противовирусное, иммуномодулирующее средство

Формула изобретения

Литиевая соль N-акридонуксусной кислоты структурной формулы



проявляющая противовирусное, иммуномодулирующее свойство.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к противоинфекционным, в том числе противовирусным, средствам на основе гидрофобных литиевых солей акридона, обладающих комбинированным механизмом действия (прямое - на микробовозбудителя, находящегося внутриклеточно, и опосредованно - через активированные факторы клеточного иммунитета), и может найти применение как специфический противовирусный препарат для экстренной профилактики и лечения вирусных инфекций различной локализации, а также инфекций, сопряженных с иммунодефицитными состояниями и, как следствие, появлением конкурирующей патологии иной природы.

Известны применяемые в противовирусной терапии лекарственные средства на основе литиевых солей (cм. Skinner G.R.B., Hartley С., Buchan A. аt al. The effect of lithium chlorid on the replication of Herpes simplex virus. Med. Microbiol. Immunol. , 1980, 168, 139-148), например хлорид лития, в которых противовирусным действием обладают ионы лития независимо от того, в состав какой соли они входят. Указанные лекарственные средства дают определенный профилактический и лечебный эффект при их использовании в виде таблеток, на мазевой основе или при других фармацевтически приемлемых носителях. Однако при относительно низкой токсичности эти лекарственные средства не обладают противовирусной активностью в отношении РНК-содержащих вирусов (например, вирусов гриппа, арборвирусов и др.).

Известны применяемые в противовирусной терапии иммуномодулирующие лекарственные средства на основе индукторов интерферона (см. патент США 4314061, МКИ С 07 D 413/14). Данное средство также обладает определенным профилактическим и лечебным эффектом и его используют растворенным в воде, на мазевой основе или в других фармацевтически приемлемых носителях.

Наиболее близким по сущности к заявляемому изобретению и механизму воздействия на клетки иммунной системы является низкомолекулярный индуктор интерферона на основе натриевой соли 10-акридонуксусной кислоты (см. патент РФ 2020941). При высокой эффективности и малой токсичности препарат является гидрофильным, нестабильным при хранении, сложен и дорог при производстве. Кроме того, он проявляет недостаточную эффективность в отношении ДНК-содержащих вирусов. Эффективность обеспечивается только за счет повышения неспецифической резистентности (индукция интерферонов альфа/бета), отсутствует эффективность при применении через рот, трудность получения, нестабильность при хранении в растворах.

Изобретение направлено на синтез низкомолекулярного химического соединения, биологическое действие которого представляло бы сочетанную, двухстороннюю активность: с одной стороны, препарат должен обладать ингибирующей активностью в отношении определенных этапов репродукции вируса, а с другой - способностью индуцировать гибель и удаление инфицированных клеток из организма или иные эффекторные функции, обеспечивающие инактивацию и элиминацию патогена без цитопатического воздействия на инфицированную клетку.

Технический результат от использования изобретения заключается в значительном повышении эффективности препарата в отношении ДНК-содержащих вирусов (в несколько тысяч раз), сочетании неспецифического действия за счет индукции интерферона с прямым противовирусным действием на репродукцию вируса в инфицированной клетке, обеспечении эффективности препарата при введении через рот, упрощении технологии и затрат на производство.

Структурная формула синтезированного препарата (гидрофобной литиевой соли N-акридонуксусной кислоты) представлена на чертеже.

Брутто-формула - C₁₅H₁₀NO₃Li. Молекулярная масса: 259,19. Чистота не менее 98%. Растворимость: литевая соль акридонуксусной кислоты слабо растворима в воде (0,2-0,3%), растворимость несколько увеличивается в горячей воде, практически нерастворима в спиртах, эфире, ацетоне, хлороформе, ДМАА, ДМФА, умеренно растворима в горячем (90-110^oС) диметилсульфоксиде.

Препарат получают, например, следующим образом. Смесь N-акридонуксусной кислоты в водном растворе изопропанола или эфира N-акридонуксусной кислоты с эквивалентным количеством водного раствора гидрида лития кипятят на масляной бане с обратным холодильником, затем охлаждают, фильтруют, промывают изопропиловым спиртом и высушивают в вакууме. В результате такой простейшей технологии получают порошок литиевой соли N-акридонуксусной кислоты, готовой для использования в лекарственной форме.

Изобретение отличается от прототипа тем, что в известное противовирусное средство внесены существенные изменения, а именно вместо натриевой соли N-акридонуксусной кислоты используется литиевая соль N-акридонуксусной кислоты.

Указанный выше выбор основан на результатах исследований, проведенных авторами предлагаемого изобретения, обнаруживших новые физико-химические свойства литиевой соли N-акридонуксусной кислоты, основные из которых - гидрофобные свойства, новая фармакологическая активность и новые фармакологические свойства.

В отличие от ранее известного действия литиевых солей (хлорид лития, сукцинат лития и др.) на ДНК-содержащие вирусы, где противовирусным действием обладает ион лития, в предлагаемом изобретении литиевая соль акридонуксусной кислоты эффективна не только в отношении ДНК-, но и РНК-содержащих вирусов, причем это действие распространяется не только на вирусы группы герпеса, оспы, аденовирусов, относящиеся к ДНК-геномным вирусам, но и на такие вирусы, как вирусы гриппа А и В, японского энцефалита и венесуэльского энцефаломиелита, вируса лихорадки долины Рифт, относящиеся к РНК-геномным вирусам.

В отличие от прототипа предлагаемое средство эффективно не только при парентеральном пути введения - в отношении тех же вирусов и, возможно, других внутриклеточных паразитов (бактерий, простейших, эукариотических микроорганизмов). Внутриклеточный цикл развития патогена в чувствительном организме хозяина является определяющим в прогнозе ингибирующего действия предлагаемого лекарственного средства.

Относительно низкая токсичность (терапевтический индекс более 10) и низкая цена лекарственного средства позволят широко использовать его как собственно препарат для лечения и профилактики инфекционных болезней, а также в комбинации с другими лекарствами для усиления действия последних, снижения или устранения резистентности микроорганизма к ним и т.д. Возможно также комбинированное применение заявляемого средства с целью снижения до субтоксических концентраций другого лекарства с сохранением его эффективности за счет синергидного действия с литиевым производным.

Полученное новое средство обладает иммуномодулирующими свойствами (воздействие на клеточные и гуморальные факторы иммунитета ин виво), а, с другой стороны, расширенным спектром противовирусной активности за счет введения в молекулу иона лития вместо иона натрия.

Структурная формула препарата, доказанная известными методами, приведена на чертеже, а физико-химические константы - в разделе сущность изобретения.

Синтезированный препарат назван "виролит". По-нашему мнению, он является индуктором синтеза и секреции цитокинов, главным образом провоспалительных цитокинов, активирующих функциональную активность натуральных киллеров и макрофагов, тем самым обеспечивая литическое действие на клетки, несущие чужеродную генетическую информацию или иные эффекторные функции специфических цитоксических CD8 (+)Т клеток, обеспечивая нецитолитическую инактивацию и элиминацию патогена из инфицированной клетки. С другой стороны, препарат проявляет ингибирующее действие на репродукцию вирусов, обладая способностью специфического взаимодействия с вирусной мишенью. Молекулярная масса виролита - 269,19. Синтез субстанции осуществляется с использованием практически не токсичных компонентов, широко используемых в медицине. Свойства не изменяются при хранении в защищенном от света месте при комнатной температуре в течение 1,5 года (срок наблюдения). Острая токсичность для мышей составляет ЛД₅₀ - 713 мг/кг при внутрибрюшном введении, не вызывает аллергических осложнений и побочных реакций. Противопоказаний к применению в опытах на лабораторных животных не установлено, побочные действия при применении не выявлены. Может применяться совместно с антибиотиками, сульфаниламидами, гормонами, сывороточными белками. Применение виролита не препятствует использованию традиционной патогенетической и симптоматической терапии. Эффективные терапевтические дозы для мышей составляют 50-100 мг/кг массы тела, терапевтический индекс - более 10. После внутримышечного введения виролит быстро проникает в кровь, достигая максимального уровня через 2 часа в неизмененном виде. С белками плазмы не связывается. Из организма выводится в неизмененном виде с мочой и через 24 часа в крови и моче не обнаруживается.

Препарат обладает широким спектром биологического действия: высокоактивен в отношении вирусов гриппа А и Б, вируса венесуэльского энцефаломиелита, вируса лихорадки долины Рифт, вирусов простого герпеса, возможно, возбудителей некоторых инвазивных инфекций, вызываемых бактериями, грибами и простейшими. Предполагается канцеростатическое действие препарата.

Пример 1. Синтез литиевой соли N-акридонуксусной кислоты.

Десять граммов N-акридонуксусной кислоты вносят в круглодонную колбу емкостью 250 мл, содержащую 100 мл 40%-ного водного изопропанола. К полученной смеси добавляют 25 мл теплого раствора, содержащего 1,42 г LiOH1/2Н₂O в Н₂О (1,08 экв). Суспензию кипятят в течение 40 минут на масляной бане с обратным холодильником. Охлаждают до 50^oС, фильтруют, промывают спиртом (изопропиловым), высушивают в вакууме при 90-95^oС. Получают 9,2 г литиевой соли акридонуксусной кислоты.

Пример 2. Синтез литиевой соли N-акридонуксусной кислоты.

Десять граммов этилового эфира N-акридонуксусной кислоты вносят в круглодонную колбу объемом, равным 250 мл, снабженную обратным холодильником, добавляют 1,35 г LiOH1/2Н₂O в 100 мл H₂O. Смесь кипятят в течение 1,3 часа (80 минут), охлаждают до 5-7^oС, фильтруют, промывают 350 этанола, высушивают в вакууме при 90-95^oС. Получают 7,9 г литиевой соли N-акридонуксусной кислоты.

Далее приводим результаты испытаний свойств заявляемого препарата (виролит). В качестве препарата сравнения выступает прототип изобретения - натриевая соль N-акридонуксусной кислоты (неовир).

Пример 3. Противовирусное действие виролита в отношении вируса герпеса простого 1 серотипа (ВПГ-1, штамм L2) на культуре клеток (Vero).

Наименьшее разведение препарата, вызывающее дегенерацию клеток, принимали за минимальную токсическую дозу (МТД). В опыте использовали градиент концентраций, начиная с 1/2 МТД.

Испытание профилактического действия препарата.

Из пробирок с монослоем клеток удаляли ростовую среду и вносили в опытные пробирки по 0,8 мл поддерживающей среды, содержащей 1/2 МТД препарата, в контрольные - по 0,8 мл поддерживающей среды. Через 2 часа контакта при 37^oС в опытные и контрольные пробирки вносили по 0,2 мл ВПГ-1, в дозах 10, 100, 1000 ИТД (инфицирующая тканевая доза). На каждое разведение вируса (в опыте и контроле) использовали по 9 пробирок. Пробирки встряхивали и помещали в термостат при 37^oС.

Дополнительные контроли:

а) контроль культуры - в 4 пробирки вносили по 1,0 мл поддерживающей среды,

б) контроль препарата - в 4 пробирки вносили по 0,8 мл рабочего разведения препарата и через 2 часа контакта при 37^oС добавляли по 0,2 мл поддерживающей среды.

Испытание лечебного действия препарата.

Из пробирок с монослоем клеток удаляли среду роста и вносили по 0,2 мл ВПГ-1, содержащие 10, 100, 1000 ИТД вируса. Контакт вируса с клетками - 1,5 часа при 37^oС. После этого вирус из пробирок удаляли, инфицированные культуры тщательно отмывали раствором Хэнкса, затем в опытные ряды добавляли по 1,0 мл поддерживающей среды, содержащей 1/2 МТД препарата, в контрольные - по 1,0 мл поддерживающей среды. На каждое разведение вируса использовали по 9 пробирок. Результаты оценивали по подавлению ЦПД (цито-патическое действие) вируса (ежедневное микроскопирование в течение 3-х дней) и по подавлению продукции вируса в культуре клеток в присутствии рабочей дозы препарата. Для этого на 1, 2 и 3 сутки после инфицирования из контрольных и опытных культур, инфицированных различными дозами вируса, изымали по 3 пробирки опытных и контрольных культур.

Вируссодержащую жидкость из каждых 3-х пробирок объединяли и титровали вирус на культуре клеток Vero с коэффициентом разведения 10 по общепринятой схеме. Учет результатов проводили по ЦПД на 5-е сутки инкубирования.

Результаты. Ежедневное микроскопирование тканевой культуры в течение 3 суток показало, что токсичность виролита в концентрации 20 и 40 мМ проявлялась в сморщивании клеток и полном разрушении клеточного пласта на 1-2 сутки наблюдения. В основном опыте использовали 1/2 МТД, т.е. рабочее разведение виролита составило 10 мМ. Препарат сравнения - прототип использовали в той же исходной концентрации - 10 мМ.

Антивирусная активность виролита и препарата сравнения.

а) Профилактическое действие препаратов. Профилактическая эффективность препаратов, определяемая по разнице инфекционной активности в опытных и контрольных культурах, в условиях различной множественности инфицирования на 1, 2 и 3 сутки представлена в табл. 1 и 2. Эффективное ингибирующее действие виролита (снижение титра вируса от 2,5 до 6,0 lg) отмечено на всех сроках наблюдения и после инфицирования различными дозами вируса (от 10 до 1000 ИТД). Соответственно этому наблюдалось значительное подавление ЦПД в опытных культурах по сравнению с контрольными. Эффективность препарата сравнения была значительно ниже и колебалась от 1,5 до 2,5 lg.

б) Лечебное действие препаратов. Аналогичные результаты ингибирующего действия виролита при введении его в рабочей дозе после инфицирования тканевой культуры ВПГ-1 представлены в табл.3 и 4. При множественности инфекций 1000, 100 и 10 ИТД выраженное ингибирующее действие виролита отмечено на всех сроках наблюдения: ингибирование репродукции вируса наблюдалось от 2,0-2,5 lg на 1-е сутки до 4,0-4,5 lg на 2-3 сутки. Ингибирующее действие препарата-прототипа было значительно ниже и колебалось от 1,5 до 3,0 lg в зависимости от срока наблюдения и множественности инфекции.

Показана также достаточно высокая степень ингибирования репродукции вируса при применении более низких концентраций виролита (5 мМ и 2,5 мМ): подавление реподукции ВПГ-1 при профилактическом действии на культуру клеток составило 4,3 и 3,5 lg соответственно, при лечебном - 3,0 и 2,7 lg (табл.5).

Таким образом, представленные результаты свидетельствуют об эффективности противовирусного действия виролита в отношении ВПГ-1 и, в частности, его профилактической и лечебной активности. Установлен также четкий дозозависимый эффект препарата. Высокая степень ингибирования вирусной репродукции позволяет отнести его к высокоактивным препаратам противогерпетического действия. Полученные предварительные данные на основании скрининга острой токсичности и специфической противовирусной активности, а также установленного терапевтического индекса (ЛД₅₀/ЕД₅₀), который составляет величину более 10, позволяют считать предлагаемый препарат потенциально перспективным для применения в медицине.

Пример 4. Вирусингибирующая активность виролита в культуре переживающей хорионаллантоисной оболочки на модели вируса гриппа типа A (H3N2) и В.

Материалы и методы. Вирус: аллантоисная культура вирусов гриппа типа А (А/Миссисип 1/85/H3N2) и В (В/Яманаши/166/98). Препараты: виролит в виде 10, 5 и 2,5 мМ растворов и препарат сравнения - прототип в тех же концентрациях. Культуру переживающей хорионаллантоисной оболочки (ХАО) готовили по стандартной методике, контакт препаратов с культурой ХАО до введения вируса составлял 2 часа.

Результаты. При аппликации в культуру клеток ХАО 10 мМ раствора виролита во всех экспериментах зафиксировано снижение ЭИД₅₀ (50%-ная эмбриональная инфицирующая доза) вируса гриппа типа А на 2,0-4,5 lg. При использовании 5,0 мМ раствора снижение ЭИД₅₀ колебалось в пределах 1,5-3,5 lg и при 2,5 мМ растворе инфекционная активность вируса снижалась на 1,0-1,25 lg. В среднем снижение составляло соответственно 3,4-2,1-1,1 lg (табл.6).

Препарат сравнения - прототип (неовир) проявлял несколько менее выраженную вирусингибирующую активность. Выявленный широкий диапозон колебаний вирусингибирующей активности в пределах одной концентрации мог быть обусловлен обнаруженной в некоторых опытах неспецифической агглютинацией эритроцитов в контроле препаратов (препараты в культуре ХАО без вируса), что приводило к занижению показателей их активности.

При использовании для инфицирования клеток культуры ХАО вируса гриппа В (В/Яманаши/166/98) снижение инфекционной активности при аппликации упомянутых препаратов зафиксировано при всех использованных концентрациях. Выраженное вирусингибирующее действие виролита и неовира в отношении вируса гриппа типа В выявлено даже при концентрации растворов 2,5 мМ (табл.7).

Таким образом, в экспериментах на культуре ХАО выявлено выраженное вирусингибирующее действие виролита в концентрации 10,0-5,0 мМ в отношении вирусов гриппа A (H3N2) и В.

Пример 5. Сравнительная оценка противовирусной активности виролита и прототипа на экспериментальных моделях актуальной вирусной инфекции.

Материалы и методы. Исследование выполнено на базе НИИ военной медицины МО РФ.

Животные: белые инбредные мыши-самцы массой 16-22 г, поставлены из питомника "Рапполово" РАМН (Ленинградская область).

Вирусы: возбудитель лихорадки долины Рифт - штамм 8-87 из музея НИИ военной медицины; инокулят - суспензия головного мозга новорожденных мышат, предварительно зараженных вирусом; возбудитель венесуэльского энцефаломиелита лошадей (ВЭЛ) - штамм "Тринидад" из музея НИИ военной медицины; вирус для заражения накапливали в желточных мешках развивающихся куриных эмбрионов; возбудитель герпеса простого 1 типа (ВПГ-1) - штамм Л-1 из музея НИИ военной медицины, для заражения животных накапливали в головном мозгу новорожденных мышат.

Препараты: препарат сравнения - прототип, субстанция; новый препарат - виролит, субстанция. Препараты вводили подкожно, а виролит дополнительно и через рот.

Оценка эффективности препаратов: по уровню выживаемости, длительности жизни (суток) животных опытных и контрольных групп.

Результаты исследования. В предварительных экспериментах экспресс-методом по В. Б. Прозоровскому с соавторами на белых мышах определена острая токсичность нового препарата виролита при внутрибрюшинном введении. Вводимая доза содержалась в 0,5 мл. Препарат разводили на физиологическом растворе с небольшим добавлением ДМСО. Было установлено, что при данном пути введения ЛД₅₀ для белых мышей составляет 71386 мг/кг.

Венесуэльский энцефаломиелит лошадей

Опыт 1: подкожное введение виролита. Сравнивали активность виролита и препарата сравнения - прототипа при подкожном двукратном введении в дозе 100 мг/кг по схеме: за 4 часа до заражения и через 48 часов после заражения вирусом. Результаты представлены в табл.8, из которой следует, что виролит после заражения белых мышей летальными дозами вируса ВЭЛ оказывает высокое защитное действие.

Опыт 2: введение виролита per os. Схема введения - 2-кратное введение per os в разовой дозе 200 мг/кг за 4 ч до заражения и через 48 ч после заражения вирусом ВЭЛ. Результаты представлены в табл.9, из которой следует, что назначение виролита оказало положительный защитный эффект и способствовало повышению устойчивости на 20% животных к возбудителю ВЭЛ. Противовирусная активность виролита и прототипа при подкожном введении в дозе 100 мг/кг на модели ВЭЛ у белых мышей приведена в табл.10.

Лихорадка долины Рифт (ЛДР)

Опыт 1. Сравнительная оценка противовирусного действия виролита и препарата сравнения - прототипа. Препарат вводили по двум схемам. 1-я схема: однократное п/к введение за 4 часа до заражения и через 48 часов после заражения. Как следует из табл.10, виролит обладает защитной эффективностью против возбудителя ЛДР, повышая выживаемость экспериментальных животных и увеличивая продолжительность их жизни. Выявлен дозозависимый эффект.

В следующем эксперименте показано, что виролит оказывал защитный эффект как при подкожном, так и при пероральном введении (табл.11).

Герпес

За 4 часа до заражения животным опытных групп вводили исследуемые препараты (подкожно или через рот), за 2 часа до заражения всем животным опытных или контрольных групп вводили суспензию гидрокортизона (0,1 мл или 125 мг/кг внутримышечно). Заражение производили внутрибрюшинно, наблюдение осуществляли в течение 14 суток. Из полученных данных (табл.12) можно заключить, что при генерализованной герпетической инфекции у белых мышей виролит оказывает защитное действие. Менее выраженный защитный противогерпетический эффект в сравнении с эффективностью в отношении РНК-содержащих вирусов объясняется, по-видимому, неадекватноситью самой модели смертельной инфекции, поскольку она инициировалась в результате воздействия иммунодепрессанта. Бесспорно, эти данные следует рассматривать как предварительные.

Пример 6. Изучение влияния виролита на иммунную систему - на клеточный и гуморальный иммунитет.

Для оценки влияния виролита на клеточный и гуморальный иммунитет можно использовать, например, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) - для оценки влияния на клеточный иммунитет и титр циркулирующих (сывороточных) антител - для оценки влияния на гуморальный иммунитет. Для этих целей используют стандартные методики, рекомендованные для подобных исследований Фармакологическим комитетом МЗ РФ.

Иммуномодулирующая активность литиевой соли 10-акридинуксусной кислоты подтверждается следующим примером.

Неинбредных белых мышей массой 21-23 г, поставленных из питомника "Рапполово" РАМН, иммунизировали свежими эритроцитами барана. Эритроциты отмывали от консерванта 0,9% раствором хлористого натрия, для иммунизации животных использовали суспензию отмытых эритроцитов в 0,9%-ном растворе хлористого натрия в объеме 0,5 мл. Эритроциты вводили белым мышам внутрибрюшинно в дозе 510⁵ клеток. Раствор виролита в дозе 100 мг/кг вводили однократно подкожно во время иммунизации.

Постановка ГЗТ. Тест ставили через 14 суток после иммунизации животных. Для этого животным опытных и контрольных групп под мозольный бугорок 4-го пальца правой задней конечности вводили 0,05 мл суспензии эритроцитов в дозе 510⁸ клеток, а в контрольную конечность - такой же объем 0,9%-ного раствора хлористого натрия. Учет реакции осуществляли через 24 часа, измеряя массу стоп задних конечностей, для чего у животных после забоя отрезали лапы на уровне голеностопного сустава и взвешивали их на аналитических весах. Индекс реакции вычисляли по формуле

,

где ИР - индекс реакции, h_о - вес опытных образцов, h_k - вес контрольных образцов.

В качестве контролей служили мыши, получившие инъекцию эритроцитов без препарата виролит, - К₁, K₂-интактные мыши, не иммунизированные, которым в день постановки ГЗТ вводили разрешающую дозу эритроцитов.

Определение уровня антител. Антитела к эритроцитам барана (ЭБ) определяли путем титрования сывороток крови общепринятым методом. Сыворотки разводили в объеме 0,5 мл в пластиковых планшетах, эритроциты использовали в концентрации 1%. Учет реакции - через 16-18 часов инкубации (1 час в термостате при 37^oС, а затем при комнатной температуре) по 4-крестовой системе, положительной считали реакцию на 2+.

Постановка реакции. Экспериментальные животные были разбиты на группы по 8-10 мышей.

Полученные результаты представлены в табл.13.

Как следует из этих данных, виролит повышал реакцию ГЗТ белых мышей к эритроцитам барана: в первом опыте - примерно на 35%, во втором - на 17% по сравнению с контролем.

Влияние виролита на гуморальное звено иммунитета оценивали по проценту сероконверсий и титру антител к эритроцитам барана. Антитела определяли через 14 суток после иммунизации животных. Полученные данные приведены в табл. 14.

Таким образом, виролит обладает иммуномодулирующими свойствами, оказывая влияние на клеточное и гуморальное звенья иммунитета. При одновременном введении с иммуногеном - эритроцитами барана- виролит в дозе 100 мг/кг стимулировал клеточный иммунный ответ белых мышей, повышая индексы реакции ГЗТ на 17-35%, в то же время оказывая депрессивный эффект на гуморальный иммунитет. Более точная оценка иммуномодулирующих свойств виролита может быть получена при использовании линейных оппозитно реагирующих мышей.

Разработанный новый оригинальный препарат виролит обладает широким спектром противовирусного действия, высоко эффективен против как РНК-, так и ДНК- содержащих вирусов, что показано на конкретных моделях репродукции вирусов на различных биологических системах. Наряду с ингибированием репродукции вирусов виролит обладает способностью к активации специфических и неспецифических факторов, функционально направленных на лизис инфицированных или трансформированных клеток и элиминацию патогена. Не менее важна активность разработанного препарата как при парантеральном, так и при энтеральном пути введения, что открывает широкие возможности создания различных лекарственных форм.