фармацевтические составы (рецептуры) на основе неполярных и полярных липидов для офтальмологического применения

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для офтальмологического применения, включающие фосфолипидную компоненту, состоящую из цвиттерионных фосфолипидов природного происхождения, и масляную компоненту, состоящую из масел природного происхождения, эмульгированные в воде и при необходимости буфер с низкой ионной силой, выбираемый из Трис и гистидина, где соотношение между масляной компонентой и фосфолипидной компонентой предпочтительно составляет 3:1, фосфолипидная компонента присутствует в количестве 0,1%-5% и масляная компонента присутствует в количестве 0,3%-15%.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой соотношение между масляной компонентой и фосфолипидной компонентой составляет 2,3:1.

3. Фармацевтическая композиция по п.1 или 2, в которой фосфолипидная компонента присутствует в количестве 0,3%-3%, а масляная компонента присутствует в количестве 0,7%-7%.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой фосфолипидная компонента включает фосфатидилхолин в количестве 50-70%, фосфатидилэтаноламин 5-20%, сфингомиелин 1-10%, лизофосфатидилхолин 1-10%, нейтральные липиды 2-15% относительно общего веса фосфолипидов.

5. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой масляная компонента включает масла в основном природного происхождения, например соевое масло, оливковое масло, подсолнечное масло, рыбий жир, масло огуречника, кунжутное масло, конопляное масло, кукурузное масло, хлопковое масло.

6. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой масляная компонента включает масла в виде неполярных триглицеридов.

7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой жирные кислоты, входящие в состав неполярных триглицеридов, выбирают, например, из миристиновой кислоты, линолевой кислоты, олеиновой кислоты, линоленовой кислоты, пальмитиновой кислоты, пальмитолеиновой кислоты, стеариновой кислоты, эйкозапентаноевой кислоты, арахидоновой кислоты, докозаноевой кислоты.

8. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой рН находится в интервале 6,5-8.

9. Фармацевтическая композиция по п.1, дополнительно включающая агент, неионный или обладающий низкой ионной силой, регулирующий осмотическое давление, для регуляции осмотического давления композиции до получения величины в интервале 0,100-0,320 Осмоль/кг.

10. Фармацевтическая композиция по п.9, в которой упомянутый агент, регулирующий осмотическое давление, выбирают из глицерина, сорбита, маннита, этиленгликоля, пропиленгликоля, декстрозы.

11. Фармацевтическая композиция по п.1, дополнительно включающая по меньшей мере один агент, выбранный из стабилизаторов, поверхностно-активных веществ, веществ, содействующих поверхностно-активным веществам, антиоксидантов и/или противомикробных агентов, загустителей, линейных или разветвленных полимеров, аминокислот.

12. Фармацевтическая композиция по п.11, в которой упомянутый стабилизирующий агент, поверхностно-активное вещество, вещество, содействующее поверхностно-активным веществам, антиоксидант и/или противомикробный агент, загуститель, линейный иди разветвленный полимер, аминокислоту выбирают из токоферола, свободных жирных кислот и их солей или производных, полисорбата, pluronic^®, cremophor^®, НРМС, гиалуроновой кислоты, ксантановой смолы, парабенов, бензалконий хлорида, полигексаметилен бигуанида (РНМВ). аргинина, лизина, глицина, спиртов.

13. Фармацевтическая композиция по п.1, дополнительно включающая активное вещество или заданную комбинацию активных веществ.

14. Фармацевтическая композиция по п.13, в которой упомянутые активные вещества выбирают из олопатадина, левокабастина, латанопроста, глюкокортикоидов, фторхинолонов второго, третьего или четвертого поколения и их смеси.

15. Фармацевтическая композиция по п.14, в которой упомянутые активные вещества можно применять в заданных комбинациях с беталактаминами, цефалоспоринами и макролидами.

16. Фармацевтическая композиция по п.14, в которой олопатадин и левокабастин применяют в концентрации между 0,02% и 0,2%, латанопрост применяют в концентрации между 0,002% и 0,01%, глюкокортикоиды применяют в концентрации между 0,001% и 1%, фторхинолоны второго, третьего или четвертого поколения применяют в концентрации между 0,1% и 0,6%.

17. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Эмульсия	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фосфолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	2,0%
Вода (при необходимости)	100 мл

18. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

5% Эмульсия	(Весовой %)
Соевое масло	3,5%
Фосфолипиды яичного желтка	1,5%
Глицерин	2,2%
Вода (при необходимости)		100 мл

19. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

1% Эмульсия	(Весовой %)
Соевое масло	0,7%
Фосфолипиды яичного желтка	0,3%
Глицерин	2,2%
Вода (при необходимости)	100 мл

20.Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Эмульсия с гистидином в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,4%
HCl (при необходимости) до рН 7,5	-
Вода (при необходимости)	100 мл

21. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Эмульсия с Трис в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Трис основание	0,242%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

22. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

5% Эмульсия с трицином в качестве буфера	(Весовой %)
Рыбий жир	3,5%
Фофолипиды яичного желтка	1,5%
Глицерин	2,0%
Трицин	0,32%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

23. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Эмульсия с глицином в качестве буфера	(Весовой %)
Рыбий жир	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Глицин	0,16%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

24. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Эмульсия с NaOH в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
0,01 MNaOH	0,05%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

25. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Лекарственная эмульсия с L-гистидином в качестве буфера	(Весовой %)
Дексаметазон 21 -пальмитат	0,16%
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,40%
НС1 (при необходимости) до рН 7,2	-
Вода (при необходимости)	100 мл

26. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Лекарственная эмульсия с Трис в качестве буфера	(Весовой %)
Левокабастин	0,05%
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Трис основание	0,24%
HCl (при необходимости) до рН 7,2	-
Вода (при необходимости)	100 мл

27. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Лекарственная эмульсия с L-гистидином в буфера качестве	(Весовой %)
Олопатадин	0,1% или 0,2%
Соевое масло	6,0%
Фофолипиды яичного желтка	4,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,60%
HCl (при необходимости) до рН 7,0	-
Вода (при необходимости)	100 мл

28. Фармацевтическая композиция по п.1, состоящая из:

10% Лекарственная эмульсия с L-гистидином в буфера качестве	(Весовой %)
Латанопрост	0,005%
Соевое масло	6,0%
Фофолипиды яичного желтка	4,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,60%
Вода (при необходимости)	100 мл

29. Фармацевтическая композиция по любому из пп.13-28, в которой активные вещества включают любые соли или эфиры упомянутых активных веществ.

30. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп.1-29, включающий этапы:

получение при температуре примерно 70±15°С в одном контейнере водной фазы, включающей воду и при необходимости все водорастворимые компоненты по пп.8-13,

отдельно получение при температуре примерно 70±15°С масляной фазы, включающей фосфолипидную компоненту и масляную компоненту и при необходимости все жирорастворимые компоненты по пп.5-7 и 12-13, перемешивание до получения гомогенной смеси,

добавление масляной фазы к водной фазе или наоборот,

доведение до нужного объема водой,

получение грубой эмульсии с помощью турбины,

доведение рН до физиологического значения с помощью раствора кислоты или щелочи, при необходимости,

гомогенизация и стабилизация эмульсии с помощью гомогенизатора под высоким давлением,

стерилизация эмульсии при 120±10°С в течение времени, необходимого для достижения F₀ (гибели микробов, необходимой для обеспечения стерильности продукта),

охлаждение эмульсии до 20±10°С.

31. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп.1-29, отличающийся тем, что рабочие операции с сырыми материалами и неготовым продуктом вплоть до стерилизации и упаковки конечного продукта проводят в атмосфере без кислорода или при давлении кислорода менее 3%.

32. Способ получения лекарственной фармацевтической композиции по любому из пп.25-29, отличающийся тем, что гидрофобное активное вещество включают в масляную фазу до добавления фосфолипидов.

33. Способ получения лекарственной фармацевтической композиции по любому из пп.25-29, отличающийся тем, что амфотерное активное вещество включают в законченную жирную фазу (масло + фосфолипиды) или в законченную композицию до стерилизации, если оно термостабильно, или в асептических условиях в предварительно стерилизованную законченную композицию, если оно термолабильно.

34. Фармацевтические композиции по любому из пп.1-29 в качестве лекарства.

35. Применение фармацевтических композиций по любому из пп.1-24 в качестве средств доставки системных лекарств.

36. Применение фармацевтических композиций по любому из пп.1-24 и 29 для получения лекарств для лечения сухости глаз или синдрома сухого глаза, уменьшающих испарение водного слоя слезной пленки, отличающееся тем, что количество фосфолипидной и масляной компонент больше или равно 1% по весу относительно общего веса композиции для получения офтальмологического лекарства, обладающего противовоспалительной/антиаллергической активностью.

37. Применение фармацевтических композиций по п.35 в качестве средств доставки офтальмологических лекарств.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим составам на липидной основе для офтальмологического применения. Конкретно, изобретение относится к офтальмологическим составам, применимым, например, для доставки лекарств в глаз и при лечении сухости глаз, поскольку они способны восстанавливать липидный слой слезной пленки. Конкретно, при непреходящих патологических состояниях, например синдроме сухого глаза, такие составы также способствуют уменьшению часто присутствующей воспалительной компоненты.

Уровень техники

Известно, что функцией слезной пленки является поддержание поверхности глаза в увлажненном состоянии, что защищает эпителий роговицы и конъюнктивы и обеспечивает перенос биологически активных веществ, необходимых для физиологии глаза (питательные вещества, кислород). Для сохранения физических характеристик глазного эпителия слезная пленка должна обладать необходимым поверхностным натяжением (необходимой емкостью слизистого слоя, позволяющей водной фазе растекаться по эпителию) и должна обладать физиологической скоростью испарения. Изменение этих свойств приводит к возрастанию сухости глаз и возможно к синдрому сухого глаза.

Слезная пленка, в основном, состоит из трех слоев. Первый прилегает к поверхности глаза (роговица, конъюнктива) и в основном состоит из муцина; промежуточный слой в основном состоит из водного раствора, содержащего ионы, белки и т.п.; третий слой, находящийся в контакте с воздухом, в основном состоит из неполярных и полярных липидов разной природы (холестерин, сложные эфиры холестерина, фосфолипиды типа триглицеридов, церамиды, цереброзиды и т.д.), обладающие свойством предотвращать быстрое испарение промежуточного водного слоя.

Фактически, эти слои находятся в динамическом равновесии друг с другом благодаря морганию век, что приводит, в общем, к более сложной и гомогенной слезной пленке.

Одной из причин наступления сухости глаз и конкретно синдрома сухого глаза является избыточное испарение водного слоя слезной пленки, обусловленное недостаточностью функции внешнего липидного слоя вследствие качественного и количественного изменения его состава.

В продаже есть офтальмологические составы, содержащие полимеры, которые уменьшают испарение слезной пленки благодаря определенному уровню вязкости.

Другие композиции на основе фосфолипидных или масляных эмульсий в воде применяют для восстановления природного липидного слоя слезной пленки всегда с функцией понижения испарения водной пленки. Эти композиции, например, представлены в патенте Glonek, US № 5578586.

В частности, вышеупомянутый патент описывает специфический метастабильный состав, состоящий из фосфолипидной компоненты и масляной компоненты в определенных концентрациях и при определенном соотношении, эмульгированных в воде.

В упомянутом патенте фосфолипидная компонента состоит из заряженных фосфолипидов (с положительным или отрицательным зарядом) в количестве в интервале 0,01-7% по весу от общего веса композиции, тогда как масляная компонента состоит из минеральных масел в количестве 0,1%-12,5% по весу от общего веса композиции.

Патент раскрывает, в частности, что такой тип масла, называемого «неполярным», является предпочтительным по отношению к маслам животного или растительного происхождения, называемым «полярными» (поскольку они содержат значительное количество кислотных и/или эфирных групп), поскольку последнее привело бы к нежелательным эффектам затуманивания поля зрения и нестабильности композиции по сравнению с синтетическими маслами.

Следует заметить, что среди липидов цвиттерионные молекулы, например фосфатидилэтаноламин и фосфатидилхолин (лецитин), совершенно исключены из области притязаний патента US № 5578586, поскольку они несут положительный заряд, который при рН 7 компенсирует отрицательный заряд фосфатной группы. Отрицательно заряженные фосфолипиды являются предпочтительными согласно этому патенту, поскольку их отрицательный заряд должен облегчить растекание композиции по поверхности глаза за счет небольшого электростатического отталкивания от отрицательно-заряженной поверхности глаза.

Дополнительно, составы, содержащие липиды, имеющиеся в продаже на настоящий день, нуждаются в хранении при низкой температуре (4°С) из-за невысокой стабильности липидной компоненты, которая становится прогорклой при комнатной температуре.

Раскрытие изобретения

Технической задачей, стоящей перед настоящим изобретением, поэтому является обнаружение фармацевтических композиций для применения в офтальмологии, которые отличались бы от известных композиций и которые были бы стабильны и хорошо переносились и дополнительно были бы полезны в качестве средства доставки активных веществ. В частности, предоставлены композиции согласно изобретению с оптимальной эффективностью для лечения сухости глаз и/или сухого глаза даже в небольшом размере.

Эта задача решена с помощью фармацевтических композиций, включающих набор конкретных липидов (фосфолипидов и масел) природного происхождения. Фактически, неожиданно обнаружилось, что применение неполярных липидов, в частности, растительного или животного происхождения (например, соевого масла, оливкового масла, рыбьего жира) и полярных липидов, например, фосфолипидов, полученных из яичного желтка или лецитина сои, или смеси фосфолипидов, например, фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, сфингомиелина, позволяет уменьшить испарение водной части слезной пленки сходным образом с действием липидов мейбомиевой железы (природного липидного слоя слезы)), а также уменьшать такое испарение более эффективным образом, чем в случае составов, эмульгированных или содержащих полимеры, имеющихся в продаже в настоящее время.

Как будет видно из примеров, композиции согласно изобретению эффективнее других составов помогают уменьшать испарение слезной пленки. Дополнительно, другие протестированные составы, продукты, обнаруженные на рынке, не могут интегрироваться с природными мейбомиевыми железами, как это делают композиции, описанные ниже.

Дополнительно, неожиданно обнаружилось, что несколько композиций согласно изобретению эффективны в борьбе с аллергическими или воспалительными состояниями глаз, связанными или нет с синдромом сухого глаза.

Дополнительно композиции можно применять как средства доставки активных веществ при патологиях глаза (глаукома, возрастная макулярная дистрофия ВМД, диабетическая ретинопатия, нейропатии, бактериальные или вирусные инфекции и т.п.) и в частности, веществ с антиаллергической и/или противовоспалительной активностью, также не связанными с синдромом сухого глаза, которым может содействовать собственная эффективность эмульсий.

Следует заметить, что фармацевтическая композиция может преимущественно применяться как носитель активных веществ благодаря ее улучшенной структуре и емкости в отношении упомянутых веществ, таких как активные вещества per se благодаря вышеописанному терапевтическому действию и/или таких как активные вещества, демонстрирующие дополнительное или синергическое действие с активными веществами, обладающими антиаллергической или противовоспалительной активностью.

Первым объектом изобретения поэтому является разработка фармацевтических композиций для офтальмологического применения, как указано в основном пункте приложенной формулы изобретения.

Вторым объектом является обеспечение стабильности упомянутых составов даже при комнатной температуре.

Третьим объектом является разработка способа получения упомянутых фармацевтических композиций.

Четвертым объектом является применение упомянутых композиций для получения лекарств для лечения глазных патологий, например, глаукомы, возрастной макулярной дистрофии ВМД, диабетической ретинопатии, нейропатии, бактериальных или вирусных инфекций, сухости в глазах и сухого глаза.

Пятым объектом является применение упомянутых композиций для лечения воспалительных состояний, связанных или не связанных с синдромом сухого глаза или аллергическими состояниями глаза.

Шестой объект состоит в применении композиций в качестве средства доставки активных веществ для офтальмологического применения и конкретно для таких, эффективность которых может усиливаться за счет фармакологической активности, характеризующей заявляемые композиции (антиаллергической, противовоспалительной).

Краткое описание фигур

Дополнительные характеристики и преимущества изобретения станут более очевидными из последующего описания нескольких осуществлений, данных в качестве примеров и не для ограничения со ссылками на фигуры, относящиеся к стабильности заявленной композиции.

Фигура 1А представляет график сравнения изменения рН трех составов согласно изобретению во время хранения при 25°С.

Фигура 1Б представляет график сравнения изменения рН трех составов согласно изобретению во время хранения при 30°С.

Фигура 1В представляет график сравнения изменения рН трех составов согласно изобретению во время хранения при 40°С.

Фигура 2 представляет таблицу с процентным содержанием эфиров жирных кислот в триглицеридах различного происхождения.

Фигура 3 представляет график, на котором сравнивают процент задержки испарения водного слоя слезы под действием составов согласно изобретению, мейбомиевой железы и нескольких продуктов, имеющихся в продаже.

Фигура 4 представляет график, на котором сравнивают эффективности различных концентраций дексаметазона фосфата натрия в отношении ингибирования накопления PGE2 (простагландинов Е2) в водных жидкостях кроликов, которым внутривенно вводят бактериальный липополисахарид.

Фигура 5 представляет график, на котором сравнивают эффективности различных способов лечения в отношении инфильтрации PMN в конъюнктиву кролика в модели поверхностного воспаления.

Фигура 6 представляет график, на котором приведено сравнение антиаллергической эффективности глюкокортикоидов и эмульсий in vivo в модели аллергии у крыс.

Фигура 7 представляет график сравнения экстравазации ЕВ (Evans Blue) в ткани глаза в присутствии глюкокортикоидов или состава согласно изобретению.

Осуществление изобретения

Офтальмологические композиции согласно изобретению включают фосфолоипидную компоненту, состоящую из цвиттерионных фосфолипидов природного происхождения, и масляную компоненту, состоящую из масел природного происхождения, эмульгированные в воде.

При разработке композиций, являющихся объектом настоящего изобретения, неожиданно обнаружилось, что не электрический заряд композиции (обусловленный содержащимися в ней фосфолипидами) является причиной ее способности растекаться по поверхности глаза эффективным для уменьшения испарения слезной пленки образом, а конкретный состав масляной фазы в плане идентичности и предпочтительного процентного содержания как фосфолипидов, так и масел и их взаимного соотношения.

Соотношение между масляной компонентой и фосфолипидной компонентой может варьировать от 4:1 до 1:1, предпочтительно оно составляет 3:1, более предпочтительно соотношение составляет примерно 2,3:1.

Обычно фосфолипиды присутствуют в офтальмологической композиции в количествах, варьирующих от 0,01 до 7% по весу от общего веса композиции, предпочтительно они варьируют от 0,1 до 5%, более предпочтительно от 0,3 до 3%.

В частности, фосфолипидная компонента включает цвиттерионные фосфолипиды природного происхождения, например, в основном, фосфатидилхолин в количестве 50-70% и другие в более низких количествах, включая фосфатидилэтаноламин 5-20%, сфингомиелин 1-10%, лизофосфатидилхолин 1-10%, нейтральные липиды 2-15% и т.д. относительно общего количества фосфолипидов. Например, фосфолипидная компонента, включающая все вышеперечисленные фосфолипиды, имеется в продаже под коммерческим названием «фосфолипиды яиц 90» (Egg Phospholipid 90) фирмы Fresenius Kabi.

Преимущественно, для дальнейшего увеличения стабильности и эффективности заявленных композиций эфиры жирных кислот, присутствующие в жирной фосфолипидной части, предпочтительно выбирают из миристиновой кислоты 1%, пальмитиновой кислоты 20-40%, пальмитолеиновой кислоты 5%, стеариновой кислоты 30%, олеиновой кислоты 20-40%, линолевой кислоты (LA) 30%, эйкозаноевой кислоты 10%, арахидоновой кислоты (АА) 5%, докозагексаноевой кислоты (DHA) 20% и другие жирные кислоты Омега-3 ряда.

Среди них жирные кислоты, содержащие двойные связи, стабилизируют эмульсию, выполняя роль антиоксидантов.

Масляная компонента включает масла преимущественно природного происхождения, например, соевое масло, оливковое масло, подсолнечное масло, рыбий жир, масло огуречника, кунжутное масло, конопляное масло, кукурузное масло, хлопковое масло. Следует понимать, что масляная компонента должна включать только природные масла в виде неполярных триглицеридов за исключением синтетических масел и масел минерального происхождения.

Под термином неполярные триглицериды в настоящем описании подразумеваются молекулы липидов, состоящие из молекулы глицерина, гидроксильные (-ОН) группы которого эстерифицированы тремя жирными кислотами, которые могут быть одинаковыми или разными.

Триглицериды присутствуют в композиции, представляющей объект изобретения, в количествах, варьирующих в интервале 0,01-28% по весу от общего веса композиции, предпочтительно 0,3-15%, более предпочтительно 0,7-7%.

Обнаружено, как показано в таблице на фигуре 2, что в отличие от минеральных масел, в животных и растительных маслах природного происхождения часто присутствуют сложные эфиры глицерина и жирных кислот с длинными цепочками, содержащими одну или более двойную связь, в основном, линолевой кислоты С18:2, олеиновой кислоты С18:1, пальмитолеиновой кислоты С16:1, линоленовой кислоты С18:3 и жирных кислот Омега-3 ряда, например, эйкозапентаеноевая кислота С20:5 n3, докозаноевая кислота С22:6. Такие масла дополнительно стабилизируют композицию, являющуюся объектом настоящего изобретения.

В частности, известно, что жирные кислоты (EFA) Омега-3 ряда (например, -линоленовая кислота (ALA), эйкозапентаноевая кислота (ЕРА) и докозаноевая кислота (ВНА) и Омега-6 ряда (например, линолевая кислота (LA) и арахидоновая кислота (АА) выполняют функцию модуляторов при воспалительном и иммунном ответах.

Дополнительно обнаружено, что композиции, включающие вышеупомянутые триглицериды и фосфолипиды в описанном процентной концентрации, преимущественно позволяют получать более гомогенное распределение липидной компоненты по поверхности глаза без образования маслянистых: капелек и таким образом затуманивания поля зрения из-за неоднородного покрытия поверхности глаза.

Как описано выше, соотношение между триглицеридами и фосфолипидами находится в интервале от 4:1 до 1:1, предпочтительно оно составляет 3:1, более предпочтительно 2,3:1.

Дополнительно неожиданно обнаружено, что добавление к композиции буфера с низкой ионной силой преимущественно позволяет стабильным образом поддерживать рН, совместимый с физиологическим рН слезы, при комнатной температуре в течение долгого периода времени (хранения) без нарушения физико-химических свойств и переносимости самого продукта.

Предпочтительно, буфер выбирают из группы, включающей Трис, NaOH, гистидин, трицин, лизин, глицин, серин, доведенные до нужного рН с помощью кислотного соединения с низкой ионной силой.

В частности, на разных этапах разработки композиций в виде эмульсий среди разработанных составов наилучшими с точки зрения стабильности оказались те, где в качестве буфера применяют Трис и те, где применяют гистидин.

Для тестирования поведения таких составов по сравнению с композициями без буфера проводят экспериментальный тест, основанный на измерении рН во время исследования стабильности (составы без буфера, составы с гистидином или Трис в качестве буфера). Как показано на фигурах 1А-1В, полученные результаты показывают резкое понижение рН по ходу времени в случае эмульсии без буфера с образованием свободных жирных кислот при комнатной температуре, тогда как в эмульсиях, содержащих в качестве буфера гистидин или Трис, значение рН более стабильно как при комнатной температуре (25°С), так и при более высоких температурах (30 и 40°С) в течение периода времени не менее 24 месяцев.

Композиции согласно изобретению могут дополнительно включать агент для регуляции осмотического давления, неионный или обладающий низкой ионной силой, так чтобы осмотическое давление конечного продукта было в интервале 0,100-0,320 Осмоль/кг. В частности, упомянутый агент, регулирующий осмотическое давление, выбирают из глицерина, сорбита, маннита, этиленгликоля, пропиленгликоля, декстрозы. Агент, регулирующий осмотическое давление, присутствует в количестве, достаточном для получения осмотического давления, близкого к таковому в слезной жидкости.

Композиции могут также включать стабилизирующие агенты, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты и/или противомикробные агенты, загустители, линейные или разветвленные полимеры, аминокислоты, например, токоферол, свободные жирные кислоты и их соли, полисорбат, pluronic®, cremophor®, НРМС, гиалуроновую кислоту, ксантановую смолу, парабены, бензалконий хлорид, полигексаметилен бигуанид (РНМВ), аргинин, лизин, глицин и т.д.

Как упоминалось выше, композиции согласно изобретению находятся в виде эмульсий масло-в-воде, которые изменяются в момент контакта с глазной поверхностью, так что их структура трансформируется. Это означает, что композиции способны распределяться по поверхности глаза, в частности, интегрироваться мейбомиевой железой, как показано в опытах in vitro по уменьшению потока испарения слезы, описанных ниже.

В экспериментах in vivo, проведенных с участием людей, дополнительно обнаружено, что липидная пленка на глазной поверхности получается гомогенной, только если композиция содержит вышеописанные масла и предпочтительно при конкретных указанных соотношениях между ними и фосфолипидами. Например, присутствие триглицеридов со средней длиной цепочки (МСТ) или с короткими цепочками, или смеси МСТ и длинноцепочечных триглицеридов, задает распределение липидной части по негомогенной слезной пленке, что обусловливает затуманивание поля зрения и плохую переносимость глазом, и все из-за специфической длины углеродных цепочек в составе масла.

Ниже описан пример способа получения композиций, являющихся объектом изобретения.

Способ получения фармацевтических составов на основе неполярных и полярных липидов для офтальмологического применения.

Способ получения фармацевтических составов на основе неполярных и полярных липидов, как описано выше, включает следующие этапы:

- получение при температуре примерно 70±15°С в одном контейнере водной фазы, включающей воду и при необходимости все описанные водорастворимые компоненты,

- отдельно получение при температуре примерно 70±15°С масляной фазы, включающей фосфолипидную компоненту и масляную компоненту и при необходимости все жирорастворимые компоненты, перемешивание до получения гомогенной смеси,

- добавление масляной фазы к водной фазе или наоборот,

- доведение до нужного объема водой,

- получение грубой эмульсии с помощью турбины,

- доведение рН до физиологического значения с помощью раствора кислоты или щелочи, при необходимости,

- гомогенизация и стабилизация эмульсии с помощью гомогенизатора под высоким давлением,

- стерилизация эмульсии при температуре 120±10°С в течение времени, необходимого для достижения F₀ (гибели микробов, необходимой для обеспечения стерильности продукта),

- охлаждение эмульсии до температуры 20±10°С.

Предпочтительно, водорастворимые компоненты, соответствующие первому этапу, выбирают среди таковых, описанных выше.

Предпочтительно, жирорастворимые компоненты, соответствующие второму этапу, выбирают среди таковых, описанных выше.

В случае эмульсий, содержащих липофильное активное вещество, его можно включать в масляную фазу до добавления фосфолипидов.

Амфотерное активное вещество можно вместо этого включать в законченную масляную фазу (масло + фосфолипиды).

Амфотерные активные вещества можно включать в законченную композицию перед стерилизацией, если они термостабильны, или добавлять в асептических условиях к предварительно стерилизованной законченной композиции.

В связи со стабилизацией композиций согласно изобретению, с учетом того, что масляная часть эмульсий может начать прогоркать уже на этапе получения и далее ее стабильность при комнатной температуре, обнаружено, что более стабильный продукт получается, если рабочие операции с сырыми материалами и неготовым продуктом вплоть до этапа стерилизации конечного продукта проводят в атмосфере без кислорода или при давлении кислорода менее 3%. Это фактически позволяет избежать окисления двойных связей, присутствующих в цепочках жирных кислот природных фосфолипидов и триглицеридов, составляющих композицию. Возможное окисление продукта фактически является причиной нестабильности составов (прогоркание, разделение фаз) и образования токсичных молекул (перекисных радикалов). Упаковку продукта также надо проводить в условиях защиты композиции от воздуха сразу после стерилизации.

В согласии с конкретным осуществлением вышеописанного способа, способ получения, проводимый в атмосфере без кислорода или при очень низком давлении кислорода заключается в размещении двух контейнеров с магнитными мешалками при контролируемой температуре (70°С), где один содержит масляную фазу, содержащую фосфолипиды и все жирные или жирорастворимые компоненты в вышеописанных соотношениях и количествах, а другой содержит водную фазу, содержащую воду и все растворимые в воде компоненты. Когда обе фазы становятся гомогенными, масляную фазу медленно добавляют к водной фазе с применением турбоэмульгатора или гомогенизатора под высоким давлением при скорости 5000 оборотов/мин. Смесь перемешивают в течение примерно 15 мин, после чего ее стерилизуют, охлаждают и пакуют.

Все варианты можно в любом случае проводить в наиболее подходящих условиях, известных специалисту в данной области техники.

Предпочтительные, но не ограничивающие примеры композиций согласно изобретению, приведены в нижеследующих таблицах.

Таблица 1
10% Эмульсия без буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фосфолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	2,0%
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 2
5% Эмульсия без буфера	(Весовой %)
Соевое масло	3,5%
Фосфолипиды яичного желтка	1,5%
Глицерин	2,2%
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 3
1% Эмульсия без буфера	(Весовой %)
Соевое масло	0,7%
Фосфолипиды яичного желтка	0,3%
Глицерин	2,2%
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 4
10% Эмульсия с гистидином в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,4%
HCl (при необходимости) до рН 7,5
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 5
10% Эмульсия с Трис в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Трис основание	0,242%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 6
5% Эмульсия с трицином в качестве буфера	(Весовой %)
Рыбий жир	3,5%
Фофолипиды яичного желтка	1,5%
Глицерин	2,0%
Трицин	0,32%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 7
10% Эмульсия с глицином в качестве буфера	(Весовой %)
Рыбий жир	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Глицин	0,16%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 8
10% Эмульсия с NaOH в качестве буфера	(Весовой %)
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
0,01 М NaOH	0,05%
HCl (при необходимости) до рН 7,6	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 9
10% Лекарственная эмульсия с L-гистидином в качестве буфера	(Весовой %)
Дексаметазон 21 -пальмитат	0,16%
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,40%
HCl (при необходимости) до рН 7,2	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 10
10% Лекарственная эмульсия с Трис в качестве буфера	(Весовой %)
Левокабастин	0,05%
Соевое масло	7,0%
Фофолипиды яичного желтка	3,0%
Глицерин	1,8%
Трис основание	0,24%
HCl (при необходимости) до рН 7,2	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 11
10% Лекарственная эмульсия буфера с L-гистидином в качестве	(Весовой %)
Олопатадин	0,1% или 0,2%
Соевое масло	6,0%
Фофолипиды яичного желтка	4,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,60%
HCl (при необходимости) до рН 7,0	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Таблица 12
10% Лекарственная эмульсия буфера с L-гистидином в качестве	(Весовой %)
Латанопрост	0,005%
Соевое масло	6,0%
Фофолипиды яичного желтка	4,0%
Глицерин	1,7%
L-Гистидин	0,60%
HCl (при необходимости) до рН 7,0	-
Вода (при необходимости)	100 мл

Такие примеры можно также осуществлять с различными солями активных веществ или с активными веществами, отличными от приведенных в примерах.

Дополнительно, олопатадин и левокабастин можно также применять в концентрации между 0,02 и 0,2% сами по себе или в комбинации друг с другом или с глюкокортикоидами, тогда как латанопрост можно применять в концентрации в интервале от 0,002 до 0,01%. Например, глюкокортикоиды можно выбирать из флуоцинолона ацетонида, флутиказона пропионата, флудроксикортида, дифлупредната, флуметазона пивалата, веклометазона дипропионата, бетаметазона, будезонида, алклометазона дипропионата, клобетазола пропионата, клобетазона бутирата, дезонида, дезоксиметазона, дифлоразона диацетата, флуоцинонида, галометазона, триамцинолона ацетонида, улобетазола пропионата, амцинонида, клокортолона пивалата, дексаметазона, дифлукортолона, флудрокортизона ацетата, флупреднидена ацетата, галцинонида, мометазона фуроата, предникарбата, флуклоролона ацетонида, дихлоризона ацетата, флуокортолона, метилпреднизолона, гидрокортизона, флуокортина бутила, их солей и эфиров и их смеси.

В модели экспериментального увеита у кроликов показано, что дексаметазон фосфат натрия способен проявлять значительное противовоспалительное действие в таких низких концентрациях, как 0,001% (Фигура 4).

Широко принято, что долговременное офтальмологическое введение (>2 недель) глюкокортикоидов в обычно применяемых терапевтических концентрациях связано с возрастающим риском глазной гипертензии и помутнения хрусталика. Фактически, клиническое применение офтальмологических глюкокортикоидов ограничено двухнедельными курсами терапии. Особенно нежелательные эффекты офтальмологических глюкокортикоидов прямо связаны с количеством лекарства, доставленного в глаз.

Согласно этой линии рассуждений применение концентраций в нижней части избранного интервала (0,001%-1%) может быть особенно полезным при долговременном лечении состояний глазной поверхности, характеризующихся воспалением, например, аллергии, сухого глаза, или при лечения после фоторефрактивной кератектомии (PRK) или пересадки роговицы.

Можно заключить, что особенно при воспалительных патологиях глазной поверхности глюкокортикоиды, применяемые в концентрации из нижней части избранного интервала, сохраняют свою эффективность, в то же время демонстрируя улучшенный профиль офтальмологической безопасности, что позволяет их применять для более долгих курсов терапии.

Дополнительные активные вещества можно выбирать из группы, включающей фторхинолоны, предпочтительно второго, третьего и четвертого поколения, например, ципрофлоксацин, офлоксацин, левофлоксацин, тровафлоксацин, моксифлоксацин, гемифлоксацин или их смеси или их «фиксированные» комбинации (составы, содержащие по меньшей мере два различных активных вещества) с противовоспалительными веществами, например, глкокортикоидами, или с другими противомикробными веществами, такими как макролиды, цефалоспорины или беталактамины. Концентрации фторхинолонов могут варьировать между 0,1 и 0,6%.

Определяют следующие параметры нескольких композиций, являющихся объектом настоящего изобретения: стабильность, переносимость, эффективность для уменьшения испарения слезной пленки, способность к диффузии в мейбомиеву железу, антиаллергическая/противовоспалительная эффективность.

Стабильность и переносимость

Все композиции, представленные в описании объекта настоящего изобретения, хорошо переносятся на офтальмологическом уровне.

Стабильность составов с буфером составляет по меньшей мере 24 месяца при комнатной температуре.

Эффективность композиций против испарения водной компоненты слезной пленки

Эксперты в области офтальмологии знают, что липидный слой слезы, производимый мейбомиевой железой, способен понижать поверхностное натяжение слезной пленки и значительно замедлять скорость испарения воды из подлежащего слоя.

Эмульсии, являющиеся объектом настоящего изобретения, проявляют особые свойства по сравнению с другими офтальмологическими составами, содержащими липиды и/или полимеры, в частности, особую способность понижать поверхностное натяжение сбалансированного физиологического раствора по меньшей мере на 30 мН/м после добавления порядка 1% по объему относительно объема капли в системе висячей капли, описанной ниже и представленной в работе Miano F. et al., J. Phys: Condens. Matter 16(2004)S2461-S2467.

Композиции, являющиеся объектом настоящего изобретения, дополнительно неожиданно способны поддерживать скорость испарения сбалансированного физиологического раствора на низком уровне независимо от температурных условий, относительной влажности, присутствия или отсутствия природного липидного слоя и объемного соотношения между раствором и эмульсией.

Для проверки способности композиций, являющихся объектом настоящего изобретения, уменьшать поток испарения водной части слезы, определяют скорость испарения сбалансированного физиологического раствора (HBSS) а отсутствие или в присутствии мейбомиевых желез в случае эмульсии, являющейся объектом настоящего изобретения, или в случае коммерческого контрольного продукта.

Применяют модель висячей капли в установке для измерения контактного угла (ОСА20, Dataphysics, Germany), включающей два гамильтоновские шприца с электронным измерительным устройством и камеру с контролируемой температурой и относительной влажностью (RH), внутри которой находится капля.

Скорость испарения рассчитывают как изменение размера капли через заданный интервал времени (15 сек), путем обработки изображений, полученных с помощью ПЗС (CCD) камеры. Измерение скорости испарения повторяют 80 раз в общей сложности в течение 20 мин в каждом опыте.

Экспериментальные данные выражают как уменьшение скорости испарения относительно сбалансированного физиологического раствора с помощью следующей формулы:

где J_w означает поток испарения, выраженный в г*м^-2*с^-1, R.H. означает относительную влажность и К означает константу, зависимую от температуры.

Соотношение между потоком испарения J_m в присутствии мейбомиевых желез или мейбомиевых желез вместе с офтальмологической композицией (композицией, являющейся объектом изобретения, или коммерческим контрольным продуктом) и J _w (потоком испарения раствора, выраженным в г*м^-2 *с^-1) определена как

=1-(J_m/J_w)

где значение в интервале 0-1 представляет сопротивление испарению, задаваемое гомогенным распределением липидов на поверхности раздела с водным слоем. Данные обрабатывают с помощью программы DATAPHYSICS (Miano F. et al. J. Phys: Condens. Matter 16 (2004) S2461-S2467). В описанных ниже экспериментах определяют скорость испарения водных растворов по сравнению с феноменом испарения слез у больных, страдающих синдромом сухого глаза, обусловленным испарением. Вместе со скоростью испарения измеряют поверхностное натяжение жидкости, являющееся важным свойством слезной жидкости. Приведены данные, относящиеся к действию ряда препаратов для офтальмологического применения на скорость испарения в модельной системе, представляющей слезную пленку.

После нанесения капли сбалансированного раствора Хэнкса (HBSS, Hank's Balanced Salt Solution, содержащий CaCl₂·Н₂О, 0,19 мг/мл; MgSO₄ , 0,098 мг/мл; KCl, 0,40 мг/мл; H₂PO₄, 0,06 мг/мл; NaHCO₃, 0,35 мг/мл; NaCl, 8,0 мг/мл и D-глюкозу, 1,0 мг/мл) объемом 12 мкл специалист добавляет известный объем, например 1 мкл природного липидного раствора в хлороформе, и ждет 2 мин до испарения хлороформа и одновременного образования липидного слоя на поверхности раздела жидкость-воздух. Затем добавляют известный объем исследуемого офтальмологического раствора в интервале 10%-50% по объему относительно объема капли. Тестируют составы, представленные в нижеследующей таблице 13.

Таблица 13
Тестируемые составы	Композиция
10% эмульсия без буфера	Эмульсия без буфера, содержащая 7% масло семян сои; 3% лецитин; 2,2% глицерин в очищенной воде
10% Эмульсия с гистидином в качестве буфера	Эмульсия, содержащая 7% масло семян сои; 3% лецитин; 2,2% глицерин в очищенной воде с гистидином в качестве буфера
10% Эмульсия с Трис в качестве буфера	Эмульсия, содержащая 7% масло семян сои; 3% лецитин; 1,8% глицерин в очищенной воде с Трис в качестве буфера
Refresh Endura (USA)	Коммерческий продукт, содержащий 1% глицерин, 1% полисорбат 80, карбомер, маннит, касторовое масло, гидроокись натрия в воде
TSP (полисахарид семян тамаринда)	Полисихарид, извлеченный из семян тамаринда (0,5% или 1,0%), маннит, хлорид бензалкония в воде

Пример 1

Измеряют скорость испарения сбалансированного физиологического раствора (HBSS) и офтальмологических композиций в различных условиях температуры и относительной влажности.

Условия: Т=25±1°С; R.H.=66%, контролируется с помощью насыщенного раствора NaNO₂.

Таблица 14
Композиция	Jw
HBSS	8,26×10-5±3,1×10 -6 г/м2/c
HBSS + мейбомиевы железы	4,46×10-5 ±1,67×10-6 г/м2/с
10% Эмульсия	6,37×10 -5±2,54×10-6 г/м2/с

Условия: Т=36±1°С, R.H.=15%, контролируется с помощью насыщенного раствора LiCl.

Таблица 15
Композиция	Jw
HBSS	3,919×10-4±4,1×10 -5 г/м2/c
HBSS + мейбомиевы железы	2,555×10-4 ±5,4×10-5 г/м2/c
10% Эмульсия	2,802×10 -4±4,01×10-5 г/м2/с

Этот пример показывает, как композиции, являющиеся объектом изобретения, способны уменьшать скорость испарения водного раствора сходным образом с мейбомиевыми железами в различных условиях окружающей среды и в частности при низкой относительной влажности, что часто имеет место в учреждениях, аэропортах, самолетах, машинах и т.д.

Пример 2

Измеряют скорость испарения сбалансированного физиологического раствора (HBSS) по сравнению с раствором с мейбомиевыми железами в условиях различной температуры и относительной влажности и при добавлении различных объемов исследуемых композиций или контрольной композиции.

Условия; Т=36±1°С; R.H.=15%.

Добавляют 1 мкл на 10 мкл тестируемой или контрольной композиции.

Таблица 16
	Мейбомиевы железы	Refresh Endura	1% TSP	10% Эмульсия
Ф	0,337±0,086	0,341±0,050	0,032±0,061	0,322±0,097

Условия: Т=36±1°С; R.H.=15%.

Добавляют 5 мкл на 10 мкл тестируемой или контрольной композиции. Соотношение между офтальмологическим препаратом и жидкостью ближе к таковому для капель глазной промывки (eyewash) в глазу, чем добавка только 1 мкл.

Таблица 17
	Мейбомиевы железы	Refresh Endura	1%TSP	10% Эмульсия
Ф	0,337±0,086	0,041±0,077	0,120±0,048	0,325±0,080

Оптимальным значением Ф является такое, которое получено для мейбомиевых желез. Чем ближе значение Ф тестируемых соединений к этой величине, тем эффективнее будут эти соединения для физиологического уменьшения испарения водной части слезной пленки. Из этого примере можно заключить, что Refresh Endura, эффективная при добавлении малых объемов к капле, при добавлении в объеме, близком к таковому глазной промывки, нарушает липидную пленку, тогда как TSP никогда не приближается к физиологическому значению Ф. С другой стороны, эмульсии демонстрируют физиологическую эффективность для уменьшения испарения водного раствора во всех примененных экспериментальных условиях.

Пример 3

Измеряют поверхностное натяжение сбалансированного физиологического раствора (HBSS), физиологического раствора в присутствии липидов мейбомиевых желез и офтальмологических растворов и эмульсий, описанных выше.

Условия: Т=25°С; U.R.=95% для раствора, насыщенного двузамещенным сульфатом натрия двенадцативодным.

Таблица 18
Композиция	(10-3Н/м)	Примечания
HBSS физиологический раствор	72,38±0,27
HBSS физиологический раствор с мейбомиевыми железами	48,60±1,25	0,05 мкл* в 15 мкл HBSS
10% эмульсия с гистидином в качестве буфера	55,11±0,29
10% эмульсия с гистидином в качестве буфера в HBSS	26,64±0,45	0,1 мкл в 10 мкл HBSS
10% эмульсия с гистидином в качестве буфера в HBSS	39,66±0,21	3 мкл в 12 мкл HBSS
Refresh Endura	39,72±0,28
Refresh Endura в HBSS	42,15±0,45	0,1 мкл в 10 мкл HBSS
0,5% TSP	47,39±0,60
1,0% TSP	47,71±0,66
0,5% TSP в HBSS	66,78±0,48	1 мкл в 15 мкл HBSS
* 0,4% раствор.

Эксперимент показывает неожиданное свойство эмульсий согласно изобретению понижать поверхностное натяжение, когда они находятся в контакте с физиологическим раствором, содержащим двухвалентные катионы (Са²⁺, Mg²⁺).

Из эксперимента ясно, что одно только присутствие обычного поверхностно-активного агента (составы Refresh Endura или TSP) не приводит к понижению эффективного поверхностного натяжения, как происходит в случае применения эмульсий, являющихся объектом изобретения.

Данные, полученные для Refresh Endura или TSP указывают, что при внесении в системы, близкие к природным, они не достигают хорошего распределения в липидах мейбомиевых желез.

Уменьшение величин поверхностного натяжения, полученное для эмульсий, являющихся объектом изобретения, и пропорциональность объемам, добавленным к водному раствору, указывает на то, что такие композиции хорошо интегрируются с липидами мейбомиевых желез.

Пример 4

Чтобы оценить способность композиций, являющихся объектом настоящего изобретения, интегрироваться и воспроизводить функцию липидов мейбомиевых желез, оценивают уменьшение скорости испарения в присутствии различных композиций, имеющихся в настоящее время на национальном и международном рынке, по сравнению с композициями согласно изобретению и с природными липидами мейбомиевых желез. В этом случае также применяют систему висячей капли. Указанные композиции сравнивают в нижеприведенной таблице 19.

Таблица 19
10% Эмульсия (SIFI)	Лецитин яичного желтка, соевое масло в буфере Трис
Refresh endura* RE (USA)	Касторовое масло, полисорбат-80, Карбомер 1342 и глицерин
10% Интралипид (Intralipid) **	Соевое масло, лецитин, глицерин
Смягчитель (Soothe)*	4,5% минеральное масло (Ресторил), полисорбат-80
* офтальмологическая композиция
** внутривенная питательная композиция

Как можно видеть на графике, представленном на фигуре 5, в отличие от других тестируемых композиций липидная эмульсия, являющаяся объектом изобретения (SIFI), уменьшает испарение в модели in vitro статистически значимым образом и сходно с действием липидов мейбомиевых желез (28% и 31%, соответственно), тогда как продукты, имеющиеся на рынке, являются менее эффективными статистически.

С помощью реологических измерений обнаружено также, что пленка из природных липидов мейбомиевых желез обычно проявляет эластичность при сжатии поверхности, обусловленном движением век во время моргания, что способствует восстановлению слезной пленки после моргания.

Обнаружено, что композиции, являющиеся объектом изобретения, в значительной степени соответствуют физическим свойствам, характеризующим диффузию природных пленок липидов мейбомиевых желез на поверхности раздела воздух/вода.

Такая характеристическая текучесть способствует правильной реконструкции слезной пленки после моргания. Это не является очевидным результатом, поскольку обнаружено, что другие композиции, содержащие фосфолипиды, и отдельные коммерческие эмульсии образуют заметно отличающуюся поверхность раздела.

Композиции эмульсии SIFI проявляют физические свойства, характерные для диффузии природных липидных пленок мейбомиевых желез на поверхности раздела воздух-вода.

Эти конкретные свойства делают композиции согласно изобретению особенно подходящими для доставки лекарств для офтальмологического применения, требующей быстрой диффузии, интеграции и совместимости со слезной жидкостью, определяющими хорошее распределение и кинетику в глазных тканях и синергические эффекты ряда лекарств.

После введения в конъюнктивальный мешок благодаря присутствию в слезе ионов фазы, составляющие эмульсию, разделяются, высвобождая активное вещество.

В частности, когда изменяется количественный и качественный состав липидного слоя, как происходит у субъектов, страдающих от сухости глаз, синдрома сухого глаза, обусловленного испарением, аллергий, бактериальных или вирусных инфекций и т.д., композиции согласно настоящему изобретению способны интегрироваться неадекватным липидным слоем, восстанавливая его физиологическое состояние.

Антиаллергическая и противовоспалительная эффективность

Как упоминалось во вводной части настоящего описания, ряд композиций, являющихся объектом настоящего изобретения, проявляют неожиданные антиаллергические и противовоспалительные свойства. Замечено также, что введение композиций согласно изобретению, включающих противовоспалительные и антиаллергические лекарства, неожиданно приводит к значительно улучшенным терапевтическим ответам по сравнению с ответами на применение упомянутых лекарств в составе известных композиций. В одном эксперименте, проведенном с глюкокортикоидами в модели поверхностного воспаления in vivo, композиции согласно изобретению неожиданно демонстрируют эффективность, сопоставимую с таковой глюкокортикоидов (фигура 6).

Такой эффект далее исследуют in vivo в модели иммунологической аллергии, конкретно при активной окулярной анафилаксии у крыс. Ткани глаза крысы фактически отвечают на феномен системной анафилаксии. Применяемая экспериментальная модель обладает характеристиками, сходными с таковыми, наблюдаемыми в патологии человека, клиническими проявлениями которой являются расширение кровеносных капилляров, отек конъюнктивы и увеличенная проницаемость сосудов (Bloch JK, Ohman J, Waltin J, and Cygan RN. "Potentiated reagin response: Initiation with minute doses of antigen and alum followed by infection with Nippostrongylus brasiliensis" J Immunol 110:197, 1973).

Применяют двадцать самцов крысы линии Вистар весом 150-175 г. Животных иммунизируют с помощью внутрибрюшинной инъекции 100 мг овальбумина и 20 мг квасцов в 1 мл стерильного раствора 0,9% NaCl. Через 14 дней животных делят на группы и они получают топикальную аллергическую провокацию с антигеном (10 мл раствора овальбумина в PBS, 100 мг/мл). Немедленно перед нанесением аллергической провокации инъецируют краситель синий Эванса (ЕВ) (1,25 мг/100 г/1 мл PBS) в каудальную вену животного с предварительной анестезией эфиром.

Вслед за наступлением глазной анафилактической реакции из мастоцитов и базофилов высвобождаются медиаторы аллергии (гистамин, серотонин, лейкотриены, тромбоцитарный активирующий фактор PAF, эозинофильный хемотактический фактор и т.д.), которые определяют вышеописанные клинические признаки.

В частности, гистамин, высвобождаемый активированными мастоцитами и базофилами, вызывает увеличение сосудистой проницаемости и вследствие этого экстравазацию красителя синего Эванса и альбумина из кровотока и накопление в глазных тканях, приводящее к отеку (Baird RS, Bloch JK, and Allansmith MR. "Edema test for assessing ocular anaphylaxis". Curr Eye Res 2: 657,1983).

Считая проницаемость сосудов адекватным параметром оценки интенсивности аллергического ответа, экстравазацию красителя в глазные ткани, измеренную через 30 мин после индукции анафилаксии, применяют в качестве маркера аллергической реакции.

Протестированы следующие композиции:

Контроль: вода и 2,2% глицерин
10% эмульсия
5% эмульсия
1% эмульсия
0,15% раствор дексаметазона фосфата натрия
0,14% дексаметазон пальмитат в 10% эмульсии

Вещества наносят топикально (15 мкл) в правый глаз животных, тогда как левый глаз не обрабатывают.

Эмульсии вводят за 5, 4, 3, 2, 1 час до внесения глазной аллергической провокации по протоколу, приведенному в литературе для кортикоглюкокортикоидов (Calonge МС, Pastor JC, Herreras JM and Gonzales JL. "Pharmacologic modulation of vascular permeability in ocular allergy in the rat". Invest Ophthalmol Vis Sci 28: 264, 1987).

После внесения аллергической провокации животные развивают аллергическую реакцию на конъюнктивальном уровне, заметную уже после первых пяти минут, с отеком конъюнктивы и век с максимумом развития через 30 мин.

Через 30 мин после аллергической провокации животных забивают путем смещения позвоночника на уровне шеи (cervical dislocation). Глаза и веки удаляют, взвешивают и погружают в раствор для экстракции, состоящий из ацетона и 0,5% сульфата натрия в соотношении 14:6 и держат при комнатной температуре при перемешивании. Через 24 часа образцы центрифугируют при 2000 об/мин в течение 10 мин и интенсивность окраски супернатанта измеряют с помощью спектрофотометра при 620 нм.

Для каждого эксперимента получают стандартные калибровочные кривые для перевода единиц оптической плотности в концентрацию в мг/мл раствора, затем данные нормализуют на мг ткани. Данные выражают в процентах экстравазации ЕВ в ткани глаза животного, подвергшегося воздействию, по сравнению с контрольным животным, не подвергавшимся фармакологическому воздействию.

Как видно на фигуре 7, в применяемой модели наблюдается зависимость эффективности от дозы для тестируемых композиций, которая предполагает статистическую значимость в случае эмульсий, содержащих масляную компоненту в концентрации выше 1%.

В частности, наблюдается, что 10% эмульсии показывают 50% ингибирование экстравазации красителя по сравнению с контролем и 5% эмульсии проявляют примерно 37% ингибирование аллергической реакции. В эксперименте также наблюдается, что эмульсия, содержащая дексаметазон пальмитат, проявляет синергический эффект с действием активного вещества, которое уже в концентрации 0,14% проявляет больший эффект, чем раствор 0,15% дексаметазона фосфата натрия.

В частности, дополнительно, синергическое действие эмульсии на эффект дексаметазона пальмитата проявляется, если сравнивать с эффективностью носителя (10% эмульсии), с большей статистической значимостью, чем получается при сравнении 0,15% раствора и PBS (Фигура 6).

Как понятно из вышеописанного, настоящая патентная заявка представляет фармацевтическую композицию для офтальмологического применения, которая позволяет применятьть природные вещества.

Дополнительно, специалист в данной области может получить многочисленные варианты композиции, где все они охвачены областью притязаний приложенной формулы изобретения.