производные дигидроиндолона

Формула изобретения

1. Соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль:



где каждый из R¹, R³ и R⁴ независимо представляет собой водород;

R² выбирают из группы, состоящей из водорода и галогена;

каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо представляет собой водород;

R⁶ выбирают из группы, состоящей из моно-C_1-8алкиламино, ди-C_1-8алкиламино, фенила, фенила, необязательно замещенного ди-C_1-8алкиламино, 5-6-членного гетероциклоалкила, содержащего один азот в качестве гетероатома, который может быть необязательно замещен C_1-8алкилом, фенил-C_1-8 алкилом, при условии, что, когда R⁶ представляет собой гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в указанной формуле I;

R ⁸ и R⁹ могут быть одинаковыми или различными и каждый из них независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и C_1-8алкила;

R¹⁵ и R¹⁶ могут быть одинаковыми или различными и каждый из них независимо представляет собой C_1-8алкил;

каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 4 и

m представляет собой целое число от 0 до 2;

причем следующие соединения не включены:

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где каждый из R¹, R³ и R ⁴ независимо представляет собой водород; R² выбирают из группы, состоящей из водорода и галогена; каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо представляет собой водород; R⁶ выбирают из группы, состоящей из моно-C_1-8алкиламино, ди-C_1-8алкиламино, фенила, фенила, необязательно замещенного ди-C_1-8алкиламино, 5-6-членного гетероциклоалкила, содержащего один азот в качестве гетероатома, который может быть необязательно замещен C_1-4 алкилом, фенил-C_1-8алкилом, при условии, что, когда R⁶ представляет собой гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в указанной формуле I; каждый из R⁸ и R ⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и C_1-4алкила; каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой C_1-4алкил.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1 и 2, где каждый из R¹, R³ и R ⁴ независимо представляет собой водород; R² представляет собой галоген; каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо представляет собой водород; R ⁶ выбирают из группы, состоящей из моно-C_1-8 алкиламино, ди-C_1-8алкиламино, фенила, фенила, необязательно замещенного ди-C_1-8алкиламино, 5-6-членного гетероциклоалкила, содержащего один азот в качестве гетероатома, который может быть необязательно замещен C_1-4алкилом, фенил-C_1-8 алкилом, при условии, что, когда R⁶ представляет собой гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в указанной формуле I; каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и C_1-4алкила; каждый из R ¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой C _1-4алкил.

4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, выбранное из соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли:



где R⁶, R⁸, R⁹ , n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для соединения формулы I по п.1.

5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.4, где R⁶ выбирают из группы, состоящей из моно-C_1-8алкиламино, ди-C₁ -₈алкиламино, фенила, фенила, необязательно замещенного ди-C_1-8алкиламино, 5-6-членного гетероциклоалкила, содержащего один азот в качестве гетероатома, который может быть необязательно замещен C_1-4алкилом, фенил-C_1-8 алкилом, при условии, что, когда R⁶ представляет собой гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в указанной формуле II; каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и C₁-₄алкила; каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 2 и m представляет собой целое число от 0 до 1.

6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, выбранное из следующих соединений или их фармацевтически приемлемых солей:

№	Структура	Название
1		N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-лигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
2		N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
3		N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диме тил-1Н-пиррол-3-формамида

4		N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
5		N-(пирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
6		N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
7		N-[4-(диметиламино)фенил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
8		N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
9		N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
10		N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
11		N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
12		N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
13		N-{2-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
14		N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
15		N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
16		N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
17		N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид

7. Способ получения соединения по любому из пп.1-3, включающий взаимодействие промежуточного соединения формулы III с промежуточным соединением формулы IV:



где R¹-R⁹, R¹⁵ -R¹⁷, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы I по п.1.

8. Способ получения соединения по любому из пп.4 и 5, включающий взаимодействие промежуточного соединения формулы V с промежуточным соединением формулы VI:



где R⁶, R⁸, R⁹ , n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы II по п.4.

9. Фармацевтическая композиция, проявляющая противоопухолевую активность, включающая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-6 и один или более фармацевтически приемлемых носителей и/или эксципиентов.

10. Фармацевтическая композиция по п.9, где композиция предназначена для лечения или профилактики заболеваний, связанных с протеинтирозинкиназами, или заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов.

11. Фармацевтическая композиция по п.10, где заболевания, связанные с протеинтирозинкиназами, представляют собой опухоли.

12. Фармацевтическая композиция по п.11, где опухоли включают в себя карциному шейки матки, рак печени, рак легких, рак желудка, рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак яичников, рак предстательной железы, колоректальный рак, рак мочеполового тракта, меланому, рак сквамозных клеток, рак астроглиальных клеток, саркому Капоши, рак спонгиобластов, предпочтительно, карциному шейки матки, рак печени, рак легких, рак желудка и рак молочной железы.

13. Фармацевтическая композиция по п.10, где заболевания, связанные с пролиферацией фибробластов, включают в себя фиброз легких, фиброз печени, хронический панкреатит, склеродерму, фиброз почечных клубочков и фиброз множества органов, являющийся следствием радиационной химиотерапии и трансплантации тканей.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к гетероциклическим соединениям, которые могут регулировать активность протеинтирозинкиназ (PTK), к способам получения соединений, фармацевтическим композициям, включающим соединения, и к применению соединений и их фармацевтических композиций для лечения и/или профилактики связанных с протеинтирозинкиназами заболеваний в организмах, в частности для лечения и/или профилактики опухолей и заболеваний, связанных с пролиферацией.

Уровень техники

Протеинтирозинкиназы (РТК) представляют собой киназы, которые катализируют перенос -фосфатов на аденозинтрифосфатах (АТФ) к тирозиновым остаткам белков. Известно, что сигнальные пути протеинтирозинкиназы (РТК) играют важную роль в росте, пролиферации, дифференциации, метаболизме и апоптозе клеток.

РТК включают в себя киназы рецепторного типа и нерецепторного типа. РТК рецепторного типа включают девять подтипов на основании их структур, среди которых распространенными являются семейство рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), семейство рецепторов сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGFR), семейство рецептора тромбоцитарного фактора роста (PDGFR), семейство рецептора фактора роста фибробластов (FGFR) и семейство инсулинового рецептора (INSR). РТК нерецепторного типа представляют собой полностью внутриклеточные РТК, также известные как «клеточные тирозинкиназы», среди которых распространенным является семейство соактиваторов стероидного рецептора (SRC).

Взаимодействия между факторами роста и их рецепторами необходимы для нормального регулирования роста клеток. Однако, при определенных условиях, вследствие мутации или сверхэкспрессии несоответствующая или неконтролируемая активация данных рецепторов, т.е. аномальная активность протеинтирозинкиназы, может привести к неконтролируемому росту клеток, что может вызвать рост опухоли. Например, члены семейства EGFR представляют собой особенно важные тирозинкиназы рецептора фактора роста, связанные с онкогенезом эпидермальных клеток. EGFR избыточно экспрессируется во многих типах эпидермальных опухолевых клеток. Семейство VEGFR также представляет собой фактор, связанный с онкогенезом клеток.

Избыточно экспрессируемые или мутированные протеинтирозинкиназы связаны с различными видами рака. Следовательно, ингибирование протеинтирозинкиназ будет значимым при лечении рака. В настоящее время различные небольшие молекулы, являющиеся ингибиторами тирозинкиназ, такие как Глевек (GLEEVEC), Тарцева (TARCEVA), Иресса (IRESSA), Сунитиниб (SUNITINIB) и тому подобные, успешно используются в клинической практике в качестве противоопухолевых лекарственных средств.

Помимо опухолей, фиброз тканей и органов представляет собой другое заболевание, создающее серьезную угрозу здоровью человека. Фиброз относится к избыточному отложению фиброзных соединительных тканей и тому подобного, что является результатом дисбаланса между пролиферацией и разрушением фиброзных тканей. Одной отличительной особенностью таких заболеваний является избыточная пролиферация фибробластов. В настоящее время фиброз тканей и органов обычно включает в себя фиброз легких, фиброз печени, хронический панкреатит, склеродерму, фиброз почечных клубочков и фиброз множества органов, являющийся следствием радиационной химиотерапии и трансплантации тканей, и т.д.

Предшествующие исследования показали, что FGFR играют роль в связывании факторов роста фибробластов и передаче сигнала. Такой тип сигнальной трансдукции связан с пролиферацией и дифференциацией различных типов клеток. Избыточная аутокринность факторов роста фибробластов приводит ко многим заболеваниям. Кроме того, аномальная сигнальная трансдукция, опосредованная FGFR, тесно связана с фиброзными заболеваниями.

Аномальная активность протеинтирозинкиназы также вовлечена во множество других нарушений, таких как воспаление, иммунные заболевания, сердечно-сосудистые заболевания, астма и заболевания нервной системы. Хотя многочисленные небольшие молекулы, являющиеся ингибиторами тирозинкиназы, были разработаны для лечения и профилактики различных заболеваний, связанных с протеинтирозинкиназами, все еще существует необходимость в новых ингибиторах тирозинкиназ для лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с протеинтирозинкиназами, в частности для лечения и/или профилактики опухолей и/или заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов.

Краткое изложение сущности изобретения

В одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы I или его соли, предпочтительно его фармацевтически приемлемой соли:

Формула I

где каждый из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, гидрокси, необязательно замещенного алкокси, необязательно замещенного циклоалкокси, необязательно замещенного арила, циано, амино, необязательно замещенного моноалкиламино и необязательно замещенного диалкиламино;

каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного алкила;

R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, необязательно замещенного моноалкиламино, необязательно замещенного диалкиламино, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероциклоалкила, при условии, что когда R⁶ представляет собой гетероарил или гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в формуле I;

R⁸ и R⁹ могут быть одинаковыми или различными, и каждый из них независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, гидрокси, необязательно замещенного алкокси, необязательно замещенного циклоалкокси, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилокси и необязательно замещенного аралкила;

R¹⁵ и R¹⁶ могут быть одинаковыми или различными, и каждый из них независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, амино, необязательно замещенного моноалкиламино, необязательно замещенного диалкиламино и необязательно замещенного арила;

каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 4;

m представляет собой целое число от 0 до 2.

В другом аспекте данного изобретения соединение формулы I или его соль предпочтительно представляет собой соединение формулы II или его соль, предпочтительно фармацевтически приемлемую соль:

Формула II

где R ⁶, R⁸, R⁹, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено в формуле I.

Другой аспект изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей по крайней мере одно соединение формулы I или его соли, соединения формулы II или его соли, как определено выше, и по крайней мере один фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательную добавку и/или среду.

Другой аспект изобретения относится к способу получения соединения формулы I или его соли, как определено выше, включающему взаимодействие соответствующего дигидроиндолонового промежуточного соединения формулы III с промежуточным соединением формулы IV в присутствии щелочи:

Формула III

где R ¹-R⁵ имеют такие же значения, как определено для формулы I,

Формула IV

где R ⁶-R⁹, R¹⁵-R¹⁷, n1-n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы I.

Другой аспект изобретения относится к способу получения соединения формулы II или его соли, как определено выше, включающему взаимодействие соответствующего 5-фтор-2-индолонового соединения формулы V с промежуточным соединением формулы VI в присутствии щелочи:

Формула V

Формула VI

где R ⁶, R⁸, R⁹, n1-n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы I.

Другой аспект изобретения относится к применению соединений формулы I или их солей, или их фармацевтических композиций, или соединений формулы II, или их солей, или их фармацевтических композиций, как определено выше, для получения лекарственных средств для лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с тирозинкиназами.

Другой аспект изобретения относится к применению соединений формулы I или их солей, или их фармацевтических композиций, или соединений формулы II, или их солей, или их фармацевтических композиций, как определено выше, для получения лекарственных средств для лечения и/или профилактики опухолей.

Другой аспект изобретения относится к применению соединений формулы I или их солей, или их фармацевтических композиций, или соединений формулы II, или их солей, или их фармацевтических композиций, как определено выше, для получения лекарственных средств для лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с тирозинкиназами, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества по крайней мере одного соединения формулы I, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, или по крайней мере одного соединения формулы II, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, как определено выше.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики опухолей, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества по крайней мере одного соединения формулы I, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, или по крайней мере одного соединения формулы II, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, как определено выше.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества по крайней мере одного соединения формулы I, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, или по крайней мере одного соединения формулы II, или его соли, или его фармацевтически приемлемой композиции, как определено выше.

Краткое описание чертежей

Рисунки включены и представляют собой часть описания только для иллюстрации некоторых предпочтительных вариантов осуществления изобретения. Рисунки вместе с другими частями описания служат для объяснения некоторых предпочтительных вариантов осуществления для специалистов в данной области.

На фиг.1 показано ингибирование роста опухоли толстой кишки человека HT-29 у "голых" мышей (бестимусные мыши с мутацией nude) под действием соединений 1-4 по изобретению и сунитиниба.

Подробное описание изобретения

В приведенных выше описаниях соединений формулы (I) и следующих вариантах осуществления использованные термины имеют следующее значение.

Термин «галоген» относится к фтору, хлору, брому или иоду, предпочтительно к фтору или хлору, более предпочтительно к фтору.

Термин «гидроксил» относится к группе -ОН.

Термин «циано» относится к группе -CN.

Термин «алкил» относится к линейной или разветвленной, замещенной или незамещенной насыщенной алифатической углеводородной группе, состоящей из атомов углерода и атомов водорода, соединенной с другими частями молекулы посредством простой связи. Алкил содержит 1-8 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода. Примеры незамещенного алкила включают, но не ограничиваются указанными, метил, этил, пропил, 2-пропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, 2-метилбутил, неопентил, н-гексил, 2-метилгексил и т.д.

Термин «алкокси» относится к группе -OR_a, где R_a представляет собой замещенный или незамещенный алкил, содержащий 1-8 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода, как определено выше. Примеры незамещенного алкоксила включают, но не ограничиваются указанным, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, трет-бутокси, н-пентокси, 2-метилбутокси, неопентокси, н-гексокси, 2-метилгексокси и т.д.

Термин «циклоалкокси» относится к группе -OR_b, где R_b представляет собой замещенную или незамещенную насыщенную неароматическую моноциклическую углеводородную группу, состоящую из атомов углерода и атомов водорода, имеющую 3-8 атомов углерода, предпочтительно 3-6 атомов углерода. Примеры незамещенного циклоалкокси включают, но не ограничиваются указанным, циклопропокси, циклобутокси, циклопентокси, циклогексокси, циклогептокси, циклооктокси и т.д.

Термин «амино» относится к группе -NH₂.

Термин «моноалкиламино» относится к -NH(алкилу), где алкил представляет собой замещенный или незамещенный алкил, содержащий 1-8 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода, как определено выше.

Термин «диалкиламино» относится к -N(алкил)₂, где алкил представляет собой замещенный или незамещенный алкил, содержащий 1-8 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода, как определено выше, и два алкила могут быть одинаковыми или различными.

Термин «арил» относится к замещенной или незамещенной, полностью состоящей из углеродов моноциклической или конденсированной полициклической ароматической циклической группе, с полностью сопряженной -электронной системой и содержащей 6-14 атомов углерода, предпочтительно 6-12 атомов углерода, наиболее предпочтительно 6 атомов углерода. Примеры незамещенного арила включают, но не ограничиваются указанным, фенил, нафтил и антрил.

Термин «арилокси» относится к группе -OR_c , где R_c представляет собой замещенный или незамещенный арил, как определено выше. Примеры незамещенного арилокси включают, но не ограничиваются указанным, фенокси, нафтокси и т.д.

Термин «аралкил» относится к незамещенному алкилу, предпочтительно незамещенному С₁-С₄алкилу, как определено выше, замещенному замещенным или незамещенным арилом, как определено выше. Примеры незамещенного аралкила включают, но не ограничиваются указанным, -СН₂-фенил, -(СН ₂)₂-фенил, -(СН₂)₃-фенил, -СН₂-СН(СН₃)-фенил, -(СН₂) ₄-фенил, -СН₂-СН(СН₃)-СН₂ -фенил, -СН₂-СН₂-СН(СН₃)-фенил и т.д.

Термин «гетероарил» относится к замещенной или незамещенной 5- или 6-членной ароматической циклической группе, содержащей атомы водорода, 3-5 атомов углерода и 1-2 гетероатома, выбранные из атомов азота, кислорода и серы. Предпочтительно гетероарил представляет собой 5-членную ароматическую циклическую группу. Примеры незамещенного гетероарила включают, но не ограничиваются указанным, пиррол, фуран, тиофен, имидазол, оксазол, пиразол, пиридин и пиримидин.

Термин «гетероциклоалкил» относится к замещенной или незамещенной 5-10-членной неароматической циклической группе из одного кольца или конденсированных колец, состоящей из 3-9 атомов углерода и 1-2 гетероатомов, выбранных из атомов азота, кислорода и серы. Примеры незамещенного гетероциклоалкила включают пирролидинил, пиперидил, пиперазинил, морфолинил и т.д.

Термин «необязательный» или «необязательно» означает, что описанное впоследствии событие или состояние может произойти или не произойти. И описание включает как ситуацию, когда событие или состояние происходит, так и ситуацию, когда событие или состояние не происходит. Например, «необязательно замещенный арил» означает, что арил может быть замещенным или может не быть замещенным, и описание включает замещенный и незамещенный арил.

Когда заместитель определяют как «необязательно замещенный», если другое ясно не указано в описании, это означает, что заместитель может быть замещенным одной или несколькими группами, каждая из которых независимо выбрана из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, алкенокси, алкинокси, циклоалкила, циклоалкенила, циклоалкокси, циклоалкенокси, галогена, галогеналкила, галогеналкенила, галогеналкокси, гидроксила, сульфгидрила, нитро, циано, ацила, карбоксила, ацилокси, ациламино, карбоксиалкила, амино, моноалкиламино, диалкиламино, арила, арилокси, аралкила, аралкенила, гетероциклоалкила, гетероциклоалкилалкила, гетероарила или гетероарилалкила.

В некоторых вариантах осуществления каждый из алкила, алкокси, циклоалкокси, моноалкиламино и диалкиламино независимо является незамещенным или замещенным одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, гидроксила и сульфгидрила. В некоторых вариантах осуществления каждый из арила, арилокси, аралкила, гетероарила, гетероциклоалкила независимо является незамещенным или замещенным одним или несколькими заместителями, выбранными из алкила, арила, аралкила, амино, моноалкиламино, диалкиламино, галогена, гидроксила и сульфгидрила.

Термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединений по изобретению, достаточному для эффективного лечения заболеваний, связанных с тирозинкиназами (в частности, опухолей и заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов) при введении млекопитающим, предпочтительно людям, страдающим от вышеуказанных заболеваний. Количество соединений по изобретению, составляющее так называемое «терапевтически эффективное количество», зависит от соединения, болезненного состояния и его тяжести, способа введения и возраста млекопитающего, которому предназначено лечение, но может быть определено в плановом порядке специалистами в данной области на основании их знаний и описания данного изобретения.

Термин «лечение» или «лечить» относится к введению соединений или препаратов по изобретению для профилактики, облегчения или прекращения заболеваний или одного или нескольких симптомов, связанных с заболеваниями, включая:

(i) профилактику появления заболеваний или состояний у млекопитающих, в частности, когда млекопитающие подвержены таким состояниям, но у которых такие состояния не были диагностированы;

(ii) ингибирование заболеваний или состояний, т.е. торможение их развития; или

(iii) облегчение при заболеваниях или состояниях, т.е. излечение заболеваний или состояний.

В соответствии с первым аспектом, данное изобретение относится к соединению формулы I или его соли, предпочтительно фармацевтически приемлемой соли:

Формула I

каждый из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, гидрокси, необязательно замещенного алкокси, необязательно замещенного циклоалкокси, необязательно замещенного арила, циано, амино, необязательно замещенного моноалкиламино и необязательно замещенного диалкиламино.

Каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного алкила.

R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, необязательно замещенного моноалкиламино, необязательно замещенного диалкиламино, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероциклоалкила, при условии, что когда R⁶ представляет собой гетероарил или гетероциклоалкил, гетероатом в R⁶ не является непосредственно связанным с другими группами в формуле I.

R⁸ и R⁹ могут быть одинаковыми или различными, и каждый из них независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, гидрокси, необязательно замещенного алкокси, необязательно замещенного циклоалкокси, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилокси и необязательно замещенного аралкила.

R¹⁵ и R¹⁶ могут быть одинаковыми или различными, и каждый из них независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, амино, необязательно замещенного моноалкиламино, необязательно замещенного диалкиламино и необязательно замещенного арила.

Каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 4.

m представляет собой целое число от 0 до 2.

В некоторых вариантах осуществления каждый из необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероциклоалкила в R ⁶ независимо является незамещенным или замещенным одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино.

В некоторых вариантах осуществления каждый из R ¹, R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₄алкила, С₁-С₄алкокси и арила. В некоторых других вариантах осуществления R¹, R³ и R ⁴ выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁ -С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления каждый из R¹, R³ и R⁴ независимо представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления R² представляет собой водород, С ₁-С₄алкил, галоген или циано. В некоторых других вариантах осуществления R² представляет собой галоген. В некоторых других вариантах осуществления R² представляет собой фтор.

В некоторых вариантах осуществления R⁵ выбирают из группы, состоящей из водорода и С ₁-С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления R⁵ выбирают из группы, состоящей из водорода и метила. В некоторых других вариантах осуществления R⁵ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, арила и гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁ -С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино. В некоторых других вариантах осуществления R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино и фенила и 5- или 6-членного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С ₁-С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино. В некоторых других вариантах осуществления R ⁶ выбирают из группы, состоящей из пиперидин-2-ила, пиперидин-4-ила и пирролидин-3-ила и пирролидин-2-ила, незамещенного или замещенного С₁-С₄алкилом или аралкилом, амино, моноалкиламино, диалкиламино, и фенила, замещенного диС₁-С₄ алкиламино.

В некоторых вариантах осуществления R⁷ представляет собой водород или С₁-С ₄алкил. В некоторых других вариантах осуществления R ⁷ представляет собой водород или метил. В некоторых других вариантах осуществления R⁷ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления R⁸ и R⁹ выбирают из водорода, С₁-С₄ алкила, гидрокси или С₁-С₄алкокси. В некоторых других вариантах осуществления R⁸ и R⁹ выбирают из водорода или С₁-С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления R⁸ и R ⁹ выбирают из водорода или метила.

В некоторых вариантах осуществления каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С ₁-С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой алкил. В некоторых других вариантах осуществления каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой метил.

В некоторых вариантах осуществления R ¹⁷ выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁ -С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления R¹⁷ выбирают из группы, состоящей из водорода и метила. В некоторых других вариантах осуществления R¹⁷ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления каждый из n1, n2 и n3 независимо выбирают из 0, 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления m выбирают из 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления каждый из R ¹, R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₄алкила, С₁-С₄алкокси и арила, R² выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₄ алкила, галогена и циано, каждый из R⁵, R⁷ , R¹⁵, R¹⁶ и R¹⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁-С ₄алкила, R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, арила и гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁-С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино, и каждый из R⁸ и R ⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₄алкила, гидрокси и С₁-С ₄алкокси.

В некоторых других вариантах осуществления каждый из R¹, R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁-С ₄алкила, R² представляет собой галоген, каждый из R⁵, R⁷ и R¹⁷ независимо выбирают из водорода и метила, R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, фенила и 5- или 6-членного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁-С₄ алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино, каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁-С₄алкила, и каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой С₁-С₄алкил.

В некоторых других вариантах осуществления каждый из R¹, R ³ и R⁴ независимо представляет собой водород, R² представляет собой фтор, каждый из R⁵ , R⁷ и R¹⁷ независимо выбирают из водорода, R⁶ выбирают из группы, состоящей из пиперидин-2-ила, пиперидин-4-ила и пирролидин-3-ила и пирролидин-2-ила, незамещенного или замещенного С₁-С₄алкилом или аралкилом, и амино, моноалкиламино, диалкиламино и фенила, замещенного диС ₁-С₄алкиламино, каждый из R⁸ и R ⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и метила, и каждый из R¹⁵ и R¹⁶ независимо представляет собой метил.

В некоторых вариантах осуществления соединение формулы I или его соль предпочтительно представляет собой соединение формулы II или его соль, предпочтительно фармацевтически приемлемую соль:

Формула II

где R ⁶, R⁸, R⁹, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено в формуле I.

В некоторых вариантах осуществления R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, арила и гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁-С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино. В некоторых других вариантах осуществления R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, фенила и 5- или 6-членного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁-С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино. В некоторых других вариантах осуществления R ⁶ выбирают из группы, состоящей из пиперидин-2-ила, пиперидин-4-ила и пирролидин-3-ила и пирролидин-2-ила, незамещенного или замещенного С₁-С₄алкилом или аралкилом, и амино, моноалкиламино, диалкиламино и фенила, замещенного диС₁-С₄ алкиламино.

В некоторых вариантах осуществления каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С₁-С₄алкила, гидрокси или С₁-С₄алкокси. В некоторых других вариантах осуществления каждый из R⁸ и R ⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁-С₄алкила. В некоторых других вариантах осуществления каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода или метила.

В некоторых вариантах осуществления каждый из n1, n2 и n3 независимо выбирают из 0, 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления m выбирают из 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы II или их соли предпочтительно представляют собой следующие соединения или их соли: каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С₁-С₄алкила, R ⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, гетероциклоалкила и арила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁ -С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино, каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 2, и m представляет собой 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления, более предпочтительно, соединения формулы II или их соли предпочтительно представляют собой следующие соединения или их соли: каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С ₁-С₄алкила, R⁶ выбирают из группы, состоящей из амино, моноалкиламино, диалкиламино, фенила и 5- или 6-членного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного заместителем, выбранным из группы, состоящей из С₁ -С₄алкила, аралкила, амино, моноалкиламино и диалкиламино, каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 2, и m представляет собой 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления, особенно предпочтительно, соединения формулы II или их соли предпочтительно представляют собой следующие соединения или их соли: каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и метила, R⁶ выбирают из группы, состоящей из пиперидин-2-ила, пиперидин-4-ила и пирролидин-3-ила и пирролидин-2-ила, незамещенного или замещенного С₁-С₄алкилом или аралкилом, и фенила, замещенного диС₁-С₄ алкиламино, каждый из n1, n2 и n3 независимо представляет собой целое число от 0 до 2, и m представляет собой 0 или 1.

Предпочтительные соединения формулы I и их соли проиллюстрированы далее, но этим не ограничиваются.

№	Структура	Название
1		N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
2		N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
3		N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид

4		N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
5		N-(пирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
6		N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
7		N-[4-(диметиламино)фенил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
8		N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
9		N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид

10		N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
11		N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
12		N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
13		N-{2-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
14		N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид

15		N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
16		N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид
17		N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид

Соединения формулы I могут включать асимметрические заместители, такие как асимметрические заместители в R8 и/или R9, что может приводить к образованию различных стереоизомеров, таких как энантиомеры, цис-транс изомеры и т.д. Все стереоизомеры (энантиомеры, диастереомеры и цис-транс изомеры) соединений формулы I и их смеси входят в объем данного изобретения.

Также подразумевается, что раскрываемое здесь изобретение охватывает in vivo метаболиты соединений формулы I. Такие метаболиты могут образовываться, например, при окислении, восстановлении, гидролизе, амидировании, этерификации вводимых соединений и тому подобном. Метаболиты, которые могут регулировать активность протеинкиназы, главным образом образуются в ферментативных процессах.

Термин «их фармацевтически приемлемые соли» относится к солям, которые, при введении субъекту, способны (непосредственно или косвенно) приводить к описанным здесь соединениям. Они сохраняют биодоступность и свойства свободного основания (кислоты) и не будут нежелательными с биологической или других точек зрения. Однако следует понимать, что не являющиеся фармацевтически приемлемыми соли соединений формулы I входят в объем изобретения, а также их можно использовать для получения фармацевтически приемлемых солей.

Разработанные соединения формулы I могут работать сами по себе или в виде их фармацевтически приемлемых солей. «Фармацевтически приемлемые соли» включают кислотно-аддитивные соли соединений формулы I. Обычно такие соли получают, например, при реакции данных соединений в виде свободного основания со стехиометрическим количеством подходящих кислот в воде, или органических растворителях, или их смесях. Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают аддитивные соли с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодат, фосфат, метафосфат, нитрат и сульфат, и аддитивные соли с органическими кислотами, такие как тартрат, ацетат, трифторацетат, цитрат, оксалат, малат, лактат, фумарат, бензоат, малеат, фумарат, манделат, гликолят, глуконат, сукцинат, метансульфонат и арилсульфонат, такой как п-толуолсульфонат. Соли соединений формулы I дополнительно включают соли, образованные при замене кислотных протонов в соединениях формулы I на ионы металлов, такие как ионы щелочных металлов, ионы щелочноземельных металлов или ион алюминия, или комплексы, образованные с органическими основаниями (например, этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, тригидроксиметиламинометан, N-метилглюкозамин и т.д.). Соли соединений формулы I предпочтительно представляют собой аддитивные соли с органическими кислотами, более предпочтительно аддитивные соли с L-яблочной кислотой.

Другой аспект изобретения относится к способу получения соединений формулы I, как определено выше, включающему взаимодействие соответствующего дигидроиндолонового промежуточного соединения формулы III с подходящим промежуточным соединением формулы IV в присутствии щелочи:

Формула III

Формула IV

где R¹-R ⁹, R¹⁵-R¹⁷, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы I.

Конкретные реакционные условия способа получения соединений формулы I включают нагревание промежуточного соединения формулы IV (1 экв.) и дигидроиндолонового промежуточного соединения формулы III (1 экв.) в спиртовых растворителях при кипении с обратным холодильником в течение 3-6 часов в присутствии щелочи и затем охлаждение до комнатной температуры, фильтрование и выделение твердого вещества. После очистки путем перекристаллизации и сушки получают соединения формулы I.

Другой аспект изобретения относится к способу получения соединений формулы II, включающему взаимодействие 5-фтор-2-индолонового соединения формулы V с промежуточным соединением формулы VI:

Формула V

Формула VI

где R⁶, R⁸, R⁹, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы II.

Конкретные реакционные условия способа получения соединений формулы II аналогичны таковым для способа получения соединений формулы I.

Спиртовые растворители, используемые в вышеуказанных способах, включают, но не ограничиваются указанным, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол, н-бутанол, изобутанол, трет-бутанол, н-пентанол, н-гексанол или смесь двух или более из них и тому подобное. Выбор подходящих органических спиртов может быть сделан специалистами в данной области на основании общих принципов органического синтеза и описания изобретения.

Щелочи, используемые в данном способе, обычно представляют собой органические щелочи и включают, но не ограничиваются указанным, пирролидин, триэтиламин и тому подобные. Выбор подходящих органических щелочей может быть определен специалистами в данной области на основании общих принципов органического синтеза и описания изобретения.

Другой аспект изобретения относится к промежуточному соединению для получения соединений формулы II - соединениям формулы VI:

Формула VI

где R ⁶, R⁸, R⁹, n1, n2, n3 и m имеют такие же значения, как определено для формулы II.

Другой аспект изобретения относится к способу получения промежуточного соединения формулы VI, включающему взаимодействие соединения формулы VII с соединением формулы VIII, представленными ниже, указанный способ может быть осуществлен в соответствии со способом синтеза ациламида, известным в данной области. Например, соединение формулы VII и соединение формулы VIII добавляют к ДМФ при перемешивании в присутствии гидрохлорида 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида и триэтиламина при низкой температуре и реакцию проводят до тех пор, пока не получают промежуточное соединение формулы VI.

Формула VII

Формула VIII

Другой аспект изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I или его соль или соединение формулы II или его соль, предпочтительно фармацевтически приемлемую соль, и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов и/или носителей для введения в организм.

Выражение «фармацевтические композиции» относится к препаратам, включающим одно или несколько соединений по изобретению или их солей и носители, эксципиенты и/или носители, обычно принятые в данной области для доставки биоактивных соединений в организм, такой как организм человека. Задача фармацевтической композиции заключается в способствовании введению соединений по изобретению в организм.

Термин «фармацевтически приемлемые носители» относится к тем носителям и разбавителям, которые не обладают существенным стимулирующим действием на организм и не будут оказывать отрицательного воздействия на биологическую активность и свойства активных соединений. Выражение «фармацевтически приемлемые эксципиенты и/или носители» относится к инертным веществам, вводимым совместно с активными соединениями и благоприятным для их введения. «Фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты и/или носители включают, но не ограничиваясь указанным, любые носители, эксципиенты, носители, добавки для обеспечения текучести, диспергирующие агенты, дезинтегрирующие агенты, суспендирующие агенты, стабилизаторы, изотонические агенты, растворители и эмульгаторы, которые одобрены Управлением по контролю за продуктами и лекарствами (США) как приемлемые для человека или домашних животных. Неограничивающие иллюстративные эксципиенты включают карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и крахмалы, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли.

Введение соединений по изобретению или их фармацевтически приемлемых солей, в чистом виде или в виде подходящих фармацевтических композиций, можно проводить с использованием любых приемлемых путей введения для разработанных агентов для аналогичного применения. Фармацевтические композиции по изобретению могут быть получены путем объединения соединений по изобретению с подходящими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами и/или носителями и получения из них твердых, полутвердых, жидких или газообразных препаратов, таких как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, мази, эмульсии, суспензии, растворы, суппозитории, инъекционные препараты, препараты для ингаляций, гели, микросферы, аэрозоли и т.д.

Иллюстративные пути введения соединений по изобретению или их фармацевтически приемлемых солей, или их фармацевтических композиций включают, но не ограничиваются указанным, пероральную, ректальную, чрезслизистую доставку или наружную, чрезкожную, ингаляционную, парентеральную, сублингвальную, внутривлагалищную, внутриназальную, внутриглазную, внутрибрюшинную, внутримышечную, подкожную, внутривенную доставку. Пероральная доставка является предпочтительной.

Фармацевтические композиции по изобретению могут быть получены хорошо известными в данной области способами, такими как обычные процессы смешивания, растворения, гранулирования, изготовления покрытых сахаром пилюль, растирания в порошок, эмульгирования, лиофильной сушки и т.д.

В предпочтительных вариантах осуществления фармацевтические композиции предназначены для пероральной доставки. Для пероральной доставки фармацевтические композиции могут быть получены путем смешивания активных соединений с фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами и/или носителями, хорошо известными в данной области. Данные носители, эксципиенты и/или носители дают возможность введения соединений по изобретению в состав рецептур таблеток, пилюль, пастилок, покрытых сахаром препаратов, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, суспензий и тому подобного для перорального введения пациентам.

Твердые пероральные композиции могут быть получены обычными методами смешивания, упаковывания или таблетирования. Например, они могут быть получены путем смешивания активных соединений с твердыми эксципиентами, необязательно с измельчением полученной смеси, добавления, при необходимости, других вспомогательных добавок и последующей переработкой смеси в гранулы для получения таблеток или основной части для покрытых сахаром препаратов. Подходящие эксципиенты включают, но не ограничиваются указанным, наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, манит или сорбит, препараты целлюлозы, такие как кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал и картофельный крахмал, и другие вещества, такие как желатин, трагакантовая камедь, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиметилцеллюлоза натрия и/или поливинилпирролидон, дезинтегрирующие агенты, такие как сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота, также можно использовать соли, такие как альгинат натрия. Основа для покрытых сахаром препаратов необязательно может быть покрыта оболочкой в соответствии со способами, хорошо известными в общем виде в фармацевтической практике, в частности покрыты растворимой в кишечнике оболочкой.

Фармацевтические композиции также можно использовать для парентерального введения, как, например, в виде подходящих асептических растворов, суспензий или лиофильно высушенных продуктов в виде единичной дозированной формы. Можно использовать подходящие эксципиенты, такие как наполнители, буферные агенты или поверхностно-активные вещества.

Как отмечено выше, аномальная активность протеинтирозинкиназы вследствие мутации или сверхэкспрессии связана с различными заболеваниями. Например, аномальная активность протеинтирозинкиназ рецепторного типа EGFR и VEGFR связана со злокачественными опухолями человека. Семейство EGFR (HER-1) сверхэкспрессируется при опухолях яичника, головы и шеи, пищевода, шейки матки, мочевого пузыря, молочных желез, ободочной и толстой кишки, желудка, эндометрия и т.д. HER-2 сверхэкспрессируется при раке молочной железы, раке яичника, раке предстательной железы, раке легких, остеокарциноме и т.д. С-KIT тирозиникназы связаны со стромальной опухолью желудочно-кишечного тракта и мелкоклеточным раком легких. Экспрессия VEGFR при раке легких в значительной степени коррелирует с низкой степенью выживаемости при раке легких и играет важную роль при колоректальном раке.

Другой пример аномальной активности протеинтирозинкиназы также связан с отличающимися от опухолей заболеваниями: псориазом (Dvir et al., J.cell.Biol. 1991, 113, 857-865), фиброзом, сердечно-сосудистыми заболеваниями, такими как атеросклероз, рестеноз (Buchdunger et al., Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 1991, 92, 2258-2262), иммунными заболеваниями, такими как аутоиммунные заболевания, анафилаксия, астма, отторжение трансплантата (Klausner and Samelson, Cell. 1991, 64, 875-878), воспалением (Berkois, Blood, 1992, 79(9), 2446-2454), развитием сосудов, образованием тромбов (Salari et al., FEBS, 1990, 263(1), 104-108), заболеваниями нервной системы (Ohmichi et al., Biochemistry, 1992, 31, 4034-4039), циррозом печени, диабетом, офтальмопатией, атрофическим артритом и различными невропатиями.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с протеинтирозинкиназами, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединений формулы I, или их солей, или фармацевтических композиций или соединений формулы II, или их солей, или фармацевтических композиций. К заболеваниям, связанным с протеинтирозинкиназами, относятся опухоли, псориаз, фиброз, сердечно-сосудистые заболевания, такие как атеросклероз, рестеноз, иммунные заболевания, такие как аутоиммунные заболевания, анафилакция, астма, отторжение трансплантата, воспаление, развитие сосудов, образование тромбов, заболевания нервной системы, гепатоцирроз, диабет, офтальмопатии, атрофический артрит и различные невропатии. В ряду данных заболеваний, опухоли представляют собой предпочтительные заболевания, связанные с протеинтирозинкиназами.

Другой аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики опухолей, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединений формулы I, или их солей, или фармацевтических композиций или соединений формулы II, или их солей, или фармацевтических композиций. Примеры опухолей включают, но не ограничиваются указанным, карциному шейки матки, рак печени, рак легких, рак желудка, рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак яичников, рак предстательной железы, колоректальный рак, рак мочеполового тракта, меланому, рак сквамозных клеток, рак астроглиальных клеток, саркому Капоши и рак спонгиобластов. Иллюстративными примерами являются карцинома шейки матки, рак печени, рак легких, рак желудка, рак молочной железы и т.д.

Другой аспект изобретения дополнительно относится к способу лечения и/или профилактики заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединений формулы I, или их солей, или фармацевтических композиций или соединений формулы II, или их солей, или фармацевтических композиций. Фиброз тканей и органов представляет собой общую отличительную особенность таких заболеваний и пролиферация многочисленных фиброзных соединительных тканей является общим патогенезом таких заболеваний.

Примеры заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов, т.е. заболеваний, связанных с фиброзом тканей и органов, включают, но не ограничиваются указанным, фиброз легких, фиброз печени, хронический панкреатит, склеродерму, фиброз почечных клубочков, межтканевый фиброз почек и фиброз множества органов, являющийся следствием радиационной химиотерапии и трансплантации тканей, и т.д. Фиброз легких представляет собой «диффузное легочное внутритканевое заболевание». Фиброз печени представляет собой поражение, проявляющееся главным образом диффузной пролиферацией фиброзной соединительной ткани в печени. Хронический панкреатит представляет собой поражение, вызываемое различными факторами и проявляющееся главным образом в разрушении клеток поджелудочной железы и прогрессирующем фиброзе. Склеродерма представляет собой заболевание соединительной ткани, характеризуемое фиброзом тканей, облитерирующим васкулитом и продуцированием множества аутоантител.

Примеры

Следующие примеры приведены для того, чтобы дать возможность специалисту в данной области более ясно понять и осуществить изобретение. Их не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения, а только как его иллюстрацию и в качестве иллюстративных примеров изобретения. Специалисту в данной области будет понятно, что для получения соединений по изобретению возможны другие схемы синтеза и все нижеследующее приведено в качестве неограничивающих примеров.

Пример 1. Синтез N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280,0 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) добавляли к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и оставляли перемешиваться в течение 1,5 часов, затем добавляли (1-этилпирролидин-2-ил)метиламин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 131,86 г (476 ммоль) N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 47,6%, т.пл. 166-169^оС.

Пример 2. Синтез N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 1)

N-[(1-этилпирролидин-2-ил)этил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (277 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 311,6 г (760 ммоль) N-[(1-этилпирролидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 76,0%, т.пл. 232-236^оС. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1Н, NH), 10,80 (с, шир., 1Н, NH), 7,72 (c, 1Н, метиленовый водород), 7.37 (т, шир., 1Н, NH), 6,81-6,92 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 3,13-3,31 (кв, 1Н), 3,03-3,07 (кв, 2Н), 2,81-2,85 (м, 2Н), 2,80-2,83 (м, 1Н), 2,42 (с, 3Н), 2,48 (с, 3Н), 2,23-2,25 (кв, 2Н), 1,66-2,09 (м, 2Н), 1,02-1,05 (т, 3Н).

Пример 3. Синтез N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280,0 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) добавляли последовательно к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли (1-метилпирролидин-2-ил)этиламин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 139,1 г (502 ммоль) N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 50,2%, т.пл. 143-149^оС.

Пример 4. Синтез N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 2)

N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (277,1 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 346,5 г (845 ммоль) N-[(1-метилпирролидин-2-ил)этил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 84,5%, т.пл. 241-244^оС. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1Н, NH), 10,81 (с, шир., 1Н, NH), 7,73 (c, 1Н, метиленовый водород), 7.62 (т, шир., 1Н, NH), 6,84-6,94 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 3,39-3,43 (м, 1Н), 3,21-3,25 (т, 2Н), 2,51 (с, 3Н), 2,22 (с, 3Н), 2,08-2,11 (м, 2Н), 1,82-1,86 (м, 2Н), 1,58-1,64 (м, 2Н), 1,39-1,44 (м, 2Н).

Пример 5. Синтез N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) последовательно добавляли к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли пиперидин-2-ил-метиламин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na ₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 117,8 г (448 ммоль) N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 44,8%, т.пл. 107-115^оС.

Пример 6. Синтез N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 3)

N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (262,9 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 307,3 г (776 ммоль) N-[(пиперидин-2-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 77,6%, т.пл. 263-266^оС. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,67 (с, шир., 1Н, NH), 10,82 (с, шир., 1Н, NH), 7,74 (c, 1Н, метилен), 7.49 (т, шир., 1Н, NH), 6,83-6,94 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 4,40 (c, шир., 1Н, NH), 3,39-3,43 (м, 1Н), 3,16-3,18 (м, 2Н), 2,50 (с, 3Н), 2,60 (с, 3Н), 2,08-2,11 (м, 2Н), 1,82-1,86 (м, 2Н), 1,58-1,64 (м, 2Н), 1,38-1,44 (м, 2Н).

Пример 7. Синтез N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280,0 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) добавляли к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли пиперидин-4-ил-метиламин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na ₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 158,3 г (602 ммоль) N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 60,2%.

Пример 8. Синтез N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 4)

N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (263,0 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 258,2 г (652 ммоль) N-[(пиперидин-4-ил)метил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 65,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,66 (с, шир., 1Н, NH), 10,82 (с, шир., 1Н, NH), 7,68-7,74 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 7,62 (т, шир., 1Н, NH), 6,83 (c, 1Н, метиленовый водород), 4,41 (c, шир., 1Н, NH), 3,67-3,68 (м, 1Н), 3,50-3,66 (м, 2Н), 3,16-3,17 (м, 2Н), 2,50 (с, 3Н), 2,60 (с, 3Н), 1,71-1,82 (м, 2Н), 1,10-1,11 (м, 2Н).

Пример 9. Синтез N-(пирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280,0 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) добавляли к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли пирролидин-3-амин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO ₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 159,8 г (680 ммоль) N-(пирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 68,0%.

Пример 10. Синтез N-(пирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 5)

N-(пирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (235 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 326,0 г (886 ммоль) N-(пирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 88,6%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,69 (с, шир., 1Н, NH), 10,69 (с, шир., 1Н, NH), 6,79-6,92 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 7,26 (c, 1Н, метилен), 6,92 (т, шир., 1Н, NH), 3,67-3,68 (м, 1Н), 3,54-3,66 (м, 2Н), 3,16-3,22 (м, 2Н), 2,51 (с, 1Н, NH), 2,32 (с, 3Н), 2,33 (с, 3Н), 1,71-1,82 (м, 2Н).

Пример 11. Синтез N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (268,1 г, 1,4 моль), триэтиламин (280,0 мл), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (167,0 г, 1,0 моль) и 1-гидроксибензотриазол (189,2 г, 1,4 моль) добавляли к ДМФ (500 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли 1-бензилпирролидин-3-амин (1,2 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 120 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (300 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (300 мл × 3), сушили над безводным Na ₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали на силикагеле (элюировали смесью метанол:этилацетат = 1:1), получая 170,3 г (524 ммоль) N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде не совсем белого твердого вещества. Выход 52,4%.

Пример 12. Синтез N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 6)

N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (325 г, 1,0 моль), 5-фтор-2-индолон (151 г, 1,0 моль), этанол (2 л) и пирролидин (4 мл) смешивали и нагревали до 78^о С при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 360,4 г (787 ммоль) N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 78,7%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,64 (с, шир., 1Н, NH), 10,81 (с, шир., 1Н, NH), 7,68-7,74 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 7,26 (с, 1Н, изопропил), 6,92 (т, шир., 1Н, NH), 6,83-6,86 (м, 5Н, водород бензольного кольца), 3,67-3,68 (м, 1Н), 3,50-3,669 (м, 2Н), 3,16-3,17 (м, 2Н), 2,32 (с, 3Н), 2,33 (с, 3Н), 1,71-1,82 (м, 2Н), 1,10-1,11 (м, 2Н).

Пример 13. Синтез N-[4-(диметиламино)фенил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли N,N-диметил-п-фенилендиамин (1,09 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (25 мл ×3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (30 мл ×3), сушили над безводным Na₂SO ₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,682 г (2,4 ммоль) N-[4-(диметиламино)фенил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 59,9%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,92 (с, шир., 1H, NH), 9,64 (с, 1H), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,77-6,74 (д, 2H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H).

Пример 14. Синтез N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид хлоруксусной кислоты (4,52 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору N,N-диметил-п-фенилендиамина (5,48 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 8,1 г (38.2 ммоль) маслянистого остатка. Выход 95,6%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 5,9 г (30,8 ммоль) маслянистого остатка. Выход 80,6%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,54 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,85 г (2,49 ммоль) N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 62,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,67 (с, 1H), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,77-6,74 (д, 2H), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H).

Пример 15. Синтез N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп- 2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

2-Бромпропионилбромид (9,2 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору N,N-диметил-п-фенилендиамина (5,48 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 7,74 г (34,24 ммоль) маслянистого остатка. Выход 85,6%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45 ^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 6,28 г (30,33 ммоль) маслянистого остатка. Выход 88,6%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,66 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,786 г (2,21 ммоль) N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида, выход 55,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,67 (с, 1H), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,77-6,74 (д, 2H), 4,71 (м, 1H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H), 1,48-1,41 (д, 3H).

Пример 16. Синтез N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид хлоруксусной кислоты (4,52 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору N,N-диметил-п-фенилендиамина (4,64 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 7,40 г (38,52 ммоль) маслянистого остатка. Выход 96,3%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 5,68 г (32,82 ммоль) маслянистого остатка. Выход 85,2%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,38 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,625 г (1,94 ммоль) N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 48,5%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,75 (с, 1H), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,64 (м, шир., 1H, CONHCH₂ ), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,14-3,10 (м, 2H), 2,57-2,55 (м, 2H), 2,46-2,40 (м, 4H), 2,26-2,20 (с, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,06-1,01 (м, 6H).

Пример 17. Синтез N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид хлоруксусной кислоты (4,52 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору (1-этилпирролидин-2-ил)метиламина (5,68 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 7,39 г (36,12 ммоль) маслянистого остатка. Выход 90,3%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 5,49 г (29,69 ммоль) маслянистого остатка. Выход 82,2%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,48 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,786 г (2,35 ммоль) N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 58,8%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., H, NH), 9,75 (с, 1H), 7,74 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,51 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 3,85-3,83 (д, 2H), 3,07-3,03 (м, 2H), 2,85 (м, 1H), 2,49-2,46 (м, 2H), 2,32-2,30 (м, 2H), 2,37-2,33 (м, 3H), 2,14-2,10 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,06- 1,01 (м, 3H).

Пример 18. Синтез N-{1-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

2-Бромпропионилбромид (9,2 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору (1-этилпирролидин-2-ил)метиламина (5,68 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 7,10 г (32,48 ммоль) маслянистого остатка. Выход 81,2%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 5,95 г (29,91 ммоль) маслянистого остатка. Выход 92,1%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,59 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,696 г (2,0 ммоль) N-{1-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 49,8%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,75 (с, 1H,), 7,72 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,70 (м, шир., 1H, CONHCH₂ ), 4,71 (м, 1H), 3,07-3,03 (м, 2H), 2,85 (м, 1H), 2,49-2,46 (м, 2H), 2,37-2,31 (м,3H), 2,30 (м, 2H), 2,14-2,09 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,48-1,41 (д, 3H), 1,07-1,04 (м, 3H).

Пример 19. Синтез N-{2-[(2-метилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид хлоруксусной кислоты (4,52 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(1-метилпирролидин-2-ил)метиламина (5,68 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 7,33 г (35,84 ммоль) маслянистого остатка. Выход 89,6%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 5,70 г (30,82 ммоль) маслянистого остатка. Выход 86,0%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, затем добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,48 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали органическими растворителями (смесь 10% метанола/дихлорметан) (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,783 г (2,34 ммоль) N-{2-[(2-метилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 58,6%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,75 (с, 1H), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,64 (м, шир., 1H, CONHCH₂ ), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,12-3,10 (м, 2H), 2,86 (м, 1H), 2,37-2,31 (м, 3H), 2,30-2,22 (м, 2H), 2,26-2,20 (с, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H).

Пример 20. Синтез N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

2-Бромпропионилбромид (9,2 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламина (5,68 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Дихлорметан отгоняли, получая 7,96 г (36,52 ммоль) маслянистого остатка. Выход 91,3%.

Полученный на стадии выше маслянистый остаток и водный аммиак (28%, 300 мл) добавляли к метанольному раствору (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Метанол отгоняли, получая 6,49 г (32,61 ммоль) маслянистого остатка. Выход 89,3%.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли маслянистый остаток, полученный на стадии выше (1,59 г, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,768 г (2,21 ммоль) N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 55,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,75 (с, 1H), 7,78 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,77 (м, шир., 1H, CONHCH₂ ), 4,71 (м, 1H), 3,12-3,10 (м, 2H), 2,86 (м, 1H), 2,37-2,31 (м, 3H), 2,30-2,22 (м, 2H), 2,26-2,20 (с, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,48-1,41 (д, 3H).

Пример 21. Синтез N-[4-(диметиламино)фенил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 7)

N-[4-(диметиламино)фенил]-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (2,84 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 2,52 г (6,02 ммоль) N-[4-(диметиламино)фенил]-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 60,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,92 (с, шир., 1H, NH), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,71 (с, 1H), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,81-6,92 (м, 3H), 6,77-6,74 (д, 2H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H).

Пример 22. Синтез N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 8)

N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,41 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,11 г (6,55 ммоль) N-{2-[4-(диметиламино)анилино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества, выход 65,5%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,71 (с, 1H), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,81-6,92 (м, 3H), 6,77-6,74 (д, 2H), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H).

Пример 23. Синтез N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 9)

N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,56 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,44 г (7,03 ммоль) N-{1-[4-(диметиламино)анилино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 70,3%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 9,34 (с, шир., 1H, NH), 7,71 (с, 1H), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,54-7,52 (д, 2H), 6,81-6,92 (м, 3H), 6,11-6,14 (д, 2H), 4,71 (м, 1H), 3,38-2,58 (с, 6H), 2,58-2,56 (м, 3H), 2,55-2,41 (м, 3H), 1,48-1,41 (д, 3H).

Пример 24. Синтез N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 10)

N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,22 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,74 г (8,22 ммоль) N-{2-[2-(диэтиламино)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 82,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 7,71 (с, 1H), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,64 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 6,81-6,92 (м, 3H), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,14-3,10 (м, 2H), 2,57 -2,55 (м, 2H), 2,46-2,40 (м, 4H), 2,26-2,20 (с, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,06-1,01 (м, 6H).

Пример 25. Синтез N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 11)

N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,34 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 2,70 г (5,78 ммоль) N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 11) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 57,8%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 7,74 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,73 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,71 (с, 1H), 6,81-6,92 (м, 3H), 3,85-3,83 (д, 2H), 3,07-3,03 (м, 2H), 2,85 (м, 1H), 2,49-2,46 (м, 2H), 2,32-2,30 (м, 2H), 2,23-2,20 (м, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,06-1,01 (м, 3H).

Пример 26. Синтез N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 12)

N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,48 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 2,73 г (5,86 ммоль) N-{2-[(1-этилпирролидин-2-ил)метиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 12) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 58,6%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,65 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 7,74 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,73 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,71 (с, 1H), 6,81-6,92 (м, 3H), 4,71 (м, 1H), 3,07-3,03 (м, 2H), 2,85 (м, 1H), 2,49-2,46 (м, 2H), 2,32-2,30 (м, 2H), 2,23-2,20 (м, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,47-1,41 (д, 3H), 1,06-1,01 (м, 3H).

Пример 27. Синтез N-{2-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 13)

N-{2-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,45 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,08 г (6,59 ммоль) N-{2-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 13) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 65,9%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,69 (с, шир., 1H, NH), 10,83 (с, шир., 1H, NH), 7,74 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,73 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,71 (с, 1H), 6,81-6,92 (м, 3H), 3,85-3,83 (д, 2H), 3,12-3,10 (м, 2H), 2,86 (м, 1H), 2,37-2,31 (м, 3H), 2,30-2,22 (м, 2H), 2,23-2,20 (м, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H).

Пример 28. Синтез N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 14)

N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,48 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 2,29 г (4,77 ммоль) N-{1-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)этиламино]-1-оксопроп-2-ил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 14) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 47,7%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,68 (с, шир., 1H, NH), 10,82 (с, шир., 1H, NH), 7,74 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,73 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,71 (с, 1H), 6,81-6,92 (м, 3H), 4,71 (м, 1H), 3,12-3,10 (м, 2H), 2,86 (м, 1H), 2,37-2,31 (м, 3H), 2,30-2,22 (м, 2H), 2,23-2,20 (м, 3H), 2,12-2,08 (м, 3H), 1,68-1,64 (м, 2H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,56-1,54 (м, 2H), 1,48-1,41 (д, 3H).

Пример 29. Синтез N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид 2-хлоруксусной кислоты (4,5 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору 1-бензилпирролидин-3-амина (7,04 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 9,85 г (39,08 ммоль) маслянистого остатка. Выход 97,7%.

Маслянистый остаток, полученный на стадии выше, и водный аммиак (300 мл) добавляли к раствору метанола (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 7,85 г (33,69 ммоль) маслянистого остатка. Выход 86,2 %.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) последовательно добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли соединение (1,86 г, 8 ммоль), полученное на стадии выше. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,614 г (1,61 ммоль) N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 40,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,81 (с, шир., 1H, NH), 9,64 (с, 1H), 7,63 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 6,92 (т, шир., 1H, NH), 6,83-6,86 (м, 5H, водород бензольного кольца), 3,81-3,75 (д, 2H), 3,67-3,68 (м, 1H), 3,50-3,669 (м, 2H), 3,16-3,17 (м, 2H), 2,32 (с, 3H), 2,33 (с, 3H), 1,71-1,82 (м, 2H), 1,10-1,11 (м, 2H).

Пример 30. Синтез N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 15)

N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,82 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,72 г (7,22 ммоль) N-{2-[(1-бензилпирролидин-3-ил)амино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 15) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 72,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,64 (с, шир., 1Н, NH), 10,81 (с, шир., 1Н, NH), 7,68-7,74 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 7,63 (м, шир., 1Н, CONHCH ₂), 7,26 (c, 1Н), 6,92 (т, шир., 1Н, NH), 6,83-6,86 (м, 5Н, водород бензольного кольца), 3,81-3,75 (д, 2Н), 3,67-3,68 (м, 1Н), 3,50-3,669 (м, 2Н), 3,16-3,17 (м, 2Н), 2,32 (с, 3Н), 2,33 (с, 3Н), 1,71-1,82 (м, 2Н), 1,10-1,11 (м, 2Н).

Пример 31. Синтез N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид 2-хлоруксусной кислоты (4,5 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-аминометилпиперидина (4,56 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 7,02 г (36,96 ммоль) маслянистого остатка. Выход 92,4%.

Маслянистый остаток, полученный на стадии выше, и водный аммиак (300 мл) добавляли к раствору метанола (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 5,37 г (31,42 ммоль) маслянистого остатка. Выход 85,0 %.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли соединение (1,37 г, 8 ммоль), полученное на стадии выше. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na ₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 7.99 г (2,50 ммоль) N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 62,4%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,82 (с, шир., 1H, NH), 7,71 (с, 1H), 7,67 (м, шир., 1H, CONHCH₂), 7,49 (т, шир., 1H, NH), 4,40 (с, шир., 1H, NH), 3,81-3,73 (д, 2H), 3,39-3,43 (м, 1H), 3,16-3,18 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 2,60 (с, 3H), 2,08-2,11 (м, 2H), 1,82-1,86 (м, 2H), 1,58-1,64 (м, 2H), 1,39-1,44 (м, 2H).

Пример 32. Синтез N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 16)

N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,2 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 2,95 г (6,52 ммоль) N-{2-[(пиперидин-2-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 16) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 65,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,67 (с, шир., 1Н, NH), 10,82 (с, шир., 1Н, NH), 7,74 (с, 1Н, метин), 7,67 (м, шир., 1Н, CONHCH₂), 7,49 (т, шир., 1Н, NH), 6,83-6,94 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 4,40 (с, шир., 1Н, NH), 3,81-3,73 (д, 2Н), 3,39-3,43 (м, 1Н), 3,16-3,18 (м, 2Н), 2,50 (с, 3Н), 2,60 (с, 3Н), 2,08-2,11 (м, 2Н), 1,82-1,86 (м, 2Н), 1,58-1,64 (м, 2Н), 1,39-1,44 (м, 2Н).

Пример 33. Синтез N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида

Хлорангидрид 2-хлоруксусной кислоты (4,5 г, 40 ммоль) добавляли по каплям к раствору 4-аминометилпиперидина (4,56 г, 40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании примерно при 0^оС. После этого реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 6,74 г (35,68 ммоль) маслянистого остатка. Выход 89,2%.

Маслянистый остаток, полученный на стадии выше, и водный аммиак (300 мл) добавляли к раствору метанола (300 мл) и перемешивали примерно при 45^оС до завершения реакции по данным тонкослойной хроматографии (ТСХ). Растворитель отгоняли, получая 5,04 г (29,47 ммоль) маслянистого остатка. Выход 82,6 %.

Гидрохлорид 1-этил-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,074 г, 5,6 ммоль), триэтиламин (1,12 мл, 8 ммоль), 5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-муравьиную кислоту (0,668 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,756 г, 5,6 ммоль) добавляли к ДМФ (10 мл) при перемешивании примерно при 0^оС и перемешивали в течение 1,5 часов, и добавляли соединение (1,37 г, 8 ммоль), полученное на стадии выше. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции в соответствии с данными тонкослойной хроматографии (ТСХ). Добавляли 1,2 мл воды и 1 мл насыщенного водного раствора соли и смесь экстрагировали смесью 10% метанола/дихлорметан (25 мл × 3), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором соли (25 мл × 3), сушили над безводным Na ₂SO₄ и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток затем хроматографировали (колоночная хроматография на силикагеле, элюент: метанол:этилацетат = 1:2), получая 0,682 г (2,13 ммоль) N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида. Выход 53,3%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,82 (с, шир., 1H, NH), 7,65 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 7,62 (т, шир., 1H, NH), 7,58 (м, шир., 1H, CONHCH ₂), 4,41 (с, шир., 1H, NH), 3,85-3,80 (д, 2H), 3,67-3,68 (м, 1H), 3,50-3,66 (м, 2H), 3,16-3,17 (м, 2H), 3,02-3,09 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 2,60 (с, 3H), 1,71-1,82 (м, 2H), 1,10-1,11 (м, 2H).

Пример 34. Синтез N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 17)

N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-формил-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамид (3,2 г, 10 ммоль), 5-фтор-2-индолон (1,51 г, 10 ммоль), этанол (20 мл) и пирролидин (0,04 мл) смешивали и нагревали до 78 ^оС при перемешивании и оставляли для протекания реакции при данной температуре в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и собранное твердое вещество перекристаллизовывали из этанола, сушили, получая 3,18 г (7,02 ммоль) N-{2-[(пиперидин-4-ил)метиламино]-2-оксоэтил}-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-метилен)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-формамида (соединение 17) в виде желто-оранжевого твердого вещества. Выход 70,2%. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 13,66 (с, шир., 1Н, NH), 10,82 (с, шир., 1Н, NH), 7,68-7,74 (м, 3Н, водород бензольного кольца), 7,65 (м, шир., 1Н, CONHCH ₂), 7,62 (т, шир., 1Н, NH), 6,83 (с, 1Н, метиновый водород), 4,41 (с, шир., 1Н, NH), 3,85-3,80 (д, 2Н), 3,67-3,68 (м, 1Н), 3,50-3,66 (м, 2Н), 3,16-3,17 (м, 2Н), 3,02-3,09 (м, 2Н), 2,50 (с, 3Н), 2,60 (с, 3Н), 1,71-1,82 (м, 2Н), 1,10-1,11 (м, 2Н).

Пример 35. Анализ противоопухолевой активности

Данные исследования проводили с использованием экспериментов, обычных в данной области. В частности, использовали следующие материалы и методы.

Тестируемые соединения.

Сунитиниб, соединения 1-3, паклитаксель.

Клеточные линии.

Клетки Hela рака шейки матки человека, клетки рака печени человека SMMC-7721, клетки рака легких человека А549, слабо дифференцированные клетки желудочной аденокарциномы человека BGC-823, клетки рака молочной железы человека MDA-MB-231.

Примечание: клетки Hela, BGC-823, SMMC-7721 представляют собой обычно используемые клеточные линии, клетки А549, MDA-MB-231 являются сунитиниб-чувствительными клеточными линиями.

3. Методы

В колбу, содержащую клетки в хорошем состоянии в экспоненциальной фазе роста, добавляли 0,25% раствор трипсина. Расщепление приводило к выпадению слипшихся клеток и клетки подсчитывали (0,5-1х10 ⁴ клеток/мл) и получали из них суспензию клеток. Суспензию клеток высевали в 96-луночный планшет в количестве 100 мкл/лунку, инкубировали в СО₂-инкубаторе в течение 24 часов. Добавляли тестируемые соединения из расчета 20 мкл/лунку с последующим добавлением 80 мкл среды, содержащей 10% сыворотки крови, и инкубировали в течение 48 часов. В лунки 96-луночного планшета добавляли 20 мкл/лунку МТТ (5 мг/мл) и клетки инкубировали в течение 4 часов в инкубаторе. После удаления супернатанта добавляли 150 мкл/лунку ДМСО и клетки встряхивали в горизонтальной качалке в течение 10 минут. Для каждой лунки измеряли значение оптической плотности (ОП) с использованием анализатора ELISA при 490 нм и рассчитывали степень ингибирования клеток. Соответствующий растворитель использовали в качестве отрицательного контроля и паклитаксель использовали в качестве положительного контроля.

1. Критерии оценки противоопухолевой активности (NCI)

Критерии для оценки активности соединения показаны в следующей таблице.

Таблица 1
Соединение мкг/мл	Степень ингибирования клеток	Активность
1	50
10	50	Высокая (***)
100	50
1	<50
10	50	Средняя (**)
100	50
1	<50
10	<50	Слабая (*)
100	50

4. Результаты

Пример 36. Анализ противоопухолевой активности

Анализ активности соединений по изобретению проводили с использованием общепринятых методов в данной области. Коммерчески доступный сунитиниб использовали в качестве положительного контроля и в качестве иллюстративных опухолевых клеточных линий использовали клетки рака легких Н460, клетки рака толстой кишки COLO205 и НТ29, клетки рака молочной железы А435. Тестируемые соединения получали способами, описанными в примерах выше.

1. Клеточные линии

Клетки рака легких Н460, клетки рака толстой кишки COLO205 и НТ29, клетки рака молочной железы А435.

2. Методы

2.1. Ингибирование пролиферации опухолевых клеток in vitro

Тест проводили в соответствии с методами проведения эксперимента, общепринятыми в данной области, и, в частности, использовали следующий метод.

Определенное количество (100 мкл/лунку, 0,5-1х10 ⁴ клеток/мл) клеток рака легких Н460, клеток рака толстой кишки COLO205 и НТ29, клеток рака молочной железы А435 и т.д. в логарифмической фазе роста высевали в 96-луночном планшете и инкубировали в инкубаторе в течение 24 часов при 37^о С и 5% СО₂. После этого добавляли тестируемые соединения и положительный контроль (20 мкл/лунку) с последующим добавлением затем 80 мкл среды, содержащей 10% сыворотки крови, и затем опухолевые клетки инкубировали дополнительно в течение 48 часов при 37 ^оС и 5% СО₂. После этого в лунки 96-луночного планшета (20 мкл/лунку) добавляли МТТ (5 мг/мл) и клетки инкубировали еще в течение 4 часов. После удаления супернатанта клетки растворяли в ДМСО (150 мкл/лунку) и проводили измерение с использованием ридера для микропланшетов при 490 нм.

2.2. Ингибирование роста клеток рака НТ29 человека, трансплантированных «голым» мышам

Получали кусок опухолевой ткани в интенсивной фазе роста, нарезали на кусочки размером примерно 1,5 мм³ и инокулировали подкожно в правую подмышечную область «голым» мышам в асептических условиях. Диаметр трансплантированных опухолей у «голых» мышей измеряли с использованием нониусного штангенциркуля. После того, как опухоль вырастала до 100-300 мм³, животных статистически подразделяли на 6 групп: модельная контрольная группа, группа сунитиниба (30 мг/кг), группа соединения 1 (30 мг/кг), группа соединения 2 (30 мг/кг), группа соединения 3 (30 мг/кг), группа соединения 4 (30 мг/кг). Соединения 1-4 и сунитиниб постоянно вводили внутрижелудочно в дозе 0,1 мл/10 г в течение 21 дня один раз в день. Тем временем, животным в группе отрицательного контроля вводили эквивалентное количество стерильного физиологического раствора. Динамическое наблюдение противоопухолевого действия соединений 1-4 и сунитиниба проводили путем измерения диаметра опухолей. Объем опухоли измеряли 2-3 раза в неделю и в тот же момент времени определяли и регистрировали массу тела «голых» мышей. Ежедневно наблюдали и регистрировали общее поведение «голых» мышей.

Индикаторы регистрации и методы расчета

(1) Объем опухоли (ОО) рассчитывали по уравнению:

ОО=1/2×a× b²

где a, b представляют собой длину и ширину, соответственно.

(2) Относительный объем опухоли (ООО) рассчитывали по уравнению:

ООО=OO_t/OO₀

где OO₀ представляет собой объем опухоли в начале введения в отдельных клетках (т.е. день 0 (d ₀)). OO_t представляет собой объем опухоли при каждом измерении.

(3) Относительная степень пролиферации опухоли T/C (%)

T/C (%) = (TOOO/COOO)x100%

TOOO: ООО группы положительного контроля и каждой группы тестируемого соединения. COOO: ООО модельной контрольной группы.

3. Результаты

3.1. Ингибирование пролиферации клеток in vitro

Таблица 3 Терапевтическое действие на клетки НТ29 рака человека, трансплантированные «голым» мышам.
Образцы	IC50 (мкМ)
	H460	COLO205	A435
Соединение 1	0,061	0,078	0,063
Соединение 2	0,16	0,11	0,085
Соединение 3	0,14	0,11	0,068
Соединение 4	0,58	0,40	0,22
Соединение 6	0,33	0,22	0,087
Соединение 7	0,23	0,17	0,082
Соединение 8	0,17	0,16	0,091
Соединение 11	0,41	0,28	0,15
Соединение 12	0,44	0,31	0,16
Сунитиниб	0,68	0,55	0,63

Вышеприведенные результаты указывают на то, что все соединения по изобретению демонстрируют превосходящую степень ингибирования in vitro пролиферации опухолевых клеток H460, COLO205, A435 и т.д. по сравнению с контрольным лекарственным средством - сунитинибом.

3.2. Ингибирование роста клеток НТ29 рака человека, трансплантированных «голым» мышам

Результаты показаны в таблице 4 и на фиг.1 и они указывают, что тестируемые соединения и сунитиниб, при постоянном введении внутрижелудочно в дозе 30 мг/кг, проявляют сильное ингибирование роста клеток НТ29 рака толстой кишки человека, трансплантированных «голым» мышам, и T/C (%) составляют 51,5, 10.1, 17,8, 15,0 и 41,0 соответственно, при этом соединение 1 демонстрирует наиболее сильное ингибирование пролиферации опухоли.

Таблица 4 Терапевтическое действие на клетки НТ29 рака человека, трансплантированные «голым» мышам.
Группа	Доза мг/кг	Число	Масса тела (г)	ОО	ООО	T/C (%)
начало	конец	d0	d21	d0	d21
Модельная контрольная группа	-	8	8	19,9±2,1	21,1±1,2	198,0±65,1	1671,3±634,7	8,8±4,0	-
Сунитиниб	30	6	6	20,4±2,0	21,0±1,9	198,2±62,4	911,8±481,7	4,6±1,5*	51,5
Группа соединения 1	30	6	6	20,2±1,9	21,5±1,3	194,7±57,7	163,7±33,6	0,8±0,2**	10,0
Группа соединения 2	30	6	6	19,7±1,7	19,7±1,6	193,5±61,9	342,9±284,7	1,6±0,9**	17,8
Группа соединения 3	30	6	6	20,6±2,0	20,8±2,3	196,7±62,7	209,4±238,4	1,3±0,7**	15,0
Группа соединения 4	30	6	6	20,0±2,2	20,3±1,5	195,0±67,4	791,7±815,0	3,6±3,2*	41,0
d0: время введения в отдельных клетках. ** З<0,01, * P<0,05 по сравнению с модельной контрольной группой

Пример 37. Ингибирование пролиферации фибробластов

Способ, общепринято используемый в настоящее время для исследования заболеваний, связанных с пролиферацией фибробластов, т.е. для исследования фиброза тканей и органов, заключается в измерении действия тестируемых соединений на пролиферацию клеток NIH/3T3 (Gao Z.M., Wan K., Effect of inhibition NIH/3T3 ctll proliferation by Cantharidin on prevention and treatment of organ and tissue fibrosis. Chinese Journal of Clinical Rehabiliration, 2004(2). Tao Y.Y., Wang X.L. Effects if Salvianolic Acid-B on TGF- 1/ERK Signalling Transduction in NIH/3T3 Fibroblast. Journal of Capital medical University, 2007(2)).

1. Клетки

Фибробласты NIH/3T3

2. Метод

Исследование проводили с использованием общепринятых методом проведения эксперимента для данной области. В частности, использовали следующий метод.

Фибробласты NIH/3T3 в логарифмической фазе роста высевали в лунки 96-луночного планшета при определенном числе клеток (100 мкл/лунку, 0,5-1×10 ⁴ клеток/мл). После инкубирования в течение 24 часов добавляли образцы для скрининга (20 мкл/лунку) (добавляли непосредственно после высевания клеточной суспензии в планшет), инкубировали дополнительно в течение 48 часов при 37^оС и 5% СО ₂. После этого в лунки 96-луночного планшета (20 мкл/лунку) добавляли МТТ (5 мг/мл). Клетки инкубировали еще в течение 4 часов и затем растворяли в ДМСО (150 мкл/лунку) и проводили измерение с использованием ридера для микропланшетов при 490 нм. Рассчитывали степень ингибирования и значения IC₅₀.

3. Результаты

Клетки NIH/3T3 приняты в качестве модели скрининга in vitro в родной стране авторов данного изобретения и за рубежом. В исследовании проводят наблюдение действия соединений по изобретению на пролиферацию NIH/3T3 и оно обеспечивает экспериментальное подтверждение их клинического применения для профилактики и лечения заболеваний, связанных с фиброзом.

Результаты показывают, что тестируемые соединения проявляют доза-зависимое ингибирование пролиферации клеток NIH/3T3. Значения IC₅₀ приведены в таблице 5. экспериментальные данные показывают, что соединения по изобретению обладают терапевтическим действием на фиброзные заболевания, связанные с пролиферацией.

Таблица 5 Ингибирование пролиферации клеток NIH/3T3 in vitro
Исследуемые соединения	IC50 (мкМ)
Соединение 1	0,205
Соединение 2	0,536
Соединение 3	0,530
Соединение 4	1,185
Соединение 6	0,698
Соединение 7	0,505
Соединение 8	0,884