соединения феноксикарбоновой кислоты и композиции для доставки активных веществ

Формула изобретения

1. Соединение, которое имеет следующую формулу:

и выбрано из группы, включающей

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
1	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	СН2	пара-Ph
2	Н	Н	Н	Н	ОН	СН2	пара-Ph
5	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН 2)5	связь
6	Н	Н	Н	Н	ОН	(CH2) 6	связь
7	Н	Н	Н	Н	ОН	(CH2)7	связь
8	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН 2)9	связь
9	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)3	связь
10	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH 2)4	связь
11	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH 2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
18	Н	Н	Н	Н	СН=СНСН3	(СН 2)7	связь
19	Н	Н	Н	Н	NH2	(CH 2)7	связь
20	Н	Н	Н	Н	NO2	(СН 2)7	связь
22	Н	Н	Cl	Н	NH2	(CH 2)7	связь
23	Н	Н	Cl	Н	NH2	(СН 2)4	связь
24	Н	Н	Н	Н	NHC(O)СН3	(СН 2)7	связь
25	Н	Н	Н	Н	СН=CHCO2Н	(СН 2)7	связь
26	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН3	(СН2)3	связь
27	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН 3	(СН2) 5	связь
28	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2СН3	(CH 2)7	связь
29	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН3	(СН2)9	связь
30	Н	Н	Н	Н	C(O)NH2	(CH2)7	связь
31	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH3	(СН2)7	связь
32	Н	Н	Н	Н	СООН	(СН2 )7	связь
33	Н	Н	Н	Н	C(O)NHCH 2CH3	(СН 2)7	связь
34	Н	Н	Н	Н	C(O)NHCH(CH3)2	(СН2)7	связь
35	Н	Н	Н	Н	ОСН3	(СН2) 7	связь
36	Н	Н	Н	Н	СН(ОН)СН 3	(СН2) 7	связь
37	Н	Н	Н	Н	С(СН 3)2OH	СН 2	пара-Ph
38	Н	Н	Н	ОН	С(O)СН 3	(СН2) 7	связь
39	Н	Н	Н	ОСН3	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
43	Н	ОН	Н	Н	Н	(CH2) 7	связь
44	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2)9	связь
45	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2 )5	связь
51	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH 3	(СН2) 7	связь
52	Н	Н	Н	Н	C(O)NH 2	СН2	пара-Ph
54	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)9	связь
55	Н	Н	ОСН3	Н	С(O)СН 3	(СН2) 7	связь
56	Н	ОСН 3	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
57	Н	Н	ОН	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
58	Н	Н	СН3	Н	С(O)СН3	(СН2)5	связь
62	Н	Н	С(O)СН3	Н	Н	(СН2)7	связь
63	Н	Н	С(O)СН2 СН3	Н	Н	(СН2) 7	связь
64	Н	С(O)СН 3	Н	Н	Н	(CH2) 7	связь
68	Н	CL	Н	Н	Н	(СН2)7	связь
71	Н	Н	F	Н	F	(СН2 )7	связь
72	Н	Н	Н	Н	OH	(CH2)10	связь
73	Н	Н	Н	Н	CL	(СН 2)7	связь
74	Н	NO2	Н	Н	ОН	(СН 2)7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2) 4	связь
76	Н	Н	Н	Н	CF3	(СН2) 4	связь
77	F	Н	Н	Н	F	(CH2)7	связь
79	Н	Н	Н	Н	ОН	СН2 СН(ОН)	пара-Ph
80	Н	Н	ОСН3	Н	Н	(СН2) 6-СН(СН3)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH2)9-OH	СН2	связь
92	Н	Н	Н	Н	-O(СН2)5СООН	(СН2)5	связь
93	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН 2)7	связь
94	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН2)5	связь
98	Н	Н	Н	С(O)-NH 2	O-(СН3) 7-СООН	-(СН2) 7-	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение, которое имеет следующую формулу:

и выбрано из группы, включающей

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
11	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)7	связь
43	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2) 4	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

3. Композиция, предназначенная для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, отличающаяся тем, что содержит

(A) активное вещество и

(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное для доставки активного вещества к тканям животного, формулы

которое выбрано из группы

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
1	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	СН2	пара-Ph
2	Н	Н	Н	Н	ОН	СН2	пара-Ph
3	Н	Н	Н	Н	ОН	СН2	связь
4	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН 2)3	связь
5	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2) 5	связь
6	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2)6	связь
7	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2 )7	связь
8	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2)9	связь
9	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH2)3	связь
10	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)4	связь
11	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)7	связь
13	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	связь
14	Н	Н	Н	Н	Н	(СН 2)3	связь
15	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2) 5	связь
16	Н	Н	Н	Н	Н	(CH2)9	связь
17	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )10	связь
18	Н	Н	Н	Н	СН=СНСН 3	(СН2) 7	связь
19	Н	Н	Н	Н	NH2	(CH2) 7	связь
20	Н	Н	Н	Н	NO2	(СН2) 7	связь
21	Н	Н	Н	Н	NH2	(CH2) 4	связь
22	Н	Н	Cl	Н	NH 2	(СН2) 7	связь
23	Н	Н	Cl	Н	NH 2	(СН2) 4	связь
24	Н	Н	Н	Н	NHC(O)СН 3	(СН2) 7	связь
25	Н	Н	Н	Н	СН=CHCO 2Н	(СН2) 7	связь
26	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2СН3	(СН 2)3	связь
27	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН3	(СН2)5	связь
28	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН 3	(СН2) 7	связь
29	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2СН3	(СН 2)9	связь
30	Н	Н	Н	Н	C(O)NH2	(СН 2)7	связь
31	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH3	(СН 2)7	связь
32	Н	Н	Н	Н	СООН	(СН2) 7	связь
33	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH 2СН3	(СН 2)7	связь
34	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH2(СН3) 2	(СН2) 7	связь
35	Н	Н	Н	Н	ОСН 3	(CH2) 7	связь
36	Н	Н	Н	Н	СН(ОН)СН 3	(CH2) 7	связь
37	Н	Н	Н	Н	С(СН 3)2OH	СН 2	пара-Ph
38	Н	Н	Н	ОН	С(O)СН 3	(СН2) 7	связь
39	Н	Н	Н	ОСН3	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
43	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2) 7	связь
44	Н	ОН	Н	Н	Н	(CH2)9	связь
45	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2 )5	связь
46	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2)3	связь
47	Н	Н	ОН	Н	Н	(CH 2)7	связь
48	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2) 9	связь
49	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2)5	связь
50	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2 )3	связь
51	Н	Н	Н	Н	C(O)NHCH 3	(СН2) 9	связь
52	Н	Н	Н	Н	C(O)NH 2	СН2	пара-Ph
54	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH2)7	связь
55	Н	Н	ОСН3	Н	С(O)СН 3	(СН2) 7	связь
56	Н	ОСН 3	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
57	Н	Н	ОН	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
58	Н	Н	СН3	Н	С(O)СН3	(СН2)5	связь
59	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	СН2	пара-Ph
60	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2)5	связь
61	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2 )7	связь
62	Н	Н	С(O)СН3	Н	Н	(СН 2)7	связь
63	Н	Н	С(O)СН2СН 3	Н	Н	(СН2)7	связь
64	Н	С(O)СН3	Н	Н	Н	(СН2)7	связь
65	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
66	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	пара-Ph
67	Н	Н	ОН	Н	Н	СН2	пара-Ph
68	Н	Cl	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
69	Н	ОСН 3	Н	Н	Н	(СН2) 7	связь
71	Н	Н	F	Н	F	(СН2)7	связь
72	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2 )10	связь
73	Н	Н	Н	Н	CL	(СН2)7	связь
74	Н	NO2	Н	Н	ОН	(СН2) 7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2)4	связь
76	Н	Н	Н	Н	CF3	(СН 2)4	связь
77	F	Н	Н	Н	F	(СН2) 7	связь
78	Н	Н	Н	Н	Cl	СН2	пара-Ph
79	Н	Н	Н	Н	ОН	СН2СН(ОН)	пара-Ph
80	Н	Н	ОСН3	Н	Н	(СН2)6-СН(СН 3)	связь
81	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2)6-СН(СН 3)	связь
82	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2)6-СН(СН 2СН2СН3)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH2) 9-ОН	СН2	связь
92	Н	Н	Н	Н	-O(CH2)5 COOH	(СН2) 5	связь
93	Н	СН 3	Н	Н	СН3	(СН 2)7	связь
94	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН2)5	связь
98	Н	Н	Н	С(O)-NH 2	O-(СН2) 7-СООН	-(СН2) 7-	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

4. Композиция, предназначенная для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, отличающаяся тем, что содержит

(A) активное вещество и

(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное для доставки активного вещества к тканям животного, формулы

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
47	Н	Н	ОН	Н	Н	(CH2 )7	связь

и его фармацевтически приемлемые соли.

5. Композиция, предназначенная для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, отличающаяся тем, что содержит

(A) активное вещество и

(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное для доставки активного вещества к тканям животного, формулы

которое выбрано из группы, включающей

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
11	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH2)7	связь
43	Н	ОН	Н	Н	Н	(CH2 )7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2) 4	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

6. Композиция по любому из пп.3-5, в которой активное вещество выбрано из группы, включающей биологически активное вещество, химически активное вещество и их комбинацию.

7. Композиция по п.6, в которой биологически активное вещество включает по меньшей мере один белок, полипептид, пептид, гормон, полисахарид, мукополисахарид, углевод, небольшие полярные органические молекулы или липид.

8. Композиция по п.6, в которой указанное биологически активное вещество предназначено для перорального, интраназального сублингвального интрадуоденального, подкожного, буккального, ректального, вагинального, пульмонального, трансдермального, парентерального, внутривенного, внутримышечного, внутриглазного введения, введения в толстую кишку или через слизистую оболочку.

9. Композиция по п.8, в которой указанное биологически активное вещество предназначено для перорального введения.

10. Композиция по п.8, в которой указанное биологически активное вещество предназначено для пульмонального введения.

11. Композиция по п.6, в которой биологически активное вещество выбрано из группы, включающей гормоны роста, гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста, гормоны роста свиней, гормоны, стимулирующие выделение гормонов роста, интерфероны, -интерферон, -интерферон, -интерферон, интерлейкин-1, интерлейкин-2, инсулин, инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека, рекомбинантный инсулин человека, инсулиноподобный фактор роста (IGF), IGF-1, гепарин, нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин, ультранизкомолекулярный гепарин, кальцитонин, кальцитонин лосося, кальцитонин угря, кальцитонин человека, эритропоэтин (ЕРО), естественный фактор предсердия, антигены, моноклональные антитела, соматостатин, ингибиторы протеазы, адренокортикотропин, гормон, стимулирующий выделение гонадотропина, окситоцин, гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона, фолликулостимулирующий гормон, глюкоцереброзидазу, тромбопоэтин, филграстим, простагландины, циклоспорин, вазопрессин, кромолиннатрий, натрийхромогликат, динатрийхромогликат, ванкомицин, десферриоксамин, бисфосфонаты, алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат, инкадронат, паращитовидный гормон, фрагменты паращитовидного гормона, противомикробные средства, даптомицин, противогрибковые средства, витамины; аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных соединений или любую их комбинацию.

12. Композиция по п.11, в которой биологически активное вещество включает инсулин, нефракционированный гепарин, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин, ультранизкомолекулярный гепарин, кальцитонин, паращитовидный гормон, эритропоэтин, даптомицин, гормоны роста человека, аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных соединений или любую их комбинацию.

13. Композиция по п.12, в которой биологически активное вещество является кальцитонином.

14. Стандартная лекарственная форма, предназначенная для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, содержащая

(A) композицию по пп.3-5 и

(B) (а) наполнитель,

(b) разбавитель,

(c) дезинтегратор,

(d) смазывающее вещество,

(e) пластификатор,

(f) краситель,

(g) носитель или

(h) любую их комбинацию.

15. Стандартная лекарственная форма по п.14, в которой активное вещество выбрано из группы, включающей биологически активное вещество, химически активное вещество и их комбинацию.

16. Стандартная лекарственная форма по п.15, в которой биологически активное вещество включает по меньшей мере один белок, полипептид, пептид, гормон, полисахарид, мукополисахарид, небольшие полярные органические молекулы, углевод или липид.

17. Стандартная лекарственная форма по п.15, в которой биологически активное вещество выбрано из группы, включающей гормоны роста, гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста, гормоны роста свиней, гормоны, стимулирующие выделение гормона роста, интерфероны, -интерферон, -интерферон, -интерферон, интерлейкин-1, интерлейкин-2, инсулин, инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека, рекомбинантный инсулин человека, инсулиноподобный фактор роста (IGF), IGF-1, гепарин, нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин, ультранизкомолекулярный гепарин, кальцитонин, кальцитонин лосося, кальцитонин угря, кальцитонин человека, эритропоэтин (ЕРО), естественный фактор предсердия, антигены, моноклональные антитела, соматостатин, ингибиторы протеазы, адренокортикотропин, гормон, стимулирующий выделение гонадотропина, окситоцин, гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона, фолликулостимулирующий гормон, глюкоцереброзидазу, тромбопоэтин, филграстим, простагландины, циклоспорин, вазопрессин, кромолиннатрий, натрийхромогликат, динатрийхромогликат, ванкомицин, десферриоксамин, бисфосфонаты, алендроиат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат, инкадронат, паращитовидный гормон, фрагменты паращитовидного гормона, противомикробные средства, даптомицин, противогрибковые средства, витамины, аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных соединений или любую их комбинацию.

18. Стандартная лекарственная форма по п.17, в которой биологически активное вещество включает инсулин, нефракционированный гепарин, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин, ультранизкомолекулярный гепарин, кальцитонин, паращитовидный гормон, эритропоэтин, гормоны роста человека, аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных соединений, или любую их комбинацию.

19. Стандартная лекарственная форма по п.18, в которой активное вещество является кальцитонином.

20. Стандартная лекарственная форма по п.15, которая является таблеткой, капсулой, порошком или жидкостью.

21. Способ введения активных веществ для их доставки к тканям организма нуждающемуся в этом животного, который включает пероральное введение указанному животному композиции по п.4.

22. Способ получения композиции, предназначенной для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, который заключается в том, что смешивают

(A) по меньшей мере одно активное вещество;

(B) по меньшей мере одно соединение по п.1 и,

(C) необязательно, носитель, приемлемый для введения.

23. Применение соединения для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, где указанное соединение имеет следующую формулу:

и выбрано из группы, включающей

Соед. №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
3	Н	Н	Н	Н	ОН	CH2	связь
4	Н	Н	Н	Н	ОН	(CH 2)3	связь
13	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	связь
14	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )3	связь
15	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2)5	связь
16	Н	Н	Н	Н	Н	(СН 2)9	связь
17	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2) 10	связь
21	Н	Н	Н	Н	NH2	(СН2) 4	связь
46	Н	ОН	Н	Н	Н	(СН2)3	связь
47	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2 )7	связь
48	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН2)9	связь
49	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН 2)5	связь
50	Н	Н	ОН	Н	Н	(CH2) 3	связь
59	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	СН2	пара-Ph
60	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2) 5	связь
61	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(CH2)7	связь
65	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
66	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	пара-Ph
67	Н	Н	ОН	Н	Н	СН2	пара-Ph
69	Н	ОСН3	Н	Н	Н	(СН2)7	связь
78	Н	Н	Н	Н	Cl	СН2	пара-Ph
81	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН 2)6-СН(СН3)	связь
82	Н	Н	ОН	Н	Н	(СН 2)6-CH(СН2СН 2)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH 2)9-OH	СН 2	связь
95	Н	Н	NO2	Н	Н	пара-Ph	связь
96	Н	Н	NH2	Н	Н	пара-Ph	связь
97	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН2) 3-(С(СН3)2)	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

Приоритет по пп.1-23 формулы установлен от 06.11.2000.

Описание изобретения к патенту

Область техники

Настоящее изобретение относится к соединениям феноксикарбоновой кислоты, предназначенным для доставки активных веществ, таких как биологически или химически активные вещества, к тканям-мишеням. Указанные соединения пригодны для образования нековалентных смесей с активными веществами, предназначенными для перорального, внутрикишечного, легочного и других способов введения лекарственных средств животным. Данное изобретение относится также к способам получения и введения таких композиций.

Предпосылки изобретения

Применение известных средств доставки активных веществ к тканям часто ограничено биологическими, химическими и физическими барьерами. Указанные барьеры обычно создаются средой, в которой производится доставка, средой, окружающей ткани-мишени, куда осуществляется доставка, и/или самими тканями-мишенями. Биологически и химически активные вещества особенно чувствительны к таким барьерам.

В организме животного существуют различные барьеры, препятствующие проникновению биологически и химически активных фармакологических и лекарственных средств. В качестве примеров физических барьеров можно привести кожу, двойные липидные слои и оболочки различных органов, которые являются относительно непроницаемыми для некоторых активных веществ, но должны быть преодолены на пути к мишеням, таким как сердечно-сосудистая система. Химические барьеры включают, но не ограничиваются ими, разные значения рН в желудочно-кишечном тракте (GI) и расщепляющие ферменты.

Преодоление указанных барьеров особенно важно при создании пероральных систем доставки лекарственных средств. Пероральное введение многих биологически или химически активных веществ является предпочтительным способом введения лекарственных средств животным, если ему не препятствуют биологические, химические и физические барьеры. К многочисленным средствам, которые обычно непригодны для перорального введения, относятся биологически или химически активные пептиды, такие как кальцитонин и инсулин; полисахариды и, в частности, мукополисахариды, включающие, но не ограничивающиеся ими, гепарин; гепариноподобные вещества; антибиотики и другие органические вещества. Указанные средства быстро становятся неэффективными или разрушаются в желудочно-кишечном тракте под действием кислотного гидролиза, ферментов и тому подобное. Кроме того, всасыванию могут препятствовать размер и структура макромолекулярных лекарственных средств.

Нестойкие фармацевтические средства ранее вводили вместе с адъювантами (например, резорцинами и неионогенными поверхностно-активными веществами, такими как полиоксиэтилен-олеиловый эфир и н-гексадецилполиэтиленовый эфир), позволяющими искусственно улучшить проницаемость стенок кишечника, а также с ингибиторами ферментов (например, ингибиторы трипсина поджелудочной железы, диизопропил-фторфосфат (DFF) и тразилол), позволяющими ингибировать ферментативное расщепление. В качестве систем доставки, инсулина и гепарина используют также липосомы. Однако спектр действия таких систем доставки лекарственных средств весьма ограничен по следующим причинам: (1) необходимость использовать адъюванты или ингибиторы в токсических количествах; (2) отсутствие приемлемых низкомолекулярных активных веществ; (3) плохая стабильность и недостаточный срок годности; (4) сложность изготовления; (5) неспособность таких систем защитить активное вещество; (6) неблагоприятное изменение активного вещества под действием системы; или (7) неспособность таких систем стимулировать всасывание активного вещества.

Для доставки фармацевтических средств недавно было предложено использовать белковые микросферы. См., например, патенты США №№ 5401516, 5443841 и заменяющий патент 35862. Кроме того, для доставки лекарственных средств используют некоторые модифицированные аминокислоты. См., например, патенты США №№ 5629020, 5643957, 5766633, 5776888 и 5866536.

Однако по-прежнему существует потребность в простых и дешевых системах доставки лекарственных средств, которые можно легко изготовить и которые обеспечивают доставку широкого спектра активных веществ при различных способах введения.

Краткое изложение существа изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям, облегчающим доставку активных веществ, и/или композициям для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, а также к применению вышеуказанных соединений для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного. Соединения для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного согласно настоящему изобретению включают соединения нижеследующей формулы:

Где:

Соединение №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
1	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	СН2	пара-Ph*
2	Н	Н	Н	Н	OH	СН2	пара-Ph
5	Н	Н	Н	Н	OH	(CH2 )5	связь
6	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2) 6	связь
7	Н	Н	Н	Н	OH	(CH2)7	связь
8	Н	Н	Н	Н	OH	(CH2 )9	связь
9	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)3	связь
10	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH 2)4	связь
11	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(CH 2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
18	Н	Н	Н	Н	СН=СНСН3	(CH 2)7	связь
19	Н	Н	Н	Н	NH2	(CH 2)7	связь
20	Н	Н	Н	Н	NO2	(СН 2)7	связь
22	Н	Н	Cl	Н	NH2	(СН 2)7	связь
23	Н	Н	Cl	Н	NH2	(СН 2)4	связь
24	Н	Н	Н	Н	NHC(O)СН3	(СН 2)7	связь
25	Н	Н	Н	Н	СН=СНСО2Н	(СН 2)7	связь
26	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН3	(СН2)3	связь
27	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН 3	(СН2) 5	связь
28	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2СН3	(СН 2)7	связь
29	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2СН3	(СН2)9	связь
30	Н	Н	Н	Н	C(O)NH2	(СН2)7	связь
31	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH3	(СН2)7	связь
32	Н	Н	Н	Н	СООН	(СН2 )7	связь
33	Н	Н	Н	Н	C(O)NHCH2CH3	(СНг)7	связь
34	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH(СН3) 2	(СН2) 7	связь
35	Н	Н	Н	Н	ОСН 3	(СН2) 7	связь
36	Н	Н	Н	Н	СН(ОН)СН 3	(СН2) 7	связь
37	Н	Н	Н	Н	С(СН 3)2OH	СН 2	пара-Ph
38	Н	Н	Н	OH	С(O)СН 3	(СН2) 7	связь
39	Н	Н	Н	ОСН3	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
43	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2) 7	связь
44	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2)9	связь
45	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2 )5	связь
51	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH3	(СН 2)9	связь
52	Н	Н	Н	Н	C(O)NH2	СН 2	пара-Ph
54	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 3	(СН2) 9	связь
55	Н	Н	ОСН3	Н	С(O)СН3	(СН 2)7	связь
56	Н	ОСН3	Н	Н	С(O)СН3	(СН2)7	связь
57	Н	Н	OH	Н	С(O)СН3	(СН2)7	связь
58	Н	Н	СН3	Н	С(O)СН 3	(СН2) 5	связь
62	Н	Н	С(O)СН3	Н	Н	(СН2) 7	связь
63	Н	Н	С(O)СН2СН3	Н	Н	(СН 2)7	связь
64	Н	С(O)СН3	Н	Н	Н	(СН 2)7	связь
68	Н	Cl	Н	Н	Н	(СН2) 7	связь
71	Н	Н	Н	Н	F	(СН2)7	связь
72	Н	Н	Н	Н	ОН	(СН2 )10	связь
73	Н	Н	Н	Н	Cl	(СН2) 7	связь
74	Н	NO 2	Н	Н	ОН	(СН2) 7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2)4	связь
76	Н	Н	Н	Н	CF3	(СН 2)4	связь
77	F	Н	Н	F	CF3	(СН 2)7	связь
79	Н	Н	Н	Н	OH	СН2СН(ОН)	пара-Ph
80	H	Н	ОСН3	Н	Н	(СН2)6-СН(СН 3)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH 2)9-OH	СН 2	связь
92	Н	Н	Н	Н	-O(СН 2)5СООН	(СН 2)5	связь
93	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН2)7	связь
94	Н	СН3	Н	Н	СН3	(СН2) 5	связь
98	Н	Н	Н	С(O)-NH2	O-(СН2)7-СООН	-(СН2)7 -	связь
и их фармацевтически приемлемые соли. * Термин «napa-Ph» означает парафенилен.

Более предпочтительные соединения без ограничения включают соединения №№5, 7, 11, 12, 43 и 75.

Данное изобретение относится также к композиции, предназначенной для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, которая содержит по меньшей мере одно из ниже приведенных соединений, и по меньшей мере одно активное вещество. В частности, указанное композиция содержит по меньшей мере одно из соединений формулы

выбранное из группы, включающей:

Соединение №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
1	Н	Н	Н	Н	С(O)СН3	CH2	пара-Ph
2	Н	Н	Н	Н	OH	CH2	пара-Ph
3	Н	Н	Н	Н	OH	СН2	связь
4	Н	Н	Н	Н	OH	(СН 2)3	связь
5	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2) 5	связь
6	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2)6	связь
7	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2 )7	связь
8	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2)9	связь
9	Н	Н	Н	Н	С(O)CH3	(СН2)3	связь
10	Н	Н	Н	Н	С(O)CH3	(СН2)4	связь
11	Н	Н	Н	Н	С(O)CH3	(СН2)5	связь
12	Н	Н	Н	Н	С(O)CH3	(СН2)7	связь
13	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	связь
14	Н	Н	Н	Н	Н	(СН 2)3	связь
15	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2) 5	связь
16	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2)9	связь
17	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )10	связь
18	Н	Н	Н	Н	СН=CHCH 3	(СН2) 7	связь
19	Н	Н	Н	Н	NH2	(СН2) 7	связь
20	Н	Н	Н	Н	NO2	(СН2) 7	связь
21	Н	Н	Н	Н	NH2	(СН2) 4	связь
22	Н	Н	Cl	Н	NH 2	(СН2) 7	связь
23	Н	Н	Cl	Н	NH 2	(СН2) 4	связь
24	Н	Н	Н	Н	NHC(O)CH 3	(СН2) 7	связь
25	Н	Н	Н	Н	CH=CHCO 2H	(СН2) 7	связь
26	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2CH3	(СН 2)3	связь
27	Н	Н	Н	Н	C(O)CH2CH3	(СН2)5	связь
28	Н	Н	Н	Н	С(O)СН2CH 3	(СН2) 7	связь
29	Н	Н	Н	Н	С(O)СН 2CH3	(СН 2)9	связь
30	Н	Н	Н	Н	C(O)NH2	(СН 2)7	связь
31	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH3	(СН 2)7	связь
32	Н	Н	Н	Н	COOH	(СН2) 7	связь
33	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH 2CH3	(СН 2)7	связь
34	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH(СН3)2	(СН2)7	связь
35	Н	Н	Н	Н	OCH3	(СН2) 7	связь
36	Н	Н	Н	Н	СН(ОН)CH 3	(СН2) 7	связь
37	Н	Н	Н	Н	С(CH 3)2ОН	СН 2	пара-Ph
38	Н	Н	Н	OH	С(O)CH 3	(CH2) 7	связь
39	Н	Н	Н	OCH3	С(O)CH3	(CH 2)7	связь
43	Н	OH	Н	Н	Н	(CH2) 7	связь
44	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2)9	связь
45	Н	OH	Н	Н	Н	(CH2 )5	связь
46	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2)3	связь
47	Н	Н	OH	Н	Н	(CH 2)7	связь
48	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2) 9	связь
49	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2)5	связь
50	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2 )3	связь
51	Н	Н	Н	Н	С(O)NHCH 3	(СН2) 9	связь
52	Н	Н	Н	Н	C(O)NH 2	СН2	пара-Ph
54	Н	Н	Н	Н	С(O)CH3	(СН2)9	связь
55	Н	Н	OCH3	Н	С(O)CH 3	(СН2) 7	связь
56	Н	OCH 3	Н	Н	С(O)CH3	(СН 2)7	связь
57	Н	Н	OH	Н	С(O)CH3	(СН 2)7	связь
58	Н	Н	CH3	Н	С(O)CH3	(СН2)5	связь
59	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	СН2	пара-Ph
60	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2)5	связь
61	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2 )7	связь
62	Н	Н	С(O)CH3	Н	Н	(СН 2)7	связь
63	Н	Н	С(O)СН2CH 3	Н	Н	(СН2)7	связь
64	Н	С(O)CH3	Н	Н	Н	(СН2)7	связь
65	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
66	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	пара-Ph
67	Н	Н	OH	Н	Н	СН2	пара-Ph
68	Н	Cl	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
69	Н	OCH 3	Н	Н	Н	(СН2) 7	связь
71	Н	Н	F	Н	F	(СН2)7	связь
72	Н	Н	Н	Н	OH	(СН2 )10	связь
73	Н	Н	Н	Н	Cl	(СН2)7	связь
74	Н	NO2	Н	Н	OH	(СН2) 7	связь
75	Н	Н	Н	Н	F	(СН2)4	связь
76	Н	Н	Н	Н	CF3	(СН 2)4	связь
77	F	Н	Н	Н	F	(СН2) 7	связь
78	Н	Н	Н	Н	Cl	СН2	пара-Ph
79	Н	Н	Н	Н	OH	CH2CH(ОН)	пара-Ph
80	Н	Н	OCH3	Н	Н	(СН2)6-СН(CH 3)	связь
81	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2)6-СН(CH 3)	связь
82	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2)6-СН(СН 2СН2CH3)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH2) 9-ОН	CH2	связь
92	Н	Н	Н	Н	-O(СН2)5 СООН	(CH2) 5	связь
93	Н	CH 3	Н	Н	CH3	(СН 2)7	связь
94	Н	CH3	Н	Н	CH3	(CH2)5	связь
98	Н	Н	Н	С(O)-NH 2	O-(СН2) 7-СООН	-(СН2) 7-	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

Указанные композиции доставляют активные вещества в выбранные биологические системы, обеспечивая более высокую или улучшенную биологическую доступность активного вещества по сравнению с введением активного вещества без соединения доставляющего агента. Предпочтительным соединением для применения в вышеуказанной композиции являются соединения №11, 12, 43, 47 и 75 и их фармацевтически приемлемые соли.

Настоящее изобретение относится также к стандартным (унифицированным) лекарственным формам, содержащим указанные композиции. Стандартная (унифицированная) лекарственная форма может быть жидкой или твердой, такой как таблетка, капсула или частицы, включая порошок или саше.

Другой вариант реализации изобретения относится к способу введения активного вещества нуждающемуся в этом животному в виде композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение доставляющего агента вышеуказанной формулы, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и активное вещество. Предпочтительные способы введения включают пероральный, внутрикишечный и легочный способы.

Другой вариант реализации изобретения относится к способу лечения заболевания или достижения требуемого физиологического эффекта у животного в результате введения композиции по настоящему изобретению.

Другой вариант реализации изобретения относится к способу получения композиции по настоящему изобретению путем смешивания по меньшей мере одного соединения доставляющего агента вышеуказанной формулы, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и по меньшей мере одного активного вещества.

Еще один вариант реализации настоящего изобретения относится к применению соединения для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, где указанное соединение, имеет следующую формулу

и выбрано из группы, включающей:

Соединение №	R 1	R2	R3	R 4	R5	R6	R 7
3	H	H	H	H	OH	CH2	связь
4	H	H	H	H	OH	(СН 2)3	связь
13	H	H	H	H	H	CH2	связь
14	H	H	H	H	H	(СН2 )3	связь
15	H	H	H	H	H	(CH2) 5	связь
16	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2)9	связь
17	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )10	связь
21	Н	Н	Н	Н	NH 2	(СН2) 4	связь
46	Н	OH	Н	Н	Н	(СН2)3	связь
47	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2 )7	связь
48	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2)9	связь
49	Н	Н	OH	Н	Н	(СН 2)5	связь
50	Н	Н	OH	Н	Н	(СН2) 3	связь
59	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	СН2	пара-Ph
60	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2) 5	связь
61	Н	Н	Н	Н	С(O)Н	(СН2)7	связь
65	Н	Н	Н	Н	Н	(СН2 )7	связь
66	Н	Н	Н	Н	Н	СН2	пара-Ph
67	Н	Н	OH	Н	Н	СН2	пара-Ph
69	Н	ОСН3	Н	Н	Н	(СН2)7	связь
78	Н	Н	Н	Н	Cl	СН2	пара-Ph
81	Н	Н	OH	Н	Н	(СН 2)6-СН(СН3)	связь
82	Н	Н	OH	Н	Н	(СН 2)6-СН(СН2СН 2СН3)	связь
88	Н	Н	Н	Н	-C(O)NH-(CH2)9-ОН	СН2	связь
95	Н	Н	NO2	Н	Н	пара-Ph	связь
96	Н	Н	NH2	Н	Н	пара-Ph	связь
97	Н	СН 3	Н	Н	СН3	(СН 2)3-(С(СН3) 2)	связь

и их фармацевтически приемлемые соли.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Соединения доставляющих агентов

Термины «алкил» и «алкенил» в используемом здесь значении означают соответственно алкильные и алкенильные заместители с линейной и разветвленной цепью.

Соединения доставляющих агентов могут представлять собой карбоновую кислоту или ее соли. Приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, органические и неорганические соли, например соли щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий; соли щелочно-земельных металлов, таких как магний, кальций или барий; соли аммония; основные аминокислоты, такие как лизин или аргинин; и органические амины, такие как диметиламин или пиридин. Предпочтительными солями являются соли натрия. Указанные соли могут быть одно- или многовалентными солями, такими как мононатриевые и динатриевые соли. Предпочтительной динатриевой солью является данатриевая соль соединения 47. Данные соли могут быть также сольватами, включая сольваты этанола, и гидратами.

Соли соединений доставляющих агентов по настоящему изобретению можно получить способами, известными в данной области. Например, натриевые соли можно получить, растворяя соединение доставляющего агента в этаноле и добавляя водный раствор гидроксида натрия.

Соединение доставляющего агента можно очистить перекристаллизацией или фракционированием на одном или нескольких твердых хроматографических носителях, используемых отдельно или соединенных последовательно. Приемлемые системы растворителей для перекристаллизации включают, но не ограничиваются ими, ацетонитрил, метанол и тетрагидрофуран. Фракционирование может быть выполнено на приемлемом хроматографическом носителе, таком как оксид алюминия, используя смеси метанол/н-пропанол в качестве подвижной фазы; хроматографией с обращенной фазой, используя смеси трифторуксусная кислота/ацетонитрил в качестве подвижной фазы; и ионообменной хроматографией, используя воду или приемлемый буфер в качестве подвижной фазы. При выполнении анионообменной хроматографии предпочтительно используют градиент 0-500 мМ хлорида натрия.

Активные вещества

Активными веществами, пригодными для использования в настоящем изобретении, являются биологически и химически активные вещества, которые включают, но не ограничиваются ими, пестициды, фармакологические и лекарственные средства.

Например, биологически или химически активные вещества, пригодные для использования в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются ими, белки; полипептиды; пептиды; гормоны; полисахариды и, в частности, смеси мукополисахаридов; углеводы; липиды; небольшие полярные органические молекулы (то есть полярные органические молекулы с молекулярной массой 500 Дальтон или менее); другие органические соединения; и, в частности, соединения, которые сами по себе не способны (или способны лишь частично) проникать сквозь оболочку желудочно-кишечного тракта и/или подвержены химическому расщеплению кислотами и ферментами в желудочно-кишечном тракте; либо комбинации указанных веществ.

Другие примеры включают, но не ограничиваются ими, синтетические, природные или рекомбинантные источники нижеследующих соединений, таких как гормоны роста, включая гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста и гормоны роста свиней; гормоны, стимулирующие выделение гормона роста; интерфероны, включая , и ; интерлейкин-1; интерлейкин-2; инсулин, включая инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека и рекомбинантный инсулин человека, необязательно имеющий противоионы цинка, натрия, кальция и аммония; инсулиноподобный фактор роста, включая IGF-1; гепарин, включая нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин и ультранизкомолекулярный гепарин; кальцитонин, включая кальцитонин лосося, угря, свиньи и человека; эритропоэтин; естественный фактор предсердия; антигены; моноклональные антитела; соматостатин; ингибиторы протеазы; адренокортикотропин; гормон, стимулирующий выделение гонадотропина; окситоцин; гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона; фолликулостимулирующий гормон; глюкоцереброзидазу; тромбопоэтин; филграстим; простагландины; циклоспорин; вазопрессин; кромолиннатрий (натрий- или динатрийхромогликат); ванкомицин; десферриоксамин (DFO); бисфосфонаты, включая алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат и инкадронат; паращитовидный гормон (РТН), включая его фрагменты; противомикробные средства, включая антибиотики, антибактериальные средства и противогрибковые средства; витамины; аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем (PEG) производные указанных соединений; или любые их комбинации. Неограничивающие примеры антибиотиков включают воздействующие на грамположительные бактерии, бактерицидные, липопептидные и циклические пептидные антибиотики, такие как даптомицин и его аналоги.

Предпочтительным активным веществом является даптомицин. Даптомицин описан в публикации Baltz, Biotechnology of Antibiotics, 2^nd Ed., ed, W.R. Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Даптомицин представляет собой циклический липопептидный антибиотик, который может быть получен ферментацией Streptomyces roseosporus. Даптомицин является членом семейства антибиотиков фактора А-21978С ₀ S. roseosporus и имеет н-деканоильную боковую цепь, связанную цепью из трех аминокислот с N-концевым триптофаном циклического пептида, состоящего из 10 аминокислот. В настоящее время указанное соединение используется в различных составах для лечения серьезных инфекций, вызываемых бактериями, которые включают, но не ограничиваются ими, устойчивые к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) и устойчивые к ванкомицину энтерококки (VRE). Способы синтеза даптомицина описаны в патентах США №№ 32333, 32455, 5800157, 4885243, 32310, 32311, 4537717, 4482487 и 4524135.

Системы доставки активного вещества к тканям

Композиция по настоящему изобретению содержит одно или несколько соединений доставляющих агентов по данному изобретению, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и одно или несколько активных веществ. Соединение доставляющего агента и активное вещество обычно смешивают до введения, получая таким образом предназначенную для введения композицию.

Предпочтительные комбинации соединений доставляющих агентов и активных веществ включают, но не ограничиваются ими, соединение 12 и кальцитонин, в частности кальцитонин лосося; соединение 12 и гепарин; соединение 5 и кальцитонин, в частности кальцитонин лосося; любое из соединений 7, 11 и 43 и даптомицин; соединение 7 и кромолин, в частности кромолиннатрий; и соединение 47 и гормон роста человека.

Предназначенные для введения композиции могут быть жидкостями. В качестве растворяющей среды можно использовать воду (например, для кальцитонина лосося, паращитовидного гормона и эритропоэтина), 25% водный раствор пропиленгликоля (например, для гепарина) и фосфатный буфер (например, для rhGH). Еще одним растворителем является полиэтиленгликоль. Лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с раствором активного вещества непосредственно перед введением. Альтернативно, раствор соединения доставляющего агента (или активного вещества) можно смешивать с активным веществом (или соединением доставляющего агента) в твердой форме. Соединение доставляющего агента и активное вещество можно также смешивать в виде сухих порошков. Соединение доставляющего агента и активное вещество можно смешивать в процессе изготовления лекарственного средства.

Лекарственные растворы могут необязательно содержать добавки, такие как соли фосфатного буфера, лимонную кислоту, гликоли или другие диспергаторы. В указанный раствор можно вводить стабилизирующие добавки, предпочтительно в концентрации от 0,1 до 20% (мас./об.).

Предназначенные для введения композиции альтернативно могут быть получены в твердой форме, такой как таблетка, капсула или частицы, например порошок или саше. Твердые лекарственные формы можно получить, смешивая твердое соединение доставляющего агента с твердым активным веществом. Альтернативно, твердое вещество можно получить из раствора соединения доставляющего агента и активного вещества способами, известными в данной области, такими как сушка вымораживанием (лиофилизация), осаждение, кристаллизация и диспергирование в твердом состоянии.

Предназначенные для введения композиции по настоящему изобретению могут также включать один или несколько ингибиторов ферментов. Указанные ингибиторы ферментов включают, но не ограничиваются ими, такие соединения, как актинонин или эпиактинонин и их производные. Другие ингибиторы ферментов включают, но не ограничиваются ими, апротинин (тразилол) и ингибитор Боумана-Бирка.

Количество активного вещества в предназначенной для введения композиции по настоящему изобретению должно обеспечивать эффективное воздействие конкретного активного вещества на ткань-мишень. Количество активного вещества в указанных композициях обычно является фармакологически, биологически, терапевтически или химически эффективным количеством. Однако фактическое количество может быть меньше указанного количества при использовании данной композиции для изготовления стандартной лекарственной формы, так как такая лекарственная форма может содержать несколько композиций соединения доставляющего агента/активного вещества или разделенную дозу фармакологически, биологически, терапевтически или химически эффективного количества. В данном случае общее эффективное количество вводят в виде кумулятивных (суммарных) доз, содержащих эффективное количество активного вещества.

Общее количество активного вещества можно определить способами, известными специалистам в данной области. Однако благодаря тому что композиции по данному изобретению обеспечивают более эффективную доставку активных веществ, чем композиции, содержащие только активное вещество, нуждающемуся субъекту можно вводить более низкие дозы биологически или химически активных веществ по сравнению с ранее использовавшимися лекарственными формами или системами доставки лекарственного средства при достижении таких же уровней в крови и/или аналогичного лечебного действия.

Описываемые соединения доставляющих агентов облегчают доставку биологически и химически активных веществ, в частности, при пероральном, назальном, подъязычном, интрадуоденальном, подкожном, трансбуккальном, внутрикишечном, ректальном, вагинальном, слизистом, легочном, чрескожном, внутрикожном, парентеральном, внутривенном, внутримышечном и глазном введении, а также преодоление гематоэнцефалического барьера.

Стандартные (унифицированные) лекарственные формы могут также содержать используемые отдельно или в комбинации наполнители, разбавители, дезинтеграторы, смазывающие вещества, пластификаторы, красители, ароматизаторы, маскирующие вкус вещества, сахара, подслащивающие вещества, соли и растворители, включающие, но не ограничивающиеся ими, воду, 1,2-пропандиол, этанол, оливковое масло или любые их комбинации.

Соединения и композиции по настоящему изобретению пригодны для введения биологически или химически активных веществ любым животным, включая, но не ограничиваясь ими, птиц, таких как куры; млекопитающих, таких как грызуны, крупный рогатый скот, свиньи, собаки, кошки, приматы и, в частности, человек; а также насекомых.

Указанная система является особенно пригодной для введения таких химически или биологически активных веществ, которые в противном случае были бы разрушены или стали менее эффективными под действием условий, существующих в организме животного, прежде чем активное вещество достигнет участка действия (то есть участка, где должно происходить высвобождение активного вещества из композиции, используемой для его доставки). Соединения и композиции по настоящему изобретению пригодны для перорального введения активных веществ, которые обычно не предназначены для такого способа введения или требуют более эффективной доставки.

Композиции, содержащие указанные соединения и активные вещества, обеспечивают эффективную доставку активных веществ к выбранным биологическим системам и более высокую или лучшую биологическую доступность активного вещества по сравнению с введением данного активного вещества без доставляющего агента. Действие лекарственного средства можно улучшить, доставляя большее количество активного вещества в течение определенного периода времени или доставляя активное вещество в требуемый период времени (то есть осуществляя более быструю или медленную доставку) или через определенный период времени (то есть осуществляя пролонгированную доставку).

Другой вариант осуществления изобретения относится к способу лечения или профилактики заболевания, а также достижения требуемого физиологического действия, указанного в нижеследующей таблице, благодаря введению животному композиции по настоящему изобретению. Специальные показания для использования активных веществ представлены в справочнике Physicians Desk Reference (54^th Ed., 2000, Medical Economics Company, Inc., Montvale, NJ), который включен в данное описание изобретения в качестве ссылки. Активные вещества, приведенные в нижеследующей таблице, включают их аналоги, фрагменты, миметики и производные, модифицированные полиэтиленгликолем.

Активное вещество	Заболевание и физиологическое действие
Гормоны роста, включая гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста (гормоны роста крупного рогатого скота) и гормоны роста свиней; гормоны, стимулирующие выделение гормонов роста	Нарушения роста
Интерфероны, включая , и	Вирусные инфекции, включающие затяжной рак и рассеянный склероз
Интерлейкин-1; интерлейкин-2	Вирусная инфекция; рак
Инсулин, включая инсулин свиней, бычий инсулин (инсулин крупного рогатого скота), человека и рекомбинантный инсулин человека, необязательно содержащий противо-ионы цинка, натрия, кальция и аммония; инсулиноподобный фактор роста, включающий IGF-1	Диабет

Активное вещество	Заболевание и физиологическое действие
Гепарин, включая нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин и ультранизкомолекулярный гепарин	Тромбоз; профилактика свертывания крови
Кальцитонин, включая кальцитонин лосося, угря, свиньи и человека	Остеопороз; заболевания костей
Эритропоэтин	Анемия
Естественный фактор предсердия	Расширение кровеносных сосудов
Антигены	Инфекция
Моноклональные антитела	Предотвращение отторжения трансплантата; рак
Соматостатин	Кровоточащая язва; эрозивный гастрит
Ингибиторы протеазы	СПИД
Адренокортикотропин	Высокий уровень холестерина (снижение уровня холестерина)
Гормон, стимулирующий выделение гонадотропина	Нарушение овуляции (стимуляция овуляции)
Окситоцин	Нарушения родового акта (стимуляция сократительной деятельности матки)
Гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона; фолликулостимулирующий гормон	Регуляция репродуктивной функции
Глюкоцереброзидаза	Болезнь Гоше (улучшение обмена липопротеина)
Тромбопоэтин	Тромбоцитопения

Активное вещество	Заболевание и физиологическое действие
Филграстим	Усиление иммунитета к инфекциям у субъектов, проходящих курс химиотерапии
Простагландины	Гипертензия
Циклоспорин	Отторжение трансплантата
Вазопрессин	Ночное недержание мочи; антидиуретическое средство
Кромолиннатрий (натрий или динатрийхромогликат)	Астма; аллергии
Десферриоксамин (DFO)	Повышенное содержание железа
Паращитовидный гормон (РТН), включая его фрагменты	Остеопороз; заболевания костей
Противомикробные средства, включая антибиотики, антибактериальные средства и противогрибковые средства; воздействующие на грамположительные бактерии, бактерицидные, липопептидные и циклические пептидные антибиотики, такие как даптомицин и его аналоги	Инфекционные заболевания, включая болезни, вызываемые грамположительными бактериями
Витамины	Витаминная недостаточность
Бисфосфонаты, включая алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат и инкадронат	Остеопороз и болезнь Педжета; ингибирование остеобластов

Один вариант осуществления настоящего изобретения относится, например, к способу лечения субъекта, страдающего или подверженного диабету, путем введения инсулина и по меньшей мере одного из соединений доставляющих агентов по настоящему изобретению.

После введения лекарственного препарата активное вещество, присутствующее в композиции или стандартной унифицированной лекарственной форме, всасывается в систему кровообращения. Биологическую доступность активного вещества можно легко оценить, определяя известную фармакологическую активность в крови, например увеличение времени свертывания крови, вызываемое гепарином, или уменьшение уровней кальция в крови, вызываемое кальцитонином. Альтернативно, можно произвести прямое измерение уровней активного вещества в крови.

Описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения

Приведенные ниже примеры иллюстрируют данное изобретение, не ограничивая его объем. Все части являются массовыми частями, за исключением особо оговоренных случаев.

Нижеследующие соединения анализируют спектроскопией протонного ядерного магнитного резонанса ( ¹Н ЯМР), которую выполняют при помощи спектрометра Брукера 300 МГц, используя в качестве растворителя диметилсульфоксид (ДМСО-d₆), за исключением особо оговоренных случаев.

Пример 1. Получение соединений

Получение соединения 1

Гидроксид калия (8,82 г, 157,2 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и переносят в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 60 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 5,35 г (39,3 ммоль) 2 -гидроксиацетофенона. Смесь перемешивают еще 15 минут и добавляют 5,39 г (25,1 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно четырех часов. К коричневой реакционной смеси добавляют дистиллированную воду (200 мл) и полученный раствор охлаждают до 0°С. Затем добавляют концентрированный водный раствор соляной кислоты до достижения рН раствора около 5. Образовавшееся твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 3,59 г (52,9%) светло-коричневого порошка. Температура плавления: 170,5-172,0°С. Анализ сжиганием: %С: 71,10 (вычислено), 70,81 (найдено); %Н: 5,22 (вычислено), 5,25 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 13,0, с, 1Н; 8,00-7,97, д, 2Н; 7,64-7,59, м, 3Н; 7,55-7,49, дт, 1Н; 7,25-7,22, д, 1Н; 7,07-7,01, дт, 1Н; 5,33, с, 2Н; 2,54, с, ЗН.

Соединения 63, 62 и 64 получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 63. Температура плавления: 91-94°С. Анализ сжиганием: %С: 69,62 (вычислено), 69,91 (найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,28 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,0, д, 2Н; 4,0, т, 2Н; 3,0, kb, 2H; 2,2, т, 2Н; 1,7, п, 2H; 1,5, п, 2H; 1,35, м, 6Н; 1,05, т, 3Н.

Соединение 62. Температура плавления: 125-129°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 68,91 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2H; 7,02, д, 2H; 4,01, т, 2H; 2,52, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,7, п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,38, м, 6Н.

Соединение 64. Температура плавления: 62-65°С. Анализ сжиганием: %С: 69,06 (вычислено), 69,32 (найдено); %Н: 7,91 (вычислено), 7,97 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,5, д, 1Н; 7,4, м, 2Н; 7,19, дд, 1Н; 4,02, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т, 2Н; 1,7, п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,3, м, 6Н.

Соединения 66 и 52 также получают аналогично способу получения соединения 1, заменяя 2 -гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 66 (фенол) и 52 (салициламид).

Соединение 66. Температура плавления: 219-221°С. Анализ сжиганием: %С: 73,67 (вычислено), 73,70 (найдено); %Н: 5,30 (вычислено), 5,22 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,57, д, 2Н; 7,30, м, 2Н; 7,01, м, 2Н; 6,95, м, 1Н; 5,19, с, 2Н.

Соединение 52. Температура плавления: 242-243°С. Анализ сжиганием: %С: 66,08 (вычислено), 65,74 (найдено); %Н: 4,86 (вычислено), 4,79 (найдено); %N: 5,14 (вычислено), 4,78 (найдено) ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,75, дд, 1Н; 7,64, шир.с, 1Н; 7,62, д, 2Н; 7,56, шир.с, 1Н; 7,44, дт, 1Н; 7,17, д, 1Н; 7,03, т, 1Н; 5,35, с, 2Н.

Получение соединения 2

Гидроксид калия (9,88 г, 176 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и переносят в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 80 мл диметилсульфоксида и 5,54 г (50,3 ммоль) катехина. Полученную смесь перемешивают в течение 45 минут, слегка нагревая до 35°С. Темную смесь обрабатывают раствором 6,94 г (40,7 ммоль) 4-(хлорметил)бензойной кислоты и 30 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 17 часов. Смесь подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты, что вызывает образование твердого вещества. Твердое вещество собирают фильтрованием. Полученный продукт перекристаллизовывают из смеси этилацетат/метил трет-бутиловый эфир/гексаны и подвергают флэш-хроматографии с использованием в качестве элюента смеси 70% гексанов/этилацетат/1% уксусной кислоты, получая соединение 2 в виде белого твердого вещества (1,10 г) (выход 11%). Температура плавления: 196-198°С. Анализ сжиганием: %С: 68,85 (вычислено), 68,60 (найдено); %Н: 4,95 (вычислено), 4,82 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,96, с, 1H; 9,03, с, 1H; 7,97, д, 2Н; 7,61, д, 2Н; 6,95, дд, 1Н; 6,83, дд, 1Н; 6,78, тд, 1H; 6,70, дт, 1H; 5,18, с, 2Н.

Соединения 79 и 59 получают аналогично способу получения соединения 2.

Соединение 79. Температура плавления: 176-178°С. Анализ сжиганием: %С: 65,69 (вычислено), 65,53 (найдено); %Н: 5,15 (вычислено), 5,00 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 13,0, шир.с, 1H; 8,7, шир.с, 1H; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1H; 6,75, м, 2Н; 6,7, м, 1H; 5,9, шир.с, 1H; 5,0, м, 1H; 4,1, дд, 1H; 3,85, дд, 1H.

Соединение 59. Температура плавления: 164-167°С. Анализ сжиганием: %С: 70,31 (вычислено), 70,18 (найдено); %Н: 4,72 (вычислено), 4,83 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 13,0, шир.с, 1Н; 10,5, с, 1Н; 8,7, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1Н; 6,75, м, 2Н; 6,7, м, 1Н; 5,9, шир.с, 1Н; 5,0, м, 1Н; 4,1, дд, 1Н; 3,85, дд, 1Н.

Получение соединения 3

Соединение 3 предоставлено фирмой Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH).

Получение соединения 6

В 200 мл круглодонную колбу помещают 11,2 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида калия и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут. Добавляют 2-бензилоксифенол (10 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 7-бромгептаноат (14,6 мл, 1,5 экв.). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа.

Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и экстрагируют 5×100 мл метиленхлорида. Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным раствором соли (по 20 мл) и концентрируют. Полученную жидкость растворяют в 125 мл водного метанола. Добавляют твердый гидроксид натрия (3 экв., 3,7 г) и полученный раствор нагревают до 80°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выпаривают метанол. Водный слой экстрагируют 150 мл простого эфира и подкисляют до рН ˜ 2 концентрированным водным раствором соляной кислоты. Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×300 мл), фильтруют и сушат, получая 19 г (2-бензилоксифенил)- 7-оксигептановой кислоты.

Получают суспензию (2-бензилоксифенил)-7-оксигептановой кислоты (19 г, 58 ммоль), 150 мл этилового спирта и 150 мг палладиевой черни и помещают в автоклав Парра. В реакторе повышают давление до 7 атм (100 фунтов/кв.дюйм), подавая водород. Смесь перемешивают при 50°С в течение 17 часов. Палладий отфильтровывают и фильтрат концентрируют, получая продукт в виде бледно-желтого твердого вещества. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны, и получают 5 г (42%) (2-гидроксифенил)-7-оксигептановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 47-50°С. Анализ сжиганием: %С: 65,53 (вычислено), 65,12 (найдено); %Н: 7,61 (вычислено), 7,82 (найдено). МС (EI): 238 (вычислено), 238 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,89-6,86, м, 1Н; 6,80-6,87, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,72-1,67, м, 2Н; 1,55-1,25, м, 6Н.

Получение соединения 7

В 200 мл круглодонную колбу помещают 22,9 г (3 экв.) только что измельченного гидроксида калия и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при 25°С в течение 5 минут. Добавляют катехин (15 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 8-бромоктаноат (34,2 г, 1 экв). Темно-коричневый раствор перемешивают при 25°С в течение 2 часов.

Добавляют дистиллированную воду (100 мл) и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 2 часов. Смесь охлаждают, подкисляют до рН ˜2 концентрированным водным раствором соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают растворитель. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны. Требуемый продукт собирают и сушат, получая 6,6 г (19%) 8-(2-гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 60-64°С. Анализ сжиганием: %С; 66,65 (вычислено), 66,65 (найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,10 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,90-6,86, м, 1Н; 6,80-6,76, м, 3Н; 3,92, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,75-1,66, м, 2Н; 1,56-1,29, м, 8Н.

Соединения 4, 35, 38, 92 и 98 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 4. Температура плавления: 64-66°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22 (вычислено), 61,32 (найдено); %Н: 6,16 (вычислено), 6,27 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,1, с, 1Н; 8,75, с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,81-6,68, м, 3Н; 3,98, т, 2Н; 2,51, т, 2Н; 1,98-1,89, м, 2Н.

Соединение 35. Температура плавления: 77-80°С. Анализ сжиганием: %С: 67,65 (вычислено), 67,40 (найдено); %Н: 8,33 (вычислено), 8,37 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 11,9, с, 1Н; 6,96-6,85, м, 4Н; 3,94, т, 2Н; 3,74, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,72-1,65, м, 2Н; 1,53-1,48, м, 2Н; 1,39-1,29, м, 6Н.

Соединение 38. Температура плавления: 75-76°С. Анализ сжиганием: %С: 65,29 (вычислено), 65,42 (найдено); %Н: 7,53 (вычислено), 7,47 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 11,9, с, 1Н; 7,35, т, 1Н; 6,56, дд, 2Н; 4,04, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,27, т, 2Н; 1,79-1,70, м, 2Н; 1,55-1,48, м, 2Н; 1,45-1,37, м, 2Н; 1,32-1,14, м, 4Н.

Соединение 92. Температура плавления: 107-108°С. Анализ сжиганием: %С: 63,89 (вычислено), 63,98 (найдено); %Н: 7,74 (вычислено), 7,72 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, шир.с, 2Н; 6,95, м, 2Н; 6,85, м, 2Н; 3,9, т, 4Н; 3,0, кв, 2H; 2,2, т, 4Н; 6 1,7, п, 4Н; 1,55, п, 4Н; 5 1,4, п, 4Н.

Соединение 98. Температура плавления: 75-77°С. Анализ сжиганием: %С: 63,16 (вычислено), 62,81 (найдено); %Н: 8,01 (вычислено), 8,17 (найдено); %N: 3,2 (вычислено), 3,05 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 2H; 7,60, с, 1Н; 7,45, с, 1Н; 7,03-7,21, м, ЗН; 3,9, м, 4Н; 2,14, т, 4Н; 1,61, м, 4Н; 1,22-1,55, м, 16Н.

Альтернативное получение соединения 7

В 500 мл колбу Эрленмейера помещают 28 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида калия и 400 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут. Добавляют 2-бензилоксифенол (25 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 8-бромоктаноат (37,6 г, 1,2 экв.). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов.

Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и нагревают до 80°С в течение 3 часов. Затем смесь подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до рН около 2. Образуется осадок не совсем белого твердого вещества. Образовавшееся твердое вещество выделяют вакуумным фильтрованием и сушат в течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Полученное вещество этерифицируют, подвергая сырую кислоту взаимодействию с 1 л метанола и 5 мл серной кислоты, и нагревают до 80°С в течение ночи. Смесь охлаждают и трижды экстрагируют 400 мл этилацетата, сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают, получая сложный метиловый эфир с количественным выходом.

Сырой сложный эфир растворяют в 150 мл этанола и смешивают с 1 г 10% палладия на активированном угле. Полученную смесь помещают в автоклав Парра. В реакторе повышают давление до 14 атм (200 фунтов/кв.дюйм), подавая водород. Гетерогенную смесь перемешивают при 50°С в течение 18 часов. Палладий отфильтровывают и фильтрат концентрируют, получая дебензилированный продукт.

Сложный метиловый эфир омыляют, используя 10 г гидроксида натрия, 400 мл метанола и 50 мл воды. Раствор нагревают до 80°С в течение одного часа и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Метанол выпаривают. Добавляют еще 100 мл воды и водный слой подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до рН 2. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3×300 мл), сушат и упаривают, получая целевое вещество. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны, и получают 22,24 г (71%) 8-(2-гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено), 66,98 (найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,22 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,80-6,67, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,73, п, 2Н; 1,53-1,29, м, 8Н.

Соединения 5, 8 и 72 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 5. Температура плавления: 51-53°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27 (вычислено), 64,26 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,00 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, шир.с, 1Н; 8,80, шир.с, 1Н; 6,90-6,85, м, 1Н; 6,80-6,68, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,26, т, 2Н; 1,76-1,67, м, 2Н; 1,61-1,52, м, 2Н; 1,48-1,40, м, 2Н.

Соединение 8. Температура плавления: 54-57°С. Анализ сжиганием: %С: 68,55 (вычислено), 68,78 (найдено); %Н: 8,63 (вычислено), 8,43 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 8,8, шир.с, 1Н; 6,92-6,89, м, 1Н; 6,82-6,71, м, 3Н; 3,96, т, 2Н; 2,24, т, 2Н; 1,75-1,68, м, 2Н; 1,54-1,39, м, 4Н; 1,30, шир.с, 8Н.

Соединение 72. Температура плавления: 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 69,36 (вычислено), 69,12 (найдено); %Н: 8,90 (вычислено), 8,89 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 6,88-6,85, м, 1H; 6,80-6,66, м, 3Н; 3,93, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,74-1,65, м, 2Н; 1,50-1,35, м, 4Н; 1,25, шир.с, 10Н.

Получение соединения 12

Гидроксид калия (10,72 г, 191,1 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и помещают в 250 мл круглодонную колбу, содержащую 80 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 6,47 г (47,5 ммоль) 2-гидроксиацетофенона и 24,04 г (95,7 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа. Оранжевую реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды, затем пять раз экстрагируют 300 мл (всего) метиленхлорида. Органические слои промывают двумя 50 мл порциями воды, затем концентрируют, получая ярко-желтую жидкость.

Полученную жидкость растворяют в 25 мл диоксана. Добавляют водный раствор гидроксида натрия (1 н. раствор, 20 мл) и полученную жидкость перемешивают и нагревают (65°С) в течение двух часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, подкисляют до рН 1 концентрированным водным раствором соляной кислоты, затем экстрагируют двумя 100 мл порциями этилацетата. Органический слой концентрируют, получая ярко-желтое масло. Масло кристаллизуют смесью метанол:вода (1:1), затем перекристаллизовывают один раз смесью метанол:вода (1:1) и еще один раз смесью метиленхлорид:гексаны (1:4), получая 5,70 г (43,1%) твердого вещества от бледно-желтого до не совсем белого цвета. Температура плавления: 71,5-73,5°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 68,77 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,57, дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.

Соединения 9, 10, 11 и 71 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 9. Температура плавления: 94,5-9°С. Анализ сжиганием: %С: 64,85 (вычислено), 64,81 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,30 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): 12,0 (с, 1Н), 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,15, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,45, т, 2Н; 2,0, п, 2Н.

Соединение 10. Температура плавления: 76-77°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 65,83 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,76 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,3, т, 2Н; 1,8, дп, 2Н; 1,6, дп, 2Н.

Соединение 11. Температура плавления: 44-4°С. Анализ сжиганием: %С: 67,18 (вычислено), 67,32 (найдено); %Н: 7,25 (вычислено), 7,26 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,25, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,6, п, 2Н; 1,45, п, 2Н.

Соединение 71. Температура плавления: 62-63°С. Анализ сжиганием: %С: 61,76 (вычислено), 61,69 (найдено); %Н; 6,66 (вычислено), 6,59 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, шир.с, 1Н; 7,13-7,30, м, 2Н; 6,94-7,02, м, 1Н; 3,98-4,02, т, 2Н; 2,17-2,22, т, 2Н; 1,65-1,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.

Приведенные ниже соединения также получают вышеописанным способом, заменяя 2 -гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 18 (2-пропенилфенол), 20 (2-нитрофенол), 24 (2-ацетамидофенол), 26-29 (2-гидроксипропиофенон), 32 (метилсалицилат) и 39 (6-метокси-2-гидроксиацетофенон). Соединения 18 и 20 далее очищают колоночной хроматографией, используя в качестве элюента 50% этилацетат в гексанах.

Соединение 18. Температура плавления: 79-81°С. Анализ сжиганием: %С: 73,88 (вычислено), 73,85 (найдено); %Н: 8,75 (вычислено), 8,77 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,38-7,41, дд, 1Н; 7,13-7,18, м, 1Н; 6,93-6,95, д, 1Н; 6,84-6,89, т, 1Н; 6,59-6,65, дд, 1Н; 6,21-6,28, м, 1Н; 3,94-3,98, т, 2Н; 2,18-2,23, т, 2Н; 1,83-1,86, дд, 2Н; 1,69-1,78, м, 2Н; 1,31-1,53, м, 9Н.

Соединение 20. Температура плавления: 81-88°С. Анализ сжиганием: %С: 59,78 (вычислено), 59,66 (найдено); %Н; 6,81 (вычислено), 6,96 (найдено); %N: 4,98 (вычислено), 4,69 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,82-7,85, дд, 1Н; 7,60-7,65, м, 1Н; 7,33-7,36, дд, 1Н; 7,06-7,11, м, 1Н; 4,12-4,16, т, 2Н; 2,15-2,27, т, 2Н; 1,66-1,75, м, 2Н; 1,28-1,54, м, 8Н.

Соединение 24. Температура плавления: 110-111°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51 (вычислено), 65,47 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 7,73 (найдено); %N: 4,77 (вычислено), 4,65 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 8,9, с, 1Н; 7,8, д, 1Н; 7,08-6,99, м, 2Н; 6,89-6,84, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 2,07, с, 3Н; 1,75, п, 2Н; 1,56-1,30, м, 8Н.

Соединение 26. Температура плавления: 70-71,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 65,92 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,67 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,15, с, 1Н; 7,56-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 7,00, т, 1Н; 4,10, т, 2Н; 2,92, кв, 2Н; 2,42, т, 2Н; 2,00, п, 2Н; 1,05, т, 3Н.

Соединение 27. Температура плавления: 68-69,5°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16 (вычислено), 68,40 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,60 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н; 2,24, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,47, м, 2Н; 1,05, т, 3Н.

Соединение 28. Температура плавления: 85-86°С. Анализ сжиганием: %С: 69,84 (вычислено), 69,59 (найдено); %Н: 8,27 (вычислено), 7,98 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,74, п, 2Н; 1,52-1,30, м, 8Н; 1,05, т, 3Н.

Соединение 29. Температура плавления: 67-69°С. Анализ сжиганием: %С: 71,22 (вычислено), 71,06 (найдено); %Н: 8,81 (вычислено), 9,02 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,54-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,06, т, 2Н; 2,93, кв, 2H; 2,18, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,51-1,36, м, 12Н; 1,05, т, 3Н.

Соединение 32. Температура плавления: 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27 (вычислено), 63,96 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,40 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,2, шир.с, 2H; 7,59, дд, 1Н; 7,45, дт, 1Н; 7,09, д, 1Н; 6,97, т, 1Н; 4,00, т, 2H; 2,20, т, 2H; 1,70, п, 2H; 1,54-1,27, м, 8Н.

Соединение 39. Температура плавления: 69-70,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,35 (вычислено), 65,39 (найдено); %Н: 7,89 (вычислено), 7,80 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 7,27, т, 1Н; 6,67, д, 2H; 3,95, т, 2H; 3,73, с, 3Н; 2,34, с, 3Н; 2,18, т, 2H; 1,63, п, 2H; 1,49, п, 2H; 1,40-1,27, м, 6Н.

Соединения 19, 21, 22 и 23 также получают вышеописанным способом, за исключением того, что используют один эквивалент соответствующего алкилирующего агента и два эквивалента гидроксида калия и промежуточные сложные эфиры очищают жидкостной хроматографией среднего давления (MPLC), используя в качестве подвижной фазы этилацетат и гексаны. Используют следующие составы растворителей: 19 и 21 (20% этилацетат ) и 22 и 23 (10% этилацетат).

Соединение 19. Температура плавления: 58-59°С. Анализ сжиганием: %С: 66,91 (вычислено), 66,73 (найдено); %Н: 8,42 (вычислено), 8,01 (найдено); %N: 5,57 (вычислено), 5,27 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 6,74-6,78, д, 1Н; 6,60-6,68, м, 2H; 6,46-6,52, м, 1Н; 3,88-3,93, т, 2H; 2,17-2,22, т, 2H; 1,66-1,76, м, 2H; 1,30-1,56, м, 8Н.

Соединение 21. Температура плавления: 115-117°С. Анализ сжиганием: %С: 63,14 (вычислено), 62,05 (найдено); %Н: 7,23 (вычислено), 7,11 (найдено); %N: 6,69 (вычислено), 6,37 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 6,74-6,77, дд, 1Н; 6,60-6,68, м, 2Н; 6,46-6,52, м, 1Н; 3,90-3,94, т, 2Н; 2,26-2,31, т, 2Н; 1,63-1,78, м, 4Н.

Соединение 22. Температура плавления: 69-71°С. Анализ сжиганием: %С: 58,84 (вычислено), 58,84 (найдено); %Н: 7,05 (вычислено), 7,08 (найдено); %N: 4,90 (вычислено), 4,83 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 6,72-6,74, д, 1Н; 6,62-6,63, д, 1Н; 6,44-6,48, дд, 1Н; 5,0, с, 2Н; 3,87-3,91, т, 2Н; 2,17-2,22, т, 2Н; 1,65-1,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.

Соединение 23. Температура плавления: 80-81°С. Анализ сжиганием: %С: 54,22 (вычислено), 54,15 (найдено); %Н: 5,79 (вычислено), 5,74 (найдено); %N: 5,75 (вычислено), 5,66 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 6,72-6,75, д, 1Н; 6,62-6,63, д, 1Н; 6,45-6,49, дд, 1Н; 5,0, шир.с, 2Н; 3,89-3,39, т, 2Н; 2,25-2,30, т, 2Н; 1,63-1,75, м, 4Н.

Получение соединения 77

Соединение 77 в форме свободной кислоты получают аналогично общему способу получения соединения 12, используя соответствующие исходные вещества. Свободную кислоту соединения 77 (10,4 г, 38,43 ммоль) растворяют в этаноле (83,0 мл). Добавляют 10,0 н. водный раствор гидроксида натрия (3,80 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 2 часов. Этанол выпаривают, получая гелеобразный мокрый остаток. Полученный остаток растворяют в деионизированной воде (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Остаточный этилацетат удаляют, продувая реактор азотом. Водный раствор лиофилизуют, получая белый порошок (6,50 г, 22,1 ммоль, выход 58%). Температура плавления: >230°С с разложением. МС (FAB) (положительная), m/z 295,2 (М + Н)⁺ 317,2 (М + Na) ⁺. ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 7,09-7,15, м, 3Н; 4,05-4,09, т, 2Н; 1,81-1,86, т, 2Н; 1,58-1,68, м, 2Н; 1,22-1,44, м, 8Н.

Альтернативное получение соединения 12

Гидроксид калия (43,28 г, 771,3 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния, затем помещают в 500 мл колбу Эрленмейера, содержащую 250 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 15 минут, после чего добавляют 27,47 г (201,8 ммоль) 2-гидроксиацетофенона с последующим немедленным добавлением 50,7 г (201,9 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Мутную густую оранжевую реакционную смесь выливают в 150 мл дистиллированной воды и перемешивают, пока раствор не становится прозрачным (примерно 15 минут).

Прозрачный оранжевый раствор охлаждают до 0°С на ледяной бане, затем подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до образования твердого вещества (рН=7). Твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 38,08 г (67,8%) желтого твердого вещества. Температура плавления: 72-73°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 69,10 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 7,99 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,57, дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.

Соединение 54 получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества. Нижеследующие соединения также получают указанным способом, заменяя 2 -гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 55 (2-гидрокси-5-метоксиацетофенон), 56 (2-гидрокси-4-метокси-ацетофенон) и 58 (2-гидрокси-5-метилацетофенон).

Соединение 54. Температура плавления: 71-73,5°С. Анализ сжиганием для C ₁₈H₂₆О₄·0,068Н ₂О: %С: 70,28 (вычислено), 69,98 (найдено); %Н: 8,56 (вычислено), 8,16 (найдено). ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 11,8, с, 1Н; 7,55, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,5, м, 2Н; 1,3, м, 10Н.

Соединение 55. Температура плавления: 120,5-121,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,21 (вычислено), 66,00 (найдено); %Н: 7,84 (вычислено), 7,54 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,1, м, 3Н; 4,03, т, 2Н; 3,72, с, 3Н; 2,54, с, 3Н; 2,20, кв, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,53-1,30, м, 8Н.

Соединение 56. Температура плавления: 106-107,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,87 (вычислено), 65,76 (найдено); %Н: 7,86 (вычислено), 7,57 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 7,65, д, 1Н; 6,61-6,55, м, 2Н; 4,08, т, 2Н; 3,82, с, 3Н; 2,49, с, 3Н; 2,19, кв, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.

Соединение 58. Температура плавления: 121-123°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16 (вычислено), 67,88 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,65 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,37, м, 1Н; 7,30, м, 1Н; 7,04, д, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,24, м, 5Н; 1,76, п, 2Н; 1,59-1,41, м, 4Н.

Получение соединения 13

Соединение 13 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).

Получение соединения 15

Гидроксид калия (28,60 г, 0,511 моль) измельчают в ступке и помещают в 500 мл кругло донную колбу, содержащую диметилсульфоксид (215 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут. К смеси добавляют фенол (12,00 г, 0,1277 моль). Затем сразу же добавляют этил 6-бромгексаноат (22,70 мл, 0,1277 моль). Смесь перемешивают в течение примерно 3 часов и выливают в 500 мл воды. Реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 1,5 часов, после чего нагревание прекращают. Затем смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется осадок белого твердого вещества. Белое твердое вещество выделяют вакуумным фильтрованием и сушат в течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Получают 25,09 г (выход 94,5%) продукта. Температура плавления: 64-67°С. Анализ сжиганием: %С: 69,23 (вычислено), 68,84 (найдено); %Н: 7,69 (вычислено), 7,78 (найдено); %N: 0,00 (вычислено), <0,02 (найдено). ¹ H ЯМР (300 МГц, AMCO-d₆): 11,95, с, 1Н; 7,27, м, 2Н; 6,90, м, 3Н; 3,93, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,50, п, 2Н; 1,30, м, 6Н.

Соединения 14, 16, 76, 75 и 68 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 14. Температура плавления: 57-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,49 (найдено); %Н: 6,67 (вычислено), 6,56 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): 12,2, (с, 1Н), 7,25 (м, 2Н), 6,90 (м, 3Н), 3,95 (т, 2Н), 2,35 (т, 2Н), 1,90 (п, 2Н).

Соединение 16. Температура плавления: 72-75°С. Анализ сжиганием: %С: 72,73 (вычислено), 72,45 (найдено); %Н: 9,09 (вычислено), 8,92 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,24, т, 2Н; 6,88, м, 3Н; 3,89, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,35, м, 4Н; 1,21, м, 8Н.

Соединение 75. Температура плавления: 55-57°С. Анализ сжиганием: %С: 62,26 (вычислено), 61,93 (найдено); %Н: 6,17 (вычислено), 5,89 (найдено); %F: 8,95 (вычислено), 9,11 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 7,25-7,10, м, 3Н; 6,95-6,83, м, 1Н; 4,05, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,77-1,62, м, 4Н.

Соединение 76. Температура плавления: 65-67°С. Анализ сжиганием: %С: 54,96 (вычислено), 54,62 (найдено); %Н: 5,0 (вычислено), 4,97 (найдено); %F: 21,73 (вычислено), 21,73 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 7,61, д, 2Н; 7,26, шир.д, 1Н; 7,10, шир.т, 1Н; 4,12, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,80-1,61, м, 4Н.

Соединение 68. Температура плавления: 67-68°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11 (вычислено), 61,77 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 6,94 (найдено); %Cl: 13,09 (вычислено), 13,05 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,32, т, 1Н; 7,00-6,95, м, 2Н; 6,91-6,88, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45-1,30, м, 6Н.

Получение соединения 17

Соединение 17 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).

Получение соединения 25

В 250 мл круглодонную колбу поочередно помещают 5,57 г (33,9 ммоль) 2-гидроксикоричной кислоты, 80 мл метанола и 6 капель концентрированной серной кислоты. Полученный прозрачный раствор нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 6 часов и оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Растворитель удаляют в вакууме и получают липкое белое твердое вещество. Полученное твердое вещество растворяют в 80 мл этилацетата и промывают тремя 40 мл порциями 10% водного раствора бикарбоната натрия, одной 40 мл порцией воды и двумя 25 мл порциями насыщенного раствора соли. Органический слой концентрируют в вакууме, получая 5,51 г (91,4%) метил 2-гидроксициннамата в виде белого твердого вещества.

Гидроксид калия (7,63 г, 136,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния, затем помещают в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 75 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 10 минут, после чего добавляют 5,49 г (30,8 ммоль) метил 2-гидроксициннамата и 7,81 г (31,1 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно пяти часов, после чего добавляют 50 мл дистиллированной воды. Желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем промывают двумя 80 мл порциями этилацетата. Водный слой охлаждают до 0°С. Добавляют концентрированный водный раствор соляной кислоты до достижения рН раствора, равного примерно 5. Полученное твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 4,31 г (45,7%) белого порошка. Температура плавления: 148-150°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено), 66,59 (найдено); %Н: 7,24 (вычислено), 7,24 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, шир.с, 2Н; 6 7,86, с; 7,81, с, 1Н; 7,67-7,63, дд, 1Н; 7,39-7,33, дт, 1Н; 7,07-7,04, д, 1Н; 6,98-6,93, т, 1Н; 6,55, с; 6,50, с, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,19, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,50, м, 2Н; 1,43-1,28, м, 6Н.

Получение соединения 30

Салициламид (5,3 г, 0,03875 моль) помещают в одногорлую круглодонную колбу, содержащую (15,0 г, 0,03875 моль) этил 8-бромоктаноат. К полученной смеси одной порцией добавляют карбонат калия (6,43 г, 0,0465 моль), используя 35 мл ацетона в качестве растворителя. Реакционную смесь нагревают в течение примерно 4 часов. Затем нагревание прекращают, реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и перемешивают в течение выходных дней в конце недели. Реакцию прекращают, когда данные ВЭЖХ указывают на наличие одного пика, соответствующего времени удерживания, равному 6,44 минуты. Реакционную смесь подвергают вакуумному фильтрованию и лепешку на фильтре промывают ацетоном. Фильтрат концентрируют в вакууме, чтобы удалить избыток растворителя (ацетона).

Твердые вещества перемешивают в гексанах в течение нескольких часов, фильтруют, выделяют и сушат под вакуумом в течение ночи. Твердые вещества (10,93 г, 0,0439 моль) перемешивают в 1,5 экв. 2 н. раствора гидроксида натрия (32 мл, 0,0658 моль). Реакционную смесь нагревают и перемешивают до окончания реакции в соответствии с данными ВЭЖХ. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Реактор помещают на водно-ледяную баню и подкисляют суспензию 2 н. водным раствором соляной кислоты. Твердые вещества выделяют вакуумным фильтрованием и лепешку на фильтре промывают водой. Твердые вещества сушат в вакууме в течение ночи, затем переносят в колбу Эрленмейера и перекристаллизовывают, используя смесь этанол/вода. Твердые вещества выпадают в осадок в течение ночи, после чего их отделяют и сушат, получая 8,08 г 8-(2-карбоксамидофенокси)каприловой кислоты. Температура плавления: 114-116°С. Анализ сжиганием: %С: 64,51 (вычислено), 64,50 (найдено); %Н: 7,52 (вычислено), 7,55 (найдено); %N: 5,02 (вычислено), 4,86 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,82, дд, 1Н; 7,55, шир.с, 2Н; 7,45, дт, 1Н; 7,12, д, 1Н; 7,01, т, 1Н; 4,10, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.

Получение соединения 33

Получение N-этилсалициламида. Диметилацетамид (50 мл) и карзалам (10,00 г, 0,0613 моль) помещают в круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, конденсатором с водяным охлаждением и магнитной мешалкой. Добавляют карбонат натрия (6,50 г, 0,0613 моль) и иодэтан (4,38 мл, 0,0548 моль) и начинают нагревать реакционную смесь. Смесь нагревают при 80°С в течение 16 часов, после чего нагревание прекращают и реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Затем реакционную смесь фильтруют через воронку из спекшегося стекла и собирают фильтрат. К фильтрату добавляют воду до осаждения белого твердого вещества. Твердое вещество выделяют фильтрованием и переносят в колбу Эрленмейера, содержащую 2 н. водный раствор гидроксида натрия (200 мл). Полученную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение примерно 1 часа и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты, в результате выделяется желтое масло. Реакционную смесь дважды экстрагируют 200 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои дважды промывают 200 мл порциями деионизированной воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. N-этилсалициламид выделяют в виде желтого масла, которое сушат в течение ночи в вакууме и получают в количестве 7,93 г.

Получение О-ацетил-N-этилсалициламида. Полученный выше N-этилсалициламид (7,93 г, 0,0481 моль) и метиленхлорид (100 мл) помещают в круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, капельной воронкой и магнитной мешалкой. Полученный раствор охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют триэтиламин (14,71 мл, 0,1057 моль). Ацетилхлорид (3,76 г, 0,0529 моль) помещают в капельную воронку и по каплям медленно добавляют к реакционной смеси в течение примерно 10 минут. Через 1 час водно-ледяную баню удаляют и реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (100 мл) и экстрагируют сначала 100 мл 2 н. водного раствора соляной кислоты и затем двумя 100 мл порциями деионизированной воды. Метиленхлоридный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное масло очищают элюированием через колонку с силикагелем. В качестве элюента используют смесь гексан:этилацетат (60:40) и собирают 75 мл фракции. Фракции, содержащие требуемый О-ацетил-N-этилсалициламид, объединяют и концентрируют в вакууме, получая 4,28 г продукта в виде желтого масла.

Получение 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Вышеуказанный O-ацетил-N-этилсалициламид (4,28 г, 0,0207 моль) и диметилформамид (75 мл) помещают в 250 мл круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, капельной воронкой и магнитной мешалкой. Полученную смесь охлаждают на водно-ледяной бане. После перемешивания смеси в течение примерно 10 минут добавляют гидрид натрия (0,76 г, 0,0316 моль), после чего по каплям добавляют раствор этил 8-бромоктаноата (7,78 г, 0,0310 моль) в диметилформамиде (25 мл) в течение 25 минут. Затем водно-ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют деионизированную воду (75 мл) и экстрагируют тремя 75 мл порциями дихлорметана. Объединенные дихлорметановые слои промывают тремя 75 мл порциями деионизированной воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натрия (2 н. раствор, 200 мл), нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение примерно 2 часов и оставляют охлаждаться до комнатной температуры в течение ночи. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагируют тремя 100 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают тремя 100 мл порциями деионизированной воды и затем тремя 100 мл порциями насыщенного раствора соли. Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное масло кристаллизуют из смеси этилацетат:гексан (30:70), получая 3,24 г требуемого продукта 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Температура плавления: 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,18 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,26 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 7,93, д, 1H; 7,75, дд, 1Н; 7,40, тд, 1H; 7,10, д, 1H; 6,98, тд, 1H; 4,00, м, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,71, п, 2Н; 1,25, м, 8Н; 1,10, д, 6Н.

Соединения 31 и 34 также получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.

Соединение 31. Температура плавления: 91,5-94°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51 (вычислено), 65,35 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 8,03 (найдено); %N: 4,77 (вычислено), 4,46 (найдено). ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1H; 8,02, шир.д, 1H; 7,72, дд, 1H; 7,42, дт, 1H; 7,11, д, 1H; 7,00, т, 1H; 4,08, т, 2Н; 2,80, д, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,53-1,25, м, 8Н.

Соединение 34. Температура плавления: 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,18 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,26 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0 (с, 1H), 7,93 (д, 1H), 7,75 (дд, 1H), 7,40 (тд, 1H), 7,10 (д, 1H), 6,98 (тд, 1H), 4,00 (м, 3Н), 2,15 (т, 2Н), 1,71 (п, 2Н), 1,25 (м, 8Н), 1,10 (д, 6Н).

Получение соединения 36

В 250 мл круглодонную колбу, оснащенную конденсатором, помещают 5,00 г (17,4 ммоль) соединения 12 и 170 мл этанола. Колбу продувают азотом. Борогидрид натрия (1,15 г, 30,4 ммоль) добавляют тремя порциями к прозрачному желтому раствору соединения 12. Реакционную смесь перемешивают в течение двух часов и проверяют окончание реакции по ВЭЖХ. Добавляют еще 0,38 г (10,0 ммоль) борогидрида натрия и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасят добавлением 30 мл 10% водного раствора бикарбоната натрия, затем фильтруют через подушку из целита. Фильтрат концентрируют в вакууме, получая бледно-желтый гель. Полученный гель перемешивают в 60 мл 1 н. водного раствора гидроксида натрия в течение двух часов, охлаждают до 0°С, затем подкисляют до рН=1 концентрированным водным раствором соляной кислоты. Водный слой экстрагируют четырьмя 30 мл порциями этилацетата. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая 2,46 г (48,8%) продукта в виде прозрачного вязкого желтого масла. Анализ сжиганием: %С: 67,51 (вычислено), 67,16 (найдено); %Н: 8,67 (вычислено), 8,56 (найдено). (Следует отметить, что при выполнении анализа сжиганием использовано 0,176 моль Н ₂О (исходя из значения KF) и 0,068 моль этилацетата (как показано в ЯМР). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 7,45-7,42, дд, 1Н; 7,18-7,12, дт, 1Н; 6,93-6,88, т, 2Н; 5,03-4,97, 1Н; 3,99-3,91, м, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,72, п, 2Н; 1,51, м, 2Н; 1,39-1,30, м, 6Н; 1,27-1,25, д, 3Н.

Получение соединения 37

Раствор 10,0 мл (11,31 г, 83,1 ммоль) 2 -гидрокси-ацетофенона и 50 мл тетрагидрофурана помещают на ледяную баню и обрабатывают 120,0 мл (168,0 ммоль) 1,4 М раствора метиллития в тетрагидрофуране, который добавляют по каплям в течение 30 минут. Реакционная смесь сначала мутнеет и затем становится прозрачной. После перемешивания в течение 18 часов раствор подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты. Слои разделяют. Органическую фазу промывают 30 мл насыщенного раствора соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают в общей сложности 12,05 г 2-(диметилгидрокси-метил)фенола.

Получают раствор 6,77 г (44,5 ммоль) 2-(диметилгидрокси-метил) фенола и 50 мл диметилсульфоксида и обрабатывают его 9,90 г (176 ммоль) только что измельченного гидроксида калия. Светло-зеленый раствор перемешивают в течение 20 минут и добавляют 9,85 г (45,8 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты и 0,40 г (2,67 ммоль) иодида натрия. Густую суспензию перемешивают в течение 4 часов, после чего добавляют еще 1,66 г (7,72 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают еще 2 часа и обрабатывают 50 мл воды. После перемешивания в течение 20 часов раствор подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется твердое вещество, которое выделяют фильтрованием. Твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанол/вода, получая 5,8 г продукта. Температура плавления: 171-172°С. Анализ сжиганием: %С: 71,31 (вычислено), 71,28 (найдено); %Н: 6,34 (вычислено), 6,14 (найдено). ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d ₆): 13,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,7, дд, 1Н; 7,6, д, 2Н; 7,2, дт, 1Н; 7,1, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 5,25, с, 2Н; 5,0, с, 1Н; 1,55, с, 6Н.

Получение соединения 67

Раствор 50,1 г (455 ммоль) гидрохинона, 15,52 г (91,0 ммоль) -хлор-п-толуиловой кислоты, 1 г (6,7 ммоль) иодида натрия, 75 мл (750 ммоль) 10 н. водного раствора гидроксида натрия и 300 мл воды нагревают до 70°С в течение 24 часов в атмосфере азота. Охлажденную реакционную смесь подкисляют 20% водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется коричневое твердое вещество. Полученное твердое вещество выделяют фильтрованием. Затем твердое вещество поглощают этилацетатом. Нерастворившееся твердое вещество отфильтровывают. Фильтрат промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток кристаллизуют из смеси этанол/вода, получая 8,1 г соединения 67, температура плавления >230°С. Анализ сжиганием: %С; 68,85 (вычислено), 68,44 (найдено); %Н: 4,95 (вычислено), 4,93 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 9,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,5, д, 2Н; 6,8, д, 2Н; 6,7, д, 2Н; 5,1, с, 2Н.

Соединения 78 и 73 получают аналогично способу получения соединения 67, используя соответствующие исходные вещества.

Соединение 78. Температура плавления: 178-181°С. Анализ сжиганием: %С: 64,01 (вычислено), 63,95 (найдено); %Н: 4,22 (вычислено), 4,25 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 8,0, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 7,45, дд, 1Н; 7,3, дт, 1Н; 7,2, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 5,3, с, 2Н.

Соединение 73. Температура плавления: 63-65°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11 (вычислено), 62,02 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 7,04 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, шир.с, 1H; 7,4, дд, 1Н; 7,3, дт, 1H; 7,1, дд, 1Н; 6,95, дт, 1Н; 4,0, т, 2Н; 2,2, т, 2Н; 1,75, п, 2Н; 1,5, м, 4Н; 1,35, м, 4Н.

Получение соединения 60

Раствор 3,0 мл (3,44 г, 28,2 ммоль) салицилальдегида, 5,05 мл (6,33 г, 28,4 ммоль) этил 6-бромгексаноата и 50 мл этанола обрабатывают 5,07 г (36,7 ммоль) карбоната калия. Суспензию нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. Через 20 часов реакционную смесь охлаждают до 25°С, фильтруют через подушку из целита и концентрируют. Остаток промывают гексанами и поглощают этанолом и 10 мл 2 н. водного раствора гидроксида натрия. Через 6 часов этанол отгоняют. Смесь подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают 30 мл насыщенного раствора соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный продукт перекристаллизовывают из смеси этанол/вода, получая 3,0 г соединения 60 в виде коричневого твердого вещества. Температура плавления: 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 61,39 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,98 (найдено). МС 236 (М⁺ пик). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, шир.с, 1H; 10,4, с, 1H; 7,7, дд, 1H; 7,65, дт, 1H; 7,2, д, 1H; 7,05, 1,5, м, 2Н.

Соединение 61 получают аналогично способу получения соединения 60, используя соответствующие исходные вещества. Температура плавления: 59-62°С. Анализ сжиганием: %С: 68,18 (вычислено), 67,59 (найдено); %Н: 7,57 (вычислено), 7,63 (найдено). МС 264 (M⁺ пик). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, шир.с, 1H; 10,4, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,75, дд, 1Н; 7,65, дт, 1Н; 7,65, д, 2Н; 7,3, д, 1H; 7,1, т, 1H; 5,4, с, 2Н.

Получение соединения 51

Карзалам (30,00 г, 0,1840 моль), иодметан (10,23 мл, 0,1643 моль), карбонат натрия (19,51 г, 0,1840 моль) и диметилформамид (150 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при 80°С. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и собирают белое твердое вещество. Полученное вещество промывают водой, после чего оставшееся твердое вещество переносят в 250 мл круглодонную колбу. К фильтрату, полученному первоначальным фильтрованием, добавляют воду, в результате чего происходит осаждение белого твердого вещества. Полученное вещество объединяют с твердым веществом, находящимся в 250 мл колбе, и добавляют 2 н. водный раствор гидроксида натрия (150 мл). Смесь нагревают в течение одного часа, после чего нагревание прекращают и реакционную смесь оставляют охлаждаться в течение ночи. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок в течение ночи, выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 21,52 г N-метилсалициламида.

N-метилсалициламид (21,52 г, 0,1425 моль) и метиленхлорид (300 мл) помещают в литровую круглодонную колбу. Колбу охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют триэтиламин (43,62 мл, 0,3135 моль). Затем по каплям добавляют ацетилхлорид в течение пяти минут. Баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют метиленхлорид (300 мл). Смесь промывают двумя 300 мл порциями 1 н. водного раствора соляной кислоты и затем тремя 300 мл порциями деионизированной воды. Раствор в метиленхлориде сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая оранжевое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из смеси этилацетат:гексан (70:30). Получают 12,15 г О-ацетил, N-метилсалициламида.

О-ацетил, N-метилсалициламид (17,74 г, 0,919 моль), полученный вышеописанным способом, переносят в литровую круглодонную колбу, содержащую диметилформамид (300 мл). Колбу охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют гидрид натрия (3,38 г, 0,1406 моль). Метил 8-бромдеканоат (36,54 г, 0,1379 моль) растворяют в дополнительной порции диметилформамида (100 мл) и полученный раствор по каплям добавляют к реакционной смеси в течение 25 минут. После перемешивания в течение примерно получаса ледяную баню удаляют и реакционную смесь продолжают перемешивать еще три дня при комнатной температуре. Добавляют воду (300 мл) и смесь экстрагируют двумя 250 мл порциями метиленхлорида. Объединенные метиленхлоридные слои трижды промывают 150 мл порциями воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая коричневое масло. Полученное масло поглощают 2 н. водным раствором гидроксида натрия (200 мл) и нагревают в течение 45 минут. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре добавляют еще 200 мл 2 н. водного раствора гидроксида натрия и реакционную смесь нагревают, пока она не становится прозрачной. После охлаждения реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагируют тремя 250 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают тремя 250 мл порциями воды и затем тремя 250 мл порциями насыщенного раствора соли. Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая желтовато-коричневое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из смеси этилацетат:гексан (30:70). Продукт выделяют в виде белого твердого вещества с выходом, равным 26,30 г. Данные анализа соединения 51: Температура плавления: 81-84°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,17 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,70 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,36 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,00, с, 1Н; 7,98, д, 1Н; 7,70-7,75, дд, 1Н; 7,39-7,48, дт, 1Н; 7,09-7,15, д, 1Н; 6,95-7,05, тд, 1Н; 4,05, т, 2Н; 2,75, д, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,20-1,55, м, 12Н.

Получение соединения 65

Гидроксид калия (28,60 г, 0,511 моль) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Добавляют диметилсульфоксид (215 мл) и начинают перемешивать смесь. После перемешивания в течение примерно 35 минут, добавляют фенол (12,00 г, 0,1277 моль) и этил 8-бромоктаноат (32,04 г, 0,1277 моль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и добавляют 500 мл деионизированной воды. Смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное белое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме в течение ночи. Получают 27,74 г 8-феноксиоктановой кислоты. Данные анализа соединения 65: Температура плавления: 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 71,19 (вычислено), 70,98 (найдено); %Н: 8,47 (вычислено), 8,70 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 11,95, с, 1Н; 7,23-7,31, м, 2Н; 6,87-6,95, м, 3Н; 3,90, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,22-1,45, м, 6Н.

Получение соединения 43

Гидроксид калия (2,62 г, 0,0467 моль) и диметилсульфоксид (90 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу в атмосфере азота. После перемешивания в течение 5 минут добавляют монобензоат резорцина (10,0 г, 0,0467 моль) и этил 8-бромоктаноат (11,73 г, 0,0467 моль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре к полученной смеси добавляют дополнительную порцию гидроксида калия (2,62 г, 0,0467 моль) для завершения реакции. После перемешивания в течение дополнительных 5,5 часов к смеси добавляют воду (200 мл) и экстрагируют тремя порциями дихлорметана (100 мл порции). Объединенные дихлорметановые порции сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло с запахом диметилсульфоксида поглощают водой. Затем смесь экстрагируют тремя порциями этилацетата (100 мл порции). Объединенные этилацетатные слои промывают тремя порциями воды (100 мл порции). Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натрия (2 н. раствор, 100 мл). Затем добавляют тетрагидрофуран (50 мл) и смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 часов, после чего нагревание прекращают. Тетрагидрофуран удаляют в вакууме и реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество несколько раз промывают водой с температурой 40-50°С и затем перекристаллизовывают из смеси вода:этанол (80:20). Полученное желтовато-коричневое твердое вещество сначала перекристаллизовывают из смеси гексан:этилацетат (90:10) и затем добавляют в кипящую воду. Этиловый спирт добавляют до тех пор, пока смесь не становится прозрачной. Во время охлаждения осаждается желтовато-коричневое твердое вещество, которое выделяют фильтрованием. Полученный продукт сушат в вакууме и выделяют с выходом 5,96 г. Данные анализа соединения 43: Температура плавления = 89-91°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,68 (найдено); %Н: 7,94 (вычислено), 7,92 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,23, м, 6Н.

Соединения 44, 45, 74 и 46 получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.

Соединение 44. Температура плавления: 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57 (вычислено), 68,71 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,58 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 11,9, с, 1Н; 9,2, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,30, п, 2Н; 1,23, м, 8Н.

Соединение 45. Температура плавления: 98-99,5°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29 (вычислено), 64,06 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,12 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,17, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,49, п, 2Н; 1,35, м, 2Н.

Соединение 74. Температура плавления: 126-128°С. Анализ сжиганием: %С: 56,57 (вычислено), 56,72 (найдено); %Н: 6,39 (вычислено), 6,66 (найдено); %N: 4,71 (вычислено), 4,32 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 11,7, с, 1Н; 10,4, с, 1Н; 7,75-7,8, дд, 1Н; 7,68-7,73, д, 1Н; 6,92-6,99, д, 1Н; 4,00, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,67, п, 2Н; 1,22-1,55, м, 8Н.

Соединение 46. Температура плавления: 93-95°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22 (вычислено), 61,20 (найдено); %Н: 6,12 (вычислено), 6,02 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,01, т, 1Н; 6,30, м, 3Н; 3,86, т, 2Н; 2,35, т, 2Н; 1,85, п, 2Н.

Получение соединения 47

Гидроксид калия (11,20 г, 200,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и помещают в 0,5 л круглодонную колбу, содержащую 90 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 10,00 г (50,0 ммоль) 4-бензилоксифенола с последующим немедленным добавлением 12,55 г (50,0 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух с половиной часов. Затем реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды. Смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. После окончания реакции реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и образовавшееся твердое вещество выделяют фильтрованием. Твердое вещество сушат в вакууме в течение ночи. Получают 17,96 г (4-бензилоксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Полученное вещество используют на следующей стадии без очистки.

(4-Бензилоксифенил)-8-оксиоктановую кислоту помещают в 0,5 л круглодонную колбу, содержащую 120 мл этилового спирта. Реакционную смесь барботируют азотом в течение 15 минут и добавляют 10% палладий на активированном угле. Затем в колбе создают вакуум и поверх колбы помещают баллон с водородом так, чтобы содержимое колбы находилось в атмосфере водорода. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и затем фильтруют через целит. Этиловый спирт удаляют в вакууме, получая белое твердое вещество, которое сначала перекристаллизовывают из смеси этиловый спирт:вода (90:10) и затем растворяют в 2 н. водном растворе гидроксида натрия. Смесь фильтруют и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Образовавшееся белое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 2,12 г (4-гидроксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Данные анализа соединения 47. Температура плавления: 97-100°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,43 (найдено); %Н: 7,94 (вычислено), 7,80 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1Н; 9,00, с, 1H; 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 6Н.

Соединения 48, 49 и 50 получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.

Соединение 48. Температура плавления: 99-100°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57 (вычислено), 68,47 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,67 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 10Н.

Соединение 49. Температура плавления: 102-104°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29 (вычислено), 64,53 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,32 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 11,5, с, 1H; 8,5, с, 1H; 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,30, м, 2Н.

Соединение 50. Температура плавления: 117-120°С. Анализ сжиганием: %С: 58,43 (вычислено), 58,63 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,40 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d ₆): 12,0, с, 1H; 8,6, с, 1H; 6,62, м, 4Н; 3,80, т, 2Н; 2,50, т, 2Н; 1,80, п, 2Н.

Получение соединения 57

2,5-Дигидироксиацетофенон (5,00 г, 0,0329 моль), бензил-бромид (3,72 мл, 0,031 моль), карбонат калия (4,31 г, 0,031 моль) и ацетон (150 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при температуре кипения с обратным холодильником и охлаждают до комнатной температуры. К холодной реакционной смеси добавляют деионизированную воду (150 мл) и трижды экстрагируют 100 мл порциями диэтилового эфира. Объединенные эфирные слои сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая темное твердое вещество. Темное твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 3,09 г 2-гидрокси-5-бензилоксиацетофенона в виде желтых игл.

Гидроксид калия (11,11 г, 0,1983 моль) и диметил-сульфоксид (90 мл) помещают в 250 мл круглодонную колбу. Через 10 минут добавляют полученный выше 2-гидрокси-5-бензилоксиацетофенон (12,00 г, 0,0496 моль), затем этил 8-бромоктаноат (12,45 г, 0,496 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют деионизированную воду и реакционную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение пяти часов. Затем реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество выделяют фильтрованием и дважды промывают порциями деионизированной воды. После сушки в течение ночи в вакууме получают 16,75 г (4-бензилокси-2-ацетилфенил)-8-оксиоктановой кислоты.

(4-Бензилокси-2-ацетилфенил)-8-оксиактановую кислоту (16,75 г, 0,0435 моль) и этилацетат (85 мл) помещают в 300 мл реактор Парра. Добавляют 10% палладий на активированном угле (0,75 г), после чего реактор герметично закрывают, откачивают воздух и подают водород. Реактор нагревают при 50°С в течение ночи, открывают и добавляют еще 0,5 г 10% палладия на активированном угле. Реактор снова герметично закрывают, откачивают воздух и подают водород. Если реакционная смесь не изменяется, находясь в течение двух дней при комнатной температуре, реактор снова открывают и реакционную смесь фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме и остаток снова помещают в реактор Парра. Затем остаток поглощают этилацетатом и добавляют 10% палладий на активированном угле. Реактор герметично закрывают, откачивают воздух, подают водород и нагревают в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реактор открывают, палладий на активированном угле отфильтровывают и реакционную смесь концентрируют в вакууме. Образовавшееся желтое твердое вещество перекристаллизовывают из смеси вода:этиловый спирт (80:20). Желтое твердое вещество, полученное в результате перекристаллизации, поглощают кипящим гексаном. Затем добавляют этилацетат, пока не образуется прозрачный раствор, и смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Осажденное желтовато-коричневое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 6,23 г (4-гидрокси-2-ацетилфенил)-8-оксиактановой кислоты. Данные анализа соединения 57. Температура плавления: 112-115°С. Анализ сжиганием: %С: 65,31 (вычислено), 65,32 (найдено); %Н: 7,48 (вычислено), 7,39 (найдено). ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 6,88-7/02, м, 3Н; 3,92, т, 2Н; 2,49, с, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,69, п, 2Н; 1,20-1,59, м, 8Н.

Получение соединения 81

Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-метилоктановой кислоты

Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 14,0 г этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,03778 моль, 1 экв.) помещают в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем добавляют 80 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества. Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К полученной смеси добавляют 19,84 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 4,70 мл иодметана (0,07556 моль, 2,0 экв). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 3 дней. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Полученный остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют в вакууме до образования остатка. Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6%). Данные ВЭЖХ показывают, что полученный продукт содержит небольшое количество исходного вещества вместе с некоторым количеством диметилированного побочного продукта. Промежуточный продукт не исследуют и используют без очистки на следующей стадии.

Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и H ₂, как описано в способе получения соединения 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 81.

Выход равен 67,85%. Продукт представляет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна 67-70°С. Элементный анализ: теоретические значения С=67,65%, Н=8,33%; найдено С=67,56%, Н=8,56%. Количественный анализ ¹³С ЯМР (ДМСО-d₆): С=0 (1С, 177,477); C _Ar-O (2С, 151,467 и 151,015 м.д.); С_Ar -Н (4С, 115,617 и 115,209 м.д.); CH₂-CH ₂-O (1C, 67,939 м.д.); СН-СН₃ (1С, 38,689 м.д.); -CH₂- (5C, 33,211, 28,769, 26,645, 25,451 м.д.); СН-СН₃ (1C, 16,944 м.д.).

Получение соединения 82

Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-(пропен-2-ил)октановой кислоты

Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 10,0 г этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,02699 моль, 1 экв.) помещают в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем добавляют 100 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества.

Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси добавляют 24,0 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,0480 моль, 1,7 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 5,0 мл аллилбромида (0,0577 моль, 2,13 экв.). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Полученный остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Затем этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют до образования масла и хроматографируют на силикагеле, используя смесь гексанов с этилацетатом (9:1). Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом, равным 7,0 г (выход 64,1%). Количественный анализ ¹³С ЯМР (CDCl ₃-d): С=O (1С, 175,462 М.д.); С_Bn (6С, 137,188, 128,36, 127,679, 127,298 м.д.); С _Ar-O (2С, 153,303 и 152,683 м.д.); С_Ar -Н (4С, 115,607 и 115,176 м.д.); =СН₂ (1С, 116,484 м.д.); (СН₂)_Bn (1С, 70,439 м.д.); (CH₂-CH ₂-O (1С, 68,242 м.д.); СН₃-СН ₂-O (1С, 59,946 м.д.); СН-СН₃ (1С, 45,147 м.д.); -СН₂-СН= (1С, 36,404 м.д.); -СН₂- (5С, 31,609, 29,121, 27,054, 25,745 м.д.); CH₂-СН₃ (1С, 14,221 м.д.).

Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и Н₂, как описано в способе получения соединения 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 82. Выход равен 67,66%. Продукт является белым твердым веществом. Т.пл. равна 98-100°С. Элементный анализ: теоретические значения С=69,36%, Н=8,90%, найдено С=69,33%, Н=8,96%. Количественный анализ ¹³С ЯМР (AMCO-d₆): С=O (1С, 177,226); C_Ar-O (2С, 151,660 и 151,216 м.д.); С _Ar-Н (4С, 115/786 и 115,368 м.д.); CH₂ -CH₂-O (1C, 67,908 м.д.); СН-СН ₂ (1С, 44,887 м.д.); -СН₂- (5С, 34,341, 28,968, 27,071, 25,614 м.д.); CH-CH₂ (1C, 32,060 м.д.); CH₂-СН₃ (1C, 20,312 м.д.); СН₂-СН ₃ (1C, 14,007 м.д.).

Получение соединения 80

Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)октановой кислоты

В 500 мл трехгорлую круглодонную колбу помещают 14,90 г 4-метоксифенола (0,12 моль), 30,0 г 8-бромэтилоктаноата (0,1265 моль), 10,36 г карбоната калия (0,075 моль), 150 мл сухого ацетона и 2,5 мол.% иодида калия. Реакционную смесь помещают в атмосферу азота и нагревают с обратным холодильником в течение 2 дней. Гетерогенную смесь упаривают в вакууме до образования твердого остатка и смешивают с 600 мл используемых в равных частях воды и этилацетата. Две фазы разделяют и органический слой экстрагируют 3 н. раствором NaOH (3×150 мл). Органический слой еще раз экстрагируют насыщенным раствором NaCl. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют. Затем органический раствор концентрируют до половины объема (˜180 мл) и дополняют равным количеством гексана. Полученную смесь помещают на ночь в холодильник. Образовавшиеся кристаллы подвергают вакуумному фильтрованию и затем воздушной сушке. Продукт не анализируют и используют без очистки на следующих стадиях.

Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)-2-метил-октановой кислоты

Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 14,0 г полученного выше соединения (0,03778 моль, 1 экв.) переносят в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Добавляют 80 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества. Затем смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси добавляют 19,84 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 4,70 мл иодметана (0,07556 моль, 2,0 экв.). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Образовавшийся остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют в вакууме до образования остатка. Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6 %). Данные ВЭЖХ показывают, что полученный продукт содержит небольшое количество исходного вещества вместе с некоторым количеством диметилированного побочного продукта. Промежуточный продукт не исследуют и используют без очистки на следующей стадии.

Продукт получают в виде прозрачной жидкости, которую подвергают вакуумной перегонке при 140°С и давлении 1 мм Hg. Конечный выход после перегонки равен 55,38%.

Количественный анализ ¹³С ЯМР (COCl₃ -d): C=O (1С, 176,508 м.д.); C_Ar-O (2С, 153,411 и 152,935 м.д.); С_Ar-Н (4С, 115,09 и 114,299 м.д.); СН₂-СН ₂-O (1С, 68,186 м.д.); СН₃-СН ₂-О (1С, 59,782); СН₃О (1С, 55,339 м.д.); СН-СН₃ (1С, 39,239 м.д.); -СН ₂- (5С, 33,465, 29,030, 26,888, 25,666 м.д.); СН-СН ₃ (1С, 16,835); СН₂-СН ₃ (1С, 14,012 м.д.).

Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 80. Выход равен 82,3%. Продукт представляет собой не совсем белое твердое вещество. Т.пл. равна 71-73°С. Элементный анализ: теоретические значения С=68,55%, Н=8,63%; найдено С=68,04%, Н=8,65%. Количественный анализ ¹³С ЯМР (ДМСО-d ₆): С=O (1С, 177,668); C_Ar-O (2С, 153,243 и 152,773 м.д.); C_Ar-H (4С, 115,265 и 114,554 м.д.); СН₂-СН ₂-O (1С, 67,818 м.д.); ОСН₃ (1С, 55,305 м.д.); СН-СН₃ (1С, 33,340 м.д.); -CH₂- (5C, 33,340, 28,805, 26,742, 25,487 м.д.); СН-СН₃ (1С, 17,075 м.д.)

Получение соединения 69

Этиловый эфир 8-(4-метоксифенокси)-2-метилоктановой кислоты получают вышеописанным способом. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 69.

Выход равен 74,6%. Продукт представляет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна 96-97°С. Элементный анализ: теоретические значения С=67,65%, Н=8,33%, найдено С=67,74%, Н=8,44%. Количественный анализ ¹³С ЯМР (ДМСО-d₆ ): С=O (1С, 174,628); C_Ar-O (2С, 153,291 и 152,798 м.д.); C_Ar-H (4С, 115,251 и 114,562 м.д.); СН₂-СН₂-О (1С, 67,844 м.д.); ОСН₃ (1С, 55,301 м.д.); СН₂-С=O (1C, 39,343 м.д.); -CH ₂- (5C, 33,747, 28,700, 25,545, 24,575 м.д.).

Получение соединения 88

Смесь 6,525 г (40 ммоль) карзалама, 10,26 г (44 ммоль) 9-бром-1-нонанола и 5,30 г (50 ммоль) карбоната натрия в 30 мл N,N-диметилацетамида (ДМА) нагревают при 75-80°С в течение 3 часов. Данные ТСХ (элюент: этилацетат/гептан) свидетельствуют об окончании реакции. Реакционную смесь осторожно выливают в смесь воды со льдом. Образовавшееся белое твердое вещество перемешивают в течение 1 часа. Указанное вещество собирают на фильтре из спекшегося стекла, промывают водой, гексаном и сушат в вакууме, получая 9,80 г 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона (80%). К суспензии 6,11 г (20 ммоль) 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона в 10 мл N,N-диметилацетамида при комнатной температуре добавляют 20,4 мл (20,4 ммоль) раствора трет-бутоксида калия в ТГФ. Прозрачный коричневый раствор становится очень густым. Добавляют дополнительное количество ДМА (10 мл) и нагревают смесь при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 минут. Затем добавляют 0,664 г (4 ммоль) иодида калия, после чего по каплям добавляют 3,34 г (20 ммоль) этилбромацетата. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа, охлаждают примерно до 35°С и выливают в смесь воды со льдом. Образуется камедь. Супернатант сливают и добавляют свежую воду. Указанную процедуру повторяют дважды. Камедь растворяют в ТГФ. Раствор в ТГФ осторожно выливают в гексан. Образовавшееся твердое вещество собирают, промывают гексаном и сушат в вакууме. Масса требуемого продукта равна 2,36 г (35%). ВЭЖХ: 4,39 мин; Т.пл. 125-128°С. ¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 1,25 (12Н, м), 1,37 (2Н, м), 1,53 (2Н, м), 3,28 (2Н, м), 3,36 (2Н, т), 4,85 (2Н, с), 7,07 (2Н, м), 7,45 (1Н, т), 7,88 (1Н, д), 8,70 (1Н, т). Элементный анализ: вычислено для C ₁₈H₂₇NO₅: С, 64,07; Н, 8,07; N, 4,15; найдено: С, 63,71; Н, 8,29; N, 4,31.

Получение соединения 93

Температура плавления: 57-59°С. Анализ сжиганием: %С: 72,69 (вычислено), 72,75 (найдено); %Н: 9,15 (вычислено), 9,44 (найдено).

Получение соединения 94

Температура плавления: 59-61°С. Анализ сжиганием: %С: 71,16 (вычислено), 71,08 (найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,99 (найдено).

Получение соединения 95

Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Россия.

Получение соединения 96

Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Россия.

Получение соединения 97

Данное соединение предоставлено фирмой Sigma Company of Milwaukee, WI.

Пример 2. Кальцитонин лосося (sCT) - пероральное введение

Лекарственные композиции для перорального введения (РО), содержащие соединение доставляющего агента и кальцитонин лосося (sCT) в деионизированной воде, получают в соответствии с приведенной ниже таблицей 2. В частности, 450 мг соединения доставляющего агента добавляют к 2,0 мл воды. Обычно используют натриевую соль указанного соединения, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, для чего к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор) и разбавляют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7 (около 6,5- 8,5), добавляя NaOH или HCl. К полученному раствору добавляют 90 мкг sCT из исходного раствора sCT (раствор с концентрацией 2 мг/мл получают, добавляя к sCT 1000% фосфатного буфера с рН 4, после чего полученную смесь оставляют в покое примерно на 10-20 минут и периодически осторожно переворачивают). Затем добавляют воду, доводя общий объем до 3,0 мл (указанное количество может изменяться в зависимости от растворимости соединения доставляющего агента). Лекарственные растворы, содержащие соединения доставляющих агентов 3 и 15, необходимо дополнительно развести водой, причем для достижения требуемого количества соединения доставляющего агента и sCT вводимые конечные дозы соответственно должны быть равны 3 и 2 мл/кг. Конечные дозы соединения доставляющего агента, sCT и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 2.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 10, 20, 30, 60 и 90 минутам. Содержание sCT в сыворотке определяют при помощи тест-набора EIA (набор № EIAS-6003 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Результаты сравнивают с базовыми значениями, полученными в промежуток времени = 0. Результаты, полученные у животных в каждой экспериментальной группе, усредняют для каждого промежутка времени. Усредненные максимальные значения приведены в нижеследующей таблице 2.

Таблица 2
Кальцитонин лосося (sCT) пероральное введение
Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
1	150	30	1	317±405
1	150	30	1	398±237
1	150	30	1	410±471
2	150	30	1	628±221
2	150	30	1	449±550
2	150	30	1	320±348
3	150	30	3	0±81
4	150	30	1	187±177
4	150	30	1	195±436
5	150	30	1	349±348
6	150	30	1	316±189
6	150	30	1	144±200
7	150	30	1	677±429
7	150	30	1	87±135
7	150	30	1	149±103
7	150	30	1	216±180
7	150	30	1	313±381

Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (МЛ)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
7	150	30	1,16	297±270
7	150	30	1	181±197
7	50	100	0,5	81±137
7	50	100	0,5	273±303
7	50	100	1	116±170
7	150	30	1	148±152
7	150	30	1	0
7	150	30	1	279±369
7	150	30	1	220±126
7	150	30	1	438±154
7	150	30	1	86±146
8	150	30	1	166±190
8	150	30	1	194±239
8	150	30	2	36±49
8	150	30	1	327±323
9	150	30	1	278±286
9	150	30	1	133±172
9	150	30	1	255±249
9	150	30	1	286±126
10	150	30	1	246±212
10	150	30	1	119±131
10	150	30	1	100±224
10	150	30	1	352±445
11	150	30	1	526±415
12	150	30	1	391±278
12	50	100	1	316±476
12	50	100	0,5	445±221
12	150	30	1	224±106
12	150	30	1	170±233
12	150	30	1	286±267
12	150	30	1	195±172
12	150	30	1	150±132
12	150	30	1	273±206
12	150	30	1	170±48
12	150	30	1	0±98
12	150	30	1	151±80
12	150	30	1	314±255
12	150	30	1	184±177
12	150	30	1	412±275

Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (МЛ)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
12	150	30	1	79±92
12	150	30	1	168±169
12	150	30	1	206±286
12	150	30	1	293±414
12	150	30	1	180±263
12	150	30	1	226±148
12	150	30	1	507±413
12	150	30	1	177±188
12	150	30	1	203±227
12	150	30	1	330±462
12	150	30	1	160±188
12	150	30	1	291±269
12	150	30	1	170±246
12	150	30	1	199±236
12	150	30	1	137±133
12	150	30	1	207±164
12	150	30	1	203±120
12	150	30	1	182±153
12	150	30	1	181±270
12	150	30	1	219±262
12	150	30	1	2761163
12	150	30	1	196±131
12	150	30	1	185±192
12	150	30	1	75±169
12	150	30	1	125±164
12	150	30	1	118±265
12	150	30	1	207±207
12	150	30	1	224±313
12	150	30	1	190±244
12	150	30	1	336±347
12	150	30	1	209±118
12	150	30	1	302±257
12	150	30	1	225±258
12	150	30	1	227±233
12	150	30	1	172±296
14	150	30	1	568±247
14	150	30	1	199±180
14	150	30	1	117±166

Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
14	150	30	1	196±155
15	150	30	2	116±88
18	150	30	2	14±4183
19	150	30	1	206±131
19	150	30	1	79±176
19	150	30	1	224±501
19	150	30	1	110±125
19	150	30	1	170±161
19	150	30	1	128±155
20	150	30	1	138±107
20	150	30	1	85±82
20	150	30	1	96±135
21	150	30	1	181±128
21	150	30	1	215±232
21	150	30	1	89±98
22	150	30	1	309±152
22	150	30	1	290±174
22	150	30	1	273±281
22	150	30	1	148±162
23	150	30	1	161±150
23	150	30	1	122±273
24	150	30	1	142±135
24	150	30	1	21±48
24	150	30	1	665±1487
25	150	30	1	53±77
27	150	30	1	163±106
28	150	30	1	138±90
29	150	30	1	233±207
29	150	30	1	193±215
29	150	30	1	92±408
30	150	30	1	166±185
30	150	30	1	166±106
30	150	30	1	122±119
30	150	30	1	313±487
31	150	30	1	165±119
31	150	30	1	70±99
31	150	30	1	84±78
32	150	30	1	175±148

Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
32	150	30	1	103±75
32	150	30	1	187±135
33	150	30	1	96±209
34	150	30	1	103±72
34	150	30	1	137±178
36	150	30	1	0±62
37	150	30	1	126±48
37	150	30	1	149±184
37	150	30	1	179±232
37	150	30	1	63±91
38	150	30	1	200±158
38	150	30	1	104±130
39	150	30	1	115±120
39	150	30	1	115±178
43	150	30	1	50±71
44	150	30	1	188±184
45	150	30	1	125±187
45	150	30	1	172±158
47	150	30	1	62±99
48	150	30	4	35±49
48	150	30	3	95±156
49	150	30	1	479±291
49	150	30	1	170±75
49	150	30	1	89±129
51	150	30	1	49±45
51	150	30	1	203±227
51	150	30	1	207±207
51	150	30	1	226±220
52	150	30	1	163±300
54	150	30	1	34±47
56	150	30	1	165±243
56	150	30	1	90±125
56	150	30	1	113±115
56	150	30	1	175±150
62	150	30	1	117±158
64	150	30	1	138±148
66	150	30	4	109±244
67	150	30	2	681±419

Соединение доставляющего агента	Доза соединения (мг/кг)	Доза sCT (мкг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное отклонение) (стандартная ошибка)
67	150	30	1	142±142
67	150	30	1	256±158
71	150	30	2	302±246
71	150	30	1	45±62
71	150	30	1	146±328
72	150	30	1	558±576
72	150	30	1	224±409
78	150	30	1	54±121
78	150	30	1	154±167
78	150	30	1	107±158
79	150	30	1	133±90

Пример 3. Рекомбинантный гормон роста человека (rhGH) - пероральное введение

Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд, содержащие соединение доставляющего агента и rhGH, получают в фосфатном буфере, смешивая компоненты. Для получения раствора соединения доставляющего агента обычно используют натриевую соль указанного соединения либо свободную кислоту превращают в натриевую соль. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в фосфатном буфере, причем для получения натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с исходным раствором rhGH (раствор с концентрацией 15 мг rhGH/мл получают, смешивая в виде порошков 15 мг rhGH, 75 мг D-маннита, 15 мг глицина и 3,39 мг двухосновного фосфата натрия и разбавляя 2% глицерином), после чего полученный раствор разводят до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Показатель рН при необходимости доводят до 7-8,5. Конечные дозы соединений доставляющих агентов и rhGH приведены в нижеследующей таблице 3.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Объединяют пять проб, взятых в каждый промежуток времени (за исключением проб, для которых указано стандартное отклонение (SD) и стандартная ошибка (SE)). Количественное определение концентрации rhGH в сыворотке производят при помощи набора для иммуноанализа rhGH (набор № K1F4015 фирмы Genzyme Corporation Inc., Cambridge, MA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Максимальные концентрации для каждой группы приведены в нижеследующей таблице 3.

Таблица 3. rhGH - пероральное введение
Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза rhGH (мг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум rhGH в сыворотке (нг/мл)
1	200	3	1	95,5
1	200	3	1	30,9
1	200	3	1	76,2
1	200	3	1	37,2±50
4	200	3	1	12,6
5	200	3	1	127
5	200	3	1	223
5	200	3	1	56,5
7	200	3	1	8,8
7	200	3	1	58,9
7	200	3	1	29,1±58,2
8	200	3	1	4,88
9	200	3	1	1
10	200	3	1	34,3
11	200	3	1	35,4
12	200	3	1	12,7
12	200	3	1	44,3
14	200	3	1	19,8
15	200	3	1	83,9
15	200	3	1	47,3
15	200	3	1	44,7
15	200	3	1	27,4±37,3
18	200	3	1	223
18	162	2,6	1	3,1
19	200	3	1	39,5
20	200	3	1	22,6
21	200	3	1	19,6
22	200	3	1	0
24	200	3	1	1,76
25	200	3	1	0
26	200	3	1	8,3
27	200	3	1	12,9

Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза rhGH (мг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум rhGH в сыворотке (нг/мл)
28	200	3	1	90,1
28	200	3	1	121
28	200	3	1	19,2
29	200	3	1	0
30	200	3	1	40,5
30	200	3	1	0
30	200	3	1	0
30	200	3	1	5,27
32	200	3	L	0
33	200	3	1	10,1
33	200	3	1	6,9
34	200	3	1	0
34	200	3	1	7,8
36	200	3	1	0
37	200	3	1	29
39	200	3	1	0
43	200	3	1	9,49
43	200	3	1	42,2±41
45	200	3	1	11,2
45	200	3	1	22,8
45	200	3	1	42,9
47	200	3	1	11,6
47	200	3	1	144
47	200	3	1	81,7
47	200	3	1	41,7
47	200	3	1	85,7
47	200	3	2	9,9±22,1
47	200	3	1	34,1±42,2
47	200	3	1	9,41
47	200	3	1	132
49	200	3	1	41,3
49	200	3	1	0
49	200	3	1	20,1
52	200	3	1	0
54	200	3	1	6,37
55	200	3	1	12,4
56	200	3	1	0
60	200	3	1	1,5±3,3
62	200	3	1	6,2
64	200	3	1	5
66	200	3	1	0
67	200	3	1	15
67	200	3	1	14,7
71	200	3	3	5,94

Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза rhGH (мг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум rhGH в сыворотке (нг/мл)
72	200	3	1	28
78	200	3	1	0
79	200	3	1	1,48
79	200	3	1	17,8

Пример 4. Гепарин - Пероральное/внутрикишечное введение

Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и гепариннатрий фармакопеи США (USP), получают в 25% водном растворе пропиленгликоля. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента или свободную кислоту превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Соединение доставляющего агента и гепарин (примерно 166-182 ед./мг (обычно 166,9 ед./мг)) смешивают в виде сухих порошков, подвергая их вихревому перемешиванию. Сухую смесь растворяют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликоля, подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7 (6,5-8,5) водным раствором NaOH (2 н. раствор). Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком, получая прозрачный раствор. Конечный объем доводят примерно до 3,0 мл. Конечные дозы соединения доставляющего агента, гепарина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 4.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не кормят в течение 24 часов, после чего животных анестезируют, вводя им внутримышечно гидрохлорид кетамина (88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующего средства для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения (РО) через желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца.

Пробы цитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введения кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часа после введения лекарственного раствора. Всасывание гепарина определяют по увеличению времени свертывания крови, измеряемого с учетом времени появления частично активированного тромбопластина (АРТТ) в соответствии со способом, описанным Henry, J.B., Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Philadelphia, PA, W.B. Saunders (1979). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, равны примерно 20 секундам. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени, при этом наибольшие из указанных средних значений (т.е. усредненный максимум АРТТ) приведены в нижеследующей таблице 4.

Таблица 4. Гепарин пероральное/внутрикишечное введение

Соединение доставляющего агента	Способ введения	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза гепарина (мг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум АРТТ (сек) ± стандартное отклонение)
1	IC	50	25	1	130,84±118,18
1	IC	50	25	1	231,34
2	IC	50	25	1	48,788±32,79
3	IC	50	25	1	16,046±0,481
3	IC	50	25	1	16,984±1,45
4	IC	50	25	1	40,3±17,8
4	IC	50	25	1	23,076±4,72
4	IC	50	25	1	37,148±39,67
5	PO	300	100	3	135,7±17,3
6	IC	50	25	1	157,4±33,7
6	PO	300	100	3	193±61,2
6	IC	50	25	1	99,8±50,6
7	IC	50	25	1	130,5±42,6
7	IC	50	25	1	92±40,3
7	IC	50	25	1	99,4±25,5
8	IC	50	25	1	251,94±67,96
9	IC	50	25	1	21,45±1,71
10	IC	50	25	1	81,8±7
10	IC	50	25	1	63,5
11	IC	50	25	1	39,53±8,25
12	IC	50	25	1	219,5±128,4
12	IC	50	25	1	169,6±68,6

Соединение доставляющего агента	Способ введения	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза гепарина (мг/кг)	Объем дозы (мл)	Усредненный максимум АРТТ (сек) ± стандартное отклонение)
12	РО	300	100	3	201,4±45,7
12	IC	50	25	1	115,81±159,53
12	IC	50	25	1	236,8
12	IC	50	25	1	300
12	IC	50	25	1	255,452±41,99
12	IC	50	25	1	167,08±81,62
12	IC	50	25	1	195,884±142,628
12	IC	50	25	1	279,076±46,79
12	IC	50	25	1	220,164±109,57
12	IC	50	25	1	300
22	IC	50	25	1	287,9±120,1
26	IC	50	25	1	76,7
26	IC	50	25	1	41,534±25,56
27	IC	50	25	1	85,7
27	IC	50	25	1	279,182±46,55
28	IC	50	25	1	143,6±44
28	IC	50	25	1	251,1±109,34
29	IC	50	25	1	105,01±115,28
29	IC	50	25	1	111,46±108,58
30	IC	50	25	1	50,9±20,5
31	IC	50	25	1	47±23,1
32	IC	50	25	1	26,5±2,3
35	IC	50	25	1	65,8±35,5
47	IC	50	25	1	370,3±97,8
51	IC	50	25	1	92,5±41,5
54	IC	50	25	1	31,56±7,54
62	IC	50	25	1	152,41±136,63
62	IC	50	25	1	91,204±117,43
64	IC	50	25	1	220,988±122,2
64	IC	50	25	1	125,372±114,72

Пример 5. Низкомолекулярный гепарин (LMWH) - пероральное/внутрикишечное введение

Лекарственные композиции для перорального введения (РО) и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и низкомолекулярный гепарин (LMWH), получают в 25% водном растворе пропиленгликоля. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента или свободную кислоту превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Соединение доставляющего агента и LMWH (парнапарин, 91 ед./мг, средняя молекулярная масса около 5000, фирмы Opocrin, Modena, Italy) (обычно 90-105 ед./мг, средняя молекулярная масса около 5000) смешивают в виде сухих порошков, подвергая их вихревому перемешиванию. Сухую смесь растворяют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликоля, подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С) для получения прозрачного раствора. Показатель рН доводят примерно до 7 (6,5-8,5) 2 н. водным раствором NaOH. Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком, получая прозрачный раствор. Конечный объем доводят примерно до 3,0 мл. Конечные дозы соединения доставляющего агента, LMWH и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 5.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не кормят в течение 24 часов, после чего животных анестезируют, вводя им внутримышечно гидрохлорид кетамина (88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующего средства для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения (РО) через желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца.

Пробы нитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введения кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 и 4,0 часа после введения лекарственного раствора. Всасывание LMWH определяют по увеличению концентрации LMWH в плазме, измеряемой при помощи анти-Х_а-анализа гепарина с использованием набора для тестирования антител к фактору Ха CHROMOSTRATE ^TM (фирмы Organon Teknika Corporation, Durham, NC). Величины концентрации LMWH в плазме, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени и строят график средних значений концентрации LMWH в плазме в зависимости от времени. Усредненные максимальные значения концентрации LMWH в плазме приведены в нижеследующей таблице 5.

Таблица 5. LMWH - пероральное/внутрикишечное введение
Соединение доставляющего агента	Способ введения	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза LMWH (ед./кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум концентрации LMWH в плазме (ед./мл) ± стандартное отклонение)
1	IC	50	750	1	1,038±0,338
1	IC	50	750	1	1,734±0,192
1	IC	25	750	1	1,022±0,432
2	IC	50	750	1	1,038±0,338
6	IC	25	750	1	0,47±0,17
7	PO	300	3000	3	0,5±0,412
7	IC	50	750	1	1,264±0,207
7	IC	50	750	1	1,716±0,105
7	IC	25	750	1	0,9±0,252
9	IC	50	750	1	0,474±0,095
10	IC	50	750	1	0,088±0,121
11	IC	50	750	1	0,91±0,414
12	PO	300	3000	3	0,137±0,18
12	IC	50	751	1	1,5±0,23
12	IC	50	750	1	1,7±0,308
12	IC	50	750	1	1,74±0,304
12	IC	50	750	1	2,012±0,124
12	IC	25	750	1	1,66±0,302
12	IC	25	750	1	0,974±0,503
12	IC	10	750	1	0,2±0,077
12	IC	25	750	1	0,624±0,247
12	IC	50	750	1	1,498±0,462
19	IC	50	750	1	0,65±0,37
22	IC	50	750	1	1,842±0,205
22	IC	25	750	1	1,496±0,153
22	IC	10	750	1	0,396±0,153
26	IC	50	750	1	0,262±0,106
27	IC	50	750	1	1,622±0,265

Соединение доставляющего агента	Способ введения	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза LMWH (ед./кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум концентрации LMWH в плазме (ед./мл) ± стандартное отклонение)
28	IC	50	750	1	1,64±0,45
28	IC	25	750	1	1,43±0,31
30	IC	50	750	1	0,162±0,094
30	IC	50	750	1	0,288±0,152
31	IC	50	750	1	0,47±0,287
31	IC	50	750	1	0,47±0,332
32	IC	50	750	1	0,07±0,01
54	IC	50	750	1	3,046±0,422
65	IC	50	750	1	0,642
66	IC	50	750	L	0,952
66	IC	50	750	1	1,114±0,254

Пример 6. Параддитовидный гормон (РТН 1-34) - пероральное/внутрикишечное введение

Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и остатки 1-34 паращитовидного гормона человека (РТН), получают в деионизированной воде. Для получения раствора соединения доставляющего агента используют натриевую соль указанного соединения, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в воде, для чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с исходным раствором РТН (обычно в воде в концентрации 5 мг РТН/мл) и разбавляя его до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Показатель рН при необходимости доводят примерно до 7-8,5. Конечные дозы соединения доставляющего агента, РТН и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 6.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения через желудочный зонд (РО) используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 или 6 длиной 7,5 см, соответствующий шприцу с концом в виде пипетки Эппендорфа. Шприц заполняют лекарственным раствором, подавая раствор через трубку катетера. Катетер вытирают досуха. На конец трубки наносят гель K-J, избегая соприкосновения с отверстием трубки, после чего трубку вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца, после чего катетер удаляют.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам при пероральном введении и 0, 10, 20, 30, 60 и 90 минутам при внутрикишечном введении. Количественное определение концентрации РТН в сыворотке производят при помощи набора для радиоиммуноанализа РТН (набор № RIK 6101 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени. Максимальные значения средних концентраций (то есть усредненные максимальные концентрации РТН в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 6.

Таблица 6
Пероральное (РО) введение РТН
Соединение доставляющего агента №	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза РТН (мкг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум РТН в сыворотке (пг/мл) ± стандартное отклонение
12	100	200	1	276±252
30	100	200	1	78±71
31	100	200	1	460±194
33	100	200	1	837±347
34	100	200	Г	538±328
51	100	200	1	420±305
51	100	200	1	287±120
51	100	200	1	478±230
51	100	200	1	798±518

Пример 7. Интерферон - пероральное введение

Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента и интерферон человека (IFN), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в воде, для чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Затем смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7,0-8,5 водным раствором NaOH. Смесь подвергают вихревому перемешиванию, получая однородную суспензию или раствор, при необходимости обрабатывают ультразвуком и нагревают. В случае необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и рН вновь доводят примерно до 7,0-8,5. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с исходным раствором IFN (в концентрации примерно от 22,0 до 27,5 мг/мл в физиологическом растворе с фосфатным буфером) и разводят до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Конечные дозы соединения доставляющего агента, IFN и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 7.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Количественное определение концентрации IFN в сыворотке производят при помощи набора для иммуноанализа альфа-IFN человека Cytoscreen (№ в каталоге КНС4012 фирмы Biosource International, Camarilio, CA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени. Максимальные значения средних концентраций (то есть усредненные максимальные концентрации IFN в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 7.

Таблица 7
Интерферон - пероральное введение
Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза IFN (мг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум IFN в сыворотке (нг/мл) ± стандартное отклонение
1	200	1	1	17,357±38
5	200	1	1	5,1042±3,4
5	50	0,5	1	1,54±0,26
5	200	1	1	1,1838±1,42
5	50	0,5	1	2,1±0,95
5	200	1	1	1,51±1,9
5	200	1	1	4,11±2
5	200	1	1	7,5769±5
6	200	1	1	0,5696±0,8
7	400	1	1	0,223
7	200	1	1	3,9308±3,2
12	200	1	1	1,6362±1,68
15	200	1	1	6,0324±2,8
28	200	1	1	2,185±2,68
28	200	1	1	0,8±1,7
32	200	1	1	0
43	200	1	1	1±2,1
43	200	1	1	1,206
47	200	1	1	1,1±0,85
59	200	1	1	0,56±1
59	200	1	1	0
67	200	1	1	3,4451±4,5
73	200	1	1	0,76±0,7
73	200	1	1	0,22±0,5

Пример 8. Инсулин - пероральное введение

Композиции для перорального введения (РО), содержащие соединение доставляющего агента и инсулин человека с противоионами цинка (минимум 26 ед./мг, фирмы Calbiochem - Novabiochem Corp., La Jolla, CA), получают в деионизированной воде. Обычно, 500 мг соединения доставляющего агента добавляют к 1,5 мл воды. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, для чего к полученному раствору при перемешивании добавляют один эквивалент гидроксида натрия. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7-8,5, добавляя NaOH или HCl. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и показатель рН повторно доводят примерно до 7-8,5. Затем добавляют воду до общего объема около 2,4 мл и подвергают раствор вихревому перемешиванию. К полученному раствору добавляют примерно 1,25 мг инсулина из исходного раствора инсулина (раствор с концентрацией 15 мг/мл получают из 0,5409 г инсулина и 18 мл деионизированной воды, доводя рН до 8,15 при помощи HCl и NaOH, причем для получения прозрачного раствора используют 40 мл концентрированной HCl, 25 мл 10 н. раствора NaOH и 50 мл 1 н. раствора NaOH) и подвергают вихревому перемешиванию. Конечные дозы соединения доставляющего агента, инсулина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 8.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения лекарственного средства используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 15, 30, 60, 120 и 180 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определяют при помощи тест-набора для анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа вносят изменения для оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе. Концентрации инсулина человека в сыворотке (мкед./мл) измеряют для каждого промежутка времени у каждого из пяти животных в каждой экспериментальной группе. Пять значений для каждого промежутка времени усредняют и строят график концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. (В предшествующих экспериментах не были обнаружены измеряемые концентрации инсулина человека после перорального введения одного инсулина человека). Максимальные значения (пики) и величины площади под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 8.

Таблица 8
Инсулин - пероральное введение
Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза инсулина (мг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум инсулина в сыворотке ± стандартное отклонение
1	100	3	1	74,237±1144,49
3	200	0,5	1	29,95±46,13
6	200	0,5	1	129,5±131,5
7	100	3	1	130,9724±83,7
7	200	0,5	1	88,06±33,72
7	200	0,5	1	320,1±520,4
7	200	0,5	1	200,2±118,7
7	200	0,5	1	164,2±134,7
7	200	0,5	1	214,7±100,86
7	200	0,5	1	56,71±47,04
7	200	0,5	1	17,4±21,8
8	200	0,5	1	13,14±6,81
10	100	3	1	63,5884±129,23
12	100	3	0,5	205,4±333,4
15	100	3	1	1332,2±1906,4
15	200	0,5	1	540,7±580,12
15	200	0,5	1	18,62±12,54
15	200	0,5	1	155,6±125,2
15	200	0,5	1	169,3±140,78
19	200	0,5	1	4,32±1,39
20	200	0,5	1	27,68±12,5
21	200	0,5	1	14,46±21,61
22	200	0,5	1	24,16±28,11
25	100	3	1	47,2162±31,43
26	100	3	0,5	240,5±528,29
30	200	0,5	1	21,88±13,4
31	100	3	0,5	21,26±6,22
32	200	3	1	6,38±4,42
32	200	0,5	1	3,12±2,26
33	100	3	0,5	58,13±52,86
33	200	0,5	1	110±128
33	200	0,5	1	14,88±11,53
35	200	0,5	1	132,3±154,5
38	100	3	1	74,6542±57,28
43	200	0,5	1	82,81±46,8
43	200	0,5	1	38,68±35,09
44	100	3	0,5	97,49±134,1

Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза инсулина (мг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум инсулина в сыворотке ± стандартное отклонение
44	200	0,5	1	17,41±10,47
44	200	0/5	1	46,76±41,19
45	200	0,5	1	70,32±149,1
49	100	3	0,5	335,7±227,05
57	200	3	1	3322±2721
59	200	0,5	1	315,53±154,56
61	200	0,5	1	58,99±27,15
63	100	3	1	7,843±8,527
68	200	3	1	76,23±76,88
72	200	3	1	4702,5±4700,4
72	200	0,5	1	108,33±55,98
72	200	0,5	1	9,81±13,72
72	200	0,5	1	18,56±19,89
73	100	3	0,5	147,66±176,71
73	200	0,5	1	51,26±9,44
73	200	0,5	1	16,01±12,21
74	100	3	0,5	70,69±127,89
75	200	0,5	1	33,88±38,49
75	200	0,5	1	32,54±19,78
76	200	0,5	1	24,72±25,53
76	200	0,5	1	38,74±74,4

Пример 9. Инсулин - легочное введение

Лекарственные композиции, содержащие соединение доставляющего агента и инсулин человека, получают в воде. В частности, к 1,5 мг соединения доставляющего агента добавляют деионизированную воду, доводя объем до 1,0 мл, и подвергают раствор вихревому перемешиванию. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, для чего к полученному раствору при перемешивании добавляют один эквивалент гидроксида натрия (10 н. раствор) и разбавляют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7,0-8,5, добавляя NaOH или HCl. К полученному раствору добавляют 75 мкл исходного раствора инсулина человека (2 мг/мл). (Исходный раствор получают следующим образом. К 0,02 г инсулина добавляют 3 мл раствора HCl с рН 3,0 в деионизированной воде. Показатель рН полученного раствора понижают до 3,0 (примерно 2,6), добавляя HCl и NaOH, пока раствор не становится прозрачным. Затем показатель рН повышают до 7,6, используя NaOH и HCl. Конечный объем доводят до 10 мл деионизированной водой с рН 7,5. Конечный рН равен 7,59). Затем добавляют воду до достижения общего объема, равного 2,0 мл, после чего сосуд с раствором несколько раз осторожно переворачивают. Конечные дозы соединения доставляющего агента, инсулина и объемы дозы приведены в нижеследующей таблице 9.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (3,0 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза (используют такое же количество кетамина и 1,5 мг/кг хлорпромазина). Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Контрольной группе из пяти животных вводят только инсулин. Трахеальный инстиллятор для грызунов, оснащенный лампой (фирмы Perm Century, Inc., Pittsburgh, PA), заполняют лекарственным раствором и вводят в горло так, чтобы игла вошла в трахею (с визуальной проверкой). Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень.

Пробы крови отбирают у всех животных из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 5, 15, 30, 60 и 120 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определяют при помощи тест-набора для анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа вносят изменения для оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе. Концентрации инсулина в сыворотке (мкед./мл) измеряют для каждого промежутка времени у каждого из пяти животных в каждой экспериментальной группе. Пять значений для каждого промежутка времени усредняют и строят график концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. Ниже приведены соотношения площадей под кривой (AUC) для экспериментальной группы и контрольной группы. В нижеследующей таблице приведены также соотношения максимальных концентраций инсулина в сыворотке (Cmax) для экспериментальной группы и контрольной группы.

Пример 10. Кромолин - пероральное введение

Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента (полученного по примеру 1) и динатриевую соль кромолина (кромолин) (фирмы Sigma Chemical Co., St. Louis, МО), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7-7,5 водным раствором NaOH. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком и нагревание. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с кромолином из исходного раствора (175 мг кромолина/мл в деионизированной воде, показатель рН при необходимости доводят примерно до 7,0, добавляя NaOH или HCl, после чего исходный раствор хранят в замороженном виде завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и нагревают примерно до 30°С). Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком и нагревание. Показатель рН доводят примерно до 7-8 водным раствором NaOH. Затем раствор разбавляют водой до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использования хранят завернутым в фольгу. Конечные дозы соединения доставляющего агента и кромолина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 10.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часам. Концентрации кромолина в сыворотке измеряют при помощи ВЭЖХ. Образцы получают следующим образом: 100 мкл сыворотки помещают вместе с 100 мкл 3 н. раствора HCl и 300 мкл этилацетата в пробирку Эппендорфа. Содержимое пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. 200 мкл этилацетатного слоя переносят в пробирку Эппендорфа, содержащую 67 мкл 0,1 М раствора фосфатного буфера. Содержимое пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. Слой фосфатного буфера переносят в пробирку для ВЭЖХ и вводят в колонку для ВЭЖХ (колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2 мм Keystone Exsil Amino, 5 мкм, 100 ; подвижная фаза = 35% буфера (68 мМ KH ₂PO₄. доведенного до рН 3,0 при помощи 85% Н₃PO₄)/65% ацетонитрила; инъецируемый объем = 10 мкл; скорость потока= 0,30 мл/мин; время удерживания кромолина = 5,5 мин; оптическую плотность определяют при 240 нм). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю.

Результаты, полученные для животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени, при этом наибольшие средние значения (т.е. усредненный максимум концентрации кромолина в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 10.

Таблица 10. Кромолин - пероральное введение

Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза кромолина (мг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум кромолина в сыворотке ± стандартное отклонение (стандартная ошибка)
5	200	25	1	0,63±0,47
7	200	25	1	0,81±0,85
7	200	25	1	0,68±0,34
7	200	25	1	0,56±0,39
15	200	25	1	0,38±0,15
47	200	25	2	0,55±0,12
47	200	25	1	0,56±0,39
60	200	25	1	1,57±0,38
60	200	25	1	0,82±0,24
60	200	25	1	0,76±0,34
61	200	25	1	0,54±0,39
61	200	25	1	0,57±0,36
61	200	25	2	0,39±0,21

Пример 11. Даптомицин - пероральное введение

Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента и даптомицин (Cubist Pharmaceuticals, Cambridge, МА.), получают в 0,9% изотоническом растворе. Для получения раствора соединения доставляющего агента или используют натриевую соль указанного соединения, или свободную кислоту превращают в его натриевую соль. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7,0-7,5 водным раствором HCl или NaOH. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с даптомицином из исходного раствора (200 мг даптомицина/мл в 0,9% изотоническом растворе, и при необходимости показатель рН доводят до 6,0-7,0 с помощью NaOH или HCl). Исходный раствор хранят в замороженном виде (-20°С) завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и постепенно нагревают примерно до 25°С. Смесь доставляющего агента и даптомицина подвергают вихревому перемешиванию при низкой скорости, получая однородный раствор. Показатель рН доводят примерно до 7,0-7,5 водным раствором NaOH. Раствор разводят 0,9% изотоническим раствором до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использования хранят завернутым в фольгу. Конечные дозы соединения доставляющего агента, даптомицина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 11.

Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.

Пробы гепаринизированной крови крыс отбирают из вентральной хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 2,0 и 4,0 часам, после введения лекарственного раствора и хранят на льду. Пробы крови центрифугируют со скоростью 11500 оборотов/мин в течение 4 минут при 4°С, получая плазму (супернатант), которую хранят при -70°С. Концентрации даптомицина в плазме измеряют при помощи изократической ВЭЖХ с обращенной фазой, выдерживая образцы во время анализа при температуре 4°С. Базовые значения, полученные при исследовании чистой плазмы, равны нулю.

Значения концентрации даптомицина в крови, полученные у животных в каждой экспериментальной группе, усредняют для каждого промежутка времени. Усредненные максимальные значения концентрации даптомицина (С_max) и площади, соответствующие уровню даптомицина, под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 11.

Таблица 11. Даптомицин - пероральное введение

Соединение доставляющего агента	Доза соединения доставляющего агента (мг/кг)	Доза даптомицина (мг/кг)	Объем дозы (мл/кг)	Усредненный максимум даптомицина в плазме (Cmax) ± стандартное отклонение, мкг/мп	AUC мкг-мин/мл
2	200	50	1	5,07±0,61	-
5	200	50	1	7,082±3,86	-
7	200	50	1	10,45±2,87	-
7	100	50	1	13,05±4,62	-
7	100	50	0,5	7,09±5,35	-
7	50	50	0,5	5,77±1,49	-
7	50	50	0,5	59,14±3,11	-
7	200	50	1	6,06±1,73	-
7	200	50	1	8,04±6,03	-
11	200	50	1	13,27±13,43	-
12	200	50	1	16,11±17,58	-
14	200	50	1	14,2±24,84	-
15	200	50	1	9,5±5,49	-
30	200	50	1	3,06±0,78	-
43	200	50	1	21,44±6	4555*
43	200	50	1	10,56±3,37	2895*
43	200	50	1	12,94±6,6	2820*
57	200	50	1	8,59±4,21	-

* AUC = Общая AUC (0 )

Приведенные выше патенты, заявки на патент, методы испытания и публикации полностью включены в данное описание изобретения в качестве ссылки.

Из приведенного выше подробного описания изобретения специалистам в данной области должны быть очевидны многие модификации настоящего изобретения. Все подобные модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.