуре, общий выход может быть существенно повышен, до около 90%. Действительно, почти количественный выход может быть достигнут на второй стадии, когда промежуточный продукт формулы (III) используют в очищенном виде. Реакции дают протекать до завершения (обычно около 1,5-2 часов).

Соединения формулы (I), где R₁ представляет сульфинил или сульфонилсодержащую группу, могут быть получены путем окисления соответствующих тиостероидов. Таким образом, например, соединение формулы (I), где R₁ обозначает алкилтиоалкил, может быть подвергнуто взаимодействию с 1 эквивалентом м-хлорпероксибензойной кислоты при 0-25^oС в течение 1-24 часов, в подходящем растворителе, таком как хлороформ, с получением соответствущего соединения формулы (I), где R₁ представляет алкилсульфинилалкил, или с 2 эквивалентами м-хлорпероксибензойной кислоты с получением соответствующего соединения формулы (I), где R₁ представляет алкилсульфонилалкил.

Когда желаемыми являются соединения формулы (I), где R₃ представляет - или -гидрокси, некоторые из них могут быть получены путем частичного кислотного гидролиза соответствующих соединений формулы (I), где R₃ представляет - или -OCOCHCl₂, в среде подходящего растворителя. Желательно использование мягкого реагента, например водного раствора бикарбоната натрия или щавелевой кислоты в метаноле. С другой стороны, как уже здесь отмечалось выше, гидролиз 16-дихлорацетата до 16-гидроксипроизводного может быть проведен на ранней стадии схемы синтеза после введения 16,17-бис(дихлорацетатных)групп, например селективный гидролиз промежуточного продукта формулы (III), имеющего 16 и 17- дихлорацетатные группы, в соответствующий 16-гидрокси-17-дихлорацетат с последующим преобразованием соответствующего соединения формулы (I), как описано выше.

В другом возможном способе получения соединений по настоящему изобретению, который может быть использован для получения соединений формулы (I), где Z представляет -гидроксиметилен и Х представляет кислород или серу, используют промежуточные 17-дихлорацетаты 17-карбоновой кислоты формулы (III), указанной выше. В соответствии с этим способом, промежуточные продукты формулы (III) последовательно обрабатывают сначала слабым ацилхлорид-образующим агентом, например таким, как диэтилхлорфосфат или оксалилхлорид, с образованием соответствующего нового хлорангидрида кислоты формулы



где R"₃, R₄, R₅ и пунктирная линия в А кольце указаны выше, и затем обрабатывают R₁XM", где R₁ и Х указаны выше, и М" представляет водород или М, где М представляет подходящий металл, например щелочной металл (такой как натрий или калий), щелочноземельный металл/2 или таллий, или NH₄, в инертном растворителе (например СНС1₃, ТГФ, ацетонитрил или ДМФ) при температуре между около 0^oС и точкой кипения растворителя, в течение 1-6 часов, с получением соответствующего соединения формулы (I). Если использовать соединение формулы R₁XM", где М" представляет водород, в реакционной системе предпочтительно присутствует акцептор кислоты, такой как триэтиламин. Две стадии этого способа могут удобно протекать в одном и том же растворителе без выделения хлорангидрида кислоты формулы (IV), образующегося на первой стадии. Этот способ имеет особое значение, когда желательно получить соединение формулы (I), где Х представляет S.

Реакция обмена галогенов, основанная на относительной растворимости, может быть использована для преобразования хлоралкил 17-карбоксилата формулы (I) в соответствующее фторалкильное производное. Фторид серебра может быть использован в этой реакции, которая проводится в соответствующем органическом растворителе (например, ацетонитрил) и которая особенно пригодна при получении соединений, в которых R₁ представляет фторметил или фторэтил.

21-Гидроксипрегненолоны, из которых получают стероидные исходные продукты формулы (II), могут быть коммерчески доступными или получены известными способами. Таким же образом, нестероидные исходные продукты, используемые в различных рассмотренных выше способах, коммерчески доступны или могут быть получены с помощью известных химических методов.

Также, исходный продукт формулы (II) выше может быть подвергнут взаимодействию с дихлорацетилхлоридом с получением промежуточного продукта формулы



где R"₃, R₄, R₅ и пунктирная линия в кольце А указаны выше, которые могут быть преобразованы в соответствующий промежуточный продукт формулы (III) выше путем частичного гидролиза с выделением или без выделения соединения формулы (V). Это взаимодействие исходного продукта формулы (II) с дихлорацетилхлоридом может быть проведена в тех же условиях, что и взаимодействие соединения формулы (II) с дихлорацетилхлоридом, как описано здесь выше, за исключением того, что дихлорацетилхлорид используется в количестве 2 молей или больше на один моль соединения формулы (II). Частичный гидролиз полученного соединения формулы (V) может проводиться в инертном растворителе в присутствии катализатора. Примеры подходящих катализаторов включают третичные алкиламины, такие как триэтиламин, триметиламин или тому подобное; ароматические амины, такие как пиридин, 4,4-диметиламинопиридин, хинолин или тому подобное; вторичные алкиламины, такие как диэтиламин, диметиламин или тому подобное; и неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, бикарбонат калия или тому подобное. Предпочтительно применение пиридина и бикарбоната калия. Примеры подходящих инертных растворителей для использования в гидролизе включают воду; низшие спирты, такие как этанол, метанол или тому подобное; эфиры, такие как диметиловый эфир, диэтиловый эфир, диметоксиэтан, диоксан, тетрагидрофуран или тому подобное; галогенированные углеводороды, такие как метилен-хлорид, хлороформ или тому подобное; третичные амины, такие как пиридин, триэтиламин или тому подобное; или смеси двух или нескольких вышеуказанных растворителей. Реакция обычно проводится при температуре от около 0 до 100^oС, предпочтительно при от комнатной температуры до 50^oС в течение 1-48 часов, предпочтительно от 2 до 5 часов.

Еще одним аспектом настоящего изобретения являются новые соединения формулы



где R₁, R₃, R₄, R₅, X и пунктирная линия в кольце А такие же, как определены для формулы (I) выше.

11-Кето производные формулы (Iс) могут быть получены способами, описанными выше для получения соответствующих 11-гидрокси соединений формулы (I). Таким образом, исходный продукт, соответствующий формуле (II), но имеющий 11-кетогруппу, подвергают взаимодействию с дихлорацетилхлоридом с получением соответствующего нового промежуточного продукта, соответствующего формуле (III) или (V), но имеющего 11-кетогруппу, которая может взаимодействовать, как описано выше для 11-гидрокси соединений, с получением в итоге соединения формулы (I), в котором Z представляет карбонил [т.е. соединение формулы (Iс)]. Все реакционные условия уже описаны ранее для соответствующих способов получения соответствующих 11-гидрокси соединений формулы (I). Также, получение соединений формулы (Iс), где R₁ представляет сульфинил- или сульфонилсодержащие группы, или где R₃ представляет гидрокси, обычно осуществляют как последнюю стадию в схеме синтеза методом, аналогичным тому, который используют для соответствующих 11-гидрокси соединений формулы (I).

Таким же образом, соединения формулы (I), в которых Z представляет -хлорметилен, могут быть легко получены способами, аналогичными тем, которые используются для получения соединений, в которых Z представляет -гидроксиметилен или карбонил.

Кроме того, 11-кето соединения формулы (Iс) можно получить путем взаимодействия соответствующих 11-гидрокси соединений формулы (I) с окислителем. Окисление 11-гидрокси соединения формулы (I) с целью его преобразования в соответствующее соединение формулы (Iс) обычно проводят с использованием окислителя в подходящем растворителе. Растворителем может быть любой общепринятый растворитель, например вода, органическая кислота (например, муравьиная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота), спирт (например, метанол, этанол), галогенированный углеводород (например, хлороформ, метиленхлорид) или тому подобное. Окислителем также может быть любой общепринятый агент, эффективный при окислении гидроксигруппы до карбонильной группы, например хлорхромат пиридиния, триоксид хрома в пиридине, пероксид водорода, дихромовая кислота, дихроматы (например, дихромат натрия, дихромат калия), марганцовая кислота, перманганаты (например, перманганат натрия, перманганат калия) или тому подобное. Окислитель обычно используют в количестве 1 моль или больше, предпочтительно от 1 до 3 молей, на моль 11-гидрокси соединения формулы (I). Реакцию обычно проводят при температуре от 0 до 40^oС, предпочтительно при комнатной температуре, в течение от 6 до 30 часов.

Новые соединения формулы (Iс) обычно используют не только как стероидные противовоспалительные средства, но также в виде предшественников in vivo и in vitro соответствующих 11-гидрокси соединений. Таким образом, соединения формулы (Iс) могут быть восстановлены in vitro с получением соответствующих 11-гидрокси соединений формулы (I), используя восстановитель, известный способностью к восстановлению 11-оксогруппы в 11-гидроксигруппу без модифицирования остальной части стероидного исходного продукта. Обычно, при проведении желаемых преобразований преимущество отдается микробиологическому восстановлению, хотя химическое восстановление также возможно. Затем соединения формулы (Iс) могут быть включены в соответствующую стандартную дозированную форму (например, удерживающая клизма) для лечения таких состояний, как язвенный колит. Считается, что в таких стандартных лекарственных формах соединения формулы (Iс) с помощью бактерий организма (например, в толстом кишечнике) подвергаются микробиологическому восстановлению в 11-гидроксистероиды, которые вызывают желаемую противовоспалительную реакцию.

Предпочтительными соединениями формулы (Iс) являются такие, которые являются предшественниками предпочтительных соединений формулы (I), где Z представляет -гидроксиметилен. Особенно предпочтительная группа соединений формулы (Iс) состоит из таких соединений, где Х и R₁ указаны выше для формулы (I), и остальные структурные варианты идентичны таковым в соответствующем положении кортизона (т.е. каждый R₃, R₄ и R₅ представляет атом водорода и 1,2-связь является насыщенной), преднизона (т.е. каждый R₃, R₄ и R₅ представляет водород и 1,2-связь является ненасыщенной) или в 6- и/или 9-фтор производных, включая 16-метил и 16-метил соединения, такие как бетаметазон и дексаметазон, в частности, когда R₁ представляет незамещенный С₁-С₄ алкил или хлорметил. Наиболее предпочтительными из этих производных являются такие, где Х представляет кислород.

Результаты, полученные при изучении различных видов активности представительного соединения настоящего изобретения, подробно обсуждаемые далее, ясно указывают на сильную противовоспалительную активность и минимальную системную активность/токсичность соединений формулы (I). С точки зрения этого желательного терапевтического индекса, т.е. разделения местной и системной активности, соединения по изобретению можно использовать при лечении местных или других локализованных воспалительных состояний, не вызывая при этом серьезных системных побочных эффектов, обычно присутствующих при использовании известных природных и синтетических глюкокортикоидов, таких как кортизон, гидрокортизон, гидрокортизон 17-бутират, бетаметазон 17-валерат, триамцинолон, бетаметазон дипропионат и тому подобное. Исследование рецепторного связывания, также обсуждаемое далее, показывает, что соединения по изобретению обладают прекрасными свойствами рецепторного связывания. Более того, исследование по сужению сосудов на человеке, также описанное далее, указывает, что данные соединения являются сильными и длительнодействующими. Другие анализы показали, что соединения формулы (I) также обладают желаемым уровнем стабильности.

Не связывая это с какой-то определенной теорией, авторы полагают, что преимущественные свойства соединений данного изобретения связаны с тем, каким образом протекает их метаболизм. Несмотря на маскирующий характер природы 17-дихлорацетатной группы, неожиданно обнаружено, что in vivo и в анализах крови 17 -группа предпочтительно и быстро гидролизуется с образованием алкилового эфира 17-гидрокси-17-карбоновой кислоты, который затем гидролизуется, давая нетоксичную кортиеновую кислоту или ее производное. Это в отличие от метаболизма алкилового эфира 17-алканоилокси-17-карбоновой кислоты, в которой гидролиз 17-группы происходит сначала, давая 17-алканоилокси-17-карбоновую кислоту, которая может быть объектом для внутримолекулярной перегруппировки ацильной группы в 17-положении, образуя реакционноактивный смешанный ангидрид в соответствии со схемой:



Teст с отеком уха

В группах мышей, предназначенных для обработки, отобранное количество исследуемого соединения растворяют в ацетоне, содержащем 5% кротонового масла; затем 50 микролитров этого раствора наносят на внутреннюю поверхность правого уха каждой мыши. Контрольную группу мышей таким же образом обрабатывают одним наполнителем, т.е. 5%-ным кротоновым маслом в ацетоне. Через шесть часов после всасывания кротонового масла

измеряется толщина каждого уха. Результаты анализа показывают, что ингибирование опухоли составляет 37,4% и 92,1% при дозах в 10 мкг/мл и 100 мкг/мл соответственно для характерных соединений по изобретению, т.е. для метил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата. Эти результаты значительно отличаются от контрольных значений, р<0,001, и демонстрируют, что представительные соединения по изобретению обладают сильной местной противовоспалительной активностью.

Тест с весом кожи

Самцов крыс Spraque-Dawley, массой около 210 г, подвергали легкой анестезии эфиром, обрили и нанесли метки в трех областях на каждом боку интрадермальным введением синих чернил. Области на каждом правом боку использовались как необработанный контроль, в то время как на области на каждом левом боку местно наносился 0,1% раствор выбранных исследуемых соединений в N,N-диметилформамиде (ДМФ). Обработанные контрольные животные получали ежедневно местно только наполнитель (ДМФ). Растворитель и исследуемое соединение (10 мкл) наносили один раз в день в течение 10 последовательных дней, при повторном выбривании, если необходимо. На одиннадцатый день животных забивали, их кожу удаляли и кусочки диаметром 16 мм вырезали из каждой области. Кусочки тщательно очищали для удаления подкожного жира и мышц, и затем приклеивали на фильтровальную бумагу и взвешивали. Результаты представлены в табл. I. Кожная атрофия является известным побочным эффектом, связанным с местным применением противовоспалительных стероидов. Результаты показывают, что представительные соединения, несмотря на то, что обладают большей активностью, чем 17-бутират, вызывают меньшую атрофию кожи.

Тест с образованием гранулемы

Исследуемое соединение растворяли в ацетоне и порциями с различными концентрациями вводили в хлопчатобумажные шарики. Шарики высушивали и затем один шарик имплантировали под кожу каждой участвующей в эксперименте крысе. Спустя шесть дней животное забивали и грануляционную ткань (ганулему), которая образовалась внутри и вокруг имплантированного шарика, удаляли, высушивали и взвешивали. Кроме того, удаляли и взвешивали тимус и надпочечники. Способность соединения ингибировать образование гранулемы в этом тесте прямо указывает на местную противовоспалительную активность; таким образом, чем ниже вес грануляционной ткани, тем лучше противовоспалительная активность. С другой стороны, значительное снижение веса тимуса указывает на значительную системную активность; и наоборот, если исследуемое соединение не снижает значительно массу вилочковой железы по сравнению с контролем, это указывает на отсутствие (или минимум) системных побочных эффектов.

При тестировании таким способом представительные соединения по изобретению,аименно17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, проявили значительную местную противовоспалительную активность при наличии относительно более низкого системного эффекта.

Результаты, полученные при проведении описанного выше исследования, значения ED₅₀ и относительная сила представительных соединений по изобретению и известных стероидов обсчитаны и представлены в табл. II. Для одного из известных стероидов, а именно бетаметазона валерата, уровень эффективности определен как 100 при уровне ED₅₀, и эффективность других соединений выражена относительно этого значения. ED₅₀ представляет дозу, необходимую для достижения 50%-ого снижения веса грануляционной ткани.

Исследованию ингибирования тимуса

Несколько последующих исследований проводились для определения эффекта, который оказывают выбранные соединения по изобретению и известные стероиды на массу тимуса крысы при системном введении лекарственного средства. В каждом из этих исследований использовались самцы крыс линии Sprague-Dawley. Исследуемые соединения суспендировали в 0,5% КМЦ (карбоксиметилцеллюлозе) и инъецировали подкожно один раз в день в течение трех дней. На пятый день (спустя 48 часов после последней обработки) животных забивали и регистрировали массу тимуса. Массу тела измеряли через 24 часа после последней обработки. Результатом исследования являлось определение TED₅₀(тимолитически-эффективной дозы, что означает дозу, необходимую для достижения 40% ингибирования веса тимуса) и относительной эффективности представительных соединений по изобретению и известных стероидов. Далее, в табл. II относительная эффективность известного стероида бетаметазона 17-валерата при TED₅₀ дозе определена как 100, и эффективность других соединений выражена относительно него. Очевидно, что чем выше ингибирующая активность тимуса при данной дозе, тем более токсично соединение.

ED₅₀, определенная для исследования по местному образованию гранулемы вокруг хлопкового шарика, и TED₅₀, определенная на основании исследования по ингибированию тимуса, как описано выше, использовались для определения относительной эффективности и терапевтического индекса для представителей соединений по изобретению в сравнении с известными стероидами. См. табл. II, которая ясно показывает сильную противовоспалительную активность и минимальную системную токсичность представительных соединений по настоящему изобретению.

Дополнительные представительные соединения по изобретению использовались в различных исследованиях стабильности и рецепторного связывания, а также в исследовании по сосудосуживанию на человеке, что подробно описано ниже.

Исследования стабильности

Аналитический способ

Жидкостная хроматография высокого разрешения (ЖХВР) применялась для количественного определения следующих соединений изобретения:

Исследуемое соединение - Химическое название

А - метил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

В - этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

С - изопропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

D - хлорметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Эти соединения являются предпочтительными соединениями по изобретению, имеющими формулу (Iа), представленную в описании выше.

Колонка Whatman C-18 (4,6 мм х 108 мм) была присоединена к Spectra-Physics component системе, состоящей из SP 8810 прецизионного изократического насоса, инжектора Rheodyne 7125 (инъекционный объем 20 мкл), SP 8450 детектора для УФ и видимой части волн различной длины (230 нм) и интегрирующего устройства SP 4290. Система работает при температуре окружающей среды. Подвижная фаза состоит из ацетонитрила, уксусной кислоты и воды (60:0,1:40). Скорость потока составляет 1,0 мл/мин, время удерживания для исследуемых соединений составляет 4,74 мин для Соединения А, 5,84 мин для Соединения В, 6,93 мин для Соединения С и 5,72 мин для Соединения D.

Площадь пика ЖХВР и высота пика использовались для измерения концентрации исследуемых соединений, которые наносились на график относительно времени для оценки скорости исчезновения соединений. Стабильность определялась путем измерения константы скорости псевдопервого порядка (k_obs в мин^-1) или времени полужизни (t_1/2 в мин) исчезновения исследуемого соединения в буфере, k_obs определяли по наклону логарифмической кривой исчезновения [k_obs-наклон (-2,303)] и время полужизни исследуемого соединения рассчитывали из уравнения t_1/2=0,693/k_obs.

Стабильность в буферах

Стабильность исследуемых соединений А, В, С и D исследовалась в буферных растворах при рН от 4,0 до 9,0. 0,1 мл порцию каждого соединения в концентрации 1 мМ смешивали с 10 мл фосфатного буфера (приготовленного путем объединения 0.05М NaH₂PO₄ и 0,05М Na₂HPO₄ с 0.05М NaCl) с получением конечной концентрации в 0,01 мМ. Смесь инкубировали при 37^oС и образцы отбирались и вводились в ЖХВР систему через соответствующие интервалы времени. Проофили рН каждого тестируемого соединения показаны в табл. III.

Стабильность биологической среды

Порцию в 0,2 мл исходного раствора (1 мМ) каждого из исследуемых соединений А, В, С и D добавляют к 2 мл каждой биологической среды (цельная гепаринизированная кровь крысы, 20% гомогенат печени крысы и гомогент легких, разведенный в 6 объемах изотонического буфера с рН 7,40, приготовленный объединением 0.05М Nа₂НРО₄ и 0,05М NaH₂PO₄ с 0.05М NaCl), которые выдерживают при 37^oС на водяной бане для получения конечной концентрации 0,1 мМ в каждой биологической среде. Образцы в 1 мл отбирают через определенные интервалы времени в течение 2 часов (на О, 3, 5, 10, 20, 40, 60, 90 и 120 минутах) и смешивают с 0,2 мл ацетонитрила, содержащего 5% ДМСО. Каждую смесь центрифугируют и супернатант наносят на ЖХВР систему. Стабильность (t_1/2, период полужизни) исследуемых соединений в крови крысы, гомогенате печени и гомогенате легких представлена в табл. IV.

Стабильность в цитозоле

С целью определения, что соединения по изобретению могут быть стабильными в течение инкубационного периода, исследуемые соединения А, В, С и D исследовали на их стабильность в условиях инкубирования, протекавшего при комнатной температуре в течение 2 часов для изучения рецепторного связывания. Замороженный цитозол, который был приготовлен для изучения рецепторного связывания, помещали на водяную баню и разбавляли 1 частью инкубационного буфера (10 мМ Tris/HCl, 10 мМ молибдата натрия и 2 мМ 1,4-дитиотреитола), содержащего 15 мМ концентрацию ингибитора фермента, диизопропилфторфосфат. Порции (500 мкл) разбавленного цитозола добавляли в центрифужные пробирки, содержащие 80 мкл порции чистого инкубационного буфера вместо объема меченого ([³H] триамцинолон ацетонид), который может использоваться при изучении рецепторного связывания (RBS-receptor binding study), 80 мкл раствора ¹-кортиеновой кислоты (0,1 мМ) в буфере (конечная концентрация ¹-кортиеновой кислоты в инкубационной среде составляла 10 нМ) и 80 мкл 100000 нМ концентрации исследуемых соединений в этаноле с получением конечной концентрации в 10000 нМ. Эту смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 часов. Образцы по 0,1 мл были взяты через соответствующие интервалы времени (0; 0,5; 1; 1,5; 2 час) и смешивались с 0,2 мл ацетонитрила, содержащего 5% ДМСО. Каждую смесь центрифугировали и супернатант наносили на ЖХВР систему. Стабильность (% сохранения после инкубирования) исследуемых соединений в цитозоле при различных условиях показана в табл. V.

Дополнительное исследование стабильности и метаболизма

Аналитический метод

Проводилась жидкостная хроматография высокого разрешения (ЖХВР) при температуре окружающей среды следующих соединений (см. табл. VIа)

Waters NOVA-РАК фенильная колонка соединена с компонентами Spectra-Physics системы, состоящей из прецизионного изократического насоса, инжектора Rheodyne 7125 (инъекционный объем 20 мкл) и SP 8450 детектора для УФ/видимых различных длин волн (работающий на 254 нм) и SP 4270 интеграционного устройства. Подвижная фаза состоит из ацетонитрила, воды и уксусной кислоты при их объемном соотношении 40:60;0,1, работающей при скорости потока 1 мл/мин. Время удерживания соединений изобретения В и его метаболитов F и Н составляло 6,32; 2,25 и 1,66 минут, соответственно. Время удерживания соединения по изобретению J и его метаболитов L и М составляло 8,64; 2,70 и 2,45 минут соответственно. Время удерживания соединения по изобретению I и его метаболитов N и О составляло 5,84; 2,70 и 1,81 минут соответственно. Время удерживания кортиеновой кислоты составляло 1,00 минуту.

Стабильность в плазме человека или крысы

Использовалась свежесобранная кровь человека или крысы. Образец в 10 мМ исследуемых соединений в растворе этанола добавляли к предварительно нагретой (37^oС) плазме с получением конечной концентрации в 100 мкМ. Через соответствующие промежутки времени отбирали образцы (0,1 мл) и смешивали с 0,2 мл 5% раствора смеси диметилсульфоксид/ацетонитрила. Смеси центрифугировали и супернатанты анализировали с помощью ЖХВР. Константа скорости псевдопервого порядка исчезновения соединения в биологической среде определялась путем анализа линейной регрессии по графику логарифма площади пика и высоты пика в зависимости от времени.

Стабильность оценивалась с помощью константы скорости псевдопервого порядка (k, час^-1) и периода полужизни (t_1/2, час) исчезновения исследуемого соединения в среде. Результаты суммированы в табл. VI и VIIа далее.

Кинетические данные, полученные при наблюдении за исчезновением соединений изобретения с помощью ЖХВР, показывают образование всех ожидаемых метаболитов, т.е. соответствующих соединений формулы (VII), в которых R₁₃ представляет Н (Н, L, М) и в которых R₂₃ представляет Н (F, М, О), а также основных метаболитов, в которых R₁₃ представляет Н и R₂₃ представляет Н (кортиеновая кислота и соответствующая 9-фтор-16-метиловая кислота).

Изучение рецепторного связывания

Материалы

Немеченые вещества получали от Sigitia Chemical Co (St.Louis, МО). Радиоактивно меченное вещество 1,2,4-[³Н]-триамцинолона ацетонид (45 кюри/ммоль) закупали у New EnglandNuclear (Boston, MA). Растворители для подвижной фазы имели марку чистоты ЖХВР, сертифицированную по стандартам ACS.

Аппаратура

Для анализа рецепторного связывания применялось следующее: Т-линейный лабораторный гомогенизатор (Talboys Engineering Corp., Emerson, NJ); гомогенизатор Virtis 45 (The Virtis Co., Gardiner, NY); Ультрацентрифуга Backman L8-70 M с ротором T-170 (Palo Alto, CA); Микроцентрифуга Fischer, модель 235 С (Fischer Scientific Co., Fairlawn, NJ); Жидкий сцинтилляционный счетчик Beckman LS 500 TD (Fuller ton, CA).

Приготовление цитозола

Самцы крыс линии Sprague-Dawley, каждый весом от 150 до 200 г, использовались через 6 дней после удаления надпочечников. Крыс забивали декапитацией. Немедленно после резекции легких ткань замораживали на льду. Цитозол готовили, используя небольшую модификацию прежде описанного метода (Dahlberg, 1984). После добавления 6 объемов инкубационного буфера, охлажденного льдом (10 мМ Tris/HCl, 10 мМ молибдата натрия и 2 мМ 1,4-дитиотреитола), ткань гомогенизировали на гомогенизаторе Virtis 45 на полной скорости, 4 раза по 10 секунд с 10-секундным периодом охлаждения между каждым этапом. Гомогенат центрифугировали при 35000 g в течение 1 часа при 4^oС на ультрацентрифуге Бекмана L8-70M, снабженной ротором Т170. Порции цитозола (по 5 мл) замораживали жидким азотом и хранили при -80^oС.

Изучение связывания

В этом исследовании изучали следующие соединения изобретения А, В, С и D и их предполагаемые метаболиты Е, F, G и Н (см. табл.VII)

Представительные соединения по изобретению (А, В, С и D) и их метаболиты (Е, F, G и Н), дексаметазон и триамцинолона ацетонид, каждый по отдельности, растворяли в абсолютном этаноле с получением 1 мМ концентрации и разбавляли для получения различных концентраций от 300000 до 10 нМ с 40%-ным этанолом в воде. Цитозол плавят на водяной бане и разводят 1 частью инкубационного буфера, содержащего диизопропилфторфосфат в концентрации 15 мМ. Отдельные порции (по 140 мкл) разбавленного цитозола добавляют в центрифужные пробирки, содержащие 20 мкл исходного раствора ³Н]триамцинолона ацетонида в инкубационном буфере (конечная концентрация меченого соединения в каждой инкубационной среде составляет 10 нМ), 20 мкл раствора ¹-кортиеновой кислоты (0,1 мМ) в буфере (конечная концентрация ¹-кортиеновой кислоты в инкубационной среде составляет 10 нМ) и 20 мкл различных концентраций конкурентного вещества (соединения по изобретению А, В, С и D; их метаболиты Е, F, G и Н; дексаметазон; и триамцинолон ацетонид). После 2 часов инкубационного периода при комнатной температуре (24^oС) несвязанный стероид удаляли добавлением 2% суспензии активированного угля в инкубационном буфере (400 мкл). Смесь инкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре и затем центрифугировали при около 10000 g в течение 3 минут на микроцентрифуге. Радиоактивность (распад в мин) супернатанта (400 мкл) определяли с помощью подсчета жидкостной сцинцилляции. Неспецифическое связывание определяли в присутствии немеченого дексаметазона (10^-6) и оно во всех случаях было меньше 10% от общего связывания.

Уровень IC₅₀ исследуемых стероидов (концентрация конкурентного вещества, необходимая для замещения 50% связей [³H]триамцинолон ацетонида) и коэффициент наклона полученной в результате сравнительной кривой определялись способом нелинейной аппроксимации, используя модуль NON-LIN, версия Macintosh SYSTAT. Данные укладываются в следующую логическую функцию:

В=Т-ТС^N/(С+IC₅₀ ^N)+NS,

где В - СРМ в присутствии конкурента,

Т - СРМ в отсутствии конкурента,

С - концентрация конкурента,

N - фактор обсчета Хилла, и

NS - распад в мин в условиях неспецифического связывания.

Полученное в результате значение IC₅₀ трансформировали в относительное сродство к связыванию (RBA), используя дексаметазон (RBA=100) в качестве стандарта для сравнения:

RBA(X)=IC₅₀ (дексаметазон)/IC₅₀ (X)100.

Сродство к рецепторному связыванию (RBAs) представительных соединений по изобретению А, В, С и D и их предполагаемых метаболитов Е, F, G и Н с глюкокортикоидным рецептором легких крыс показаны в табл. VIII.

Обнаружено, что другое представительное соединение по изобретению, метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, имеет RBA-495, при анализе, проводимом таким образом. Ранее обнаружено, что лотепреднол этабонат имеет RBA=420. Напротив, обнаружено, что соединения формулы (VI), в которых R₁₂ представляет этил и R₂ представляет низший алканоил, т.е. хорошо известные аналоги соединений по изобретению алкил 17-алканоилокси-17-карбоксилата имеют RBA менее чем 1.

Действие ¹-кортиеновой кислоты на сродство к рецепторному связыванию

Для представительного соединения по изобретению В сродство к рецепторному связыванию изучали в присутствии и без ¹-кортиеновой кислоты в инкубационном растворе для изучения влияния ¹-кортиеновой кислоты на рецепторное связывание. Результаты представлены в табл. IX.

Ранее установлено, что лотепренол этабонат имеет RBA=152 без ¹-кортиеновой кислоты, тогда как в присутствии ¹-кортиеновой кислоты обнаружено, что его RBA= 420. В отличие от лотепренола этабоната настоящие соединения не связываются с транскортином. Соответственно, эти соединения более доступны для желаемой ферментативной дезактивации, что, в свою очередь, еще более повышает шанс на отсутствие у них нежелательных побочных эффектов.

Дополнительное излучение рецепторного связывания

Дополнительные исследования по оценке сродства к рецепторному связыванию соединений по изобретению, других соединений формулы (VII), приведенных здесь выше, и хорошо известных противовоспалительных стероидов были проведены с использованием способов, описаных выше в разделе "Изучение рецепторного связывания". Исследовались хорошо известные стероиды - дексаметазон, триамцинолон ацетонид, фторметолон и бетаметазон 17-валерат. Исследуемыми соединениями по изобретению были А, В, С, D, I и J, указанные выше. С целью сравнения также исследовали следующее соединение, имеющее формулу (VII) (см. табл. Ха).

Результаты приведены в табл. X.

Иcследование сужения сосудов у человека

Исследуемые соединения (10 мМ) растворяли в растворе этанола/пропиленгликоля (9/1) и 50 мкл этой смеси наносили на круглые кусочки пластыря, 8 мм в диаметре. После испарения этанола пластырь прикладывали человеку-добровольцу на предплечье и покрывали водонепроницаемой пленкой на 3 часа. Интенсивность сосудосуживания оценивали через 1, 8, 17 и 24 часа после удаления пластыря.

Градация шкалы для оценки активности сосудосуживания была следующая: 0, нормальная кожа; 1, легкое побледнение неотчетливого контура; 2, побледнение по крайней мере с двух углов контура; 3, побледнение с четким контуром по месту нанесения; 4, очень сильное побледнение (см. табл. XI).

Так как степень побледнения зависит как от собственной эффективности исследуемого соединения, так и от количества соединения, приложенного к месту проявления своей активности, можно сделать заключение, что представительные соединения являются сильными и длительно действующими местными противовоспалительными срествами с хорошими проникающими свойствами.

Дополнительное исследование суживания сосудов у человека

Способ 1

Исследуемые соединения (0,1-10 мМ) растворяли в растворе этанола/пропиленгликоля (9/1) с получением прозрачной смеси. Смесь в количестве 50 мкл помещали на круглые кусочки пластыря (8 мм в диаметре). После испарения этанола пластырь накладывали людям-добровольцам на предплечье и покрывали водонепроницаемой пленкой на 3 часа. Интенсивность суживания сосудов (шкала 0-4) оценивали через различные интервалы времени после удаления пластыря. Градация шкалы была следующая: 0, нормальная кожа; 1, легкое побледнение неотчетливого контура; 2, побледнение по крайней мере с двух углов контура; 3, побледнение с четким контуром по месту нанесения; 4, очень сильное побледнение. Кожные тесты (2-4 теста для каждого соединения) проводились на одном и том же человеке. Результаты представлены в табл. XII и XIII.

Способ 2

Тестируемые соединения (0,1-5 мМ) растворяли в растворе этанола/пропиленгликоля (9/1) с получением прозрачной смеси. Смеси в количестве 20 мкл помещали на круглые кусочки пластыря (1/4 дюцма (0,6 см) в диаметре). Пластырь накладывали людям-добровольцам на предплечье и покрывали водонепроницаемой пленкой на 3 часа. Интенсивность сосудосуживания оценивали по появлению побледнения в различные моменты времени после удаления пластыря. Тесты проводились на одном и том же человеке, и результаты получали после 2-4 наблюдений. Результаты представлены в табл. XIV.

Дексаметазон, бетаметазон 17-валерат и лотепреднол эта-бонат были использованы в качестве соединений сравнения. Также исследовали следующие соединения формулы (VII) (см. табл. XIIa).

Соединения А, В, С и D являются соединениями по изобретению формулы (Ia). Соединения I, J и К являются соединениями по изобретению формулы (Ib). Соединение Р является 17-негалогенированным алканоилокси производным, выбранным для сравнения (см. табл. XII, XIII, XIV).

В табл. XIV "-" обозначает, что получен отрицательный результат.

В других приведенных здесь таблицах "-" обозначает, что исследование не проводилось.

Исследование суживания сосудов человека используется как показатель чрезкожной абсорбции, активности и биодоступности глюкокортикоидов. Сравниваются соединения по изобретению, структурно родственные им соединения и хорошо известные противовоспалительные агенты. Результаты, представленные в табл. XII, показывают, что на 3-й час и после 20 часов после удаления пластыря представительные соединения по изобретению формулы (I) демонстрируют сосудосуживающую активность, равную или большую, чем у бетаметазон 17-валерата.

Одночасовая повторная окклюзия через 20 часов после удаления пластыря приводит к отчетливому повторному появлению побледнения кожи. И на этот раз, как показывает табл. XIII, представительные соединения изобретения формулы (I) показывают сосудосуживающую активность, равную или больше, чем бетаметазон 17-валерат.

В табл. XIV использовались результаты более простого способа оценки сосудосуживающей активности, по которому регистрировался только "положительный" (побледнение можно наблюдать) или "отрицательный" (побледнение не определяется) результат. И снова представительные соединения по изобретению формулы (I) показали равную или лучшую активность по сравнению с бетаметазон 17-валератом.

Таблицы XII, XIII и XIV также показывают, что, когда характеристическая 17-дихлорацетоксигруппа в соединениях формулы (I) заменяется на 17-пропионилоксигруппу, местная противовоспалительная активность сильно уменьшается. Эти таблицы также показывают, что данные 17-дихлорацетокси соединения обычно проявляют наибольшую активность, когда 17-группа представляет этиловый или метиловый эфир.

Соединения формулы (I) могут быть объединены с подходящим нетоксичным фармакологически приемлемым носителем для получения фармацевтической композиции для использования при лечении местных или других локализованных воспалений. Очевидно, с точки зрения отсутствия у них системной активности, соединения по изобретнию не предназначены для лечения состояний, для которых указывается системная адренокортикоидная терапия, например надпочечниковая недостаточность. В качестве примеров воспалительных состояний, которые можно лечить с помощью фармакологических композиций, содержащих, по крайней мере, одно соединение по изобретению, или один или несколько фармацевтических носителей, можно отметить следующие: кожные заболевания, такие как атопический дерматит, угревая сыпь, псориаз или контактный дерматит; аллергические состояния, такие как бронхиальная астма; заболевания глаз и ушей, включающие острые и хронические аллергические и воспалительные реакции (например, воспалительные заболевания глаз, такие как блефарит, конъюнктивит, эписклерит, склерит, кератит, передний увеит и симпатическая офтальмия); респираторные заболевания; воспаления рта, десен и/или горла, такие как гингивиты или оральная афта; воспаления слизистой носа, например, вызванные аллергией; воспаления верхних и нижних отделов кишечника, такие как язвенный колит; воспаления, связанные с артритом; и аноректальные воспаления, зуд и боль, связанная с геморроем, простатитом, криптитом, свищами, послеоперационными болями и анальным зудом. Такие композиции также могут применяться местно в качестве профилактического средства против воспаления и отторжения ткани, которые развиваются в связи с трансплантацией.

Очевидно, что выбор носителя(ей) и стандартных лекарственных форм будет зависеть от конкретных состояний, при которых должна вводиться композиция.

Примеры различных видов препаратов для местного/локального применения включают мази, лосьоны, кремы, порошки, капли (например, глазные и ушные капли и капли для носа), спреи (например, для носа и горла), суппозитории, удерживающие клизмы, жевательные или сосательные таблетки или пилюли (например, для лечения афтозных язв) и аэрозоли. Мази и кремы могут быть приготовлены, например, на водной или масляной основе с добавлением подходящих загущающих и/или желатинирующих агентов и/или гликолей. Такая основа может, таким образом, включать, например, воду и/или масло, такое как жидкий парафин или растительное масло, такое как арахисовое масло или касторовое масло, или гликолевые растворители, такие как пропиленгликоль или 1,3-бутандиол. Загужающие агенты, которые могут быть использованы в соответствии с природой основы, включают мягкий парафин, стеарат алюминия, цетостеариловый спирт, полиэтиленгликоли, ланолин, гидрированный ланолин и воск, и/или моностеарат глицерила, и/или неионные эмульгирующие агенты.

Растворимость стероидов в мази или креме может быть повышена с помощью включения ароматического спирта, такого как бензиловый спирт, фенилэтиловый спирт или феноксиэтиловый спирт.

Лосьоны могут быть приготовлены на водной или масляной основе, или будут обычно включать один или несколько следующих компонентов, а именно, эмульгаторов, диспергаторов, суспенгаторов, загустителей, растворителей, красителей и отдушек. Порошки могут быть приготовлены с добавлением любой подходящей порошкообразной основы, например талька, лактозы или крахмала. Капли могут быть приготовлены на водной основе, также содержащей один или несколько диспергирующих агентов, суспендирующих агентов или солюбилизирующих агентов и т.д. Спрей-композиции, например, могут быть приготовлены в виде аэрозолей с использованием подходящего пропеллента, например дихлордифторметана или трихлорфторметана.

Распыляемые или порошкообразные составы могут быть приготовлены для оральных ингаляций при лечении астмы, что хорошо известно в данной области. Растворы и суспензии могут быть приготовлены для перорального или ректального введения для применения при лечении воспалительных заболеваний кишечника, например, как это более подробно описано в приведенных далее примерах. Парентеральные/инъекционные составы могут быть приготовлены для прямого введения в суставы при лечении артритов в соответствии с методами, хорошо известными специалистам в области парентеральных препаратов.

Пропорция активного ингредиента в композициях в соответствии с изобретением будет изменяться в зависимости от используемого соединения, вида препарата и конкретных состояний, для лечения которых должна применяться композиция. Препарат будет обычно содержать от около 0,0001 до около 5,0% по массе соединения формулы (I). Препараты для местного применения содержат от 0,0001 до 2,5%, предпочтительно 0,01-0,5% активного компонента, и применяются один раз в день, или по необходимости. Также, говоря в целом, соединения по изобретению могут быть включены в состав композиций для наружного или другого местного применения, по существу, так же, как готовятся доступные на сегодняшний день типы композиций, содержащие известные глюкокортикоиды, при приблизительно таких же уровнях доз (или, в случае наиболее сильных соединений по изобретению, соответственно в меньшем количестве) по сравнению с известными высокоактивными агентами, такими как метилпреднизолонацетат и беклометазондипропионат, или в значительно более низких дозах по сравнению с менее активными известными агентами, такими как гидрокортизон.

Таким образом, например, ингаляционный состав, пригодный для использования при лечении астмы, может быть приготовлен как аэрозоли с фиксированной дозировкой, содержащие представительные типы соединений по изобретению, такие как этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, в соответствии со способами, хорошо известными специалистам в области фармацевтических препаратов. Такая аэрозольная единица может содержать микрокристаллическую суспензию вышеуказанного соединения в подходящей пропелленте (например, трихлорфторметане и дихлордифторметане) с олеиновой кислотой или другими подходящими диспергирующими агентами. Каждая единица обычно содержит 1-10 миллиграмм вышеуказанного активного ингредиента, приблизительно 5-50 микрограмм которого высвобождается при каждом применении.

Другой пример фармакологической композиции в соответствии с изобретением представляет пену, пригодную для лечения широкого спектра воспалительных аноректальных заболеваний, которая применяется анально или перианально и содержит от 0,05% до 0,1% соединения формулы (I), такого как этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4 -диен- 3-он-17-карбоксилат или метил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, и 1% местного анестетика, такого как гидрохлорид прамоксина, в мукоадгезивной пенистой основе пропиленгликоля, этоксилированного стеарилового спирта, полиоксиэтилен-10-стеарилового эфира, цетилового спирта, метилпарабена, пропилпарабена, триэтаноламина и воды с инертным пропеллентом.

Еще одним фармацевтическим препаратом по изобретению является раствор или суспензия, подходящие для использования в качестве удерживающей клизмы, одноразовая доза которой обычно содержит 20-40 миллиграмм соединения по изобретению, такого как этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, вместе с хлоридом натрия, полисорбатом 80 и от 1 до 6 унций (от 28,3 до 169,8 г) воды (воду добавляют непосредственно перед употреблением. Суспензия может вводиться в виде удерживающей клизмы или через капельницы несколько раз в неделю при лечении язвенных колитов.

Другие фармацевтические препараты в соответствии с изобретением проиллюстрированы в примерах далее.

Предполагается, что обычный специалист в данной области без дополнительных разъяснений, используя данное описание, сможет в полной мере использовать настоящее изобретение. Поэтому следующие примеры приводятся только в качестве иллюстрации, но не ограничивают каким-либо образом описание или формулу изобретения.

В следующих примерах синтеза все используемые нестероидные соединения и растворители имеют степень чистоты реагента. Все точки плавления определялись с использованием аппарата для определения точки плавления Fisher-Johns и не являются точечными значениями. Данные 300 МГц ¹H-ЯМР получены с использованием спектрометра Varian Т-90, QE-300 или спектрометра Varian Unity-300 и выражены в миллионных долях () относительно тетраметилсилана. Элементный анализ проводился с помощью Atlantic Microlab, Inc., Атланта, Джорджия, США. Масс-спектр получали с использованием оборудования Кrаtos MFC 500 и бомбардировкой быстрыми атомами (FAB). Тонкослойная хроматография (ТСХ) проводилась с использованием Merck DC-алюминиевых фоновых пластин, покрытых слоем силикагеля 60, толщиной около 0,2 мм, содержащего флуоресцентный индикатор (254). Силикагель (частицы размером 32-63) поставлен фирмой Selecto Scientific.

Пример 1

К раствору преднизолона (15 г, 0,04 моля) в тетрагидрофуране (120 мл) и метаноле (30 мл) при комнатной температуре добавляли теплый раствор (приблизительно 50^oС) метапериодата натрия (25,7 г, 0,12 моля) в воде (100 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов, затем концентрируют при пониженном давлении для удаления тетрагидрофурана и метанола. Твердое вещество растирают с 50 мл воды, отделяют фильтрацией, промывают несколько раз водой и сушат в вакууме при 50^oС в течение 3 часов. Продукт, 11, 17-дигидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту 1 (которую также обозначают ¹-кортиеновой

кислотой) получают в виде белого порошка с выходом приблизительно 94% (13,5 г), имеющим точку плавления 231-232^oС.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) (м.д.): 5.51(с, 1, СН=СН), 1.41(с,3, 19-СН₃), 0.92(с, 18-СН₃).

Элементный анализ для C₂₀H₂₆O₅:

Рассчитано: С 69.36; Н 7.51;

Найдено: С 69.31; Н 7.56. Продукт имеет следующую структурную формулу:



Пример 2

Замена преднизолона, используемого в Примере 1, на эквивалентное количество одного из исходных соединений, перечисленных ниже, и последовательное повторение способа приводит, в частности, к следующим указанным продуктам:

Исходное соединение - продукт

флудрокортизон-9-фтор-11,17-дигидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоновая кислота, т.пл. 250-253^oС;

бетаметазон-9-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-ен-3-он-17-карбоновая кислота, т.пл. 248-249^oС;

дексаметазон-9-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-ен-3-он-17-карбоновая кислота, т.пл. 275-278,5^oС;

гидрокортизон-11, 17-дигидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоновая кислота, т.пл. 231-234^oС (т.е. кортиеновая кислота).

Пример 3

Замена преднизолона, используемого в Примере 1, на эквивалентное количество одного из исходных соединений, перечисленных ниже, и последовательное повторение способа приводит, в частности, к следующим указанным продуктам:

Исходное соединение - продукт

кортизон - 17-гидроксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

хлоропреднизон - 6-хлор-17-гидроксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

флуметазон - 6, 9-дифтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

флупреднизолон - 6-фтор-11, 17-дигидроксиандроста1,4-ен-3-он-17-карбоновая кислота;

мепреднизон - 17-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

метилпреднизолон - 11,17-дигидрокси-6- метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

параметазон - 6-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

преднизон - 17-гидроксиандроста-1,4-диен-3,11-

дион-17-карбоновая кислота.

триамцинолон - 9-фтор-11,16,17-тригидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

изофлупреднон - 9-фтор-11, 17-дигидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

6, 9-дифторпреднизолон - 6,9-фтор-11,17-дигидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

беклометазон-9-хлор-11,17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

9-хлор-6-фтор-16-метилпреднизолон - 9-хлор-6-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

9-фтор-6-метил-преднизолон - 9-фтор-11,17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

дихлоризон - 9, 11-дихлор-17-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

9-хлор-16-метилпреднизолон - 9-хлор-11,17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота.

Пример 4

11, 17-Дигидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту 1 (3,12 г, 9,0 ммолей) растворяют в растворе бикарбоната натрия (7,56 г, 90 ммолей) в воде (100 мл). Добавляют метиленхлорид (100 мл), затем гидросульфат тетрабутиламмония (1,0 г). Смесь энергично перемешивают и в течение 5 минут по каплям добавляют дихлорацетилхлорид (1,51 г, 17 ммолей) в метиленхлориде (10 мл). Перемешивание продолжают приблизительно 5 часов, затем органическую фазу отделяют и последовательно промывают 5%-ным водным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором тиосульфата натрия. Органический раствор сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученный сырой твердый продукт очищают с помощью хроматографии, элюируя смесью метанол:метиленхлорид 1:100 по объему.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) (м.д.): 1.00(с, 18-СН₃), 1.42(с, 19-СН₃), 4.30(м, 11-СН), 5.93(с, 4-СН), 6.24(м, 2-СН), 6.87(с, COCHCl₂), 7.30(м, 1-СН=С).

FAB масс-спектр: 457 (М⁺).

Элементный анализ для С₂₂Н₂₆О₆С₁₂;

Рассчитано: С 57.77; Н 5.69; Сl 15.54;

Найдено: С 56.58; Н 5.83; Сl 15.14;

Продукт,17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота 4, имеет следующую структурную формулу:



Пример 5

Замещение на эквивалентное количество 9-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты 11, 17-дигидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты, используемой в Примере 4, и последовательное повторение способа приводит к 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоте 5, которая имеет следующую структурную формулу:



Очистка сырого продукта с помощью флэш-хроматографии на силикагеле метанолом: метиленхлоридом 10: 100 дает 5 с 90% выходом. МС: 490,7 ([М+Н]), 510,7 ([M+Na]).

Пример 6

Следуя общей методике Примера 4 и заменив соответствующие реагенты, получают новые промежуточные продукты по настоящему изобретению (см. табл. XV).

Соединения от 6-1 по 6-4, представленные выше, могут быть названы следующим образом:

6-1: 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоновая кислота;

6-2: 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоновая кислота;

6-3:17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

6-4: 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота.

Пример 7

Следуя общей методике примера 4 и заменяя соответствующие реагенты, получают новые промежуточные соединения по настоящему изобретению (см. табл. XVI).

Соединения с 7-1 по 7-15 могут быть названы следующим образом:

7-1: 17-дихлорацетоксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

7-2: 17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-3: 17-дихлорацетокси-16-метиландроста-1,4-, диен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

7-4:17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-5: 17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

7-6: 16,17-бис(дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-7: 6-хлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоновая кислота;

7-8: 17-дихлорацетокси-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-9: 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-10:17-дихлорацетокси-6,9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-11:9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-12: 9-хлор-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-

метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-13:17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-14: 9,11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота;

7-15:9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота.

Пример 8

17-Дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту 4 (0,23 г, 0,5 ммоля) растворяют в растворе бикарбоната натрия (0,2 г, 2,34 ммоля) в воде (50 мл). Добавляют метиленхлорид (50 мл), затем гидросульфат тетрабутиламмония (0,2 г). Смесь энергично перемешивают, одновременно добавляя по каплям метилиодид (0,16 г, 1,12 ммоля) в метиленхлориде (1 мл) в течение 5 минут. Перемешивание продолжают приблизительно 5 часов, затем отделяют органическую фазу и последовательно промывают 5%-ным водным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором тиосульфата натрия. Органический раствор сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученный сырой твердый продукт очищают с помощью хроматографии, элюируя метанолом: метиленхлоридом 1:200 по объему. Продукт получают с выходом 85% (0,2 г). Дополнительная очистка перекристаллизацией из смеси н-гексана и диэтилового эфира дает метил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 8, плавящийся при 115-117^oС и имеющий следующую структурную формулу:



¹H ЯМР (CDCl₃) м.д.: 1.02(с, 18-СН₃), 1.40(с, 19-СН₃), 3.75(с, СООСН₃), 4.51(м, 11-СН), 5.93(с, 4-СН), 6.24(м,2-СН), 6.85 (с, СОСНСl₂), 7.30(м, 1-СН=С).

FAB масс-спектр: 471 (M⁺).

Элементный анализ для С₂₃Н₂₈О₆Сl₂:

Рассчитано: С 58.60; Н 5.94; Сl 15.07;

Найдено: С 58.64; Н 6.15; Сl 14.73.

Пример 9

Повторение общей методики Примера 8, но используя эквивалентное количество этилиодида вместо метилиодида, дает этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 9, плавящийся при 208-210^oС и имеющий структурную формулу:



¹H ЯМР (СDСl₃) м.д.: 1.05(с, 18-СН₃), 1.27(т, СН₂СН₃), 1.37(с, 19-СН₃), 4.25(с, СООСН₂), 4.51(м, 11-СН), 5.93(с, 4-СН), 6.24(м, 2-СН), 6.87(с, COCHCl₂), 7.30(м, 1-СН=С).

FAB масс-спектр: 485 (М⁺").

Элементный анализ для С₂₄Н₃₀О₆Сl₂;

Рассчитано: С 59.38; Н 6.19; Сl 14.64;

Найдено: С 59.48; Н 6.26; Сl 14.72.

Пример 10

Повторение общей методики Примера 8, но используя эквивалентное количество изопропилиодида вместо метилиодида, дает изопропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 10, плавящийся при 222-223^oС и имеющий структурную формулу:



¹H ЯМР (СDСl₃) м. д.: 1.01(с, 18-СН₃), 1.22(д, СН(СН₃)₂), 1.39 (с, 19-СН₃), 4.25 (с, СООСН), 4,51(м, 11-СН), 5.93(с,4-СН), 6.24(м, 2-СН), 6.86 (с, COCHCl₂), 7.32(м, 1-СН=С). FAB масс-спектр: 499 (M⁺).

Элементный анализ для С₂₅Н₃₂O₆Сl₂:

Рассчитано: С 60.12; Н 6.41; Сl 14.23;

Найдено: С 59.99; Н 6.49; Сl 14.31.

Пример 11

Повторение общей методики Примера 8, но используя эквивалентное количество хлорметилиодида вместо метилиодида, дает хлорметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 11, плавящийся при 122-123^oС и имеющий структурную формулу:



¹H ЯМР (СDСl₃) м.д.: 0.98(с, 18-СН₃), 1.36(д, 19-СН₃), 4,45(м, 11-СН), 5.76(АВкв, СН₂Сl), 5.95(с,4-СН), 6.24(м, 2-СН), 6.89 (с, СОСНСl₂), 7.28(м, 1-СН=С).

FAB масс-спектр: 505 (M⁺).

Элементный анализ для С₂₃Н₂₇O₆Сl₃:

Рассчитано: С 54.65; Н 5.35; Сl 21.09;

Найдено: С 54.61; Н 5.41; Cl 20.94.

Такой же продукт более предпочтительно получать следующим способом, описанным ниже:

17-Дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 4 (0,024 моля) растворяют в воде (100 мл), содержащей бикарбонат натрия (9,90 г). Добавляют метиленхлорид (80 мл), затем гидросульфат тетрабутиламмония (0,47 г, 1,18 ммоля). Хлорметил хлорсульфат (4,75 г, 0,029 моля) в метиленхлориде (20 мл) добавляют по каплям в течение 30 минут при энергичном перемешивании. После перемешивания в течение 2 часов органическую фазу отделяют, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают досуха в вакууме с получениемсырогохлорметил17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата 11. После очистки хроматографически и перекристаллизацией, как описано в Примере 8, продукт плавится при 122-123^oС.

Пример 12

Повторение общей методики Примера 8, но используя вместо 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты 2 эквивалентное количество 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты 5, дает метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат 12, имеющий структурную формулу:



и, кроме того, характеризующийся точкой плавления 248-251^oС.

Пример 13

Следуя общей методике Примера 8 и заменяя на подходящие реагенты, получают соединения (см. табл. XVII).

Следующие соединения могут быть названы следующим образом:

13-1: этил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16- метиландроста-1, 4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-2:изопропил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-3:хлорметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-4: метил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-5: этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-6: изопропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-7: хлорметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-8: метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-9: этил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-10: изопропил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-11: хлорметил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандрост-4-ен-3-он-17-карбоксилат;

13-12: метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-

метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-13: этил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-14: изопропил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси- 16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-15: хлорметил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16 -метиландроста-1, 4 -диен- 3-он-17- карбоксилат;

13-16; метил 17-дихлорацетокси-6,9-дифтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-17: этил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1, 4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-18: изопропил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-19: хлорметил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-20: метил 17-дихлорацетоксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-21: этил 17-дихлорацетоксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-22: изопропил 17-дихлорацетоксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-23: хлорметил 17-дихлорацетоксиандрост-4-ен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-24:метил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-25: этил 17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-26:изопропил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-27:хлорметил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-28: метил 17-дихлорацетокси-16-метиландроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-29: этил 17-дихлорацетокси-16-метиландроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-30:изопропил17-дихлорацетокси-16-метиландроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-31:хлорметил17-дихлорацетокси-16-метиландроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-32:метил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-33: этил 17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-дарбоксилат;

13-34:иэопропил-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-35:хлорметил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-36: метил 17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-37: этил 17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-38: изопропил 17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-39: хлорметил 17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-

дион-17-карбоксилат;

13-40: метил 16, 17-бис (дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-41: этил 16, 17-бис (дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-42: изопропил 16, 17-бис (дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-43:хлорметил16,17-бис(дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-44: метил 6-хлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-45: этил 6- хлор-17- дихлорацетоксиандроста-1,4 -диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-46: изопропил 6-хлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-47: хлорметил 6-хлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3,11-дион-17-карбоксилат;

13-48:метил17-дихлорацетокси-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-49:этил17-дихлорацетокси-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-50:изопропил17-дихлорацетокси-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-51:хлорметил17-дихлорацетокси-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат

13-52:метил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-53: этил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-54:изопропил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-55:хлорметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-56: метил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-57: этил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11- гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-58:изопропил17-дихлорацетокси-6,9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-59: хлорметил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-60:метил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-61: этил 9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-62:изопропил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-63:хлорметил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-64: метил 9-хлор-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрок-

си-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-65:этил9-хлор-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-66: изопропил 9-хлор-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-67: хлорметил 9-хлор-17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-68: метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-69:этил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-70:изопропил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-71:хлорметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-72: метил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-73: этил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-74: изопропил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-75: хлорметил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-76:метил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-77: этил 9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-78:изопропил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-79:хлорметил9-хлор-17-дихлорацетокси-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-80: н-пропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-81: н-бутил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-82:н-пропил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-83: н-бутил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-84: н-пропил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-85: н-бутил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-86:н-пропил17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-87: н-бутил 17-дихлорацетокси-6-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-88: н-пропил 16, 17-бис (дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-89: н-бутил 16, 17-бис (дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-90: н-пропил 9,11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-91: н-бутил 9,11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-92:н-пропил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

13-93:н-бутил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Пример 14

Продукты по Примеру 4 и Примеру 5, соединения 4 и 5, соответственно каждое, подвергают взаимодействию сначала с диэтилхлорфосфатом и затем с СН₃SNа в хлороформе приблизительно в течение 6 часов. На первой стадии получают следующие промежуточные продукты (см. табл.XVIII).

На второй стадии получают соединения формулы (см. табл.XIX).

Когда продукты по Примеру 6 и по Примеру 7 обрабатывают в соответствии с вышеприведенными двумя стадиями процесса, получают соединения формулы (см. табл.XX).

Пример 15

17-Дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту 4 (7,00 ммоля) обрабатывают 7,00 мл 1М раствора метанольного раствора гидроксида натрия и затем добавляют 500 мл этилового эфира для осаждения. Выпавший осадок удаляют фильтрацией и сушат в вакуумном эксикаторе в течение ночи с получением желаемой соли, т.е. 17- дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата натрия. Соль растворяют в 40 мл гексаметилфосфорамида и медленно добавляют 1 эквивалент хлорметилметилсульфида. Быстро образуется осадок хлорида натрия. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 1 часа, затем разбавляют этилацетатом до общего объема 200 мл и промывают последовательно 3% бикарбонатом натрия и водой. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом магния и фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме до масла, и масло хроматографируют на силикагеле, используя этилацетат, хлороформ и уксусную кислоту в качестве элюента. Полученный при хроматографии продукт кристаллизуют из смеси этилового эфира и гексана с получением метилтиометил 17-дихлорацет-окси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат, который характеризуется структурной формулой



К раствору метилтиометил 17-дихлорацетокси-11- гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата (1 ммоль) в 2 мл дихлорметана добавляют м-хлорпероксибензойную кислоту (2 ммоля перкислоты). Происходит экзотермическая реакция, которая быстро затухает. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Выпавший осадок удаляют фильтрацией и фильтрат концентрируют в вакууме с получением метилсульфонилметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-арбоксилата, имеющего следующую структурную формулу:



Повторение методики, описанной в предыдущем абзаце, но с использованием только 1 ммоля м-хлорпероксибензойной кислоты, дает метилсульфинилметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата.

Пример 16

Повторение методики, описанной в первом абзаце Примера 15, но заменяя 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту на эквивалентное количество одного из исходных продуктов, перечисленных ниже, дает указанные продукты:

Исходное соединение - продукт

17-дихлорацетокси- 9-фтор-11-гидрокси-16- метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота - метилтиометил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

16,17-бис(дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота - метилтиометил 16, 17-бис(ди-хлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота - метилтиометил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат метилтиометил;

17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота-метилтиометил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

9, 11-дихлор-17-дихлор-ацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота - метилтиометил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат

Пример 17

Окисление каждого из продуктов, полученных в Примере 16, в соответствии со способом описанным во втором абзаце Примера 15, дает соответственно:

метилсульфонилметил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11- гидрокси-16-метиландроста-1,4 -диен- 3-он-17- карбоксилат;

метилсульфонилметил 16, 17-бис (дихлорацетокси) - 9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфонилметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфонилметил17-дихлорацетокси-6,9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфонилметил 9, 11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Пример 18

Окисление продуктов, полученных в Примере 16, в соответствии со способом, описанным в третьем абзаце Примера 15, дает соответственно:

метилсульфинилметил 17-дихлорацетокси- 9-фтор-11- гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфинилметил 16, 17-бис (дихлорацетокси) - 9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфинилметил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11- гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

метилсульфинилметил17-дихлорацетокси-6,9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;и

метилсульфинилметил 9, 11-дихлор-17- дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Пример 19

К раствору 3 грамм хлорметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата в 100 мл ацетонитрила добавляют AgF в молярном соотношении со стероидом как 10:1, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 дней, защитив реакционную систему от попадания света. Затем реакционную смесь фильтруют и твердый продукт на фильтре промывают этилацетатом. Фильтрат и этилацетатный раствор объединяют, смесь промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Растворители удаляют дистилляцией, получая сырой кристаллический продукт. Этот продукт подвергают препаративной тонкослойной хроматографии (Silica Gel 60F254, Merck), используя смесь хлороформа и метанола (15:1) в качестве элюирующего растворителя. Затем продукт перекристаллизовывают из смеси тетрагидрофурана и н-гексана, получая фторметил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Пример 20

Следуя общей методике Примера 19 и заменяя на подходящие реагенты, получают соединения (см. табл.XXI)

Данные соединения могут быть названы следующим образом:

20-1:фторметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-2:фторметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-3: фторметил 17-дихлорацетокси-6, 9-дифтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-4: фторметил 16, 17-бис(дихлорацетокси)-9-фтор-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-5:фторметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-6:фторметил17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-6-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат;

20-7: фторметил 9,11-дихлор-17-дихлорацетоксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат.

Пример 21

К смеси 9-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты (1 г, 2,64 ммоля, 1 эквивалент) и цианида серебра (0,78 г, 5,83 ммоля, 2 эквивалента) в 10 мл ГМФА (гексаметилфосфорамид, Aldrich) добавляют дихлорацетилхлорид (1,42 г, 9,63 ммоля, 3,6 эквивалента) одной порцией при комнатной температуре. Смесь перемешивают на масляной бане при 80^oС в течение 12 минут. Затем смесь добавляют по каплям к насыщенному водному раствору хлорида натрия (200 мл) при перемешивании с образованием осадка. Осадок собирают с помощью фильтрации и растворяют в тетрагидрофуране. Раствор тетрагидрофурана фильтруют для удаления нерастворимого твердого AgCN. Фильтрат концентрируют до около 10 мл и осаждают разбавлением 200 мл насыщенного водного раствора NaCl. Собранный осадок (1,29 г, 100% выход) показывает единственное пятно на ТСХ с 13:100 MeOH/CH₂Cl₂. Этот осадок может быть непосредственно использован на следующей стадии без какой-либо очистки. Бесцветное чистое соединение, 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновая кислота, может быть получено для анализа с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с 13:100 МеОН/СН₂С1₂, т.пл. 217-218^oС.

¹H ЯМР (CDCl₃-ДMCO-d₆) 0.96(3Н,д,16-СН₃), 1.12(3Н, с, 18-СН₃), 1.55(3Н, с, 19-СН₃), 2.59(1Н, м, 6Н), 2.65(1Н, м, 6-Н), 3.42(1Н, м, 16Н), 4.24(1Н, ушир.д, 11-Н), 1.28, 1.76, 1.81, 1.84, 2.12, 2.16, 2.22 и 2.40(8Н, м, другие Н в кольце), 6.03(1Н, с, 4-Н), 6.25(1Н, д, 2-Н), 6.43(1Н, с, СНС1₂), 7.33(1Н, д, 1-Н) м.д.

Пример 22

К смеси 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16- метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты (0,80 г, 1,63 ммоля), бикарбоната натрия (0,69 г, 8,2 ммоля, 5 эквивалентов) и гидросульфата тетрабутиламмония (0,11 г, 0,32 ммоля, 0,2 эквивалента) в 25 мл воды и 25 мл метиленхлорида добавляют иодэтан (0,54 г, 3,5 ммоля, 2,1 эквивалента) в 5 мл метиленхлорида при комнатной температуре при энергичном перемешивании. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. Органический слой отделяют и промывают насыщенным водным раствором NaCl. При удалении растворителя получают сырой продукт, который очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с 3,5;100 и 13:100 МеОН/метиленхлоридом с получением 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата (154 мг, 22,6%), т.пл. 234-236^oС. MS: 518,1 ([М+Н)].

Пример 23

К смеси 11, 17-дигидроандроста-1,4-диен-3-он-17- карбоновой кислоты (1,09 г, 3,14 ммоля, 1 эквивалент), NaHCO₃ (2,64 г, 31,4 ммоля, 10 эквивалентов), гидросульфата тетра-бутиламмония (0,31 г, 0,91 ммоля, 0,3 эквивалента) в метиленхлориде и воде (по 150 мл каждого) добавляют дихлорацетилхлорид (6,28 ммоля, 2 эквивалента) в 5 мл метиленхлорида при комнатной температуре при энергичном перемешивании. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. Органический слой отделяют и промывают насыщенным водным раствором NaCl. Удаление растворителя дает сырой продукт, который очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с 10: 100 метанолом/метиленхлоридом, получая чистую 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту с 95% выходом.

Пример 24

К смеси 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4- диен-3-он-17-карбоновой кислоты (3,24 г, 7,09 ммоля, 1 эквивалент), бикарбоната натрия (2,96 г, 35,4 ммоля, 5 эквивалентов) и гидросульфата тетрабутиламмония (2,96 г, 8,72 ммоля, 1,2 эквивалента) в 60 мл метиленхлорида и 60 мл воды добавляют этилиодид (2,21 г, 14,17 ммоля, 2 эквивалента) в 5 мл метиленхлорида при комнатной температуре при энергичном перемешивании. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. Органический слой отделяют, промывают насыщенным водным раствором NaCl, сушат над сульфатом натрия и выпаривают на роторном испарителе с получением сырого продукта. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с 2,1:100 метанолом/метиленхлоридом, получая чистое соединение этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата (1,89 г, 54,9% выход), т.пл. 207-208^oС. MS: 484,8 ([М⁺]).

Пример 25

К смеси неочищенной 17-дихлорацетокси-9-фтор-11- гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты (1 г, 2,0 ммоля, 1 эквивалент), полученной по Примеру 21, и безводного К₂СО₃ (0,72 г, 5,21 ммоля, 2,61 эквивалента) в гексаметилфосфорамиде (12 мл) добавляют метилиодид (3,8 г,

26,8 ммоля, 13,4 эквивалента) при комнатной температуре. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь добавляют к насыщенному водному раствору NaCl (200 мл) при перемешивании с образованием осадка. Осадок растворяют в метаноле (200 мл). В метанольном растворе при разбавлении насыщенным водным раствором NaCl (200 мл) выпадает осадок. Осадок очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (150 г) с 3;100 метанола/метиленхлорида, получая чистый метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат (0,95 г, 92% выход, рассчитанный на исходный продукт по Примеру 21, т.е. 9-фтор-11, 17-дигидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновую кислоту). Образец для элементного анализа получен растворением продукта в метиленхлориде, фильтрацией раствора и выпариванием с получением твердого продукта, который затем кристаллизуют из смеси метиленхлорида и гекса-на, т.пл. 252-253^oС.

¹H ЯМР (СDСl₃): 1.01(3Н, д, 16-СН₃), 1.09(3Н, с, 18-СН₃), 1.56(3Н, с, 19-СН₃), 2.43(1Н, м, 6-H), 2.63(1Н, м, 6-Н), 3.38(1Н, м, 16-Н), 3.75(3Н, с, СO₂СН₃), 4.41(1Н, ушир.д, 11-Н), 1.36; 1.64; 1.69; 1.72; 1.85; 2.18; 2.21 и 2.38(8Н, м, другие Н в кольце), 5.94(1Н, с, CHCl₂), 6.13(1Н, с, 4-Н), 6.35(1Н, д, 2-Н), 7.22(1Н, д, 1-Н) м.д.

При проведении вышеописанной реакции с использованием очищенной 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16- метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты реакционный выход количественный.

Пример 26

Ксмеси17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоновой кислоты (0,50 г, 1,02 ммоля, 1 эквивалент) и К₂СО₃ (0,36 г, 2,60 ммоля, 2,6 эквивалента) в гексаметилфосфорамиде (10 мл) добавляют хлорметилиодид (1,18 г, 6,69 ммоля, 6,6 эквивалента) при комнатной температуре. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов и затем добавляют 200 мл водного насыщенного раствора NaCl. Воздух барботируют в водный раствор для стимуляции образования осадка. Осадок растворяют в метаноле (10 мл) и добавляют к насыщенному водному раствору NaCl (200 мл). Образованный осадок очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (47 г) с 3:100 метанолом/метиленхлоридом с получением чистого хлорметил 17-дихлорацет-окси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилата (0,29 г, 53% выход), плавящегося при 228-229^oС (разложение).

¹H ЯМР (CDCl₂): 1.01(3Н, д, 16-СН₃), 1.16(3Н, с, 18-СН₃), 1.56(3Н, с, 19-СН₃), 2.42(1Н, м, 6-H), 2.64(1Н, м, 6-Н), 3.42(1Н, м, 16-Н), 4.45(1Н, м, ушир. д, 11-Н), 1.35, 1.63, 1.73, 1.78, 1.83, 1.88, 2.22 и 2.37 (8Н, м, другие Н в кольце), 5.56 и 5.94(2Н, 2д, CH₂Cl), 5.96(1Н, с, CHCl₂), 6.14(1Н, с, 4-Н), 6.37(1Н, д, 2-Н). 7.23(1Н, д, 1-Н) м.д.

Элементный анализ для С₂₄Н₂₈СlFО₆:

Рассчитано: С 53.60; Н 5.25;

Найдено; С 53.81; Н 5.56.

Пример 27

Мазь, мас.%/мас.:

Соединение формулы (I), например этил или изопропил 17-дихлорацет-окси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гид-рокси-16-метиландроста-1,4-диен-3он-17-карбоксилат - 0,05

Жидкий парафин - 10,0

Белый мягкий парафин - 89,95

Пилюля для лечения афтозной язвы, мг:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11 гидроксиандроста-1,4 -диен- 3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси- 9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,1

Лактоза - 69,90

Аравийская камедь - 3,00

Стеарат магния - 0,75

Удерживающая клизма, мас.%/об.:

Соединение формулы (I), например этил или изопропил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,001

Твин 80 - 0,05

Этанол - 0,015

Пропилпарабен - 0,02

Метилпарабен - 0,08

Дистиллированная вода - q.s. 100 об.

Глазные капли, мас.%/об.:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1.4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,05 мас.%/мас.

Твин 80 - 2,5

Этанол - 0,75

Бензалконий хлорид - 0,02

Фенилэтанол - 0,25

Хлорид натрия - 0,60

Вода для инъекций - q.s. 100 об.

Пример 28

Мазь, мас.%/мас.:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4 диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси- 9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,1

Жидкий парафин - 10,0

Белый мягкий парафин - 89,9

Пилюли для лечения афтозной язвы, мг:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор- l1- гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,15

Лактоза - 60,85

Аравийская камедь - 3,00

Стеарат магния - 0,75

Удерживающая клизма, мас.%/об.:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси- 9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,001

Твин 80 - 0,05

Этанол - 0,015

Пропилпарабен - 0,02

Метилпарабен - 0,08

Дистиллированная вода - q.s. 100 об.

Глазные капли, мас.%/об.:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4 -диен- 3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,1

Твин 80 - 2,5

Этанол - 0,75

Бензалкония хлорид - 0,02

Фенилэтанол - 0,25

Хлорид натрия - 0,60

Вода для инъекций - q.s. 100 об.

Пример 29

Глазные капли, мас.%/об.:

Соединение формулы (I), например изопропил или этил 17-дихлорацетокси-11-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат или метил 17-дихлорацетокси-9-фтор-11-гидрокси-16-метиландроста-1,4-диен-3-он-17-карбоксилат - 0,5 мас.%/мас.

Повидон - 0,6

Бензалкония хлорид - 0,02

Эдетат натрия по фармакопее CIDA(U.S.P) - 0,10

Глицерин U.S.Р. - 2,5

Тилоксапол U.S.Р. - 3,0

Хлорид натрия - 0,3

-Аминобутират натрия - 1,0

Стерильная дистиллированная вода - q.s. 100 об.

Ингредиенты, перечисленные выше, объединяют, затем устанавливают рН и, если необходимо, доводят до 5,0-5,5, подщелачивая гидроксидом натрия или подкисляя соляной кислотой.