препарат для лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита и мастита у коров и способ его применения

Формула изобретения

1. Препарат для лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита, серозного, серозно-катарального и субклинического мастита у коров, включающий 1,4-ди-N-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин и воду, отличающийся тем, что дополнительно включает трекрезан, диметилсульфоксид и пропандиол 1,2 в следующем соотношении компонентов, г/%:

1,4-ди-N-Окись2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин	1,0-1,2
Трекрезан (крезацин)	3,0-3,18
Диметилсульфоксид	10,0-10,5
Пропандиол 1,2	20-25
Дистиллированная вода	Остальное

2. Способ лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита, серозного, серозно-катарального и субклинического мастита у коров, включающий введение лекарственного препарата, отличающийся тем, что вводят препарат по п.1 один раз в день в течение 3-5 дней.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что для лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита препарат вводят в полость матки в дозе 70-100 мл.

4. Способ по п.2, отличающийся тем, что для лечения серозного, серозно-катарального и субклинического мастита препарат вводят интерцистернально в пораженную долю вымени в дозе 10 мл.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к лекарственным средствам, используемым для лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита и мастита у коров и способам применения данных лекарственных средств.

Известен препарат и способ лечения серозного мастита у коров мастицидом (Ветеринарное законодательство. - М.: Колос, 1981. - С.327-328). Препарат содержит пенициллин, стрептомицин, сульфадимезин и норсульфазол, суспензированные в растительном масле. Вводят препарат в течение двух-трех дней, два раза в сутки через каждые 12 часов.

Известен способ лечения мастисаном Е (Акушерство, гинекология и биотехника размножения. - М.: Колос, 2000. - С.327). Препарат содержит эритромицин основание, сульфадимезин и масляную основу. Вводят в сосок вымени в дозе 5-10 мл два раза в день в течение 2-3-х дней.

К недостаткам данных препаратов и способам их применения можно отнести сравнительно низкое лечебно-профилактическое действие, возможность развития антибиотикорезистентности, длительные сроки ожидания использования молока в пищевых целях (4-6 дней после последнего введения препарата), значительные трудовые и материальные затраты.

Наиболее близким к предлагаемому и принятым за прототип является диоксидин 1% раствор и способ его применения (Ветеринария. 2004. № 9; RU 2228176 C2). В состав препарата входят 1,4-ди-N-окись 2,3 бис-(оксиметил) хиноксалин, консервант и вода для инъекций. Препарат применяют для лечения клинических и субклинических форм мастита и для профилактической санирующей обработки вымени в начале сухостойного периода. В зависимости от показаний препарат вводят в сосок вымени в дозах от 10 до 30 мл два раза в день в течение 2-4 дней. Препарат также применяют для лечения эндометрита в дозе 200 мл путем введения в параректальную клетчатку.

К недостаткам данного препарата и способа его применения относятся отсутствие пролонгирующего эффекта, нестабильность лекарственной формы, которая не исключает проведения дополнительных манипуляций перед введением (нагревание в водяной бане до растворения осадка, который выпадает при хранении препарата ниже 15°С), значительные материальные и трудовые затраты, излишняя травматизация животных.

Техническая задача, решаемая данным изобретением, заключается в расширении номенклатуры средств и способов для лечения маститов и эндометрита у коров.

Сущность изобретения заключается в том, что препарат для профилактики и лечения мастита коров содержит 1,4-ди-Т-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин, пропандиол 1,2, диметилсульфоксид, метиловый эфир пара-оксибензойной кислоты, дистиллированную воду и согласно изобретению указанные вещества содержатся при следующем соотношении компонентов, г/%:

1,4-ди-N-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин	1,0-1,2
трекрезан	3,0-3,18
диметилсульфоксид	10,0-10,5
пропандиол 1,2	20,0-25
вода дистиллированная	остальное

Диоксидин (1,4-Ди-N-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалина) - зеленовато-желтый кристаллический порошок, без запаха, малорастворим в воде, спирте, рН 1% раствора 5,2-7,2. Относится к антимикробным препаратам широкого спектра действия. Эффективен в отношении грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Действует на штаммы бактерий, устойчивые к другим химиотерапевтическим средствам, включая антибиотики. Зарегистрирован в Российской Федерации (per. удостоверение № 76/647/1).

Трекрезан (крезацин, ортокрезоксиацетат /2-оксиэтил/ аммония -аммониевая соль ортокрезоксиуксусной кислоты) - кристаллический порошок с желтоватым, кремовым или сероватым оттенком, хорошо растворим в воде, обладает специфическим запахом, не токсичен. Крезацин активирует гипофизарно-адреналовую систему, стимулирует биосинтез белка, активирует АТФазы. Стимулирует гуморальный ответ, влияет на выработку цитокинов, эритропоэз, функциональные свойства стволовых кроветворных клеток, индуцирует продукцию интерферона, снижает содержание циркулирующих иммунных комплексов, увеличивает в сыворотке крови Ig G. Используется в животноводстве как кормовая добавка в качестве стимулятора иммунитета, ростовых процессов, воспроизводительной функции, молочной, мясной и яичной продуктивности. После применения препарата продукцию используют без ограничения. Зарегистрирован в Российской Федерации (Per. № 10.07.173. - 94 овфп).

Диметилсульфоксид - бесцветная прозрачная жидкость или бесцветные кристаллы (плавящиеся при температуре +18,5°С.) со специфическим запахом. Гигроскопичен. Смешивается во всех отношениях с водой и спиртом. Обладает способностью проникать через клеточные мембраны, в том числе через кожные барьеры. Обладает анальгетическим и противовоспалитьельным, умеренным антисептическим и фибринолитическим действием. Усиливает проникновение через кожу некоторых лекарственных веществ. Зарегистрирован в Российской Федерации (per. удостоверение № 75/244/9).

Пропиленгликль (1,2-пропандиол) - бесцветная вязкая жидкость без запаха со сладким вкусом. Смешивается с водой и спиртом во всех соотношениях. Используется как пластификатор и растворитель высокомолекулярных соединений. В ветеринарии применяется как растворитель и пролонгатор лекарственных средств.

Сущность изобретения заключается также в том, что в известном способе лечения, включающим интерцистернальное введение препарата, согласно изобретению, больным животным вводят препарат в сосок вымени в дозе 10 мл в течение трех-четырех дней, с интервалом 24 часа.

Сущность изобретения заключается также в том, что в известном способе лечения, включающим внутриматочное введение препарата, согласно изобретению, больным животным вводят препарат в полость матки в дозе 70-100 мл один раз в день в течение 4-5 дней, с интервалом 24 часа.

Изучением фармакокинетических свойств установлено, что при внутриматочном и интерцистернальном введении препарат не кумулируется и полностью выводится из организма через 24-36 часов. Молоко можно использовать в пищу через 24 часа после последнего введения препарата.

Согласно результатам токсикологических исследований препарат малотоксичен для животных, не оказывает отрицательного влияния на гематологические показатели при рекомендуемых способах введения. ЛД₅₀ гинодиксина для белых мышей при внутрибрюшинном введении составляет 47,5 мл/кг массы тела. Не вызывает хронического токсикоза у белых крыс и коров.

Не обладает сенсибилизирующим влиянием, не оказывает раздражащего действия на конъюнктиву, слизистую оболочку влагалища, эндометрий и паренхиму вымени.

Препарат проявляет антиикробное действие в отношении граммположительной и граммотрицательной микрофлоры и их различным ассоциациям, выделяемым при маститах и эндометрите. Препарат оказывает утеротоническое влияние и способствует ускоренному выведению воспалительного экссудата из полости матки.

Терапевтическая эффективность препарата при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров составляет 94,44%. Препарат способствует улучшению показателей общей резистентности организма: повышению содержания гемоглобина (на 14,49%), альбуминов (на 21,18%), уровня фагоцитарной активности нейтрофилов (на 15,55%), лизоцимной активности сыворотки крози (на 36,47%). Применение препарата способствует сокращению сервис-периода в среднем на 19-20 дней, увеличению количества коров, оплодотворяющихся после первого осеменения в среднем на 29%.

Стоимость лечения препаратом значительно ниже, чем при использовании других лекарственных средств.

Терапевтический эффект применения препарата при серозном, и субклиническом мастите составляет 100%, серозно-катаральном - 89,44%. Эффективность лечения различных форм мастита указанным препаратом по сравнению с традиционными в среднем увеличивается на 2-12,5%.

Применение препарата не сопровождается развитием побочных эффектов и осложнений.

Препарат удобен в применении, не требует специальной подготовки перед введением. Препарат можно одновременно использовать в терапии эндометрита и мастита у коров.

Использование препарата и указанного способа лечения позволяет снизить риск проявления местного дисбактериоза.

Препарат готовят весообъемным способом в асептических условиях, в специально оборудованном помещении. В подготовленную емкость наливают пропандиол 1,2 в количестве 20,0-25,0 г/%, диметилсульфоксид - 10,0-10,5 г/%. Нагревают до 75-82°С, загружают диоксидин 1,0-1,2 г/%, перемешивают до полного растворения, добавляют 1/2 часть необходимого объема дистиллированной воды, перемешивают. Затем вносят трекрезан (крезацин) 3,0-3,18 г/%, перемешивают до полного растворения и доводят объем дистиллированной водой.

Готовая лекарственная форма препарата представляет собой светло-желтый прозрачный раствор с рН 6,5-7,5. Выпускается в стеклянных флаконах под обкатку емкостью 10 мл, 100 мл, 400 мл.

В зависисимости от заболевания препарат применяют путем интерцистернального или внутриматочного способа введения. При послеродовом гнойно-катаральном эндометрите препарат вводят в полость матки в дозе 70-100 мл один раз в день в течение 4-5 дней, с интервалом 24 часа.

При мастите препарат вводят после тщательного сдаивания секрета из пораженной доли и дезинфекции соска. Вводят в дозе 10 мл один раз в день в течение в течение трех-четырех дней, с интервалом 24 часа.

Пример 1. Изучение эффективности препарата при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров проводили в одном из хозяйств Новосибирской области. Больные коровы были разделены на опытную и контрольную группы по 36 и 20 коров. Животным опытной группы внутриматочно вводили препарат в дозе 100 мл один раз в день в течение 4-5 дней. Состав препарата следующий, г/%: 1,4-ди-N-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин - 1,0-1,2; трекрезан (крезацин) 3,0 - 3,18; диметилсульфоксид - 10,0-10,5; пропандиол 1,2 - 20-25; дистиллированная вода остальное.

Животным контрольной группы применяли фурапен согласно наставлению по его применению. До лечения и через пять дней после опыта у 5 животных контрольной и опытной групп брали пробы крови и влагалищную слизь для лабораторных исследований.

Сравнительную терапевтическую эффективность в отношении прототипа (1% раствора диоксидина) проводили по основным показателям, отраженным в таблице 3.

Было установлено, что эндометрит преимущественно наблюдается у коров на 7-10 сутки после отела и проявляется в виде обильных маточно-влагалищных выделений серовато-белого цвета с примесью гноя, в некоторых случаях выделения приобретают буроватый цвет. При ректальном исследовании рога матки увеличены, флюктуируют, ретракция понижена.

При микробиологическом анализе маточно-влагалищного экссудата выделяли преимущественно стрептококки (66,11%), диплококки (41,67%) и стафилококки (33,33). Реже - культуры эшерихий (19,44%), протея (13,89%), Bacillus subtillis (19,44%), йерсений (16,67%).

Цитограмма влагалищных выделений коров, больных послеродовым эндометритом, лейкоцитарного типа, в поле зрения деструктированные и нормальные нейтрофилы, значительные скопления микробов, встречаются эритроциты, единичные эпителиальные клетки.

После введения препарата клиническая картина заболевания изменялась на следующий день у 34 коров опытной группы и характеризовалась резким увеличением количества выделяемых лохий. После второго введения препарата они выделялись в значительно меньшем количестве, становились прозрачными и тягучими. На 3-4 дни лечения маточно-влагалищные выделения отсутствовали или выделялись в незначительном количестве. В цитограмме выделений на второй день после лечения уменьшалось количество деструктированных нейтрофилов и очаговых скоплений микрофлоры, увеличивалось количество эпителиальных клеток. На пятый день после лечения цитограмма характеризовалась единичными скоплениями микробов, появлением симпластов ороговевающих и неороговевающих (суперфициальных) эпителиальных клеток и лейкоцитов.

В конторольной группе подобные изменения в клинике отмечены у 17 коров. У трех животных отмечали рецедивы заболевания на третий день после лечения. В цитограмме маточно-влагалищной слизи через пять дней после проведенного курса лечения преобладали нейтрофилы без признаков дегенерации, встречались эпителиальные суперфициальные клетки, скопления микробов, единичные эритроциты.

Сравнительная эффективность лечения в отношении известных способов (фурапен) отражена в таблице 1.

Таблица 1
№п/п	Показатель	Группа
		опытная		контрольная
		голов	%	голов	%
1.	Количество голов в группе	36		20
2.	Выздоровело коров в группе	34	94,44	17	85
3.	Оплодотворилось коров,%	30	88,23	9	52,94
4.	Оплодотворилось коров после первого осеменения, %	22	64,7	6	35,29
5.	Продолжительность бесплодия, дни	64,62±8,24		84,33±9,15
6.	Индекс оплодотворения	1,56		2,33
7.	Выбраковано коров (гол.): всего из них: в результате бесплодия аборта патологии опорно-двигательного аппарата	4 1 2 1		6 4 2

Морфологические и биохимические показатели крови у коров опытной и контрольной групп находились в пределах физиологической нормы (табл.2).

После лечения препаратом у коров отмечено достоверное повышение содержания гемоглобина (на 14,49%), альбуминов (на 21,18%), уровня фагоцитарной активности нейтрофилов (на 15,55%) и лизоцимной активности сыворотки крови (на 36,47%). Одновременно в сыворотке крови коров этой группы снижалось содержание -глобулинов (на 18,55%), -глобулинов (на 20,53%). Уровень бактерицидной активности сыворотки крови не изменялся (табл.2).

В конторольной группе коров количество гемоглобина повысилось на 8,74%, альбуминов на 4,5%. Повышение уровня бактерицидной и лизоцимной активности было недостоверным. В контрольной группе животных отмечено снижение содержания общего белка (на 8,92%), -глобулинов (на 6,31%), -глобулинов (4,09%).

Таблица 2
Показатель	Группа
	опытная	Контрольная
Гемоглобин, гл	*	*
Эритроциты, 10 12л
Лейкоциты, 10 9л
Общий белок, гл	*	*
Кальций, мг/%
Фосфор неорганический, мг/%
Щелочной резерв, мг/%
Каротин, мг/%
Витамин Е, мг/%
Альбумины, %
Альфа-глобулины, %
Бета-глобулины, %
Гамма-глобулины, %
Лизоцимная активность сыворотки крови. %
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
Фагоцитарная активность, %
*Р<0,05, **Р<0,01

Применение данного способа лечения способствует выздоровлению животных в 94% случаях. Наряду с этим уменьшается количество дней бесплодия (в среднем на 20 дней), повышается оплодотворяемость коров от первого осеменения в 1,8 раза в сравнении с показателями у коров контрольной группы.

Препарат не оказывает отрицательного влияния на гематологические показатели, способствует увеличению гемоглобина, общего белка, повышению уровня фагоцитарной активности нейтрофилов и лизоцимной активности сыворотки крови.

В таблице 3 представлены обобщенные данные по терапевтической эффективности заявляемого препарата и способа лечения, известного способа лечения (фурапен) и прототипа.

Таблица 3
№п/п	Показатель	Группа
		препарат		прототип
		опытная	контрольная
1.	Количество голов в группе	36	20	22
2.	Клинически выздоровело коров в группе, %	94,44	85	97,46
3.	Оплодотворилось коров, %	88,23	52,94	83,33
4.	Продолжительность бесплодия, дни	64,62±8,24	84,33±9,15	84,3±8,0
5.	Индекс оплодотворения	1,56	2,33	1,7

Из данных следует, что применение препарата позволяет повысить количество оплодотворившихся коров в сравнении с прототипом на 5,36%, снизить количество дней бесплодия на 30,46% (19 дней) и улучшить индекс оплодотворения на 8,97%.

Пример 2. Исследования проводили в хозяйствах Новосибирской области. Терапевтическую эффективность препарата определяли на больных коровах с диагнозами: серозный, серозно-катаральный, субклинический формы мастита. Животные были сформированы в шесть групп (3 опытные, 3 контрольные). Коров опытных групп в количестве 39 лечили гинодиксином, который вводили в сосковый канал с помощью катетера или через канюлю стеклянного шприца после предварительной дезинфекции соска один раз в сутки в дозе 10 мл. Состав препарата следующий, г/%: 1,4-ди-N-окись 2,3-бис-(оксиметил) хиноксалин - 1,0-1,2; трекрезан (крезацин) - 3,0 - 3,18; диметилсульфоксид - 10,0-10,5; пропандиол 1,2 - 20-25; дистиллированная вода - остальное.

Коровам контрольных групп в количестве 33 применяли внутрицистернальное введение антибактериальных препаратов (мастицид, мастисан А, мастисан Е).

Сравнительную терапевтическую эффективность в отношении прототипа (1% раствора диоксидина) проводили по основным показателям, отраженным в таблице 6.

Для оценки эффективности лечения проводили клинический осмотр, учитывали результаты лабораторных исследований проб молока (бактериологическое исследование, реакция с 10% раствором мастидина, проба отстаивания), продолжительность лечения, затраты на приобретение лекарственных средств, кратность введения препарата, возможные осложнения, количество выздоровевших животных. Результаты проведенных опытов представлены в таблице 4.

Таблица 4
Показатель	Формы мастита
	Серозный		Серозно-катаральный		Субклинический
	опытная	контрольная	опытная	контрольная	опытная	контрольная
Количество коров	9	8	15	10	15	15
Больных долей	9	8	19	13	18	17
Выздоровело коров	9	7	13	8	15	14
Излечено долей	9	7	17	11	18	16
Отсутствие лечебного эффекта		1	2	2		1
Рецидив заболевания	1		-	-
Продолжительность лечения (дни)	3,4	3,3	3,68	3,69	2,6	2,75
Эффективность лечения (%)	100	87,5	89,44	84,61	100	98

Результаты анализа сыворотки крови больных серозным маститом коров (табл.5), указывают на соответствие морфологических и биохимических показателей у коров опытной и контрольной групп физиологической норме.

Таблица 5
Показатель	Группа
	опытная	контрольная
Гемоглобин, гл
Эритроциты, 10 12л
Лейкоциты, 10 9л
Общий белок, гл
Кальций, мг/%
Фосфор неорганический, мг/%
Щелочной резерв, мг/%
Каротин, мг/%
Витамин Е, мг/%
Альбумины, %
Альфа-глобулины, %
Бета-глобулины, %
Гамма-глобулины. %
АлаТ
АсаТ
Мочевина
*P<0,05, **P<0,01

Как показали исследования, в сыворотке крови у коров опытной группы после лечения достоверно снизилась активность ферментов (АлаТ, АсаТ). Снижение этих показателей указывает на нормализацию показателей функционального состояния печени и отсутствие цитолитического действия препарата на гепатоциты.

Терапевтическая эффективность при лечении препаратом серозного и субклинического мастита составила 100%, серозно-катарального 89,44%. В контрольных группах показатели были значительно ниже и составили: при лечении субклинического мастита 98%, серозно-катарального 84,61%, серозного - 87,5%. Эффективность лечения различных форм мастита в опытных группах в среднем увеличилась на 2-12,5%.

Препарат показал более высокую терапевтическую эффективность по сравнению с прототипом (табл.6). Продолжительность лечения препаратом в среднем в 1,15 раза короче, а терапевтическая эффективность, в зависимости от формы мастита, выше на 2,91-10,75%.

Таким образом, предлагаемый препарат и способ лечения мастита и эндометрита у коров является более эффективным по сравнению с известными.

Технический результат, решаемый изобретением, заключается в усовершенствовании формы препарага, которая не требует дополнительных манипуляций перед введением (подогревание до 40°С), сокращении кратности введения и ускорению сроков выздоровления, повышении эффективности лечения.

Таблица 6
Показатель	Формы мастита
	Серозный			Серозно-катаральный			Субклинический
	опытная	контрольная	прототип	опытная	контрольная	прототип	опытная	контрольная	прототип
Количество коров	9	8	9	15	10	8	15	15	10
Больных долей	9	8	10	19	13	8	18	17	10
Выздоровело коров	9	7	8	13	8	7	15	14	7
Излечено долей	9	7	9	17	11	7	18	16	7
Отсутствие лечебного эффекта		1	1	2	2	1			3
Рецидив заболевания	1		1	-	-			1
Продолжительность лечения (дни)	3,4	3,3	4,0	3,68	3,69	4,26	2,6	2,75	3,2
Эффективность лечения (%)	100	87,5	89,25	89,44	84,61	86,53	100	98	96,22