амидные производные или их соли

Формула изобретения

1. Амидное производное, представленное следующей формулой:



в которой кольцо В представляет моноциклическую гетероарильную группу;

X представляет связь или низшую алкиленовую группу;

R представляет атом водорода, атом галогена, низшую алкильную группу, амино группу, арил(низшую)алкильную группу или галогенарил(низшую)алкильную группу,

или его соль.

2. Амидное производное по п.1, представляющее

(R)-4"-[2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]-2-пиридинкарбоксанилид;

(R)-2-[1-(4-хлорбензил)-1Н-имидазол-2-ил] -4"-[2-[2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилид;

(R)-2-[1-(3,4-дихлорбензил)-1Н-тетразол-5-ил] -4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилид;

(R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4"-[2-(2-гидроокси-2-фенилэтил)амино] этил] ацетанилид;

(R)-2-(2-аминопиридин-6-ил)-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино] этил] ацетанилид или

(R)-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]-2-(2-пиридил)ацетанилид

или его соль.

3. Фармацевтическое средство для лечения сахарного диабета, содержащее терапевтически эффективное количество активного ингредиента, отличающееся тем, что в качестве активного ингредиента оно включает амидное производное или его соль по п.1.

4. Фармацевтическое средство по п.3, отличающееся тем, что оно включает амидное производное или его соль по п.2.

Описание изобретения к патенту

Область техники

Изобретение относится к фармацевтическим препаратам и, более конкретно, оно относится к новым амидным производным или их солям и терапевтическим средствам от сахарного диабета.

Предшествующий уровень техники

Сахарный диабет представляет заболевание, сопровождаемое непрерывным гипергликемическим состоянием, и, говорят, что он является следствием действия многих факторов окружающей среды и генетических факторов. Основным регулирующим фактором сахара в крови является инсулин, и, известно, что гипергликемия является следствием дефицита инсулина или избытка факторов, которые ингибируют его действие (таких как генетическая причина, недостаток физической нагрузки, ожирение и стресс).

Сахарный диабет подразделяется на два основных типа. Первый представляет инсулинзависимый сахарный диабет (ИЗСД, IDDM), вызываемый снижением инсулинсекретирующей функции поджелудочной железы вследствие аутоиммунных заболеваний, и другой представляет инсулиннезависимый сахарный диабет (ИНСД, NIDDM), вызываемый снижением инсулинсекретирующей функции поджелудочный железы вследствие панкреатического утомления, сопровождаемого непрерывной высокой секрецией инсулина. 95% или более диабетических пациентов в Японии, как сообщают, страдают ИНСД, и увеличение таких пациентов вследствие изменения стиля повседневной жизни становится проблемой.

Что касается лечения сахарного диабета, то в случае слабых форм, в основном, проводят лечение с помощью диеты, лечебной гимнастики и средств от ожирения, в то время когда болезнь прогрессирует, то вводят пероральные противодиабетические лекарственные средства (например, промоторы секреции инсулина, такие как соединения сульфонилмочевины, и потенциаторы чувствительности к инсулину, которые усиливают чувствительность к инсулину. В некоторых случаях вводят препараты инсулина. Однако существует большой спрос на создание лекарственных средств, посредством которых можно было бы в большей степени осуществлять контроль за уровнем сахара в крови, и существует потребность в разработке противодиабетических лекарственных средств, имеющих новый механизм и имеющих высокую полезность.

В патентах США 4396627 и 4478849 описываются фенилэтаноламиновые производные и раскрывается, что эти соединения полезны в качестве лекарственных средств против ожирения и гипергликемии. Действие этих соединений, как сообщают, обусловлено стимулирующим действием на ₃-рецепторы. В частности, известно, что -адреналиновые рецепторы подразделяются на ₁, ₂ и ₃ субтипы, стимулирование ₁-рецептора вызывает увеличение частоты сердечных сокращений, стимулирование ₂-рецептора стимулирует разложение гликогена в мышцах, посредством чего ингибируется синтез гликогена, вызывая действие, такое как мышечный тремор, а стимулирование ₃-рецептора проявляет действие против ожирения и действие против гипергликемии (такое как уменьшение триглицеридов, уменьшение холестерина и увеличение HDL-холестерина).

К сожалению, эти ₃-агонисты также оказывают действия, вызываемые стимулированием ₁- и ₂-рецепторов, такие как увеличение частоты сердечных сокращений и мышечный тремор, и они создают проблему в плане проявления побочных действий.

Недавно было установлено, что -рецепторы различаются по типам, и сообщается также, что даже соединения, в отношении которых подтверждено было, что они проявляют селективность в отношении ₃-рецептора у животных грызунов, таких как крысы, проявляют и действие, являющееся следствием стимулирующего воздействия на ₁- и ₂-рецепторы человека. С учетом вышеупомянутого за последнее время были проведены исследования соединений, проявляющие стимулирующее действие, которое селективно по отношению к ₃-рецептору человека, с использованием человеческих клеток или клеток, в которых экспрессируются рецепторы человека. Например, в WO 95/29159 описываются замещенные сульфонамидные производные, представленные нижеследующей формулой:



в которой в отношении обозначений символов следует обратиться к описанию этого патента, и раскрывается, что благодаря своему селективному стимулирующему действию на ₃-рецепторы, имеющиеся у человека, они являются полезными для лечения ожирения, гипергликемии и т.д. Однако в этом патенте вообще не сообщается о действии, промотирующем секрецию инсулина, и действии, потенцирующем чувствительность к инсулину, этих соединений.

Таким образом, все еще существует потребность в создании терапевтических средств нового типа для лечения сахарного диабета, которые имели бы высокую клиническую полезность.

Сущность изобретения

Настоящими изобретателями проведено интенсивное исследование соединений, оказывающих действие, как промотирующее секрецию инсулина, так и потенцирующее чувствительность к инсулину, и было установлено, что новые амидные производные проявляют как благоприятное промотирующее секрецию инсулина действие, так и активное потенцирующее чувствительность к инсулину действие и, кроме того, демонстрируют селективное стимулирующее действие по отношению к ₃-рецепторам, что привело к созданию настоящего изобретения.

Таким образом, данное изобретение относится к амидному производному, представленному следующей формулой (I):



где кольцо В представляет гетероарильную группу;

Х представляет связь или низшую алкиленовую группу;

R представляет атом водорода, атом галогена, низшую алкильную группу, аминогруппу, арил-низшую-алкильную группу или галогенарил-низшую-алкильную группу,

или его солям, проявляющим как промотирующее секрецию инсулина действие, так и действие, потенцирующее чувствительность к инсулину, и, кроме того, оказывающим действия против ожирения и против гиперлипемии благодаря селективному стимулирующему действию на ₃-рецепторы. Данное изобретение также относится к терапевтическому средству против сахарного диабета, содержащему амидное производное или его соль в качестве эффективного ингредиента.

Соединение формулы (I) дополнительно иллюстрируется следующим образом.

В определениях, используемых в формуле в данном описании, термин "низший" означает линейную или разветвленную углеводородную цепь, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов, если не оговорено иное.

Примерами "низшей алкильной группы" являются метильная, этильная и линейная или разветвленная пропильная, бутильная, пентильная или гексильная группа, предпочтительна алкильная группа, имеющая от 1 до 4 углеродных атомов, и особенно предпочтительна метильная, этильная, пропильная или изопропильная группы.

Примером "низшей алкиленовой группы" является двухвалентная группа, получаемая путем удаления водородного атома из вышеупомянутой "низшей алкильной группы, предпочтительна алкиленовая группа, имеющая от 1 до 4 углеродных атомов, особенно предпочтительны метилен, этилен, пропилен или бутилен.

Примером "гетероарильной группы" являются моноциклические гетероарильные группы, такие как фурил, тиенил, пирролил, имидазолил, тиазолил, пиразолил, изотиазолил, изоксазолил, пиридил, пиримидил, пиридазинил, пиразинил, тиадиазолил, триазолил и тетразолил, и бициклические гетероарильные группы, такие как нафтилидинил и пиридопиримидинил.

Примерами "атома галогена" являются атом фтора, атом хлора, атом брома и атом иода, и примерами "галогенарил-низшей-алкильной группы" является группа, в которой атом или атомы водорода у арила в вышеупомянутой арил-низшей-алкильной группе замещен (замещены) атомом или атомами галогена.

Случай, когда X представляет связь, означает, что атом углерода группы -СО- непосредственно связан с кольцом В.

Соединение (I) данного изобретения имеет, по крайней мере, один асимметрический атом углерода и, поэтому существуют оптические изомеры, такие как (R)-соединения и (S)-соединения, рацематы, диастереомеры и т.д. Данное изобретение включает все и каждый из выделенных изомеров и их смеси. Данное изобретение также включает гидраты, сольваты (такие как сольваты с этанолом) и полиморфные вещества соединения (I).

Соединения (I) данного изобретения могут образовывать соль с кислотой. Примерами соли являются соли присоединения кислоты (кислотно-аддитивные соли) с минеральными кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота и фосфорная кислота, и соли с органическими кислотами, такими как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, лимонная кислота, винная кислота, угольная кислота, пикриновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота и глутаминовая кислота.

Способ получения

Соединение данного изобретения или его соль можно получить путем применения различных синтетических способов, использующих характеристики его основного скелета или типа заместителя. Представительные способы получения иллюстрируются ниже.

Первый способ получения (см. схему 1 в конце описания).

В данном способе соединение (II) и соединение (III) подвергают амидированию и затем из него удаляют защитную группу, получая соединение (I) данного изобретения.

Амидирование в данном способе получения может быть проведено стандартными способами.

Растворитель можно варьировать в зависимости от Y¹ в соединении (III) и, в большинстве случаях, может применяться инертный растворитель или спиртовой растворитель (такой как изопропанол).

Когда Y¹ представляет гидроксильную группу, может использоваться способ, по которому рекцию проводят в вышеупомянутом растворителе в присутствии конденсирующего агента. Примерами конденсирующего агента являются N,N"-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)кабодиимид (EDCI), 1,1"-карбонилдиимидазол (CDI), дифенилфосфорилазид (DPPA) и диэтилфосфорилцианид (DEPC).

Когда Y¹ представляет низшую алкоксигруппу, можно использовать способ, по которому реакцию проводят при нагревании или кипячении с обратным холодильником как таковую или в вышеупомянутом инертном растворителе.

Когда Y¹ представляет атом галогена, может применяться способ, по которому реакцию проводят в вышеупомянутом инертном растворителе в присутствии основания.

Примерами инертного растворителя являются диметилформамид (ДМФ, DMF), диметилацетамид, тетрахлорэтан, дихлорметан, дихлорэтан, хлороформ, тетрахлорид углерода, тетрагидрофуран, диоксан, диметоксиэтан, этилацетат, бензол, толуол, ксилол, ацетонитрил, диметилсульфоксид и смешанный растворитель из них, и они могут соответствующим образом выбираться в зависимости от условий реакции. Примерами основания являются неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия и карбонат калия, и органические основания, такие как N-метилморфолин, триэтиламин, диизопропилэтиламин и пиридин.

Защитная группа аминогруппы, представленная R^a, представляет защитную группу, которая обычно используется для аминогруппы, и иллюстративными примерами ее являются ацилы, такие как формил, ацетил, пропионил, метоксиацетил, метокси-пропионил, бензоил, тиенилацетил, тиазолилацетил, тетразолилацетил, тиазолилглиоксилоил и тиенилглиоксилоил; низшие алкоксикарбонилы, такие как метоксикарбонил, этоксикарбонил и трет-бутоксикарбонил; аралкилоксикарбонилы, такие как бензилоксикарбонил и n-нитробензилоксикарбонил; низшие алкансульфонилы, такие как метансульфонил и этансульфонил; аралкилы, такие как бензил, n-нитробензил, бензгидрил и тритил, и три-(низший-алкил)силилы, такие как триметилсилил.

Удаление защитной группы в данном способе получения может проводиться с помощью стандартных приемов. Например, защитную группу для аминогруппы, представленную R^a, можно легко удалить с помощью i) способа, в котором в случае, когда защитная группа представляет бензгидрил, п-метоксибензил, тритил, трет-бутоксикарбонил, формил и т.д., проводят обработку кислотой, такой как муравьиная кислота, трифторуксусная кислота, смесь трифторуксусной кислоты и анизола, смесь бромистоводородной кислоты и уксусной кислоты, смесь хлористоводородной кислоты и диоксана; ii) способа, в котором, когда защитная группа представляет бензил, п-нитробензил, бензгидрил, тритил и т. д. , проводят каталитическое восстановление с использованием катализаторов палладий-углерод или гидроксид палладия-углерод; iii) способа, по которому, когда защитная группа представляет три-(низший-алкил)силильную группу и т.п. , проводят обработку водой, фторидным анионом (тетра-н-бутиламмонийфторид, фторид натрия, фторид калия или фтористоводородная кислота) и т.д.

Второй способ получения (см. схему 2 в конце описания).

В этом способе получения соединение (IV) подвергают взаимодействию с соединением (V), получая соединение (I) данного изобретения.

Аминовое соединение (IV) и соединение (V) подвергаются взаимодействию друг с другом при нагревании или кипячении с обратным холодильником в течение от 1 до 24 часов, так как они есть, или в инертном растворителе, давая соединение (I) данного изобретения.

Примерами инертного растворителя являются ацетонитрил, тетрагидрофуран, 2-бутанон, диметилсульфоксид и N-метилпирролидон. В реакции, к реакционной смеси может добавляться основание, такое как бикарбонат натрия, карбонат калия или диизопропилэтиламин.

В вышеупомянутых способах получения полученное вещество можно очистить путем удаления нежелательных побочных продуктов с помощью перекристаллизации, пульверизации, препаративной тонкослойной хроматографии, флешхроматографии на силикагеле (упоминаемой W. С. Still et а1. J.Org. Chem. 43, 2923 (1978)), жидкостной хроматографии среднего давления и ВЭЖХ (HPLC). Соединения, полученные с помощью ВЭЖХ (HPLC), могут выделяться в виде соответствующих солей.

Исходное вещество, используемое в вышеупомянутых способах получения, можно легко получить способами, которые известны специалистам в данной области. Один из характерных способов представлен ниже.

Способ получения исходного соединения (II) (см. схему в конце описания).

Данный способ получения состоит из стадий (а)-(с), из которых стадия (а) представляет стадию, на которой соединение (VI) подвергают взаимодействию с соединением (VII) с последующим восстановлением с получением соединения (VIIIa) в зависимости от типа R^с, стадия (b) представляет стадию, на которой проводят защиту, когда R^b в соединении (VIIIa) является атомом водорода, и стадия (с) представляет стадию, на которой нитрогруппу восстанавливают в аминогруппу, с получением соединения (II).

Примерами защитной группы аралкильного типа для аминогруппы, используемыми в вышеупомянутом способе получения, являются бензил, п-нитробензил, бензгидрил и т.д.

Стадия (а):

Иллюстрация представлена для следующих трех случаев.

1) Когда R^с представляет эпокси, соединение (VI) может подвергаться взаимодействию с соединением (VII) тем же самым образом, как в вышеупомянутом втором способе получения. Условия реакции, такие как температура реакции, растворитель и т.д., также являются теми же самыми.

2) Когда R^с представляет 2-галогенацетил, соединение (VI) подвергают взаимодействию с соединением (VII) в присутствии основания с последующим восстановлением, получая соединение (VIIIa). Основанием является то же, что упомянуто в первом способе получения. Восстановление может проводиться в вышеупомянутом инертном растворителе или в растворителе спиртового типа при перемешивании в присутствии восстанавливающего агента. Примерами восстанавливающего агента являются боргидрид натрия, цианоборгидрид натрия, литийалюминийгидрид и боран.

3) Когда R^с представляет 1-карбоксиметан-1-ол, соединение (VI) подвергают взаимодействию с соединением (VII) в присутствии конденсирующего агента, с последующим восстановлением таким же образом, как в случае 2), с получением соединения (VIIa). Конденсирующим агентом является тот же, что упоминается в первом способе получения.

Стадия (b):

Когда R^b в соединении (VIIIa) представляет атом водорода, аминогруппу защищают обычными способами, используя, например, ди-трет-бутилдикарбонат или аналогичные, с получением соединения (VIIIa).

Стадия (с):

Способ восстановления нитрогруппы в аминогруппу может проводиться с помощью общепринятых способов, таких как восстановление металлами с использованием железа, цинка и т.д., и каталитическое восстановление с использованием катализатора, такого как палладий-углерод, гидроксид палладия-углерод, никель Ренея и т.д. R^a становится атомом водорода в зависимости от условия восстановления, но его можно снова защитить обычными способами.

Что касается других соединений, таких как соединение (III), соединение (IV), соединение (V), соединение (VI) и соединение (VII), то можно использовать соединения, которые доступны на рынке или которые соответствующим образом синтезируются известными способами (такими как амидирование, восстановление, N-алкилирование, циклизация и гидролиз) из коммерчески или промышленно доступных соединений.

Соединение (I) данного изобретения, которое получают как таковое, выделяют и очищают в виде свободного соединения, его соли, получаемой посредством солеобразования стандартными способами, гидрата, сольвата с различными растворителями, такими как этанол, или полиморфных кристаллов. Выделение и очистку можно осуществлять, используя обычные химические операции, такие как экстрация, концентрирование, выпаривание, кристаллизация, фильтрование, перекристаллизация и различные приемы хроматографии.

Различные изомеры могут быть выделены обычными способами с использованием физико-химических различий между изомерами. Например, рацемат может быть превращен в стереохимически чистые изомеры с помощью обычного рацемического разделения (такого как способ, по которому рацемат превращают в диастереомерные соли с обычной оптически активной кислотой [например, винная кислота] , с последующим подвержением оптическому разделению). Смесь диастереомеров может быть разделена стандартным способом, таким как фракционная кристаллизация или хроматография. В случае оптически активного соединения его можно получить исходя из соответствующего оптически активного вещества.

Промышленная применимость

Фенэтанольное производное данного изобретения, представленное формулой (I), или соль его оказывает как промотирующее секрецию инсулина действие, так и действие, потенцирующее чувствительность к инсулину, и, кроме того, проявляет селективное стимулирующее действие по отношению к ₃-рецептору, и поэтому оно является полезным как терапевтическое средство от сахарного диабета.

Как подтверждалось с помощью теста на толерантность к глюкозе и гипогликемического теста на инсулинрезистентных модельных животных, как описано позднее, соединение данного изобретения проявляет, благоприятное промотирующее секрецию инсулина действие, так и действие, потенцирующее чувствительность к инсулину, в связи с чем весьма ожидаема его полезность при сахарном диабете. Хотя ₃-рецептор стимулирующее действие может иметь возможность участия в экспрессии промотирующего секрецию инсулина действия и действия, потенцирующего чувствительность к инсулину, возможен также другой механизм участия в нем, и детали его до сих пор еще не известны. ₃-Рецептор стимулирующее действие соединения данного изобретения является селективным по отношению к ₃-рецепторам человека. Известно, что стимуляция ₃-рецептора стимулирует расщепление жира (расщепление триглицеридов жировой ткани на глицерин и свободную жирную кислоту), и тем самым промотируется исчезновение жировой массы. Поэтому соединение данного изобретения оказывает действие против ожирения и действие против гиперлипемии (такое как действие, понижающее уровень триглицерида, действие, понижающее уровень холестерина, и действие, повышающее HDL холестерин), и является полезным в качестве профилактического и терапевтического средства при ожирении и гиперлипемии (такой как гипертриглицеридемия, гиперхолистеринемия и гипо-НD-липопротеинемия). Эти заболевания были известны как враждебные факторы при сахарном диабете, и облегчение симптомов этих заболеваний также полезно для профилактики и терапии сахарного диабета.

Соединение данного изобретения также полезно в качестве профилактического и терапевтического средства против других заболеваний, когда улучшение симптомов может достигаться путем снижения симптомов ожирения и гиперлипемии, таких как ишемические коронарные заболевания (например, артериосклероз, инфаркт миокарда и стенокардия), церебральный артериосклероз (например, церебральный инфаркт) или аневризма.

Кроме того, селективное ₃-рецептор стимулирующее действие соединения данного изобретения является полезным для профилактики и лечения некоторых заболеваний, которые, как сообщалось, облегчаются путем стимулирования ₃-рецептора. Примеры этих заболеваний показаны следующим образом.

Упоминалось, что ₃-рецептор опосредует (является связующим звеном) подвижность не относящегося к сфинктеру сокращения гладкой мышцы, и, так как полагают, что селективное рецептор стимулирующее действие помогает фармакологическому регулированию кишечной перистальтики без сопутствующего кардиоваскулярного действия, соединение данного изобретения имеет перспективу быть полезным при лечении заболеваний, вызываемых аномальной кишечной перистальтикой, таких как различные желудочно-кишечные заболевания, включая синдром раздраженной толстой кишки (слизистый колит). Оно также полезно для лечения пептической язвы, эзофагита, гастрита и дуоденита (включая заболевание, вызываемое Helicobacter pylori), изъязвление тонкой кишки (такое как воспалительные кишечные заболевания, язвенный колит, клональное заболевание и проктит).

Кроме того, показано, что ₃-рецептор воздействует на ингибирование высвобождения нейропептида из некоторых сенсорных волокон в легком. Сенсорный нерв играет важную роль в нейрогенном воспалении дыхательного тракта, включая кашель, и поэтому специфический ₃-агонист данного изобретения является полезным при лечении нейрогенного воспаления и, кроме того, почти не оказывает действия на кариолегочную систему.

Кроме того, ₃-адреналиновый рецептор способен оказывать в результате селективное антидепрессивное действие вследствие стимуляции ₃-рецептора головном мозге, и, таким образом, соединение данного изобретения имеет перспективу быть полезным в качестве антидепрессанта. В результате экспериментов с использованием клеток человека было установлено, что действие соединения данного изобретения является селективным по отношению к ₃-рецепторам, вредное действие, вызываемое стимуляцией другого ₃-рецептора, является низким или отсутствует.

Действия соединения данного изобретения подтверждаются нижеследующими испытаниями.

1. Гипогликемический тест на kk мышах (инсулинрезистентная модель; ожирение и гипергликемия):

Самцов kk мышей (уровень сахара в крови не ниже чем 200 мг/дл) подвергают анализу на уровень сахара в крови при кормлении и затем статистически делят на группы. Лекарственный препарат, подлежащий испытанию, принудительно вводят перорально или подкожно один раз в день в течение четырех дней, и сравнивают уровень сахара в крови после 15-18 часов от конечного введения с уровнем сахара в крови до введения (n=6). Отбирают кровь из хвостовой вены мышей, используя стеклянный капилляр (предварительно обработанный гепарином), удаляют оттуда белок и измеряют количество глюкозы в супернатантной жидкости (мг/дл) колориметрическим определением с помощью глюкозооксидазного способа.

Соединение данного изобретения значительно понижало уровень сахара в крови по сравнению с уровнем до введения сравнительного лекарственного средства в обоих случаях, как перорального, так и подкожного введения. Например, соединение Примера 6 демонстрирует гипогликемический показатель 48%, в среднем, при оральном введении 10 мг/кг. Данный результат показывает, что соединение данного изобретения проявляет хорошее потенцирующее действие на чувствительность к инсулину:

Соединения примера - ED₃₀ (мг/кг день)

2 - 3,1

5 - 6,5

6 - 2,7

2. Тест на толерантность к глюкозе на нормальных крысах:

Самцов крыс SD линии, в возрасте семи недель, держат в голоде на протяжении целого дня и ночи, затем произвольно делят на группы и подвергают испытанию на толерантность к глюкозе при пероральном введении (OGTT) (n=4). Соединение, подлежащее испытанию, вводят орально или подкожно за 30 минут до введения глюкозы (2 г/кг при оральном введении). У крыс, которых анестезировали пентобарбиталом (65 мг/мл), отбирают кровь из брюшной аорты, используя обработанный гепарином стеклянный шприц, оттуда удаляют белок и измеряют количество глюкозы в супернатантной жидкости (мг/дл) колориметрическим определением с помощью глюкозооксидазного способа. Показатель инсулина в крови определяют путем измерения количества инсулина в плазме (нг/мл) с помощью радиоиммуноанализа (RIA).

В группе, которой вводили соединение данного изобретения орально или подкожно, наблюдалось значительное повышение содержания инсулина в крови по сравнению с группой, которой не давали лекарственное средство. Повышение уровня сахара в крови после введения глюкозы также значительно игибировалось. Из этих результатов видно, что соединение данного изобретения проявляет хорошее промотирующее секрецию инсулина действие и хорошее ингибирующее гипергликемию действие.

3. Тест на стимулирование ₃-, ₂- и ₁-рецепторов человека:

Стимулирующее действие на ₃-рецептор человека исследуют, используя SК-N-МС клеточную систему (приобретают клетки, в которых перманентно экспрессируются ₃-рецептор человека и ₁-рецептор человека), в то время как стимулирующие действия на ₂- и ₁-рецепторы человека исследуют, используя СНО клеточную систему (приобретают клетки, в которых принудительно экспрессируется каждый из ₂- и ₁-рецепторов человека). Стимулирующее действие соединения (10^-10 до 10^-4 M) исследуют путем инкубирования 10⁵ клеток/лунку каждой из клеток на 24-луночном планшете и контроля в субсливном (subconfluent) состоянии спустя два дня, используя продуцирующую активность циклической АМФ (сАМР) в качестве показателя. Стимулирующее действие на ₃-рецептор человека исследуют в присутствии блокатора ₁-рецептора (CGP20712A, 10^-5 M). Количество продуцирования сАМР в каждой клетке (пноль/мл) измеряют с помощью RIA метода, используя ¹²⁵I-cAMP. Интенсивность действия каждого соединения сравнивают путем вычисления величины pD2 и максимальной активности (I.A. (%), при котором максимальную реакцию 10^-8 М изопротеренола определяют как 100%) по данным полученной кривой доза-реакция.

Было установлено, что соединение данного изобретения оказывает селективное стимулирующее действие на ₃-рецептор человека.

Фармацевтическую композицию, содержащую одно или несколько из соединений данного изобретения или его солей в качестве эффективного ингредиента, получают, используя обычные фармацевтически приемлемые наполнители. Введение фармацевтической композиции согласно данному изобретению может осуществляться либо пероральным путем, либо парентеральным путем, например, при помощи инъекции, суппозитория, подкожного средства, ингаляционного средства, или путем вливания в мочевой пузырь (intracystic infusion).

Дозу можно подобрать соответствующим образом в зависимости от каждого конкретного случая, принимая во внимание симптом, возраст, пол и т.д. пациента, но обычно она находится в диапазоне примерно от 0,01 до 100 мг/кг в день для взрослых в случае перорального применения, и ее вводят сразу или путем деления на 2-4 приема в день. В случае проведения внутривенной инъекции в зависимости от симптома, доза обычно находится в диапазоне примерно от 0,001 до 10 мг/кг в день для взрослых, и ее вводят сразу или путем деления два или более раз в день.

Что касается наполнителя для препарата, можно использовать нетоксичные твердые или жидкие вещества для фармацевтических препаратов.

Примерами твердой композиции, используемой посредством перорального введения, согласно данному изобретению являются таблетки, пилюли, капсулы, разбавленный порошок и гранулы. В такой твердой композиции одно или несколько активных веществ смешивают с, по крайней мере, одним инертным эксципиентом, таким как лактоза, манит, глюкоза, гидроксипропилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, поливинилпирролидон, агар, пектин, алюминат магний-метасиликата и алюминат магния. Композиция может также обычным образом содержать добавки, иные, чем инертный эксципиент, такие как смазка (например, стеарат магния), дезинтегратор (например, гликолят кальцийцеллюлозы), стабилизатор (например, лактоза) и вспомогательный солюбилизатор (например, глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота). Таблетки или пилюли могут, при необходимости, быть покрыты сахарным покрытием, таким как сахароза, желатином, гидроксипропилцеллюлозой и фталатом гидроксипропилметилцеллюлозы или пленкой из веществ желудочного или кишечного покрытия.

Жидкая композиция для орального введения включает фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, и она содержит обычно используемые инертные эксципиенты (наполнители), такие как очищенные вода или этанол. Помимо инертного наполнителя композиция может дополнительно содержать вспомогательные агенты, такие как увлажняющие или суспендирующие агенты, сластители, придающие вкус агенты, ароматизирующие агенты и антисептические агенты. Инъекция для парентерального введения включает асептические водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Неводные растворы и суспензии включают, например, дистиллированную воду для инъекции и физиологический солевой раствор. Примерами растворителя для неводного раствора и суспензии являются пропилен-гликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (такие как масло какао, оливковое масло и кунжутное масло), спирты (такие как этанол), аравийская камедь и Полисольват 80 (Polysolvafce 80) (торговая марка). Такая композиция может дополнительно содержать вспомогательные вещества, такие как изотонизирующие агенты, антисептические агенты, увлажняющие агенты, эмульгаторы, диспергирующие агенты, стабилизаторы (например, лактоза) и вспомогательные солюбилизаторы (например, глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота). Их можно стерилизовать, например, путем фильтрации, пропуская через бактериальный фильтр, или путем компаундирования или облучения с бактерицидом. Они могут также использоваться путем приготовления стерильной твердой композиции с последующим растворением в стерильной воде или стерильном растворителе для инъекции перед использованием.

Предпочтительные варианты воплощения изобретения

Данное изобретение дополнительно иллюстрируется с помощью Примеров, приведенных ниже. Соединения данного изобретения не ограничиваются соединениями, упомянутыми в нижеследующих Примерах, а охватывают все соединения, представленные вышеуказанной формулой (I), их соли, гидраты, геометрические и оптические изомеры и полиморфные формы. В частности, случай, в котором вещество, которое используют в данном изобретении, является новым, иллюстрируется с помощью нижеследующего сравнительного Примера.

Сравнительный пример 1

2-Пиридинкарбонилхлорид (146 мг) добавляют к раствору 448 мг трет-бутил-(R)-N-[2-(4-аминофенил)-N-(2-гидрокси-2-фенилэтил)этил] карбамата и 330 мг триэтиламина в 4 мл хлороформа. Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение двух часов, и растворитель затем выпаривают в вакууме. Остаток разбавляют хлороформом и органический слой промывают насыщенным водным растворам кислого карбоната натрия и сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель выпаривают в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: гексан/этилацетат =1/3), получая 321 мг трет-бутил-(R)-N-(2-гидрокси-2-фенилэтил)-N-[2-[4-[(2-пирндинкарбонил)амино]фенил]этил]карбамата.

Пример 1

4 н. раствор хлористый водород - этилацетат (10 мл) добавляют к 10 мл этанольного раствора 458 мг трет-бутил-(R)-N-(2-гидрокси-2-фенилэтил)-N-[2-[4-[(2-пиридинкарбонил)амино] фенил] этил] карбамата. Реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов и растворитель затем выпаривают в вакууме. Полученные неочищенные кристаллы перекристаллизовывают из смеси метанол-этанол-этилацетат, получая 289 мг дигидрохлорида (R)-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]-2-пиридинкарбоксанилида.

Соединения Примеров 2-4 получают таким образом, как в Примере 1.

Пример 2

Дигидрохлорид (R)-2[1-(4-хлорбензил)-1Н-имидазол-2-ил] -4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Пример 3

Гидрохлорид (R)-2-[1-(3,4-дихлорбензил)-1Н-тетразол-5-ил]-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Пример 4

Дигидрохлорид (R)-2-(2-аминопиридин-6-ил)-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Пример 5

15 мл 4 н. раствора хлористый водород - этилацетат добавляют к раствору 690 мг трет-бутил-(R)-N-[2-[4-[2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетамино]фенил]этил] -N-[(2-гидрокси-2-фенил)этил] карбамата в МеОН (30 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух часов. Растворитель выпаривают в вакууме и остаток затем очищают с помощью колоночной хроматографии с обращенной фазой (элюент: вода/метанол =2/1), получая 310 мг дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4"-[2-(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино] этил] ацетанилида.

Пример 6

10% палладий-углерод (5,96 г) добавляют к 400 мл метанольного раствора 20,1 г 4"-[2-[N-бензил-N-(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино] этил] -2-(2-пиридил)ацетанилида. Реакционный раствор перемешивают в атмосфере водорода при атмосферном давлении в течение шести часов. Нерастворимые вещества отфильтровывают, используя Целит, и фильтрат концентрируют в вакууме. К метанольному раствору остатка добавляют 10,8 мл 4 н. раствора хлористый водород - этилацетат и растворитель затем выпаривают в вакууме. Полученные неочищенные кристаллы перекристаллизовывают из смеси метанол-этанол, получая гидрохлорид (R)-4"-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]-2-(2-пиридил)ацетанилида.

Структурные формулы соединений Примеров представлены в Таблице 1, физические и химические свойства соединения Ссылочного Примера 1 представлены в Таблице 2 и физические и химические свойства соединений Примеров представлены в Таблице 3 соответственно.

Символы, используемые в таблицах, имеют следующие значения. Rex: Ссылочный Пример ; NMR: спектр ядерного магнитного резонанса, TMS - внутренний стандарт; используемым растворителем являлся DMCO-d, если не указано иное; mp: температура плавления; dec: разложение; MS (m/z): данные масс-спектрометрического анализа (m/z).

Обозначения для данных ЯМР Таблиц 2 и 3:

s - с (синглет), d - д (дублет), dd - дд (двойной дублет), m - м (мультиплет), brs - шс (широкий синглет), br - ш (широкий), dt - дт (двойной триплет), Hz - Гц.