новые замещенные диазаспиропиридиноновые производные для применения в лечении мсн-1-опосредованных заболеваний

Формула изобретения

1. Соединение формулы (I)



его фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная соль,

где А представляет собой радикал формулы (II)



где k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 0, 1, 2, 3 или 4, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3, 4 или 5; где один из -СН₂-фрагментов может быть заменен на атом О; и где каждый из -СН₂-фрагментов может быть замещен оксогруппой;

X представляет собой СН или N;

R³ выбран из группы, включающей водород, С_1-5алкил и С_3-6 циклоалкил;

R⁴, R⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы,

включающей водород, галоген, оксо, С_1-3алкил и С_1-3алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю, 1, 2 или 3;

q представляет собой целое число, равное нулю, 1, 2 или 3;

Y¹, Y³, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь и О;

Y² представляет собой насыщенный или ненасыщенный С_1-6углеводородный радикал с прямой цепью;

В выбран из группы, включающей фенил, необязательно замещенный r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из галогена; и где r представляет собой целое число, равное нулю, 1 или 2;

алкил представляет собой насыщенный углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, содержащий указанное число атомов углерода; где указанный радикал необязательно может быть замещен на одном или нескольких атомах углерода одним или несколькими радикалами, выбранными из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио и формил; и

галоген представляет собой фтор, хлор, бром или йод.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 1, 2 или 3, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3 или 4.

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что А выбран из группы, включающей (а-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (с-2)

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что А представляет собой радикал формулы (сс-2)

5. Соединение по п.1, отличающееся тем, что А представляет собой радикал формулы (аа-1) или (bb-1).

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что каждый из R⁴ и R⁵ независимо друг от друга выбран из группы, включающей водород, галоген, С_1-3 алкил и С_1-3алкилокси.

7. Соединение по п.1, отличающееся тем, что р равно нулю или 1.

8. Соединение по п.1, отличающееся тем, что q равно нулю.

9. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Y² выбран из группы, включающей

-СН₂-, -СН₂СН₂ - и -СН=СН-.

10. Соединение по п.1, отличающееся тем, что В представляет собой фенил.

11. Соединение по п.1, отличающееся тем, что фрагмент B-Y¹-Y²-Y³ выбран из радикалов (a1-2), (a1-3) и (a1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2;

12. Соединение по п.1, его фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная соль, где

k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 1, 2 или 3, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3 или 4; где один из -СН₂-фрагментов может быть заменен на атом О; и где каждый из -СН₂-фрагментов может быть замещен оксогруппой;

X представляет собой СН или N;

R³ выбран из группы, включающей водород, С _3-6циклоалкил и С_1-5алкил;

R⁴ , R⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы,

включающей водород, галоген, С_1-3алкил и С_1-3алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

Y¹, Y³, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь или О;

Y² представляет собой насыщенный или ненасыщенный С_1-6углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью; и

В представляет собой фенил, необязательно замещенный одним

галогеновым заместителем R⁶.

13. Соединение по п.1, его фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная соль, где

А выбран из группы, включающей (а-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (с-2),





X представляет собой СН или N;

R ³ выбран из группы, включающей водород, С_3-6 циклоалкил и С_1-5алкил;

R⁴, R ⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород, галоген, С_1-3алкил и С_1-3 алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

фрагмент B-Y¹-Y²-Y³ выбран из радикалов (a1-2), (a1-3) и (a1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶



R⁶ представляет собой галогеновый заместитель; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2.

14. Соединение по п.1, его фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная соль, в котором

А выбран из группы, включающей (а-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (с-2),





X представляет собой СН или N;

R ³ выбран из группы, включающей водород, С_3-5 циклоалкил и С_1-3алкил;

R⁴, R ⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород, галоген, С_1-3алкил и С_1-3 алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

Y¹, Y³, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь или О;

Y² представляет собой насыщенный или ненасыщенный С_1-6углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью; и

В представляет собой фенил, необязательно замещенный одним галогеновым заместителем R⁶.

15. Соединение по п.1, его фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная соль, где

А выбран из группы, включающей (а-1) или (b-1);



X представляет собой СН;

R³ представляет собой метил;

R⁴, R⁵ , каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород или галоген;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

Y¹ представляет собой простую связь;

Y³ представляет собой О;

Y ² представляет собой СН₂ и

В представляет собой фенил.

16. Соединение по любому из пп.1-15 для применения в качестве лекарственного средства для предупреждения и/или лечения заболеваний, где антагонизм МСН-1-рецептора является терапевтически полезным.

17. Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-15 для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения психиатрических расстройств, включая, но, не ограничиваясь этим, состояние беспокойства, расстройство пищевого поведения, аффективные расстройства, такие как биполярные расстройства и депрессия, психозы, такие как шизофрения, и расстройства сна; ожирения; диабета; сексуальных расстройств и неврологических расстройств.

18. Способ получения фармацевтической композиции по п.17, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемый носитель тщательно смешивают с терапевтически эффективным количеством соединения по любому из пп.1-15.

19. Применение соединения по любому из пп.1-15 или фармацевтической композиции по п.17, для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения психиатрических расстройств, включая, но не ограничиваясь этим, состояние беспокойства, расстройство пищевого поведения, аффективные расстройства, такие как биполярные расстройства и депрессия, психозы, такие как шизофрения, и расстройства сна; ожирения; диабета; сексуальных расстройств и неврологических расстройств.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к арил- и гетероарилзамещенным диазаспиропиридиноновым производным, обладающим антагонистической активностью в отношении меланинконцентрирующего гормона (MCH), в частности активностью в отношении MCH-1. Изобретение также относится к их получению, включающим их композициям и их применению в качестве лекарственного средства.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Меланинконцентрирующий гормон (MCH) представляет собой циклический полипептид, состоящий из 19-аминокислот, который в основном продуцируется нейронами гипоталамуса, широко распространенными в центральной нервной системе (ЦНС) (J. Comp. Neurol. (1992) 319, 218-245). MCH осуществляет свои эффекты опосредованно через два G белоксвязанных рецептора (GPCR), обозначаемых как MCH-1 и MCH-2 (описаны в Doggrell, 2003). В то время как у грызунов экспрессируется только MCH-1-рецептор, у человека и приматов имеет место экспрессия обоих рецепторов, MCH-1 и MCH-2 (Genomics (2002), 79, 785-792). Изначально MCH-1-рецептор считался ценной мишенью для лечения ожирения, поскольку MCH активирует пищевое поведение у грызунов (Nature (1996), 380, 243-247). Однако недавно было показано, что антагонизм MCH-1 дает анксиолитические и антидепрессивные профили у грызунов (Nat. Med. (2002) 8, 825-830; Neuropharmacology (2004), 46, 457-467; Neuropsychopharmacology (2006), 31(1), 112-120; Neuropsychopharmacology (2006), 31(6), 1135-1145). Таким образом, в настоящее время считается общепринятым, что MCH-рецепторы, в частности MCH-1-рецептор, являются важной мишенью при лечении спектра аффективных расстройств (Eur. J. Neuroscience (2000) 12, 1194-1216).

мРНК MCH-1-рецептора и белок распространены в различных ядрах гипоталамуса, включая паравентрикулярное ядро, и некоторых лимбических структурах, все из которых участвуют в регуляции эмоций и стресса (Eur. J. Neuroscience (2000) 12, 1194-1216). Кроме того, плотное мечение было обнаружено в прилегающей к ядру оболочке (J. Comp. Neurol. (2001) 435, 26-40). Было обнаружено, что инъекция MCH непосредственно в паравентрикулярное ядро повышает уровень в плазме адренокортикотропного гормона (ACTH) и изменяет архитектуру сна (Verret et al. 2003, BMC Neurosci 4:19). MCH также индуцирует выделение кортикотропинвысвобождающего гормона (CRF) из гипоталамических эксплантатов, эффект, который является чувствительным к блокаде антагонистом MCH-1-рецептора (J. Neuroendrocrinol. (2003) 15, 268-2729). Таким образом, представляется вероятным, что стимуляция MCH-1-рецепторов вызывает активацию оси гипоталамус - гипофиз - надпочечники (HPA) через повышение выделения CRF. Инъекция MCH в прилегающую к ядру оболочку, где в большом количестве присутствует MCH-1-рецептор, усиливала неподвижность в испытании вынужденного плавания у крыс, что говорит об усилении депрессивного поведения (Soc. Neurosci. Abstr. (2004) 763,9). Более того, Borowsky et al. (Nat. Med. (2002) 8, 825-830) сообщали об антагонисте MCH-1, SNAP-7941, который показал антидепрессант- и анксиолитикподобные действия в испытаниях грызунов, подтверждая роль в отношении MCH-1-рецептора при депрессии и состоянии беспокойства.

ИЗВЕСТНЫЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В настоящее время многие компании предпринимают активные попытки разработки антагонистов MCH-1, и были сообщения в некоторых патентных публикациях о самых различных типах структур, большей частью в связи с регулированием приема пищи и потребления энергии (Expert Opin. Ther. Patents (2005) 15(10)). Большинство MCH-антагонистов, о которых были сообщения, включают основной центр и две (гетеро)ароматические части, соединенные линкерами. WO 2005/085200 (Banyu Pharmaceutical Co., Ltd) раскрывает пиридиноновые, пиримидиноновые и пиридазиноновые производные для применения в качестве антагонистов MCH-1. WO 2003/033480, WO 2003/033476 и WO 2005/05042541 (Glaxo Group Limited), WO 2004/024702 (Boehringer Ingelheim Pharma GMBH & Co. KG) и WO 2005/103039 (Neurocrine Biosciences Inc.) раскрывают различные бициклические гетероциклы, такие как тиенопиримид-4-он-, бензопиримид-4-он- и фталимидпроизводные, для применения в качестве антагонистов MCH-1. WO 2003/097047 и WO 2005/040157 (Eli Lilly and Company) и WO 2005/070925 (Aventis Pharma Deutschland GmbH) сообщают о различных ароматических 5-членных кольцевых гетероциклах, таких как оксазольные и оксадиазольные производные, для применения в качестве антагонистов MCH-1. WO 2004/011438 и WO 2005/070898 (Aventis Pharma Deutschland GMBH) раскрывают диарилзамещенные циклические карбамидные производные в качестве антагонистов MCH-1.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задача, на решение которой было направлено настоящее изобретение, состоит в предоставлении соединения, обладающего сродством связывания в отношении рецепторов меланинконцентрирующего гормона (MCH), в частности, в отношении MCH-1-рецепторов, в частности, в качестве антагониста.

Более того, было обнаружено, что соединения в соответствии с настоящим изобретением демонстрируют очень низкие взаимодействия с hERG-каналами или никакого взаимодействия, при этом такие взаимодействия являются нежелательными, но в значительной степени связаны с соединениями предшествующего уровня техники. Следовательно, соединения по настоящему изобретению являются предпочтительными по сравнению с соединениями предшествующего уровня техники благодаря, по существу, отсутствию их взаимодействий с hERG-каналами и отсутствию QT-пролонгации.

Поставленная задача достигается с помощью нового замещенного диазаспиропиридинонового производного в соответствии с общей формулой (I)

его фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли, его N-оксидной формы или его четвертичной аммониевой соли, где

А представляет собой радикал формулы (II)

где k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 0, 1, 2, 3 или 4, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3, 4 или 5; где один из -СН₂-фрагментов может быть заменен на атом О; и где каждый из -СН₂-фрагментов может быть замещен оксогруппой;

X представляет собой СН или N;

R ³ выбран из группы, включающей водород, С_1-5 алкил, С_3-6циклоалкил и С_1-5алкилоксикарбонил;

R⁴, R⁵, каждый независимо друг от друга, выбран из группы, включающей водород, галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, С_1-3 алкил и C_1-3алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю, 1, 2 или 3;

q представляет собой целое число, равное нулю, 1, 2 или 3;

Y¹, Y³, каждый независимо друг от друга, выбран из группы, включающей простую связь, О, NR⁷ , S, SO и SO₂; где R⁷ выбран из группы, включающей водород и C_1-3алкил;

Y ² представляет собой насыщенный или ненасыщенный C _1-6углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, где один или несколько атомов водорода могут быть необязательно заменены радикалом, выбранным из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио и формил;

В представляет собой 6-членное кольцо, содержащее ноль, 1, 2 или 3 атома азота, необязательно замещенное r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей водород, галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3 алкил и C_1-3алкилокси; и где r представляет собой целое число, равное нулю, 1 или 2; или два заместителя R ⁶ могут быть объединены в радикал -CH₂CH ₂CH₂- или -OCH₂O-;

алкил представляет собой насыщенный углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, содержащий указанное число атомов углерода; где этот радикал, необязательно, может быть замещен на одном или нескольких атомах углерода одним или несколькими радикалами, выбранными из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио и формил;

арил представляет собой нафтил или фенил, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси;

галоген представляет собой фтор, хлор, бром или йод.

В рамках настоящей заявки фраза "соединения в соответствии с настоящим изобретением" означает соединение в соответствии с общей формулой (I), его фармацевтически приемлемую кислотно- или основно-аддитивную соль, его N-оксидную форму или его четвертичную аммониевую соль.

Изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с настоящим изобретением, в частности соединения формулы (I), его фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли, его N-оксидной формы или его четвертичной аммониевой соли.

Изобретение также относится к способу предупреждения и/или лечения расстройства или заболевания, восприимчивого к антагонизму MCH-рецептора, в частности к антагонизму MCH-1-рецептора, у субъекта, нуждающегося в этом, включающему стадию введения указанному субъекту соединения или фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления изобретения указанное расстройство или заболевание выбрано из группы, включающей психиатрические расстройства, включая, но не ограничиваясь этим, состояние беспокойства, расстройства пищевого поведения, аффективные расстройства, такие как биполярные расстройства и депрессия, психозы, такие как шизофрения, и расстройства сна; ожирение; диабет; сексуальные расстройства и неврологические расстройства.

Изобретение также относится к применению соединения по настоящему изобретению в качестве лекарственного средства и для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения расстройства или заболевания, восприимчивого к антагонизму MCH-рецептора, в частности к антагонизму MCH-1-рецептора.

В частности, изобретение относится к применению соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения психиатрических расстройств, включая, но не ограничиваясь этим, состояние беспокойства, расстройства пищевого поведения, аффективные расстройства, такие как биполярные расстройства и депрессия, психозы, такие как шизофрения, и расстройства сна. Кроме того, соединение можно применять для лечения ожирения, диабета, сексуальных расстройств и неврологических расстройств.

Соединение в соответствии с настоящим изобретением, в частности в соответствии с формулой (I), также может быть подходящим в качестве дополнительного лечения или комбинированного лечения и/или предупреждения перечисленных выше заболеваний, в частности для предупреждения и/или лечения психиатрических расстройств в сочетании с антидепрессантами, транквилизаторами и/или нейролептическими средствами, которые в настоящее время являются доступными или находятся в стадии разработки или которые станут доступны в будущем, в частности для улучшения эффективности и/или начала действия. Это оценивали на моделях грызунов, в которых было показано, что антидепрессанты, транквилизаторы и/или нейролептические средства являются активными. Например, соединения оценивали в комбинации с антидепрессантами, транквилизаторами и/или нейролептическими средствами для ослабления индуцированной стрессом гипертермии.

Изобретение, следовательно, также относится к применению соединения по настоящему изобретению в комбинации с одним или несколькими другими соединениями, выбранными из группы, включающей антидепрессанты, транквилизаторы и нейролептические средства, к фармацевтической композиции, включающей соединения по настоящему изобретению и одно или несколько других соединений, выбранных из группы, включающей антидепрессанты, транквилизаторы и нейролептические средства, а также к способу получения таких фармацевтических композиций.

Изобретение также относится к применению соединения по настоящему изобретению в комбинации с одним или несколькими другими соединениями, выбранными из группы соединений, снижающих уровень липидов, для предупреждения и/или лечения ожирения, к фармацевтической композиции, включающей соединения по настоящему изобретению и одно или несколько других соединений, выбранных из группы соединений, снижающих уровень липидов, а также к способу получения таких фармацевтических композиций.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 1, 2 или 3, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3 или 4.

В одном варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где A выбран из группы радикалов (a-1), (a-2), (a-3), (a-4), (a-5), (a-6), (a-7), (a-8), (b-1), (b-2), (b-3), (b-4), (b-5), (b-6), (b-7), (b-8), (b-9), (b-10), (c-1), (c-2), (c-3), (c-4), (c-5), (c-6), (c-7), (c-8), (d-1), (d-2), (d-3), (d-4), (d-5), (d-6), (e-1), (e-2), (e-3), (e-4), (e-5), (e-6), (f-1), (f-2), (f-3) и (f-4), как показано ниже, где один из -CH₂ -фрагментов может быть заменен группой O и где каждый из -CH ₂- фрагментов может быть замещен оксогруппой.

В рамках настоящей заявки становится понятным, что показанные выше радикалы могут быть введены в формулу (I) справа налево или слева направо, т.е. каждый конец радикала может быть присоединен либо к радикалу R³, либо к арил/гетероарильному радикалу в формуле (I).

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где A выбран из группы, включающей (a-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (c-2).

В другом варианте воплощения изобретения, в случае, когда один из -CH₂ -фрагментов в радикале в соответствии с формулой (II) заменен -O-, A представляет собой радикал в соответствии с формулой (cc-2), как показано ниже.

В другом варианте воплощения изобретения, когда один из -CH₂-фрагментов в радикале в соответствии с формулой (II) замещен оксо, A представляет собой радикал в соответствии с (aa-1) или (bb-1), как показано ниже.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где R³ выбран из группы, включающей водород, С_3-6циклоалкил и С_1-5алкил, в частности, из группы, включающей водород, С_3-5циклоалкил и C_1-3алкил, в частности, из группы, включающей водород, метил, этил, пропил и циклопропил.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где X представляет собой СН или азот.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где каждый из R⁴ и R⁵, независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород, галоген, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где р равно нулю или 1.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где q равно нулю.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где Y¹ и Y³ каждый, независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь и О.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где Y² выбран из группы, включающей -СН₂-, -СН₂СН₂- и -СН=СН-.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где B выбран из группы, включающей фенил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил и триазинил; в частности, из группы, включающей фенил, пиридинил и пиридазинил; в частности, B представляет собой фенил.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где B замещен одним галогеновым заместителем, в частности фтором или галогеном.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где фрагмент B-Y¹-Y ²-Y³ выбран из радикалов (a1-1)-(d1-5), представленных ниже, необязательно замещенных r количеством заместителей R ⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2; или два заместителя R⁶ могут быть объединены в радикал -CH ₂CH₂CH₂- или -OCH₂O-.

В другом варианте воплощения изобретения фрагмент B-Y¹-Y²-Y³ выбирают из радикалов (a1-2), (a1-3) и (a1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2; или два заместителя R⁶ могут быть объединены в радикал -CH₂CH₂CH ₂- или -OCH₂O-.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где применимо одно или несколько, в сочетании или отдельно, следующих ограничений:

- k, l, m, n, каждый независимо друг от друга, представляют собой целое число, равное 1, 2 или 3, при условии, что (k+l) и (m+n) равно 2, 3 или 4;

- А выбран из группы радикалов (а-1), (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-8), (а-9), (а-10), (а-11), (b-1), (b-2), (b-3), (b-4), (b-5), (b-6), (b-7), (b-8), (b-9), (b-10), (с-1), (с-2), (с-3), (с-4), (с-5), (с-6), (с-7), (с-8), (d-1), (d-2), (d-3), (d-4), (d-5), (d-6), (e-1), (e-2), (e-3), (e-4), (e-5), (e-6), (f-1), (f-2), (f-3) и (f-4), где один из -СН₂-фрагментов может быть замещен группой О; и где каждый из -СН₂ -фрагментов может быть замещен оксогруппой; или

- А выбран из группы, включающей (а-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (с-2); или

- А представляет собой радикал в соответствии с формулой (сс-2); или

- А представляет собой радикал в соответствии с (аа-1) или (bb-1);

- R³ выбран из группы, включающей водород, С_3-6 циклоалкил и С_1-5алкил, в частности из группы, включающей водород, С_3-6циклоалкил и C_1-3алкил, в частности из группы, включающей водород, метил, этил, пропил и циклопропил;

- X представляет собой СН;

- каждый из R⁴ и R⁵ независимо друг от друга выбран из группы, включающей водород, галоген, С_1-3 алкил и C_1-3алкилокси;

- р равно нулю или 1;

- q равно нулю;

- Y ¹ и Y³, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь и O;

- Y ² выбран из группы, включающей -CH₂-, -CH ₂CH₂- и -CH=CH-;

- B выбран из группы, включающей фенил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил и триазинил; в частности из группы, включающей фенил, пиридинил и пиридазинил; в частности, B представляет собой фенил;

- B замещен одним галогеновым заместителем, в частности фтором или галогеном;

- B-Y¹-Y ²-Y³ выбран из радикалов (a1-1)-(d1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2; или два заместителя R⁶ могут быть объединены в радикал -CH₂ CH₂CH₂- или -OCH₂O-; или

- B-Y¹-Y²-Y³ выбран из радикалов (a1-2), (a1-3) и (a1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил, C_1-3алкил и C_1-3алкилокси; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2; или два заместителя R⁶ могут быть объединены в радикал -CH₂CH₂CH ₂- или -OCH₂O-.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где

A выбран из группы, включающей (a-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (c-2),

X представляет собой СН или N;

R³ выбран из группы, включающей водород, С_3-6 циклоалкил и C_1-5алкил;

R⁴ , R⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород, галоген, С_1-3алкил и C _1-3алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

фрагмент B-Y¹ -Y²-Y³ выбран из радикалов (a1-2), (a1-3) и (a1-5), необязательно замещенных r количеством заместителей R⁶

R⁶ представляет собой галогеновый заместитель; и где r представляет собой целое число, равное 1 или 2.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где

А выбран из группы, включающей (а-1), (b-1), (b-3), (b-5) и (с-2),

X представляет собой СН или N;

R³ выбран из группы, включающей водород, С_3-6 циклоалкил и C_1-3алкил;

R⁴ , R⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород, галоген, С_1-3алкил и C _1-3алкилокси;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

Y¹, Y ³, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей простую связь или О;

Y² представляет собой насыщенный или ненасыщенный С_1-6 углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью; и

В представляет собой фенил, необязательно замещенный одним галогеновым заместителем R⁶.

В другом варианте воплощения изобретение относится к соединению по настоящему изобретению, где

А выбран из группы, включающей (а-1) или (b-1);

X представляет собой СН;

R³ представляет собой метил;

R ⁴, R⁵, каждый независимо друг от друга, выбраны из группы, включающей водород или галоген;

р представляет собой целое число, равное нулю или 1;

q представляет собой целое число, равное нулю;

Y¹ представляет собой простую связь;

Y³ представляет собой О;

Y² представляет собой CH₂; и

B представляет собой фенил.

В рамках настоящей заявки алкил представляет собой насыщенный углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, содержащий указанное число атомов углерода, т.е. когда указан C_1-3алкил, алкильный радикал может содержать от 1 до 3 атомов углерода; или когда указан C_1-5 алкил, алкильный радикал может содержать от 1 до 5 атомов углерода. Каждый радикал необязательно может быть замещен на одном или нескольких атомах углерода одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио и формил. Предпочтительно, алкил представляет собой метил, этил, пропил или изопропил. Другие радикалы, охватываемые этим определением, представляют собой, например, гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, 1-гидроксипропил, фторметил, дифторметил и трифторметил.

В рамках настоящей заявки C_3-6циклоалкил как группа или часть группы означает циклические насыщенные углеводородные радикалы, содержащие от 3 до 6 атомов углерода, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил. C_3-6циклоалкил, необязательно, может быть замещен на одном или нескольких атомах углерода одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио и формил.

В рамках настоящей заявки арил представляет собой нафтил или фенил, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо друг от друга выбран из группы, включающей галоген, циано, гидрокси, амино, оксо, карбоксил, нитро, тио, формил и C_1-3алкилокси.

В рамках настоящей заявки галоген представляет собой заместитель, выбранный из группы, включающей фтор, хлор, бром и йод. Предпочтительно галоген представляет собой фтор, хлор или бром.

В рамках настоящей заявки, если не указано иное, связь может быть любой связью, включая ковалентную связь, простую связь, двойную связь, тройную связь, координационную связь и водородную связь.

Фармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная соль определена так, что она включает терапевтически активную нетоксичную кислотно-аддитивную солевую форму, которую может образовывать соединение формулы (I). Указанная соль может быть получена путем обработки осн вной формы соединения формулы (I) подходящей кислотой, например неорганической кислотой, например галогенводородной кислотой, в частности хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной кислотой и фосфорной кислотой; органической кислотой, например уксусной кислотой, гликолевой кислотой, пропановой кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой, щавелевой кислотой, малоновой кислотой, янтарной кислотой, малеиновой кислотой, фумаровой кислотой, оксиянтарной кислотой, виноградной кислотой, лимонной кислотой, метансульфоновой кислотой, этансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, пара-толуолсульфоновой кислотой, цикламиновой кислотой, салициловой кислотой, пара-аминосалициловой кислотой и памовой кислотой.

С другой стороны, указанная форма кислотно-аддитивной соли может быть преобразована в форму свободного основания путем обработки подходящим основанием.

Соединение в соответствии с формулой (I), содержащее кислотный протон, также может быть преобразовано в терапевтически активную форму соли присоединения нетоксичного металла или амина (основно-аддитивной соли) при помощи обработки подходящим органическим и неорганическим основанием. Подходящие формы осн вных солей включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, в частности соли лития, натрия, калия, магния и кальция, соли с органическими основаниями, например бензатиновые, N-метил-D-глюкаминовые, гибраминовые соли и соли с аминокислотами, например аргинин и лизин.

С другой стороны, указанная форма соли может быть преобразована в свободную форму при помощи подходящей кислоты.

Термин «аддитивная соль», как он используется в рамках настоящей заявки, также включает сольват, который может образовывать соединение формулы (I), а также его соль. Такие сольваты представляют собой, например, гидраты и алкоголяты.

N-оксидная форма соединения формулы (I) подразумевает включение соединения формулы (I), в котором один или несколько атомов азота являются окисленными до так называемых N-оксидов, в частности таких N-оксидов, где один или несколько третичных атомов азота (например, пиперазинильного или пиперидинильного радикала) являются N-окисленными. Такие N-оксиды легко могут быть получены специалистами в данной области без каких-либо изобретательских навыков, и они являются очевидной альтернативой для соединения формулы (I), поскольку эти соединения являются метаболитами, которые образуются путем окисления в организме человека после их приема. Как это общеизвестно, окисление обычно является первой стадией метаболизма лекарственного средства (Textbook of Organic Medicinal and Pharmaceutical Chemistry, 1977, стр.70-75). Также является общеизвестным, что форма метаболита соединения также может быть введена человеку вместо соединения как такового, по сути, с аналогичным эффектом.

Соединение формулы (I) может быть преобразовано до соответствующей N-оксидной формы, следуя процедурам, известным в данной области техники для преобразования трехвалентного азота в форму его N-оксида. Указанная реакция N-окисления, как правило, может быть осуществлена путем взаимодействия соединения формулы (I) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие как, например бензолкарбопероксокислоту или галогензамещенную бензолкарбопероксокислоту, например 3-хлорбензолкарбопероксокислоту, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусную кислоту, алкилгидропероксиды, например трет-бутилгидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например этанол и подобные, углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.

Четвертичная аммониевая соль соединения формулы (I) определяет указанное соединение, которое может быть образовано путем реакции между основным азотом соединения формулы (I) и подходящим кватернизирующим агентом, таким как, например, необязательно замещенный алкилгалогенид, арилгалогенид или арилалкилгалогенид, в частности, метилйодид и бензилйодид. Могут быть также использованы другие реагенты с легко отщепляемыми группами, такие как, например, алкилтрифторметансульфонаты, алкилметансульфонаты и алкил-пара-толуолсульфонаты. Четвертичная аммониевая соль содержит по меньшей мере один положительно заряженный азот. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетатный и ацетатный ионы.

Изобретение также включает производное (обычно называемое "пролекарство") фармакологически активного соединения по настоящему изобретению, в частности, в соответствии с формулой (I), которое разлагается in vivo с образованием соединения по настоящему изобретению. Пролекарства являются обычно (но не всегда) более низкоактивными на целевом рецепторе, чем соединения, на которые они разлагаются. Пролекарства особенно полезны, когда желаемое соединение обладает химическими или физическими свойствами, которые делают его введение затруднительным или неэффективным. Например, желаемое соединение может быть лишь слаборастворимым, оно может плохо транспортироваться через слизистый эпителий или оно может иметь нежелательно короткий период полужизни в плазме. Более подробное обсуждение пролекарств можно найти в Stella, V.J. et al., "Prodrugs", Drug Delivery Systems, 1985, pp. 112-176 и Drugs, 1985, 29, pp. 455-473.

Форма пролекарства фармакологически активного соединения по настоящему изобретению в основном представляет собой соединение формулы (I), его фармацевтически приемлемую кислотно- или основно-аддитивную соль, его N-оксид или его четвертичную аммониевую соль, содержащее кислотную группу, которая является этерифицированной или амидированной. Такие этерифицированные кислотные группы включают группы формулы -COOR^X, где R^X представляет собой C _1-6алкил, фенил, бензил или одну из следующих групп:

Амидированные группы включают группы формулы - CONR^yR^z, где R^y представляет собой H, C_1-6алкил, фенил или бензил, и R^z представляет собой -OH, H, C_1-6алкил, фенил или бензил. Соединение по настоящему изобретению, содержащее аминогруппу, может быть модифицировано при помощи кетона или альдегида, такого как формальдегид, с образованием основания Манниха. Это основание будет гидролизоваться с кинетикой первого порядка в водном растворе.

В рамках настоящей заявки соединение по настоящему изобретению по существу включает все его стереохимически изомерные формы. Термин "стереохимически изомерная форма", как он используется в настоящей заявке, определяет все возможные стереохимически изомерные формы, которые соединение формулы (I) может иметь. Если не упомянуто или указано иное, то химическое обозначение соединения обозначает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, при этом указанные смеси содержат все диастереомеры и энантиомеры основной молекулярной структуры. Более конкретно, стереогенные центры могут иметь R- или S-конфигурацию; заместители на бивалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут иметь либо цис-, либо транс-конфигурацию. Соединения, включающие двойные связи, могут иметь E- или Z-стереохимию по указанной двойной связи. Таким образом, все стереохимически изомерные формы соединения формулы (I) включены в объем настоящего изобретения.

Следуя номенклатуре CAS, когда в молекуле присутствуют два стереогенных центра известной абсолютной конфигурации, обозначение R или S дается (на основании правила последовательности Cahn-Ingold-Prelog) хиральному центру с самым маленьким порядковым номером, ссылочному центру. Конфигурация второго стереогенного центра указывается с использованием соответствующих обозначений [R*,R*] или [R*,S*], где R* всегда определен как ссылочный центр, и [R*,R*] указывает центры с одинаковой хиральностью, а [R*,S*] указывает центры с разной хиральностью. Например, если хиральный центр с самым маленьким порядковым номером в молекуле имеет S-конфигурацию и второй центр имеет R-конфигурацию, то стереообозначение будет представлено как S-[R*,S*]. Когда используются " " и " ", положение наиболее высокоприоритетного заместителя по асимметричному атому углерода в кольцевой системе, содержащей наименьшее число колец, произвольно находится всегда в " " положении средней плоскости, определяемой кольцевой системой. Положение наиболее высокоприоритетного заместителя по другому асимметричному атому углерода в кольцевой системе (атом водорода в соединении формулы (I)) относительно положения наиболее высокоприоритетного заместителя по ссылочному атому обозначают как " ", если он находится на той же стороне средней плоскости, определяемой кольцевой системой, или " ", если он находится на другой стороне средней плоскости, определяемой кольцевой системой.

В рамках настоящей заявки соединение по настоящему изобретению по существу включает все изотопные комбинации его химических элементов. В рамках настоящей заявки химический элемент, в частности когда он указан в связи с соединением формулы (I), включает все изотопы и изотопные смеси этого элемента, встречающиеся в природе или полученные синтетическим путем, с естественным содержанием изотопа или в изотопно обогащенной форме. В частности, когда указан водород, должно быть понятно, что он относится к ¹H, ²H, ³ H и их смесям; когда указан углерод, должно быть понятно, что он относится к ¹¹C, ¹²C, ¹³C, ¹⁴C и их смесям; когда указан азот, должно быть понятно, что он относится к ¹³N, ¹⁴N, ¹⁵ N и их смесям; когда указан кислород, должно быть понятно, что он относится к ¹⁴O, ¹⁵O, ¹⁶O, ¹⁷O, ¹⁸O и их смесям; и когда указан фтор, должно быть понятно, что он относится к ¹⁸F, ¹⁹F и их смесям.

Следовательно, соединение по настоящему изобретению по существу включает соединение с одним или несколькими изотопами одного или нескольких элементов и их смеси, включая радиоактивное соединение, также называемое соединением, меченным радиоактивным изотопом, в котором один или несколько нерадиоактивных атомов были замещены одним из их радиоактивных изотопов. Что касается термина "соединение, меченное радиоактивным изотопом", он означает любое соединение формулы (I), его фармацевтически приемлемую кислотно- или основно-аддитивную соль, его N-оксидную форму или его четвертичную аммониевую соль, которое содержит, по меньшей мере, один радиоактивный атом. Например, соединение может быть мечено позитроном или гаммаизлучающими радиоактивными изотопами. Для способов связывания с радиолигандом (анализ мембранных рецепторов) ³H-атом или ¹²⁵ I-атом представляет собой атом, выбранный для замещения. Для получения изображения наиболее широко используемые позитрониспускающие радиоактивные изотопы (PET) представляют собой ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O и ¹³N, все из которых получены при помощи ускорителя и имеют период полураспада 20, 100, 2 и 10 минут соответственно. Поскольку периоды полураспада этих радиоактивных изотопов очень короткие, то их использование практически возможно только в институтах, которые имеют ускоритель для их получения, и это, таким образом, ограничивает их применение. Наиболее широко используемыми из этих изотопов являются ¹⁸F, ^99mTc, ²⁰¹Tl и ¹²³ I. Обращение с такими радиоактивными изотопами, их получение, выделение и введение в молекулу хорошо известны специалистам в данной области техники.

В частности, радиоактивный атом выбирают из группы, включающей водород, углерод, азот, серу, кислород и галоген. Предпочтительно, радиоактивный атом выбирают из группы, включающей водород, углерод и галоген.

В частности, радиоактивный изотоп выбирают из группы, включающей ³H, ¹¹C, ¹⁸F, ¹²² I, ¹²³I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ⁷⁵ Br, ⁷⁶Br, ⁷⁷Br и ⁸²Br. Предпочтительно, радиоактивный изотоп выбирают из группы, включающей ³ H, ¹¹C и ¹⁸F.

ПОЛУЧЕНИЕ

Соединение по настоящему изобретению, как правило, можно получить путем последовательного осуществления стадий, каждая из которых хорошо известна специалистам в данной области техники. В частности, пиридиноновое производное может быть получено в соответствии с одним или несколькими из следующих способов получения.

Схема 1A

Реакцию сочетания с использованием меди осуществляли в присутствии соли меди, такой как Cu(OAc)₂, в апротонном растворителе, таком как DCE, в присутствии амина или N-оксида амина, такого как пиридин или NMO, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 15 минут при 180°C при микроволновом излучении. Реакцию сочетания с использованием палладия осуществляли в апротонном растворителе, таком как толуол, в присутствии палладиевого катализатора, такого как Pd(AcO)₂ и в присутствии трет-BuOK в качестве основания и лиганда, такого как BINAP, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 24 часов при 100°C при традиционном нагревании.

Когда A-R³ представляет собой амид, реакцию сочетания осуществляют в апротонном растворителе, таком как диоксан или ДМФА, в присутствии CuI, N,N-диметилэтилендиамина и K ₃PO₄ в качестве основания, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 20 минут при 175°C в условиях микроволнового облучения.

Когда аминогруппа защищена защитной группой, реакции удаления защитных групп осуществляют хорошо известными способами синтеза. Преобразование аминогруппы в различные производные можно осуществить при помощи способов синтеза, хорошо известных специалистам в данной области.

Кроме того, пиридиноновое производное может быть получено в соответствии с процедурой, описанной на схеме 1В.

Схема 1В

Реакцию сочетания с использованием меди осуществляют в апротонном растворителе, таком как диоксан или ДМФА, в присутствии CuI, N,N-диметилэтилендиамина в качестве лиганда и неорганического основания, такого как K ₃РО₄, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 20 минут при 175°С в условиях микроволнового облучения.

Ортозамещенные фенильные производные могут быть получены в соответствии со схемой 2.

Hal-радикал представляет собой галоген, такой как Вr или I. Х^А может представлять собой ОН, Вr или I. Реакцию сочетания с использованием меди осуществляют в апротонном растворителе, таком как диоксан или ДМФА, в присутствии CuI, N,N-диметилэтилендиамина в качестве лиганда и неорганического основания, такого как K₃РО₄, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 20 минут при 175°C в условиях микроволнового облучения.

OH-активирование можно осуществить через трифлат, в присутствии трифторметансульфонового ангидрида или 1,1,1-трифтор-N-фенил-N-[(трифторметил)сульфонил]метансульфонамида, в апротонном растворителе, таком как DCM или ТГФ, при температуре, подходящей для завершения реакции. Реакцию сочетания с использованием палладия осуществляют в апротонном растворителе, таком как толуол или трифтортолуол, в присутствии палладиевого катализатора, такого как Pd(AcO)₂, и в присутствии основания, такого как трет-BuOK или CS₂CO₃, и необязательно требуется присутствие лиганда, такого как BINAP или ксантфос, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 24 часов при 100°C при традиционном нагревании.

Соединения по настоящему изобретению с заместителями, отличными от бензилокси, получают в соответствии со схемой 3A, схемой 3B.

Схема 3А

Реакцию сочетания с использованием меди осуществляют в присутствии соли меди, такой как Cu(OAc)₂, в апротонном растворителе, таком как DCE, в присутствии амина или N-оксида амина, такого как пиридин или NMO, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 15 минут при 180°C в условиях микроволнового облучения.

Галогенирование осуществляют в присутствии оксибромида или оксихлорида фосфора, в апротонном растворителе, таком как DCE, при температуре, подходящей для завершения реакции, обычно 150°C в условиях микроволнового облучения.

Алкилирование осуществляют в присутствии органического или неорганического основания, такого как NaH или 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундецен-7, в апротонном растворителе, таком как DME, CH₃CN или ДМФА, при температуре, подходящей для завершения реакции, обычно 120^oC в течение 10 минут в условиях микроволнового облучения. Реакцию сочетания с использованием палладия осуществляют в апротонном растворителе, таком как толуол или диоксан, в присутствии палладиевого катализатора, такого как Pd(AcO)₂ или Pd(PPh₃)₄, и в присутствии основания, такого как трет-BuOK, или неорганического водного основания, такого как Na₂CO₃, и иногда требуется лиганд, такой как BINAP, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 24 часа при 100°C при традиционном нагревании.

Другие соединения синтезировали, следуя схеме 3B.

Схема 3B

Реакцию сочетания с использованием меди осуществляют в присутствии соли меди, такой как Cu(OAc)₂, в апротонном растворителе, таком как DCE, в присутствии амина или N-оксида амина, такого как пиридин или NMO, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 15 минут при 180°C в условиях микроволнового облучения.

Реакцию восстановления осуществляют в протонном растворителе, таком как MeOH, и в присутствии восстановителя, такого как боргидрид натрия, при комнатной температуре и в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 30 минут при комнатной температуре.

Реакцию по типу реакции Мицунобу можно осуществить в присутствии фосфина, такого как трифенилфосфин, азодикарбоксилатного производного, такого как диэтилазодикарбоксилат, в апротонном растворителе, таком как ТГФ, при подходящей температуре и в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, например, при 100°C в течение 5 минут в условиях микроволнового облучения.

Реакцию сочетания с использованием палладия осуществляли в апротонном растворителе, таком как толуол, в присутствии палладиевого катализатора, такого как Pd(AcO)₂, и в присутствии трет-BuOK в качестве основания и лиганда, такого как BINAP, при подходящей температуре либо путем традиционного нагревания, либо при помощи микроволнового облучения, в течение периода времени, достаточного для завершения реакции, обычно 24 часов при 100°C при традиционном нагревании.

ФАРМАКОЛОГИЯ

Неожиданно было обнаружено, что соединение по настоящему изобретению, в частности соединение формулы (I), его фармацевтически приемлемые кислотно- или основно-аддитивные соли, его N-оксидная форма или его четвертичная аммониевая соль обладают сродством связывания в отношении MCH-рецептора, в частности в отношении MCH-1-рецептора, в частности в качестве антагонистов.

Принимая во внимание их указанную выше активность, соединения по настоящему изобретению являются подходящими для предупреждения и/или лечения заболеваний, где антагонизм MCH-рецептора, в частности антагонизм MCH-1-рецептора, является терапевтически полезным. В частности, соединение по настоящему изобретению может быть подходящим для лечения и/или предупреждения психиатрических расстройств, включая, но не ограничиваясь этим:

- состояние беспокойства, включая, но не ограничиваясь этим, агорафобию; генерализованное состояние беспокойства; компульсивное побуждение; обсессивно-компульсивное расстройство; паническое расстройство; социальные фобии; и стресс, такой как посттравматический стресс;

- расстройство, связанное с дефицитом внимания/гиперактивностью;

- аутизм;

- дистимию;

- расстройство пищевого поведения, включая, но не ограничиваясь этим, анорексию; компульсивное переедание и нервную булимию;

- расстройство контроля побуждений;

- задержку психического развития, включая, но не ограничиваясь этим, преходящий синдром X;

- расстройство настроения, включая, но не ограничиваясь этим, беспокойство; биполярное расстройство, такое как биполярное аффективное расстройство, биполярное расстройство (I), биполярное расстройство (II), гипоманиакальное состояние и маниакальный синдром; депрессию, такую как сильная депрессия и суицидальная депрессия; сезонные расстройства настроения; и суицид;

- предменструальный синдром, включая, но не ограничиваясь этим, дисфорию;

- психоз, включая, но не ограничиваясь этим, агрессивность; лекарственный психоз; шизоаффективное расстройство; шизофрению, такую как бред, кататонический синдром, кататоническая шизофрения, деструктивная шизофрения, параноидная шизофрения, остаточная шизофрения и шизофрениформное расстройство; и диссомнию, такую как вторичная диссомния;

- расстройство сна, включая, но не ограничиваясь этим, нарушения циркадного ритма; гиперсомнию; бессонницу; нарколепсию и синдром апноэ во сне;

- заикание и

- приступы ярости.

Кроме того, соединение по настоящему изобретению можно использовать для лечения сексуальных расстройств, неврологических расстройств и особенно ожирения и диабета.

Изобретение, следовательно, относится к соединению общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли, его N-оксидной форме или его четвертичной аммониевой соли, для применения в качестве лекарственного средства.

Изобретение также относится к применению соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения заболеваний, где антагонизм MCH-рецептора, в частности антагонизм MCH-1-рецептора, является терапевтически полезным.

Изобретение также относится к применению соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения состояния беспокойства, расстройств пищевого поведения, аффективных расстройств, таких как биполярные расстройства и депрессия, психозов, таких как шизофрения, и расстройств сна. Кроме того, соединение по настоящему изобретению можно использовать для лечения сексуальных расстройств и неврологических расстройств, и особенно ожирения и диабета.

КОМБИНИРОВАННОЕ ЛЕЧЕНИЕ

Соединение по настоящему изобретению, в частности в соответствии с формулой (I), можно совместно вводить в качестве дополнительного лечения и/или профилактики при перечисленных выше заболеваниях.

В частности, соединение по настоящему изобретению, в частности в соответствии с формулой (I), можно совместно вводить в сочетании с антидепрессантами, транквилизаторами и/или нейролептическими средствами, которые в настоящее время являются доступными или находятся в стадии разработки или которые станут доступны в будущем, в частности для улучшения эффективности и/или начала действия. Является подходящим, когда соединение по настоящему изобретению и одно или несколько других средств могут присутствовать в виде объединенного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения для предупреждения и/или лечения депрессии и/или состояния беспокойства. Такие комбинированные препараты могут, например, быть в форме сдвоенной упаковки. Является также подходящим, когда соединение по настоящему изобретению и одно или несколько других средств можно вводить как отдельные фармацевтические композиции либо одновременно, либо последовательно.

Изобретение поэтому относится к фармацевтической композиции по настоящему изобретению, отличающейся тем, что она дополнительно включает одно или несколько других соединений, выбранных из группы, включающей антидепрессанты, транквилизаторы и нейролептические средства.

Подходящие классы антидепрессантов включают ингибиторы повторного поглощения норэпинефрина, селективные ингибиторы повторного поглощения серотонина (SSRI), ингибиторы моноаминоксидазы (MAOI), обратные ингибиторы моноаминоксидазы (RIMA), ингибиторы повторного поглощения серотонина и норадреналина (SNRI), норадренергические и специфические серотонергические антидепрессанты (NaSSA), антагонисты фактора высвобождения кортикотропина (CRF), антагонисты -адренорецептора и атипичные антидепрессанты.

Подходящие примеры ингибиторов повторного поглощения норэпинефрина включают амитриптилин, кломипрамин, доксепин, имипрамин, тримипрамин, амоскапин, дезипрамин, мапротилин, нортриптилин, протриптилин, ребоксетин и их фармацевтически приемлемые соли.

Подходящие примеры селективных ингибиторов повторного поглощения серотонина включают флуоксетин, флувоксамин, пароксетин, сертралин и их фармацевтически приемлемые соли.

Подходящие примеры ингибиторов моноаминоксидазы включают изокарбоксазид, фенелзин, транилципромин, селегилин и их фармацевтически приемлемые соли.

Подходящие примеры обратных ингибиторов моноаминоксидазы включают моклобемид и его фармацевтически приемлемые соли.

Подходящие примеры ингибиторов повторного поглощения серотонина и норадреналина включают венлафаксин и его фармацевтически приемлемые соли.

Подходящие атипичные антидепрессанты включают бупропион литий, нефазодон, тразодон, вилоксазин, сибутрамин и их фармацевтически приемлемые соли.

Другие подходящие антидепрессанты включают адиназолам, алапроклат, аминептин, комбинацию амитриптилин/хлордиазепоксид, атипамезол, азамиансерин, базинаприн, бефуралин, бифемелан, бинодалин, бипенамол, брофаромин, бупропион, сароксазон, церикламин, цианопрамин, цимоксатон, циталопрам, клемепрол, кловоксамин, дазепинил, деанол, демексиптилин, дибензепин, дотиепин, дроксидопа, энефексин, эстазолам, этоперидон, фемоксетин, фенгабин, фезоламин, флуотрацен, идазоксан, индалпин, инделоксазин, иприндол, левопротилин, литоксетин, лофепрамин, медифоксамин, метапрамин, метралиндол, миансерин, милнаципран, минаприн, миртазапин, монирелин, небрацетам, нефопам, ниаламид, номифензин, норфлуоксетин, оротирелин, оксафлозан, пиназепам, пирлиндон, пизотилин, ритансерин, ролипрам, серклоремин, сетиптилин, сибутрамин, силбутиамин, силпирид, тенилоксазин, тозалинон, тимолиберин, тианептин, тифлукарбин, тофенацин, тофизопам, толоксатон, томоксетин, вералиприд, виквалин, зимелидин и зометапин и их фармацевтически приемлемые соли, и St. John's wort herb или Hypericum perforatum или их экстракты.

Подходящие классы средств против беспокойства включают бензодиазепины и агонисты или антагонисты 5-HT_1A рецептора, в частности частичные агонисты 5-HT _1A, антагонисты фактора высвобождения кортикотропина (CRF), соединения, обладающие мускариновой холинергической активностью, и соединения, действующие на ионные каналы. Помимо бензодиазепинов, другие классы средств против беспокойства включают небензодиазепиновые седативные-гипнотические лекарственные средства, такие как золпидем; стабилизирующие настроение лекарственные средства, такие как клобазам, габапентин, ламотригин, лореклезол, окскарбамазепин, стирипентол и вагабатрин; и барбитураты.

Подходящие нейролептические средства выбирают из группы, включающей ацетофеназин, в частности, малеатную соль; алентемол, в частности, гидробромидную соль; алпертин; азаперон; бателапин, в частности, малеатную соль; бенперидол; бензиндопирин, в частности, гидрохлоридную соль; брофоксин; бромперидол; бутакламол, в частности, гидрохлоридную соль; бутаперазин; карфеназин, в частности, малеатную соль; карвотролин, в частности, гидрохлоридную соль; хлорпромазин; хлорпротиксен; цинперен; цинтриамид; кломакран, в частности, фосфатную соль; клопентиксол; клопимозид; клопипазан, в частности, мезилатную соль; клороперон, в частности, гидрохлоридную соль; клотиапин; клотиксамид, в частности, малеатную соль; клозапин; циклофеназин, в частности, гидрохлоридную соль; дроперидол; этазолат, в частности, гидрохлоридную соль; фенимид; флуциндол; флумезапин; флуфеназин, в частности, деканоатную, энантатную и/или гидрохлоридную соли; флуспиперон; флуспирилен; флутролин; гевотролин, в частности, гидрохлоридную соль; галопемид; галоперидол; илоперидон; имидолин, в частности, гидрохлоридную соль; ленперон; локсапин; мазапертин, в частности, сукцинатную соль; мезоридазин; метиапин; миленперон; милипертин; молиндон, в частности, гидрохлоридную соль; наранол, в частности, гидрохлоридную соль; нефлумозид, в частности, гидрохлоридную соль; окаперидон; оланзапин; оксиперомид; пенфлуридол; пентиапин, в частности, малеатную соль; перфеназин; пимозид; пиноксепин, в частности, гидрохлоридную соль; пипамперон; пиперацетазин; пипотиазин, в частности, пальмитатную соль; пиквиндон, в частности, гидрохлоридную соль; прохлорперазин, в частности, эдизилатную соль; прохлорперазин, в частности, малеатную соль; промазин, в частности, гидрохлоридную соль; кветиапин; расоксиприд; рисперидон; римказол, в частности, гидрохлоридную соль; сеперидол, в частности, гидрохлоридную соль; сертиндол; сетоперон; спиперон; сулпирид; тиоридазин; тиотиксен; торазин; тиоперидон, в частности, гидрохлоридную соль; тиоспирон, в частности, гидрохлоридную соль; трифлуоперазин, в частности, гидрохлоридную соль; трифлуперидол; трифлупромазин; зипразидон, в частности, гидрохлоридную соль; и их смеси.

Соединение по настоящему изобретению, в частности в соответствии с формулой (I), также можно использовать в сочетании с другим снижающим уровень липидов средством, таким образом приводя к так называемой комбинированной снижающей уровень липидов терапии для лечения ожирения. Указанное дополнительное снижающее уровень липидов средство может представлять собой, например, известное средство, традиционно используемое для лечения гиперлипидемии, такое как, например, смола, усиливающая секрецию желчных кислот, производное фибриновой кислоты или никотиновая кислота, как указано выше в разделе Предпосылки изобретения . Подходящие дополнительные снижающие уровень липидов средства также включают другие ингибиторы биосинтеза холестерина и ингибиторы абсорбции холестерина, в частности ингибиторы HMG-CoA редуктазы и ингибиторы HMG-CoA синтазы, ингибиторы экспрессии гена HMG-CoA редуктазы, ингибиторы CETP, ингибиторы ACAT, ингибиторы скваленсинтетазы, антагонисты CB-1, ингибиторы абсорбции холестерина, такие как эзетимиб и т.п.

Любой ингибитор HMG-CoA редуктазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Термин "ингибитор HMG-CoA редуктазы", как используется в настоящей заявке, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует биопреобразование гидроксиметилглутарил-кофермента A в мевалоновую кислоту при каталитическом действии фермента HMG-CoA редуктазы. Такие "ингибиторы HMG-CoA редуктазы" представляют собой, например, ловастатин, симвастатин, флувастатин, правастатин, ривастатин и аторвастатин.

Любой ингибитор HMG-CoA синтазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Термин "ингибитор HMG-CoA синтазы", как используется в настоящей заявке, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует биосинтез гидроксиметилглутарил-кофермента A из ацетил-кофермента A и ацетоацетил-кофермента A при каталитическом действии фермента HMG-CoA синтазы.

Любой ингибитор экспрессии гена HMG-CoA можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Такие средства могут представлять собой ингибиторы транскрипции HMG-CoA редуктазы, которые блокируют транскрипцию ДНК, или ингибиторы трансляции HMG-CoA редуктазы, которые предотвращают трансляцию мРНК, кодирующей HMG-CoA редуктазу в белок. Такие ингибиторы могут либо влиять на транскрипцию или трансляцию непосредственно, либо могут биопреобразовываться в соединения, обладающие указанными выше свойствами, при помощи одного или нескольких ферментов в каскаде биосинтеза холестерина, или могут приводить к аккумуляции метаболита, обладающего указанными выше видами активности.

Любой ингибитор CETP можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Термин "ингибитор CETP", как используется в настоящей заявке, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует опосредованный белком-переносчиком холестерилового сложного эфира (CETP) транпорт различных холестериловых сложных эфиров и триглицеридов из HDL в LDL и VLDL.

Любой ингибитор ACAT можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Термин "ингибитор ACAT", как используется в настоящей заявке, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует внутриклеточную этерификацию пищевого холестерина под действием фермента ацил CoA:холестеринацилтрансферазы.

Любой ингибитор скваленсинтетазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте настоящего изобретения, относящемся к комбинированной терапии. Термин "ингибитор скваленсинтетазы", как используется в настоящей заявке, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует конденсацию двух молекул фарнезилпирофосфата с образованием сквалена при каталитическом действии фермента скваленсинтетазы.

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ

Изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению, в частности соединения формулы (I), его фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли, его N-оксидной формы или его четвертичной аммониевой соли.

Соединение по настоящему изобретению, в частности соединение формулы (I), его фармацевтически приемлемую кислотно- или основно-аддитивную соль, его N-оксидную форму или его четвертичную аммониевую соль, или любую их подгруппу или комбинацию можно формулировать в различные фармацевтические формы, предназначенные для введения. В качестве подходящих композиций могут быть указаны все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств.

Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме его аддитивной соли, в качестве активного ингредиента объединяют в тесной смеси с фармацевтически приемлемым носителем, при этом такой носитель может принимать разнообразные формы в зависимости от формы препарата, желательной для введения. Такие фармацевтические композиции желательно получать в стандартной лекарственной форме, подходящей, в частности, для орального, ректального, чрескожного введения, парентерального введения путем инъекции или введения путем ингаляции. Например, для получения композиций в оральной лекарственной форме можно использовать любую обычно используемую фармацевтическую среду, такую как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п., в случае оральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и т.п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за простоты их введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее выгодные стандартные лекарственные формы для орального введения, в этом случае очевидно использование твердых фармацевтических носителей. Для парентеральных композиций носитель обычно включает стерильную воду, по крайней мере большей частью, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например, способствующие растворению. Могут быть получены, например, растворы для инъекций, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Суспензии для инъекций также могут быть получены, в этом случае можно использовать подходящие жидкие носители, суспендирующие вещества и т.п. Также включены твердые формы препаратов, предназначенные для преобразования, непосредственно перед применением, в жидкие формы препаратов. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно включает агент, усиливающий пенетрацию, и/или подходящее смачивающее вещество, необязательно в сочетании с подходящими добавками любой природы в малых количествах, при этом такие добавки не должны оказывать какое-либо существенное вредное действие на кожу. Указанные добавки могут способствовать введению на кожу и/или могут быть полезными для получения желаемых композиций. Такие композиции можно вводить различным путем, например в виде чрескожных пластырей, путем нанесения пятна, в виде мази.

Особенно выгодно формулировать указанные выше фармацевтические композиции в стандартную лекарственную форму для простоты их введения и равномерного дозирования. Стандартная лекарственная форма, как это используется в настоящей заявке, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве унифицированных доз, при этом каждая такая единица содержит предварительно определенное количество активного ингредиента, рассчитанное так, чтобы обеспечить желаемый терапевтический эффект, в ассоциации с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких стандартных лекарственных форм являются таблетки (включая таблетки с насечкой или покрытием), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, облатки, суппозитории, растворы или суспензии для инъекций и т.п., а также такие формы, разделенные на кратные части. Поскольку соединения по настоящему изобретению являются активными орально вводимыми антагонистами допамина, фармацевтические композиции, включающие указанные соединения, предназначенные для орального введения, являются особенно предпочтительными.

Как уже было указано, изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей соединение по настоящему изобретению и одно или несколько других соединений, выбранных из группы, включающей антидепрессанты, транквилизаторы, нейролептические средства и средства, снижающие уровень липидов, а также к использованию такой композиции для получения лекарственного средства.

Следующие примеры предназначены для иллюстрации, но не для ограничения объема настоящего изобретения.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Во всех разделах настоящей заявки "ТГФ" означает тетрагидрофуран; "ДМФА" означает N,N-диметилформамид; "EtOAc" означает этилацетат; "DCM" означает дихлорметан; "DME" означает 1,2-диметоксиэтан; "DCE" означает 1,2-дихлорэтан; "DIPE" означает диизопропиловый эфир; "DMSO" означает диметилсульфоксид; "DIPEA" означает диизопропилэтиламин; "DIAD" означает диизопропилдиазодикарбоксилат; "TEMPO" означает 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил Свободный Радикал; "BINAP" означает 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил; "ТФУК" означает трифторуксусная кислота; "Xantphos" означает 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантан; "BOC" означает трет-бутилоксикарбонил; "NMO" означает N-метилморфолин-N-оксид.

Реакции, осуществляемые при помощи микроволнового облучения, осуществляли в одномодальном реакторе: Emrys Optimizer microwave reactor (Personal Chemistry A.B., currently Biotage) или Initiator Sixty (Biotage). Описание обоих аппаратов можно найти на www.biotage.com. И в многомодовом реакторе: MicroSYNTH Labstation (Milestone, Inc.). Описание аппарата можно найти на www.milestonesci.com.

A. Получение промежуточных соединений

A1. Получение промежуточного соединения I-1

К раствору 4-бензилокси-2(lH)-пиридона (1 г, 5,0 ммоль) в DCE (20 мл) добавляли 4-бромфенилбороновую кислоту (2 г, 12,0 ммоль), Cu(OAc)₂ (1,82 г, 10,0 ммоль), пиридин (1,51 мл, 20,0 ммоль) и молекулярные сита (4Å) (2 г). Реакционную смесь нагревали в условиях микроволнового облучения при 180°C в течение 15 минут. Твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат обрабатывали водным раствором NH ₄OH. Органический слой отделяли, сушили (Na₂ SO₄) и растворитель выпаривали. Полученный остаток очищали при помощи колоночной хроматографии в DCM 100 до DCM/EtOAc 4:1 с получением промежуточного соединения I-1 (230 мг, 13%).

A2. Получение промежуточного соединения I-2

Смесь 4-бензилокси-2(1H)-пиридона (0,5 г, 0,0025 моль), 4-бром-2-метоксифенола (0,67 г, 0,0033 моль), CuI (0,48 г, 0,0025 моль), N,N'-диметилэтилендиамина (0,53 мл, 0,0050 моль) и K₃PO₄ (1,06 г, 0,0050 моль) в смеси диоксан/ДМФА (4/1; 10 мл) нагревали в течение 15 минут при 180°C в микроволновом реакторе. Затем нагревание повторяли снова в течение 15 минут в микроволновом реакторе. Твердое вещество отфильтровывали и фильтр промывали при помощи DCM. К фильтрату добавляли раствор NH₄OH (32%). Органический слой отделяли, сушили (Na₂SO₄), фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии. Нужные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток осаждали при помощи DIPE с получением промежуточного соединения I-2 (31%).

A3. Получение промежуточного соединения I-3

Смесь промежуточного соединения I-2 (0,76 г, 0,0033 моль), 1,1,1-трифтор-N-фенил-N-[(трифторметил)сульфонил]метансульфонамида (1,18 г, 0,0033 моль) и K₂CO₃ (1,38 г, 0,01 моль) в ТГФ (20 мл) нагревали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 15 минут. Твердое вещество отфильтровывали и промывали при помощи DCM. Фильтрат упаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/EtOAc 100/0, 9/1 и 4/1). Нужные фракции собирали и растворитель выпаривали. Выход: 0,9 г промежуточного соединения I-3 (60%).

Промежуточное соединение I-3 также можно получить путем добавления при 0°C трифторметансульфонового ангидрида (1,1 экв.) к смеси промежуточного соединения I-2, Et₃ N и DCM в качестве растворителя. В этом случае смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре до завершения реакции.

A4. Получение промежуточного соединения I-4

Смесь соединения I-1 (534 мг, 0,0015 моль) и POBr₃ (1,72 г, 0,006 моль) в 1,2-DCE (7,5 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 150°C в течение 20 минут. Затем добавляли Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор), DCM и MeOH. Реакционную смесь перемешивали до тех пор, пока раствор смеси не становился прозрачным. Затем органический слой отделяли, сушили (Na₂SO₄) и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/EtOAc; 9/1). Затем остаток обрабатывали при помощи DIPE с получением 0,375 г промежуточного соединения I-4 (76%) в виде твердого вещества.

A5. Получение промежуточного соединения I-5

К 60% раствору NaH (55 мг, 0,00136 моль) в DME (1,5 мл) по каплям при 0°C добавляли 4-фторбензиловый спирт (0,149 мл, 0,00136 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем добавляли соединение I-4 (225 мг, 0,00068 моль) в DME (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 10 минут. Затем добавляли NH₄Cl (10%) и DCM. Органический слой отделяли, сушили (Na₂SO₄ ) и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/EtOAc 9/1 и 4/1) с получением 0,193 г промежуточного соединения I-5 (76%).

A6. Получение промежуточного соединения I-6

Смесь 2-гидрокси-4-пиридинкарбоксальдегида (123 мг, 0,001 моль), 4-бромфенилбороновой кислоты (400 мг, 0,002 моль), Cu(OAc)₂ (18 мг, 0,0001 моль), пиридина (162 мл, 0,002 моль), TEMPO (172 мг, 0,0011 моль) и молекулярных сит в DCM (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем твердые вещества фильтровали через слой целита и фильтрат обрабатывали при помощи Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (элюенты: DCM и DCM/EtOAc; 9/1) с получением 0,180 г промежуточного соединения I-6 (65%).

A7. Получение промежуточного соединения I-7

К смеси промежуточного соединения I-6 (180 мг, 0,00065 моль) в метаноле (5 мл) при 0°C добавляли боргидрид натрия (30 мг, 0,00078 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляли NH₄Cl (насыщенный водный раствор). Смесь экстрагировали при помощи DCM. Органический слой отделяли, сушили над Na ₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток осаждали при помощи DIPE с получением 0,170 г промежуточного соединения I-7 (93%).

A8. Получение промежуточного соединения I-8

Смесь соединения I-7 (170 мг, 0,00061 моль), фенола (87 мг, 0,00092 моль), DIAD (181 мл, 0,00092 моль) и трифенилфосфина (241 мг, 0,00092 моль) в ТГФ (2 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 100°C в течение 10 минут. Растворитель выпаривали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (элюент: DCM и DCM/EtOAc 9/1). Затем остаток обрабатывали при помощи DIPE с получением 0,151 г промежуточного соединения I-8 (70%).

A9. Получение промежуточного соединения I-9

Смесь соединения I-4 (150 мг, 0,00045 моль), транс-2-фенилвинилбороновой кислоты (66 мг, 0,00045 моль) и Pd(PPh₃)₄ (27 мг, 0,000023 моль) в деоксигенированном диоксане (1 мл) и насыщенного водного раствора Na₂ CO₃ (1 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 150°C в течение 10 минут. Затем добавляли DCM и H₂ O. Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO ₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/EtOAc; 9/1 и 4/1) с получением 0,040 г промежуточного соединения I-9 (25%).

A10. Получение промежуточного соединения I-10

Смесь 2,5-дибромпиридина (474 мг, 0,0002 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 500 мг, 0,00019 моль), DIPEA (2 мл) в ацетонитриле (1 мл) нагревали при 175°C в условиях микроволнового облучения в течение 10 минут. Затем добавляли DCM и Na₂ CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (элюент: DCM и DCM/EtOAc 4:1) с получением 375 мг промежуточного соединения I-10 (52%).

A11. Получение промежуточного соединения I-11

Смесь 4-бензилокси-2(lH)-пиридона (50 мг, 0,0025 моль), 2-бром-5-йодтолуола (1,13 г, 0,0038 моль), CuI (0,238 г, 0,0015 моль), N,N-диметилэтилендиамина (0,266 мл, 0,0025 моль) и K₃PO₄ (1,06 г, 0,005 моль) в смеси диоксан/ДМФА 9:1 (75 мл) перемешивали при 180°C в микроволновом реакторе в течение 15 минут. Затем добавляли DCM. Твердое вещество отфильтровывали через дикалит и фильтрат промывали при помощи 32% раствора NH₄OH. Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (элюент: DCM). Требуемый продукт собирали и выпаривали. Получившийся в результате продукт осаждали при помощи DIPE с получением 0,737 г промежуточного соединения I-11 (80%).

B. Получение конечных соединений

B1. Получение конечного соединения I-5

К смеси промежуточного соединения I-1 (0,000561 моль) в толуоле (3 мл) в атмосфере N₂ добавляли 1,1-диметилэтиловый эфир 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 0,00078 моль), Pd(OAc)₂ (0,0000267 моль), BINAP (0,000042 моль) и в конце ^t BuONa (0,00168 моль). Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в герметично закрытой пробирке в течение ночи. Затем к смеси добавляли H₂O и экстрагировали при помощи DCM. Органический слой фильтровали, сушили над Na₂ SO₄ и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (10 г картридж; элюент: DCM и DCM/(CH₃OH/NH₃); от 10% до 30%) с получением 0,189 г BOC-защищенного соединения (67%). Это соединение (0,00717 моль) растворяли в ТФУК (14 мл) и DCM (28,8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель концентрировали и остаток нейтрализовали при помощи 50% раствора NaOH при охлаждении на ледяной бане. Органическую фазу экстрагировали при помощи DCM, сушили над Na₂ SO₄ и упаривали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле на короткой колонке (элюент: DCM/CH₃ OH; 9,5/0,5 и DCM/(CH₃OH(NH₃); от 9,5/0,5 до 9/1) с получением 1,08 г соединения 1-5 (49%).

B2. Получение конечного соединения 1-11

Смесь промежуточного соединения I-1 (0,00084 моль), трет-бутилового эфира 1-оксо-2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (024 г, 0,0010 моль), CuI (0,16 г, 0,00084 моль), N,N-диметилэтилендиамина (0,0016 моль) и K₃PO₄ (0,35 г, 0,0016 моль) в смеси диоксан/ДМФА 9:1 (75 мл) перемешивали при 175°C в микроволновом реакторе в течение 20 минут. Затем добавляли DCM. Твердое вещество отфильтровывали через дикалит и фильтрат промывали при помощи NH₄Cl (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали с получением 0,433 г BOC-защищенного соединения. Этот неочищенный продукт (0,000969 моль) растворяли в ТФУК (2 мл) и DCM (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии этого времени реакционную смесь нейтрализовали при помощи Na₂ CO₃ (насыщенный водный раствор) в условиях охлаждения на ледяной бане. Органическую фазу экстрагировали при помощи DCM, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток очищали при помощи хроматографии на короткой колонке с силикагелем (5 г) и промывали этиловым эфиром с получением 0,270 г соединения 1-11 (67%).

B3. Получение конечного соединения 2-1

Смесь промежуточного соединения I-11 (185 мг, 0,0005 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 171 мг, 0,00065 моль), Pd(OAc) ₂ (11 мг, 0,00005 моль), BINAP (23 мг, 0,0375 ммоль), и ^tBuONa (144 мг, 0,0015 моль) в толуоле (2,5 мл) перемешивали в атмосфере N₂ и нагревали при 100°C в течение 24 часов. Добавляли избыточное количество Pd(OAc)₂ и BINAP при нагревании реакционной смеси еще в течение 24 часов. Затем добавляли DCM. Твердые вещества отфильтровывали через целит и фильтрат упаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/EtOAc; 9/1 и DCM/ацетон 9/1 и 4/1) с получением 0,175 г BOC-защищенного соединения. Это соединение растворяли в ТФУК (1 мл) и DCM (2 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH 95/5 и DCM/(CH₃OH/NH ₃); 95/5). Остаток обрабатывали этиловым эфиром с получением 0,089 г соединения 2-1 (62%).

B4. Получение конечного соединения 2-2

Смесь промежуточного соединения I-3 (228 мг, 0,0005 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 171 мг, 0,00065 моль), Pd(OAc) ₂ (11 мг, 0,00005 моль), Xantphos (58 мг, 0,0001 моль) и Cs₂CO₃ (407 мг, 0,00125 моль) в трифтортолуоле (3,0 мл) перемешивали в атмосфере N₂ и нагревали при 100°C в течение 24 часов. Затем добавляли DCM. Твердые вещества отфильтровывали через целит и фильтрат выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/EtOAc; 9/1 и DCM/ацетон 9/1 и 4/1) с получением 0,130 г BOC-защищенного соединения. Это соединение растворяли в ТФУК (1 мл) и DCM (2 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли Na₂ CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM(MeOH) 95/5 и DCM/(CH₃OH/NH ₃); 95/5). Остаток обрабатывали этиловым эфиром с получением 0,0366 г соединения 2-2 (35%).

B5. Получение конечного соединения 3-2

Смесь промежуточного соединения I-5 (0,190 г, 0,00051 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 0,177 г, 0,00066 моль), Pd(OAc) ₂ (58 мг, 0,000026 моль), BINAP (24 мг, 0,000038 моль) и ^tBuONa (147 мг, 0,00153 моль) в деоксигенированном толуоле (4 мл) нагревали в течение ночи при 100°C. Затем добавляли DCM. Твердое вещество отфильтровывали и фильтрат упаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/ацетон; 9/1 и 4/1) с получением 0,202 г BOC-защищенного соединения. Это соединение (0,202 г, 0,00039 моль) растворяли в ТФУК (2 мл) и DCM (4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM(MeOH) 95/5 и DCM/(CH₃OH/NH₃ ); 9/1). Затем остаток обрабатывали при помощи DIPE с получением 0,098 г соединения 3-2 (60%).

B6. Получение конечного соединения 3-1

Смесь промежуточного соединения I-9 (0,040 г, 0,00011 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 0,037 г, 0,00014 моль), Pd(OAc) ₂ (12 мг, 0,0000055 моль), BINAP (5 мг, 0,0000083 моль) и ^tBuONa (0,00033 моль) в толуоле (1 мл) перемешивали в атмосфере N₂ и нагревали в течение ночи при 100°C. Затем добавляли DCM. Твердое вещество отфильтровывали через целит и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM и DCM/ацетон 9/1) с получением 0,050 г BOC-защищенного амина (91%). Этот продукт растворяли в смеси ТФУК (0,5 мл) и DCM (1 мл), перемешивая реакционную смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM(CH₃OH) 95/5 и DCM/(CH ₃OH/NH₃); 1/1). Остаток обрабатывали при помощи DIPE с получением 0,017 г соединения 3-1 (43%).

B7. Получение конечного соединения 3-3

Смесь промежуточного соединения I-8 (304 мг, 0,00085 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,7-диазаспиро[3,5]нонан-7-карбоновой кислоты (CAS: 896464-16-7, 289 мг, 0,0011 моль), Pd(OAc) ₂ (10 мг, 0,000043 моль), BINAP (40 мг, 0,000064 моль) и ^tBuONa (245 мг, 0,00255 моль) в толуоле (5 мл) нагревали при 100°C в течение 24 часов. Затем добавляли DCM. Твердое вещество фильтровали через слой целита. Фильтрат выпаривали, сушили над MgSO₄ и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (элюент: DCM и DCM/ацетон; 9/1) с получением 0,430 г BOC-защищенного амина. Это соединение растворяли в ТФУК (2 мл) и DCM (4 мл) и смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли Na₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток обрабатывали этиловым эфиром с получением 0,278 г соединения 3-3 (81%).

B8. Получение конечного соединения 4-1

Смесь 4-бензилокси-2(1H)-пиридона (187 мг, 0,93 ммоль), промежуточного соединения I-10 (375 мг, 0,93 ммоль), йодида меди (177 мг, 0,93 ммоль), N,N-диметилэтилендиамина (0,198 мл, 1,86 ммоль), фосфата калия (395 мг, 1,86 ммоль) в смеси диоксан:ДМФА 4:1 (4 мл) нагревали при 180°C в течение 15 минут в условиях микроволнового облучения. Затем добавляли DCM. Твердое вещество отфильтровывали через слой целита. Фильтрат обрабатывали раствором NH₄OH (30%). Органический слой отделяли, сушили (Na₂SO₄) и растворитель выпаривали с получением 600 мг BOC-защищенного соединения. Это соединение растворяли в ТФУК (3 мл) и DCM (6 мл) и смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли Na ₂CO₃ (насыщенный водный раствор). Органический слой отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (элюенты: DCM/CH₃OH 98/5 и DCM/CH₃OH(NH ₃) 9/1). Нужные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток обрабатывали этиловым эфиром с получением 0,238 г соединения 4-1 (64%).

B9. Получение конечного соединения 1-9

Смесь соединения I-5 (0,5 г, 1,25 ммоль) и 1-этокси-1-[(триметилсилил)окси]циклопропана (0,260 мл, 0,0013 моль) в MeOH (метанол; 6 мл) и уксусной кислоте (0,2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляли цианоборогидрид натрия (0,113 г, 0,0018 моль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 24 часов. Затем добавляли NaHCO₃ (насыщенный водный раствор) и NH₄OH (30%). Смесь экстрагировали при помощи DCM. Отделенный органический слой сушили (Na₂SO₄ ) и растворитель выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH 95/5 и DCM/(MeOH/NH ₃) 95/5. Нужные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток обрабатывали простым этиловым эфиром с получением 0,470 г соединения 1-9 (86%).

B10. Получение конечного соединения 2-4

Восстановительное метилирование осуществляли в течение ночи при 50°C на смеси соединения 2-3 (2,1 г, 0,005 моль) и параформа (0,5 г) в метаноле (100 мл), с использованием Pt/C 5% (0,5 г) в качестве катализатора в присутствии раствора тиофена (0,5 мл; 4% в DIPE). После поглощения H₂ (1 эквивалент) катализатор отфильтровывали и фильтрат упаривали. Остаток кристаллизовали из CH₃CN. Выход: 1,6 г соединения 2-4 (71%).

B11. Получение конечного соединения 1-15

Смесь промежуточного соединения I-1 (7,80 г, 0,022 моль), 1,1-диметилэтилового эфира 2,8-диазаспиро[4,5]декан-8-карбоновой кислоты (6 г, 0,025 моль), Pd(OAc)₂ (0,25 г, 0,0011 моль), BINAP (1,12 г, 0,0018 моль) и ^tBuONa (2,4 г, 0,025 моль) перемешивали в течение ночи в атмосфере N₂ на масляной бане при 100°C. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали на Дикалите. Фильтр промывали при помощи толуола (200 мл). Фильтрат упаривали и получали 6 г неочищенного остатка. Фильтр также промывали горячим DCM (300 мл). Растворитель выпаривали с получением 12 г белого твердого вещества. Объединенные остатки кристаллизовали из CH₃ CN. Получали 8,3 г BOC-защищенного соединения (73%). Это BOC-защищенное соединение (8,3 г, 0,016 моль) суспендировали в 2-пропаноле (200 мл). Затем добавляли смесь HCl/2-пропанол (50 мл; 6 N) и получали раствор. Этот раствор нагревали, и происходило образование осадка. Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов, после чего ее охлаждали на ледяной бане. Продукт отфильтровывали. Выход: 8,0 г соединения 1-15 (99%; 2HCl.0,8 H₂O).

B12. Получение конечного соединения 1-14

Первое соединение 1-15 преобразовывали в свободное основание (которое соответствует соединению 1-13) способами, хорошо известными специалистам в данной области. Затем осуществляли реакцию восстановительного метилирования в течение ночи при 50°C на смеси соединения 1-13 (1,5 г, 0,0036 моль) и параформа (1 г) в метаноле (150 мл), с использованием Pt/C 5% (0,5 г) в качестве катализатора в присутствии раствора тиофена (1,0 мл; 4% в DIPE). После поглощения H₂ (1 экв.) катализатор отфильтровывали и фильтрат упаривали. Остаток кристаллизовали из CH₃CN. Желаемое соединение отфильтровывали. Выход: 1,2 г соединения 1-14 (78%).

Таблицы 1-4 представляют соединения формулы (I), которые были получены в соответствии с одним из описанных выше примеров.

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблица 4

АНАЛИТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

ЖХМС Основная процедура A

ВЭЖХ-анализ осуществляли с использованием HP 1100 от фирмы Agilent Technologies, который включал насос (четырех- или двухкомпонентный) с дегазатором, автоматическое устройство для ввода проб, колоночную печь, диодный детектор (DAD) и колонку, указанную в соответствующих методах ниже. Поток из колонки разделяли для отведения в MS-спектрометр. Конфигурация MS-детектора включала источник ионизации электроспреем. Азот использовали в качестве распыляющего газа. Температуру источника поддерживали при 140°C. Сбор данных осуществляли с использованием программы MassLynx-Openlynx.

ЖХМС Основная процедура B

ВЭЖХ-анализ осуществляли с использованием системы Alliance HT 2790 (Waters), включающей четырехкомпонентный насос с дегазатором, автоматическое устройство для ввода проб, колоночную печь (установленную на 40°C, если не указано иное), диодный детектор (DAD) и колонку, указанную в соответствующих методах ниже. Поток из колонки разделяли для отведения в MS-спектрометр. Конфигурация MS-детектора включала источник ионизации электроспреем. Масс-спектры получали путем сканирования от 100 до 1000 в течение 1 с с использованием времени покоя 0,1 с. Напряжение на капиллярной игле было 3 кВ, и температуру источника поддерживали при 140°C. Азот использовали в качестве распыляющего газа. Сбор данных осуществляли с использованием системы данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.

ЖХМС Основная процедура C

ЖХ-анализ осуществляли с использованием системы Acquity UPLC (Waters), включающей двухкомпонентный насос, устройство для ввода проб, колоночный нагреватель (установленный на 55°C), диодный детектор (DAD) и колонку, указанную в соответствующих методах ниже. Поток из колонки разделяли для отведения в MS-спектрометр. Конфигурация MS-детектора включала источник ионизации электроспреем. Масс-спектры получали путем сканирования от 100 до 1000 в течение 0,18 с с использованием времени покоя 0,02 с. Напряжение на капиллярной игле было 3,5 кВ, и температуру источника поддерживали при 140°C. Азот использовали в качестве распыляющего газа. Сбор данных осуществляли с использованием системы данных.

ЖХМС - Процедура 1

В дополнение к основной процедуре A: Обращенно-фазовую ВЭЖХ осуществляли на колонке ACE-C18 (3,0 мкм, 4,6×30 мм) от фирмы Advanced Chromatography Technologies, со скоростью потока 1,5 мл/мин, при 40°C. Использовали следующие условия градиента: 80% A (0,5 г/л раствора ацетата аммония), 10% B (ацетонитрил), 10% C (метанол) до 50% B и 50% C через 6,5 минут, до 100% B к 7 минутам и уравновешивали до начальных условий к 7,5 минутам вплоть до 9,0 минут. Объем вводимой пробы 5 мкл. Масс-спектры высокого разрешения (по времени пролета, TOF) получали только в режиме положительной ионизации путем сканирования от 100 до 750 в течение 0,5 с с использованием времени покоя 0,1 с. Напряжение на капиллярной игле было 2,5 кВ для режима положительной ионизации и напряжение на конусе было 20 В. Лейцин-Энкефалин использовали в качестве стандартного вещества для калибрования зафиксированной массы.

ЖХМС - Процедура 2

В дополнение к основной процедуре B: Обращенно-фазовую ВЭЖХ осуществляли на колонке Xterra MS C18 (3,5 мкм, 4,6×100 мм) со скоростью потока 1,6 мл/минут. Использовали три подвижные фазы (подвижная фаза A: 95% 25 мМ ацетата аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза B: ацетонитрил; подвижная фаза C: метанол) для осуществления условий градиента 100% A до 1% A, 49% B и 50% C в течение 6,5 минут, до 1% A и 99% B в течение 1 минуты и выдерживали эти условия в течение 1 минуты и снова уравновешивали 100% A в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Напряжение на конусе было 10 В для режима положительной ионизации и 20 В для режима отрицательной ионизации.

ЖХМС - Процедура 3

В дополнение к основной процедуре B: Колоночный нагреватель был установлен на 60°C. Обращенно-фазовую ВЭЖХ осуществляли на колонке Xterra MS C18 (3,5 мкм, 4,6×100 мм) со скоростью потока 1,6 мл/минута. Использовали три подвижные фазы (подвижная фаза A: 95% 25 мМ ацетата аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза B: ацетонитрил; подвижная фаза C: метанол) для осуществления условий градиента 100% A до 50% B и 50% C в течение 6,5 минут, до 100% B в течение 0,5 минуты и выдерживали эти условия в течение 1 минуты и снова уравновешивали 100% A в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Напряжение на конусе было 10 В для режима положительной ионизации и 20 В для режима отрицательной ионизации.

ЖХМС - Процедура 4

В дополнение к основной процедуре C: Обращенно-фазовую СВЭЖХ (сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография) осуществляли на колонке C18 (1,7 мкм, 2,1×50 мм; Waters Acquity) со связанным мостиком гибридом этилсилоксан/силикагель(BEH) со скоростью потока 0,8 мл/минута. Использовали две подвижные фазы (подвижная фаза A: 0,1% муравьиной кислоты в H₂O/метаноле 95/5; подвижная фаза B: метанол) для осуществления условий градиента 95% A и 5% B до 5% A и 95% B в течение 1,3 минуты и выдерживанием в течение 0,2 минуты. Использовали объем вводимой пробы 0,5 мкл. Напряжение на конусе было 10 В для режима положительной ионизации и 20 В для режима отрицательной ионизации.

Точки плавления

Для некоторых соединений определяли точки плавления (т.пл.) при помощи DSC823e (Mettler-Toledo). Точки плавления измеряли с использованием температурного градиента 30°C/минута. Максимальная температура была 400°C. Значения представляют собой максимальные значения.

Для некоторых соединений определяли точки плавления (т.пл.) при помощи DSC822e (Mettler-Toledo). Точки плавления измеряли с использованием температурного градиента 10°C/минута. Конечная температура была установлена на 300°C. Значения представляют собой максимальные значения.

Для некоторых соединений определяли точки плавления в открытых капиллярных пробирках в аппарате Mettler FP62. Точки плавления измеряли с использованием температурного градиента 10°C/минута. Максимальная температура была 300°C. Точку плавления считывали с цифрового дисплея.

Данные были получены с экспериментальными погрешностями, которые обычно связаны с этим аналитическим методом.

C. Фармакологические примеры

Взаимодействие соединения формулы (I) с MCH-1-рецепторами оценивали в in vitro анализах временной мобилизации (Ca²⁺ ) в формате флуориметрического планшет-ридера (FLIPR) (Sullivan et al. 1999, Methods Mol Biol 114:125-133). В общем, природный агонист (MCH) инкубировали с клетками, экспрессирующими MCH-1-рецептор, что вызывало зависимую от концентрации временную мобилизацию Ca²⁺ из внутренних запасов. Взаимодействие испытываемых соединений с рецептором оценивали в конкурентных анализах. Различные концентрации испытываемого соединения добавляли к инкубационной смеси, содержащей экспрессирующие рецептор клетки и субмаксимальную концентрацию MCH. Испытываемое соединение пропорционально его антагонистической активности и его концентрации ингибировало MCH-индуцированную мобилизацию Ca²⁺.

Пример C1: Анализы связывания с MCH-1

Клеточная культура и мембранный препарат. Клетки яичников китайского хомячка (CHO), стабильно экспрессирующие MCH-1-рецептор человека, выращивали в 1:1 смеси модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM) и среды HAM F12, включающей Glutamax (Invitrogen), дополненной 10% термоактивированной фетальной бычьей сывороткой и 400 мкг/мл генетицина.

Анализ мобилизации Ca²⁺ для MCH-1-рецептора . За двадцать четыре часа до эксперимента экспрессирующие MCH-1-рецептор CHO клетки высевали в 20 мкл (5000 клеток на лунку) в 384-луночные микротитровальные планшеты с темными стенками и прозрачным дном (Costar). В день эксперимента добавляли 20 мкл на лунку содержащего кальций набора для анализа, содержащего 10 мМ пробенецида (Molecular Devices). Клетки нагружали в течение 90 минут при 37°C и 5% CO₂ в инкубаторе для клеточной культуры. После нагрузки добавляли 20 мкл серийных разведений испытываемого соединения и клетки далее инкубировали в течение 20 минут при комнатной температуре в темноте. Через 20 минут добавляли 20 мкл субмаксимальной концентрации MCH и регистрировали изменения внутриклеточного кальция непосредственно в аппарате FLIPR III (Molecular devices).

Анализ данных и результаты. Данные анализов в присутствии соединения рассчитывали как процент от общих Ca ²⁺-ответов, измеренных в отсутствие испытываемого соединения. Кривые ингибирования, представляющие собой процент от общих Ca ²⁺-ответов против log значения концентрации испытываемого соединения, получали автоматически и сигмоидальные кривые ингибирования получали с использованием метода нелинейной регрессии. Значения pIC₅₀ для испытываемых соединений получали на основании индивидуальных кривых.

Все соединения формулы (I) обеспечивали ингибирование более чем 50% (pIC₅₀ ) при испытываемой концентрации в пределах от 10^-6 M до 10^-9 M зависимым от концентрации образом.

Для выбранного ряда соединений, охватывающих б льшую часть различных вариантов воплощения формулы (I), результаты in vitro исследований представлены в таблице 6.

Таблица 6
Данные фармакологических исследований для соединений по настоящему изобретению
Соединение №	MCH-1 pIC 50
1-12	7,6
1-6	7,6
2-1	7,6
2-3	7,6
3-4	7,6
1-14	7,5
1-4	7,5
1-5	7,5
2-4	7,5
2-2	7,4
3-2	7,4
1-2	7,3
1-11	7,2
1-7	7,2
1-8	7,2
3-1	7,2
4-1	7,2
1-1	7,1
1-10	7,1
1-9	7,0
1-3	6,9
3-3	6,3

Пример C.2: Определение снижения hERG

Потенциальные эффекты соединений по настоящему изобретению на hERG-опосредованный мембранный K ⁺ ток исследовали на уровне отдельной клетки с использованием цельноклеточной конфигурации пэтч-кламп метода с одним электродом (Hamill, O.P., Marty, A., Neher, E., Sakmann, B. & Sigworth, F.J. (1981) Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches. Pfl gers Archiv. 391: 85-100).

HERG (ether-à-go-go -related ген человека) кодирует калиевый канал с биофизическими свойствами, подобными быстро активируемому K⁺ току задержанного выпрямления (I_Kr) в сердечных миоцитах (Snyders, D.J. & Chaudhary, A. (1996). High affinity open channel block by dofetilide of HERG expressed in a human cell line. Molecular Pharmacology 49, 949-955 and Smith, P.L., Baukrowitz, T. & Yellen, G. (1996). The inward rectification mechanism of the HERG cardiac potassium channel. Nature 379, 833-836). Этот I_Kr ток способствует K⁺ току, ответственному за фазу реполяризации потенциала сердечного действия. Блокирование этого тока может продлить продолжительность потенциала действия и вызвать длительный QT-синдром. Развитие QT пролонгации может привести к приступам вентрикулярной аритмии, такой как Torsades de Pointes, что может привести к внезапной смерти.

Автоматический пэтч-кламп анализ с использованием системы PatchXpress 7000A (Axon Instruments) использовали для оценки эффекта испытываемых веществ на HERG остаточный ток.

Клетки : Использовали клеточную линию почки эмбриона человека (HEK293) со стабильной трансфекцией HERG (Mohammad, S., Zhou, Z., Gong, Q. & January, C.T. (1997). Blockage of the HERG human cardiac K+ channel by the gastrointestinal prokinetic agent cisapride. American Journal of Physiology 273, H2534-H2538 and Zhou, Z., Gong, Q., Ye, B., Fan, Z., Makielski, J.C., Robertson, G.A. & January, C.T. (1998). Properties of HERG channels stably expressed in HEK 293 cells studied at physiological temperature. Biophysical Journal 74, 230-241). Клетки постоянно находились в культуре. Перед использованием получали клеточную суспензию и непосредственно перед экспериментом эти клетки центрифугировали при 1000 об./мин в течение 1 минуты, супернатант сливали и клетки снова суспендировали в 150 мкл раствора ванночки в 1,5-мл пробирке Эппендорфа.

Растворы: Раствор в ванночке содержал 137 мМ NaCl, 4 мМ KCl, 10 мМ глюкозы, 10 мМ HEPES, 1,8 мМ CaCl ₂ и 1 мМ MgCl₂ (pH 7,4 при помощи NaOH). Внутрипипеточный раствор содержал 130 мМ KCl, 5 мМ EGTA, 10 мМ HEPES, 5 мМ MgATP и 1 мМ MgCl₂ (pH 7,2 при помощи KOH). Испытываемые соединения растворяли в DMSO с получением исходного раствора от 10^-2 M до 3×10^-1 M (конечная концентрация DMSO: 0,3, 0,1 или 0,03%). Контроль (= раствор ванночки + DMSO) и испытываемые растворы (= раствор ванночки + DMSO + испытываемое соединение) содержали 0,3% или 0,1% DMSO.

Система регистрации: В систему PatchXpress заливали (примировали) раствор ванночки и внутрипипеточный раствор. 16-луночный чип для наполнения (Sealchip 16, Aviva Biosciences Corp.) вводили в систему и примировали до получения суспензии клеток в растворе в ванночке. Пробирку Эппендорфа, заполненную клетками, помещали в определенное положение и начинали процедуру с растирания и диспергирования клеток в каждой регистрирующей камере (лунке) чипа. Система PatchXpress следовала общим принципам общепринятого пэтч-кламп анализа в конфигурации целая клетка .

Измерения: HERG ток определяли как максимальный остаточный ток -50 мВ после 4,8-с деполяризации до +20 мВ, начиная с исходного потенциала -80 мВ. Каждое значение представляет средний ток от 4 последовательных импульсов напряжения. Для определения продолжительности блокирования остаточный ток сравнивали с предварительной обработкой носителем. Эффект испытываемого соединения на HERG ток измеряли через 5 минут после внесения лекарственного средства. Если наблюдали более чем 5% снижение HERG тока, испытываемое вещество считалось (частично) блокирующим HERG ток.

Контрольные эксперименты: Одновременно осуществляли контрольные эксперименты с использованием носителя в аналогичных условиях. Астемизол использовали в качестве контрольного соединения, известного как ингибирующее HERG - опосредованный ток при наномолярных концентрациях.

Таблица 7
Сравнение показателей снижения hERG
Соединение	Структура	Снижение hERG (%) при 3 мкМ
Соединение предшествующего уровня техники (Banyu 2005/085200)		38,9%
Соединение предшествующего уровня техники (Banyu 2005/085200)		42,6%
Соединение 1-7		-1,8%
Соединение 1-12		0,7%
Соединение 2-1		15,6%

D. Примеры композиций

"Активный ингредиент" (а.и.), как это используется во всех представленных примерах, относится к конечному соединению формулы (i), его фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли, его стереохимически изомерным формам, его N-оксидной форме, его четвертичной аммониевой соли и его пролекарству.

Пример D.1: капли для орального введения

500 г а.и. растворяли в 0,5 л 2-гидроксипропановой кислоты и 1,5 л полиэтиленгликоля при 60-80°С. После охлаждения до 30-40°С добавляли 35 л полиэтиленгликоля и смесь тщательно перемешивали. Затем добавляли раствор 1750 г натрий сахарина в 2,5 л дистиллированной воды и при перемешивании добавляли 2,5 л какао-ароматизатора и полиэтиленгликоль (сколько потребуется) до объема 50 л, с получением раствора капель для орального введения, включающего 10 мг/мл а.и. Полученным раствором заполняли подходящие контейнеры.

Пример D.2: раствор для орального введения

9 г метил 4-гидроксибензоата и 1 г пропил 4-гидроксибензоата растворяли в 4 л кипящей дистиллированной воды. В 3 л этого раствора растворяли сначала 10 г 2,3-дигидроксибутандионовой кислоты и затем 20 г а.и. Этот последний полученный раствор объединяли с оставшейся частью первого полученного раствора и добавляли 12 л 1,2,3-пропантриола и 3 л 70% раствора сорбита. 40 г натрий сахарина растворяли в 0,5 л воды и добавляли 2 мл малиновой эссенции и 2 мл эссенции крыжовника. Этот последний полученный раствор объединяли с предыдущим раствором, добавляли воду (сколько потребуется) до объема 20 л с получением раствора для орального введения, включающего 5 мг активного ингредиента на чайную ложку (5 мл). Полученным раствором заполняли подходящие контейнеры.

Пример D.3: таблетки с пленочным покрытием

Получение ядра таблеток

Смесь 100 г а.и., 570 г лактозы и 200 г крахмала тщательно перемешивали и затем увлажняли раствором 5 г додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона примерно в 200 мл воды. Мокрую порошкообразную смесь просеивали через сито, сушили и снова просеивали через сито. Затем добавляли 100 г микрокристаллической целлюлозы и 15 г гидрированного растительного масла. Все это тщательно смешивали и прессовали в таблетки с получением 10000 таблеток, каждая из которых содержала 10 мг активного ингредиента.

Покрытие

К раствору 10 г метилцеллюлозы в 75 мл денатурированного этанола добавляли раствор 5 г этилцеллюлозы в 150 мл DCM. Затем добавляли 75 мл DCM и 2,5 мл 1,2,3-пропантриола. 10 г полиэтиленгликоля расплавляли и растворяли в 75 мл DCM. Этот последний полученный раствор добавляли к первому полученному раствору и затем добавляли 2,5 г октадеканоата магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл концентрированной суспензии красителя и все это гомогенизировали. Ядра таблеток покрывали полученной таким образом смесью в аппарате для нанесения покрытия.

Пример D.4: раствор для инъекций

1,8 г метил 4-гидроксибензоата и 0,2 г пропил 4-гидроксибензоата растворяли примерно в 0,5 л кипящей воды для инъекций. После охлаждения до около 50°С добавляли при перемешивании 4 г молочной кислоты, 0,05 г пропиленгликоля и 4 г а.и. Раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду для инъекций (сколько потребуется) до объема 1 л, с получением раствора, включающего 4 мг/мл а.и. Раствор стерилизовали путем фильтрации и заполняли им стерильные контейнеры.