новая лекарственная композиция для лечения болевого синдрома при спазме гладкой мускулатуры

Формула изобретения

1. Лекарственная композиция в форме ородисперсной таблетки для лечения болевого синдрома при спазме гладкой мускулатуры, характеризующаяся тем, что она содержит комбинацию гиосцина бутилбромида и нестероидного противовоспалительного средства (НПВС) в терапевтически эффективных количествах в качестве активных компонентов и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.

2. Лекарственная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она используется для лечения спастической дискинезии желчевыводящих путей и желчного пузыря, желчной колики, холецистита, кишечной колики, почечной колики, пилороспазма, альгодисменореи, синдрома раздраженного кишечника.

3. Лекарственная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она содержит в качестве НПВС средство, выбранное из группы: ацетилсалициловая кислота (аспирин), дифлунизал, лизинмоноацетилсалицилат, фенилбутазон, производные индолуксусной кислоты (индометацин, сулиндак, этодолак), производные фенилуксусной кислоты (диклофенак, ацеклофенак), оксикамы (пироксикам, теноксикам, лорноксикам, мелоксикам), производные пропионовой кислоты (ибупрофен, напроксен, флурбипрофен, кетопрофен, тиапрофеновая кислота).

4. Лекарственная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она содержит в качестве НПВС диклофенак или его натриевую соль в виде комплекса с калия полакриллином при соотношении диклофенака или его натриевой соли с калия полакриллином 1:2.

5. Лекарственная композиция по п.4, характеризующаяся тем, что содержит в качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ маннитол, аспартам, кросповидон, поливинилпирролидон К 30, вкусовую добавку и кремния диоксид коллоидный безводный при следующем содержании компонентов, мас.%:

Гиосцин бутилбромид	3,7-4,3
Комплекс диклофенака
или диклофенак натрия с калия
полакриллином	58,0-63,0
Маннитол	13,11-14,49
Аспартам	9,0-10,5
Кросповидон	6,08-6,72
Поливинилпирролидон К30	1,9-2,1
Вкусовая добавка	2,83-3,57
Кремния диоксид коллоидный
безводный	0,38-0,42

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к средствам, используемым для лечения болевого синдрома при спазме гладкой мускулатуры, в частности, при таких состояниях как:

спастическая дискинезия желчевыводящих путей и желчного пузыря;

желчная колика;

холецистит;

кишечная колика;

почечная колика;

пилороспазм;

альгодисменорея;

синдром раздраженного кишечника.

В основе таких спастических состояний лежит спазм гладких мышц органов. Он может быть обусловлен повышением уровня реагирования на раздражение вследствие нарушений в функционировании звеньев соответствующей нервно-рефлекторной дуги. Кроме того, спазм может возникать в результате нарушенной работы нервно-мышечного синапса при изменении электрического потенциала мышечных клеток или обменных процессов в отдельных мышечных элементах.

Например, дискинезия желчевыводящих путей и желчного пузыря - это функциональное расстройство двигательной функции желчного пузыря и внепеченочных протоков, т.е. буквально «нарушение движения». В данном случае речь идет о нарушении согласованных сокращений желчного пузыря и сфинктеров, позволяющих желчи выходить из желчного пузыря в двенадцатиперстную кишку.

Наиболее частой причиной желчных колик у взрослых являются желчные камни. Образование желчных камней происходит, в основном, в желчном пузыре и связано с расстройствами обмена веществ, при которых нарушается химический состав желчи. Такие состояния могут угрожать, по данным статистики, 5-10% населения любой развитой страны.

Почечная колика - синдром, наблюдающийся при ряде заболеваний почек, основное проявление которых - острые боли в поясничной области. Наиболее частыми причинами почечной колики бывают почечнокаменная болезнь, гидронефроз, нефроптоз - состояния, при которых нарушается уродинамика в верхних отделах мочевых путей.

Синдром раздраженного кишечника (СРК) - функциональное заболевание кишечника, характеризуемое хронической абдоминальной болью, дискомфортом, вздутием живота и нарушениями в поведении кишечника в отсутствие каких-либо органических причин.

Распространенность СРК среди населения составляет 14-48%. У женщин эта патология отмечается в 2-4 раза чаще, чем у мужчин. По некоторым данным, например, ежегодно в США расходы на лечение данного заболевания составляют 2 млрд долл.

Для лечения болевого синдрома при таких спастических состояниях традиционно используются спазмолитические средства. Обычно их применяют коротким курсом, до полного купирования болевого синдрома, в том числе и в сочетании с обезболивающими препаратами.

Из обезболивающих препаратов наибольшее распространение получили НПВС, в том числе следующие группы препаратов:

салицилаты: ацетилсалициловая кислота (аспирин), дифлунизал, лизинмоноацетилсалицилат.

пиразолидины: фенилбутазон.

производные индолуксусной кислоты: индометацин, сулиндак, этодолак.

производные фенилуксусной кислоты: диклофенак, ацеклофенак.

оксикамы: пироксикам, теноксикам, лорноксикам, мелоксикам.

производные пропионовой кислоты: ибупрофен, напроксен, флурбипрофен, кетопрофен, тиапрофеновая кислота.

Спазмолитические средства (spasmolytica; греч. spasmos судорога, спазм + lytikos освобождающий, избавляющий) - это лекарственные средства, понижающие тонус и двигательную активность гладких мышц и применяемые для предупреждения или устранения спазмов гладкомышечных органов. Примерами клинически значимых эффектов этих препаратов являются: устранение болей, обусловленных спазмами мускулатуры органов брюшной полости, улучшение вентиляции легких вследствие расширения бронхов при бронхоспазме, снижение АД и увеличение кровотока в периферических сосудах в результате снижения тонуса сосудистой стенки.

Миотропные С.с. снижают тонус гладкомышечных органов путем прямого влияния на биохимические процессы, протекающие в гладкомышечных клетках. В опытах на изолированных органах они понижают тонус гладких мышц, сосудов, бронхов, кишечника, мочевыводящих и желчных путей и др. В условиях целого организма отдельные группы миотропных С.с. проявляют неодинаковый тропизм к различным гладкомышечным органам и в связи с этим используются преимущественно по определенным показаниям.

Из спазмолитических средств, применяемых при таких состояниях, можно выделить, как Дицетел (пинаверия бромид), который расслабляет преимущественно гладкую мускулатуру пищеварительного тракта, желчевыводящих путей; Дюспаталин (мебеверина гидрохлорид), который избирательно влияет на гладкую мускулатуру желудочно-кишечного тракта (главным образом, толстого отдела кишечника), устраняет его спастические сокращения, но не влияет на нормальную перистальтику; Отилония бромид (Спазмомен), который избирательно влияет на гладкую мускулатуру желудочно-кишечного тракта и применяется для устранения спастических болей и дискинезий (по гиперкинетическому типу) при эзофагите, гастрите, дуодените, энтерите, синдроме раздраженной кишки, а также другие продукты (гимекромон, бенциклан, дротаверина гидрохлорид и т.д.)

Одним из самых распространенных препаратов в последнее время стал гиосцина бутилбромид (http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_1701.htm).

Гиосцина бутилбромид был создан в Германии в 1951 г.

Гиосцина N-бутилбромид является производным алкалоида гиосцина (скополамина), бутилированного по азоту.

В отличие от скополамина, гиосцина N-бутилбромид представляет собой четвертичное аммониевое соединение, которое плохо всасывается при приеме внутрь и не проходит гематоэнцефалический барьер. В опытах in vitro показано, что гиосцина N-бутилбромид снижает тонус гладких мышц, вследствие чего он нашел применение при лечении болей в животе, вызванных спазмами желудочно-кишечного тракта, в том числе синдрома раздраженной толстой кишки, и спазмов желчных и мочевыводящих путей. Гиосцина N-бутилбромид проявляет свое действие за счет блокады М-холинорецепторов, находящихся в мышцах кишечника, его применение не связано с системными побочными эффектами, характерными для других М-холиноблокаторов.

Он является высокоселективным в отношении M1 и М3-подтипов рецепторов, которых больше всего в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, желчного пузыря и билиарных протоков, что определяет его частое использование при данной патологии.

В то же время он имеет низкую системную биодоступность, что приводит к вариабельности проявлений действия при энтеральном введении.

Таким образом, эффективность лечения с его помощью известных лекарственных средств в виде таблеток не всегда оценивается как достаточная.

Кроме того, обычные таблетки для перорального приема не всегда удобны для пациентов - они требуют запивания водой, жевательные таблетки оказывают воздействие на зубы. У многих людей возникают осложнения в связи с необходимостью глотать обычные таблетки, которые часто имеют достаточно большой размер. Проблемы, связанные с неприятием таблеток (затрудненное дыхание, удушье, вызванное закупориванием горла), часто приводят к несоблюдению дозировки и даже к отказу от приема лекарств. Эти проблемы затрагивают, в частности, детей, людей пожилого возраста, пациентов, страдающих расстройствами глотательных рефлексов или патологиями, нарушающими слюновыделение.

Для таких групп больных разрабатываются быстродиспергируемые во рту формы.

Патент РФ 2424793 относится к фармацевтической композиции в виде пищевой пленки для перорального введения, где пищевая пленка включает диклофенак в форме свободной кислоты или резината диклофенака в количестве от 10 до 50 мас.% и пленкообразующий полимер в количестве от 10 до 80 мас.% в расчете на сухую массу полученной пищевой пленки. Композиция содержит от 10 до 50 мг диклофенака в растворенном или равномерно диспергированном состоянии, при этом пищевая пленка обладает толщиной 20-250 мкм. Изобретение обеспечивает быстрое разложение пищевой пленки в ротовой полости пациента в течение менее 20 секунд.

Известен патент RU 2242968 С2, который относится к быстродиспергирующейся твердой лекарственной форме, которая растворяется в ротовой полости в пределах шестидесяти (60), более предпочтительно тридцати (30), наиболее предпочтительно десяти (10) секунд. В качестве матрицы использован модифицированный крахмал, а в качестве активного вещества может быть выбран гиосцин бутилбромид.

Известны также таблетки сублингвальные Levsin, содержащие в качестве активного начала алкалоиды белладонны, а в качестве вспомогательных веществ - лактозу, стеарат магния, стеариновую кислоту, маннитол, крахмал и краситель, которые могут быть использованы при различных спастических состояниях, в том числе при синдроме раздраженного кишечника (http://www.medapharma.us/products/pi/LevsinSLTablets_PI.pdf). Не оказывает достаточно эффективного действия для снятия интенсивного болевого синдрома.

Еще одним новым направлением в разработке быстродиспергируемых таблеток являются ородиспергируемые таблетки.

Благодаря быстрому разрушению, которое становится возможным в присутствии слюны, ородиспергируемая таблетка в течение нескольких десятков секунд после приема распадается на легко проглатываемые мелкие частицы. В случае формы с мгновенным высвобождением активного вещества оральная дисперсия обеспечивает более быстрое усвоение организмом по сравнению с проглатываемыми формами благодаря увеличению площади обмена с физиологическими жидкостями.

Например, известен патент РФ 2317812, раскрывающий ородисперсную твердую лекарственную форму, содержащую однородные гранулы из лактозы и крахмала, полученные сушкой при совместном распылении. В качестве активного начала могут быть включены самые различные фармакологически активные вещества. Однако данные наполнители могут оказать негативное действие в случае использования при синдроме раздраженного кишечника.

Еще одним подходом при создании более эффективных средств для снятия болевого синдрома при спазмах гладких мышц является комбинирование известных препаратов.

Например, известна комбинация диклофенака и питофенона, которую можно использовать при болях, при коликах кишечника, желчного пузыря и мочеточников (Modulatory effect of diclofenac on antispasmodic effect of pitofenone in cholinergic spasm, Kulkarni, S.K., Indian Journal of Experimental Biology, Volume 42, Issue 6, June 2004, Pages 567-569).

В качестве ближайшего аналога может быть указан препарат Новиган в форме таблеток, включающий НПВС, представляющее собой Ибупрофен, в комбинации со спазмолитиком Питофеноном и холиноблокатором-Фенпивериния бромидом (http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_2346.htm). Данный препарат оказывает в меньшей степени ульцерогенное действие, но эффективен лишь при слабых или средних болях.

Задача настоящего изобретения - разработать более эффективную лекарственную форму, которая может быть использована для уменьшения болевого синдрома при различных спастических состояниях гладкой мускулатуры.

Поставленная задача решается новой лекарственной композицией в форме ородисперсной таблетки для лечения болевого синдрома при спазме гладкой мускулатуры, содержащей в качестве активных компонентов гиосцин бутилбромид и нестероидное противовоспалительное средство (НПВС) в терапевтически эффективных количествах и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.

Технический результат: повышение эффективности, биодоступности, вариабельности действия и снижение побочных эффектов.

Лекарственная композиция эффективна, например, для лечения спастической дискинезий желчевыводящих путей и желчного пузыря, желчной колики, холецистита, кишечной колики, почечной колики, пилороспазма, альгодисменореи, синдрома раздраженного кишечника.

В качестве НПВС могут быть использованы, например, ацетилсалициловая кислота (аспирин), дифлунизал, фенилбутазон, лизинмоноацетилсалицилат, производные индолуксусной кислоты (индометацин, сулиндак, этодолак), производные фенилуксусной кислоты (диклофенак, диклофенак натрия, ацеклофенак), оксикамы (пироксикам, теноксикам, лорноксикам, мелоксикам), производные пропионовой кислоты (ибупрофен, напроксен, флурбипрофен, кетопрофен, тиапрофеновая кислота).

Одной из предпочтительных альтернатив является сочетание гиосцин бутилбромида и диклофенака или его натриевой соли.

Анальгезирующий эффект НПВС в большей степени проявляется при болях слабой и средней интенсивности, которые локализуются в мышцах, суставах, сухожилиях, нервных стволах, а также при головной или зубной боли, в меньшей степени - при сильных висцеральных болях.

Согласно настоящему изобретению обнаружено потенцирующее действие данной группы на действие гиосцин бутилбромида даже при использовании более слабых по анальгетическому действию препаратов из группы НПВС. При этом, комбинацию можно использовать как при умеренных, так и при интенсивных болях.

Как правило, НПВС проявляют свое фармакологическое действие в высоких дозах, чем обусловлено наличие ряда побочных эффектов. Основным негативным свойством всех НПВС является высокий риск развития нежелательных реакций со стороны желудочно-кишечного тракта.

Поэтому возможность их снижения является важной задачей при разработке новых лекарственных средств на их основе. Было обнаружено, что за счет введения гиосцина бутилбромида значительно уменьшается разрушение клеток слизистой оболочки желудка, индуцируемого НПВС.

Композиция согласно изобретению включает активные вещества в терапевтически эффективных дозах. Указанные дозы зависят от заболевания, интенсивности боли, возраста и веса пациента. В среднем они составляют для гиосцина бутилбромида - 1-50 мг и для НПВС - от 1 до 1000 мг. Дозы НПВС являются разрешенными для применения и известны из уровня техники, в том числе из ФС. Однако в настоящем изобретении они могут быть снижены до 10% за счет проявляемой синергии с гиосцином бутилбромидом.

Например: кеторолак 10-30 мг, кетопрофен 25 мг, ибупрофен 400-700 мг; флурбипрофен 25-50 мг, ацетилсалициловая кислота 200-650 мг, фенопрофен 150-200 мг, напроксен 100-250 мг, этодолак 100-200 мг, диклофенак 2-200 мг, мелоксикам 1-5 мг мг, набуметон 800-1000 мг.

Еще одним аспектом изобретения является форма для введения лекарственной композиции. Предлагаемая лекарственная композиция выполнена в форме ородисперсной таблетки, что позволяет не только снизить ульцерогенное действие НПВС, но и решить проблему биодоступности и вариабельности действия гиосцина бутилбромида.

Для создания ородисперсной таблетки могут быть использованы сахара, такие как лактоза, сахароза; сахарные спирты, в частности- маннитол, сорбит, ксилит; диоксид кремния, стеариновая кислота и ее фармацевтически приемлемые соли, поливинилпирролидон, микрокристаллическая целлюлоза, модифицированные крахмалы, подсластители, вкусовые и ароматизирующие добавки и др.

Одним из предпочтительных вариантов является использование лекарственной композиции в форме ородисперсной таблетки, содержащей комбинацию гиосцина бутилбромида и НПВС, носителем в которой является состав из Маннитола, Аспартама, Кросповидона, Поливинилпирролидон K30, Вкусовой добавки, кремния диоксида коллоидного безводного.

Одним из частных случаев осуществления изобретения являются таблетки, содержащие гиосцина бутилбромид и диклофенак или его натриевую соль с калия полакриллином, при соотношении диклофенака или его натриевой соли с калия полакриллином (1:2) при следующем содержании компонентов, масс.%:

Гиосцин бутилбромид	3.7-4.3
Комплекс диклофенака или
диклофенак натрия с калия
полакриллином	58.0-63.0
Маннитол	13.11-14.49
Аспартам	9.0-10.5
Кросповидон	6.08-6.72
Поливинилпирролидон K30	1.9-2.1
Вкусовая добавка	2.83-3.57
Кремния диоксид коллоидный
безводный	0.38-0.42

Ородисперсные таблетки представляют собой белые округлые, непокрытые, плоские таблетки со скошенным краем.

Калия Полакриллин (РР) является монофункциональной минимально поперечно связанной карбоксильной кислотно-обменной смолой, полученной со-полимеризацией метакриловой кислоты с дивинилбензеном и в последующем нейтрализованной гидроксидом калия:

PP - эффективный агент, вызывающий дезинтеграцию, в низкой концентрации в различных препаратах в форме таблеток, включающих многие гидрофобные составы, где стандартные дезинтегрирующие агенты мало эффективны.

В заявленной композиции он может быть использован для получения комплекса с диклофенаком или его натриевой соли - резината диклофенака.

Маннитол оказывает дополнительное стабилизирующее действие на состав.

Заменитель сахара Аспартам используется в данной форме как усваиваемый низкокаллорийный подсластитель, обеспечивая в сочетании с другими компонентами приемлемые вкусовые качества.

В предлагаемой композиции выбрано также оптимальное сочетание двух видов поливинилпирролидона - Кросповидона и Поливинилпирролидона К30. Указанное сочетание обеспечивает требуемую прессуемость, стабильность, и также влияет на вкусовые качества таблеток.

В качестве вкусовой добавки можно вводить пищевые приемлемые добавки, например лимонную, мандариновую, черничную, мятную и др., предпочтительно - сухую мяту.

В качестве антифрикционного и диспергирующего компонента в состав введен кремния диоксид коллоидный безводный, например, может быть использован диоксид марки Аэросил 200.

Способ получения таблеток заключается в следующем.

Смешивают маннитол, кремния диоксид коллоидный безводный, 20% раствор поливинилпирролидона К30, гранулируют смесь распылением в псевдоожижженом слое. Отдельно смешивают предварительно полученный комплекс Диклофенака или диклофенака натрия с калия полакриллином (Резинат Диклофенака или резинат диклофенака натрия), взятых при соотношении 1:2, с гиосцина бутилбромидом, кросповидоном, аспартамом и вкусовой добавкой.

Объединяют полученные смеси и перемешивают до получения гомогенного состояния. Таблетируют смесь методом компрессия в две стадии: предварительная компрессия с силой 2-3 кН и окончательная компрессия с силой 8-10 кН. Твердость таблеток составляет 25-44 Н.

Примеры осуществления изобретения.

Пример 1

Гиосцин бутилбромид	3.7
Комплекс диклофенака или
диклофенак натрия с калия
полакриллином	63.0
Маннитол	13.11
Аспартам	9,0
Кросповидон	6.08
Поливинилпирролидон К 30	1.9
Сухая мята	2.83
Аэросил 200	0.38

Стадия А: Грануляция

Взвешивание и просеивание наполнителей для процесса грануляции:

Маннитол (13.11 кг)

Аэросил 200 (0.38 кг)

Поливинилпирролидон К30 (PVP К 30) (1.9 кг)

Весь взвешенный материал просеивается через решетчатый фильтр 40 меш. Гранулятор с псевдоожиженным слоем предварительно нагревают перед заполнением смеси и перед началом распыления раствора распыляемого материала для приобретения текучести смеси Маннитола и Аэросила 200 по крайней мере, в течение 3 минут.

Получение 20% раствора PVP К30 с использованием очищенной дистиллированной воды согласно стандарту Европейской Фармакопеи. Распыление раствора распыляемого материала в емкость гранулятора с псевдоожиженным слоем. Содержание влаги в грануляте составляет между 1,0 и 3,0%.

Стадия В: получение Комплекса Резината Диклофенака Натрия

Взвешивают и просеивают Диклофенака Натрия (21.0 кг) и Калия Полакриллина (42.0 кг). В теплую очищенную дистиллированную воду (температура от 35°C до 40°C) медленно добавляют просеянный Калия Полакриллин к вышеупомянутой дистиллированной воде при размешивании и продолжают размешивание в течение 2 часов. Медленно добавляют Диклофенак Натрия к вышеупомянутому раствору смолы при размешивании. pH фактор раствора Диклофенак Натрия - Смола должен составлять 5-6.

Перемешивают 2 часа при температуре между 35°C и 40°C.

Оставляют смесь на ночь. Комплекс Диклофенак Натрия - Смола будет стабилизирован, а на верхнем слое пасты будет присутствовать всплывающая жидкость. Слить всплывающую жидкость. Пасту высушивают при температуре 60°C в течение 30 минут или пока потеря при высыхании не составит NMT 3,0%.

Химическая реакция Комплекса Диклофенак Натрия - Резинат показана:

Стадия С: Заключительное смешивание

Взвешивание и просеивание активных веществ и остальной части наполнителей:

Комплекс Диклофенака Натрия с Калия Полакриллином,

гиосцин бутилбромид (3,7 кг)

Кросповидон (6,08 кг)

Аспартам (9 кг)

Сухая Мятная вкусовая добавка (2,83 кг)

Все взвешенные материалы просеивают через решетчатый фильтр 40 меш. Смешивают Кросповидон, аспартам, Сухую Мятную вкусовую добавку, Комплекс Резината Диклофенака Натрия и Гиосцин бутилбромида с гранулами Стадии А в блендере 50 минут таким образом, чтобы была получена гомогенная порошкообразная смесь.

Стадия D: Таблетирование

Способ, используемый для получения таблеток - это компрессия поворотным таблеточным прессом SMART Kilian 250. Компрессия осуществляется в две стадии: предварительная компрессия и окончательная компрессия. Условия: сила основной компрессии составляет 8-10 кН, сила предварительной компрессии - 2-3 кН. Твердость таблеток составляет 40 Н.

Пример 2

Гиосцин бутилбромид	4.0
Комплекс диклофенака или
диклофенак натрия с калия
полакриллином	60.0
Маннитол	13.8
Аспартам	10.0
Кросповидон	6.4
Поливинилпирролидон К30	2.0
Сухая мята	3.4
Кремния диоксид коллоидный
безводный	0.4

Пример 3

Гиосцин бутилбромид	4.3
Комплекс диклофенака или
диклофенак натрия с калия
полакриллином	58.0
Маннитол	14.49
Аспартам	10.5
Кросповидон	6.72
Поливинилпирролидон К30	2.0
Сухая мята	3.57
Кремния диоксид коллоидный
безводный	0.42

Пример 4

Гиосцин бутилбромид	3.7
Ацетилсалициловая кислота	61.1
Сорбитол	15
Аспартам	9,0
Кросповидон	6.0
Поливинилпирролидон К30	1.9
Сухая мята	2.9
Аэросил 200	0.4

Пример 5

Гиосцин бутилбромид	4.3
кетопрофен	20.0
Маннитол	13.0
Аспартам	9,0
МКЦ	45,8
Поливинилпирролидон К30	1.9
Сухая мята	3
Аэросил 200	2,0

Пример 6

Для оценки спазмолитического и обезболивающего действия веществ в опытах на грызунах (мыши, крысы) широко используется метод, вызывания болевых спазмов (судорог) стенки живота внутрибрюшинным (в/б) введением раствора уксусной кислоты. Судорожные сокращения, вызываемые уксусной кислотой, оцениваются визуально, легко подсчитываются за определенный период времени (обычно 10-30 мин) и обезболивающее или спазмолитическое действие оценивается по уменьшению числа судорог по сравнению с контрольными животными.

Эксперименты были проведены в соответствии с Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (под редакцией Р.Н. Хабриева, Москва, 2005). Животные (всего 80 мышей) были разделены на группы по 10 животных в каждой. Исследуемые растворы веществ были зашифрованы руководителем исследования. Опыты проводились исследователем, который не знал какое вещество было введено мышам (слепой метод) Группы животных дешифровались после получения всех данных.

1 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали 1% крахмальный клейстер.

2 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали диклофенак 10 мг/кг.

3 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали диклофенак 2,5 мг/кг

4 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали диклофенак 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг.

5 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали диклофенак 2,5 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг

6 группа, 10 мышей. Животные этой группы получали гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг

7 группа, Животные этой группы получали кетопрофен 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг.

8 группа, Животные этой группы получали ацетилсалициловую кислоту 20 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 1 мг/кг.

Все вещества вводили мышам внутрь желудка с помощью металлического зонда для мышей (FTSS-20S-38) фирмы Salomon Scientific (США) в объеме 0,2 мл на 10 г массы тела. Контрольной группе вводили 1: крахмальный клейстер в том же объеме. Спустя 1 час после введения этого раствора веществ мышам внутрибрюшинно вводили 0,75% раствора уксусной кислоты из расчета 0,1 мл на 10 г массы тела животного и в течение 15 мин подсчитывали количество корчей у каждого животного.

Результаты исследования и обсуждение результатов

Таблица 1
Влияние исследуемых веществ на количество корчей, вызванных в/б введением 0,75% уксусной кислоты у мышей. Приведены средние величины ± стандартные ошибки среднего значения (M±м) на группы из 10 животных
N группы	Исследуемые вещества и дозы	Среднее количество «корчей» за 15 мин и стандартная ошибка к ней. М±м	Достоверное различие с контролем
1	Контроль: уксусная кислота	32.80±1.227
2	гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг	22.40±0.9092	p<0,001
3	Диклофенак 2,5 мг/кг	29.90±0.8226	P>0.05 (нд)

4	Диклофенак 10 мг/кг	10.60±1.869	P<0,001
5	Диклофенак 2,5 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг	24.10±0.8750	P<0,001
6	Диклофенак 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг	6.80±1.672	P<0,001
7	Кетопрофен 10 мг/кг + гисцина N-бутилбромид 2 мг/кг	6.60±1.852	P<0,001
8	Аспирин 20 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 1 мг/кг	9.74±1.638	P<0,001

Статистический анализ полученных данных показал, что комбинация веществ НПВС + гиосцина N-бутилбромид статистически достоверное уменьшение числа корчей у мышей.

Показатели однофакторного дисперсионного анализа были: F2,29=103,7 (p<0.0001), последующий анализ действия отдельных групп с помощью теста Бонферрони выявил высокодостоверное влияние комбинации в дозах диклофенак 2,5 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг (p<0,001) и диклофенак 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг (p<0,001).

Однофакторный вариационный анализ действия отдельно вводимого диклофенака также выявил статистически достоверное угнетающее влияние вещества: F2,29=76,96 (p<0.0001), однако последующий анализ влияния отдельных групп с помощью теста Бонферрони показал статистически достоверное действие только дозы диклофенака 10 мг/кг (p<0,001), причем доза 2,5 мг/кг не оказывала статистически достоверного эффекта.

Гиосцина N-бутилбромид в дозе 2 мг/кг также оказывал угнетающее действие (p<0,001, т-тест Стьюдента) на корчи, вызванные уксусной кислотой у мышей.

Следующим этапом анализа было сравнить эфективность комбинации диклофенак + гиосцина N-бутилбромид с действием отдельно вводимого диклофенака. Для этого применялся двухфаторнй дисперсионный анализ где одним фактором было «вещество» и другим фактором - «доза».

Анализ показал высокодостоверное влияние фактора вещества: Fl,36=5,36 (p=0,0015), сильное влияние дозы: F1,36=77,96 (p=0,0001), и отсутствие интеракции «вещество» х «доза»: F3,36=0,23 (p=0,4). Таким образом, действие комбинации диклофенак + гиосцина N-бутилбромид статистически более эффективно угнетает корчй вызванные уксусной кислотой, чем отдельно вводимый диклофенак.

Следующим этапом было сравнить по силе действия комбинацию диклофенак + гиосцина N-бутилбромид с отдельно водимым гиосцина N-бутилбромидом. Поскольку гиосцина N-бутилбромид исследовался только в одной дозе был применен однофакторный дисперсионный анализ при котором действие комбинации сравнивалось с действием гиосцина. Статистический анализ показал статистичски значимое более сильное действие комбинации: F2,29=62,17, p<0.0001, причем анализ Бонферрони выявил статистически более сильное комбинации Диклофенак 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг по сравнению с дозой 2 мг/кг гиосцина N-бутилбромида (p<0,001). Комбинация Диклофенак 2,5 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг статистически не отличалась от отдельно вводимого гиосцина N-бутилбромида.

Сравнение действия веществ по силе угнетающего действия на корчи суммировано на рисунке. На этом графике корчи, вызванные уксусной кислотой в контрольной группе приняты за 100% и действие веществ и их комбинаций выражено в процентах к контролю.

Данные представлены в процентах по отношению к контролю, принятому за 100%. Каждая группа состояла из 10 мышей.

Как видно из рисунка, исследуемые вещества и их комбинации по силе угнетающего действия на корчи располагаются в следующем порядке:

Диклофенак 10 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг > Диклофенак 10 мг/кг > гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг = диклофенак 2,5 мг/кг + гиосцина N-бутилбромид 2 мг/кг > Диклофенак 2,5 мг/кг.