новый пиримидиновый нуклеозид или его соль

Формула изобретения

1. Пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное следующей формулой (1):



в которой один из X и Y является цианогруппой, а другой является атомом водорода;

R¹ представляет собой атом водорода, группу (R³)(R⁴)(R ⁵)Si- или карбонильную группу, включающую С1-С6 алкильную группу, которая монозамещена аминогруппой;

R² представляет собой атом водорода или группу (R⁶)(R ⁷)(R⁸)Si-, при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² не является водородом; или

R¹ и R² вместе образуют 6-членную циклическую группу -Si (R⁹)(R¹⁰)-, где каждый R⁹ и R¹⁰ представляет собой С1-С6 линейную или разветвленную алкильную группу;

R³ , R⁴ и R⁵ представляют собой С1-С10 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена С1-С6 алкоксигруппой, или С3-С6 циклоалкильную группу;

R⁶, R⁷ и R⁸ представляют собой С1-С10 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена С1-С6 алкоксигруппой, С3-С6 циклоалкильную группу или фенил,

или его фармакологически приемлемая соль.

2. Пиримидиновое нуклеозидное соединение или его фармакологически приемлемая соль по п.1, где один из X и Y является цианогруппой, а другой является атомом водорода; R¹ представляет собой атом водорода, группу (R³)(R⁴)(R ⁵)Si- или карбонильную группу, включающую С1-С6 алкильную группу, которая монозамещена аминогруппой; R² представляет собой атом водорода или группу (R⁶)(R⁷)(R ⁸)Si-, при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² не является водородом; или R¹ и R ² вместе образуют 6-членную циклическую группу -Si (R ⁹)(R¹⁰)-; R³, R⁴ и R ⁵ представляют собой С1-С8 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена линейной или разветвленной С1-С6 алкоксигруппой, или С3-С6 циклоалкильную группу; R ⁶, R⁷ и R⁸ представляют собой С1-С8 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена линейной или разветвленной С1-С6 алкоксигруппой, С3-С6 циклоалкильную группу или фенил.

3. Пиримидиновое нуклеозидное соединение или его фармакологически приемлемая соль по п.1, где один из X и Y является цианогруппой, а другой является атомом водорода; R¹ является атомом водорода, валильной группой или группой (R³)(R⁴)(R⁵)Si-; R² является атомом водорода или группой (R⁶ )(R⁷)(R⁸)Si- (в том случае, когда R ¹ является атомом водорода или валильной группой, R ² не является атомом водорода); и R³, R ⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R ⁸, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются С1-С8 линейной или разветвленной алкильной группой или С3-С6 циклоалкильной группой.

4. Пиримидиновое нуклеозидное соединение или его фармакологически приемлемая соль по п.1, где один из X и Y является цианогруппой, а другой является атомом водорода; R¹ является атомом водорода, L-валильной группой или группой (R³)(R⁴)(R⁵ )Si-; R² является атомом водорода или группой (R ⁶)(R⁷)(R⁸)Si- (в том случае, когда R¹ является атомом водорода или L-валильной группой, R² не является атомом водорода); и любой из R ³, R⁴ и R⁵, а также любой из R ⁶, R⁷ и R⁸, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются С3-С8 линейной или разветвленной алкильной группой или циклопропильной группой, а другие группы, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, представляют собой С1-С4 линейную или разветвленную алкильную группу.

5. Пиримидиновое нуклеозидное соединение или его фармакологически приемлемая соль по п.1, где один из X и Y является цианогруппой, а другой является атомом водорода; R¹ является атомом водорода, L-валильной группой, триизопропилсилильной группой, диэтилизопропилсилильной группой, диметилтексилсилильной группой или диметил-н-октилсилильной группой; R² является атомом водорода, трет-бутилдиметилсилильной группой, триизопропилсилильной группой, диэтилизопропилсилильной группой, циклопропилдиизопропилсилильной группой или диметилтексилсилильной группой (в том случае, когда R¹ является атомом водорода или L-валильной группой, R² не является атомом водорода).

6. Пиримидиновое нуклеозидное соединение, выбранное среди следующих (а)-(k), или его фармакологически приемлемая соль:

(а) 5'-O-триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(b) 5'-O-диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(c) 5'-O-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(d) 5'-О-(диметил-н-октилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(e) 3'-O-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(f) 3'-O-диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(g) 3'-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(h) 3'-O-триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(i) 3'-O-диметилтексилсилил-5'-О-(L-валил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(j) 5'-О-(L-валил)-3'-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин; и

(k) 3'-O-циклопропилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин.

7. Противоопухолевый агент, включающий эффективное количество пиримидинового нуклеозидного соединения по любому из пп.1-6 или его фармакологически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

8. Применение пиримидинового нуклеозидного соединения по любому из пп.1-6 или его фармакологически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения опухоли.

9. Способ лечения опухоли, включающий введение эффективного количества пиримидинового нуклеозидного соединения по любому из пп.1-6 или его фармакологически приемлемой соли.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к 2'-дезокси-2'-цианопиримидиновому нуклеозидному соединению или его соли, которые проявляют превосходный противоопухолевый эффект.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В настоящее время раковые опухоли, характеризуемые аномальной пролиферацией клеток, все еще являются заболеваниями, которые наиболее трудно поддаются лечению. Поэтому существует острая потребность в разработке эффективного средства для лечения раковых опухолей. Так как пролиферация клеток в значительной мере зависит от биосинтеза нуклеиновых кислот, до настоящего времени обширные исследования были направлены на разработку лекарственных средств-антагонистов метаболизма нуклеиновых кислот, которые ингибируют метаболизм нуклеиновых кислот.

Среди указанных лекарственных средств, в результате обширных исследований, были разработаны антагонисты метаболизма нуклеиновых кислот на основе производных цитидина. Например, были разработаны цитарабин (непатентный документ 1), анцитабин (непатентный документ 2), цитарабин ocfosfate (непатентный документ 3), гемцитабин (патентный документ 1) и т.д., и теперь указанные лекарственные средства используются в клинической терапии.

Указанные соединения проявляют противоопухолевый эффект, основанный на ингибировании ДНК-полимеразы или рибонуклеотид редуктазы, что приводит к ингибированию синтеза ДНК. Указанные лекарственные средства достигают клинических терапевтических результатов на определенном уровне. Однако цитарабин, анцитабин и цитарабин ocfosfate, как известно, не проявляют никакой активности по отношению к солидным опухолям (непатентный документ 4). Кроме того, гемцитабин может быть применен к ограниченному ряду типов рака (непатентный документ 4). Таким образом, указанные лекарственные средства никогда не демонстрировали удовлетворительной противоопухолевой активности.

Чтобы решить вышеупомянутые проблемы, был разработан 2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (CNDAC), обладающий способностью разрывать цепь ДНК. Противоопухолевая активность CNDAC отличается от соответствующей активности цитидиновых соединений, которые были разработаны (патентный документ 2 и непатентные документы 5 и 6). Кроме того, в качестве пероральных лекарственных средств были разработаны 4-N-пальмитоил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (P-CNDAC, Патентный документ 3 и непатентные документы 7 и 8), и 5'-фосфатидилпиримидиновый нуклеотид (патентный документ 4). Обнаружено, что указанные CNDAC соединения проявляют интересные противоопухолевые эффекты (непатентные документы 5 и 8).

Однако существующие CNDAC соединения еще не были на рынке. Поэтому есть острая потребность в разработке и коммерциализации противоопухолевых лекарственных средств на основе производных цитидина, проявляющих повышенный противоопухолевый эффект и подходящих для перорального введения.

[Патентный документ 1] японская патентная публикация (kokoku) No. 6-37394

[Патентный документ 2] японский патент No. 2559917

[Патентный документ 3] японский патент No. 2569251

[Патентный документ 4] японская опубликованная заявка на патент (kokai) No. 7-179491

[Непатентный документ 1] Evance, J. S. et al. Proc. Soc. Exp. Bio. Med., 106, 350 (1961)

[Непатентный документ 2] Hoshi, A. et al. Gann, 67, 725 (1972)

[Непатентный документ 3] Kodama, K. et al. Jpn. J. Cancer Res., 80, 679-685 (1989)

[Непатентный документ 4] Matsuda, A., et al. Cancer Sci., 95, 105-111 (2004)

[Непатентный документ 5] Matsuda, A., et al. J. Med. Chem., 34, 2919-2922 (1991)

[Непатентный документ 6] Azuma, A., et al. J. Med. Chem., 36, 4183-4189 (1993)

[Непатентный документ 7] Matsuda, Akira and Takuma, Sasaki, Protein, Nucleic Acid, and Enzyme, 43, 1981-1989 (1998)

[Непатентный документ 8] Katz, M. H. et al. Cancer Res., 64, 1828-1833 (2004)

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачи, решаемые настоящим изобретением

Настоящее изобретение направлено на обеспечение нового пиримидинового нуклеозидного соединения, которое проявляет превосходный противоопухолевый эффект по сравнению с существующими пиримидиновыми нуклеозидными соединениями.

Способы осуществления настоящего изобретения

Чтобы решить указанную задачу, авторы настоящего изобретения провели обширные исследования и обнаружили, что пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное следующей формулой (1), или его соль проявляет превосходную биодоступность при пероральном введении и имеет превосходную противоопухолевую активность по сравнению с существующими CNDAC соединениями. Настоящее изобретение было разработано на основе указанного открытия.

Соответственно, настоящее изобретение обеспечивает новое пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (1):

[F1]

(где один из X и Y представляет собой цианогруппу, а другой представляет собой атом водорода; один из R¹ и R² представляет собой атом водорода, карбонильную группу, включающую C1-C6 алкильную группу, которая монозамещена аминогруппой, или группу (R³)(R⁴ )(R⁵)Si-, а другой представляет собой группу (R ⁶)(R⁷)(R⁸)Si-, или R¹ и R² вместе образуют 6-членную циклическую группу -Si(R⁹)(R¹⁰)-; каждый R³, R ⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R ⁸ представляет собой C1-C10 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена, C3-C6 циклоалкильную группу, которая может быть замещена, C6-C14 арильную группу, которая может быть замещена, или C1-C6 алкильную группу, которая замещена одним или двумя C6-C14 арильными группами и которая может быть замещена; и каждый R⁹ и R¹⁰ представляет собой C1-C6 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может быть замещена) или его соль.

Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую эффективное количество соединения, представленного формулой (1), или его соли и фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение также обеспечивает противоопухолевый агент, включающий эффективное количество соединения, представленного формулой (1), или его соли и фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение также обеспечивает применение соединения, представленного формулой (1), или его соли для производства лекарственного средства.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения опухоли, включающий введение эффективного количества соединения, представленного формулой (1), или его соли.

Технический результат изобретения

Новые пиримидиновые нуклеозидные соединения настоящего изобретения и их соли обладают превосходной противоопухолевой активностью и хорошей абсорбируемостью при пероральном введении и, таким образом, применимы в качестве противоопухолевого агента.

Краткое описание чертежа

На чертеже представлен график, показывающий изменение объема опухоли при использовании эквитоксического количества соединения 19, CNDAC, или P-CNDAC против клеток рака толстой кишки человека штамма KM20C.

Наиболее предпочтительный вариант осуществления изобретения

Новое пиримидиновое нуклеозидное соединение настоящего изобретения и его соли имеют химическую структуру, которая представлена вышеупомянутой формулой (1) и которая характеризуется наличием силильной группы в 3'- и 5'-положениях.

Некоторые промежуточные соединения для синтеза вышеупомянутых CNDAC соединений, как известно, имеют силильные группы в 3'- и 5'-положениях (например, патентные документы 2 и 3). Однако CNDAC соединение настоящего изобретения, представленное формулой (1), не было раскрыто. Кроме того, противоопухолевая активность промежуточных соединений для синтеза вышеупомянутых CNDAC соединений не была известна.

В формуле (1) примеры "C1-C6 алкильной группы" "карбонильной группы, имеющей C1-C6 алкильную группу, которая монозамещена аминогруппой", представленной группами R¹ или R², включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил и н-гексил, причем предпочтительной группой является изобутил.

В формуле (1) примеры "C1-C10 линейной или разветвленной алкильной группы", представленной группами R³, R⁴, R⁵ , R⁶, R⁷ или R⁸, включают метил, этил, н-пропил, изопропил, n-бутил, трет-бутил, н-гексил, н-октил и тексил. Предпочтительно, " C1-C10 линейная или разветвленная алкильная группа" является C1-C8 линейной или разветвленной алкильной группой. Более предпочтительно, любой из R³ , R⁴ и R⁵ и любой из R⁶, R ⁷ и R⁸, среди которых некоторые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются C3-C8 линейной или разветвленной алкильной группой, а другие группы, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются C1-C4 линейными или разветвленными алкильными группами.

В формуле (1) примеры "C3-C6 циклоалкильной группы", представленной группами R³ , R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ или R⁸, включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Из них предпочтительны циклопропил и циклогексил, а наиболее предпочтителен циклопропил.

В формуле (1) примеры "C6-C14 арильной группы", представленной группами R³, R⁴, R⁵, R⁶ , R⁷ или R⁸, включают фенил и нафтил.

В формуле (1) "C6-C14 арильная группа" "C1-C6 алкильной группы, которая замещена одной или двумя C6-C14 арильными группами", представленная группами R ³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ или R⁸, представляет собой группу, соответствующую вышеупомянутой C6-C14 арильной группе, а "C1-C6 алкильная группа" является группой, соответствующей вышеупомянутой C1-C6 алкильной группе. Конкретные примеры включают бензил, фенетил, бензгидрил и нафтилметил.

В формуле (1) "заместители", которые могут быть связаны с R³, R⁴, R ⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹ или R¹⁰, могут быть одинаковыми или отличными друг от друга (количество замещений: один-три). Примеры заместителей включают C1-C3 линейные или разветвленные алкильные группы, такие как метил, этил и изопропил; гидроксил; C1-C6 алкоксигруппы, такие как метокси, этокси, изопропокси и трет-бутокси; аминогруппу; атомы галогенов, такие как хлор и бром; цианогруппу; и нитрогруппу.

В формуле (1) примеры "(R³)(R ⁴)(R⁵)Si-" и " (R⁶)(R ⁷)(R⁸)Si-" представленные группами R ¹ и R², включают трет-бутилдиметилсилил, триизопропилсилил, триизобутилсилил, диметил-н-октилсилил, диметилтексилсилил, триметилсилил, триэтилсилил, три-н-пропилсилил, три-н-бутилсилил, три-н-гексилсилил, н-пропилдиметилсилил, н-бутилдиметилсилил, изобутилдиметилсилил, н-пентилдиметилсилил, н-гексилдиметилсилил, диметил-трет-гексилсилил, н-децилдиметилсилил, (3,3-диметилбутил)диметилсилил, 2,3-диметилпропилдиметилсилил, ди-трет-бутилметилсилил, ди-н-бутилметилсилил, диэтилизопропилсилил, н-октилдиизопропилсилил, н-октилдиизобутилсилил, циклогексилдиметилсилил, дициклогексилметилсилил, изопропилдифенилсилил, трифенилсилил, диметилфенилсилил, трет-бутилдифенилсилил, метилдифенилсилил, дифенил(дифенилметил)силил, п-толилдиметилсилил, бифенилдиметилсилил, м-феноксифенилдиметилсилил, бифенилдиизопропилсилил, три(2-бифенил)силил, три(о-толил)силил, три(2-метоксифенил)силил, трибензилсилил, бензилдиметилсилил, фенетилдиметилсилил, (3-фенилпропил)диметилсилил, п-(трет-бутил)фенетилдиметилсилил, фенетилдиизопропилсилил, неофилдиметилсилил, бромметилдиметилсилил, хлорметилдиметилсилил, 4-хлорбутилдиметилсилил, (дихлорметил)диметилсилил, 3-хлорпропилдиметилсилил, 3,3,3-трифторпропилдиметилсилил, 1H,1H,2H,2H-перфтор-н-децилдиметилсилил, 1H,1H,2H,2H-перфтор-н-октилдиметилсилил, 3,3,4,4,5,5,6,6,6-нонафтор-н-гексилдиметилсилил, бис(хлорметил)метилсилил, пентафторфенилдиметилсилил, пентафторфенилпропилдиметилсилил, 3,5-бис(трифторметил)фенилдиметилсилил, [3-(хлорметил)фенилэтил]диметилсилил, [4-(хлорметил)фенилэтил]диметилсилил, ацетоксиэтилдиметилсилил, 3-ацетоксипропилдиметилсилил, 3-метакрилоксипропилдиметилсилил, 3-цианопропилдиизопропилсилил, [3-(триметилсилокси)пропил]диметилсилил, н-бутилдиизопропилсилил, диизопропил-н-пропилсилил, диизопропил(2,2-диметилпропил)силил, (3-метилбутил)диизопропилсилил, (2-этилбутил)дициклопропилсилил, трет-амилдиэтилсилил, трет-бутилдиизобутилсилил, диэтил(3-метилпентан-3-ил)силил, изобутилдиизопропилсилил, диэтил(2-метилпентан-2-ил)силил, циклопропилдиизопропилсилил, дициклопропилизобутилсилил, диизопропил(3-метоксипропил)силил, (3-этоксипропил)диизопропилсилил, [3-(трет-бутилокси)пропил]диизопропилсилил, трет-бутилди(3-этоксипропил)силил и 3-феноксипропилдиметилсилил. Предпочтительно обе группы "(R³)(R⁴ )(R⁵)Si-" и "(R⁶)(R⁷ )(R⁸)Si-" представляют собой трет-бутилдиметилсилил, триизопропилсилил, диэтилизопропилсилил, циклогексилдиметилсилил, триизобутилсилил, трифенилсилил, трибензилсилил, диметилфенилсилил, диметил-н-октилсилил, дициклопропил(2-этилбутил)силил, диэтил(3-метилпентан-3-ил)силил, трет-бутилдиизобутилсилил, циклопропилдиизопропилсилил или диметилтексилсилил, более предпочтительно трет-бутилдиметилсилил, триизопропилсилил, диэтилизопропилсилил, диметил-н-октилсилил, циклопропилдиизопропилсилил или диметилтексилсилил, особенно предпочтительно триизопропилсилил, циклопропилдиизопропилсилил или диметилтексилсилил.

В формуле (1) " C1-C6 линейная или разветвленная алкильная группа", представленная группой R⁹ или R ¹⁰, включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и н-гексил.

Предпочтительное пиримидиновое нуклеозидное соединение

Соединение настоящего изобретения предпочтительно является соединением, представленным формулой (1), в которой один из X и Y представляет собой цианогруппу, а другой представляет собой атом водорода; один из R¹ и R² является атомом водорода, группой (R³ )(R⁴)(R⁵)Si- или карбонильной группой, имеющей C1-C6 алкильную группу, которая монозамещена аминогруппой, а другой представляет собой группу (R⁶)(R⁷ )(R⁸)Si-, или R¹ и R² вместе образуют 6-членную циклическую группу -Si(R⁹)(R ¹⁰)-; R³, R⁴, R⁵, R ⁶, R⁷ и R⁸, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, индивидуально представляют собой C3-C6 циклоалкильную группу, фенильную группу, бензильную группу или C1-C8 линейную или разветвленную алкильную группу, которая может иметь C1-C6 алкоксигруппу.

Соединение настоящего изобретения более предпочтительно является соединением, представленным формулой (1), в которой один из X и Y представляет собой цианогруппу, и другой представляет собой атом водорода; R¹ является атомом водорода, валильной группой или группой (R³ )(R⁴)(R⁵)Si-; R² является атомом водорода или группой (R⁶)(R⁷)(R⁸ )Si- (в том случае, когда R¹ является атомом водорода или валильной группой, R² не является атомом водорода); а R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются C1-C8 линейной или разветвленной алкильной группой или C3-C6 циклоалкильной группой.

Соединение настоящего изобретения еще более предпочтительно является соединением, представленным формулой (1), в которой один из X и Y представляет собой цианогруппу, а другой представляет собой атом водорода; R¹ является атомом водорода, L-валильной группой или группой (R³)(R⁴)(R⁵ )Si-; R² представляет собой атом водорода или группу (R⁶)(R⁷)(R⁸)Si- (в том случае, когда R¹ является атомом водорода или L-валильной группой, R² не является атомом водорода); а любой из R³, R⁴ и R⁵ и любой из R ⁶, R⁷ и R⁸, из которых некоторые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, индивидуально являются C3-C8 линейной или разветвленной алкильной группой или циклопропильной группой, а другие группы, которые могут быть одинаковыми или отличными друг от друга, являются C1-C4 линейными или разветвленными алкильными группами.

Соединение настоящего изобретения наиболее предпочтительно является соединением, представленным формулой (1), в которой один из X и Y представляет собой цианогруппу, а другой представляет собой атом водорода; R¹ является атомом водорода, L-валильной группой, триизопропилсилильной группой, диэтилизопропилсилильной группой, диметилтексилсилильной группой или диметил-н-октилсилильной группой; R² является атомом водорода, трет-бутилдиметилсилильной группой, триизопропилсилильной группой, диэтилизопропилсилильной группой, циклопропилдиизопропилсилильной группой или диметилтексилсилильной группой (в том случае, когда R¹ является атомом водорода или L-валильной группой, R² не является атомом водорода).

Предпочтительные примеры пиримидинового нуклеозидного соединения включают следующие (a)-(k):

(a) 5'-O-триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(b) 5'-O-диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(c) 5'-O-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(d) 5'-O-(диметил-н-октилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(e) 3'-O-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(f) 3'-O-диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(g) 3'-O-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(h) 3'-O-триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(i) 3'-O-диметилтексилсилил-5'-O-(L-валил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин;

(j) 5'-O-(L-валил)-3'-O-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин; и

(k) 3'-O-циклопропилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин.

На соль пиримидинового нуклеозидного соединения настоящего изобретения не накладывается никаких специфических ограничений, если указанная соль является фармакологически приемлемой. Примеры солей, которые могут быть образованы, включают соли минеральных кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, сульфат, нитрат и фосфат; и соли органических кислот, такие как ацетат, пропионат, тартрат, фумарат, малеат, малат, цитрат, метансульфонат, п-толуолсульфонат и трифторацетат. В зависимости от типа заместителя(ей), пиримидиновое нуклеозидное соединение настоящего изобретения может образовывать оптические или геометрические изомеры. Пиримидиновое нуклеозидное соединение настоящего изобретения охватывает такие оптические и геометрические изомеры. Указанные изомеры могут быть разделены или использоваться в виде смеси. Пиримидиновое нуклеозидное соединение настоящего изобретения также охватывает аморфные разновидности, полиморфы и сольваты, такие как гидраты.

Пиримидиновое нуклеозидное соединение настоящего изобретения или его соль могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции, включающей стадии 1-11.

[F2]

[F3]

X, Y, R¹ и R² , приведенные на стадиях 1-11, имеют те же значения, как описано выше. Каждый из R¹¹ и R¹⁴ представляет собой защитную группу для аминогруппы. На защитную группу не накладывается никаких специфических ограничений, и может быть использована любая стандартная защитная группа. Например, приемлемые защитные группы включают перечисленные в документе (T.W. Greene, Protective groups in Organic Synthesis , A Wiley-Interscience Publication, John-Wiley & Sons, New-York, 1981, р. 218-287). Конкретные примеры включают замещенные оксикарбонильные группы, такие как трет-бутоксикарбонильная и бензилоксикарбонильная группы. R¹² является защитной группой для гидроксильной группы, и примеры включают трифенилметильную группу, 4-метокситрифенилметильную группу и 4,4'-диметокситрифенилметильную группу. Группа R¹³-CO₂H представляет собой аминомонозамещенную карбоновую кислоту, и примеры включают такие аминокислоты, как глицин, L-аланин, -аланин, L-валин, L-лейцин, L-изолейцин, L-лизин и D-аланин.

(Стадия 1)

На стадии 1 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (2), или его соль взаимодействуют с общеизвестным силилирующим агентом, таким как триалкилсилил галогенид, триалкилсилилтрифлат или триалкилсилилацетамид, представленным как (R³)(R⁴)(R⁵ )Si-Z или (R⁶)(R⁷)(R⁸)Si-Z (где Z представляет собой атом галогена, трифторметансульфонилокси группу, ацетаминогруппу и т.д.), с помощью которых может быть получено соединение, представленное формулой (1a). Реакция может быть проведена в соответствии с любым известным методом. На растворитель, используемый в реакции, не накладывается никаких определенных ограничений, пока растворитель является инертным по отношению к реакции. Примеры растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид и диметилсульфоксид. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. В реакции, в случае необходимости, может также использоваться основание. Примеры оснований включают органические амины, такие как имидазол, 1-метилимидазол, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин; и неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия. Растворитель может полностью состоять из основания. В реакции вышеупомянутые (R ³)(R⁴)(R⁵)Si-Z или (R⁶ )(R⁷)(R⁸)Si-Z используются в количестве приблизительно 1-10 моль, предпочтительно приблизительно 1-5 моль, а основание используется в количестве приблизительно 1-100 моль, предпочтительно приблизительно 1-10 моль, относительно 1 моля соединения, представленного формулой (2). Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 100°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 30°C и от 1 до 20 часов. Соединение, представленное формулой (1a) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено при необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки. Триалкилсилил галогенид, используемый в реакции и представленный как (R³)(R⁴)(R⁵ )Si-Z или (R⁶)(R⁷)(R⁸)Si-Z, может быть получен с помощью стандартного метода. Например, тригалогенсилан, моноалкилдигалогенсилан или диалкилмоногалогенсилан взаимодейтсвуют с соответствующим алкиллитием или реактивом Гриньяра, в результате чего образуется триалкилсилан, представленный как (R³ )(R⁴)(R⁵)Si-H или (R⁶)(R ⁷)(R⁸)Si-H, и далее продукт взаимодействует с галогенирующим агентом, таким как N-хлорсукцинимид, N-бромсукцинимид, N-йодсукцинимид, хлор, бром, йод или 1,3-дихлор-5,5-диметилгидантоин, в результате чего образуется триалкилсилил галогенид. В процессе получения триалкилсилана, представленного как (R³)(R ⁴)(R⁵)Si-H, может использоваться такая добавка, как бромид меди. Триалкилсилан, представленный как (R³ )(R⁴)(R⁵)Si-H или (R⁶)(R ⁷)(R⁸)Si-H, и триалкилсилил галогенид, представленный как (R³)(R⁴)(R⁵)Si-Z или (R ⁶)(R⁷)(R⁸)Si-Z, может быть выделен и очищен в случае необходимости. Альтернативно, соединения могут также использоваться на стадии 1 в том же виде, в каком получали.

(Стадия 2)

На стадии 2 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (1a), взаимодействует с вышеупомянутым (R³)(R⁴)(R⁵ )Si-Z или (R⁶)(R⁷)(R⁸)Si-Z в присутствии основания, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (1b). Стадия 2 проводится таким же способом, как и стадия 1.

(Стадия 3)

На стадии 3 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (2), взаимодействует с вышеупомянутым (R³)(R⁴ )(R⁵)Si-Z или (R⁶)(R⁷)(R ⁸)Si-Z или с таким соединением, как диалкилсилил дигалогенид или диалкилсилил дитрифлат, представленный как Z-Si(R⁹ )(R¹⁰)-Z (где Z имеет такое же значение, как упомянуто выше), в присутствии основания, в результате чего, таким же способом, как и на стадии 1, может быть получено соединение, представленное формулой (1b). Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов. Соединение, представленное формулой (1b) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение можно также использовать на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 4)

На стадии 4 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (1b), обрабатывают в кислотных условиях, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (1c). На кислоту, используемую на стадии 4, не накладывается никаких специфических ограничений, пока кислота применима для удаления заместителя R¹. Примеры кислоты включают минеральные кислоты, например соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и фосфорную кислоту; и органические кислоты, например трифторуксусную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, муравьиную кислоту, метансульфоновую кислоту и п-толуолсульфоновую кислоту. Указанные кислоты могут быть смешаны с водой, причем в случае необходимости может также использоваться растворитель. Примеры используемого растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол и воду. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 20 часов.

(Стадия 5)

На стадии 5 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (2), взаимодействует с защищающим аминогруппу реагентом, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (3). На растворитель, используемый в реакции, не накладывается никаких специфических ограничений, пока растворитель является инертным по отношению к реакции. Примеры растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид и диметилсульфоксид. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. В реакции, в случае необходимости, может также использоваться основание. Примеры основания включают органические амины, такие как имидазол, 1-метилимидазол, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин; и неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия. Растворитель может полностью состоять из основания. На используемый защищающий аминогруппу реагент не накладывается никаких специфических ограничений, пока защитная группа может быть удалена в кислых или нейтральных условиях, и примеры включают алкоксикарбонил галогениды, такие как трет-бутоксикарбонилхлорид; ангидриды алкилугольной кислоты, такие как ди-трет-бутилдикарбонат; и аралкилоксикарбонил галогениды, такие как бензилоксикарбонилхлорид. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов. Соединение, представленное формулой (3) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 6)

На стадии 6 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (3), взаимодействует с реагентом, защищающим гидроксильную группу, в присутствии основания, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (4). Примеры основания включают органические амины, такие как имидазол, 1-метилимидазол, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, лутидин и коллидин; и неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия. Растворитель может полностью состоять из основания. На растворитель, используемый в реакции, не накладывается никаких специфических ограничений, пока растворитель является инертным по отношению к реакции. Примеры растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид и диметилсульфоксид. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. На используемый реагент, защищающий гидроксильную группу, не накладывается никаких специфических ограничений, пока защитная группа может селективно защитить 5'-гидроксильную группу в молекуле сахара и может быть удалена в кислых или нейтральных условиях, и примеры включают триарилметил галогениды, такие как трифенилметилхлорид, 4-метокситрифенилметилхлорид и 4,4'-диметокситрифенилметилхлорид. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов. Соединение, представленное формулой (4) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 7)

На стадии 7 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (4), взаимодействует с вышеупомянутым (R³)(R⁴)(R⁵)Si-Z или (R ⁶)(R⁷)(R⁸)Si-Z в присутствии основания, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (5). Примеры основания включают органические амины, такие как имидазол, 1-метилимидазол, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин; и неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия. Растворитель может полностью состоять из основания. На растворитель, используемый в реакции, не накладывается никаких специфических ограничений, пока растворитель является инертным по отношению к реакции. Примеры растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид и диметилсульфоксид. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. Соединение, представленное формулой (5) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 8)

На стадии 8 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (5), взаимодействует с реагентом для снятия защитных групп, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (6). В том случае, когда защитной группой для 5'-гидроксильной группы в молекуле сахара является триарилметильная группа, примеры используемого растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, ацетон, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол и воду. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. На используемый реагент для снятия защитных групп не накладывается никаких специфических ограничений, и могут использоваться соответствующие стандартные реагенты. Например, в том случае, когда защитной группой для 5'-гидроксильной группы в молекуле сахара является триарилметильная группа, примеры реагента для снятия защитных групп включают минеральные кислоты, например соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и фосфорную кислоту; и органические кислоты, например трифторуксусную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, муравьиную кислоту, метансульфоновую кислоту и п-толуолсульфоновую кислоту. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов. Соединение, представленное формулой (6) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 9)

На стадии 9 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (6), взаимодействует с реагентом для снятия защитных групп, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (1c). В том случае, когда защитная группа для 4-аминогруппы является трет-бутоксикарбонильной группой, примеры используемого растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, ацетон, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол и воду. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. На используемый реагент для снятия защитных групп не накладывается никаких специфических ограничений, и могут использоваться соответствующие стандартные реагенты. Например, в том случае, когда защитная группа для 4-аминогруппы является трет-бутоксикарбонильной группой, примеры реагента для снятия защитных групп включают минеральные кислоты, например соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и фосфорную кислоту; и органические кислоты, например трифторуксусную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, муравьиную кислоту, метансульфоновую кислоту и п-толуолсульфоновую кислоту. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов. Следует отметить, что стадии 8 и 9 могут быть проведены как одна единственная стадия вместо двух отдельных стадий.

(Стадия 10)

На стадии 10 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (6), конденсируют с соответствующей карбоновой кислотой с защищенной аминогруппой, в результате чего образуется эфир карбоновой кислоты, представленный формулой (7). На тип реакции конденсации не накладывается никаких специфических ограничений, пока конденсация проходит между обычной карбоновой кислотой и спиртом таким образом, что в результате образуется эфир. Например, может использоваться смешанный ангидрид, конденсирующий агент и т.д. Когда используется смешанный ангидрид, примеры основания включают органические амины, такие как триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин; и неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия. Примеры реагента, используемого для образования смешанного ангидрида кислоты с аминокислотой с защищенной аминогруппой, включают изобутилхлоркарбонат и пивалоилхлорид. Примеры конденсирующего агента включают карбодиимидные соединения, такие как дициклогексилкарбодиимид, гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида и N,N'-карбонилдиимидазол. Примеры конденсирующих вспомогательных веществ включают 1-гидроксибензотриазолгидрат, N-гидроксисукцинимид, N-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимид и 4-диметиламинопиридин. На растворитель, используемый в реакции, не накладывается никаких специфических ограничений, пока растворитель является инертным по отношению к реакции. Примеры растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, N,N-диметилформамид и диметилсульфоксид. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. Соединение, представленное формулой (7) и полученное в результате реакции, может быть выделено и очищено в случае необходимости. Альтернативно, соединение может также использоваться на последующей стадии без дальнейшей очистки.

(Стадия 11)

На стадии 11 пиримидиновое нуклеозидное соединение, представленное формулой (7), взаимодействует с реагентом для снятия защитных групп, в результате чего образуется соединение, представленное формулой (1d). В том случае, когда каждая из защитных групп для 5'-амино- и 4-аминогрупп является трет-бутоксикарбонильной группой, примеры используемого растворителя включают дихлорметан, хлороформ, этилацетат, тетрагидрофуран, диоксан, диэтиловый эфир, бензол, толуол, ацетон, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол и воду. Указанные растворители могут использоваться отдельно или в комбинации. На используемый реагент для снятия защитных групп не накладывается никаких специфических ограничений, и могут использоваться соответствующие стандартные реагенты. Например, в том случае, когда каждая из защитных групп для указанных аминогрупп является трет-бутоксикарбонильной группой, примеры реагента для снятия защитных групп включают минеральные кислоты, например соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и фосфорную кислоту; и органические кислоты, например трифторуксусную кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, муравьиную кислоту, метансульфоновую кислоту и п-толуолсульфоновую кислоту. Значения температуры и времени реакции составляют от -30 до 150°C и от 0,1 до 100 часов, предпочтительно от 0 до 100°C и от 1 до 40 часов.

Полученное таким образом соединение настоящего изобретения и другие соединения могут быть превращены в соответствующие соли, предпочтительно фармацевтически приемлемые соли, с помощью общеизвестных методов.

Соединение настоящего изобретения, его соль, другие соединения и их соли могут быть выделены и очищены с помощью стандартных методов разделения/очистки, таких как концентрирование, экстракция растворителями, фильтрация, перекристаллизация или любой хроматографический метод.

При использовании соединения настоящего изобретения в качестве лекарственного средства соединение смешивают с фармацевтическим носителем, причем в соответствии с профилактическими и лечебными целями может быть выбран ряд лекарственных форм. Могут использоваться любые лекарственные формы, и примеры включают пероральные формы, инъекции, свечи, мази и пластыри. Из указанных лекарственных форм предпочтительно используются пероральные формы. Указанные лекарственные формы могут быть получены с помощью любых фармацевтических способов, известных в уровне техники.

Используемый фармацевтический носитель может являться любыми органическими и неорганическими веществами-носителями, которые обычно используются как материалы для приготовления лекарственных средств. В твердых лекарственных средствах носитель включен в форме основы, смазывающего вещества, связующего вещества, разрыхлителя или подобной добавки. В жидких лекарственных средствах носитель включен в качестве растворителя, растворяющего вспомогательного вещества, суспендирующего агента, изотоничного агента, буфера, смягчающего агента или подобной добавки. В случае необходимости могут быть также включены другие добавки, такие как консервант, антиоксидант, краситель и подсластитель.

В процессе приготовления твердого перорального лекарственного средства соединение настоящего изобретения смешивают с основой и дополнительными добавками, такими как связующее вещество, разрыхлитель, смазывающее вещество, краситель, подсластитель и вкусовая добавка, после чего смесь формируют в таблетки, таблетки с покрытием, гранулы, порошок, капсулы и т.д. с помощью обычного способа. Указанные добавки могут представлять собой добавки, обычно используемые в уровне техники, и примеры включают лактозу, сахарозу, хлорид натрия, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и кремниевую кислоту (основы); воду, этанол, пропанол, простой сироп, раствор глюкозы, раствор крахмала, раствор желатина, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция и поливинилпирролидон (связующие вещества); сухой крахмал, альгинат натрия, порошок агара, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты и лактозу (разрыхлители); очищенный тальк, соли стеариновой кислоты, тетраборат натрия и полиэтиленгликоль (смазывающие вещества); оксид титана и оксид железа (красители); а также сахарозу, апельсиновую цедру, лимонную кислоту и винную кислоту (подсластители и вкусовые добавки).

В процессе приготовления жидкого перорального лекарственного средства соединение настоящего изобретения смешивается с добавками, такими как подсластители, буферы, стабилизаторы и вкусовые добавки, после чего смесь формируют в жидкое пероральное лекарственное средство, сироп, эликсир и т.д. с помощью обычного способа. В этом случае подсластитель и вкусовая добавка могут быть такими же, как описано выше. Примеры буфера включают цитрат натрия, а примеры стабилизатора включают трагакантовую камедь, гуммиарабик и желатин.

В процессе приготовления раствора для инъекции соединение настоящего изобретения смешивается с такими добавками, как регулятор pH, буфер, стабилизатор, изотонический агент и местный анастетик, после чего смесь формируют в виде подкожных, внутримышечных и внутривенных растворов для инъекций с помощью обычного способа. В этом случае примеры регулятора pH и буфера включают цитрат натрия, ацетат натрия и фосфат натрия, а примеры стабилизатора включают пиросульфит натрия, ЭДТА, тиогликолевую кислоту и тиомолочную кислоту. Примеры местного анастетика включают прокаина гидрохлорид и лидокаина гидрохлорид. Примеры изотонического агента включают хлорид натрия и глюкозу.

В процессе приготовления суппозиториев соединение настоящего изобретения смешивают с носителем для лекарственного средства, известным в уровне техники, таким как полиэтиленгликоль, ланолин, масло какао и триглицерид жирной кислоты, а также необязательное поверхностно-активное вещество, такое как Tween (зарегистрированная торговая марка), после чего смесь формируют в свечи с помощью обычного способа.

В процессе приготовления мази соединение настоящего изобретения смешивается, в случае необходимости, с обычно используемыми добавками, такими как основа, стабилизатор, увлажнитель, консервант и т.д., после чего смесь смешивают и формируют в лекарственную форму с помощью обычного способа. Примеры основы для мази включают жидкий парафин, белый вазелин, белый воск, октилдодециловый спирт и парафин. Примеры консерванта включают п-оксиметилбензоат, п-оксиэтилбензоат и п-оксипропилбензоат.

В процессе приготовления пластыря вышеупомянутую мазь, крем, гель, пасту или подобный материал наносят на стандартную подложку с помощью обычного способа. Примеры подходящих подложек включают тканую и нетканую хлопковую ткань, штапельное волокно или химическое волокно; а также пленки и вспененные пластинки, сделанные из мягкого винилхлорида, полиэтилена или полиуретана.

Стандартная доза соединения настоящего изобретения, которая должна быть включена в любое из вышеупомянутых лекарственных средств, меняется в зависимости от состояния пациентов, которым требуется ввести соединение изобретения, лекарственной формы или других факторов. Обычно стандартная доза предпочтительно составляет приблизительно от 0,05 до 1000 мг для пероральных лекарственных средств, приблизительно 0,01-500 мг для инъекций и приблизительно 1-1000 мг для суппозиториев. Ежедневная доза лекарственного средства, включающего любую из вышеупомянутых лекарственных форм, которая меняется в зависимости от состояния, массы тела, возраста, пола и т.д. пациента, не может быть определена точно. Однако обычно ежедневная доза для взрослого составляет приблизительно 0,05-5000 мг, предпочтительно 0,1-1000 мг. Стандартную дозу предпочтительно вводят один раз в день либо раздельным способом два-четыре раза.

Примеры заболеваний (в случае злокачественных опухолей), которые могут быть вылечены в результате введения лекарственного средства, содержащего соединение настоящего изобретения, включают рак головы и шеи, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак печени, рак желчного пузыря/желчных путей, рак поджелудочной железы, рак легких, рак груди, рак яичников, рак шейки матки, рак полости матки, рак почек, рак мочевого пузыря, рак простаты, опухоль яичек, остеосаркому и саркому мягких тканей, лейкемию, злокачественную лимфому, плазмаклеточную миелому, рак кожи и опухоль головного мозга.

Настоящее изобретение далее будет подробно описано со ссылками на справочные примеры, сравнительные примеры, примеры (рабочие примеры), примеры фармакологических тестов и примеры композиций. Однако ни один из них не должен рассматриваться как ограничивающий изобретение.

Пример 1

5'-O-(трет-Бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (1)

2'-Циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (в дальнейшем упоминающийся как CNDAC) (1,02 г, 4,04 ммоль) суспендировали в пиридине (40 мл). К полученной суспензии добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (790 мг, 5,25 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов в атмосфере азота. После удаления растворителя остаток дважды вскипятили с толуолом и очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (5% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 1 получали в виде белого твердого вещества (1,19 г, 80%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,67 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,18 (2H, ушир.д), 6,18 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,12 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,65 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,29 (1H, дд, J=13,9 Гц, J=8,1 Гц), 3,84-3,69 (4H, м), 0,81 (9H, с), 0,00-0,01 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 367 (MH⁺ ). Анализ. Рассчитано для C₁₆H₂₆N₄ O₄Si: C, 52,44; H, 7,15; N, 15,29. Найдено: C, 52,01; H, 7,10; N, 15,02; т.п. 185°C (разл.).

Пример 2

5'-O-Триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (2)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,01 г, 4,00 ммоль) и триизопропилсилилхлорида (1,68 мл, 8,00 ммоль), в результате чего соединение 2 получали в виде белого твердого вещества (720 мг, 44%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,76 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,26 (2H, ушир.с), 6,28 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,22 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,72 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,44 (1H, ддд, J=13,9 Гц, J=8,1 Гц, J=5,9 Гц), 4,01-3,77 (4H, м), 1,16-1,04 (21H, м); FAB-LRMS m/z 409 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₉H₃₂N₄O ₄Si: C, 55,86; H, 7,89; N, 13,71. Найдено: C, 55,83; H, 7,48; N, 14,10; т.п. 177°C (разл.).

Пример 3

5'-O-Диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (3)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,01 г, 4,00 ммоль) и диэтилизопропилсилилхлорида (800 мкл, 4,36 ммоль), в результате чего соединение 3 получали в виде белого твердого вещества (762 мг, 50%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,79 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,26 (2H, ушир.с), 6,27 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,40 (1H, дд, J=13,9 Гц, J=7,9 Гц), 3,96-3,76 (4H, м), 0,97-0,92 (13H, м), 0,67-0,58 (4H, м); FAB-LRMS m/z 381 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₇H₂₈N₄O ₄Si: C, 53,66; H, 7,42; N, 14,72. Найдено: C, 55,69; H, 7,16; N, 14,89; т.п. 175°C (разл.).

Пример 4

5'-O-Циклогексилдиметилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (4)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и циклогексилдиметилсилилхлорида (808 мкл, 4,36 ммоль), в результате чего соединение 4 получали в виде белого твердого вещества (1,03 г, 66%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,71 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,21 (2H, ушир.д), 6,19 (1H, д, J=5,3 Гц), 6,15 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,68 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,30 (1H, дд, J=13,9 Гц, J=7,9 Гц), 3,83-3,66 (4H, м), 1,62 (5H, м), 1,14-1,01 (5H, м), 0,65 (1H, м), 0,00 (6H, с); FAB-LRMS m/z 393 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H ₂₈N₄O₄Si: C, 55,08; H, 7,19; N, 14,27. Найдено: C, 54,96; H, 7,04; N, 14,49; т.п. 152-153°C.

Пример 5

5'-O-(трет-Бутилдифенилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (5)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и трет-бутилдифенилсилилхлорида (1,42 мл, 5,54 ммоль), в результате чего соединение 5 получали в виде белого твердого вещества (1,68 г, 3,42 ммоль, 86%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,70 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,64 (4H, м), 7,50-7,40 (6H, м), 7,27 (2H, д, J=7,6 Гц), 6,34 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,25 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,59 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,55 (1H, дд, J=13,7 Гц, J=7,6 Гц), 3,97-3,84 (4H, м), 1,02 (9H, с); FAB-LRMS m/z 491 (MH ⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₆H₃₀ N₄O₄Si: C, 63,65; H, 6,16; N, 11,42. Найдено: C, 63,38; H, 6,18; N, 11,60; т.п. 187°C.

Пример 6

5'-O-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (6)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и диметилтексилсилилхлорида (1,01 мл, 5,15 ммоль), в результате чего соединение 6 получали в виде белого твердого вещества (905 мг, 58%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,60 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,15 (2H, ушир.д), 6,14 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,08 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,63 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,24 (1H, дд, J=13,9 Гц, J=7,3 Гц), 3,79-3,64 (4H, м), 1,49 (1H, м), 0,76-0,73 (12H, м), 0,07, 0,00 (кажд. 6H, с); FAB-LRMS m/z 395 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H ₃₀N₄O₄Si: C, 54,80; H, 7,66; N, 14,20. Найдено: C, 54,54; H, 7,71; N, 14,12; т.п. 188°C (разл.).

Пример 7

5'-O-Триизобутилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (7)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и триизобутилсилилхлорида (1,28 мл, 4,75 ммоль), в результате чего соединение 7 получали в виде белого твердого вещества (1,68 г, 94%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,73 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,28 (2H, ушир.д), 6,22 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,19 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,37 (1H, дд, J=13,7 Гц, J=7,1 Гц), 3,89-3,76 (4H, м), 1,80 (3H, м), 0,93 (18H, м), 0,63 (6H, м); FAB-LRMS m/z 451 (MH⁺ ). Анализ. Рассчитано для C₂₂H₃₈N₄ O₄Si: C, 58,64; H, 8,50; N, 12,43. Найдено: C, 58,49; H, 8,59; N, 12,20; т.п. 152°C.

Пример 8

5'-O-Трифенилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (8)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и трифенилсилилхлорида (1,40 г, 4,75 ммоль), в результате чего соединение 8 получали в виде белого твердого вещества (1,14 г, 56%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,62-7,42 (16H, м), 7,23 (2H, ушир.д), 6,30 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,22 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,39 (1H, д, J=6,9 Гц), 4,53 (1H, дд, J=13,9 Гц, J=7,6 Гц), 4,10-3,95 (2H, м), 3,84 (2H, м); FAB-LRMS m/z 511 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₈ H₂₆N₄O₄Si: C, 65,86; H, 5,13; N, 10,97. Найдено: C, 65,26; H, 5,20; N, 10,89; т.п. 203°C (разл.).

Пример 9

5'-O-Трибензилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (9)

Общую процедуру примера 1 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и трибензилсилилхлорида (1,60 г, 4,75 ммоль), в результате чего соединение 9 получали в виде белого твердого вещества (1,64 г, 75%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,40 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,24-6,97 (17H, м), 6,24 (1H, д, J=5,8 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,53 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,38 (1H, дд, J=13,5 Гц, J=7,6 Гц), 3,93 (1H, дд, J=11,7 Гц, J=2,1 Гц), 3,85-3,73 (3H, м), 2,14 (6H, с). FAB-LRMS (отрицательный) m/z 551 (M-H)^-. Анализ. Рассчитано для C₃₁ H₃₂N₄O₄Si: C, 67,37; H, 5,84; N, 10,14. Найдено: C, 67,12; H, 5,64; N, 10,54; т.п. 188°C (разл.).

Пример 10

5'-O-(Диметил-н-октилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (10)

CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (в дальнейшем ДМФА) (40 мл), после чего к раствору добавляли имидазол (593 мг, 8,72 ммоль) и диметил-н-октилхлорсилан (1,04 мл, 4,36 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (5-12% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 10 получали в виде белого твердого вещества (940 мг, 56%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,87 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,34 (2H, ушир.д), 6,31 (2H, м), 5,82 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,44 (1H, дд, J=13,4 Гц, J=7,7 Гц), 3,97-3,81 (4H, м), 1,34 (12H, м), 0,93 (3H, м), 0,68 (2H, м), 0,19 (6H, с); FAB-LRMS m/z 423 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₀H₃₄N₄O₄Si·0,2H ₂O: C, 56,36; H, 8,14; N, 13,15. Найдено: C, 56,36; H, 7,92; N, 13,67; т.п. 142°C.

Пример 11

5'-O-Диметилфенилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (11)

Общую процедуру примера 10 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и диметилфенилсилилхлорида (723 мкл, 4,36 ммоль), в результате чего соединение 11 получали в виде белого твердого вещества (624 мг, 40%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,72 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,57 (2H, м), 7,41 (3H, м), 7,25 (2H, ушир.д), 6,24 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,20 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,64 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,38 (1H, м), 3,92-3,77 (4H, м), 0,37 (6H, с); FAB-LRMS m/z 387 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H₂₂N₄O₄Si·0,5H ₂O: C, 54,67; H, 5,86; N, 14,17. Найдено: C, 54,77; H, 7,80; N, 14,01; т.п. 139-140°C.

Пример 12

5'-O-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-рибофуранозилцитозин (12)

2'-Циано-2'-дезокси-1- -D-рибофуранозилцитозина трифторацетат (55 мг, 0,150 ммоль) растворяли в ДМФА (0,5 мл), после чего к раствору добавляли имидазол (41 мг, 0,602 ммоль) и диметилтексилсилилхлорид (29,4 мкл, 0,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (7-10% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 12 получали в виде белой пены (59 мг, 100%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,61 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,32 (2H, ушир.с), 6,29 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,28 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,26-4,32 (1H, м), 3,91-3,95 (1H, м), 3,76 (1H, дд, J=3,6 Гц, J=11,5 Гц), 3,71 (1H, дд, J=3,6 Гц, J=11,5 Гц), 3,56-3,60 (1H, м), 1,53-1,63 (1H, м), 0,81-0,86 (12H, м), 0,00 (6H, с); FAB-LRМS м/z 395 (МH ⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H₃₀ N₄O₄Si: C, 54,80; H, 7,66; N, 14,20. Найдено: C, 54,62; H, 7,59; N, 14,47; т.п. 187-187,5°C.

Пример 13

5'-O-Диметилтексилсилил-3'-O-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (13)

Соединение 6 (79 мг, 0,200 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл), затем к раствору добавляли имидазол (54 мг, 0,793 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (60 мг, 0,40 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 13 получали в виде белой пены (74 мг, 73%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,62 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,30 (2H, ушир.с), 6,23 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,53 (1H, т, J=7,6 Гц), 3,92 (2H, м), 3,77 (2H, м), 1,61 (2H, м), 0,86 (21H, м), 0,12 (12H, м); FAB-LRMS m/z 509 (MH⁺).

Пример 14

3',5'-бис-О-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (14)

CNDAC гидрохлорид (3,40 г, 11,8 ммоль) растворяли в ДМФА (100 мл), затем к раствору добавляли имидазол (5,42 г, 94,4 ммоль) и диметилтексилсилилхлорид (9,27 мл, 47,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 20 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а остаток распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 14 получали в виде белой пены (4,80 г, 76%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,62 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,29 (2H, ушир.с), 6,23 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,53 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,3 Гц), 3,91 (2H, м), 3,83-3,71 (2H, м), 1,60 (2H, м), 0,85 (24H, м), 0,14 (12H, м).

Пример 15

3',5'-Бис-О-диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (15)

Общую процедуру примера 13 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и диэтилизопропилсилилхлорида (1,83 мл, 10,0 ммоль), в результате чего соединение 15 получали в виде белой пены (1,96 г, 97%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,76 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,34 (2H, ушир.с), 6,30 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,82 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,68 (1H, дд, J=7,7 Гц, J=7,4 Гц), 4,03 (2H, м), 3,87 (2H, м), 1,01 (26H, м), 0,71 (8H, м); FAB-LRMS m/z 509 (MH⁺).

Пример 16

3',5'-Бис-О-триизобутилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (16)

Общую процедуру примера 14 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и триизобутилсилилхлорида (3,22 мл, 12,0 ммоль), в результате чего соединение 16 получали в виде белой пены (2,48 г, 96%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,65 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,30 (2H, ушир.д), 6,19 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,76 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,58 (1H, дд, J=6,9 Гц, J=6,8 Гц), 3,87 (3H, м), 3,75 (1H, дд, J=3,1 Гц, J=11,5 Гц), 1,88-1,72 (6H, м), 0,94 (36H, м), 0,75-0,59 (12H, м); FAB-LRMS m/z 649 (MH⁺).

Пример 17

3',5'-Бис-О-(диметил-н-октилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (17)

Общую процедуру примера 14 повторяли с использованием CNDAC (1,00 г, 3,96 ммоль) и диметил-н-октилсилилхлорида (2,38 мл, 10,0 ммоль), в результате чего соединение 17 получали в виде бесцветного масла (970 мг, 41%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,71 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,26 (2H, ушир,д), 6,19 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,52 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,7 Гц), 3,92 (1H, дд, J=7,9 Гц, J=7,6 Гц), 3,86-3,67 (3H, м), 1,25 (24H, м), 0,82 (6H, м), 0,60 (4H, м), 0,10 (12H, м).

Пример 18

3',5'-О-(Ди-трет-бутилсиландиил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (18)

CNDAC (504 мг, 2,01 ммоль) и нитрат серебра (747 мг, 4,42 ммоль) растворяли в ДМФА (20 мл), после чего к раствору добавляли ди-трет-бутилсилилбис(трифторметансульфонат) (712 мкл, 2,21 ммоль) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут в атмосфере азота, после чего к смеси добавляли триэтиламин (612 мкл, 4,42 ммоль), и реакционную смесь перемешивали снова в течение 5 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а остаток распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя к остатку добавляли хлороформ, и полученный раствор отфильтровали через целит для удаления нерастворимого вещества. Фильтрат концентрировали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2-5% метанол/хлороформ) с последующей перекристаллизацией из гексана, в результате чего соединение 18 получали в виде белого твердого вещества (712 мг, 91%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,72 (1H, д, J=6,9 Гц), 7,33 (2H, ушир.д), 6,44 (1H, ушир.с), 5,79 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,33 (2H, м), 4,06 (2H, м), 3,81 (1H, м), 1,04, 0,97 (каждый 9H, каждый с); FAB-LRMS m/z 393 (MH ⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H₂₈ N₄O₄Si·1,3H₂O: C, 51,98; H, 7,42; N, 13,47. Найдено: C, 52,00; H, 6,98; N, 12,94; т.п. 139-140°C.

Пример 19

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (19)

Соединение 14 (5,11 г, 9,52 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (в дальнейшем ТГФ) (50 мл). К раствору добавляли 80%-ный водный раствор трифторуксусной кислоты (50 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток трижды вскипятили с этанолом, после чего к раствору добавили хлороформ. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок, получали фильтрацией. Твердое вещество растворяли в смеси растворителей 10% метанол-хлороформ, и полученную смесь промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток перекристаллизовывали из гексана, и таким образом получали соединение 19 в виде белого твердого вещества (3,04 г, 81%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,19 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,19 (1H, дд, J=5,3 Гц, J=4,9 Гц), 4,57 (1H, дд, J=6,9 Гц, J=7,3 Гц), 3,85 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,3 Гц), 3,74 (2H, м), 3,56 (1H, м), 1,59 (1H, м), 0,84 (12H, м), 0,18, 0,15 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 395 (MH ⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₈H₃₀ N₄O₄Si: C, 54,80; H, 7,66; N, 14,20. Найдено: C, 54,54; H, 7,70; N, 13,82; т.п. 159-161°C.

Пример 20

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозина метансульфонат (20)

Соединение 14 (3,00 г, 5,11 ммоль), синтезированное способом, подобным примеру 14, за исключением того, что очистка не была выполнена, растворяли в этаноле (10 мл). К раствору добавляли метансульфоновую кислоту (800 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. Затем к реакционной смеси добавляли этилацетат (10 мл), и белое твердое вещество, выпавшее в осадок, выделяли фильтрацией, в результате чего получали соединение 20 в виде белого твердого вещества (1,42 г, 57%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,58 (1H, ушир.с), 8,64 (1H, ушир.с), 8,23 (1H, д, J=7,9 Гц), 6,23 (1H, д, J=7,3 Гц), 6,17 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,60 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,9 Гц), 4,08 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,9 Гц), 3,80 (2H, м), 3,58 (1H, дд, J=3,6 Гц, J=12,5 Гц), 2,37 (3H, c), 1,59 (1H, м), 0,85 (12H, м), 0,18, 0,16 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 489 (M-H)^-; Анализ. Рассчитано для C₁₉H₃₄N₄O₇SSi: C, 46,51; H, 6,98; N, 11,42. Найдено: C, 46,46; H, 7,02; N, 11,42; т.п. 203-204°C.

Пример 21

3'-О-Диэтилизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (21)

К соединению 15 (400 мг, 0,786 ммоль) добавляли 80% водный раствор уксусной кислоты (20 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь растворяли в этилацетате и промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (2-15% метанол/хлороформ), с последующей перекристаллизацией из гексана, в результате чего соединение 21 получали в виде белого твердого вещества (116 мг, 39%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,25 (2H, ушир.д), 6,17 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,20 (1H, т, J=5,3 Гц), 4,60 (1H, дд, J=6,9 Гц, J=6,8 Гц), 3,86 (1H, дд, J=6,9 Гц, J=7,3 Гц), 3,75 (2H, м), 3,57 (1H, м), 0,97 (13H, м), 0,66 (4H, м); FAB-LRMS m/z 381 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₇ H₂₈N₄O₄Si·0,7H₂ O: C, 51,94; H, 7,54; N, 14,25. Найдено: C, 52,06; H, 7,33; N, 13,87; т.п. 161-163°C.

Пример 22

3'-О-Триизобутилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (22)

Соединение 16 (1,30 г, 2,00 ммоль) растворяли в ТГФ (16 мл). К раствору добавляли 80%-ный водный раствор трифторуксусной кислоты (4 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь растворяли в этилацетате и промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (5-10% метанол/хлороформ), с последующей перекристаллизацией из гексана, в результате чего соединение 22 получали в виде белого твердого вещества (270 мг, 30%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,80 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,16 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,78 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,21 (1H, дд, J=5,3 Гц, J=4,9 Гц), 4,63 (1H, дд, J=6,6 Гц, J=6,4 Гц), 3,85-3,71 (3H, м), 3,58 (1H, м), 1,81 (3H, м), 0,95 (18H, м), 0,69 (6H, м); FAB-LRMS m/z 451 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₂ H₃₈N₄O₄Si·0,7H₂ O: C, 57,04; H, 8,57; N, 12,09. Найдено: C, 56,98; H, 8,35; N, 11,96; т.п. 101-102°C.

Пример 23

3'-О-(Диметил-н-октилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (23)

Соединение 17 (573 мг, 0,966 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл). К раствору добавляли 50%-ный водный раствор уксусной кислоты (5 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 20 минут при охлаждении льдом. Реакционную смесь растворяли в этилацетате и промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (2-10% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 23 получали в виде белого твердого вещества (111 мг, 27%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,18 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,17 (1H, дд, J=5,3 Гц, J=4,9 Гц), 4,55 (1H, т, J=7,3 Гц), 3,86 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,3 Гц), 3,72 (2H, м), 3,56 (1H, м), 1,25 (12H, м), 0,84 (3H, м), 0,60 (2H, м), 0,14 (6H, с); FAB-LRMS m/z 423 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₀H₃₄N₄O ₄Si: C, 56,84; H, 8,11; N, 13,26. Найдено: C, 56,83; H, 8,16; N, 13,12; т.п. 153-154°C.

Пример 24

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (24a)

CNDAC (10,0 г, 39,6 ммоль) растворяли в ДМФА (250 мл). К раствору добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (26,0 г, 119 ммоль), и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 28 часов при 50°C. Реакционную смесь охладили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (5-10% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 24a получали в виде белого твердого вещества (8,30 г, 59%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,47 (1H, с), 8,31 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,07 (1H, д, J=7,8 Гц), 6,26 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,20 (1H, д, J=7,1 Гц), 5,24 (1H, м), 4,43 (1H, м), 3,90 (1H, м), 3,83 (1H, м), 3,76 (1H, м), 3,64 (1H, м), 1,47 (9H, с); FAB-LRMS m/z 353 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₅H₂₀N₄O ₆·1,3H₂O: C, 47,95; H, 6,06; N, 14,91. Найдено: C, 48,04; H, 5,95; N, 14,46; т.п. 120-122°C (разл.).

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-5'-O-диметокситритил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (24b)

Соединение 24a (4,00 г, 11,4 ммоль) растворяли в пиридине (70 мл). К полученному раствору добавляли диметокситритилхлорид (4,65 г, 13,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 22 часов. Реакцию гасили метанолом, после чего растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток дважды вскипятили с толуолом, после чего полученный продукт растворяли в хлороформе, с последующей промывкой водой, а затем насыщенным солевым раствором. Затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и удаляли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-2,5% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 24b получали в виде желтой пены (6,64 г, 89%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,48 (1H, с), 8,27 (1H, д, J=7,8 Гц), 7,35 (4H, м), 7,26 (5H, м), 6,90 (5H, м), 6,40 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,27 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,60 (1H, дд, J=14,4 Гц, J=8,1 Гц), 3,96 (1H, м), 3,75 (6H, с), 3,46-3,36 (2H, м), 1,46 (9H, с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 653 (M-H)^-.

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-3'-О-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (24c)

Соединение 24b (6,58 г, 10,1 ммоль) растворяли в ДМФА (60 мл). К полученному раствору добавляли имидазол (2,73 г, 40,3 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (3,03 г, 20,1 ммоль), и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а затем остаток распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя к остатку добавляли 80% водный раствор уксусной кислоты, и полученную смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а остаток трижды вскипятили с этанолом. Полученную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором. Затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и удаляли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-2% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 24c получали в виде бледно желтой пены (4,11 г, 88%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 8,03 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,42 (1H, ушир.с), 7,31 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,25 (1H, д, J=6,6 Гц), 4,71 (1H, м), 4,01 (2H, м), 3,85 (1H, м), 3,68 (1H, м), 2,26 (1H, ушир.с), 1,51 (9H, с), 0,91 (9H, с), 0,18, 0,15 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 467 (MH⁺).

3'-О-(трет-Бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозина трифторацетат (24)

Соединение 24c (620 мг, 1,33 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл). К полученному раствору добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл) при охлаждении льдом, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционную смесь растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении. Остаток трижды вскипятили с этанолом, с последующим добавлением хлороформа. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок, выделяли фильтрацией, в результате чего соединение 24 получали в виде белого твердого вещества (560 мг, 88%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,91 (1H, ушир.с), 8,25 (1H, ушир.с), 8,10 (1H, д, J=7,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,3 Гц), 6,04 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,59 (1H, дд, J=7,7 Гц, J=7,6 Гц), 4,03 (1H, дд, J=7,9 Гц, J=7,4 Гц), 3,83-3,55 (4H, м), 0,87 (9H, с), 0,14, 0,13 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 479 (M-H)^-. Анализ. Рассчитано для C₁₈H₂₇F₃N₄O ₆Si: C, 44,99; H, 5,66; N, 11,66. Найдено: C, 44,89; H, 5,58; N, 11,61; т.п. 163-165°C.

Пример 25

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-5'-О-диметокситритил-3'-О-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (25a)

Соединение 24b (1,20 г, 1,83 ммоль) растворяли в ДМФА (15 мл). К полученному раствору добавляли имидазол (1,50 г, 29,4 ммоль) и диметилтексилсилилхлорид (2,87 мл, 14,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 40 часов при 50°C. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, а полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат = 3:1 - 1:1), в результате чего соединение 25a получали в виде белой пены (1,25 г, 86%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 8,15 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,43-7,22 (9H, м), 7,13 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,86 (4H, м), 6,33 (1H, д, J=6,3 Гц), 4,67 (1H, т, J=5,6 Гц), 3,99 (1H, м), 3,81 (6H, с), 3,63 (2H, м), 3,35 (1H, м), 1,51 (9H, с), 0,77 (12H, м), 0,15, -0,07 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 795 (M-H)^-.

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозина трифторацетат (25)

Соединение 25a (1,23 г, 1,54 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл). К полученному раствору добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл) при охлаждении льдом, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении. Остаток трижды вскипятили с этанолом, с последующим добавлением хлороформа. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок, выделяли фильтрацией, в результате чего соединение 25 получали в виде белого твердого вещества (613 мг, 78%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,11 (1H, м), 6,22 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,05 (1H, м), 4,59 (1H, т, J=7,6 Гц), 4,01 (1H, т, J=7,6 Гц), 3,78 (2H, м), 1,59 (1H, м), 0,85 (12H, м), 0,18, 0,16 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 507 (M-H)^-. Анализ. Рассчитано для C₂₀H₃₁F₃N₄O ₆Si·0,2H₂O: C, 46,90; H, 6,18; N, 10,94. Найдено: C, 46,76; H, 6,10; N, 10,67; т.п. 151-154°C.

Пример 26

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозина гидрохлорид (26)

Соединение 25 (720 мг, 1,42 ммоль) растворяли в 10% смеси растворителей метанол/хлороформ (100 мл), с последующей промывкой насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (70 мл). Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток растворили в хлороформе (30 мл), а затем к раствору добавляли по каплям 4 н. соляную кислоту/диоксан (354 мкл, 1,42 ммоль). Образованный белый осадок выделяли фильтрацией, с последующей промывкой хлороформом и сушкой, в результате чего соединение 26 получали в виде белого твердого вещества (552 мг, 91%).

¹H-ЯМР(ДМСО-d₆) 9,60 (1H, ушир.с), 8,59 (1H, ушир.с), 8,19 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,19 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,16 (1H, д, J=7,9 Гц), 4,57 (1H, т, J=7,6 Гц), 4,04 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=7,9 Гц), 3,77 (2H, м), 3,55 (1H, м), 1,55 (1H, м), 0,81 (12H, м), 0,15, 0,13 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 429 (M-H)^- . Анализ. Рассчитано для C₁₈H₃₁ClN ₄O₄Si: C, 50,16; H, 7,25; N, 13,00. Найдено: C, 49,82; H, 7,31; N, 12,98; т.п. 206°C (разл.).

Пример 27

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-5'-O-диметокситритил-3'-O-триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (27a)

Процедуру синтеза соединения 25a повторяли, за исключением того, что использовали соединение 24b (1,20 г, 1,83 ммоль) и триизопропилсилилхлорид (3,11 мл, 14,7 ммоль), в результате чего соединение 27a получали в виде белой пены (1,07 г, 72%).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 8,27 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,44-6,83 (15H, м), 6,32 (1H, д, J=6,3 Гц), 4,78 (1H, дд, J=4,6 Гц, J=4,3 Гц), 3,80 (6H, с), 3,67 (2H, м), 3,37 (1H, м), 1,51 (9H, с), 0,97 (21H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 809 (M-H)^-.

3'-О-Триизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (27)

Соединение 27a (1,05 г, 1,29 ммоль) растворили в дихлорметане (10 мл). К полученному раствору добавили трифторуксусную кислоту (10 мл) при охлаждении льдом. Температуру реакционной смеси повысили до комнатной, после чего смесь перемешивали в течение 90 минут. Реакционную смесь растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении. Остаток трижды вскипятили с этанолом, а затем полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10% метанол/хлороформ), в результате чего получали белое твердое вещество. Полученное твердое вещество растворяли в 10% смеси растворителей метанол/хлороформ, с последующей промывкой насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, с последующим удалением растворителя, в результате чего соединение 27 получали в виде белой пены (390 мг, 75%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,80 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,15 (1H, д, J=6,9 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,23 (1H, м), 4,73 (1H, т, J=5,9 Гц), 3,84 (1H, м), 3,84 (2H, м), 3,75 (1H, м), 3,60 (1H, м), 1,60 (21H, м); FAB-LRMS m/z 409 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₉H₃₂N₄O ₄Si·0,8H₂O: C, 53,95; H, 8,01; N, 13,25. Найдено: C, 53,85; H, 7,81; N, 13,01; т.п. 162-163°C.

Пример 28

3',5'-бис-О-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-рибофуранозилцитозин (28)

2'-Циано-2'-дезокси-1- -D-рибофуранозилцитозина трифторацетат (183 мг, 0,500 ммоль) растворили в ДМФА (2 мл). К полученному раствору добавили имидазол (204 мг, 3,00 ммоль) и диметилтексилсилилхлорид (295 мкл, 1,50 ммоль), и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 13 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, и образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-5% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 28 получали в виде белой пены (248 мг, 92%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,58 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,32 (2H, ушир.с), 6,25 (1H, д, J=6,9 Гц), 5,75 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,46 (1H, дд, J=3,6 Гц, J=5,6 Гц), 3,91 (1H, дд, J=3,6 Гц, J=5,6 Гц), 3,79 (2H, м), 3,67 (1H, м), 1,60 (1H, м), 0,85 (24H, м), 0,18, 0,15 (каждый 3H, каждый с), 0,11 (6H, с); FAB-LRMS m/z 537 (MH⁺)

Пример 29

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D- рибофуранозилцитозин (29)

Соединение 28 (200 мг, 0,372 ммоль) растворяли в этаноле (1 мл). К полученному раствору добавляли воду (100 мкл) и метансульфоновую кислоту (58 мкл, 0,89 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 40°C в течение 3 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток перекристаллизовывали из метанол-диизопропилового эфира, в результате чего соединение 29 получали в виде белого твердого вещества (95 мг, 65%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,70 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,32 (2H, ушир.д), 6,29 (1H, д, J=7,9 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,19 (1H, т, J=5,3 Гц), 4,54 (1H, дд, J=2,5 Гц, J=5,6 Гц), 3,89 (1H, м), 3,74 (1H, дд, J=5,4 Гц, J=7,9 Гц), 3,54 (2H, м), 1,61 (1H, м), 0,87 (12H, м), 0,18, 0,15 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 395 (MH⁺); т.п. 179-182°C.

Пример 30

3'-О-Диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-рибофуранозилцитозина метансульфонат (30)

Соединение 29 (52 мг, 0,131 ммоль) растворяли в метаноле (150 мкл). К полученному раствору добавляли метансульфоновую кислоту (8,5 мкл, 0,13 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 5 минут. Затем к реакционной смеси добавляли бутилацетат (1,5 мл), с последующим охлаждении льдом. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок, выделяли фильтрацией, в результате чего соединение 30 получали в виде белого твердого вещества (56 мг, 88%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,53 (1H, ушир.с), 8,56 (1H, ушир.с), 8,10 (1H, д, J=7,8 Гц), 6,17 (1H, д, J=6,1 Гц), 6,13 (1H, д, J=7,8 Гц), 4,57 (1H, дд, J=3,9 Гц, J=5,7 Гц), 3,99 (1H, дд, J=3,1 Гц, J=6,6 Гц), 3,88 (1H, т, J=5,9 Гц), 3,68 (1H, дд, J=3,1 Гц, J=12,4 Гц), 3,56 (1H, дд, J=3,0 Гц, J=12,4 Гц), 2,34 (3H, с), 1,60 (1H, м), 0,85 (12H, м), 0,18, 0,15 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 489 (M-H)^-; т.п. 211-212°C.

Пример 31

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-3'-О-диметилтексилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (31a)

Процедуру синтеза соединения 24c повторяли, за исключением того, что использовали соединение 24b (3,00 г, 4,58 ммоль) и диметилтексилсилилхлорид (5,38 мл, 27,4 ммоль), в результате чего соединение 31a получали в виде белой пены (1,78 г, 79%).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 8,04 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,45 (1H, ушир.с), 7,31 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,28 (1H, д, J=6,3 Гц), 4,73 (1H, т, J=5,0 Гц), 4,04 (2H, м), 3,91 (1H, м), 3,71 (1H, дд, J=4,6 Гц, J=6,3 Гц), 2,16 (1H, м), 1,54 (9H, с), 0,90 (12H, с), 0,26, 0,22 (каждый 3H, каждый с).

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-3'-О-диметилтексилсилил-5'-О-[N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (31b)

Соединение 31a (742 мг, 1,50 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл), после чего к полученному раствору добавляли Boc-L-Val-OH (652 мг, 3,00 ммоль), EDC (575 мг, 3,00 ммоль) и DMAP (9 мг, 0,08 ммоль), а затем полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при 0°C в течение 4 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, и образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-2% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 31b получали в виде белой пены (1,04 г, колич.).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 7,97 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,37 (2H, м), 6,22 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,01 (1H, д, J=8,2 Гц), 4,56 (2H, м), 4,29 (2H, м), 4,17 (1H, м), 3,72 (1H, дд, J=5,9 Гц, J=3,0 Гц), 2,15 (1H, м), 1,51, 1,46 (каждый 9H, каждый с), 1,01-0,86 (18H, м), 0,21, 0,17 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 694 (MH⁺).

3'-O-Диметилтексилсилил-5'-O-(L-валил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин-бис(трифторацетат) (31)

Соединение 31b (1,00 г, 1,44 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл). При охлаждении льдом к полученному раствору добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении. Остаток несколько раз вскипятили с этанолом, с последующей очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (5-15% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 31 получали в виде белого твердого вещества (812 мг, 78%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 8,41 (2H, ушир.с), 7,93 (1H, ушир.с), 7,75 (1H, ушир.с), 7,69 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,19 (1H, д, J=7,9 Гц), 5,88 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,75 (1H, т, J=7,6 Гц), 4,54 (1H, м), 4,38 (1H, м), 3,99 (3H, м), 2,17 (1H, м), 1,59 (1H, м), 0,95 (6H, м), 0,85 (12H, м), 0,21, 0,18 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 494 (MH-2TFA)⁺. Анализ. Рассчитано для C₂₇H ₄₁F₆N₅O₉Si: C, 44,93; H, 5,73; N, 9,70. Найдено: C, 44,90; H, 6,18; N, 9,99; т.п. 118-120°C.

Пример 32

4-N-(трет-Бутоксикарбонил)-5'-O-[N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валил]-3'-O-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (32a)

Соединение 24c (700 мг, 1,50 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл), после чего к полученному раствору добавляли Boc-L-Val-OH (652 мг, 3,00 ммоль), EDC (575 мг, 3,00 ммоль) и DMAP (9 мг, 0,08 ммоль), а затем полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при 0°C в течение 3 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, и образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-2% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 32a получали в виде белой пены (1,02 г, колич.).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 7,98 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,38 (2H, м), 6,23 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,01 (1H, д, J=8,4 Гц), 4,56 (2H, м), 4,34-4,14 (3H, м), 3,73 (1H, дд, J=5,9 Гц, J=2,8 Гц), 2,15 (1H, м), 1,52, 1,46 (каждый 9H, каждый с), 1,01-0,91 (15H, м), 0,18, 0,14 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 666 (MH⁺).

5'-O-(L-Валил)-3'-O-(трет-бутилдиметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин-бис(трифторацетат) (32)

Соединение 32a (960 мг, 1,44 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл). При охлаждении льдом к полученному раствору добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 90 минут. Реакционную смесь растворяли в этаноле и концентрировали при пониженном давлении. Остаток несколько раз вскипятили с этанолом, с последующей очисткой с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (5-15% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 32 получали в виде белого твердого вещества (682 мг, 68%).

¹H-ЯМР (ДМСО) 8,43 (2H, ушир.с), 7,79 (1H, ушир.с), 7,67 (2H, м), 6,18 (1H, д, J=8,2 Гц), 5,86 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,75 (1H, м), 4,53 (1H, м), 4,38 (1H, дд, J=6,6 Гц, J=12,2 Гц), 3,99 (3H, м), 2,17 (1H, м), 0,95 (6H, т, J=7,3 Гц), 0,88 (9H, с), 0,17, 0,15 (каждый 3H, каждый с); FAB-LRMS m/z 466 (MH-2TFA)⁺; Анализ. Рассчитано для C₂₅H₃₇F₆N ₅O₉Si·0,3H₂O: C, 42,95; H, 5,42; N, 10,02. Найдено: C, 42,86; H, 5,89; N, 10,14; т.п. 118-120°C.

Пример 33

5'-O-(Ди-трет-бутилметилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (33)

Ди-трет-бутилметилсилан (2,00 г, 12,6 ммоль) растворяли в дихлорметане (25 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (2,14 г, 12,0 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре полтора часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ДМФА (6,3 мл). К полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (1,45 г, 5,04 ммоль) и имидазол (2,06 г, 30,2 ммоль), и полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, и сформированный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (0-9% метанол/хлороформ), с последующей перекристаллизацией из метанола, в результате чего соединение 34 получали в виде белого твердого вещества (350 мг, 17%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,72 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,38 (2H, ушир.д), 6,28 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,44 (1H, дд, J=13,4 Гц, J=7,8 Гц), 3,98 (1H, m) 3,89-3,81 (3H, м), 0,98 (18H, с), 0,11 (3H, с); FAB-LRMS m/z 409 (MH⁺ ); Анализ. Рассчитано для C₁₉H₃₂N₄ O₄Si: C, 55,86; H, 7,89; N, 13,71. Найдено: C, 55,85; H, 7,91; N, 14,11.

Пример 34, 35

трет-Амилдиэтилсилан (34a)

Магний (2,43 г, 100 ммоль) и йод (каталитическое количество) добавляли к ТГФ (20 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота в течение 20 минут по каплям добавляли трет-амилхлорид (12,3 мл, 100 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения экзотермической реакции полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 5 часов, в результате чего получали раствор трет-амилмагнийхлорида в ТГФ.

Трихлорсилан (9,70 мл, 96,1 ммоль) растворяли в ТГФ (100 мл), и к полученному раствору при 0°C в атмосфере азота по каплям добавляли раствор этилмагнийхлорида в ТГФ (0,93M, 200 мл, 186 ммоль), после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), а затем по каплям в течение 30 минут добавляли приготовленный ранее раствор трет-амилмагнийхлорида в ТГФ (100 мл), и полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, и затем к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, с последующей очисткой путем перегонки при пониженном давлении, в результате чего соединение 34a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 30 мм рт.ст., 95°C фракция, 4,53 г, 30%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,47 (1H, м), 1,32 (2H, м), 1,04-0,93 (6H, м), 0,91 (6H, с), 0,86 (3H, т, J=7,6 Гц), 0,61 (4H, м).

5'-O-(трет-Амилдиэтилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (34)

3',5'-Бис-O-(трет-амилдиэтилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (35)

Соединение 34a (2,00 г, 12,6 ммоль) растворяли в дихлорметане (25 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (2,90 г, 12,3 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ДМФА (5 мл). К полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (1,11 г, 3,87 ммоль) и имидазол (1,72 г, 32,0 ммоль), и полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, а образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (0-9% метанол/хлороформ), в результате чего и соединение 34 (494 мг, 31%), и соединение 35 (600 мг, 27%) получали в виде белой пены.

Соединение 34

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,26 (1H, м), 6,20 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,34 (1H, м), 3,95 (1H, м), 3,86-3,78 (3H, м), 1,34 (2H, кв, J=7,8 Гц), 1,06-0,97 (6H, м), 0,89 (6H, с), 0,83 (3H, т, J=7,8 Гц), 0,69 (4H, кв, J=7,8 Гц); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 407 (M-H)^- .

Соединение 35

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,63 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,29 (2H, ушир.с), 6,22 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,76 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,66 (1H, т, J=6,6 Гц), 4,33 (1H, т, J=4,9 Гц), 3,91-3,85 (3H, м), 1,36-0,53 (42H, м); FAB-LRMS m/z 565 (MH⁺).

Пример 36, 37

трет-Бутилдиизобутилсилан (36a)

Диизобутилхлорсилан (18,0 мл, 100 ммоль) растворяли в ТГФ (100 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям в течение 30 минут добавляли раствор хлорида трет-бутилмагния в ТГФ (1,0M, 100 мл). К полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), с последующим перемешиванием при 70°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, и добавляли к полученному раствору насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, и промытый таким образом слой сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, с последующей очисткой путем перегонки при пониженном давлении, в результате чего соединение 36a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 27 мм рт.ст., 100°C фракция, 13,6 г, 68%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,75 (1H, ушир.с), 1,80 (1H, м), 0,96 (12H, д, J=5,4 Гц), 0,91 (9H, с), 0,54 (4H, м).

5'-O-(трет-Бутилдиизобутилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (36)

3',5'-Бис-O-(трет-бутилдиизобутилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (37)

Соединение 36a (1,39 г, 6,92 ммоль) растворяли в дихлорметане (13,8 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (1,20 г, 6,75 ммоль), затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ДМФА (2,3 мл). К полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и имидазол (770 мг, 11,3 ммоль), после чего смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, а образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (0-9% метанол/хлороформ), в результате чего и соединение 36 (425 мг, 0,94 ммоль, 54%), и соединение 37 (450 мг, 40%) получали в виде белой пены.

Соединение 36

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,68 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,23 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,18 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,40 (1H, дд, J=7,6 Гц, 13,2 Гц), 3,96 (1H, дд, J=3,9 Гц, 11,7 Гц), 3,85-3,78 (3H, м), 1,90-1,83 (2H, м), 0,96 (12H, м), 0,91 (9H, с), 0,86-0,62 (4H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 449 (M-H) ^-.

Соединение 37

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,54 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,25 (2H, ушир.д), 6,09 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,69 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,63 (1H, м), 3,85-3,80 (4H, м), 1,79 (4H, м), 0,90 (12H, д, J=6,8 Гц), 0,88 (9H, с), 0,63 (8H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 647 (M-H)^-.

Пример 38

Диэтил(3-метилпентан-3-ил)силан (38a)

Процедуру синтеза соединения 34a повторяли, за исключением того, что использовали раствор 3-метилпентан-3-илмагнийхлорида в ТГФ (100 мл), который готовили из магния (2,43 г, 100 ммоль) и 3-хлор-3-метилпентана (13,6 мл, 100 ммоль); трихлорсилан (10,0 мл, 99,1 ммоль); и раствор этилмагнийхлорида в ТГФ (0,93M, 200 мл, 190 ммоль), в результате чего соединение 38a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 39-42 мм рт.ст., 94-97°C фракция, 8,86 г, 51%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 3,52 (1H, ушир.с), 1,37 (4H, м), 1,04-0,97 (9H, м), 0,90-0,84 (6H, м), 0,62 (4H, м).

5'-O-[Диэтил(3-метилпентан-3-ил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (38)

Процедуру синтеза соединение 34 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 38a (3,44 г, 20,0 ммоль), N-бромсукцинимид (3,38 г, 19,0 ммоль), CNDAC гидрохлорид (2,30 г, 7,97 ммоль) и имидазол (1,30 г, 19,0 ммоль), в результате чего соединение 38 получали в виде белой пены (300 мг, 0,71 ммоль, 9%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,72 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,25 (1H, д, J=5,6 Гц), 6,19 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,30 (1H, дд, J=7,6 Гц, J=13,4 Гц), 3,96 (1H, дд, J=2,0 Гц, J=11,7 Гц), 3,87-3,77 (3H, м), 1,47-1,31 (4H, м), 0,99 (6H, т, J=7,8 Гц), 0,86 (3H, с), 0,81 (6H, т, J=7,3 Гц), 0,69 (4H, м); FAB-LRMS m/z 423 (MH⁺); Анализ. Рассчитано для C₂₀ H₃₄N₄O₄Si: C, 56,84; H, 8,11; N, 13,26. Найдено: C, 55,61; H, 8,15; N, 13,50.

Пример 39

3'-O-(трет-Амилдиэтилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (39)

Соединение 35 (600 мг, 1,06 ммоль) растворяли в метаноле (1,8 мл), и к полученному раствору добавляли метансульфоновую кислоту (137 мкл), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и этилацетат, и образованный органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (9% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 39 получали в виде белой пены (147 мг, 34%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,79 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,16 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,21 (1H, м), 4,65 (1H, т, J=6,3 Гц), 3,85-3,59 (3H, м), 3,60 (1H, м), 1,34 (2H, кв, J=7,6 Гц), 1,00 (6H, м), 0,88 (6H, с), 0,82 (3H, т, J=7,6 Гц), 0,73 (4H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 407 (M-H)^-.

Пример 40

Изобутилдиизопропилсилан (40a)

Диизопропилхлорсилан (16,4 мл, 96,1 ммоль) растворяли в ТГФ (100 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям в течение 30 минут добавляли раствор изобутилмагнийбромида в ТГФ (1,0M, 100 мл). Затем к полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), после чего смесь оставляли перемешиваться при 70°C на ночь. Реакционную смесь охлаждали, и к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, с последующей очисткой с помощью перегонки при пониженном давлении, в результате чего соединение 40a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 70 мм рт.ст., 102-106°C фракция, 8,26 г, 50%).

¹H-ЯМР (CDCl₃ ) 3,49 (1H, м), 1,80 (1H, м), 1,05 (12H, м), 0,98 (6H, м), 0,88 (2H, м), 0,56 (2H, м).

3',5'-Бис-O-изобутилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (40)

Соединение 40a (1,53 г, 8,90 ммоль) растворяли в дихлорметане (25 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (1,54 г, 8,68 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После того, как растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в ДМФА (2,3 мл), а к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и имидазол (770 мг, 11,3 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, и образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (5% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 40 получали в виде белой пены (910 мг, 88%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,65 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,29 (2H, ушир.д), 6,22 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,75 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,68 (1H, м), 3,98-3,84 (4H, м), 1,84 (2H, м), 1,02 (28H, м), 0,95 (12H, д, J=6,6 Гц), 0,66 (4H, м); FAB-LRMS m/z 593 (MH⁺).

Пример 41

3'-O-Изобутилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (41)

Процедуру синтеза соединения 39 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 40 (400 мг, 0,675 ммоль) и метансульфоновую кислоту (87 мкл, 1,3 ммоль), в результате чего соединение 41 получали в виде белой пены (263 мг, 93%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,15 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,22 (1H, м), 4,68 (1H, т, J=6,1 Гц), 3,83 (2H, м), 3,74 (1H, м), 3,58 (1H, м), 1,84 (1H, м), 1,02-0,91 (20H, м), 0,68 (2H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 421 (M-H)^-.

Пример 42

Диэтил(2-метилпентан-2-ил)силан (42a)

Процедуру синтеза соединения 34a повторяли, за исключением того, что использовали раствор хлорида 2-метилпентан-2-илмагния в ТГФ (100 мл), приготовленный из магния (2,43 г, 100 ммоль) и 2-хлор-2-метилпентана (12,0 г, 99,0 ммоль); трихлорсилан (9,70 мл, 96,1 ммоль); и раствор этилмагнийхлорида в ТГФ (0,93M, 200 мл, 1,86 ммоль), в результате чего соединение 42a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 40 мм рт.ст., 100-103°C фракция, 6,62 г, 40%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 3,47 (1H, м), 1,32-1,21 (4H, м), 0,96 (6H, т, J=8,1 Гц), 0,92 (6H, с), 0,88 (3H, т, J=6,5 Гц), 0,66-0,56 (4H, м).

3',5'-Бис-O-[диэтил(2-метилпентан-2-ил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (42)

Процедуру синтеза соединения 40 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 42a (2,76 г, 16,0 ммоль), N-бромсукцинимид (2,77 г, 15,6 ммоль), CNDAC гидрохлорид (1,41 г, 4,90 ммоль) и имидазол (2,18 г, 32,0 ммоль), в результате чего соединение 42 получали в виде белой пены (1,67 г, 57%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,62 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,31 (2H, м), 6,22 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,76 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,66 (1H, м), 3,98-3,84 (4H, м), 1,26 (8H, м), 1,06-0,84 (30H, м), 0,63 (8H, м); FAB-LRMS m/z 593 (MH⁺).

Пример 43

3'-O-[Диэтил(2-метилпентан-2-ил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (43)

Процедуру синтеза соединения 39 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 42 (360 мг, 0,607 ммоль) и метансульфоновую кислоту (80 мкл, 1,2 ммоль), в результате чего соединение 43 получали в виде белой пены (55 мг, 11%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,71 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,17 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,78 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,19 (1H, м), 4,66 (1H, т, J=6,3 Гц), 3,85-3,54 (4H, м), 1,28 (4H, м), 1,03-0,97 (6H, м), 0,88 (6H, с), 0,82 (3H, т, J=7,6 Гц), 0,73 (4H, м); FAB-LRMS m/z 423 (MH⁺).

Пример 44

Циклопропилдиизопропилсилан (44a)

Процедуру синтеза соединения 40a повторяли, за исключением того, что использовали диизопропилхлорсилан (4,10 мл, 96,0 ммоль) и раствор циклопропилмагнийбромида в ТГФ (1,0M, 100 мл), в результате чего соединение 44a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 35 мм рт.ст., 86-89°C фракция, 1,84 г, 50%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,01 (1H, м), 1,07 (14H, м), 0,62 (2H, м), 0,28 (2H, м), -0,46 (1H, м).

3',5'-Бис-O-циклопропилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (44)

Процедуру синтеза соединения 40 повторяли, за исключением того, что использовали циклопропилдиизопропилсилан (1,05 г, 6,92 ммоль), N-бромсукцинимид (1,20 г, 6,75 ммоль), CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и имидазол (770 мг, 11,3 ммоль), в результате чего соединение 44 получали в виде бледно-желтой жидкости (880 мг, 91%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 7,76 (1H, д, J=7,6 Гц), 6,26 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,03 (1H, м), 3,68 (1H, т, J=2,9 Гц), 1,04 (28H, м), 0,67 (4H, м), 0,44 (4H, м), -0,38 (2H, м); FAB-LRMS m/z 561 (MH⁺).

Пример 45

3'-O-Циклопропилдиизопропилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (45)

Процедуру синтеза соединения 39 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 44 (880 мг, 1,57 ммоль) и метансульфоновую кислоту (203 мкл, 3,14 ммоль), в результате чего соединение 45 получали в виде белой пены (240 мг, 38%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,15 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,20 (1H, м), 4,75 (1H, м), 3,85-3,73 (3H, м), 3,61 (1H, м), 1,01 (14H, м), 0,63 (2H, м), 0,39 (2H, м), -0,35 (1H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 405 (M-H)^-; Анализ. Рассчитано для C₁₉H ₃₀N₄O₄Si: C, 56,13; H, 7,44; N, 13,78. Найдено: C, 55,41; H, 7,37; N, 13,95.

Пример 46

3'-O-(трет-Бутилдиизобутилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (46)

Процедуру синтеза соединения 39 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 37 (250 мг, 0,39 ммоль) и метансульфоновую кислоту (25 мкл, 0,39 ммоль), в результате чего соединение 46 получали в виде белой пены (50 мг, 29%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,13 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,22 (1H, м), 4,70 (1H, т, J=5,9 Гц), 3,86-3,79 (2H, м), 3,74 (1H, дд, J=4,9 Гц, J=12,3 Гц), 3,61 (1H, дд, J=4,2 Гц, J=12,3 Гц), 1,92-1,82 (2H, м), 0,98 (12H, м), 0,91 (9H, с), 0,86-0,62 (4H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 449 (M-H)^-.

Пример 47

н-Бутилдиизопропилсилан (47a)

Диизопропилхлорсилан (13,1 мл, 76,8 ммоль) растворяли в ТГФ (75 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям в течение 10 минут добавляли раствор н-бутилмагнийхлорида в ТГФ (0,84M, 100 мл, 84 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), после чего смесь перемешивали при 65°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, и к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, и промытый таким образом слой сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, с последующей очисткой путем перегонки при пониженном давлении, в результате чего соединение 47a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 50 мм рт.ст., 93,2-95,5°C фракция, 8,43 г, 64%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 3,41 (1H, м), 1,41-1,30 (4H, м), 1,06-1,01 (14H, м), 0,94-0,86 (3H, м), 0,64-0,57 (2H, м).

3',5'-Бис-O-(н-бутилдиизопропилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (47)

Соединение 47a (2,17 г, 12,6 ммоль) растворяли в дихлорметане (25 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (2,19 г, 12,3 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток растворяли в ДМФА (5 мл). Затем к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (1,11 г, 3,84 ммоль) и имидазол (1,72 г, 25,2 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 7 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, а образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-9% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 47 получали в виде белой пены (522 мг, 23%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,60 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,23 (2H, ушир.с), 6,18 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,69 (1H, д, J=7,3 Гц), 4,60 (1H, т, J=7,8 Гц), 3,93-3,64 (4H, м), 1,29-1,24 (8H, м), 0,97-0,95 (28H, м), 0,81-0,79 (6H, м), 0,71-0,62 (4H, м); FAB-LRMS m/z 593 (MH⁺).

Пример 48

3'-O-(н-Бутилдиизопропилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (48)

Соединение 47 (522 мг, 0,880 ммоль) растворяли в метаноле (1,5 мл), и к полученному раствору добавляли метансульфоновую кислоту (0,10 мл), полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и этилацетат, и органический слой последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, с последующей сушкой над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (11% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 48 получали в виде белой пены (179 мг, 48%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,16 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,21 (1H, ушир.с), 4,65 (1H, т, J=6,4 Гц), 3,86-3,78 (3H, м), 3,73-3,56 (1H, м), 1,01 (14H, м), 0,89-0,84 (3H, м), 0,74-0,69 (2H, м); FAB-LRMS m/z 423 (MH ⁺).

Пример 49

Диизопропил-н-пропилсилан (49a)

Процедуру синтеза соединение 47a повторяли, за исключением того, что использовали раствор н-пропилмагнийбромида в ТГФ (1,04M, 100 мл, 104 ммоль), в результате чего соединение 49a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 60 мм рт.ст., 99,5-103,0°C фракция, 9,38 г, 62%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,43 (1H, ушир.с), 1,53-1,40 (2H, м), 1,32-0,91 (14H, м), 0,64-0,57 (2H, м).

3',5'-Бис-О-(диизопропил-н-пропилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (49)

Процедуру синтеза соединения 47 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (2,22 г, 7,69 ммоль) и соединение 49a (3,99 г, 25,2 ммоль), в результате чего соединение 49 получали в виде белой пены (1,82 г, 42%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,60 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,23 (2H, ушир.с), 6,18 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,69 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,59 (1H, т, J=7,3 Гц), 3,96-3,87 (2H, м), 3,79-3,73 (2H, м), 1,40-1,17 (4H, м), 0,99-0,86 (28H, м), 0,68-0,57 (4H, м); FAB-LRMS m/z 565 (MH⁺).

Пример 50

3'-O-(Диизопропил-н-пропилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (50)

Процедуру синтеза соединения 48 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 49 (1,17 г, 2,07 ммоль), в результате чего соединение 50 получали в виде белой пены (381 мг, 45%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,16 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,20 (1H, т, J=5,12), 4,65 (1H, т, J=6,4 Гц), 3,86-3,56 (3H, м), 3,34-3,27 (1H, м), 1,46-1,34 (2H, м), 1,04-0,93 (17H, м), 0,74-0,68 (2H, м); FAB-LRMS m/z 409 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₁₉H ₃₂N₄O₄Si: C, 55,86; H, 7,89; N, 13,71. Найдено: C, 55,44; H, 7,84; N, 13,51.

Пример 51

Диизопропил(2,2-диметилпропил)силан (51a)

Магний (2,43 г, 100 ммоль) и йод (каталитическое количество) добавляли к ТГФ (100 мл), а затем к полученному раствору по каплям в течение 20 минут добавляли 1-бром-2,2-диметилпропан (10,7 мл, 100 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения экзотермической реакции полученную смесь далее перемешивали при 50°C в течение 5 часов, в результате чего приготовили раствор 2,2-диметилпропилмагнийбромида в ТГФ. Процедуру синтеза соединения 47a повторяли, за исключением того, что использовали приготовленную таким образом смесь, в результате чего соединение 51a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 40 мм рт.ст., 120,0-122,5°C фракция, 7,65 г, 45%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,60 (1H, ушир.с), 1,03-0,85 (23H, м), 0,67-0,63 (2H, м).

3',5'-Бис-O-[диизопропил(2,2-диметилпропил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (51)

Процедуру синтеза соединения 47 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (550 мг, 1,92 ммоль) и соединение 51a (2,35 г, 12,6 ммоль), в результате чего соединение 51 получали в виде белой пены (532 мг, 45%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 7,73 (1H, д, J=7,4 Гц), 6,22 (1H, д, J=5,6 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,77 (1H, ушир.с), 4,11-3,91 (3H, м), 3,72-3,69 (1H, м), 1,12-0,98 (46H, м), 0,80-0,78 (4H, м); FAB-LRMS m/z 622 (MH⁺).

Пример 52

3'-O-[Диизопропил(2,2-диметилпропил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (52)

Процедуру синтеза соединения 48 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 51 (512 мг, 0,824 ммоль), в результате чего соединение 52 получали в виде белой пены (166 мг, 46%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 7,78 (1H, д, J=7,4 Гц), 6,23 (1H, д, J=6,3 Гц), 5,78 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,04-4,00 (2H, м), 3,85-3,79 (1H, м), 3,70-3,66 (1H, м), 1,10-1,00 (23H, м), 0,57 (2H, ушир.с); FAB-LRMS m/z 437 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C₂₁H ₃₆N₄O₄Si: C, 57,77; H, 8,31; N, 12,83. Найдено: C, 57,77; H, 8,35; N, 12,61.

Пример 53

(3-Метилбутил)диизопропилсилан (53a)

Процедуру синтеза соединения 51a повторяли, за исключением того, что использовали 1-бром-3-метилбутан (12,6 мл, 100 ммоль), в результате чего соединение 53a получали в виде бесцветной жидкости (12,6 г, 73%).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 3,41 (1H, ушир.с), 1,53-1,41 (1H, м), 1,30-1,21 (2H, м), 1,10-0,91 (14H, м), 0,90-0,82 (6H, м), 0,61-0,57 (2H, м).

3',5'-Бис-O-[(3-метилбутил)диизопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (53)

Процедуру синтеза соединения 47 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (520 мг, 1,80 ммоль) и соединение 53a (2,35 г, 12,6 ммоль), в результате чего соединение 53 получали в виде белой пены (515 мг, 46%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 7,78 (1H, д, J=7,4 Гц), 6,30 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,72 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,76 (1H, т, J=3,7 Гц), 4,01-3,86 (3H, м), 3,64-3,60 (1H, м), 1,52-1,49 (2H, м), 1,47-1,20 (4H, м), 1,06-1,00 (28H, м), 0,89 (12H, д, J=5,1), 0,73-0,65 (4H, м); FAB-LRMS m/z 622 (MH⁺).

Пример 54

3'-O-[(3-Метилбутил)диизопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (54)

Процедуру синтеза соединения 48 повторяли, за исключением того, что использовали соединение 53 (500 мг, 0,805 ммоль), в результате чего соединение 54 получали в виде белой пены (166 мг, 50%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,28 (2H, ушир.д), 6,25 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,43 (1H, т, J=7,9 Гц), 3,96 (1H, д, J=10,2 Гц), 3,87-3,78 (3H, м), 1,50-1,38 (1H, м), 1,29-1,22 (2H, м), 1,02 (14H, c), 0,86 (6H, д, J=6,4), 0,69-0,62 (2H, м); FAB-LRMS m/z 437 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C ₂₁H₃₆N₄O₄Si: C, 57,77; H, 8,31; N, 12,83. Найдено: C, 57,79; H, 8,29; N, 12,83.

Пример 55

5'-O-(н-Бутилдиизопропилсилил)-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (55)

Соединение 47a (500 мг, 2,90 ммоль) растворяли в дихлорметане (5,8 мл). К полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (463 мг, 2,60 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После того, как растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в ДМФА (2,5 мл), и к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и имидазол (531 мг, 7,80 ммоль), после чего смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (0-9% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 55 получали в виде белой пены (351 мг, 48%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆ ) 7,76 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,26 (2H, ушир.д), 6,26 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,46-4,38 (1H, м), 3,95 (1H, д, J=9,6 Гц), 3,86-3,74 (3H, м), 1,36-1,30 (4H, м), 1,01 (14H, c), 0,86-0,83 (3H, м), 0,69-0,63 (2H, м); FAB-LRMS m/z 423 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C ₂₀H₃₄N₄O₄Si: C, 56,84; H, 8,11; N, 13,26. Найдено: C, 56,10; H, 8,74; N, 12,89.

Пример 56

5'-O-[(3-Метилбутил)диизопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (56)

Процедуру синтеза соединения 55 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (491 мг, 1,70 ммоль) и соединение 53a (541 мг, 2,90 ммоль), в результате чего соединение 56 получали в виде белой пены (379 мг, 51%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,76 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,28 (2H, ушир.д), 6,25 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,74 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,43 (1H, т, J=7,9 Гц), 3,96 (1H, д, J=10,2 Гц), 3,87-3,78 (3H, м), 1,50-1,38 (1H, м), 1,29-1,22 (2H, м), 1,02 (14H, c), 0,86 (6H, д, J=6,4), 0,69-0,62 (2H, м); FAB-LRMS m/z 437 (MH⁺). Анализ. Рассчитано для C ₂₁H₃₆N₄O₄Si: C, 57,77; H, 8,31; N, 12,83. Найдено: C, 57,38; H, 8,21; N, 12,68.

Пример 57

(2-Этилбутил)дициклопропилсилан (57a)

Магний (2,43 г, 100 ммоль) и йод (каталитическое количество) добавляли к ТГФ (100 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям в течение 20 минут добавляли 1-бром-2-этилбутан (13,8 мл, 100 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения экзотермической реакции полученную смесь далее перемешивали при 50°C в течение 5 часов, в результате чего был приготовлен раствор 2-этилбутилмагнийбромида в ТГФ. Трихлорсилан (2,52 мл, 25,0 ммоль) растворяли в ТГФ (26 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям при 0°C добавляли раствор циклопропилмагнийбромида в ТГФ (0,50M, 100 мл, 50 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), а затем по каплям в течение 30 минут добавляли полученный ранее раствор 2-этилбутилмагнийбромида в ТГФ (25,0 мл), после чего смесь перемешивали при 70°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали и добавляли к полученному раствору насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, в результате чего соединение 57a получали в виде коричневой жидкости (510 мг, 10%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,61-3,60 (1H, м), 1,38-1,30 (5H, м), 0,90-0,81 (6H, м), 0,65-0,60 (6H, м), 0,37-0,31 (4H, м), -0,45--0,51(2H, м).

5'-O-[(2-Этилбутил)дициклопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (57)

Процедуру синтеза соединения 55 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и соединение 57a (510 мг, 2,60 ммоль), в результате чего соединение 57 получали в виде белой пены (309 мг, 40%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,74 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,28 (2H, ушир.д), 6,25 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,42-4,34 (1H, м), 3,99-3,77 (4H, м), 1,54-1,39 (1H, м), 1,36-1,29 (4H, м), 0,85-0,80 (6H, м), 0,60-0,50 (6H, м), 0,40-0,32 (4H, м), -0,38--0,46 (2H, м); FAB-LRMS m/z 447 (MH⁺).

Пример 58

Дициклопропилизобутилсилан (58a)

Трихлорсилан (2,52 мл, 25,0 ммоль) растворяли в ТГФ (26 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям при 0°C добавляли раствор циклопропилмагнийбромида в ТГФ (0,50M, 100 мл, 50 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К полученной смеси добавляли бромид меди (I) (286 мг, 2,00 ммоль), и к полученному раствору по каплям в течение 30 минут добавляли изобутилмагнийбромид (1,00M, 25,0 мл, 25,0 ммоль), после чего смесь перемешивали при 70°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, и к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли, с последующей очисткой путем перегонки при пониженном давлении, в результате чего соединение 58a получали в виде бесцветной жидкости (точка кипения; 20 мм рт.ст., 95-100°C фракция, 1,46 г, 35%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 3,45 (1H, м), 1,91-1,86 (1H, м), 0,99-0,95 (6H, м), 0,63-0,57 (6H, м), 0,33-0,30 (4H, м), -0,43--0,51 (2H, м).

5'-O-Дициклопропилизобутилсилил-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (58)

Процедуру синтеза соединения 55 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (500 мг, 1,73 ммоль) и соединение 58a (438 мг, 2,60 ммоль), в результате чего соединение 58 получали в виде белой пены (247 мг, 34%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,75 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,27 (2H, ушир.д), 6,24 (1H, д, J=5,8 Гц), 6,20 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,41-4,34 (1H, м), 3,98-3,76 (4H, м), 1,93-1,81 (1H, м), 1,03-0,94 (6H, м), 0,60-0,50 (6H, м), 0,39-0,33 (4H, м), -0,36--0,51 (2H, м); FAB-LRMS m/z 419 (MH⁺).

Пример 59

[3-(трет-Бутокси)пропил]диизопропилсилан (59a)

Процедуру синтеза соединения 51a повторяли, за исключением того, что использовали 1-бром-3-(трет-бутокси)пропан (5,40 г, 27,7 ммоль), в результате чего соединение 59a получали в виде коричневой жидкости (3,10 г, 49%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) 3,44 (1H, ушир.с), 1,58-1,53 (2H, м), 1,26 (9H, c), 1,10-0,96 (16H, м), 0,83-0,78 (2H, м).

5'-O-{[3-(трет-Бутокси)пропил]диизопропилсилил}-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (59)

Процедуру синтеза соединения 55 повторяли, за исключением того, что использовали CNDAC гидрохлорид (1,11 г, 3,84 ммоль) и соединение 59a (2,90 г, 12,6 ммоль), в результате чего соединение 59 получали в виде белой пены (425 мг, 23%).

¹H-ЯМР (CDCl ₃) 7,86 (1H, д, J=7,4 Гц), 6,36 (1H, д, J=6,5 Гц), 5,81 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,65 (1H, т, J=5,9 Гц), 4,10-3,93 (3H, м), 3,34-3,30 (1H, м), 1,66-1,58 (2H, м), 1,15 (9H, c), 1,06-1,04 (16H, м), 0,73-0,67 (2H, м); FAB-LRMS m/z 481 (MH⁺).

Пример 60

Диизопропил(3-метоксипропил)силан (60a)

1-Бром-3-метоксипропан (9,18 г, 60,0 ммоль) растворяли в ТГФ (55 мл), и к полученному раствору добавляли магний (1,53 г, 62,9 ммоль) и йод (каталитическое количество), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут и при 55°C в течение 5 минут. Полученную смесь по каплям в течение 5 минут добавляли к диизопропилхлорсилану (8,88 мл, 52,0 ммоль) в ТГФ (65 мл), после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения экзотермической реакции полученную смесь далее перемешивали при 50°C в течение 1,5 часов, а затем к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Полученную смесь экстрагировали пентаном, после чего промывали водой шесть раз и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего соединение 60a получали в виде желтой жидкости (10,1 г, 89%).

¹ H-ЯМР (CDCl₃) 3,44 (1H, ушир.с), 3,35 (2H, т, J=6,6 Гц), 1,60-1,72 (2H, м), 0,97-1,03 (14H, м), 0,58-0,64 (2H, м).

5'-O-[Диизопропил(3-метоксипропил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (60)

Соединение 60a (565 мг, 3,00 ммоль) растворяли в дихлорметане (6 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (534 мг, 3,00 ммоль), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в ДМФА (4,5 мл), и к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (866 мг, 3,00 ммоль) и имидазол (511 мг, 7,51 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли метанол (0,1 мл), и полученную смесь разделили между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток перекристаллизовывали из трет-бутилметилового эфира, в результате чего соединение 60 получали в виде белого порошка (820 мг, 62%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,75 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,27, 7,25 (каждый 1H, каждый ушир.с), 6,25 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,38-4,45 (1H, м), 3,76-3,97 (4H, м), 3,27 (2H, т, J=6,9 Гц), 3,20 (3H, c), 1,51-1,61 (2H, м), 1,01 (14H, c), 0,62-0,69 (2H, м).

Пример 61

(3-Этоксипропил)диизопропилсилан (61a)

1-Бром-3-этоксипропан (5,85 г, 35,0 ммоль) растворяли в ТГФ (30 мл). К полученному раствору добавляли магний (900 мг, 37,0 ммоль) и йод (каталитическое количество) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и при 60°C в течение 10 минут. Полученную смесь по каплям добавляли к диизопропилхлорсилану (5,12 мл, 30,0 ммоль) в ТГФ (40 мл), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут и при 60°C в течение 1,5 часов. К полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, и полученную смесь экстрагировали пентаном, после чего промывали водой шесть раз и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего соединение 61a получали в виде желтой жидкости (6,52 г, 92%).

¹H-ЯМР (CDCl₃ ) 3,36-3,75 (5H, м), 1,61-1,72 (2H, м), 1,21 (3H, т, J=7,0 Гц), 0,97-1,03 (14H, м), 0,57-0,65 (2H, м).

5'-O-[(3-Этоксипропил)диизопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (61)

Соединение 61a (809 мг, 4,00 ммоль) растворяли в дихлорметане (8 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (712 мг, 4,00 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в ДМФА (4,5 мл), и к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (1,26 г, 4,36 ммоль) и имидазол (681 мг, 10,0 ммоль), после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После того как к реакционной смеси добавляли метанол, полученную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором шесть раз, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток перекристаллизовывали из трет-бутилметилового эфира, в результате чего соединение 61 получали в виде белого порошка (1,10 г, 68%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d ₆) 7,75 (1H, д, J=7,4 Гц), 7,27, 7,25 (каждый 1H, каждый ушир.с), 6,21 (1H, д, J=5,9 Гц), 6,21 (1H, д, J=7,4 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,4 Гц), 4,37-4,45 (1H, м), 3,76-3,98 (4H, м), 3,38 (2H, кв, J=6,9 Гц), 1,50-1,61 (2H, м), 1,01 (14H, c), 0,62-0,68 (2H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 451 (M-H)^-.

Пример 62

3'-O-[(3-Этоксипропил)диизопропилсилил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (62)

Соединение 61a (1,82 г, 8,99 ммоль) растворяли в дихлорметане (18 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (1,60 г, 8,99 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ДМФА (5 мл). Затем к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (866 мг, 3,00 ммоль) и имидазол (1,23 г, 18,1 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут и при 55°C в течение 2 часов. После того как к реакционной смеси добавляли метанол, полученную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором шесть раз, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток растворяли в метаноле (5 мл), и к полученному раствору добавляли метансульфоновую кислоту (0,33 мл, 4,5 ммоль) и смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и этилацетат, после чего образованный органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (6-10% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 62 получали в виде белой пены (310 мг, 23%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,79 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,29, 7,24 (каждый 1H, каждый ушир.с), 6,16 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,77 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,21 (1H, т, J=5,4 Гц), 4,63-4,66 (1H, м), 3,79-3,87 (2H, м), 3,56-3,77 (2H, м), 3,39 (2H, кв, J=7,1 Гц), 1,52-1,60 (2H, м), 1,08 (3H, т, J=7,1 Гц), 1,01 (14H, c), 0,67-0,70 (2H, м); FAB-LRMS (отрицательный) m/z 451 (M-H)^-.

Пример 63

5'-O-[трет-Бутилди(3-этоксипропил)силил]-2'-циано-2'-дезокси-1- -D-арабинофуранозилцитозин (63)

Магний (330 мг, 13,5 ммоль) и йод (каталитическое количество) добавляли к ТГФ (13,5 мл), и к полученному раствору в атмосфере азота по каплям в течение 20 минут добавляли 1-бром-3-этоксипропан (2,25 г, 13,5 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После завершения экзотермической реакции полученную смесь далее перемешивали при 50°C в течение 4 часов. В атмосфере азота при 0°C полученную смесь добавляли по каплям к трет-бутилдихлорсилану (1,06 г, 6,75 ммоль) и бромиду меди (I) (20 мг, 0,14 ммоль) в ТГФ (6,75 мл), после чего смесь перемешивали при 70°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, и к полученному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и н-пентан. Образованный органический слой трижды промывали водой и однократно насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя полученную желтую жидкость растворяли в дихлорметане (7,4 мл), и к полученному раствору при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (642 мг, 3,61 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ДМФА (3,3 мл), и к полученному раствору добавляли CNDAC гидрохлорид (530 мг, 1,85 ммоль) и имидазол (378 мг, 5,55 ммоль), после чего смесь оставляли перемешиваться при 60°C на ночь. Затем к реакционной смеси добавляли метанол, и полученную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Образованный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, а затем промытый таким образом органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на нейтральном силикагеле (0-5% метанол/хлороформ), в результате чего соединение 63 получали в виде желтой пены (310 мг, 23%).

¹ H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,71 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,29, 7,25 (каждый 1H, каждый ушир.с), 6,27 (1H, м), 6,20 (1H, д, J=7,6 Гц), 5,73 (1H, д, J=7,6 Гц), 4,38 (1H, м), 3,94 (1H, дд, J=2,2, J=11,7 Гц), 3,86-3,75 (3H, м), 3,37 (4H, кв, J=7,1 Гц), 3,29 (2H, кв, J=7,1 Гц), 3,16 (1H, д, J=5,4 Гц), 1,56 (4H, м), 1,07 (6H, т, J=7,1 Гц), 0,91 (9H, c), 0,63 (4H, м); FAB-LRMS m/z 509 (MH⁺).

Структурные формулы соединений 1-63, которые получены в вышеупомянутых примерах, приведены в таблицах 1-11.

Таблица 1
Соединение	Структурная формула
1
2
3
4
5
6

Таблица 2
Соединение	Структурная формула
7
8
9
10
11
12

Таблица 3
Соединение	Структурная формула
13
14
15
16
17
18

Таблица 4
Соединение	Структурная формула
19
20
21
22
23
24

Таблица 5
Соединение	Структурная формула
25
26
27
28
29
30

Таблица 6
Пример	Структурная формула
31
32
33
34
35
36

Таблица 7
Пример	Структурная формула
37
38
39
40
41
42

Таблица 8
Пример	Структурная формула
43
44
45
46
47

Таблица 9
Пример	Структурная формула
48
49
50
51
52
53

Таблица 10
Пример	Структурная формула
54
55
56
57
58
59

Таблица 11
Пример	Структурная формула
60
61
62
63

Пример фармакологического теста 1

Противоопухолевый тест с использованием системы подкожного имплантирования "голой" мыши с пероральным введением CNDAC соединения

Клетки рака толстой кишки человека штамма KM20C подкожно прививали мышам BALB/cA Jcl-nu (CLEA Japan, Inc.), и полученные в результате опухолевые ткани разрезали на фрагменты толщиной 2 мм. Каждый из фрагментов подкожно имплантировали в спину мыши BALB/cA Jcl-nu 6-недельного возраста. На 14 день после имплантации измеряли наибольшие и наименьшие диаметры полученной опухоли, и объем опухоли вычисляли из следующего уравнения. Мыши были разделены на группы (по 6 животных в группе) таким образом, чтобы группы были примерно равны по значению среднего объема опухоли.

(Уравнение 1) Vt=1/2(Vl)·(Vs)²

В данном уравнении Vt обозначает объем опухоли, Vl обозначает наибольший диаметр опухоли, а Vs представляет собой наименьший диаметр опухоли.

Каждое CNDAC соединение растворяли или суспендировали в 0,5% растворе гидроксипропилметилцеллюлозы, который уравновешивали 100 мМ цитратным буфером (pH 6,0). Со следующего дня после формирования групп смесь вводили перорально каждой мыши один раз в день в течение последующих 14 дней в дозе, которая является эквивалентной, в молярном отношении, 18 мг/кг/день CNDAC.

На 29 день после формирования групп измеряли наибольшие и наименьшие диаметры подкожно имплантированной опухоли у каждой мыши, а также, с целью оценки противоопухолевого эффекта соединения, с помощью следующих уравнений вычисляли относительный объем опухоли (RTV) и показатель ингибирования (IR). Результаты тестов представлены в таблице 12.

(Уравнение 2) RTV=Vt1/Vt2

В данном уравнении RTV обозначает показатель объема опухоли, Vt1 обозначает объем опухоли, измеренный в день анализа, а Vt2 представляет собой объем опухоли, измеренный в день формирования группы.

(Уравнение 3) IR (%)=[1-(RTVtest)/(RTVcont)]×100

В данном уравнении IR обозначает показатель ингибирования роста опухоли, RTVtest представляет среднее значение RTV группы, в которой вводили лекарственное средство, а RTVcont представляет собой среднее значение RTV в необработанной группе.

Таблица 12
Пример №	IR (%)
1	75
2	65
3	82
6	82
7	79
10	68
18	69
19	89
21	85
24	83
27	85
31	89
32	85
CNDAC	46

Как показано в таблице 12, соединения настоящего изобретения проявляют превосходный противоопухолевый эффект по сравнению с CNDAC.

Пример фармакологического теста 2

Фармакокинетический тест CNDAC соединения на крысах Donryu

CNDAC соединения перорально вводили крысам Donryu (Charles River Laboratories Japan, Inc, возраст 5 недель), после чего измеряли уровень содержания CNDAC в крови. CNDAC соединения, обладавшие превосходной абсорбционной способностью при пероральном введении и легко трансформировавшиеся в активный CNDAC в организме, выбирали на основе уровня содержания CNDAC в крови.

В частности, с вечера дня перед испытательным днем крысы Donryu не получали питание. Утром испытательного дня каждое CNDAC соединение (эквимолярное количество, до 30 мг/кг CNDAC) растворяли или суспендировали в 0,5% растворе гидроксипропилметилцеллюлозы, уравновешенном 100 мМ цитратным буфером (pH 5,0), а затем вводили перорально, после чего из хвостовой полой вены через 15 и 30 минут, а также спустя 1, 2, 4 и 8 часов после введения взяли кровь, в результате чего получали образцы сыворотки (от 3 животных в каждой точке времени). Уровни содержания соединений и CNDAC в каждом образце сыворотки измеряли с помощью ВЭЖХ. Вычисляли площадь под кривой концентрации CNDAC в крови (AUC) от 0 до 8 часов, и из следующего уравнения определяли биодоступность (ВА), которая указывает количество CNDAC, попавшее в кровь от общего количества CNDAC соединения. Результаты тестов приведены в таблице 13.

(Уравнение 4) BA=[(AUCtest)/(AUCcont)]·100 (%)

В данном уравнении ВА обозначает биодоступность, AUCtest обозначает AUC уровня CNDAC в крови при пероральном введении CNDAC соединения (в количестве, эквивалентном 30 мг/кг CNDAC), а AUCcont представляет собой AUC уровня CNDAC в крови при введении CNDAC в хвостовую вену (в количестве, эквивалентном 30 мг/кг CNDAC).

Таблица 13
Пример №	BA (%)
2	19,4
3	20,6
6	22,9
10	19,3
19	45,1
21	22,8
23	19,3
24	21,0
25	42,6
26	23,5
27	25,3
31	41,4
32	24,2
CNDAC P-CNDAC	9,2 14,6

Как показано в таблице 13, соединения настоящего изобретения показывают превосходную биодоступность по сравнению с известным CNDAC соединением при пероральном введении - P-CNDAC.

Пример фармакологического теста 3

Фармакокинетический тест CNDAC соединения на крысах SD(IGS)

CNDAC соединения вводили перорально крысам SD (IGS) (Charles River Laboratories Japan, Inc., возраст 8 недель), после чего измеряли уровень содержания CNDAC в крови. CNDAC соединения, обладавшие превосходной абсорбционной способностью при пероральном введении и легко трансформировавшиеся в активный CNDAC в организме, выбирали на основе уровня содержания CNDAC в крови.

Утром испытательного дня каждое CNDAC соединение (эквимолярное количество, до 10 мг/кг CNDAC) растворяли или суспендировали в 0,5% растворе гидроксипропилметилцеллюлозы, уравновешенном 100 мМ цитратным буфером (pH 5,0), а затем вводили перорально, после чего из сонной артерии через 30 минут, а также спустя 1, 2, 4, 6 и 8 часов после введения взяли кровь, в результате чего получали образцы сыворотки (от 2-3 животных в каждой точке времени). Уровни содержания соединений и CNDAC в каждом образце сыворотки измеряли с помощью ЖХ/МС. Вычисляли площадь под кривой концентрации CNDAC в крови (AUC) от 0 до 8 часов. Результаты тестов приведены в таблице 14.

Таблица 14
Пример №	AUC 0-8 ч (нг·ч/мл)
19	1163
45	1210
CNDAC	492
P-CNDAC	956

Как показано в таблице 14, соединения настоящего изобретения показывают более высокий AUC по сравнению с известным CNDAC соединением для перорального введения - P-CNDAC.

Пример фармакологического теста 4

Противоопухолевый тест с использованием системы подкожного имплантирования "голой" мыши с пероральным введением CNDAC, P-CNDAC или соединения 19 в эквитоксической дозе

Клетки рака толстой кишки человека штамма KM20C подкожно пересеяли мышам BALB/cA Jcl-nu (CLEA Japan, Inc.), и полученные в результате опухолевые ткани разрезали на фрагменты толщиной 2 мм. Каждый из фрагментов подкожно имплантировали в спину мыши BALB/cA Jcl-nu 6-недельного возраста. На 15 день после имплантации измеряли наибольшие и наименьшие диаметры полученной опухоли, и объем опухоли вычисляли из следующего уравнения. Мыши разделяли на группы (по 6 животных в группе) таким образом, чтобы группы были примерно равны по значению среднего объема опухоли.

(Уравнение 5) Vt=1/2(Vl) · (Vs)²

В данном уравнении Vt обозначает объем опухоли, Vl обозначает наибольший диаметр опухоли, а Vs представляет собой наименьший диаметр опухоли.

CNDAC, P-CNDAC или соединение 19 растворяли или суспендировали в 0,5% растворе гидроксипропилметилцеллюлозы, который уравновешивали 100 мМ цитратным буфером (pH 6,0). Со следующего дня после формирования групп смесь вводили перорально каждой мыши один раз в день в течение последующих 14 дней в эквитоксической дозе.

Наибольшие и наименьшие диаметры подкожно имплантированной опухоли у каждой мыши измеряли два раза в неделю, после чего, с целью оценки противоопухолевого эффекта соединения, из следующих уравнений вычисляли относительный объем опухоли (RTV) как показатель, показывающий рост опухоли. Результаты тестов приведены на чертеже.

(Уравнение 6) RTV=Vt1/Vt2

В данном уравнении RTV обозначает показатель объема опухоли, Vt1 обозначает объем опухоли, измеренный в день анализа, а Vt2 представляет собой объем опухоли, измеренный в день формирования группы.

Как показано на чертеже, эквитоксическая доза соединения 19 значительно уменьшает объем опухоли по сравнению с CNDAC и P-CNDAC. В то время как CNDAC и P-CNDAC не вызывают исчезновение опухоли, соединение 19 устраняет опухоль в трех случаях из всех шести, подтверждая, что соединение настоящего изобретения показывает превосходный противоопухолевый эффект.

Пример композиции 1

Таблетки

Таблица 15
Соединение 3	50 мг
Кукурузный крахмал	50 мг
Микрокристаллическая целлюлоза	50 мг
Гидроксипропилцеллюлоза	15 мг
Лактоза	47 мг
Тальк	2 мг
Стеарат магния	2 мг
Этилцеллюлоза	30 мг
Ненасыщенный глицерид	2 мг
Диоксид титана	2 мг

Таблетки (250 мг/таблетка) приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.

Пример композиции 2

Гранулы

Таблица 16
Соединение 19	300 мг
Лактоза	540 мг
Кукурузный крахмал	100 мг
Гидроксипропилцеллюлоза	50 мг
Тальк	10 мг

Гранулы (1000 мг/пакетик) приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.

Пример композиции 3

Капсулы

Таблица 17
Соединение 20	100 мг
Лактоза	30 мг
Кукурузный крахмал	50 мг
Микрокристаллическая целлюлоза	10 мг
Стеарат магния	3 мг

Капсулы (193 мг/капсула) приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.

Пример композиции 4

Раствор для инъекций

Таблица 18
Соединение 21	100 мг
Хлорид натрия	3,5 мг
Дистиллированная вода для инъекций	Соответствующая доза (2 мл/ампула)

Раствор для инъекций приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.

Пример композиции 5

Сироп

Таблица 19
Соединение 27	200 мг
Очищенная сахароза	60 г
этил пара-гидроксибензоат	5 мг
бутил пара-гидроксибензоат	5 мг
Вкусоароматическая добавка	Соответствующее количество
Краситель	Соответствующее количество
Очищенная вода	Соответствующее количество

Сироп приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.

Пример композиции 6

Суппозитории

Таблица 20
Соединение 32	300 мг
Witepsol W-35 (зарегистрированная торговая марка, смесь моно-, ди- и триглицеридов насыщенных жирных кислот - лауриновой и стеариновой, продукт Dynamite Nobel Со.)	1400 мг

Суппозитории приготавливали в соответствии с вышеприведенной рецептурой с помощью обычного способа.