способ разрушения клетки-мишени или инфекционного агента- мишени (варианты), химерный рецептор (варианты), днк (варианты), вектор (варианты)

Классы МПК:C07K14/705 рецепторы; клеточные антигены; клеточные поверхностные детерминаторы
C12N15/62 ДНК последовательности, кодирующие белки при слиянии
C12N15/863 поксвирусные векторы, например вакцинный вирус
C12N5/10 клетки, модифицированные введением чужеродного генетического материала, например клетки, трансформированные вирусом
A61K48/00 Лекарственные препараты, содержащие генетический материал, который включен в клетки живого организма для лечения генетических заболеваний; для генной терапии
Автор(ы):, ,
Патентообладатель(и):ДЗЕ ДЖЕНЕРАЛ ХОСПИТАЛ КОРПОРЕЙШН (US)
Приоритеты:
подача заявки:
1996-01-24
публикация патента:

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для создания функционирующих тирозин-специфических протеинкиназных химер. Сконструированный химерный рецептор включает внеклеточную часть, которая специфически распознает клетку-мишень или инфекционный агент-мишень, трансмембранный домен и внутриклеточную часть, представляющую собой протеинтирозинкиназу Syk человека или свиньи, или протеинтирозинкиназу ZAP-70, или производную от CD28. ДНК, кодирующую химерный рецептор, клонируют в экспрессионный вектор вируса коровьей оспы, которым трансфицируют клетки млекопитающего. Трансфицированные клетки, экспрессирующие два или три различных химерных рецептора, имеющих соответственно внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы Syk и CD28 или внутриклеточную часть ZAP-70, Sre и CD28, вводят млекопитающему в эффективном количестве для разрушения клетки-мишени или инфекционного агента-мишени. Изобретение позволяет разрабатывать средства, способные нацеливать терапевтические клетки на специфическое распознавание и разрушение клетки-мишени или инфекционного агента-мишени. 8 с. и 24 з.п. ф-лы, 19 ил.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74, Рисунок 75, Рисунок 76, Рисунок 77, Рисунок 78, Рисунок 79, Рисунок 80, Рисунок 81, Рисунок 82, Рисунок 83, Рисунок 84, Рисунок 85, Рисунок 86, Рисунок 87, Рисунок 88, Рисунок 89, Рисунок 90, Рисунок 91, Рисунок 92, Рисунок 93, Рисунок 94, Рисунок 95, Рисунок 96, Рисунок 97, Рисунок 98, Рисунок 99, Рисунок 100, Рисунок 101, Рисунок 102, Рисунок 103, Рисунок 104, Рисунок 105, Рисунок 106, Рисунок 107, Рисунок 108, Рисунок 109, Рисунок 110

Формула изобретения

1. Способ разрушения клетки-мишени или инфекционного агента-мишени, включающий введение млекопитающему эффективного количества терапевтических клеток, при этом каждая из указанных терапевтических клеток экспрессирует первый рецептор, включающий (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы Syk, включающую аминокислоты 338-630 Syk человека (SEQ 1D NO:5) или аминокислоты 336-628 Syk свиньи (SEQ 1D NO:6), которая передает сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционного агента-мишени, связанного с рецептором, (b) трансмембранный домен, (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень; второй рецептор, включающий (а) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, (b) трансмембранный домен, (с) внутриклеточную часть, производную от CD28.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная протеинтирозинкиназа Syk представляет собой Syk человека.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная клетка-мишень заражена вирусом иммунодефицита и указанная внеклеточная часть указанного первого рецептора и указанная внеклеточная часть указанного второго рецептора включают часть CD4, связанную с оболочкой ВИЧ.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная терапевтическая клетка уничтожает указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или указанный инфекционный агент-мишень, связанный с рецептором, путем цитолиза.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная передача сигнала указанной внутриклеточной частью указанной протеинтирозинкиназы Syk является МНС-независимой.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная внеклеточная часть указанного первого рецептора и указанная внеклеточная часть указанного второго рецептора включают часть рецептора, способную связываться с лигандом, часть лиганда, способную связываться с рецептором, или часть антитела, способную связываться с антигеном.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный внеклеточный домен указанного первого рецептора или указанный внеклеточный домен указанного второго рецептора включает CD16.

8. Способ разрушения клетки-мишени или инфекционного агента-мишени, включающий введение млекопитающему эффективного количества терапевтических клеток, при этом каждая из указанных терапевтических клеток экспрессирует первый рецептор, включающий (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы ZAP-70, (b) трансмембранный домен, (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень; второй рецептор, включающий (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы семейства Src, (b) трансмембранный домен, и (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, где указанные протеинтирозинкиназы семейства ZAP-70 и Src совместно передают сигнал указанной терапевтической клетке на уничтожение указанной клетки-мишени или указанного инфекционного агента-мишени, когда каждая из указанных внеклеточных частей указанного первого и второго химерных рецепторов связывается с указанной клеткой-мишенью или с указанным инфекционным агентом-мишенью; третий рецептор, включающий (а) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, (b) внутриклеточную часть, производную CD28.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанная протеинтирозинкиназа семейства Src представляет собой Fyn или Lck.

10. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанная клетка-мишень заражена вирусом иммунодефицита и каждая из указанных внеклеточных частей включает часть CD4, связанную с оболочкой ВИЧ.

11. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанная терапевтическая клетка уничтожает указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или указанный инфекционный агент-мишень, связанный с рецептором, путем цитолиза.

12. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанная передача сигнала указанными внутриклеточными частями указанных протеинтирозинкиназ семейства ZAP-70 и Src является МНС-независимой.

13. Способ по п.8, отличающийся тем, что каждая из указанных внеклеточных частей включает часть рецептора, способную связываться с лигандом, часть лиганда, способную связываться с рецептором, или часть антитела, способную связываться с антигеном.

14. Способ по п.8, отличающийся тем, что по крайней мере один из указанных внеклеточных доменов включает CD16.

15. Химерный рецептор, включающий (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы Syk, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислот 338-630 Syk человека (SEQ 1D NO:5) или аминокислот 336-628 Syk свиньи (SEQ 1D NO:6), которая передает сигнал клетке, которая экспрессирует указанный рецептор, на уничтожение клетки-мишени, связанной с рецептором, или инфекционного агента-мишени, связанного с рецептором, (b) трансмембранный домен, (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, причем указанный рецептор экспрессируется клеткой, включающей химерный рецептор, который включает (а) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, (b) трансмембранный домен, (с) внутриклеточную часть, производную CD28.

16. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что указанная протеинтирозинкиназа Syk представляет собой протеинтирозинкиназу Syk человека.

17. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что указанная клетка-мишень заражена вирусом иммунодефицита и каждая из указанных внеклеточных частей включает часть CD4, связанную с оболочкой ВИЧ.

18. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что указанная клетка уничтожает указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или указанный инфекционный агент-мишень, связанный с рецептором, путем цитолиза.

19. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что указанная передача сигнала указанной внутриклеточной частью указанной протеинтирозинкиназы Syk является МНС-независимой.

20. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что каждая из указанных внеклеточных частей включает часть рецептора, связанную с лигандом, часть лиганда, связанную с рецептором, или часть антитела, связанную с антигеном.

21. Химерный рецептор по п.15, отличающийся тем, что по крайней мере один из указанных внеклеточных доменов включает CD16.

22. Химерный рецептор, включающий (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы ZAP-70, (b) трансмембранный домен, (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает клетку-мишень или инфекционный агент-мишень, причем указанный химерный рецептор экспрессируется клеткой, включающей химерный рецептор, который включает (а) внутриклеточную часть протеинтирозинкиназы семейства Src, включая аминокислотную последовательность протеинтирозинкиназы Fyn или Lck, (b) трансмембранный домен, (с) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, где указанные части протеинтирозинкиназы ZAP-70 и семейства Src совместно передают сигнал указанной клетке на уничтожение указанной клетки-мишени или указанного инфекционного агента-мишени, причем каждая из указанных внеклеточных частей химерного рецептора, содержащего указанные части протеинкиназы Zap-70 или семейства Src, связывается с указанной клеткой-мишенью или с указанным инфекционным агентом-мишенью, и химерный рецептор, включающий (а) внеклеточную часть, которая специфически распознает и связывает указанную клетку-мишень или указанный инфекционный агент-мишень, (b) трансмембранный домен, и (с) внутриклеточную часть, производную CD28.

23. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что указанная протеинтирозинкиназа семейства Src представляет собой Fyn или Lck.

24. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что указанная клетка-мишень заражена вирусом иммунодефицита, и каждая из указанных внеклеточных частей включает часть CD4, связанную с оболочкой ВИЧ.

25. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что указанная клетка уничтожает указанную клетку-мишень, связанную с рецептором, или указанный инфекционный агент-мишень, связанный с рецептором, путем цитолиза.

26. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что указанная передача сигнала указанными внутриклеточными частями указанных протеинтирозинкиназ семейства ZAP-70 и Src является МНС-независимой.

27. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что каждая из указанных внеклеточных частей включает часть рецептора, связанную с лигандом, часть лиганда, связанную с рецептором, или часть антитела, связанную с антигеном.

28. Химерный рецептор по п.22, отличающийся тем, что по крайней мере один из указанных внеклеточных доменов включает CD16.

29. ДНК, кодирующая химерный рецептор по п.15, включающая нуклеотидную последовательность, определяющую аминокислотную последовательность химерного рецептора по п.15.

30. Экспрессионный вектор вируса коровьей оспы для экспрессии химерного рецептора, включающий ДНК, кодирующую химерный рецептор по п.15.

31. ДНК, кодирующая химерный рецептор по п.22, включающая нуклеотидную последовательность, определяющую аминокислотную последовательность химерного рецептора по п.22.

32. Экспрессионный вектор вируса коровьей оспы для экспрессии химерного рецептора, включающий ДНК, кодирующую химерный рецептор п.22.

Описание изобретения к патенту

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Класс C07K14/705 рецепторы; клеточные антигены; клеточные поверхностные детерминаторы

искусственный ген mel-tci-a0201, кодирующий полиэпитопный белок-иммуноген mel-tci-a0201, рекомбинантная плазмидная днк pmel-tci-a0201, обеспечивающая экспрессию искусственного гена mel-tci-a0201 и искусственный белок-иммуноген mel-tci-a0201, содержащий множественные ctl- и th-эпитопы антигенов меланомы -  патент 2522830 (20.07.2014)
scfv cинтетический аналог вариабельных участков моноклонального антитела 6313/g2 к рецептору ангиотензина ii типа 1 -  патент 2512071 (10.04.2014)
иммуносупрессорные полипептиды и нуклеиновые кислоты -  патент 2506275 (10.02.2014)
синтетический антиген, обладающий способностью связывать аутоантитела к мускариновому м2-рецептору -  патент 2502743 (27.12.2013)
сопряженный с g-белком рецептор, имеющий измененное сродство к лигандам, и его применение -  патент 2468035 (27.11.2012)
изолированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, специфическое(ий) для человеческого иммуноглобулина е (варианты), кодирующая его молекула нуклеиновой кислоты, клетка-хозяин, способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, фармацевтическая композиция, применение ее для лечения расстройств, ассоциированных с ige -  патент 2466140 (10.11.2012)
способ изготовления панели сывороток с hbsag ad- и ay-субтипов для контроля качества диагностики гепатита в -  патент 2463610 (10.10.2012)
пептиды, ингибирующие нейронный экзоцитоз -  патент 2461568 (20.09.2012)
способ иммуноферментного анализа для определения аутоантител к 1-адренорецептору в плазме и сыворотке крови человека -  патент 2452964 (10.06.2012)
sparc-производные антигенные пептиды отторжения опухоли и лекарственные средства, содержащие их -  патент 2451521 (27.05.2012)

Класс C12N15/62 ДНК последовательности, кодирующие белки при слиянии

дисплей на поверхности клеток полипептидных изоформ на основе прочитывания терминирующего кодона -  патент 2528858 (20.09.2014)
модифицированный фактор виллебранда с удлиненным полупериодом существования in vivo, его применения и способы получения -  патент 2528855 (20.09.2014)
слитый белок тиоредоксина и домена 4 инфестина, способ его получения, экспрессионная плазмидная днк, кодирующая слитый белок, и бактерия рода escherichia coli, трансформированная такой плазмидной днк -  патент 2528251 (10.09.2014)
искусственный ген mel-tci-a0201, кодирующий полиэпитопный белок-иммуноген mel-tci-a0201, рекомбинантная плазмидная днк pmel-tci-a0201, обеспечивающая экспрессию искусственного гена mel-tci-a0201 и искусственный белок-иммуноген mel-tci-a0201, содержащий множественные ctl- и th-эпитопы антигенов меланомы -  патент 2522830 (20.07.2014)
рекомбинантная днк, кодирующая гибридный белок эпидермального фактора роста человека слитого последовательностью глутатион-s-трансферазы (gst-hegf) и рекомбинантная плазмида pas007, обеспечивающая синтез gst-hegf в клетках escherichia coli -  патент 2521515 (27.06.2014)
рекомбинантная плазмидная днк pg1-rm7, обеспечивающая синтез гибридного белка g1-rm7, и гибридный белок, связывающий фактор некроза опухолей и обладающий биолюминесцентной активностью -  патент 2513686 (20.04.2014)
мутеины кислотной зоны внеклеточного домена рецептора фактора роста фибробластов -  патент 2509774 (20.03.2014)
способы скрининга с применением g-белок сопряженных рецепторов и родственных композиций -  патент 2506274 (10.02.2014)
способ синтеза белка с модифицированным профилем n-гликозилирования в растениях -  патент 2499053 (20.11.2013)
полинуклеотидная последовательность, кодирующая сконструированный белок пертактин, вектор, включающий такую последовательность, и вакцинные композиции, содержащие белок пертактина или вектор -  патент 2499046 (20.11.2013)

Класс C12N15/863 поксвирусные векторы, например вакцинный вирус

Класс C12N5/10 клетки, модифицированные введением чужеродного генетического материала, например клетки, трансформированные вирусом

нуклеиноваяя кислота, обладающая активностью гена фосфатазы фосфатидной кислоты (варианты), белок, рекомбинантный вектор, трансформант и способ получения композиции жирной кислоты -  патент 2528875 (20.09.2014)
модифицированный фактор виллебранда с удлиненным полупериодом существования in vivo, его применения и способы получения -  патент 2528855 (20.09.2014)
антитела, узнающие углеводсодержащий эпитоп на cd43 и сеа, экспрессируемых на раковых клетках и способы их применения -  патент 2528738 (20.09.2014)
антитела против альфа5-бета 1 и их применение -  патент 2528736 (20.09.2014)
флавивирус с двухкомпонентным геномом и его использование -  патент 2527891 (10.09.2014)
антитела против g-белка распираторно-синцитиального вируса (rsv) -  патент 2526517 (20.08.2014)
антитело к epha2 -  патент 2525133 (10.08.2014)
средство для лечения ишемических поражений тканей и способ его применения -  патент 2522778 (20.07.2014)
одноцепочечное антитело к раково-эмбриональному антигену, химерный мономолекулярный т-клеточный рецептор, вектор и клетка-хозяин для обеспечения экспрессии такого рецептора и способ диагностики или лечения. -  патент 2522004 (10.07.2014)
средство для вовлечения происходящей из костного мозга плюрипотентной стволовой клетки в периферический кровоток -  патент 2519714 (20.06.2014)

Класс A61K48/00 Лекарственные препараты, содержащие генетический материал, который включен в клетки живого организма для лечения генетических заболеваний; для генной терапии

композиция для лечения рака легких, прежде всего, немелкоклеточного рака легких (нмкрл) -  патент 2526510 (20.08.2014)
средство для лечения ишемических поражений тканей и способ его применения -  патент 2522778 (20.07.2014)
способ генерации антиген-специфических цитотоксических клеток с противоопухолевой активностью при раке молочной железы -  патент 2521506 (27.06.2014)
способ стимулирования регенерации спинного мозга с помощью генетически модифицированных клеток крови пуповины человека -  патент 2521225 (27.06.2014)
способ фотодинамической терапии опухолей -  патент 2519936 (20.06.2014)
средство для вовлечения происходящей из костного мозга плюрипотентной стволовой клетки в периферический кровоток -  патент 2519714 (20.06.2014)
биокомпозит для обеспечения восстановительных процессов после повреждения у млекопитающего, способ его получения (варианты) и применения -  патент 2519326 (10.06.2014)
двойное нацеливание нп mir-208 и mir 499 в лечении заболеваний сердца -  патент 2515926 (20.05.2014)
поксвирусные онколитические векторы -  патент 2508401 (27.02.2014)
биологические материалы и их применение -  патент 2508296 (27.02.2014)