применение натуральных активных веществ в косметических или терапевтических композициях

Формула изобретения

1. Косметическая композиция, включающая гидролизованные белки дрожжей в качестве активного вещества и по меньшей мере один приемлемый носитель, отличающаяся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получены путем экзогенного ферментативного гидролиза, и/или кислотного гидролиза, и/или щелочного гидролиза из оболочек дрожжей.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены путем ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина, трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы K, генеазы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы и/или их смеси.

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены из оболочек дрожжей, принадлежащих роду Saccharomyces, роду Kluyveromyces, роду Torula, роду Candida, роду Hansenula, роду Pichia, и/или их смесей, предпочтительно роду Saccharomyces, более предпочтительно виду Saccharomyces cerevisiae.

4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа.

5. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа.

6. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что отношение АА/ОА гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

7. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит по меньшей мере одну добавку, выбранную из консервантов, хелатирующих агентов, красителей, фильтра ультрафиолетового излучения, регулятора pH, улучшителей консистенции, отдушки и антиоксиданта, и/или по меньшей мере один эксципиент, выбранный из гидрофильных соединений, гидрофобных соединений и поверхностно-активных веществ.

8. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что (а) гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа; и

(б) гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа.

9. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что (а) гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа; и

(б) гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа; и

(в) отношение АА/ОА гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

10. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что (а) гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа; и

(б) гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа; и

(в) отношение АА/ОА гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%; и

(г) гидролизованные белки дрожжей получены путем ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина, трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы K, генеазы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы и/или их смеси.

11. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что (а) гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа; и

(б) отношение АА/ОА гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

12. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что (а) гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа; и (б) отношение АА/ОА гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

13. Способ получения косметической композиции по п.1, включающий следующие стадии:

гидролиз белка оболочек дрожжей путем экзогенного ферментативного гидролиза, и/или кислотного гидролиза, и/или щелочного гидролиза для получения гидролизованных белков дрожжей, и смешивание указанных гидролизованных белков дрожжей с подходящим косметическим носителем.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены путем ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина, трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы K, генеазы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы и/или их смесей.

15. Применение гидролизованных белков дрожжей, полученных из оболочек дрожжей, в качестве активного вещества в косметических композициях по п.1.

16. Способ косметической терапии, включающий контактирование кожи, и/или отростков кожи, и/или слизистых оболочек с композицией по любому из пп.1-10, или композиции, которая получена способом по п.13 или 14.

17. Способ косметической терапии по п.16, предназначенный для увлажнения кожи, и/или слизистых оболочек, и/или отростков кожи, и/или для улучшения репарации кожи, и/или слизистых оболочек, и/или отростков кожи, и/или для увеличения прочности дермы, и/или для борьбы против старения кожи, и/или для регуляции секреции кожного жира, и/или для уменьшения количества перхоти.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачей настоящего изобретения является применение натуральных активных веществ в косметических и терапевтических композициях, где данные вещества представляют собой гидролизованные белки дрожжей, полученные из нерастворимой фракции дрожжей.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В течение уже нескольких лет существует интерес к косметическим и терапевтическим применениям гидролизатов белков.

Гидролизаты белков могут иметь различное происхождение: они могут быть животного происхождения, в частности из рыбы, растительного происхождения, или их источником могут быть грибы, например дрожжи.

Наличие или отсутствие биологической активности у гидролизатов белков зависит, в частности, от природы исходных белков.

Так, гидролиз белков рыб позволил получить гидролизованные белки, обладающие определенной пространственной структурой, распознаваемой некоторыми рецепторами. При этом специально отмечалась активность гормонального и опиоидного типа (Legal and Stenberg, Biofutur, No. 179, 1998, стр.61-63).

В некоторых источниках из предшествующего уровня техники упоминается применение гидролизатов белка дрожжей в косметических композициях. Эти гидролизаты белков дрожжей получают либо путем гидролиза целых дрожжевых клеток, либо путем гидролиза растворимой фракции дрожжей (содержимого цитоплазмы).

Так, в заявке на патент ЕР 0695801 описано косметическое применение белковой композиции, полученной посредством:

- стадии термической обработки дрожжей с последующей обработкой литическими ферментами клеточной стенки дрожжей для получения смеси,

- стадии очистки и выделения белка из указанной смеси для получения дрожжевых белков, и

- стадии гидролиза указанных белков.

Литические ферменты, использующиеся согласно данному документу, представляют собой ферменты, атакующие гликаны и дестабилизирующие стенку и мембрану. Таким образом, такая композиция содержит гидролизованные белки, полученные из растворимой фракции дрожжей В заявке на патент ЕР 0126364 описано косметическое применение не включающего гистамины, не вызывающего лихорадку, стерильного активного продукта, полученного способом, включающим следующие стадии:

- плазмолиз дрожжей и гомогенизация при температуре менее 0°C,

- обработка протеолитическим ферментом в течение по меньшей мере 70 ч,

- обработка диаминоксидазой для удаления веществ, содержащих гистамин,

- фракционное осаждение со смесью спиртов для удаления остаточных белков.

Таким образом, конечный продукт содержит гидролизованные белки дрожжей, полученные в результате гидролиза белков целых дрожжей. Осуществление такого способа получения имеет много недостатков, в частности, заключающихся в продолжительности процесса, большом количестве стадий и необходимости работы в стерильных условиях.

В заявке на патент ЕР 0237398 описано косметическое применение биологически активных полипептидов, полученных способом, включающим следующие стадии:

- механическое раздробление натуральных веществ, например, дрожжей, для получения водного гомогената,

- ферментативный гидролиз с помощью гидролизующего агента, состоящего из -химотрипсина и, возможно, трипсина, для получения гидролизата,

- отделение полипептидной фракции определенной молекулярной массы.

Таким образом, полипептидная фракция происходит из белка, полученного из целых дрожжей. В частности, полипептидная фракция имеет молекулярную массу менее 10000 Да и более 1000 Да.

Потребители все чаще требуют "натуральные" продукты, как в пищевой, так и в косметической и фармацевтической отраслях.

В косметической и фармацевтической отраслях есть действительная потребность в создании новых натуральных активных веществ, которые:

- имеют улучшенные косметические или терапевтические качества, такие как увлажняющий эффект, антивозрастной эффект и/или укрепляющий эффект, и/или

- превосходную стабильность с течением времени, и/или

- получение которых является однородным, и/или способ получения которых легко воплотить в промышленных масштабах.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачей настоящего изобретения является создание натуральных действующих веществ, пригодных в косметической или терапевтической области.

Также задачей изобретения является создание новых терапевтических или косметических композиций.

Другая задача изобретения относится к способу косметической обработки кожи и/или отростков кожи и/или слизистых оболочек или к указанным веществам для их терапевтического применения.

Настоящее изобретение, в частности, основано на открытии новой категории гидролизованных белков с улучшенной косметической и/или терапевтической активностью, и/или превосходной стабильностью с течением времени, и/или получение которых является однородным и/или способ получения которых легко воплотить в промышленных масштабах.

Задачей настоящего изобретения является косметическая или терапевтическая композиция, включающая гидролизованные белки дрожжей в качестве активного вещества, отличающаяся тем, что указанные гидролизованые белки дрожжей получены из нерастворимой фракции дрожжей.

Согласно одному воплощению, гидролизованные белки дрожжей получают посредством ферментативного гидролиза и/или кислотного гидролиза и/или щелочного гидролиза.

Согласно одному воплощению, гидролизованные белки дрожжей получают посредством ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере одной пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина, трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы K, генеразы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы и/или их смеси.

Согласно одному воплощению, гидролизованные белки дрожжей получают из таких дрожжей, как дрожжи рода Saccharomyces, Kluyveromyces, Torula, Candida, Hansenula, Pichia, и/или их смеси, предспочтительно Saccharomyces, более предпочтительно Saccharomyces cerevisiae.

Согласно одному воплощению, гидролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа.

Согласно одному воплощению, гидролизованные белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизвоанных белков дрожжей, имеющих молекулярную массу менее 1 кДа.

Согласно одному воплощению, отношение АА/АО гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

Согласно одному воплощению, композиция содержит от 0,001% до 20% гндролизованных белков дрожжей, более предпочтительно от 0,001% до 15% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,001% до 10% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 3% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 2% гидролизованных белков дрожжей.

Согласно одному воплощению, композиция содержит по меньшей мере одну добавку, выбранную из консервантов, хелатирующих агентов, красителей, фильтра ультрафиолетового излучения, регулятора pH, улучшителей консистенции, отдушки или антиоксиданта, и/или по меньшей мере один эксципиент, выбранный из гидрофильных соединений, гидрофобных соединений и поверхностно-активных веществ,

Задачей настоящего изобретения также является способ изготовления косметической или терапевтической композиции, включающий следующие стадии:

- гидролиз белка нерастворимой фракции дрожжей для получения гидролизованных белков дрожжей, и

- смешивание указанных гидролизованных белков дрожжей с подходящим терапевтическим или косметическим носителем.

Задачей настоящего изобретения также является применение гидролизованных белков дрожжей, полученных из нерастворимой фракции дрожжей, в качестве активного вещества в косметических и/или терапевтических композициях.

Другая задача настоящего изобретения относится к способу косметической терапии, включающему стадию приведения в контакт с кожей и/или отростками кожи и/или слизистыми оболочками композиции согласно настоящему изобретению, или композиции, которая может быть получена способом согласно настоящему изобретению.

Еще одна задача настоящего изобретения также относится к гидролизованным белкам дрожжей, полученным из нерастворимой дрожжевой фракции, для применения их в качестве лекарственного средства, предпочтительно для терапии и/или профилактики патологической сухости кожи, патологических проблем с заживлением и/или патологической гиперсебореи, и/или акне.

КРАТКОЕ ОПИСНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг.1 представлено, в процентном соотношении, распределение по размерам (в кДа) гидролизованных белков дрожжей согласно настоящему изобретению (белая гистограмма) и гидролизованных белков дрожжей, полученных путем гидролиза целых клеток дрожжей (заштрихованная гистограмма).

На Фиг.2 представлен профиль молекулярной массы для гидролизованных белков дрожжей согласно изобретению (черная кривая), и для гидролизованных белков дрожжей, полученных путем гидролиза целых клеток (серая кривая). На оси ординат указана абсорбция, зарегистрированная при 214 нм, а на оси абсцисс - время удержания в минутах.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВОПЛОЩЕНИЙ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачей настоящего изобретения является косметическая или терапевтическая композиция, включающая гидролизованные белки дрожжей в качестве активного вещества.

В частности, задачей настоящего изобретения является косметическая или терапевтическая композиция, включающая гидролизованные белки дрожжей в качестве активного вещества, отличающаяся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получены из нерастворимой фракции дрожжей.

Гидролизованные белки дрожжей также называются "дрожжевые пептоны" или "белки дрожжей, полученные путем гидролиза"

Термин "косметическая композиция" в данном документе обозначает композицию, предназначенную для того, чтобы оказывать косметический эффект.

Согласно предпочтительному воплощению настоящего изобретения, косметический эффект достигается путем местного нанесения композиций согласно настоящему изобретению.

Термин "местный" обозначает, что композиция является активной в том месте, на которое ее наносят на кожу, отростки кожи и/или слизистые оболочки. Согласно изобретению, действие композиции может одновременно быть направлено на поверхностные слои эпидермиса и/или дерму.

Термин "отросток кожи" означает, в общем, все, что покрывает кожу, в частности, волосы, ногти, волоски, ресницы.

Термин "кожа" включает кожу головы.

Термин "кожа" включает дерму и эпидермис, а также поверхностные слои эпидермиса.

Термин "слизистые оболочки" или термин "влажная эпителиальная ткань" обозначает оболочки, которые покрывают открытые полости со стороны внешней среды, в частности, слизистые оболочки носа, глаза, и половых органов, а также слизистые оболочки влагалища.

В другом предпочтительном воплощении косметический эффект достигается при пероральном введении.

Термин "терапевтическая композиция" обозначает композицию, предназначенную для оказания терапевтического эффекта.

Предпочтительная терапевтическая композиция согласно настоящему изобретению представляет собой дерматологическую композицию.

В частности, терапевтический эффект достигается посредством местного нанесения терапевтических композиций согласно настоящему изобретению. Таким образом, задача настоящего изобретения относится также к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, предназначенной для нанесения на кожу или отростки кожи, и/или слизистые оболочки.

Другая предпочтительная композиция согласно настоящему изобретению представляет собой композицию, подходящую для перорального введения.

Термины "активное вещество", или "активный компонент" или "активный ингредиент" здесь обозначают вещество, отвечающее за косметический эффект в косметической композиции или отвечающее за терапевтичесекий эффект в терапевтической композиции.

Косметическая композиция согласно изобретению включает по меньшей мере соединение в качестве активного вещества и приемлемый косметический носитель.

Терапевтическая композиция согласно изобретению включает по меньшей мере соединение в качестве активного вещества и приемлемый терапевтический носитель.

Гидролизованные белки дрожжей согласно изобретению получают из нерастворимой фракции дрожжей.

Термин "нерастворимая фракция" обозначает оболочки дрожжей, то есть, одновременно покровы и плазматическую мембрану дрожжей.

Нерастворимая фракция составляет примерно от 20 до 30 масс.% сухого вещества дрожжевых клеток.

Термин "растворимая фракция" означает содержимое дрожжей, отличное от оболочек дрожжей.

Оболочки дрожжей имеют значительное содержание углеводов (примерно 50%). Белки составляют примерно от 10 до 20% оболочек дрожжей, в частности, от 13 до 18% оболочек дрожжей (по отношению к массе сухого вещества).

Нерастворимую фракцию могут получать путем термической обработки дрожжей в течение от 1 до 3 ч при температуре в диапазоне между 70°С и 90°С с последующим разделением растворимой и нерастворимой фракции, в частности, путем центрифугирования. Таким образом удаляют растворимую фракцию и выделяют нерастворимую.

Гидролизованнные белки дрожжей согласно настоящему изобретению получают путем гидролиза белков, полученных из нерастворимой фракции дрожжей.

Гидролизованные белки дрожжей могут подвергать определенным видам подходящей обработки (например, отделение белков посредством центрифугирования, концентрирование, фильтрация или обработка активированным углем).

Таким образом, в отличие от обычных гидролизатов белка, полученных в результате аутолиза или ферментативного гидролиза содержимого всей клетки или только ее растворимой части, гидролизованнные белки дрожжей согласно настоящему изобретению получают из конкретной фракции клетки. Белки нерастворимой фракции дрожжей имеют иную природу, чем белки, присутствующие в растворимой фракции дрожжей. Белки нерастворимой фракции дрожжей, в частности, включают маннопротеины, которые не имеют клеточной фракции.

Помимо этого, белки нерастворимой фракции являются по существу натнвными белками, не подвергавшимися гидролизу, в то время как ббльшая часть белков растворимой фракции уже является прошедшей полный или частичный гидролиз. Таким образом, результат гидролиза белков, полученных из целых дрожжей, в меньшей степени поддается контролю вследствие гетерогенного статуса исходных белков.

Помимо этого, способ согласно настоящему изобретению позволяет делать белки нерастворимой фракции более доступными для гидролиза, среди прочего, благодаря значительному концентрированию указанных белков, по сравнению с гидролизом, проводящимся на целых дрожжах.

Таким образом, гидролизоваиные дрожжевые белки согласно настоящему изобретению характеризуются определенной природой белков, определенным (гомогенным) профилем распределения массы белков, и/или определенным отношением АА/АО (с очень малой долей свободных аминокислот), а именно, в частности, меньшим или равным 35%, в частности, меньшим или равным 30%, в частности, меньшим или равным 25%, в частности, меньшим или равным 20%.

Термин "отношение АА/АО" обозначает массовое отношение количества азота в аминокислотах (в процентах) к общему количеству азота (в процентах). Отношение АА/АО характеризует степень деградации белка, в частности, степень гидролиза белков дрожжей.

Неожиданно оказалось, что, будучи гидролизованным, этот новый источник белков имеет косметическую и терапевтическую активность.

Гидролизованные белки дрожжей представлены в сухом виде, в частности, в виде порошка, или в виде раствора, в частности, в виде водного раствора.

Задача настоящего изобретения относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, отличающейся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены путем ферментативного гидролиза, и/или кислотного гидролиза и/или щелочного гидролиза.

Кислотный гидролиз представляет собой гидролиз, выполненный в кислой среде, предпочтительно при нагревании, например, путем использования сильной кислоты, такой как соляная кислота, серная кислота, фосфоновая кислота и/или азотная кислота.

В частности, кислотный гидролиз разлагает триптофан и превращает аминокислоты глутамип и аспарагин, соответственно, в глутамат и аспартат.

Щелочной гидролиз представляет собой гидролиз, выполненный в щелочной среде, например, с использованием сильного основания, такого как гидроксид натрия или гндроксид калия.

В частности, щелочной гидролиз разлагает аминокислоты серии, треонин и цистеин.

Ферментативный гидролиз белков дрожжей осуществляют с помощью гидролаз.

Согласно предпочтительному воплощению, гидролизованные белки дрожжей согласно изобретению получают путем ферментативного гидролиза.

Ферментативный гидролиз осуществляют, добавляя по меньшей мере один экзогенный фермент. Предпочтительно, эндогенные ферменты дрожжей предварительно деактивируют, например, путем термической обработки.

В частности, согласно настоящему изобретению, гидролазы представляют собой гидролазы, действующие на пептидные связи. Такие гидролазы, называемые пептидазы, или протеазы, или протеолитические ферменты, имеют номер ЕС 3.4 в классификации ЕС. Пептидазы катализируют гидролитическое расщепление связи C-N.

В частности, согласно настоящему изобретению, гидролазы выбраны из экзопептидаз, в частности, аминопептидаз, дипептидаз, дипептидил-пептидаз, трипептидил-пептидаз, пептидил-дипептидаз, карбоксипептидаз серинового типа, карбоксипептидаз цистеинового типа, металлокарбоксипептидаз, омега-пептидаз, и эндопептидаз (или протеиназ), в частности, сериновой эндопептидазы, цистеиновой эндопептидазы, аспарагиновой эндопептидазы и металлоэндопептидазы.

Ферментативный гидролиз можно сочетать с гидролизом дисульфидных мостиков, проводящимся с помощью восстанавливающих агентов, в частности, 2-меркаптоэтанола или дитиотреитола, ТСЕР (трис (2-карбоксиэтил) фосфина).

В частности, задачей настоящего изобретения является терапевтическая или косметическая композиция, как определено выше, отличающаяся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены путем ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере одной пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина. трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы К, генеразы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы, алкалазы®, нейтразы® и/или их смеси.

Специалист в области техники легко определит условия применения ферментов (в частности, их концентрацию, длительность гидролиза, температуру).

В качестве примера, гидролиз могут осуществлять, добавляя протеазы в течение по меньшей мере 18 ч при температуре в диапазоне 45°C и 55°C.

Предпочтительно, солюбилизированную часть, содержащую гидролизованные белки дрожжей, затем выделяют с помощью центрифугирования, после чего ее, возможно, концентрируют и затем сушат.

Предпочтительный фермент согласно изобретению выбран из папаина, трипсина, пепсина, алкалазы®, нейтразы®.

Согласно конкретному воплощению, ферментативный гидролиз осуществляют с помощью по меньшей мере двух различных ферментов, в частности, с помощью по меньшей мере трех различных ферментов, в частности, с помощью по меньшей мере трех различных ферментов.

В качестве примера, гидролиз могут осуществлять с помощью смеси папаина и алкалазы®.

В частности, настоящее изобретение относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, отличающейся тем, что гидролизованные белки дрожжей получены из дрожжей рода Saccharomyces, Khiyveromyces, Torula, Candida, Hansenula, Pichia, и/или их смеси, предпочтительно Saccharomyces, наиболее предпочтительно Saccharomyces cerevisiae,

Если гидролизованные белки дрожжей получены из дрожжей рода Hansenula, это предпочтительно дрожжи Hansenula anomala.

Если гидролизованные белки дрожжей получены из дрожжей рода Pichia, это предпочтительно дрожжи Pichia pastoris.

Предпочтительно гидролизованные белки дрожжей согласно настоящему изобретению получены из дрожжей Saccharomyces, более предпочтительно Saccharomyces cerevisiae.

Согласно настоящему изобретению, предпочтительные терапевтические и косметические композиции содержат в качестве активного вещества гидролизованные белки дрожжей, полученные из дрожжей того же рода, а предпочтительно, той же разновидности и того же вида дрожжей.

Согласно другому воплощению, косметические композиции согласно настоящему изобретению включают в качестве активного вещества гидролизованные белки дрожжей, полученные из дрожжей одного и того же рода, но по меньшей мере двух различных видов, предпочтительно по меньшей мере трех различных видов.

Согласно другому воплощению, косметические и терапевтические композиции согласно настоящему изобретению содержат в качестве активного вещества гидролизованные белки дрожжей, полученные из дрожжей, принадлежащих по меньшей мере двум разным родам, в частности, по меньшей мере трем различным родам.

Настоящее изобретение, в частности, относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, отличающейся тем, что гндролизованные белки дрожжей содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно 45%, более предпочтительно 50%, еще более предпочтительно 55%, еще более предпочтительно 60%, белков дрожжей с молекулярной массой, находящейся в диапазоне между 1 и 5 кДа.

Настоящее изобретение относится, в частности, косметической или терапевтической композиции, как определено выше, отличающейся тем, что гидролизованпые белки дрожжей содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35%, гидролизованпых белков дрожжей с молекулярной массой менее 1 кДа.

Настоящее изобретение, в частности, относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, отличающейся тем, что отношение АА/ОА для гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%.

Термин "отношение АА/ОА" обозначает массовое отношение количества азота в аминокислотах (в процентах) к общему количеству азота (в процентах). Отношение АА/АО характеризует степень деградации белка, в частности, степень гидролиза дрожжевых белков

Согласно настоящему изобретению, предпочтительная композиция содержит гадролизованные белки дрожжей, где по меньшей мере 55% указанных белков имеют молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа, и/или не более 42% указанных белков имеют молекулярную массу менее 1 кДа, и/или отношение АА/ОА является меньшим или равным 35%.

Согласно настоящему изобретению, другая предпочтительная композиция содержит гадролизованные белки дрожжей, где по меньшей мере 60% указанных белков имеют молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа и/или не более 37% указанных белков имеют молекулярную массу менее 1 кДа, и/или отношение АА/ОА является меньшим или равным 35%.

Согласно предпочтительному воплощению, настоящее изобретение относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, где гадролизованные белки дрожжей получены из продукта Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer®.

Продукт Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer® включает гидолизованные белки дрожжей, полученные из нерастворимой фракции Saccharomyces cerevisiae. Гидролизованные белки продукта Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer® включают по большей части гадролизованные дрожжевые белки, имеющие молекулярную массу, большую или равную 1 кДа и меньшую 5 кДа (примерно 60%), другие гадролизованные белки по существу имеют молекулярную массу, меньшую 1 кДа (примерно 32%) (см. Пример 1).

Гидролизованные белки продукта Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer® характеризуются отношением АА/ОА, находящимся в диапазоне между 15 и 28%.

Согласно настоящему изобретению, композиция может содержать продукт Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer® или гадролизованные белки дрожжей, полученные путем дополнительных стадий экстракции и/или очистки указанного продукта.

Согласно изобретению, композиция может содержать гидролизованные белки дрожжей, соответствующие конкретной гидролизовашюй белковой фракции, изолированной из продукта Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А.

Согласно изобретению, предпочтительная косметичесая или терапевтическая композиции содержит продукт Гидролизованный Дрожжевой Пептон-А Springer®.

Настоящее изобретение относится к косметической или терапевтической композиции как определено выше, содержащей от 0,001% до 20% гидролизованных белков дрожжей, более предпочтительно от 0,001% до 15% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,001% до 10% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 3% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 2% гидролизованных белков дрожжей.

Проценты указаны как масс.%.

Настоящее изобретение относится, в частности, к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, включающей от 0,01% до 20% гидролизованных белков дрожжей, в частности от 0,01% до 15% гидролизованных белков дрожжей, в частности от 0,01% to 10% гидролизованных белков дрожжей.

Задачей настоящего изобретения, более конкретно, является косметическая или терапевтическая композиция, как определено выше, содержащая от 0,01% до 3% гндролизованных белков дрожжей, в частности, от 0,01% до 2% гидролизованных белков дрожжей, в частности от 0,01% to 1% гидролизованных белков дрожжей.

Согласно изобретению, приемлемый косметический или терапевтический носитель содержит предпочтительно по меньшей мере соединение, выступающее в качестве добавки, и по меньшей мере соединение, выступающее в качестве эксципиента, поскольку такое соединение можно использовать многими способами,

Настоящее изобретение относится к косметической или терапевтической композиции, как описано выше, отличающейся тем, что она содержит по меньшей мере одну добавку, выбранную из консервантов, хелатирующих агентов, красителей, фильтра ультрафиолетового излучения, регулятора pH, улучшителей консистенции, отдушки или антиоксиданта, и по меньшей мере один эксципиент, выбранный из гидрофильных соединений, гидрофобных соединений и поверхностно-активных соединений.

Термин "добавка" обозначает агент, который в косметических и терапевтических композициях играет роль консерванта, хелатирующего агента, красителя, фильтра ультрафиолетового излучения (позволяющего защищать сырье), регулятора pH (кислоты или основания), улучшителя консистенции, отдушки и/или антиоксиданта.

Термин "сырье, которое требуется защищать", означает любое соединение в косметической или терапевтической композиции, которое может разлагаться светом.

Термин "эксципнент" означает гидрофильные соединения, составляющие водную фазу, гидрофобные соединения, составляющие жирную фазу, или поверхностно-активные вещества.

Поверхностно-активные вещества представляют собой амфифильные молекулы, способные удерживать вместе две среды, в норме несмешивающиеся, снижая межфазное повернхпостное натяжение.

Поверхностно-активные вещества являются ионными (анионными, катионными или амфотерными) или неионными.

Согласно настоящему изобретению приводится следующий список соединений, которые могут использоваться в качестве косметического и терапевтического носителя. Этот список приводится в качестве примера и не должен рассматриваться как исчерпывающий.

Согласно настоящему изобретению, консерванты, использующиеся в композициях, в частности, выбирают из бутилированного гидрокситолуола (БГТ), бутилированного гндроксианизола (БГА), пропил галлата, октила, додецила, -токоферола, -токоферол ацетата, аскорбиновой кислоты, оскорбил пальмитата, экстрактов розмарина, экстрактов Gingko biloba и оризанола.

Согласно настоящему изобретению, хелатирующие агенты, используемые в композиции, в частности выбирают из лимонной кислоты, циклодекстрипа, дипатриевой соли ЭДТК (этилендиаминтераускусной кислоты), пентетата пентанатрия, фитиновой кислоты, цитрата натрия, фитата натрия и ЭДТК или пирофосфата тетранатрия.

Согласно настоящему изобретению, красители, используемые в композициях, в частности, выбирают из агентов, имеющих обозначение показателя цветности (Color Index).

Согласно настоящему изобретению, фильтры ультрафиолетового излучения в композиции согласно изобретению, в частности, выбирают из бензофенона-3 (оксибензона), бензофенона-4 (сулисобепзона), дрометриозола, трисилоксана, бензилсалицилата, авобензола, октилметоксицинпамата (октиноксата), этилгексилсалицилата (октисалата) и диоксида титана.

Согласно настоящему изобретению, регуляторы pH (кислота или основание), используемые в композиции, в частности выбирают из аминометилпропанола, лимонной кислоты, фумаровой кислоты, ортофосфорной кислоты, себациновой кислоты (октандикарбоновой кислоты), ацетата натрия, бикарбоната натрия, цитрата натрия, гидроксида натрия, винной кислоты, пирофосфата тетранатрия или триеэтиламина (ТЭА).

Термин "улучшитель консистенции" означает агент, способный увеличивать вязкость водных фаз, в которых он диспергирован, причем данное увеличение выгодным образом является значительным.

В зависимости от обстоятельств, улучшитель консистенции может представлять собой загуститель и/или агент гелеобразования.

Термин "загуститель" обозначает вещество, позволяющее получить вязкий раствор без образования трехмерной сети, в частности, в отличие от агентов гелеобразования.

Улучшители консистенции, в частности, выбирают из агар-агара (агар), альгинатов, каррагенатов, гуаровой камеди, камеди тары, камеди рожкового дерева, камедь карайи, ксантановой камеди, геля алоэ, глицерина крахмала, хитозана, оксида кремния, силикатов, в частности бетонита, гекторита, монтмориллонита, силиката алюминия, силиката магния, произвродных целлюлозы, в частности, гидроксиэтилцеллюлозы, гидпроксипропилцеллюлохы, метилгидроксипропилцеллюлозы или гипромеллозы, акриловых и виниловых полимеров, - в частности карбомеров, цианакрилатных полимеров, поливинилпирродидона (ПВП), поливиниловых спиртов полиэтиленгликолей и поликватерниумов.

Согласно изобретению, отдушки, используемые в композициях, в частности выбирают из эфирных масел, композиций синтетического происхождения, солюбплнзированных отдушек.

Согласно изобретению, антиоксиданты, используемые в композиции, в частности, выбирают из аскорбилпальмитата, бутилированного гидрокситолуола (БГТ), токоферола (витамина Е), и токоферола ацетата.

Гидрофильные соединения водной фазы, в частности, выбирают из воды, спиртов и многоатомных спиртов.

Согласно изобретению, спирты, которые могут использовать в композициях, представляют собой, в частности, этанол, пропанол, изопропанол, бензиловый спирт и гексиловый спирт.

Согласно изобретению, многоатомные спирты, которые могут использовать в композициях, представляют собой, в частности, глицерин, пропитленгликоль, бутиленгликоль, гексиленгликоль и сорбит.

Гидрофобные соединения жирной фазы, в частности, выбирают из углеводородов, жирных кислот, жирных спиртов, сложных эфиров, глицеридов, церидов и фосфатидов.

Углеводороды, в частности выбирают из цепей, содержащих углерод и водород, незамещенный и замещенный, линейный, разветвленный или циклический, в частности, углеродные цепи, содержащие от 22 до 35 атомов углерода, и, в частности, следующих углеводородов: парафины, парафиновые масла, вазелин, сквалан, кремнийорганические соединения и пергидросквалены.

Согласно изобретению, кремнийорганические соединения, которые могут использовать в композициях, в частности представляют собой летучие кремнийорганические масла, нелетучие кремнийорганические масла, модифицированные кремннйорганические масла, кремнийорганические воски, кремнийорганические камеди, кремнийорганические эмульсии, кремнийоргапические микроэмульсии. Крменийорганические соединения в частности выбирают из полиоксановых кремиийорганических соединений, полидиметилсилоксанов или диметиконов, фенилтриметилсилоксанов или фенилметиконов, циклических полидиметилсилоксанов или циклометиконов, димитикон-кополиолов, аминодиметиконов, и диметиконпропил PG-бетаина.

Согласно изобретению, жирные кислоты, используемые в композициях, в частности представляют собой насыщенные жирные кислоты и ненасыщенные жирные кислоты, в частности, мононенасыщенные, диненасыщенные, триненасыщенные жирные кислоты. Жирные кислоты, в частности, выбирают из стеариновой кислоты, пальмитиновой кислоты, лауриновой кислоты, миристиновой кислоты, олеиновой кислоты, линолевой кислота и линоленовой кислоты.

Жирные спирты, в частности, выбрирают из длинноцепочечных насыщенных жирных спиртов - цетилового спирта или гексадеканола, стеарилового спирта, цетостеарилового спирта, короткоцепочечных ненасыщенных жирных спиртов, -олеинового спирта, октилдодеканола и тетрагидрофурфурилового спирта.

Сложные эфиры, в частности, выбирают из жидких жирных сложных эфиров с линейной цепью - в частности, изопропилпальмитата, миристилстеарата, октилпальмитата, изостеарилизостеарата, бутиларахидоната, изопропилланолата, изопропилмиристата, глицерилмоностеарата, эфиров многоатомных спиртов - в частности, глицерина, этилена, этиленгликоля, пропиленгликоля, диетиленгликоля, и сложных эфиров оксиэтилена.

Глицериды представляют собой, в частности, диглицериды и триглиценриды. Глицериды, в частности, выбирают из растительных масел, в частности, оливкового масла, арахисового масла, миндального масла, масла лесного ореха, подсолнечного масла, кунжутного масла, соевого масла, масла маиса, орехового масла, масла из виноградных косточек, масла бурачника, масла энотеры, масла муската штамбовой розы, масла киви, масла авокадо, масла семян злаков, масла австралийского ореха, касторового масла, макового масла, масла семени хлопчатника, масла из косточек абрикоса, кокосового масла, масла копры, масла монои, масла ядра кокосового ореха, масла картаме, масла крабового дерева, масла семян тыква, акульего жира, норкового жира; масляных жиров - в частности, кокосового масла, масла из семян дерева ши, масла копры, масла бабассу, пальмового масла, масла таману, модифицированного растительного масла, синтетического масла, жиров, и талового жира.

Согласно изобретению, цериды, используемые в композициях, в частности, выбирают из стеридов, каротин-церидов, липохрома, восков, в частности, спермы кита или спермацета, ланолина, производных ланолина - ланолинового воска, жидкого ланолина, гидрогенированного ланолина, этоксилированного ланолина, ланолиновых спиртов, ацетилировнаных ланолиновых спиртов, этоксилированпых ланолиновых спиртов, ланолиновых кислот, изопропил ланолата; масла жожоба, озокерита, церезина, карнаубского воска и пчелиного воска.

Согласно изобретению, поверхностно активные вещества представляют собой, в частности, эмульгаторы, смачивающие агенты, детергенты и/или вспениватели.

Катионные поверхностно активные вещества, в частности, выбирают из четвертичных солей аммония, жирных солей первичных аминов, четвертичных аммониевых крахмалов, алкнлпиридиний хлоридов, алкиламмоний сахаринатов, диэтилэтилентриаминовых крахмалов или катионных смол.

Неионные поверхностно активные вещества, в частности, выбирают из сложных эфиров глицерина, сложных эфиров этиленгликоля, сложных эфиров сорбитана, простых эфиров жирных спиртов, липофильных сложных эфиров сахаров, сложных полиглицериновых эфиров, сополимеров пропиленоксида и этиленоксида, сапонинов, этоксилированных жирных спиртов, простых эфиров глюкозы, простого эфира этилегликоля или полиэтнленгликоля, простого эфира этиленгликоля или полиглицерина, оксиэтиленированного простого эфира сорбитана, оксиэтиленированных алкилфенолов, амипоксидов, самоэмульгирующихся оснований (сложных эфиров полиэтиленгликоля), производных метилгликозидов, моноэтаноламинов, производных моноэтаноламидов, днэтаноламидов или производных диэтаноламидов.

Анионные поверхностно-активные вещества, в частности, выбирают из щелочных омыляющих веществ, аминных омыляющих веществ, алкилсаркозинатов, алкилсульфоацетаов, алкилтауратов, алкилсульфатов натрия и калия, простых эфиров алкилсульфатов натрия и калия, парафинов, олефинсульфонатов, изотионатов, аклкилфосфатов натрия, простых эфиров аклкилфосфатов натрия.

Амфотерные или цвиттер-ионные поверхностно-активные вещества, в частности, выбирают из алкилбетаинов, алкиламидобетаинов, алкиламино моно- и дипропионатов, производных имидазолов, таких как кокоамфодиацетат, и лауроамфодиацетата натрия.

Согласно изобретению, косметическая и терапевтическая композиция может содержать, в дополнение к гидролизованным белкам дрожжей, как определено выше, другие компоненты дрожжей.

Согласно предпочтительному воплощению, косметическая и терапевтическая композиция согласно настоящему изобретению, не содержит каких либо других компонентов дрожжей кроме гидроллизованных белков дрожжей согласно настоящему изобретению

Настоящее изобретение относится, в частности, к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, в которой активное вещество обладает увлажняющим эффектом и/или репарационным эффектом, и/или укрепляющим эффектом, и/или антивозрастным эффектом, и/или эффектом против себореи, и/или эффектом против акне, и/или эффектом против перхоти, и/или эффектом восстановления волос, и/или эффектом в отношении блеска и/или гладкости и/или роста волос.

Термин "увлажняющий эффект" обозначает уменьшение испарения кожи вследствие окклюзнвных явлений или вследствие фиксации воды на активном веществе, увлажняющего или гигроскопического эффекта активного вещества и/или свойства фиксации на глицеридах "межклеточного цемента".

Увлажняющий эффект композиции согласно изобретению проявляется, в частности, на уровне эпидермиса как активациея синтеза липидов, в частности, фосфолипидов и нейтральных липидов, и синтеза гиалуроновой кислоты.

Увлажняющий эффект композиции согласно изобретению может быть продемонстрирован in vitro при анализе синтеза липидов и гиалуроновой кислоты кератиноцитами, как описано в Примере 3.

Увлажняющий эффект композиции согласно изобретению также приводит к эффекту, направленному против перхоти, проявляющемуся при нанесении композиции на кожу головы.

Эффект против перхоти может быть продемонстрирован уменьшением количества перхоти у субъекта, подвергавшегося терапии композицией согласно настоящему изобретению, например, как описано в Примере 5.

Термины "репарационный эффект" и "заживляющий эффект" обозначают эффект в отношении репарации и/или восстановления эпидермиса и/или дермы. В частности, эффект репарации является полезным для репарации повреждений и/или ожогов.

В частности, репарационный эффект гидролизованных белков дрожжей связан с активацией синтеза гиалуроновой кислоты. Репарационный эффект может быть продемонстрирован количеством высвобождающейся гиалуроновой кислоты и анализом ее экспрессии в восстанавливающемся человеческом эпидермисе, как описано в Примере 3.

Термин "укрепляющий эффект" обозначает разглаживающий и тонизирующий эффект в отношении кожи, обеспечивающийся ее механической подложкой, в частности, волокнами коллагена и эластина.

Согласно изобретению, композиция позволяет, в частности, улучшить сжатие коллагеновой сети, активировать синтез эластина и созревание коллагена.

Коллагеновая сеть соответствует совокупности коллагеновых волокон и фибрилл.

Согласно изобретению, укрепляющий эффект композиции может быть показан т vitro, как описано в Примере 3.

Термин "антивозрастной эффект" озбоначает одновременно превентивный эффект, задерживающий появление признаков старения кожи, и немедленно проявляющийся эффект уменьшения признаков старения. Согласно настоящему изобретению, композиция, в частности, проявляет антивозрастной эффект, связанный с возрастом, и также может проявлять эффект, направленный против фотоиндуцированного старения.

Видимые признаки старения кожи, связанные с возрастом, представляют собой, в частности, сухость кожи, появление морщинок и морщин, снижение прочности кожи, а также потерю гибкости кожи.

Старение, связанное с возрастом, также приводит к снижению количества коллагена, его растворимости и синтеза, снижению количества эластина и микрофибрилл, снижению количества глнкозамингликанов и инактивации фибробластов

Согласно изобретению, антивозрастной эффект композиции приводит, в частности, к увеличению пролиферации фибробластов дермиса и их активности в отношении синтеза коллагена, и гликозамингликанов.

Антнвозрастной эффект, связанный с возрастом, может быть продемонстрирован in vitro увеличением синтеза коллагена и гликозамингликанов фибробластами дермиса, как описано в Примере 3.

В частности, признаками фотоиндуцированного старения являются появление глубоких морщин, утолщенная и грубая кожа.

В частности, фотоиндуцированное старение кожи приводит к уменьшению количества и растворимости коллагена, увеличению количества эластина и микрофибрилл, увеличению количества гликозамингликанов, увеличению количества воспалительных клеток.

Настоящее изобретение относится также к косметической или терапевтической композиции, как описано выше, отличающейся тем, что активное вещество имеет репарационный эффект.

Термин "эффект против себореи" обозначает эффект, регулирующий секрецию сальных желез, регулирующий адсорбцию кожного жира и/или оказывающий вяжущее действие, позволяющее закрыть кожные поры.

Согласно изобретению, композиция позволяет уменьшить секрецию кожного жира.

В частности, согласно изобретению, композиция позволяет регулировать адсорбцию кожного жира путем адсорбции липидов.

Таким образом, согласно изобретению, композиция особенно полезна в контексте гиперсебореи лица и/или гиперсебореи кожи головы, приводящей к так называемой "жирности" волос.

Согласно изобретению, косметическая композиция имеет антисеборейный эффект, полезный для жирной кожи и/или в случае тенденции к акне.

Термин "эффект против акне" обозначает благоприятный эффект в отношении акне.

В частности, согласно изобретению, благоприятный эффект терпапевтической композиции в отношении акне связан с регуляцией секреции кожного жира.

Эффект против себореи и эффект против акне могут быть продемонстрированы, как описано в Примере 4. Например, согласно изобретению, композицию наносят на кожу или кожу головы субъектов, демонстрирующих гиперсеборею на уровне, соответственно, кожи и кожи головы. Затем определяют секрецию кожного жира, нанося пластырь, абсорбирующий кожный жир, на часть тела, подвергающуюся терапии. Пластырь затем анализируют для того, чтобы количественно охарактеризовать секрецию кожного жира. Секрецию после терапии сравнивают с секрецией у того же субъекта перед терапией.

Термин "восстанавливающий эффект" обозначает достижение эффекта гладкости волос. Самый внешний слой волоса, называемый кутикулой, образован перекрывающимися чешуйками. Восстанавливающий эффект приводит к гладкости рельефа кутикулы, в то время как поврежденный волос имеет грубый рельеф.

В частности, согласно изобретению, композиция оказывает тонизирующий эффект в отношении волос.

Восстанавливающий эффект в отношении волос может быть продемонстрирован измерением топографии волос, как описано в Примере 5.

Термин "эффект блеска" означает способность волос отражать свет и придавать волосам эффект "сияния".

Термин "эффект мягкости" означает чувство мягкости волос при касании.

Термин 'эффект в отношении роста волос" означает улучшение динамики роста волос.

Эффект в отношении роста волос может быть продемонстрирован в тестах, измеряющих динамику роста волос, как описано в Примере 5.

Настоящее изобретение относится, в частности, к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, в форме раствора (одна фаза), дисперсии (в частности, эмульсии, суспензии, пене или аэрозолю), геля, масла, карандаша, порошка, влажной салфетки, маски или пластыря.

Термин "эмульсия" обозначает все типы эмульсий, в частности, макроэмульсии, микроэмульсии, наноэмульсии, простые эмульсии и множественные эмульсии.

Эмульсии представляют собой дисперсии жидкости в другой жидкости, где эти две жидкости являются несмешивающимися. Эмульсии содержат липофильную и гидрофильную фазы и эмульгатор.

В частности, эмульсии включают молочко, лосьоны, крема и т.д.

Наноэмульсии представляют собой дисперсии, в которых диаметр диспергированных частиц является меньшим, чем 1000 нм, в частности, от 10 нм до 100 нм.

Микроэмульсии представляют собой дисперсии, в которых диаметр диспергированных частиц является меньшим, чем 1000 мкм, в частности, от 10 мкм до 100 мкм.

Паноэмульсии и микроэмульсии представляют собой прозрачные среды.

В частности, согласно изобретению, косметическая или терапевтическая композиция подходит для нанесения на кожу или волосы.

В частности, согласно изобретению, композиция для нанесения на волосы представлена в форме шампуней, лосьонов, масок или спреев.

Настоящее изобретение относится к косметической или терапевтической композиции, как определено выше, в форме таблетки, пластинки, драже, капсулы, гранулы, пилюли, порошка, сиропа, суспензий для питья и эмульсии для питья.

Согласно изобретению, косметическая или терапевтическая композиция может содержать в качестве активного вещества гидролизованные белки дрожжей и по меньшей мере одно дополнительное активное вещество.

В качестве примера, дополнительное(ые) актнвное(ые) вещество(а) может иметь увлажняющий эффект и/или укрепляющий эффект, и/или антивозрастной эффект, и/или эффект против себореи, и/или эффект, восстанавливающий волосы, и/или эффект в отношении блеска, и/или мягкости, и/или роста волос, и/или репарации, и/или похудения, и/или очищения, и/или антиоксидантный, и/или депигментирующий, и/или защищающими сосуды, и/или противовоспалительный, и/или антибактериальный, и/или противогрибковый эффект.

Согласно изобретению, в предпочтительной косметической композиции по меньшей мере одно дополнительное косметическое вещество имеет такой же косметический эффект, как гидролизованные белки дрожжей.

Согласно изобретению, в предпочтительной терапевтической композиции по меньшей мере одно дополнительное активное вещество имеет такой же терапевтический эффект, как гидролизованные белки дрожжей.

Поскольку гидролизованные белки дрожжей и по меньшей мере одно дополнительное активное вещество имеют один и тот же косметический или терапевтический эффект, получаемый эффект предпочтительно является синергетическим.

Таким образом, согласно изобретению, гидролизованные белки дрожжей представляют собой новый натуральный агент, в особенности пригодный для изготовления косметических и терапевтических композиций.

Настоящее изобретение также относится к способу изготовления косметической или терапевтической композиции, состоящему из следующих стадий:

- гидролиз белков нерастворимой фракции дрожжей для получения гидролизованных белков дрожжей, и

- смешивание указанных гидролизованных белков дрожжей с подходящим косметическим или терапевтическим носителем.

В частности, приемлемый косметический или терапевтический носитель выбинрают из указанных выше добавок и/или эксципиентов.

Настоящее изобретение также относится к способу получения, как определено выше, косметической или терапевтической композиции, состоящему из следующих стадий:

- гидролиз белка нерастворимой фракции дрожжей для получения гидролизованных белков дрожжей, и

- смешивание указанных гидролизованных белков дрожжей по меньшей мере с дополнительным активным веществом и приемлемым косметическим или терапевтическим носителем.

Настоящее изобретение также относится к применению гидролизованных белков дрожжей, полученных из нерастворимой фракции дрожжей, в качестве активного вещества в косметических и/или терапевтических композициях.

Настоящее изобретение, в частности, относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получают из нерастворимой фракции дрожжей.

Настоящее изобретение, в частности, относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получают путем ферментативного гидролиза и/или кислотного гидролиза и/или щелочного гидролиза.

Настоящее изобретение относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получают путем ферментативного гидролиза с помощью по меньшей мере пептидазы, предпочтительно выбранной из папаина, трипсина, химотрипсина, субтилизина, пепсина, термолизина, проназы, флавастацина, энтерокиназы, протеазы фактора Ха, фурина, бромелайна, протеиназы K, генеразы I, термитазы, карбоксипептидазы А, карбоксипептидазы В, коллагеназы, алкалазы®, нейтразы® и/или их смеси.

Настоящее изобретение, в частности, относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки дрожжей получают из дрожжей рода Saccharomyces, Kluyveromyces, Torula, Candida, Hansenula, Pichia и/или их смесей, предспочтительно Saccharomyces, более предпочтительно Saccharomyces cerevisiae.

Настоящее изобретение также относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки содержат по меньшей мере 40%, предпочтительно по меньшей мере 45%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере 55%, еще более предпочтительно по меньшей мере 60% белков дрожжей, имеющих молекулярную массу в диапазоне между 1 и 5 кДа.

Настоящее изобретение также относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки содержат не более 55%, предпочтительно не более 50%, более предпочтительно не более 45%, еще более предпочтительно не более 40%, еще более предпочтительно не более 35% гидролизованных белков дрожжей, имеющих молекулярную массу менее 1 кДа.

Настоящее изобретение также относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что отношение АА/АО указанных гидролизованных белков дрожжей является меньшим или равным 35%, в частности меньшим или равным 30%, в частности меньшим или равным 25%, в частности меньшим или равным 20%

Настоящее изобретение, в частности, относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанные гидролизованные белки присутствуют в указанной терапевтической или косметической композиции с содержанием от 0,001% до 20% гидролизованных белков дрожжей, более предпочтительно от 0,001% до 15% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,001% до 10% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 3% гидролизованных белков дрожжей, еще более предпочтительно от 0,01% до 2% гидролизованных белков дрожжей.

Настоящее изобретение также относится к применению, как определено выше, отличающемуся тем, что указанная косметическая или терапевтическая композиция содержит по меньшей мере одну добавку, выбранную из консеравнтов, хелатирующих агентов, красителей, фильтра ультрафиолетового излучения, регулятора рН, улучшителей консистенции, отдушки или антиоксиданта, и/или по меньшей мере один эксципиент, выбранный из гидрофильных соединений, гидрофобных соединений и поверхностно-активных веществ.

Настоящее изобретение относится к способу косметической терапии, включающему стадию приведения в контакт с кожей и/или отростками кожи и/или слизистыми оболочками косметической композиции, как определено выше, или которая может быть получена способом, определенным выше.

Термин "контакт" далее также будет называться "нанесением".

Способ терапии может включать одно или более нанесение в день, предпочтительно от одного до трех нанесений в день.

Частота нанесений косметической композиции может быть снижена с течением времени.

Способ косметической терапии может состоять из короткого периода терапии в течение одной или более недель, или долговременной терапии в течение нескольких лет. Способ терапии также может состоять из нескольких повторных курсов терапии каждый год или несколько раз в год.

Настоящее изобретение относится, в частности, к способу косметической терапии, как определено выше, предназначенному для увлажнения кожи и/или слизистых оболочек, и/или отростков кожи, и/или улучшения репарации кожи и/или слизистых оболочек, и/или отростков кожи, и/или улучшения прочности дермы, и/или для борьбы со старением кожи, и/или регуляции секреции кожного жира, и/или уменьшения количества перхоти, и/или восстановления волос, и/или улучшения роста волос.

Увлажнение эпидермиса направлено одновременно на восстановление качества кожного барьера, а именно, непроницаемости, ограничивающей испарение воды, и создание благоприятных условий для присутствия молекул, захватывающих воду, например, гликозаминогликанов, в частности, гиалуроновой кислоты.

Согласно изобретению, способ косметической терапии особенно полезен при терапии и/или профилактике сухости кожи или перхоти.

Репарация кожи и/или слизистых оболочек и/или отростков кожи имеет цель способствовать физиологическому заживлению, в частности, путем активации синтеза гиалуроновой кислоты.

Подтяжка кожи имеет цель поддерживать и усиливать плотность кожи, в частности, путем активации синтеза эластина, синтеза и созревания коллагена и сжатия коллагеновой решетки.

Борьба со старением кожи относится к задержке и/или уменьшению признаков старения.

Согласно предпочтительному воплощению изобретения, терапия, предназначенная для борьбы с признаками старения кожи, связана с увлажнением кожи.

Согласно изобретению, способ косметической терапии предназначен для субъектов от 20 лет, в частности от 30 лет, в частности от 40 лет, в частности от 50 лет.

В частности, регуляция секреции кожного жира относится к уменьшению секреции кожного жира.

Согласно изобретению, способ косметической терапии является особенно полезным при терапии себореи или жирных типов кожи, в частности, жирных типов кожи, называемых "проблемная кожа" или "кожа с тенденцией к акне" и/или для волос, называемых "жирные".

Репарация волос состоит в восстановлении волос, в частности, путем разглаживания волосяной кутикулы и/или восстановления блеска и/или мягкости волос

Согласно изобретению, способ косметической терапии особенно пригоден для субъекта с поврежденными волосами, в частности, вследствие солнечного облучения, контакта с морем, слишком частного мытья, окраски, расчесывания, химической завивки и т.д.

Улучшение роста волос имеет цель увеличить кинтерику роста волос, также называемую рост волос.

Согласно изобретению, способ косметической терапии, в частности, подходит для субъекта с малой скоростью роста волос и/или в случае нормальной потери волос.

В частности, нормальной потерей волос называют вызванное андрогенами облысение, эндокринное облысение или облысение, связанное с возрастом.

Согласно предпочтительному воплощению, способ косметической терапии согласно изобретению подходит для применения на лице, в частности, по контуру глаз, носу, лбу, подбородке, телу, в частности, на руках, ногах, спине и/или коже головы.

Настоящее изобретение также относится к гидролизованным белкам дрожжей, полученным из нерастворимой фракции дрожжей, для применения в медицине, в частности, для терапии и/или профилактики патологической сухости кожи, патологических проблем с заживлением и/или патологической гиперсебореи, и/или акне.

В частности, настоящее изобретение относится к гидролизованным белкам дрожжей, как определено выше, или полученным с помощью определенного выше способа получения для терапии и/или профилактики патологической сухости кожи, патологических проблем с заживлением и/или патологической гиперсебореи, и/или акне и/или патологической потери волос. Настоящее изобретение направлено на их применение для изготовления фармацевтической композиции, как определено выше.

Согласно изобретению, терапевтическая композиция особенно полезна для терапии патологической сухости кожи, также называемой ксероз, в частности, в случае ихтиоза, сухости кожи, связанной с экземой или псориазом, или патологической сухости кожи головы, в частности, связанной с перхотью.

Согласно изобретению, терапевтическая композиция в особенности пригодна для терапии патологического заживления, например, гипертрофического заживления, келоидного заживления, и стягивающего рубцевания и/или задержек заживления, в частности, задержек, связанных с плохим обеззараживанием, а также задержек сосудистого и нейрологического происхождения.

Согласно изобретению, терапевтическая композиция также пригодна для терапии патологической гиперсебореи, с частности, связанной с нарушениями гормональной регуляции, в частности, у подростков, беременных женщин и женщин в менопаузе

Согласно настоящему изобретению, терапевтические композиции также пригодны для терапии патологического акне, в частности, юношеского акне, ассоциированного с гпперсебореей.

Согласно изобретению, терапевтическая композиция пригодна для терапии патологической потери волос, также называемой пелада, являющейся результатом эмоционального потрясения, расстройства щитовидной железы и/или терапии, при которой облысение является побочным эффектом (например, терапии рака).

В частности, применение, как определено выше, направлено на местное нанесение указанной терапевтической композиции на кожу и/или отростки кожи и/или слизистые оболочки.

Применение, как определено выше, может состоять из одного или более нанесений в день, предпочтительно, от одного до трех нанесений в день.

Частота нанесения терапевтической композиции может снижаться во время терапии.

Терапия может состоять из неотложной терапии, от нескольких дней до нескольких недель, и длительной терапии в течение нескольких лет. Терапия также может состоять из повторных курсов, повторяющихся каждый год или несколько раз в год.

Настоящее изобретение также относится к применению косметической композиции или терапевтической композиции, как определено выше, направленному на терапию побочных эффектов или нежелательных проявлений при других видах терапии.

В частности, такие побочные эффекты или нежелательные проявления приводят к сухости кожи, например, связанной с экземой. ПРИМЕРЫ:

Ниже изобретение иллюстрируется следующими неограничивающими примерами:

Пример 1: Получение гидролизовапных белков дрожжей согласно настоящему изобретению

Оборудование и способы

Водную суспензию дрожжевых клеток Saccbaromyces cerevisiae, имеющую содержание сухого вещества от 12 до 30 масс.%, подвергают термической обработке в течение от 1 до 3 часов при температуре от 70°C до 90°C (для деактивации эндогенных клеточных ферментов). Такая термическая обработка вызывает плазмолиз дрожжей, после чего становится возможным отделить нерастворимую фракцию от растворимой, поскольку она ограничена растворимой фракцией. Отделение солюбилизированной фракции от нерастворимой фракции проводят путем нескольких последовательных стадий центрифугирования и промывания водой (по меньшей мере 2 последовательные стадии, предпочтительно по меньшей мере 3).

Выделенную нерастворимую фракцию, имеющую содержание сухого вещества от 12 до 25 масс.% далее подвергают гидролизу, добавляя по меньшей мере одну экзогенную протеазу в течение 18 ч при температуре от 45°С да 65°С. Например, протеаза представляет собой папаин, используемый в концентрации от 0,01 масс.% до 0,5 масс.%.

Солюбилизированную гидролизованную фракцию отделяют от гидролизованной нерастворимой фракции с помощью нескольких последовательных стадий центрифугирования и промывания водой (по меньшей мере 2 последовательные стадии, предпочтительно по меньшей мере 3).

Солюбилизированную гидролизованную фракцию концентрируют посредством по меньшей мере одной стадии выпаривания для получения концентрированной фракции.

Концентрированную фракцию, возможно, очищают посредством фильтрации или осветления перед проведением распылительной сушки.

Солюбилизированная гидролизованная и, возможно, концентрированная, и/или очищенная и/или высушенная фракция, полученная таким образом, соответствует гидролизованным белкам дрожжей согласно настоящему изобретению.

Молекулярную массу и профиль молекулярной массы гидролизованных белков дрожжей определяют путем жидкой гель-проникающей хроматографии с детекцией ультрафиолетового излучения при 215 нм с помощью колонки для гель-фильтрации SEPHADEX Pharmacia HR 10/30 Калибровку осуществляют с помощью белковых стандартов известного размера, которые позволяют калибровать систему и оценивать молекулярную массу смеси.

Отношение АА/ОА определяют, измеряя общее количество азота и количество азота в аминных группах.

Общее количество азота (ОА) определяют согласно методу Кьельдаля, установленному на основании "официальных способов анализа диетических продуктов" (JO от 3 ноября 1979).

Азот в аминогруппах (АА) определяют посредством образования производных с 1-2 нафтохинон-4-сульфонатом (НХС) (Н. NEHRING, A. HOCK, improved method for determination aminonitrogen, Pharmazie, 1971, 26, 616-619).

Результаты

Согласно изобретению, гидролизованные белки дрожжей, полученные из концентрированной солюбилизировнаной фракции, очищают и сушат, после чего помечают буквой "А". Они имеют слегка бежевый цвет.

Таблица 1 и Фиг.1 демонстрируют молекулярно-массовое распределение гидролизованных белков дрожжей согласно изобретению (А) в сравнении с таковым для гидролизованных белков дрожжей (В), полученных в результате гидролиза целой клетки дрожжей.

Гидролизованные белки дрожжей (В) получают путем термической обработки суспензии клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae в течение от 1 до 3 ч при температуре между 70°C и 90°C с последующим добавлением по меньшей мере одной экзогенной протеазы в течение по меньшей мере 18 ч. при температуре от 45°C до 65°C. Например, протеаза представляет собой папаин, применяющийся в концентрации от 0,01 масс.% до 0,5 масс.%. Солюбилизированную гидролизованную фракцию отделяют от гидролизованоой нерастворимой фракции посредством нескольких последовательных стадий центрифугирования и промывания водой (по меньшей мере 2 последовательные стадии, предпочтительно по меньшей мере 3). Солюбилизированную гидролизованную фракцию концентрируют посредством по меньшей мере одной стадии непрерывного или порционного испарения с получением концентрированной фракции. Концентрированную фракцию, возможно, очищают путем фильтрации или осветлепия перед распылительной сушкой с получением гидролизованных белков целых дрожжей (В).

Согласно изобретению, большая часть гидролизованных белков дрожжей представляет собой белки с молекулярной массой, большей или равной 1 кДа и меньшей или равной 5 кДа (64,2%), другие гидролизованные белки имеют молекулярную массу, по существу меньшую 1 кДа(31,6%).

Что касается белков, полученных из целых клеток (В), то у них молекулярно-массовое распределение является абсолютно иным: большая часть гидролизованных белков дрожжей имеет молекулярную массу, меньшую 1 кДа (67,3%), в то время как остальные гидролизованные белки по существу имеют молекулярную массу, большую или равную 1 кДа.

Таблица 1
Молекулярная масса (в кДа)	Распределение (в процентах)
	А	В
10	0,3	1,1
5 и<10	3,9	2,0
от 1 до<5	64,2	29,6
<1	31,6	67,3

Согласно изобретению, разница между профилем молекулярной массы гидролизованных белков дрожжей и белков дрожжей, полученных в результате гидролиза целых клеток, ясно видна на Фиг.2.

На Фиг.2 продукты, представленные первыми, имеют более высокую молекулярную массу. Гидролизованные белки дрожжей являются более концентрированными в области большей молекулярной массы с более значимой интенсивностью. Гидролизованные белки композиции В демонстрируют пики концентрации в области меньшей молекулярной массы, что означает большую степень деградации.

Что касается отношения АА/ОА, на Таблице 2 показано, что гидролизованные белки дрожжей согласно настоящему изобретению (А) имеют отношение АА/ОА, находящееся в диапазоне между 15 и 28%, в то время как указанное отношение для гидролизовапных белков дрожжей, полученных из целых клеток (В), находится в диапазоне между 32 и 40%.

Table 2
	А	В
АА/ОА (в процентах)	15-28	32-40

Отношение АА/ОА позволяет дать оценку деградации белка: чем менее она выражена, тем большее количество белков представлено в нативной форме, и наоборот, чем она более выражена, тем больше белков представлено в деградированной форме.

На таблице 3 показано, что гидролизованные белки дрожжей согласно изобретению (А) фактически имеют очень малое количество свободных аминокислот по сравнению с гидролпзованными белками дрожжей, полученными из целых клеток (В).

Таким образом, гидролизованные белки дрожжей согласно изобретению (А) показывают меньшую степень деградации, чем гидролизованные белки дрожжей в композиции В.

Помимо этого, на Таблице 3 показано, что состав аминокислот в гидролизованных белках дрожжей согласно настоящему изобретению (А) отличается от такового в гидролизованных белках, полученных их целых клеток (В).

Таблица 3
	A (% г/г)		В (% г/г)
	Свободные аминокислоты	Общее количество аминокислот	Свободные аминокислоты	Общее количество аминокислот
ASP	H/o	7,59	0,7	6
SER	Н/о	3,62	1,4	2,8
GLU	0,47	10,51	5,5	13,2
GLY	Н/о	3	0,6	3
HIS	Н/о	1,61	0,5	1,3
ARG	Н/о	2,38	1,2	3,4
THR	Н/о	4,26	1,1	3,2
ALA	Н/о	4,75	2.9	5,1
PRO	Н/о	2,93	0,5	3,8
CYS	Н/о	0,2	0,1	0,3
TYR	Н/о	1,89	0,3	1,5
VAL	Н/о	4	1,3	3,6
MET	Н/о	0,56	0,4	0,8
LYS	Н/о	6,23	1,5	5
ILE	Н/о	3,42	1	3
LEU	Н/о	5,52	2,1	4,6
PHE	Н/о	2,94	1,1	2,5
Общее	0,47	65,41	22	63,1
Н/о: Не определено (значения слишком малы)

Пример 2; Эффект гидролизованных белков дрожжей согласно изобретению в отношении профиля экспрессии кератиноцитов и фибробластов

Оборудование и способы

Эффект гидролизованных белков дрожжей согласно изобретению в отношении профиля экспрессии нормальных кератиноцитов эпидермиса человека и нормальных фибробластов дермы человека оценивают на ДНК-чипах.

Первый чип содержит 164 гена кератиноцитов человека, в частности, вовлеченных в рост, дифференцировку, адгезию, коммуникацию и смерть клеток.

Второй микрочип содержит 143 гена человеческих фибробластов, в частности, вовлеченных в рост, дифференцировку, адгезию, коммуникацию и смерть клеток, синтез и деградацию внеклеточного матрикса и стресс.

Нормальные кератиноциты эпидермиса человека и нормальные фибробласты дермы человека содержат в культуре в течение от 24 ч до 96 ч в присутствии или при отсутствии гидролизованных белков дрожжей согласно Примеру 1. Клетки затем промывают и их РНК экстрагируют и очищают.На этой РНК получают кДНК с помощью обратной транскрипции. Полученные кДНК маркируют пред гибридизацией на чипе, соответствующем тому же типу клеток.

Уровень экспрессии каждого гена в отсутствие гидролизованпых белков дрожжей сравнивают с таковым в присутствии указанных гидролизованных белков дрожжей.

Результаты

Среди генов, активируемых на чипе фибробластов дермы, есть гены, вовлеченные в пролиферацию клеток и синтез внеклеточного матрикса.

Результаты, полученные на чипе эпидермальных кератиноциитов показывают, что дрожжевые белки согласно изобретению стимулируют дифференцировку кератиноцитов эпидермиса и ингибируют экспрессию генов, кодирующих белки клеточного матрикса, что предполагает увлажняющий эффект.Явление дифференцировки кератиноцитов в действительности вовлечено в усиление кожного барьера и позволяет ограничить потери воды. Ингибирование экспрессии генов, кодирующих белки клеточного матрикса, обладает схожим эффектом.

Пример 3: Увлажняющие, аптивозрастные и укрепляющие свойства гпдролпзованных белков дрожжей согласно изобретению. Оборудование и методы

Используемые гидролизованные белки дрожжей представляют собой белки, описанные в Примере 1.

(i) Увлажняющий эффект

Испытания проводят на нормальных кератиноцитах эпидермиса человека (NHEK-Normal Human Epidermal Keratinocytes), высаженных в лунки 96-луночного планшета в среде KSFM (среда для кератиноцитов без сыворотки - keratinocyte serum-free medium). Синтез липндов, FLG (филлагрина), СК10 (цитокератина), TGK (трансглутаминазы K) и гиалуроновой кислоты оценивают в присутствии различных концентраций гидролизованных белков дрожжей (от 0,04 мг/мл до 1 мг/мл). В трех лунках с культурой поддерживают условия.

При синтезе липидов и при синтезе FLG, СК10, TGK в качестве положительного контроля используют кальций, а при синтезе гиалуроновой кислоты в качестве положительного контроля используют ретиноевую кислоту.

Отрицательным контролем является пустая культуральная среда.

Синтез липидов анализируют с помощью формирования изображения на люминесцентном фосфорном покрытии, а синтез гиалуроновой кислоты оценивают путем измерения концентрации гиалуроновой кислоты, высвободившейся в среде.

Синтез FLG и СК10 оценивают путем иммунного маркирования клеток после 72 часов содержания в культуре, а синтез ТGК путем иммунного маркирования клеток спустя 48 ч

(ii) Антивозрастной эффект.

Нормальные фибробласты дермы человека (NHDF - Normal human dermal fibroblasts) и состарившиеся нормальные фибробласты дермы человека (AgNHDF - normal human dermal aged fibroblasts) высаживают в лунки 96-луночного планшета в среде DMEM (Dulbecco's modified Eagle medium - модифицированная Дульбекко среда Игла)+10% SVF (stromal vascular fraction - фракция сосудов стромы). Тесты проводят в среде DMEM+1% SVF.

Тест на пролиферацию фибробластов и тест на синтез коллагена и гликозамингликана проводят при различных концентрациях гидролизованных белков дрожжей. В трех лунках с культурой поддерживают условия.

Отрицательным контролем является пустая культуральная среда.

Тест на пролиферацию осуществляют спустя 24 ч после осаждения клеток. В культуральную среду добавляют [³H]-тимидин. В качестве положительного контроля используют EGF (epidermal growth factor - эпидермальный фактор роста).

Синтез гликозамиингликана и коллагена оценивают в конфлюэнтных на 80% клетках, к которым, соответственно, добавляют [³ H]-гликозамин или [³H]-пролин. Затем используют ретиноевую кислоту качестве положительного контроля.

Спустя 24 часа инкубации макромолекулы экстрагируют и измеряют включение радиоактивных предшественников.

(iii) Укрепляющий эффект

Тесты проводят на состарившихся нормальных фибробластах дермы человека (AgNHDF).

Синтез и созревание коллагена оценивают после предварительного культивирования клеток в колбе в течение 8 дней в присутствии различных концентраций гидролизованных белков дрожжей. Отрицательный контроль представляет собой пустую культуральную среду, а положительный контроль представляет собой TGF (transforming growth factor - трансформирующий фактор роста ) и витамин C. Клетки затем высевают в камеру для культивирования. Непосредственно перед слиянием, клетки фиксируют в метаноле и определяют присутствие коллагена иммунохимическими методами, используя специфичные антитела к коллагену I и вторичные флуоресцентные антитела. Уровень экспрессии внутриклеточного и внеклеточного коллагена и его локализацию в матриксе оценивают с помощью микроскопа.

Сжатие коллагеновой решетки оценивают после культивирования клеток в колбе в течение 8 дней в присутствии различных концентраций гидролизованных белков дрожжей. Отрицательный контроль представляет собой пустую культуральную среду, а положительный контроль представляет собой TGF . Полученную суспензию клеток затем вводят в раствор коллагена типа I при контролируемом pH. Спустя несколько часов раствор превращается в гель таким образом, что получается эквивалент дермы с ясно определенным контуром. Диаметр и количество клеток каждого эквивалента дермы измеряют, следуя определенной кинетике.

Синтез эластина оценивают после 8 дней культивирования клеток в колбе в присутствии разных концентраций гадролизованных белков дрожжей. Положительный контроль представляет собой пустую культурную среду, а отрицательный контроль представляет собой витамин С.Клетки затем высевают в культуральной камере. Непосредственно перед слиянием клетки фиксируют в метаноле и присутствие эластина определяют иммунохимическими методами, используя специфичные антитела к эластину и вторичные флуоресцентные антитела. Уровень экспрессии эластина анализируют с помощью микроскопа.

(iv) Репарационный эффект

Тесты проводят на реконструированном эпидермисе человека. Образцы реконструированного эпидермиса культивируют. На пятый день культуры обрабатывают гидролизованными белками дрожжей, тестируемыми в трех различных концентрациях при локальном нанесении.

Отрицательный контроль представляет собой необработанную культуру, положительный контроль представляет собой ретиноевую кислоту, наносимую локально. Обработку возобновляют на седьмой день, и прекращают поддержание культур на десятый день.

Высвобождение гиалуроновой кислоты количественно определяют в культуральных супернатантах с помощью специального модифицированного теста ELISA (enzyme linked immunosorbent assay - твердофазный иммуноферментный анализ). Результаты выражены в мг/мл высвобожденной гиалуроновой кислоты и в процентной доле стимуляции по отношению к необработанному контролю.

Эспрессию гиалуроновой кислоты в образцах эпидермиса оценивают иммулогистологическим методом.

(v) Статистика

Сравнение между группами проводят посредством дисперсионного анализа (ANOVA) с помощью критерия множественного сравнения Даннета.

Результаты

(i) Оценка увлажняющего эффекта в отношении эпидермиса.

В присутствии раствора гидролизованных белков дрожжей синтез липидов и гналуроновой кислоты активизируется по сравнению с отрицательным контролем.

Помимо этого, в присутствии раствора гидролизованных белков дрожжей наблюдается стимулирование секреции FLG, CK10 и TGK с эффектом дозы.

(ii) Оценка антивозрастного эффекта в отношении дермы

В присутствии раствора гидролизованных белков дрожжей активация наблюдается клеточной пролиферации и увеличение синтеза основных компонентов внеклеточного матрикса (по сравнению с отрицательным контролем).

(iii) Оценка укрепляющего эффекта

В присутствии раствора гидролизованных белков дрожжей наблюдается увеличение уровня экспрессии коллагена, а также созревание коллагена, на что указывает его расположение в матриксе, по сравнению с отрицательным контролем. Увеличение плотности эквивалента дермы (по отношению диаметров у ряда более слабых клеток по сравнению с отрицательным контролем) означает лучшее сжатие коллагеновой сети. Помимо этого синтез эластина активизируется по сравнению с отрицательным контролем. Все эти факторы указывают на то, что гидролизованные белки дрожжей улучшают биомеханические свойства дермы (в частности, в отношении эластичности и сжимаемости).

(iv) Оценка репарационного эффекта

В присутствии раствора гидролизованных белков дрожжей наблюдается увеличение экспрессии гиалуроновой килсоты (по сравнению с отрицательным контролем).

Пример 4: Свойства, подавляющие себорею и акне

Оборудование и методы

Раствор гидролизованных белков наносят на кожу или кожу головы субъектов, демонстрирующих гиперсеборею, соответственно, на уровне кожи или кожи головы.

Секрецию кожного жира затем оценивают, нанося пластырь, абсорбирующий кожный жир на часть тела, подвергающуюся терапии. Этот пластырь потом подвергают анализу для того, чтобы количественно определить секрецию кожного жира.

Секрецию кожного жира сравнивают с секрецией у того же субъекта перед терапией. Результаты

Раствор гидролизованных белков дрожжей позволяет уменьшить количество секретируемого кожного жира.

Пример 5: нанесение на волосы

Оборудование и способы

(i) Гидролизованные белки дрожжей

Раствор гидролизованных белков дрожжей такой, как описан в Примере 1.

(ii) Эффект против перхоти

Раствор гидролизованпых белков дрожжей наносят на кожу головы субъектов, страдающих от перхоти. После терапии раствором гидролизованных белков дрожжей на участок, подвергавшийся терапии, наносят пластырь для сбора перхоти с кожи головы.

Сравнивают количество перхоти, собранной на пластырь до и после терапии.

(iii) Рост полос

Динамику роста волос определяют следующим образом: перед терапией локон волос пациента окрашивают на 2-3 см от корня, на кожу головы наносят раствор гндролизованных белков дрожжей и измеряют расстояние между корнем и началом окрашивания.

Динамику роста после терапии у группы подвергавшихся терапии субъектов сравнивают с динамикой роста, полученной в группе субъектов, не подвергавшихся терапии.

(iv) Блеск волос

Блеск волос определяют, измеряя количество и интенсивность света, отраженного от поверхности волос.Для этой цели делают фотографии с использованием кроссполяризации и без поляризации. Две фотографии конвертируют в оттенки серого и определяют блеск волос путем вычитания света между двумя фотографиями.

Блеск волос после нанесения раствора гидролизованных белков дрожжей сравнивают с блеском волос, определенным перед терапией.

(v) Мягкость волос

Мягкость волос оценивают с помощью сенсорного анализа группой экспертов, состоящей из трех квалифицированных специалистов, оценивающих мягкость волос при касании.

Мягкость волос отмечают на шкале от 0 до 10, где отметка 0 соответствует отсутствию мягкости, а отметка 10 соответствует значительной мягкости.

Мягкость волос после нанесения раствора гидролизованных белков дрожжей сравнивают с таковой, определенной до терапии.

(vi) Восстановление волос

Восстановление волос определяют, измеряя топографию поверхности волос с помощью интерферометрического микроскопа.

Параметры, позволяющие определить состояние чешуек кутикулы на поверхности волоса, следующие:

- открытие чешуек

- длина чешуек

- топология поверхности, в частности шероховатость

Размер анализируемой поверхности составляет 120 на 30 мкм.

Восстановление волос после нанесения раствора гидролизованных белков дрожжей сравнивают со статусом волос перед терапией.

Результаты

Нанесение на волосы растворов гидролизованных белков дрожжей позволяет достигать эффекта, направленного против перхоти, и усиливать рост волос

Раствор гидролизованных белков дрожжей также имеет эффект, восстанавливающий волосы, и позволяет улучшить блеск, мягкость, и восстановление волос. В частности, наблюдается уменьшение количества мест, не покрытых чешуйками кутикулы, увеличение длины чешуек и уменьшение шероховатости.

Пример 6: Примеры косметических композиций и терапевтических композиций согласно изобретению

Следующие композиции представляют собой неограничивающие примеры настоящего изобретения.

Композиция 1: увлажняющий крем (масло в воде)

Ингредиенты	Процентное содержание (масс.%)
Гидролизованные белки дрожжей (композиция А)	1,5
Каприловый и каприновый триглицерид	4
Минеральное масло	2
Стеариловый спирт	3
Изопропил пальмитат	2
Глицерин стеарат PEG-100	6
Диметикон	4
Глицерин	8
Консервант	0,3
Вода	69,2

Композиция 2: лосьон (масло в воде)

Ингредиенты	Процентное содержание (масс.%)
Гидролизованние белки дрожжей (композиция А)	2,50
Парафиновое масло	2,60
Пропиленгликоль	1,40
Триглицерид	1,0
PEG-75	1,0
Кокосовый каприлат/капринат	1,0

Глицерин стеарат	0,6
Диметикон	0,5
Полиакриловая кислота	0,3
Гидроксид натрия	0,11
Отдушка	0,10
ЭДТА	0,03
Глицерин	5,00
Краситель	0,32
Консервант	1,50
Очищенная вода	82,04

Композиция 3: шампунь против перхоти

Ингредиенты	Процентное содержание (масс.%)
Гидролизованные белки дрожжей (композиция А)	1.5
Лаурилсульфат натрия	30
Эстерифицированный лаурилсульфат динатрия
Кокоамфодиацентат
Гексиленгликоль
Какомидопропиламин оксид	1
Экстаркт индийской жерухи	1
Консервант	0.2
Лимонная кислота	рН 6
Вода	до 100

Композиция 4: увлажняющая маска

Ингредиенты	Процентное содержание (масс.%)
Гндролизованные белки дрожжей (композиция А)	4,00
Тимироновый блеск	4,00
Пропиленгликоль	3,00
Глицерин	3,00
Мочевина	3,00
Муциновая кислота	0,30
Отдушка	0,30
Смола акации	0,50
Ксантановая камедь	0,10
ЭДТА	0,10

Аллаптоин	0,10
Гпдроксид натрия	0,06
Поливиниловый спирт	10,00
Тальк	10,00
95% спирт	15,00
Очищенная вода	46,54